專利名稱：：藥物化合物巴西蘇木紅素制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及以蘇木為原料提取的巴西蘇木紅素的制備方法和在醫(yī)藥方面的新用途，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
。技術(shù)背景蘇木，為豆科植物蘇木fee幼^u'/7/sL的干燥心材。分布于我國的廣西，廣東，臺灣，貴州，云南，四川等地。全年可采。除去外皮及邊材，取心材，曬干。含有巴西蘇木素(brasiljn)，巴西蘇木紅素(brasilein)等成分。以蘇木為原料提取的巴西蘇木紅素(C15H1205)的結(jié)構(gòu)式如下物理化學(xué)特征黃色粉末(MeOH)，mp〉300°C(dec.),TLC檢查紫外燈365nm下顯亮白色熒光。EI-MSffl/z:248(M+),231,214.IR(KBr)cm-1:3400,1705(C=0),1670，1600,1520,1410,1390,1100。UV(MeOH)nm:276'352。'H剛R(DMS0-cUS:2.5(2H,同，H-2)，3.2(2H，同，H-3)，7.3(1H，要，H-7)。"C畫R(DMSO-d6)S:23.7(C-3)，32.9(C-2)，107.8(C-7),113.1(C-6)，115.4(C-4)，140.0(C-5)，141.4(C-9),144.1(C-8)'144.9(C-IO)'149.1(C-12)'160.5(C-l1),195.5(C-1)?！侗静菥V目》記載蘇木真有"破血，排膿止痛"的功效。主治婦人血?dú)庑母雇矗b腫撲損瘀血"，《中藥大辭典-上冊》記載蘇木具有"行血破瘀，消腫止痛"的功效?，F(xiàn)有技術(shù)屮，巴西蘇木紅素的提取釆用有機(jī)溶劑，該方法提取成本高，操作安全性差。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種藥物化合物巴西蘇木紅素新的制備方法，旨在降低提取成本，提高操作的安全性。本發(fā)明的另一目的是提供藥物化合物巴西蘇木紅素在醫(yī)藥方面的新用途。本發(fā)明的技術(shù)方案如下-一種藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法,其特征在于該方法包括如下步驟1)先將藥材重量的515倍的堿水溶劑進(jìn)行加熱提取，得到提取液；2)將提取液在室溫下加酸，使PH值為26,離心或靜止過濾，棄去上清液，取沉淀物，然后干燥，得干燥物；3)將干燥物用醇溶解，進(jìn)行色譜分離，即制得巴西蘇木紅素。在上述制備方法中，步驟l)中所述的加熱提取所用的水液堿濃度為0.016%。所述的加熱提取所用溫度為3CTC10(TC所述的提取次數(shù)為13次，每次為30分鐘至5小時。本發(fā)明所提供的藥物化合物巴西蘇木紅素的用途，主要是指在制備治療血壓升高及由此引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。在臨床應(yīng)用時，以常規(guī)的制劑工藝，單獨(dú)使用或與其他藥物配合制備成在臨床上可以使用的各種不同劑型的藥物。如散劑，丸劑，膠囊劑，片劑，微囊劑，軟膠囊劑，膜劑，栓劑，注射劑，膏劑，酊劑，散劑，沖劑，氣霧劑，各種外用制劑等。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，巴西蘇木紅素具有明顯的降低正常及高血壓大鼠血壓的作用。藥理實(shí)驗(yàn)表明，巴西蘇木紅素具有降低實(shí)驗(yàn)大鼠外周血壓的作用，以該化合物為活性成分，可以用來制備治療體內(nèi)血壓升高所引起的病癥，如各種類型的高血壓、動脈粥樣硬化、冠心病、腦血栓和腦出血等。本發(fā)明所述的制備方法與現(xiàn)有制備方法相比，該方法操作簡單，由于采用堿水提取，不涉及有機(jī)溶劑，因此提取成本低，操作安全性高。具體實(shí)施方式本發(fā)明提供的藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法，其具體工藝步驟如下1)先將藥材重量的515倍的堿水溶劑進(jìn)行加熱提取，得到提取液。加熱提取所用溫度為30'C10(TC，提取次數(shù)一般為13次，每次為30分鐘至5小時。所用的水液堿濃度為O.016%。2)將提取液在室溫下加酸，使ra值為26，離心或靜止過濾，棄去上清液，取沉淀物，然后干燥，得干燥物；3)將干燥物用醇溶解，進(jìn)行色譜分離，即制得巴西蘇木紅素。下面的實(shí)施例和藥物實(shí)驗(yàn)資料使本發(fā)明所說的巴西蘇木紅素的制備及其用途得以證實(shí),同時又不應(yīng)將下列實(shí)施例看作是對本發(fā)明的限制。制備實(shí)施例1:蘇木心材(500克)用重量5倍的0.01%的氫氧化鈉水溶液，加熱(IO(TC)提取3次，每次5小時，將提取液放至室溫后用酸中，使PH值為2，靜置，取沉淀物，棄上清液，干燥。干燥品加乙醇溶解，用200300目硅膠拌樣，用硅膠柱色譜分離，用石油醚丙酮梯度洗脫，把柱層析液濃縮，用葡聚糖凝膠純化，最終得巴西蘇木紅素。制備實(shí)施例2:蘇木心材(500克)用重量10倍的2%的氫氧化鈉水溶液，加熱(80°C)提取2次，每次3小時，將提取液放至室溫后用酸中和，使PH值為5，靜置，棄上清液，取沉淀，將沉淀干燥。干燥品加乙醇溶解，用6080目聚酰胺拌樣，用聚酰胺柱色譜分離，分別用水和乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液并濃縮，用葡聚糖凝膠純化，最終得巴西蘇木紅素。制備實(shí)施例3:巴西蘇木紅素的提取和分離制備蘇木心材(500克)用重量15倍的6%的氫氧化鉀水溶液，加熱(30°C)提取2次，每次1小時，將提取液放至室溫后用酸中和使PH值為6，靜置，棄上清液，取沉淀，干燥。干燥品加甲醇溶解，用反向(ODS)柱色譜分離，分別用水和甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液并濃縮，用葡聚糖凝膠純化，最終得巴西蘇木紅素。藥效實(shí)驗(yàn)例1:對正常大鼠外周血壓的影響觀察本發(fā)明巴西蘇木紅素對正常大鼠外周血壓的影響。本發(fā)明所用巴西蘇木紅素，批號070131。將巴西蘇木紅素以DMSO溶解，以生理鹽水配制成所需濃度。實(shí)驗(yàn)所用動物為雄性Wistar大鼠，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物研究所提供，體重為250-320g。實(shí)驗(yàn)室室溫25-28°C，相對濕度40%60%，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠5只，每三日清掃籠舍一次。取正常大鼠，10%烏拉坦腹腔注射，將其麻醉，固定。分離頸總動脈，插入塑料導(dǎo)管，并聯(lián)接于壓力換能器和四導(dǎo)生理儀。開通電腦，進(jìn)行監(jiān)測15分鐘，記錄正常血壓。股靜脈給予巴西蘇木紅素。分別于給藥后5，10，15，30，45,60，75，卯分鐘觀察并記錄血壓值。計算收縮壓、舒張壓和平均動脈壓。所得數(shù)據(jù)經(jīng)EXCEL軟件處理。SPSS10.0軟件處理，方差分析，組間t檢驗(yàn)。本試驗(yàn)巴西蘇木紅素給藥劑量分別為1.25，2.5,5mg/kg。本試驗(yàn)用巴西蘇木紅素以助溶劑生理鹽水配制，其助溶劑濃度0.5y。DMS0,4。/。羥丙基-e-環(huán)糊精。本試驗(yàn)所用空白對照為等體積助溶劑生理鹽水(0.5。/。DMS0,4y。羥丙基-e-環(huán)糊精)。_表l給藥前正常大鼠血壓的變化(x士s)_分組藥物劑量收縮壓舒張壓平均動_(mg/Kg)(mmHg)_(國Hg)_脈壓(腿Hg)_對照組124.0±7.4592.17±6.21108.08±3.94巴西蘇木紅素1.25123.83±9.3391.5±6.28107.67±4.86巴西蘇木紅素2.5126.5±10.6393.5±5.28110.0±4.32巴西蘇木紅素5.0125.17±11.0592.33±3.93108.75±5.52與對照組相比，P〉0.05。n=6表2給藥后45分鐘正常大鼠血壓的變化(x土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，巴西蘇木紅素對正常大鼠血壓有降低作用。其最低有效劑量為2.5mg/kg。其特點(diǎn)是以舒張壓下降為主，給藥后血壓下降時間多在藥后30-45分鐘。提示巴西蘇木紅素具有一定的降血壓作用，對于防治因血壓過高所引起的心腦血管疾病都有積極的意義。藥效實(shí)驗(yàn)例2:對急性高血壓大鼠外周血壓的影響觀察本發(fā)明巴西蘇木紅素對急性高血壓大鼠外周血壓的影響。本發(fā)明所用巴西蘇木紅素，批號070131。將巴西蘇木紅素以DMSO溶解，以生理鹽水配制成所需濃度。實(shí)驗(yàn)所用動物為雄性Wistar大鼠，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物研究所提供，體重為250-320g。實(shí)驗(yàn)室室溫25-28°C，相對濕度40%60%，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養(yǎng)，每籠5只，每三日清掃籠舍一次。取正常大鼠，用10%烏拉坦腹腔注射麻醉，俯臥位固定于手術(shù)臺上，分離頸總動脈，插入塑料導(dǎo)管，并聯(lián)接于壓力換能器和四導(dǎo)生理儀。開通電腦，進(jìn)行監(jiān)測15分鐘，記錄正常血壓。然后打開腹腔，分離左腎動脈，用動脈夾夾閉左腎動脈，15分鐘時，股靜脈給予巴西蘇木紅素，給藥后15分鐘松開動脈夾，使左腎動脈再通，此時記錄血壓。分別于松開動脈夾后5，10，15，30，45，60分鐘觀察并記錄血壓值。計算松開動脈后15分鐘時的收縮壓、舒張壓和平均動脈壓。所得數(shù)據(jù)經(jīng)EXCEL軟件處理。SPSS10.0軟件處理，方差分析，組間t檢驗(yàn)。本試驗(yàn)巴西蘇木紅素給藥劑量分別為1.25,2.5,5mg/kg。本試驗(yàn)用巴西蘇木紅素以助溶劑生理鹽水配制，其助溶劑濃度0.5TOMS0,4%羥丙基-P-環(huán)糊精。本試驗(yàn)所用空白對照為等體積助溶劑生理鹽水(0.5。/。DMS0,4y。羥丙基-p-環(huán)糊精)。_表3巴西蘇木紅素對高血壓大鼠血壓(再灌15分鐘)的影響(x士s)分組藥物劑量收縮壓舒張壓平均動<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>巴西蘇木紅素2.5117.33±10.23*82.0±9.65*99.67±8.84*巴西蘇木紅素5.0129.67±6.7184.5±6.53*_107.08±5.16*與對照組相比，**P<0.01,*P<0.05。n=6本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，巴西蘇木紅素對正常和高血壓大鼠血壓有降低作用。其最低有效劑量為2.5mg/kg。提示巴西蘇木紅素具有一定的降血壓作用，對于防治因血壓過高所引起的心腦血管疾病都有積極的意義。權(quán)利要求1.一種藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟1)先將藥材重量的5～15倍的堿水溶液進(jìn)行加熱提取，得到提取液；2)將提取液在室溫下加酸，使PH值為2～6，離心或靜止過濾，棄去上清液，取沉淀物，然后干燥，得干燥物；3)將干燥物用醇溶解，進(jìn)行色譜分離，即制得巴西蘇木紅素。2.按照權(quán)利要求l所述的藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法，其特征在于步驟l)中所述的加熱提取所用的堿水溶液的濃度為0.016%。3.按照權(quán)利要求l所述的藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法，其特征在于步驟l)中所述的加熱提取所用溫度為3CTC10(TC。4.按照權(quán)利要求l所述的藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法，其特征在于步驟l)中所述的提取次數(shù)為13次，每次為30分鐘至5小時。5.按照權(quán)利要求1所述的藥物化合物巴西蘇木紅素的制備方法，其特征在于所述的醇采用乙醇或甲醇。6.藥物化合物巴西蘇木紅素在制備治療血壓升高及由血壓升高引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。全文摘要藥物化合物巴西蘇木紅素及其制備方法和用途，涉及一種從蘇木心材中分離出來的藥物化合物的制備方法。該方法采用堿水溶液進(jìn)行提取，不涉及有機(jī)溶劑，因此提取成本低，操作安全。同時將動物試驗(yàn)證明，所制得的巴西蘇木紅素可以用來制備治療體內(nèi)血壓升高所引起的病癥，如各種類型的高血壓、動脈粥樣硬化、冠心病、腦血栓和腦出血等。文檔編號A61K31/352GK101125846SQ20071012208公開日2008年2月20日申請日期2007年9月21日優(yōu)先權(quán)日2007年9月21日發(fā)明者李伯男,杜力軍,偉王,佳申,邢東明,超馬申請人:清華大學(xué)