專利名稱：從紅花中分離出的新化合物、其制法和藥物組合物與用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從紅花中分離出的新化合物，及其制備方法，含有這類 化合物的藥物組合物，還涉及其在預(yù)防和治療腦血管疾病中的醫(yī)藥用途，。
背景技術(shù)：
紅花系菊科植物紅花(awtkwms^cton'船L.)的干燥管狀花，始 載于《開寶本草》。其栽培與藥用的歷史已長達(dá)2100多年，具有活血 祛瘀，通經(jīng)止痛之功效。在現(xiàn)代臨床中成為預(yù)防和治療冠心病、心肌 梗死和腦血栓等中老年疾病的重要中藥。近年來對紅花的化學(xué)成分及 藥理作用的研究十分活躍，已有報道的紅花化學(xué)成分主要包括黃酮類、 多糖及揮發(fā)油等，特別是黃酮類成分具有顯著的心血管系統(tǒng)活性，目 前從紅花中分離得到的黃酮類成分有山柰酚、槲皮素、6-羥基山柰酚、 6-羥基山柰酚-3-0-葡萄糖苷、6-羥基山柰酚-7-0-葡萄糖苷、山柰酚-3-葡萄糖苷、槲皮素-7-葡萄糖苷、槲皮素-3-葡萄糖苷、山柰酚-3-蕓香糖 苷、蘆?。患t花中還含有紅花苷，新紅花苷和紅花醌苷及重要的活性 成分紅花黃色素中的紅花黃色素A (SY-A)、羥基紅花黃色素A(HSYA) 等。紅花中水溶性成份紅花黃色素是近年來藥效學(xué)研究的熱點(diǎn)，表現(xiàn) 出廣泛的藥理活性(1)心肌保護(hù)作用，(2)降血壓作用，(3)抗凝 血、抑制血栓形成的作用，(4)抗氧化的作用。本發(fā)明所涉及的一種新化合物的的制備方法及其醫(yī)藥用途未見文 獻(xiàn)報道。 參考文獻(xiàn)l.杭麗君，唐寅軒.現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，1995， 12 (2): 192張戈，郭美麗，等.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2002， 23 (1): 1093李艷梅，車慶明.藥學(xué)學(xué)報，1998， 33 (8): 6264尹宏斌，何直升，葉陽.中草藥，2001， 32 (9): 7765鐘朝杰，李隆云.四川中草藥研究，1992， 12: 736周瑜芳，胡子昭.新疆工學(xué)院學(xué)報，1997， 18 (4): 2707 Takahashi Y et al:Tetra Lett 1982,23(49): 51638 Meswlhy M R, Kadota S, Momose Y,et al:Chem Pharm Bull, 1993,41(10): 17969 Meswlhy M R, Kadota S, Momose Y,et al:Chem Pharm Bull，1992，40(12): 335510 KatsuyukiNakano,KazuhitoKusaka，etal:Journal of chromatography,1988，438: 6111 Planta Med， 1992,58: 285-286 12Phytochemistry,1992,31(ll): 400113 J Nat Prod, 1988,51(2): 22914 Chapman and Hall, 1982: 8515楊志福，梅其炳，等.西北藥學(xué)雜志，2001， 16 (3): 131 16常海濤，韓宏星，屠鵬飛，等.國外醫(yī)藥 植物藥分冊，1999， 14 (5): 20117戎惠珍.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1997， 9 (4): 4518曹治權(quán).微量元素與中醫(yī)藥.北京中國中醫(yī)藥出版社，1993: 42219郭美麗，張漢明，張芝玉等.植物資源與環(huán)境，5巻5420鐘朝杰，李隆云.四川中草藥研究，1992， 12: 7321聶瓊嶸.時珍國醫(yī)國藥，2003， 14 (8): 50322劉發(fā)，魏苑，楊新中，等.藥學(xué)學(xué)報，1992,127(10): 78523 FenghuaFu，ChunfangSu，KeLiu, et al:AntihypertensiveDrugs AndPha腿cology,2005,18(5): 59A 24黃正良,崔祝梅，任遠(yuǎn)，等.中草藥,1987,18(4): 22 25陳文梅,金鳴，吳偉，等.心肺血管病雜志，2001,20(4): 201-201,240 26楊樹東，李金榮,蔡亞欣，等.心肺血管病雜志,1996,15(4): 198 27陳文梅，金鳴，吳偉,等.中國藥學(xué)雜志,2000,35(11): 741 28金鳴，吳偉,陳文梅,等.中國藥學(xué)雜志，2001，36(3): 167 29陳希元，馬軍，阿不力克木.中國藥理學(xué)通報，1996，12(6): 483 30李江偉.中草藥,1999,30(2): 128 31楊志福,文愛東，賈敏,等.中藥材,2001,24(4): 28332金鳴，李金榮，蔡亞欣，等.心肺血管病雜志，1998，17(4): 27733陳文梅，金鳴，李金榮,等.紅花黃色素對羥自由基損傷抗凝血酶的保護(hù)作用[J].心肺血管病雜志，1998，17(3): 215 34XinbingWei,HuiqingLiu，XiaSun,et al.Neuroscience Letters,2005 35胡書群,張光毅,趙文君.徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1995,15(3): 225 36胡書群,張光毅.徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1999,19(5): 349 37柏蕙英,秦月琴.中草藥,1992,23(10): 531 38陸正武,劉發(fā),胡堅(jiān),等.中國藥理學(xué)報，1991，12(6): 537發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了從紅花中分離出的一種新化合物，如式(i 、 n、 ni、 iv)所示，及其衍生物。<formula>formula see original document page 7</formula>本發(fā)明的新化合物是可以通過下列方法得到的步驟1制備紅花提取液紅花藥材，加水熱回流提取或冷浸提取，提取液減壓濃縮至適當(dāng) 體積，加入乙醇沉淀，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味，水沉，靜置，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入堿液調(diào)pH8-12，熱回流，放冷后以鹽酸調(diào)pH至中性，即得紅花提取液。 具體而言，紅花藥材，加4-10倍量水，優(yōu)選是6-8倍，更優(yōu)選是7倍； 提取溫度是從室溫到溶劑回流的溫度，優(yōu)選是溶劑回流的溫度； 提取時間是l-24小時，提取液過濾，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入乙醇沉淀，醇濃度為 75%-95%，優(yōu)選的的醇濃度是80%-90%，更優(yōu)選的醇沉濃度為85%， 靜置12-48h，優(yōu)選18-36h，更優(yōu)選是24h， 過濾，濾液減壓濃縮至無醇味，加入水沉淀，水的加入量為6-10倍量，優(yōu)選為7-9倍量，最優(yōu)選的水量為8倍量， 在靜置12-48h，優(yōu)選18-36h，更優(yōu)選是24h，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入氫氧化鈉調(diào)pH7-12，優(yōu)選的pH9-11， 更優(yōu)選的pH10， 熱回流0.5-2h，優(yōu)選是lh， 放冷后以鹽酸調(diào)pH7，即得紅花提取液。步驟2制備紅花提取物粗粉步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，進(jìn)行柱分離，優(yōu)選 的分離柱選自大孔樹脂柱、反相C18及C8柱、葡聚糖凝膠柱、聚酰胺 柱，以水洗脫，收集相應(yīng)的流份，凍干，即得提取物粗粉。具體而言，1，當(dāng)使用大孔吸附樹脂柱分離時，優(yōu)選的大孔吸附樹脂選自DlOl， D201、 D301、 XAD16、 XAD1600、 XAD7HP、 XAD761、 HP、 SP、 HP2MG系列，以水作為洗脫液，提取液與填料的重量比為1: 20-50， 優(yōu)選為1: 25—40;洗脫3-5個柱體積后，開始收集流份6-11個柱體 積，凍干，即得提取物粗粉。2、 當(dāng)使用反相C18柱分離時，以水洗脫，提取液與填料的重量比為1: 10-20，洗脫2-4個柱體積后，開始收集流份收集相應(yīng)的流份5-ll個柱 體積，凍干，即得提取物粗粉。3、 當(dāng)使用反相C8柱分離時，以水洗脫，提取液減與填料的重量比為 1: 20-50，洗脫l-3個柱體積后，優(yōu)選的洗脫體積為2個柱體積，開始收集流份2-6個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。4、 當(dāng)使用葡聚糖凝膠柱分離時，優(yōu)選的葡聚糖凝膠選自G-IO、 G-25、 G-50、 LH-20，以水洗脫，提取液減與填料的重量比為1: 20-50，優(yōu)選 為l: 25-40，更優(yōu)選的比例為l: 30，洗脫l-3個柱體積后，優(yōu)選的洗 脫體積為2個柱體積，開始收集流份2-6個柱體積，凍干，即得提取物 粗粉。5、 當(dāng)使用聚酰胺柱分離時，以水洗脫，提取液減與填料的重量比為1: 20-50，優(yōu)選為1: 25-40，更優(yōu)選的比例為1: 30，洗脫1-3個柱體積 后，優(yōu)選的洗脫體積為2個柱體積，開始收集流份2-6個柱體積，凍干， 即得提取物粗粉。步驟3分離純化將步驟2所得的提取物粗粉用水溶解，上分離柱進(jìn)行化合物的分 離純化，優(yōu)選的分離柱選自葡聚糖凝膠、TSKgelToyopearlHW-40柱、 上反相硅膠0DS柱、上聚酰胺柱、硅膠柱。優(yōu)選的葡聚糖凝膠選自G-10 、 G-25、 G-50、 LH陽20。具體而言，將步驟2所得的提取物粗粉用水溶解，1、 當(dāng)使用葡聚糖凝膠LH-20柱分離時，樣品與葡聚糖凝膠LH-20重量比(1: 50-200)，用水洗脫，洗脫2-4個柱體積后，開始收集色帶，60 'C下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。2、 當(dāng)使用葡聚糖凝膠G-25柱分離時，樣品與葡聚糖凝膠重量比(1: 50-200)，用水洗脫，洗脫2-4個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減 壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于 90%。3、 當(dāng)使用葡聚糖凝膠G-10柱分離時，樣品與葡聚糖凝膠重量比(1:50-200) ，用水洗脫，洗脫2-4個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減 壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于 90%。4、 當(dāng)使用TSKgdToy叩earlHW40柱分離時，樣品與樹脂重量比(1: 50-200)，用水洗脫，洗脫1-3個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減 壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于 90%。5、 當(dāng)使用反相硅膠ODS-18柱分離時，樣品與反相硅膠ODS-18重量 比(1: 50-200)，用水洗脫，洗脫3-5個柱體積后，開始收集相應(yīng)的色 帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷， 其含量大于90%。6、 當(dāng)使用反相硅膠ODS-8柱分離時，樣品與反相硅膠ODS-18重量比 (1: 50-200)，用洗脫，洗脫3-5個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大 于90%。7、 當(dāng)使用上硅膠柱(200-300目)分離時，樣品與硅膠重量比(1:30-100)， 用乙酸乙酯-甲醇-水(1:1:0.1-0.5)洗脫，洗脫4-6個柱體積后，開始 收集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧千燥，即得紅 花新苷，其含量大于90%。本發(fā)明還涉及以本發(fā)明化合物作為活性成份的藥物組合物。該藥物 組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。可通過將本發(fā)明化合物與一種 或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適于人 或動物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物在其藥物組合物中的含量通常 為0. 1-95重量％。本發(fā)明化合物或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥 途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、 鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以 是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù) 乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻 劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含 片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑 等。本發(fā)明化合物可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、 耙向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。為了將本發(fā)明化合物制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種 賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑。 稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、 木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤劑可以是 水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡 萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲 基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹脂、卡波姆、 聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、 低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、 羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十 二垸基磺酸鈉等；潤滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸 鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、 腸溶包衣片，或雙層片和多層片。為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明化合物與稀 釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有 效成分本發(fā)明化合物先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼?， 再置于硬膠囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明化合物片劑的各稀釋劑、 黏合劑、潤濕劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明化合物的 膠囊劑。為將本發(fā)明化合物制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二 醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、 pH調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、 羥丙基-e-環(huán)糊精等；pH調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧 化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋 酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、 矯味劑或其它添加劑。為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用 任何公知的給藥方法給藥。本發(fā)明化合物藥物組合物的給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的 性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動物的個體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。
一般來講，本發(fā)明化合物的每天的合適劑量范圍為0. 001-150mg/Kg體重，優(yōu)選為0. 1-100mg/Kg體重，更優(yōu)選為1-60mg/Kg 體重，最優(yōu)選為2-30mg/Kg體重。上述劑量可以一個劑量單位或分成 幾個劑量單位給藥，這取決于醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及包括運(yùn)用其它治療 手段的給藥方案。本發(fā)明的化合物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY 藥物合并使用。當(dāng)本發(fā)明的化合物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時， 應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整它的劑量。與給予生理鹽水的模型組大鼠相比，受試品紅花新苷在6mg/kg的劑量下靜脈注射給藥可明顯改善腦缺血大鼠的神經(jīng)行為癥狀，縮小缺 血區(qū)范圍，證明紅花新苷對實(shí)驗(yàn)性腦缺血有保護(hù)作用。說明本發(fā)明的化 合物紅花,新苷具有預(yù)防和/或治療腦血管缺血疾病的作用。
具體實(shí)施方式
以下通過實(shí)施例及試驗(yàn)例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不受限于這些實(shí) 施例。步驟1 、紅花提取液的制備實(shí)施例1、紅花藥材，加10倍量水，室溫提取12h，提取液過濾，濾液減壓濃縮 至適當(dāng)體積，加入乙醇沉淀，醇濃度為75%，靜置48h，過濾，濾液減壓濃縮至無 醇味，10倍量水沉淀，靜置48h，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入氫氧化鈉調(diào)pH7， 熱回流2h,放冷后以鹽酸調(diào)pH7，即得紅花提取液。實(shí)施例2、紅花藥材，加4倍量水，室溫提取24h，提取液過濾，濾液減壓濃縮至 適當(dāng)體積，加入乙醇沉淀，醇濃度為95%，靜置12h，過濾，濾液減壓濃縮至無醇 味，6量水沉淀，靜置12h，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入氫氧化鈉調(diào)pHll， 熱回流0.5h，放冷后以鹽酸調(diào)pH7，即得紅花提取液。實(shí)施例3、紅花藥材，加6倍量水，回流提取2h，提取液過濾，濾液減壓濃縮至 適當(dāng)體積，加入乙醇沉淀，醇濃度為80%,靜置36h，過濾，濾液減壓濃縮至無醇 味，7量水沉淀，靜置36h，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入氫氧化鈉調(diào)pH9，熱 回流lh，放冷后以鹽酸調(diào)pH7，即得紅花提取液。實(shí)施例4、紅花藥材，加7倍量水，熱回流lh，提取液過濾，濾液減壓濃縮至適 當(dāng)體積，加入乙醇沉淀，醇濃度為85%，靜置24h，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味， 8倍量水沉淀，靜置24h，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入氫氧化鈉調(diào)pH10，熱 回流lh，放冷后以鹽酸調(diào)pH7，即得紅花提取液。實(shí)施例5、紅花藥材，加9倍量水，熱回流3h，提取液過濾，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入乙醇沉淀，醇濃度為90%，靜置18h，過濾，濾液減壓濃縮至無醇味， 9倍量水沉淀，靜置18h，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入氫氧化鈉調(diào)pH12，熱 回流1.5h，放冷后以鹽酸調(diào)pH7，即得紅花提取液。步驟2 、制備紅花提取物粗粉實(shí)施例6、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上大孔吸附樹脂柱，可選 擇的大孔吸附樹脂為D101，，以水作為洗脫液，提取液與填料的重量比為1: 50， 用水洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集流份6個柱體積，凍干，即得提取物粗 粉。實(shí)施例7、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上大孔吸附樹脂柱，可選 擇的大孔吸附樹脂為D301，以水作為洗脫液，提取液與填料的重量比為1: 20， 用水洗脫，洗脫5個柱體積后，開始收集流份11個柱體積，凍干，即得提取物粗 粉。實(shí)施例8、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上大孔吸附樹脂柱，可選 擇的大孔吸附樹脂為XAD1600，以水作為洗脫液，提取液與填料的重量比為1: 40，用水洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集流份9個柱體積，凍干，即得提取 物粗粉。實(shí)施例9、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上大孔吸附樹脂柱，可選 擇的大孔吸附樹脂為HP2MG，以水作為洗脫液，提取液與填料的重量比為1: 30, 用水洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集流份8個柱體積，凍干，即得提取物粗 粉。實(shí)施例IO、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上反相C18柱，以水洗 脫，提取液與填料的重量比l: 20，洗脫2個柱體積后，開始收集流份收集相應(yīng)的 流份5個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例ll、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上反相C18柱，以水洗 脫，提取液與填料的重量比l: 10,洗脫4個柱體積后，開始收集流份收集相應(yīng)的 流份ll個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例12、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上反相C18柱，以水洗 脫，提取液與填料的重量比l: 15，洗脫3個柱體積后，開始收集流份收集相應(yīng)的 流份8個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例13、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上反相C8柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比l: 50，洗脫l個柱體積后，開始收集流份2個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例14、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上反相C8柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比l: 20，洗脫3個柱體積后，開始收集流份6個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例15、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上反相C8柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比h 40，洗脫2個柱體積后，開始收集流份4個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例16、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上葡聚糖凝膠柱(G-IO)， 以水洗脫，提取液減與填料的重量比為1: 50,洗脫1個柱體積后開始收集流份2 個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例17、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上葡聚糖凝膠柱(G-25)， 以水洗脫，提取液減與填料的重量比為1: 20,洗脫2個柱體積后開始收集流份6 個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例18、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上葡聚糖凝膠柱(G-50)， 以水洗脫，提取液減與填料的重量比為1: 30，洗脫3個柱體積后開始收集流份5 個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例19、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上葡聚糖凝膠柱(LH-20)， 以水洗脫，提取液減與填料的重量比為1: 40，洗脫2.5個柱體積后開始收集流份 4個柱體積，凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例20、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上聚酰胺柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比為1: 20，洗脫3個柱體積后，開始收集流份6個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例21、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上聚酰胺柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比為1: 30，洗脫2個柱體積后，開始收集流份4個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例22、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上聚酰胺柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比為1: 40，洗脫2個柱體積后，開始收集流份3個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。實(shí)施例23、步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，上聚酰胺柱，以水洗脫， 提取液減與填料的重量比為1: 50，洗脫1個柱體積后，開始收集流份2個柱體積， 凍干，即得提取物粗粉。步驟3 、分離純化實(shí)施例24、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠LH-20柱，樣品與葡聚 糖凝膠LH-20重量比1: 50，用水洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集色帶，60 t:下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例25、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠LH-20柱，樣品與葡聚 糖凝膠LH-20重量比1: 200，用水洗脫，洗脫2個柱體積后，開始收集色帶，60 'C下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。實(shí)施例26、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠LH-20柱，樣品與葡聚 糖凝膠LH-20重量比1: 150，用水洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集色帶，60 'C下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例27、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠G-25柱，樣品與葡聚糖 凝膠重量比h 50，用水洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集色帶，60'C下減壓濃 縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例28、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠G-25柱，樣品與葡聚糖 凝膠重量比l: 200，用水洗脫，洗脫2個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減壓 濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例29、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠G-25柱，樣品與葡聚糖 凝膠重量比l: 150，用水洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減壓 濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例30、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠G-10柱，樣品與葡聚糖 凝膠重量比l: 50，用水洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減壓濃 縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例31、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠G-10柱，樣品與葡聚糖 凝膠重量比l: 200，用水洗脫，洗脫2個柱體積后，開始收集色帶，60。C下減壓 濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于卯％。 實(shí)施例32、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上葡聚糖凝膠G-10柱，樣品與葡聚糖 凝膠重量比l: 150，用水洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減壓 濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例33、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上TSKgelToyopearlHW-40柱，樣品 與樹脂重量比l: 50，用水洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減壓 濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于卯％。 實(shí)施例34、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上TSKgelToy叩eariHW-40柱，樣品 與樹脂重量比l: 200，用水洗脫，洗脫l個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減 壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例35、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上TSKgelToyopearlHW-40柱，樣品 與樹脂重量比l: 150,用水洗脫，洗脫2個柱體積后，開始收集色帶，60。C下減 壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。實(shí)施例36、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上反相硅膠ODS-18柱，樣品與反相 硅膠ODS-18重量比l: 50，用水洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集相應(yīng)的色帶， 6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于 90%。實(shí)施例37、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上反相硅膠ODS-18柱，樣品與反相 硅膠ODS-18重量比1: 200，用水洗脫，洗脫5個柱體積后，開始收集相應(yīng)的色 帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大 于9線。實(shí)施例38、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上反相硅膠ODS-18柱，樣品與反相 硅膠ODS-18重量比1: 150，用水洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集相應(yīng)的色 帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大 于90%。實(shí)施例39、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上反相硅膠ODS-8柱，樣品與反相硅 膠ODS-18重量比l: 50，用洗脫，洗脫5個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下減 壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例40、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上反相硅膠ODS-8柱，樣品與反相硅 膠ODS-18重量比l: 200，用洗脫，洗脫3個柱體積后，開始收集色帶，60'C下 減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧千燥，即得紅花新苷，其含量大于卯％。 實(shí)施例41、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上反相硅膠ODS-8柱，樣品與反相硅 膠ODS-18重量比h 150，用洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收集色帶，6(TC下 減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含量大于90%。 實(shí)施例42、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱200目，樣品與硅膠重量比 1: 30，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.1)洗脫，洗脫6個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。實(shí)施例43、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱200目，樣品與硅膠重量比 1: 100，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.5)洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。實(shí)施例44、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱200目，樣品與硅膠重量比1: 60，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.3)洗脫，洗脫5個柱體積后，開始收 集色帶，60'C下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。實(shí)施例45、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱200目，樣品與硅膠重量比 1: 70，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.4)洗脫，洗脫5個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。實(shí)施例46、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱300目，樣品與硅膠重量比 h 30，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.1)洗脫，洗脫5個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于卯％。實(shí)施例47、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱300目，樣品與硅膠重量比 1: 80，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.5)洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于卯％。實(shí)施例48、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱300目，樣品與硅膠重量比 1: 60，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.3)洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。實(shí)施例49、步驟2所得紅花粗粉用水溶解，上硅膠柱300目，樣品與硅膠重量比 1: 70，用乙酸乙酯-甲醇-水(體積比1:1:0.4)洗脫，洗脫4個柱體積后，開始收 集色帶，6(TC下減壓濃縮，濃縮液經(jīng)冷凍干燥或噴霧千燥，即得紅花新苷，其含 量大于90%。新化合物紅花新苷的理化數(shù)據(jù)分子式C2()H2201();分子量:422;比旋光度[a]D2。 (c ， CH3OH);紫外光譜UV: >^狀nm (logs): 202， 246， 363 (CH3OH); 203, 230， 418(+A13C1); 203, 231， 411 (+A13C1+HC1);紅外光譜IR (KBr): v麗cm": 3373,2924, 1670, 1626, 1514, 1446, 1269, 1169， IO卯;核磁共振氫譜！H 麗R (D20+CD3OD, ppm): S7.77(1H， d, J= 15.5 Hz, H-7), 7.48 (1H， d， J=15.5Hz, H-8), 7.37 (2H, d, /= 7.5 Hz， H-10, 14), 6.73 (2H， d， 《/= 7.5 Hz， H畫11,13), 4.40 (1H, brs， H-4), 2.77 (1H, brs， H-3), 3.83 (1H, d, /= 8.5 Hz, H-l'),3，20-3.29 (2H， m, H-4',5'), 3.60 (1H, brd， /= 11.5Hz, H畫6'), 3.49 (1H， m, H-6')， 3.40-3.46 (2H, m， H-2',3');核磁共振碳譜13C NMR (D20+CD3OD, ppm): S202， 203， 186.4, 158.7, 142.8,130.9 (2C)， 127.7， 122.9， 116.2 (2C), 113.9， 79.9, 78.2, 76.4, 71.5, 70.4， 70.1, 61.4, 53.4 ;高 分辨質(zhì)譜HR-ESI(FTMS)(+)w/z445.1101 [M+Naf (calcd 445.1111)。結(jié)構(gòu)解析化合物為黃色粉末，高分辨質(zhì)譜FT-MS顯示準(zhǔn)分子離子峰m/z: 445.1101 [M+Na]+(calcd 445.1111)，推出分子式為C20H22O10。紫外光 譜UV紫外光譜顯示特征吸收帶人，(logs): 202 (4.03), 246 (4.13), 363 (4.25) nm (MeOH)，力n AlCl3帶I紅移55 nm，力口 A1C13+HC1同 A1C13，無芳香鄰二羥基取代。分析其& NMR譜，S7.77 (1H, d, J= 15.5 Hz， H-7)， 7.48 (1H， d, J = 15.5Hz， H-8)提示分子中含有反式雙鍵，在S7.37 (2H, d, /= 7.5 Hz), 6.73 (2H， d, /= 7.5 Hz)提示分子中存在AB系統(tǒng)，表明分子中含有對 位二取代的芳環(huán)。在54.40 (1H, brs), 2.77 (1H, brs)各有一個氫。此夕卜，在 5 3.83-3.20有七個氫，表明分子中含有一個糖，由于其端基質(zhì)子出現(xiàn)在 3.83 (lH，d，J-8.5 Hz),可以推斷該糖不是以氧苷形式存在。"CNMR 譜顯示20個碳信號，除6個糖碳信號(S 79.9， 78.2， 76.4, 71.5, 70.1, 61.4)和一個桂皮酰基外[186.4, 158.7, 142.8, 130.9 (2C), 127.7, 122,9， 116.2 (2C)]，剩余5個碳信號(5202， 203, 113.9.2， 70.4， 53.4)。結(jié)合二維 核磁共振'H」H COSY， HMQC和HMBC譜確定化合物的結(jié)構(gòu)如式所 示。藥理實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)例l實(shí)驗(yàn)方法參考《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》1066頁主編徐叔云汴如濂陳修1、實(shí)驗(yàn)材料 (1)受試品受試品紅花新苷，為褐色固體顆粒，共17mg，易溶于生理鹽水。 受試品紅花新苷，為中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所張金蘭教授提供。使 用前用生理鹽水配制成所需濃度的溶液(6mg/kg)。(2) 試劑戊巴比妥鈉北京化學(xué)試劑公司產(chǎn)品(德國進(jìn)口分裝)批號020919蒸餾水配置(0.8mg/100ml)。磷酸二氫鈉北京北化精細(xì)化學(xué)品 有限責(zé)任公司，批號990293，蒸餾水配置成3.1202g/100ml溶液，常 溫冷藏。磷酸氫二鈉北京北化精細(xì)化學(xué)品有限責(zé)任公司，批號 990308，蒸餾水配置成7.01628g/100ml溶液，常溫冷藏。氯化鈉北 京北化精細(xì)化學(xué)品有限責(zé)任公司，批號20040220，蒸餾水配置成 0.9g/100ml溶液，常溫冷藏。紅四氮唑(TTC):北京化學(xué)試劑公司產(chǎn) 品(德國進(jìn)口分裝)批號040919。 4%TTC配制方法分別取0.7ml 磷酸二氫鈉、1.8ml磷酸氫二鈉、22.5ml生理鹽水、lgTTC配置而成。(3) 動物雄性SD大鼠，體重250—270g，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物 科學(xué)部提供，合格證號SCXK(京)2002-0001。(4) 器材大鼠手術(shù)臺、手術(shù)器械、尼龍魚線(直徑0.24mm)、縫線、 秒表等。2、實(shí)驗(yàn)方法(1) 動物分組大鼠隨機(jī)分為3組，分別為假手術(shù)組、腦缺血模型組紅花新苷 6mg/kg給藥組和和，(2) 中動脈阻塞所致局灶性腦缺血(MCAO)模型及組織的制備1選用直徑0.24 mm魚線， 一端加熱使成光滑球形，大鼠用水合氯 醛G50mg/kg， ，i.p.)麻醉，仰臥位固定，頸部正中切口，分離右側(cè)頸 總及頸內(nèi)、外動脈，將頸外動脈近心端結(jié)扎。結(jié)扎頸總動脈近心端， 用銀夾夾閉頸內(nèi)動脈，在頸總動脈近分叉處剪一小口，將魚線插入頸 內(nèi)動脈，遇輕微阻力時即停止，插入深度約1.8 cm左右。結(jié)扎頸總動 脈插線處，固定魚線。消毒縫合傷口。動物放回籠中詞養(yǎng)。以上實(shí)驗(yàn) 操作均在23 25'C進(jìn)行。動物入組標(biāo)準(zhǔn)(1)大鼠大腦中動脈閉塞同側(cè)出現(xiàn)Honers征。(2)大鼠蘇醒后出現(xiàn)左前肢屈曲、內(nèi)收，左側(cè)轉(zhuǎn)圈， 或向左側(cè)傾倒。(3) 給藥方式給藥組于手術(shù)后30分鐘經(jīng)舌下靜脈給藥，假手術(shù)組 和模型組給予等容量的生理鹽水。(4) 神經(jīng)行為評分和腦缺血面積測定術(shù)后24小時測定行為評分，動物行為評分標(biāo)準(zhǔn)為(a) 提鼠尾觀察前肢屈曲情況，雙前肢對稱向地面計(jì)為0分，如手術(shù) 對側(cè)前肢出現(xiàn)腕屈曲計(jì)為1分，肘屈曲計(jì)為2分，肩內(nèi)旋計(jì)為3分， 既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩內(nèi)旋者，計(jì)為4分。(b) 將動物置于平地面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動，檢査阻力。如 雙側(cè)阻力對等且有力，計(jì)為0分，如向手術(shù)對側(cè)推動時阻力下降者， 根據(jù)下降程度不同分為輕、中、重三度，分別計(jì)為l， 2和3分。(c) 將動物雙前肢置于一金屬網(wǎng)上，觀察雙前肢的肌張力。雙前肢肌 張力對等且有力者及為0分。同樣根據(jù)手術(shù)對側(cè)肌張力下降程度不' 同計(jì)為1， 2和3分。(d) 動物有不停地向一側(cè)轉(zhuǎn)圈者，計(jì)為1分。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)評分，滿分為11分。分?jǐn)?shù)越高表示動物行為障礙越嚴(yán)重。術(shù)后24小時測定行為評分后，將動物斷頭取腦，去掉繡球、小腦 腦干和低位腦干，然后冠狀切4刀共5片。5片腦組織用TTC染色， 正常組織為紅色，梗死部位為白色，求算梗死面積及比值。同法操作， 記錄各組梗死面積及比值，進(jìn)行t檢驗(yàn)。 3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1) 與假手術(shù)組大鼠相比，模型組大鼠表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)行為障礙； 缺血30分鐘后靜脈注射給于紅花新苷6mg/kg，動物神經(jīng)行為癥狀則得 到明顯改善，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，紅花新苷組動物的行為評分與模型組動 物相比都有高度顯著性差異(PO.Ol)(2) TTC染色顯示，大鼠腦缺血24小時后，腦組織出現(xiàn)明顯缺血區(qū)。 缺血30分鐘后給與紅花新苷治療，腦缺血區(qū)明顯小于模型組。紅花新 苷6mg/kg給藥組的大鼠腦缺血面積與模型組相比有顯著性差異(P<0.05)。表l.紅花新苷對局部腦缺血大鼠行為的影響(mean士SD)組別動物數(shù)行為評分假手術(shù)組50.00+0.00模型組108.30±0.80A6 mg/kg組76.29±1.10**與假手術(shù)組比較Apo.01，與模型組比較"PO.Ol。 表2.受試品紅花新苷對大鼠局部腦缺血面積的影響(mean士SD)組別動物數(shù)腦缺血面積比(％)假手術(shù)組50.00+0.00模型組1028.84±6.14A6mg/kg721.43 ±6.99*組與假手術(shù)組比較APO.OI，與模型組比較* <0.05。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)論與給予生理鹽水的模型組大鼠相比，受試品紅花新苷在6mg/kg的 劑量下靜脈注射給藥可明顯改善腦缺血大鼠的神經(jīng)行為癥狀，縮小缺 血區(qū)范圍，提示受試品紅花新苷對實(shí)驗(yàn)性腦缺血有保護(hù)作用。
權(quán)利要求
1. 如式I、II、III所示的化合物，
2、如式i、 n 、 m和iv所示化合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 步驟i制備紅花提取液紅花藥材，加水提取，提取液濃縮至適當(dāng)體積后，加入乙醇沉淀，靜置，過 濾，濾液減壓濃縮至無醇味，水沉，靜置，濾液減壓濃縮至適當(dāng)體積，加入堿液調(diào)pH8-12，熱回流，放冷后以鹽酸調(diào)pH至中性，制得紅花提取液； 步驟2制備紅花提取物粗粉步驟1所得紅花提取液減壓濃縮至適當(dāng)體積，進(jìn)行柱分離，以水洗脫，收集相應(yīng)的流份，凍干，即得提取物粗粉； 步驟3分離純化將步驟2所得的提取物粗粉用水溶解，上分離柱進(jìn)行化合物的分離純化。
3、 根據(jù)權(quán)利要求2的制備方法，其特征在于，步驟2中所述的分離柱選自大孔樹 脂柱、反相C18及C8柱、葡聚糖凝膠柱、聚酰胺柱。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3的制備方法，其特征在于，所述的大孔樹脂選自D101， D201、 D301、 XAD16、 XAD1600、 XAD7HP、 XAD761、 HP、 SP、 HP2MG系列。
5、 根據(jù)權(quán)利要求3的制備方法，其特征在于，所述的葡聚糖凝膠選自G-IO、 G-25、 G國50、 LH-20。
6、 根據(jù)權(quán)利要求2的制備方法，其特征在于，步驟3中所述的分離柱選自葡聚糖 凝膠、TSKgel Toyopearl HW-40柱、上反相硅膠ODS柱、上聚酰胺柱、硅膠柱。
7、 根據(jù)權(quán)利要求6的制備方法，其特征在于，所述的葡聚糖凝膠選自G-IO、 G-25、 G國50、 LH-20。
8、 根據(jù)權(quán)利要求2的制備方法，其特征在于，步驟1中乙醇沉淀時，醇濃度為 750/0-95%。
9、 一種藥物組合物，包括常規(guī)的載體，其特征在于，還含有有效劑量的式I、 II 、 III、 W所示化合物或其衍生物中至少一種
10、式i、 ii、 m、 iv所示化合物及其衍生物在制備預(yù)防和/或治療腦血管缺血 疾病藥物中的應(yīng)用
全文摘要
本發(fā)明公開了從紅花中分離出的新化合物如式I、II、III和IV所示，這類化合物的制備方法，含有這類化合物的藥物組合物，還涉及其在預(yù)防和治療腦血管疾病中的醫(yī)藥用途。
文檔編號A61K31/351GK101279965SQ200710065069
公開日2008年10月8日 申請日期2007年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月2日
發(fā)明者馮子明, 姜建雙, 嶺 張, 張培成, 張英豪, 張金蘭, 朱海波, 凱 渠, 盛彧欣 申請人:中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所