專利名稱：虎眼萬年青osw－1皂甙的無a、b環(huán)的雙環(huán)類似物、合成方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有高抗腫瘤和免疫抑制活性的虎虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物及其合成方法和用途。
背景技術(shù)：
虎眼萬年青皂甙OSW-1是日本化學(xué)家Sashida等從一種原產(chǎn)于南非斯威士蘭(Swaziland)、德蘭士瓦(Transvaal)、納塔爾(Natal)等省的常綠觀賞性植物虎眼萬年青(Ornithogalum Saundersiae)的地下球莖中分離提取出的具有膽甾烷骨架的皂甙[Kubo，S.Y.；Terao，M.M.；Sashida，Y.Phytochemistry 1992，31，3969]。生物活性測試表明，OSW-1具有極強(qiáng)的廣譜抗腫瘤活性，是迄今所發(fā)現(xiàn)的抗癌活性極強(qiáng)的化合物之一。其IC50值在0.1-0.7nM之間，比臨床使用的甲胺喋呤(methotrexate)，依托泊苷(etoposide)，阿霉素(adriamycin)，順鉑(cisplatin)，喜樹堿(camptothecin)以及紫杉醇(taxo1)等強(qiáng)10-100倍[Mimaki，Y.；Kuroda，M.；Kameyama，A.；Sashida，Y.Bioorg.Med.Chem.Lett.1997，7，633]。隨后，Sashida等從Ornithogalum Saundersiae及相關(guān)植物中分離出了一系列與OSW-1結(jié)構(gòu)相關(guān)的皂甙，部分皂甙顯示了相當(dāng)?shù)目鼓[瘤活性和免疫抑制活性，并申請了一系列的專利[(a)Sashida，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashida，Y.；Oka，K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.KokaiTokkyo Koho JP 09048794 A2 18 Feb 1997 Heisei，7 pp.(Japan).(b)Sashida，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashida，Y.；Oka，K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09048795 A2 18 Feb1997 Heisei，7 pp.(Japan).(c)Sashida，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashida，Y.；Oka，K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09048796 A2 18 Feb 1997 Heisei，6 pp.(Japan).(d)Sashida，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashida，Y.；Oka，K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09040690 A2 10 Feb1997 Heisei，10 pp.(Japan).(e)Sashida，Y.；Oka，K.；Hirano，T.；Mimaki，Y.；Kuroda，A.；Fujii，A.；Myata，Y.(Sashida，Y.；Oka，K.；Pola Kasei Kogyo Kk，Japan).Jpn.Kokai Tokkyo Koho JP 09040691 A2 10 Feb 1997 Heisei，7 pp.(Japan).]。
OSW-1皂甙有極強(qiáng)的廣譜抗腫瘤活性，因此具有極好的藥用前景，這引起了許多化學(xué)家的興趣和極大的關(guān)注，國際上多個小組對OSW-1進(jìn)行了合成研究。1998年，鄧紹江、俞飚和惠永正等率先完成了OSW-1的全合成[Deng，S.；Yu，B.；Lou，Y.；Hui，Y.J.Org.Chem.1998，64，202]。隨后對于其全合成又有多次報(bào)道[(a)Morzycki，J.W.；Gryzkiewicz A.Carbohyd.Res.2002，1269.(b)Yu，W.；Jin，Z.J.Am.Chem.Soc.2001，3369.(c)Yu，W.；Jin，Z.J.Am.Chem.Soc.2002，6576.]。近年來，我們小組通過對OSW-1及其衍生物的化學(xué)合成及生理活性的測定，對其構(gòu)效關(guān)系有了進(jìn)一步的了解[(a)Ma，X.；Yu，B.；Hui，Y.；Xiao，D.；Ding，J.；Carbohyd.Res.2000，329，495.(b)Ma，X.；Yu，B.；Hui，Y.；Miao，Z.；Ding，J.；Carbohyd.Res.2001，334，159.(c)Ma，X.；Yu，B.；Hui，Y.；Miao，Z.；Ding，J.；Bioorg.Med.Chem.Lett.2001，2153.(d)Shi，B.；Wu，H.；Yu，B.；Wu，J.Angew.Chem.Int.Ed.2004，43，4324.(e)Deng，L.；Wu，H.；Yu，B.；Jiang，M.；Wu，J.Bioorg.& Med.Chem.Lett.2004，14，2781-2785.(f) Shi，B.；Tang，P.；Hu，X.；Liu，J.O.；Yu，B.J.Org.Chem.2005，70，10354-10367.(g)俞飚，史炳鋒 中國發(fā)明專利CN200410015744.7]。其它小組也對OSW-1的衍生物進(jìn)行了合成研究，以期得出其準(zhǔn)確的構(gòu)效關(guān)系[(a)Guo，C.-X.；Lacour，T.G.；Fuchs，P.L.Bioorg.Med.Chem.Lett.1999，9，419-424.(b)Morzicky,J.W.；Wojtkielewicz，A.；Wolczy ski，S.Bioorg.Med.Chem.Lett.2004，14，3323-3326.(c)Matsuya，Y.；Masuda，S.；Ohsawa，N.；Adam，S.；Tschamber，T.；Eustache，J.；Kamoshita，K.；Sukenaga，Y.；Nemoto，H.Eur.J.Org.Chem.2005，803-808]。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物。
本發(fā)明目的還提供一種實(shí)用的合成上述虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供上述虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物的用途。
本發(fā)明提供的虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物的結(jié)構(gòu)通式如下
其中X＝O，S，N；R1＝羥基或氫；5位氫構(gòu)型不定；11位甲基構(gòu)型不定；R2＝C1-C10的直鏈或帶支鏈烷基，當(dāng)X＝N時，允許雙取代；R3＝糖基，推薦為帶取代基團(tuán)的單糖或二糖。
上述R3＝糖基中的糖基為帶取代基團(tuán)的單糖或二糖，所述的帶取代基團(tuán)的單糖或二糖上的取代基是C1-C10的?；龅膯翁腔蚨鞘瞧咸烟腔?、甘露糖基、半乳糖基、阿拉伯糖基、木糖或他們組成的二糖基。7位糖基R3進(jìn)一步推薦為 結(jié)構(gòu)所示的D-木糖和L-阿拉伯糖形成的二糖2-O-?；?β-D-木糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-乙?；?α-L-阿拉伯吡喃糖基，其中的?；鵕4為C1-C10的酰基，如對甲氧基苯甲?；?MBz)。
所述的虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物可以是如下的結(jié)構(gòu)式 其中的Ac＝乙?；?，MBz＝對甲氧基苯甲酰基。
本發(fā)明首次提供了一種合成虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物的新的實(shí)用的合成方法，該方法包括如下步驟(1)順式或反式雙環(huán)的構(gòu)建；(2)區(qū)域選擇性還原六元環(huán)酮羰基；(3)7α-羥基的引入；(4)Aldol反應(yīng)引入側(cè)鏈，同時得到8α-羥基；(5)7位羥基氧化為酮；(6)7位羥基構(gòu)型的翻轉(zhuǎn)；(7)7位羥基的糖苷化；(8)脫除保護(hù)基得到目標(biāo)化合物；所述的7位糖基推薦為 所示的D-木糖和L-阿拉伯糖形成的二糖2-O-(4-甲氧基苯甲酰基)-β-D-木糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-乙?；?α-L-阿拉伯吡喃糖基。
具體來說，推薦各步驟如下a)順式或反式雙環(huán)的構(gòu)建以Hajos-Parrish酮為原料，鈀碳催化常壓氫化，可以得到順式雙環(huán)結(jié)構(gòu)化合物(5位氫與9位角甲基處于同側(cè)，環(huán)的結(jié)構(gòu)為 )；把Hajos-Parrish酮的衍生物(如化合物4)與MMC的DMF溶液回流后，可以在Hajos-Parrish酮衍生物的4位引入羧基(如化合物5)，接著用Pd-BaSO4催化氫化，高溫真空脫羧，可以得到反式雙環(huán)結(jié)構(gòu)化合物(5位氫與9位角甲基處于異側(cè)，環(huán)的結(jié)構(gòu)為 如化合物6)。
b)區(qū)域選擇性地還原酮羰基用NaBH4/iPrOH在低溫下選擇性地還原六元環(huán)上的羰基為羥基(如化合物8還原為化合物9)。
c)7α-羥基的引入甲醇/溴化銅回流下，可以得到7α/β-溴代酮(如化合物10)，保護(hù)基操作保護(hù)3位羥基，DMF-H2O-CH2Cl2作溶液堿性條件下水解，可以得到7α羥基，如化合物12。
d)Aldol反應(yīng)引入側(cè)鏈?zhǔn)褂帽狨セ虮崃蝓?，在常?guī)條件下發(fā)生Aldol反應(yīng)，在8位引入 所示的側(cè)鏈，同時構(gòu)建得到8α-羥基，其中X為O或S，R2如前所述(如化合物13)。
e)7羥基氧化成酮Swern氧化或者TPAP/NMO氧化7位羥基為酮，如化合物14。Swern氧化可參見Deng，S.；Yu，B.；Lou，Y.；Hui，Y.J.Org.Chem.1998，202；TPAP/NMO氧化可參見Shi，B.；Wu，H.；Yu，B.；Wu，J.Angew.Chem.Int.Ed.2004，43，4324。TPAP為四丙基銨過釕酸鹽(Tetrapropylammonium perruthenate)，NMO為4-甲基N-氧嗎啉(4-Methylmorpholine N-oxide)。
f)7位羥基構(gòu)型的翻轉(zhuǎn)NaBH4/CeCl3·7H2O條件下還原翻轉(zhuǎn)7位羥基，如化合物15，21。
g)7位羥基的糖苷化使用1位羥基用三氯乙酰亞胺酯活化的糖基給體(如化合物16)，促進(jìn)劑使用催化量的路易斯酸或質(zhì)子酸。所述的路易斯酸或質(zhì)子酸推薦為三烷基硅基三氟甲磺酸酯(如三甲基硅基三氟甲磺酸酯TMSOTf，三乙基硅基三氟甲磺酸酯TESOTf或三丁基硅基三氟甲磺酸酯TBSOTf)或三氟甲磺酸等。
h)脫除保護(hù)基得到目標(biāo)化合物，其結(jié)構(gòu)通式如下 式中X，R1，R2，R3如前所述。所述的合成方法中，R1推薦為羥基或者氫原子。7位糖基R3推薦為 結(jié)構(gòu)所示的D-木糖和L-阿拉伯糖形成的二糖2-O-?；?β-D-木糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-乙酰基-α-L-阿拉伯吡喃糖基，其中的?；鵕4為C1-C10的?；鐚籽趸郊柞；?MBz)。
推薦為如下結(jié)構(gòu)通式 其中，X＝O，S；R1＝羥基，氫；5位氫構(gòu)型不定；11位甲基構(gòu)型不定；R2＝直鏈或帶支鏈的烷基(C1-C10)，R4＝C1-C10的?；?br> 當(dāng)所述的結(jié)構(gòu)中R1＝H時，步驟(5)后，脫除3位羥基上的保護(hù)基，進(jìn)行脫羥反應(yīng)，后續(xù)操作不變。
本發(fā)明提供的虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物用于制備抑制腫瘤藥物。該類型新結(jié)構(gòu)化合物在體外活性測試中顯示了很強(qiáng)的對腫瘤細(xì)胞的抑制活性。其中化合物(1)對宮頸癌hela細(xì)胞的IC50值為2.6±0.4μM，對白血病T細(xì)胞JurKat T的IC50值為14.5±1.2μM；化合物(2)對宮頸癌hela細(xì)胞的IC50值為14.9±1.2μM，對白血病T細(xì)胞JurKat T的IC50值為8.9±0.9μM。
具體實(shí)施例方式
下述實(shí)施例將有助于進(jìn)一步理解本發(fā)明，但不能限制本發(fā)明的內(nèi)容。
實(shí)施例1虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物(1)的合成合成路線如下圖所示 試劑和條件a)硼氫化納，乙醇，-15℃，84％；b)異丁烯，磷酸，三氟化硼乙醚，97％；c)甲氧基鎂碳酸甲酯(Magnesium methyl carbonate，MMC)，DMF，125℃；d)H2(3atm)，5％鈀-硫酸鋇，甲醇，0℃；然后高壓，90℃，73％；e)2N鹽酸，甲醇，回流，100％；f)氯鉻酸吡啶(PCC)，二氯甲烷，室溫，100％；g)硼氫化納，異丙醇，0℃，72％；h)溴化銅，甲醇，89％；i)叔丁基二甲基氯硅烷(TBDMSCl)，咪唑，DMF，100％；j)氫氧化鈉(水溶液)-DMF-二氯甲烷，96％；k)二異丙基胺，正丁基鋰，四氫呋喃，-78℃；丙酸異丁酯，-78℃；12，-78℃，82％；l)四丙基銨過釕酸鹽(TPAP)，4-甲基-N-氧嗎啉(NMO)，4分子篩，rt，99％；m)七水合氯化鈰，硼氫化納，四氫呋喃，-10℃；1N鹽酸，-78℃，70％；n)三甲基硅基三氟甲磺酸酯(TMSOTf)，4分子篩，二氯甲烷，-20℃，56％；o)氫氟酸吡啶，二氯甲烷，室溫，100％.
具體實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)(1)(+)-(1S，7aS)-7，7a-Dihydro-7aS-methyl-1S-hydroxy-5(6H)-indanone(7，7a-二氫-7aS-甲基-1S-羥基-5-羰基-茚)3-15℃下，將底物Hajos-Parrish(1.64g，10mmol)溶于無水乙醇(8mL)中，緩慢滴加NaBH4(95mg)的乙醇溶液(9mL)，保持體系溫度不超過-10℃直至溶液加完，溶液變成墨綠色。緩慢升溫至5℃，然后降溫至-10℃，滴加1 N HCl溶液淬滅反應(yīng)，并調(diào)節(jié)pH值到中性，溶液由墨綠色變?yōu)槌赛S色。旋去乙醇，EA萃取，水洗，飽和食鹽水溶液干燥，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝3∶2)，得漿狀物(1.4g，84％)。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ＝5.77(s，1H)，3.83(m，1H)，2.68(m，1H)，2.60-2.31(m，3H)，2.20-2.03(m，3H)，1.80(m，1H)，1.13(s，3H)；ESI-MSm/z 165.0[M-H+].
(2)(+)-(1S，7aS)-1-tert-Butoxy-7，7a-dihydro-7a-methyl-5(6H)-indanone(7，7a-二氫-7aS-甲基-1S-叔丁氧基-5-羰基-茚)4-78℃，將醇3(16.16g，97.3mmol)溶于無水DCM(140mL)，加入新鮮制備的1.69mL濃H3PO4(2.0g的P2O5溶于5.5mL的85％H3PO4)，然后加入BF3·Et2O(4mL)，液化的異丁烯(81.6mL)。恒溫?cái)嚢?小時，然后自然升溫至室溫，攪拌過夜。反應(yīng)液倒入2 N氨水中淬滅，DCM萃取。有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水洗，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝9∶1)，得固體(21g，97％)。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ＝5.75(s，1H)，3.56(dd，J＝7.5，9.6Hz，1H)，2.68(dd，J＝11.7，19.5Hz，1H)，2.50(m，1H)，2.43-2.28(m，2H)，2.05-1.92(m，2H)，1.85-1.65(m，2H)，1.17(s，9H)，1.01(s，3H).
(3)(+)-(1S，7aS)-1-tert-Butoxy-5，6，7，7a-tetrahydro-7a-methyl-5-oxo-4-indancarboxylic acid(7，7a-二氫-7aS-甲基-1S-叔丁氧基-5-羰基-4-羧基-茚)5將化合物4(19g，85.6mmol)溶于MMC(150mL)，在預(yù)先升溫至125℃的油浴中加熱2小時，Ar鼓泡。冷卻后，CH2Cl2稀釋，加入碎冰塊，劇烈攪拌下，滴加濃HCl，調(diào)節(jié)pH值至3。分液，低溫旋干(溫度不超過30℃)。用EA溶解后，用大量的水洗，以洗去溶液中的DMF，然后用飽和的食鹽水溶液洗，無水Na2SO4干燥。過濾，低溫減壓濃縮，Et2O-PE重結(jié)晶，得黃色片狀晶體(13g，57％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝13.15(brs，1H)，3.67(t，J＝8.9Hz，1H)，3.35-3.14(m，2H)，2.86-2.58(m，2H)，2.12-2.00(m，2H)，1.95-1.74(m，2H)，1.19(s，12H).
(4)(+)-(1S，3aS，7aS)-1-tert-Butoxy-3a，4，7，7a-tetrahydro-7a-methyl-5(6H)-indanone(3aS，4，7，7a-四氫-7aS-甲基-1S-叔丁氧基-5-羰基-茚)6將不飽和酸5(500mg)和5％Pd-BaSO4(100mg)溶于甲醇(30mL)，0℃，加壓氫化(3atm)12小時，過濾后，減壓濃縮。氫化后的產(chǎn)物90℃下高真空脫羧2小時，硅膠柱層析(PE∶EA＝2∶1)，得漿狀物(309mg，73％)。1H NMR(300MHz，CHCl3)δ＝3.46(t，J＝8.4Hz，1H)，2.49-2.27(m，4H)，2.05-1.90(m，2H)，1.80-1.52(m，3H)，1.48-1.34(m，2H)，1.14(s，9H)，0.97(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝212.0，79.4，72.5，44.6，42.9，42.0，37.4，35.2，31.8，28.7，25.8，10.2；HREI-MSm/z C14H24O2[M+]計(jì)算值224.1776；實(shí)測值224.1772.
(5)(+)-(1S，3aS，7aS)-3a，4，7，7a-Tetrahydro-1-hydroxy-7a-methyl-5(6H)-indanone(3aS，4，7，7a-四氫-7aS-甲基-1S-羥基-5-羰基-茚)7將叔丁基醚6(272mg)溶于MeOH和2N HCl組成的10mL混合液(1∶1)，升溫至80℃回流5小時，TLC顯示反應(yīng)完全，冷卻后，減壓旋去甲醇，EA稀釋，有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝5∶2)，得漿狀物(201mg，100％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝3.75(t，J＝8.1Hz，1H)，2.49-2.26(m，4H)，2.20-2.10(m，1H)，2.06-1.93(m，1H)，1.80-1.68(m，1H)，1.69-1.53(m，2H)，1.51-1.39(m，2H)，0.99(s，3H)；13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ＝211.8，80.2，44.6，42.8，42.3，37.2，34.7，31.0，25.2，9.7；HREI-MSm/z C10H16O2[M+]計(jì)算值168.1150；實(shí)測值168.1158(6)(+)-(3aS，7aS)-3a，4，7，7a-Tetrahydro-7a-methyl-1，5-indandione(3aS，4，7，7a-四氫-7aS-甲基-1，5-二羰基-茚)8將化合物7(5.286g，31.46mmol)溶于50mL二氯甲烷中，加入PCC(8.84g，1.3 equiv.)，室溫下反應(yīng)至原料消失。過濾后，旋干，硅膠柱層析分離(PE-EtOAc，4∶1)，得白色固體(100％)。[α]D27=158]]>(c＝1.1，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝2.60-2.38(m，5H)，2.26-2.19(m，1H)，2.18-1.95(m，3H)，1.80-1.60(m，2H)，1.11(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝217.9，209.3，46.6，44.3，42.2，36.7，36.0，29.5，23.7，12.4；HREI-MSm/z C10H14O2[M+]計(jì)算值166.0994；實(shí)測值166.0996。
(7)(+)-(3aS，5S，7aS)-3a，4，5，6，7，7a-Hexahydro-5-hydroxy-7a-methyl-1-indanone(3aS，4，5，6，7，7a-六氫-7aS-甲基-5S-羥基-1-羰基-茚)9將二酮8(55mg，0.33mmol)溶于異丙醇(5mL)，0℃下，滴加NaBH4的乙醇溶液(3.3mg的NaBH4溶于盡可能少的乙醇中)，攪拌1小時后，自然升溫至室溫，繼續(xù)反應(yīng)直至反應(yīng)結(jié)束，用飽和的NH4Cl溶液淬滅反應(yīng)，EA萃取，有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝3∶2)，得液體(40mg，72％)。[α]D27=71]]>(c＝1.0，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ＝3.70-3.60(m，1H)，2.75(s，1H)，2.47(dd，J＝8.0，19.5Hz，1H)，2.18-2.07(m，1H)，2.01-1.80(m，4H)，1.78-1.70(m，1H)，1.70-1.61(m，1H)，1.60-1.40(m，2H)，1.36-1.25(m，1H)，0.94(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝220.1，70.9，47.1，43.6，35.9，34.3，30.4，29.2，23.2，12.8；HREI-MSm/zC10H16O2[M+]計(jì)算值168.1150；實(shí)測值168.1154。
(8)(2R，3aS，5S，7aS)-2-Bromo-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-5-hydroxy-7a-methyl-1-indanone(3aS，4，5，6，7，7a-六氫-7aS-甲基-2R-溴-5S-羥基-1-羰基-茚)10底物9(2.479g，14.75mmol)與CuBr2(9.91g，3 equiv.)溶于重蒸的無水甲醇(50mL)中，加熱回流至反應(yīng)完全。過濾后，旋干，硅膠柱層析(PE∶EA＝2∶1)，得油狀物(3.22g，89％)。[α]D27=29]]>(c＝0.1，CHCl3)；1HNMR(300MHz，CDCl3)δ＝4.52(d，J＝7.2Hz，1H)，3.78-3.60(m，1H)，2.26(dd，J＝6.9，14.7Hz，1H)，2.20-2.06(m，2H)，2.00-1.72(m，3H)，1.60-1.56(m，3H)，0.95(s，3H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ＝212.2，70.8，47.2，46.1，40.3，35.6，33.4，30.4，30.1，13.3；HREI-MSm/z C10H15O2Br[M+]計(jì)算值246.0255；實(shí)測值246.0244。
(9)(2R，3aS，5S，7aS)-2-Bromo-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-5-tert-butyldimethylsiloxy-7a-methyl-1-indanone(3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-2R-溴-5-叔丁基二甲基硅基-1-羰基-茚)11a and(2S，3aS，5S，7aS)-2-Bromo-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-5-tert-butyldimethylsiloxy-7a-methyl-1-indanone (3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-2S-溴-5-叔丁基二甲基硅基-1-羰基-茚)11b將化合物10(2.658g，10.76mmol)，TBSCl(1.947g，1.2 equiv.)和咪唑(1.46g，2 equiv.)溶于無水DMF(6mL)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。反應(yīng)完全后，用EA稀釋反應(yīng)體系，有機(jī)相依次用水，稀HCl溶液，飽和食鹽水溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE-EtOAc，16∶1)，得白色固體11a(1.63，42％)and 11b(2.22，57％)。11a[α]D27=46]]>(c＝0.8，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝4.40(d，J＝7.6Hz，1H)，3.70-3.60(m，1H)，2.26-2.19(m，1H)，2.15-2.00(m，2H)，1.88-1.76(m，3H)，1.56-1.45(m，2H)，1.47-1.42(m，1H)，0.96(s，3H)，0.88(s，9H)，0.06(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝211.9，71.6，56.3，47.3，40.4，35.2，34.4，30.8，30.0，25.8，18.1，13.5，-4.7；HREI-MSm/z C16H29O2BrSi[M+]計(jì)算值360.1120；實(shí)測值360.1127。
11b[α]D27=87]]>(c＝1.0，CDCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝3.98(t，J＝9.1Hz，1H)，3.65-3.57(m，1H)，2.51-2.44(m，1H)，1.88-1.78(m，4H)，1.59-1.52(m，3H)，1.35-1.25(m，1H)，1.07(s，3H)，0.88(s，9H)，0.05(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝212.2，71.7，55.6，47.0，40.2，35.1，34.3，30.7，29.7，25.8，18.1，14.2，-4.6；HREI-MSm/z C16H29O2BrSi[M+]計(jì)算值360.1120；實(shí)測值360.1111。
(10)(2R，3aS，5S，7aS)-3a，4，5，6，7，7a-Hexahydro-2-hydroxy-5-tert-butyldimethylsiloxy-7a-methyl-1-indanone(3a，4，5，6，7，7a-六氫-7a-甲基-2-羥基-5-叔丁基二甲基硅基-1-羰基-茚)12將化合物11a和11b的混合物(3.85g，10.69mmol)溶于DCM(42mL)、DMF(63mL)中，在0度下加入NaOH水溶液(21mL，0.67 M)，劇烈攪拌過夜，TLC顯示反應(yīng)結(jié)束。DCM稀釋后，稀HCl溶液，飽和食鹽水溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE-EtOAc，7∶1)，得油狀物(3.05g，96％)。[α]D27=16]]>(c＝0.3，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝4.35(d，J＝8.3Hz，1H)，3.60-3.46(m，1H)，2.45(s，1H)，2.08-1.98(m，1H)，1.81-1.74(m，4H)，1.75-1.68(m，1H)，1.57-1.45(m，2H)，1.42-1.35(m，1H)，1.01(s，3H)，0.89(s，9H)，0.06(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝218.6，71.7，71.5，47.1，41.0，34.9，32.1，30.7，29.3，25.9，18.2，13.3，-4.7；HRESI-MSm/z C16H30O3SiNa[M+Na+]計(jì)算值321.1856；實(shí)測值321.1853。
(11)7，8-cis Diol(7，8-順式二醇)13-78℃，Ar保護(hù)下，將iPr2NH(4.71mL，10 equiv.)溶于干燥的THF(70mL)，滴加nBuLi溶液(21mL，10 equiv.)，恒溫?cái)嚢?.5小時。緩慢滴加丙酸異丁酯(3mL，6 equiv.)，恒溫反應(yīng)攪拌一小時，滴加溶于10mL THF溶液的底物12(1.0g，3.36mmol)。-78℃攪拌4小時，TLC顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入冷的稀鹽酸溶液中，EA萃取，有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮。硅膠柱層析(PE-DCM，2∶1～1∶1)，得白色固體(960mg，67％)。[α]D27=-9]]>(c＝0.5，CHCl3)；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ＝4.14(t，J＝7.2Hz，1H)，3.91-3.80(m，2H)，3.58(s，1H)，3.60-3.44(m，1H)，2.79(q，J＝6.9Hz，1H)，2.20-2.02(m，1H)，2.00-1.58(m，7H)，1.55-1.33(m，5H)，1.31-1.21(m，3H)，1.26(d，J＝7.2Hz，3H)，0.99(d，J＝8.1Hz，6H)，0.88(s，9H)，0.81(s，3H)，0.02(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝177.9，81.1，76.6，71.7，71.3，47.7，45.0，40.6，36.3，35.1，31.1，30.6，27.6，25.9，19.1，19.0，14.0，12.8，-4.6；HRESI-MSm/zC23H44O5SiNa[M+Na+]計(jì)算值451.2850；實(shí)測值451.2849。
(12)Ketone(酮)14將化合物13(200mg，0.47mmol)，NMO(82mg，1.5 equiv.)和4MS溶于無水CH2Cl2(5mL)中，室溫?cái)嚢?0分鐘后，加入TPAP(16mg，0.1 equiv.)，繼續(xù)反應(yīng)2小時，反應(yīng)結(jié)束，過濾后，減壓濃縮，硅膠柱分離純化(PE∶DCM＝1∶1)，得白色固體(197mg，98％)。[α]D26=-88]]>(c＝1.0，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ＝5.28(s，1H)，4.22(dd，J＝6.5，10.6Hz，1H)，3.91(dd，J＝6.9，10.6Hz，1H)，3.75-3.64(m，1H)，2.56(q，J＝7.2Hz，1H)，2.52-2.45(m，1H)，2.32(dd，J＝8.0，18.8Hz，1H)，2.06-1.96(m，2H)，1.87-1.75(m，3H)，1.58-1.39(m，3H)，1.26(d，J＝7.2Hz，3H)，0.98(d，J＝8.1Hz，6H)，0.89(s，9H)，0.81(s，3H)，0.06(s，6 H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝216.0，178.8，82.2，71.2，71.1，44.7，38.7，37.3，36.9，34.3，31.2，29.7，28.8，27.6，25.9，19.1，19.0，18.2，13.0，12.6，-4.7；HRESI-MSm/z C23H42O5SiNa[M+Na+]計(jì)算值449.2694；實(shí)測值449.2696。
(13)7，8-trans Diol(7，8-反式二醇)15化合物14(154mg，0.36mmol)，溶于20mL THF中，-10℃下加入CeCl3·7H2O(175mg，1.3 equiv.)，和NaBH4(68mg，5 equiv.)。反應(yīng)3小時后，-78℃下，緩慢加入1N HCl溶液，調(diào)節(jié)pH為6～8，CH2Cl2萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾后，旋干，柱層析分離(PE-EA，19∶1)，得白色固體(107mg，70％)。[α]D26=-7]]>(c＝0.9，CHCl3)；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ＝4.01-3.96(m，1H)，3.94-3.86(m，2H)，3.63-3.53(m，1H)，3.48(s，1H)，3.08(q，J＝7.3Hz，1H)，2.25-2.21(m，1H)，2.20-2.12(m，1H)，2.03-1.90(m，2H)，1.83-1.65(m，3H)，1.58-1.33(m，3H)，1.27(d，J＝7.3Hz，3H)，1.27-1.15(m，1H)，0.95(s，3H)，0.92(d，J＝6.0Hz，6H)，0.88(s，9H)，0.04(s，6H)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ＝178.6，84.2，82.0，71.9，70.9，45.8，41.1，40.3，37.2，35.1，31.2，30.6，27.7，25.9，19.1，18.2，12.8，12.4，-4.6；HRESI-MSm/z C23H44O5SiNa[M+Na+]計(jì)算值451.2850；實(shí)測值451.2865。
(14)全保護(hù)的OSW-1雙環(huán)(缺A，B環(huán))類型皂甙17將化合物15(67mg，0.157mmol)和糖給體16(226mg，1.5 equiv.)，4MS溶于14mL無水CH2Cl2中，室溫?cái)嚢?0分鐘后，冷至-20℃，緩慢滴加TMSOTf(0.05 equiv)的CH2Cl2溶液。反應(yīng)3小時后，加入Et3N淬滅反應(yīng)，過濾后，旋干，柱層析分離(PE-EtOAc 19∶1)，得白色泡沫(106mg，56％)。[α]D26=-34]]>(c＝0.3，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝8.05(d，J＝9.0Hz，2H)，6.88(d，J＝8.4Hz，2H)，4.97(s，1H)，4.89(s，1H)，4.81(s，1H)，4.36(d，J＝10.8，1H)，4.28(s，1H)，4.11(s，1H)，4.04-3.93(m，3H)，3.86(s，3H)，3.74(s，1H)，3.69(t，J＝6.5Hz，1H)，3.62-3.54(m，2H)，3.52(s，1H)，3.37-3.26(m，2H)，2.84(q，J＝7.5Hz，1H)，2.18-2.04(m，1H)，1.99(s，3H)，1.14(d，J＝7.2Hz，3H)，1.03-0.80(m，42H)，0.72-0.51(m，24H)，0.05(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝179.3，168.9，164.6，163.4，132.1，122.9，113.3，100.7，84.1，72.3，70.7，55.4，45.3，40.9，40.4，36.3，35.1，31.4，30.3，27.5，26.0，20.8，19.0，18.7，18.4，13.1，13.0，7.0，6.8，4.9，4.8，4.7，-4.5，-4.6；HRESI-MSm/z C61H110O16Si4Na[M+Na+]計(jì)算值1233.6763；實(shí)測值1233.6805。
(15)虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物1將化合物17(21mg)溶于5mL CH2Cl2中，滴加2滴HF·Py溶液，室溫下攪拌1小時。用CH2Cl2稀釋反應(yīng)體系，加入NaHCO3中和，有機(jī)相用水，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干，柱層析分離(CH2Cl2-MeOH，16∶1)，得白色泡沫(13 mg，100％)。[α]D26=-24]]>(c＝0.4，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝8.00(d，J＝7.5Hz，2H)，6.92(d，J＝7.5Hz，2H)，4.98(s，1H)，4.84(d，J＝4.8Hz，2H)，4.21(s，1H)，4.15(d，J＝12.0Hz，1H)，4.00(t，J＝9.3Hz，1H)，3.92(s，1H)，3.90-3.68(m，8H)，3.85(s，3H)，3.66-3.52(m，1H)，3.51-3.33(m，3H)，2.69(q，J＝7.2Hz，1H)，2.17-1.94(m，2H)，1.91(s，3H)，1.85-1.65(m，4H)，1.55-1.20(m，5H)，1.08(d，J＝6.9Hz，3H)，0.82(s，3H)，0.77(t，J＝4.9Hz，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝178.7，169.5，165.5，163.9，132.1，121.6，113.8，100.1，99.8，89.5，84.0，77.2，72.8，72.6，71.1，70.4，69.7，69.1，65.1，63.6，61.8，55.4，45.3，40.8，40.2，36.2，34.6，30.9，30.1，29.7，27.5，22.7，20.6，19.0，18.9，14.1，12.8，12.5；HRESI-MSm/zC37H54O16Na[M+Na+]計(jì)算值777.3304；實(shí)測值777.3326。
實(shí)施例2虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物(2)的合成合成路線如下圖所示
試劑和條件a)硼氫化納，乙醇，-15℃，84％；b)異丁烯，磷酸，三氟化硼乙醚，97％；c)甲氧基鎂碳酸甲酯(Magnesium methyl carbonate，MMC)，DMF，125℃；d)氫氣(3atm)，5％鈀-硫酸鋇，甲醇，0℃；然后高壓，90℃，73％；e)2 N鹽酸，甲醇，reflux，100％；f)氯鉻酸吡啶(PCC)，二氯甲烷，室溫，100％；g)硼氫化納，異丙醇，0℃，72％；h)溴化銅，甲醇，89％；i)叔丁基二甲基氯硅烷(TBDMSCl)，咪唑，DMF，100％；j)氫氧化鈉(水溶液)-DMF-二氯甲烷，96％；k)二異丙基胺，正丁基鋰，四氫呋喃，-78℃；丙酸異丁酯，-78℃；12，-78℃，82％；l)四丙基銨過釕酸鹽(TPAP)，4-甲基-N-氧嗎啉(NMO)，4 分子篩，室溫，99％；m)氫氟酸吡啶，二氯甲烷，室溫，100％；n)N，N-雙三氟甲磺?；桨?N，N-bis(trifluoromethanesulfonyl)aniline，PhNTf2)，4-二甲氨基吡啶(DMAP)，吡啶，80％；o)氫氣(1atm)，10％鈀碳，乙醇-乙酸乙酯-三乙胺，100％；p)七水合氯化鈰，硼氫化納，四氫呋喃，-10℃；1N鹽酸，-78℃，65％；q)三甲基硅三氟甲磺酸酯(TMSOTf)，4分子篩，二氯甲烷，-20℃；氫氟酸吡啶，二氯甲烷，室溫，52％。
具體實(shí)驗(yàn)和數(shù)據(jù)(1)(1S，7aS)-7，7a-Dihydro-7a-methyl-1-hydroxy-5(6H)-indanone(7，7a-二氫-7aS-甲基-1S-羥基-5-羰基-茚)3-15℃下，將底物Hajos-Parrish(1.64g，10mmol)溶于無水乙醇(8mL)中，緩慢滴加NaBH4(95mg)的乙醇溶液(9mL)，保持體系溫度不超過-10℃直至溶液加完，溶液變成墨綠色。緩慢升溫至5℃，然后降溫至-10℃，滴加1N HCl溶液淬滅反應(yīng)，并調(diào)節(jié)pH值到中性，溶液由墨綠色變?yōu)槌赛S色。旋去乙醇，EA萃取，水洗，飽和食鹽水溶液干燥，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝3∶2)，得漿狀物(1.4g，84％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝5.77(s，1H)，3.83(m，1H)，2.68(m，1H)，2.60-2.31(m，3H)，2.20-2.03(m，3H)，1.80(m，1H)，1.13(s，3H)；ESI-MSm/z 165.0[M-H+].
(2)(+)-(1S，7aS)-1-tert-Butoxy-7，7a-dihydro-7a-methyl-5(6H)-indanone(7，7a-二氫-7aS-甲基-1S-叔丁氧基-5-羰基-茚)4-78℃，將醇3(16.16g，97.3mmol)溶于無水二氯甲烷(140mL)，加入新鮮制備的1.69mL濃H3PO4(2.0g的P2O5溶于5.5mL的85％H3PO4)，然后加入BF3·Et2O(4mL)，液化的異丁烯(81.6mL)。恒溫?cái)嚢?小時，然后自然升溫至室溫，攪拌過夜。反應(yīng)液倒入2N氨水中淬滅，DCM萃取。有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水洗，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝9∶1)，得固體(21g，97％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝5.75(s，1H)，3.56(dd，J＝7.5，9.6Hz，1H)，2.68(dd，J＝11.7，19.5Hz，1H)，2.50(m，1H)，2.43-2.28(m，2H)，2.05-1.92(m，2H)，1.85-1.65(m，2H)，1.17(s，9H)，1.01(s，3H).
(3)(+)-(1S，7aS)-1-tert-Butoxy-5，5，7，7a-tetrahydro-7a-methyl-5-oxo-4-indancarboxylic acid(7，7a-二氫-7aS-甲基-1S-叔丁氧基-5-羰基-4-羧基-茚)5將化合物4(19g，85.6mmol)溶于MMC(150mL)，在預(yù)先升溫至125℃的油浴中加熱2小時，Ar鼓泡。冷卻后，CH2Cl2稀釋，加入碎冰塊，劇烈攪拌下，滴加濃HCl，調(diào)節(jié)pH值至3。分液，低溫旋干(溫度不超過30℃)。用EA溶解后，用大量的水洗，以洗去溶液中的DMF，然后用飽和的食鹽水溶液洗，無水Na2SO4干燥。過濾，低溫減壓濃縮，Et2O-PE重結(jié)晶，得黃色片狀晶體(13g，57％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝13.15(brs，1H)，3.67(t，J＝8.9Hz，1H)，3.35-3.14(m，2H)，2.86-2.58(m，2H)，2.12-2.00(m，2H)，1.95-1.74(m，2H)，1.19(s，12H).
(4)(+)-(1S，3aS，7aS)-1-tert-Butoxy-3a，4，7，7a-tetrahydro-7a-methyl-5(6H)-indanone(3aS，4，7，7a-四氫-7aS-甲基-1S-叔丁氧基-5-羰基-茚)6將不飽和酸5(500mg)和5％Pd-BaSO4(100mg)溶于甲醇(30mL)，0℃，加壓氫化(3atm)12小時，過濾后，減壓濃縮。氫化后的產(chǎn)物90℃下高真空脫羧2小時，硅膠柱層析(PE∶EA＝2∶1)，得漿狀物(309mg，73％)。1HNMR(300 MHz，CHCl3)δ＝3.46(t，J＝8.4Hz，1H)，2.49-2.27(m，4H)，2.05-1.90(m，2H)，1.80-1.52(m，3H)，1.48-1.34(m，2H)，1.14(s，9H)，0.97(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝212.0，79.4，72.5，44.6，42.9，42.0，37.4，35.2，31.8，28.7，25.8，10.2；HREI-MSm/z C14H24O2[M+]計(jì)算值224.1776；實(shí)測值224.1772.
(5)(+)-(1S，3aS，7aS)-3a，4，7，7a-Tetrahydro-1-hydroxy-7a-methyl-5(6H)-indanone(3aS，4，7，7a-四氫-7aS-甲基-1S-羥基-5-羰基-茚)7將叔丁基醚6(272mg)溶于MeOH和2N HCl組成的10mL混合液(1∶1)，升溫至80℃回流5小時，TLC顯示反應(yīng)完全，冷卻后，減壓旋去甲醇，EA稀釋，有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝5∶2)，得漿狀物(201mg，100％)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝3.75(t，J＝8.1Hz，1H)，2.49-2.26(m，4H)，2.20-2.10(m，1H)，2.06-1.93(m，1H)，1.80-1.68(m，1H)，1.69-1.53(m，2 H)，1.51-1.39(m，2H)，0.99(s，3H)；13CNMR(100 MHz，CDCl3)δ＝211.8，80.2，44.6，42.8，42.3，37.2，34.7，31.0，25.2，9.7；HREI-MSm/z C10H16O2[M+]計(jì)算值168.1150；實(shí)測值d 168.1158(6)(+)-(3aS，7aS)-3a，4，7，7a-Tetrahydro-7a-methyl-1，5-indandione(3aS，4，7，7a-四氫-7aS-甲基-1，5-二羰基-茚)8將化合物7(5.286g，31.46mmol)溶于50mL二氯甲烷中，加入PCC(8.84g，1.3 equiv.)，室溫下反應(yīng)至原料消失。過濾后，旋干，硅膠柱層析分離(PE-EtOAc，4∶1)，得白色固體(100％)。[α]D27=158]]>(c＝1.1，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝2.60-2.38(m，5H)，2.26-2.19(m，1H)，2.18-1.95(m，3H)，1.80-1.60(m，2 H)，1.11(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝217.9，209.3，46.6，44.3，42.2，36.7，36.0，29.5，23.7，12.4；HREI-MSm/z C10H14O2[M+]計(jì)算值166.0994；實(shí)測值166.0996。
(7)(+)-(3aS，5S，7aS)-3a，4，5，6，7，7a-Hexahydro-5-hydroxy-7a-methyl-1-indanone(3aS，4，5，6，7，7a-六氫-7aS-甲基-5S-羥基-1-羰基-茚)9將二酮8(55mg，0.33mmol)溶于異丙醇(5mL)，0℃下，滴加NaBH4的乙醇溶液(3.3mg的NaBH4溶于盡可能少的乙醇中)，攪拌1小時后，自然升溫至室溫，繼續(xù)反應(yīng)直至反應(yīng)結(jié)束，用飽和的NH4Cl溶液淬滅反應(yīng)，EA萃取，有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水溶液洗，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE∶EA＝3∶2)，得液體(40mg，72％)。[α]D27=71]]>(c＝1.0，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ＝3.70-3.60(m，1H)，2.75(s，1H)，2.47(dd，J＝8.0，19.5Hz，1H)，2.18-2.07(m，1H)，2.01-1.80(m，4H)，1.78-1.70(m，1H)，1.70-1.61(m，1H)，1.60-1.40(m，2H)，1.36-1.25(m，1H)，0.94(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝220.1，70.9，47.1，43.6，35.9，34.3，30.4，29.2，23.2，12.8；HREI-MSm/z計(jì)算值C10H16O2[M+]168.1150；實(shí)測值168.1154。
(8)(2R，3aS，5S，7aS)-2-Bromo-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-5-hydroxy-7a-methyl-1-indanone(3aS，4，5，6，7，7a-六氫-7aS-甲基-2R-溴-5S-羥基-1-羰基-茚)10底物9(2.479g，14.75mmol)與CuBr2(9.91g，3 equiv.)溶于重蒸的無水甲醇(50mL)中，加熱回流至反應(yīng)完全。過濾后，旋干，硅膠柱層析(PE∶EA＝2∶1)，得油狀物(3.22g，89％)。[α]D27=29]]>(c＝0.1，CHCl3)；1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ＝4.52(d，J＝7.2Hz，1H)，3.78-3.60(m，1H)，2.26(dd，J＝6.9，14.7Hz，1H)，2.20-2.06(m，2H)，2.00-1.72(m，3H)，1.60-1.56(m，3H)，0.95(s，3H)；13CNMR(75MHz，CDCl3)δ＝212.2，70.8，47.2，46.1，40.3，35.6，33.4，30.4，30.1，13.3；HREI-MSm/z for C10H15O2Br[M+]計(jì)算值246.0255；實(shí)測值246.0244。
(9)(2R，3aS，5S，7aS)-2-Bromo-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-5-tert-butyldimethylsiloxy-7a-methyl-1-indanone(3aS，4，5，6，7，7a-六氫-7aS-甲基-2R-溴-5S-叔丁基二甲基硅基-1-羰基-茚)11a和(2S，3aS，5S，7aS)-2-Bromo-3a，4，5，6，7，7a-hexahydro-5-tert-butyldimethylsiloxy-7a-methyl-1-indanone (3aS，4，5，6，7，7a-六氫-7aS-甲基-2S-溴-5S-叔丁基二甲基硅基-1-羰基-茚)11b將化合物10(2.658g，10.76mmol)，TBSCl(1.947g，1.2 equiv.)和咪唑(1.46g，2 equiv.)溶于無水DMF(6mL)，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)過夜。反應(yīng)完全后，用EA稀釋反應(yīng)體系，有機(jī)相依次用水，稀HCl溶液，飽和食鹽水溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE-EtOAc，16∶1)，得白色固體11a(1.63，42％)and 11b(2.22，57％)。11a[α]D27=46]]>(c＝0.8，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝4.40(d，J＝7.6Hz，1H)，3.70-3.60(m，1H)，2.26-2.19(m，1H)，2.15-2.00(m，2H)，1.88-1.76(m，3H)，1.56-1.45(m，2H)，1.47-1.42(m，1H)，0.96(s，3H)，0.88(s，9H)，0.06(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝211.9，71.6，56.3，47.3，40.4，35.2，34.4，30.8，30.0，25.8，18.1，13.5，-4.7；HREI-MSm/z C16H29O2BrSi[M+]計(jì)算值360.1120；實(shí)測值360.1127。
11b[α]D27=87]]>(c＝1.0，CDCl3)；1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ＝3.98(t，J＝9.1Hz，1H)，3.65-3.57(m，1H)，2.51-2.44(m，1H)，1.88-1.78(m，4H)，1.59-1.52(m，3H)，1.35-1.25(m，1H)，1.07(s，3H)，0.88(s，9H)，0.05(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝212.2，71.7，55.6，47.0，40.2，35.1，34.3，30.7，29.7，25.8，18.1，14.2，-4.6；HREI-MSm/z C16H29O2BrSi[M+]計(jì)算值360.1120；實(shí)測值360.1111。
(10)(2R，3aS，5S，7aS)-3a，4，5，6，7，7a-Hexahydro-2-hydroxy-5-tert-butyldimethylsiloxy-7a-methyl-1-indanone 12將化合物11a和11b的混合物(3.85g，10.69mmol)溶于DCM(42mL)、DMF(63mL)中，在0度下加入NaOH水溶液(21mL，0.67 M)，劇烈攪拌過夜，TLC顯示反應(yīng)結(jié)束。DCM稀釋后，稀HCl溶液，飽和食鹽水溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，硅膠柱層析(PE-EtOAc，7∶1)，得油狀物(3.05g，96％)。[α]D27=16]]>(c＝0.3，CHCl3)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ＝4.35(d，J＝8.3Hz，1H)，3.60-3.46(m，1H)，2.45(s，1H)，2.08-1.98(m，1H)，1.81-1.74(m，4H)，1.75-1.68(m，1H)，1.57-1.45(m，2H)，1.42-1.35(m，1H)，1.01(s，3H)，0.89(s，9H)，0.06(s，6H)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ＝218.6，71.7，71.5，47.1，41.0，34.9，32.1，30.7，29.3，25.9，18.2，13.3，-4.7；HRESI-MSm/z C16H30O3SiNa[M+Na+]計(jì)算值321.1856；實(shí)測值321.1853。
(11)7，8-cis Diol(7，8-順式二醇)13-78℃，Ar保護(hù)下，將iPr2NH(4.71mL，10 equiv.)溶于干燥的THF(70mL)，滴加nBuLi溶液(21mL，10 equiv.)，恒溫?cái)嚢?.5小時。緩慢滴加丙酸異丁酯(3mL，6 equiv.)，恒溫反應(yīng)攪拌一小時，滴加溶于10mL THF溶液的底物12(1.0g，3.36 mmol)。-78℃攪拌4小時，TLC顯示反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入冷的稀鹽酸溶液中，EA萃取，有機(jī)相依次用水，飽和食鹽水溶液洗滌，無水Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮。硅膠柱層析(PE-DCM，2∶1～1∶1)，得白色固體(960mg，67％)。[α]D27=-9]]>(c＝0.5，CHCl3)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ＝4.14(t，J＝7.2Hz，1H)，3.91-3.80(m，2H)，3.58(s，1H)，3.60-3.44(m，1H)，2.79(q，J＝6.9Hz，1H)，2.20-2.02(m，1H)，2.00-1.58(m，7H)，1.55-1.33(m，5H)，1.31-1.21(m，3H)，1.26(d，J＝7.2Hz，3H)，0.99(d，J＝8.1Hz，6H)，0.88(s，9H)，0.81(s，3H)，0.02(s，6H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝177.9，81.1，76.6，71.7，71.3，47.7，45.0，40.6，36.3，35.1，31.1，30.6，27.6，25.9，19.1，19.0，14.0，12.8，-4.6；HRESI-MSm/z calcdC23H44O5SiNa[M+Na+]計(jì)算值451.2850；實(shí)測值451.2849。
(12)Ketone(酮)14將化合物13(200mg，0.47mmol)，NMO(82mg，1.5equiv.)和4MS溶于無水CH2Cl2(5mL)中，室溫?cái)嚢?0分鐘后，加入TPAP(16mg，0.1 equiv.)，繼續(xù)反應(yīng)2小時，反應(yīng)結(jié)束，過濾后，減壓濃縮，硅膠柱分離純化(PE∶DCM＝1∶1)，得白色固體(197mg，98％)。[α]D26=-88]]>(c＝1.0，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ＝5.28(s，1H)，4.22(dd，J＝6.5，10.6Hz，1H)，3.91(dd，J＝6.9，10.6Hz，1H)，3.75-3.64(m，1H)，2.56(q，J＝7.2Hz，1H)，2.52-2.45(m，1H)，2.32(dd，J＝8.0，18.8Hz，1H)，2.06-1.96(m，2H)，1.87-1.75(m，3H)，1.58-1.39(m，3H)，1.26(d，J＝7.2Hz，3H)，0.98(d，J＝8.1Hz，6H)，0.89(s，9H)，0.81(s，3H)，0.06(s，6 H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝216.0，178.8，82.2，71.2，71.1，44.7，38.7，37.3，36.9，34.3，31.2，29.7，28.8，27.6，25.9，19.1，19.0，18.2，13.0，12.6，-4.7；HRESI-MSm/z C23H42O5SiNa[M+Na+]計(jì)算值449.2694；實(shí)測值449.2696。
(13)醇18將化合物14(28mg)溶于5mL CH2Cl2中，加入2滴HF·Py，室溫?cái)嚢璋胄r，然后用NaHCO3溶液淬滅反應(yīng)，CH2Cl2萃取，有機(jī)相用水，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干，柱層析分離(PE-EA，2∶1)，得白色泡沫(21mg，100％)。1H NMR(300MHz，CHCl3)δ＝5.31(s，1H)，4.02(dd，J＝6.3，10.5Hz，1H)，3.90(dd，J＝6.9，10.5Hz，1H)，3.80-3.70(m，1H)，2.57(q，J＝7.2Hz，1H)，2.58-2.48(m，1H)，2.34(dd，J＝7.8，18.9Hz，1H)，2.14-1.90(m，4H)，1.82(dd，J＝12.6，18.9Hz，1H)，1.62-1.53(m，2H)，1.42(dd，J＝13.2，23.7Hz，1H)，1.26(d，J＝7.2Hz，3H)，0.97(d，J＝6.9Hz，6H)，0.81(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝215.7，178.8，82.1，71.2，70.4，44.7，38.7，37.2，36.7，33.7，30.8，28.6，27.6，19.1，19.0，13.0，12.6；HRESI-MSm/z C17H28O5Na[M+Na+]計(jì)算值335.1829；實(shí)測值335.1829。
(14)烯19將醇18(16mg)和PhNTf2(30mg)，DMAP(92mg)溶于無水CH2Cl2(2mL)和pyridine(0.5mL)中，室溫下攪拌至反應(yīng)完全。旋干，柱層析分離(PE-DCM，2∶1)，得白色泡沫(12mg，100％)。1H NMR(400MHz，CHCl3)δ＝5.66(s，2H)，5.24(s，1H)，4.02(dd，J＝6.5，10.6Hz，1H)，3.91(dd，J＝6.9，10.6Hz，1H)，2.85(dd，J＝3.8，18.5Hz，1H)，2.71-2.59(m，1H)，2.59(q，J＝7.2Hz，1H)，2.48(dd，J＝8.5，19.0Hz，1H)，2.28-2.19(m，1H)，2.08-1.97(m，1H)，1.88-1.72(m，3H)，1.26(d，J＝7.3Hz，1H)，0.98(d，J＝6.8Hz，6H)，0.75(s，3H)；13C NMR(100MHz，CDCl3)δ＝215.6，178.8，126.5，125.1，81.8，71.1，43.3，38.5，37.4，34.5，32.0，29.7，27.6，27.2，19.1，19.0，13.1，12.5；HRESI-MSm/z C17H26O4Na[M+Na+]計(jì)算值317.1723；實(shí)測值317.1727。
(15)Ketone 20將烯19(38mg)和10％Pd-C(10mg)溶于EtOH-EA(5mL，1∶4)中，常壓室溫氫化5小時。過濾后旋干，柱層析分離(PE-DCM，2∶1)，得白色泡沫(38mg，100％)。[α]D26=-130]]>(c＝1.0，CHCl3)；1HNMR(400 MHz，CDCl3)δ＝5.24(s，1H)，4.02(dd，J＝6.3，10.4Hz，1H)，3.90(dd，J＝6.9，10.4Hz，1H)，2.57(q，J＝7.1Hz，1H)，2.53-2.42(m，1H)，2.33(dd，J＝8.0，18.7Hz，1H)，2.07-1.94(m，2H)，1.81-1.49(m，6H)，1.42-1.25(m，2H)，1.27(d，J＝7.1Hz，3H)，0.98(d，J＝6.3Hz，6H)，0.79(s，3H)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ＝216.5，178.9，82.4，71.1，45.3，38.8，38.7，37.7，30.8，27.6，25.8，24.7，21.1，19.1，19.0，12.9，12.7；HREI-MSm/zC17H28O4[M+]計(jì)算值296.1988；實(shí)測值296.1995。
(16)7，8-trans Diol(7，8-反式二醇)21化合物20(30mg，0.1mmol)，溶于8mL THF中，-10℃下加入CeCl3·7H2O(48mg，1.3 equiv.)，和NaBH4(19mg，5 equiv.)。反應(yīng)3小時后，-78℃下，緩慢加入1N HCl溶液，調(diào)節(jié)pH為6～8，CH2Cl2萃取，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾后，旋干，柱層析分離(PE-EA，25∶1)，得白色固體(20mg，65％)。1H NMR(300MHz，CHCl3)δ＝3.98-3.88(m，1H)，3.90(dd，J＝2.6，6.8Hz，2H)，3.39(s，1H)，3.10(dd，J＝7.4，14.6Hz，1H)，2.37(s，1H)，2.25-2.14(m，1H)，2.02-1.83(m，2H)，1.29(d，J＝7.1Hz，3H)，0.95(d，J＝6.9Hz，6H)，0.89(s，3H)；13C NMR(75 MHz，CDCl3)δ＝178.5，85.0，81.3，70.8，46.3，41.9，41.3，38.0，33.1，30.9，29.7，27.7，26.0，25.5，21.3，19.0，12.6，12.5；HREI-MSm/z C17H30O4[M+]計(jì)算值298.2144；實(shí)測值298.2153。
(17)虎眼萬年青皂甙OSW-1類型皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物2將化合物21(20mg)和糖給體16(90mg)，4 MS溶于5mL無水CH2Cl2中，室溫?cái)嚢?0分鐘后，冷至-20℃，緩慢滴加TMSOTf(0.05 equiv)的CH2Cl2溶液。反應(yīng)3小時后，加入Et3N淬滅反應(yīng)，過濾后，旋干后溶于5mL CH2Cl2中，滴加2滴HF·Py溶液，室溫下攪拌1小時。用CH2Cl2稀釋反應(yīng)體系，加入NaHCO3中和，有機(jī)相用水，飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥。過濾，旋干，柱層析分離(CH2Cl2-MeOH，20∶1)，得白色泡沫(25mg，52％)。[α]D26=-41]]>(c＝0.1，CHCl3)；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ＝7.99(d，J＝9.0Hz，2H)，6.90(d，J＝9.3Hz，2H)，4.99(s，1H)，4.84(s，2H)，4.04-3.88(m，2H)，3.85(s，3H)，3.87-3.72(m，5H)，3.70-3.63(m，1H)，3.50-3.33(m，4H)，2.70(q，J＝7.5Hz，1H)，2.20-2.05(m，1H)，1.90(s，3H)，1.92-1.56(m，6H)，1.53-1.37(m，4H)，1.33-1.14(m，5H)，1.08(d，J＝6.9Hz，3H)，0.92-0.80(m，1H)，0.80-0.72(m，9H)；13C NMR(75 MHz，CDCl3)δ＝178.9，169.5，165.6，163.9，132.1，121.4，113.8，100.0，99.7，89.2，84.7，76.3，72.9，72.6，70.3，69.7，69.2，65.1，63.4，61.7，55.4，45.8，41.8，40.9，37.0，32.8，29.7，27.5，26.0，25.5，21.3，20.6，19.0，18.9，12.9，12.3；HRESI-MSm/z C37H54O15K[M+K+]計(jì)算值777.3094；實(shí)測值777.3091。
實(shí)施例3 體外活性測試結(jié)果MTT法測定對體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的抑制作用取處于指數(shù)生長期的宮頸癌hela細(xì)胞和JurKat T細(xì)胞(白血病T細(xì)胞)，加入適量Trypsin-EDTA液，用10 mL含5％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液配成懸液。計(jì)數(shù)后用完全培養(yǎng)液稀釋成5*104個/mL的細(xì)胞懸液。取24孔板，每孔加入上述細(xì)胞懸液1.0mL，放入培養(yǎng)箱48h。依次加入5個濃度的受試藥物和DMSO，每個濃度4孔。在37℃、5％CO2、飽和濕度的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48h。每孔加入濃度5mg/mL的MTT 100μL，孵育48h。傾去各孔內(nèi)液體，加入0.5mLDMSO，搖勻，每孔取出0.1mL于96孔板，以酶標(biāo)儀在550nM處測定OD值。重復(fù)三次。按下式計(jì)算細(xì)胞生長抑制率和用Bliss法計(jì)算IC50。細(xì)胞抑制率(％)＝(1-加藥細(xì)胞OD值/對照細(xì)胞OD值)*100％
權(quán)利要求
1.一種虎眼萬年青OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物，其特征是該具有如下的結(jié)構(gòu)式 其中X＝O、S或N；R1＝羥基或氫；5位氫構(gòu)型是R或S構(gòu)型；11位甲基構(gòu)型是R或S構(gòu)型；R2＝直鏈或帶支鏈烷基，當(dāng)X＝N時，允許雙取代；R3＝糖基，所述的糖基為帶取代基團(tuán)的單糖或二糖，所述的帶取代基團(tuán)的單糖或二糖上的取代基是C1-C10的?；?，所述的單糖或二糖是葡萄糖基、甘露糖基、半乳糖基、阿拉伯糖基、木糖或它們組成的二糖基。
2.如權(quán)利要求1所述的虎眼萬年青OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物，其特征是所述的虎眼萬年青OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物具有如下的結(jié)構(gòu)式 其中，MBz＝對甲氧基苯甲酰基。
3.如權(quán)利要求1所述的虎眼萬年青OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物，其特征是所述的7位糖基R3為 結(jié)構(gòu)所示的D-木糖和L-阿拉伯糖形成的二糖。
4.如權(quán)利要求1所述的虎眼萬年青OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物，其特征是所述的7位糖基R3是2-O-酰基-β-D-木糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-乙?；?α-L-阿拉伯吡喃糖基時，其中的?；鵕4為C1-C10的?；?。
5.如權(quán)利要求1所述的一種虎眼萬年青OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物的合成方法，其特征是該方法包括如下步驟(1)順式或反式雙環(huán)的構(gòu)建；(2)區(qū)域選擇性還原六元環(huán)酮羰基；(3)7α-羥基的引入；(4)Aldol反應(yīng)引入側(cè)鏈，同時得到8α-羥基；(5)7位羥基氧化為酮；(6)7位羥基構(gòu)型的翻轉(zhuǎn)；(7)7位羥基的糖苷化；(8)脫除保護(hù)基得到目標(biāo)化合物；當(dāng)R1＝H時，步驟(5)后加入脫除羥基步驟，后續(xù)(6)-(8)步驟不變。
6.如權(quán)利要求4所述的合成方法，其特征是當(dāng)所述的虎眼萬年青皂甙OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物通過如下(1)或(2)二種方法獲得(1)虎眼萬年青皂甙OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似結(jié)構(gòu)中R1＝OH時，各步驟如下a.順式或反式雙環(huán)的構(gòu)建以Hajos-Parrish酮為原料，鈀碳催化氫化，可以得到順式雙環(huán)結(jié)構(gòu)化合物((R)-H5)；把Hajos-Parrish酮的衍生物與MMC的DMF溶液回流后，可以在Hajos-Parrish酮的4位引入羧基，接著用Pd-BaSO4催化氫化，高溫真空脫羧，可以得到反式雙環(huán)結(jié)構(gòu)化合物((S)-H5)；-15℃下，將底物Hajos-Parrish(1.64g，10mmol)溶于無水乙醇(8mL)中，緩慢滴加NaBH4(95mg)的乙醇溶液(9mL)，保持體系溫度不超過-10℃直至溶液加完，溶液變成墨綠色。緩慢升溫至5℃，然后降溫至-10℃，滴加1N HCl溶液淬滅反應(yīng)，并調(diào)節(jié)pH值到中性，溶液由墨綠色變?yōu)槌赛S色b.區(qū)域選擇性地還原酮羰基用NaBH4/iPrOH在低溫下選擇性地還原六元環(huán)上的羰基為羥基；c.7α-羥基的引入甲醇/溴化銅回流下，可以得到7α/β-溴代酮，保護(hù)基操作保護(hù)3位羥基，DMF-H2O-CH2Cl2作溶液堿性條件下水解，可以得到7α羥基；d.Aldol反應(yīng)引入側(cè)鏈?zhǔn)褂帽狨セ虮崃蝓ィ诔Ｒ?guī)條件下發(fā)生Aldol反應(yīng)，在8位引入 所示的側(cè)鏈，同時構(gòu)建得到8α-羥基，其中X為O或S，R2如權(quán)利要求1所述；e.7羥基氧化成酮Swern氧化或者TPAP/NMO氧化7位羥基為酮；f.7位羥基構(gòu)型的翻轉(zhuǎn)NaBH4/CeCl3·7H2O條件下還原翻轉(zhuǎn)7位羥基；g.7位羥基的糖苷化使用1位羥基用三氯乙酰亞胺酯活化的糖基給體，促進(jìn)劑使用催化量的路易斯酸或質(zhì)子酸；h.脫除保護(hù)基得到目標(biāo)化合物，其結(jié)構(gòu)通式如權(quán)利要求1所述；(2)虎眼萬年青皂甙OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似結(jié)構(gòu)R1＝H時步驟如下步驟a-e同(1)所述之步驟，接著脫除3位羥基的保護(hù)基，隨后進(jìn)行脫羥反應(yīng)，后續(xù)操作同(1)所述之步驟(5)，(6)，(7)，(8)。
7.如權(quán)利要求5所述的合成方法，其特征是所述的步驟(1)中3位為羥基，7位糖基R3為 結(jié)構(gòu)所示的D-木糖和L-阿拉伯糖形成的二糖2-O-?；?β-D-木糖吡喃糖基-(1→3)-2-O-乙酰基-α-L-阿拉伯吡喃糖基，其中的酰基R4為C1-C10的?；?。
8.一種如權(quán)利要求1或2所述的虎眼萬年青皂甙OSW-1皂甙的無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物的用途，其特征用于制備抑制腫瘤的藥物。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種虎眼萬年青OSW－1類型皂甙無A，B環(huán)的雙環(huán)類似物及其合成方法和用途。該方法包括如下步驟(1)雙環(huán)的構(gòu)建；(2)區(qū)域選擇性還原六元環(huán)酮羰基；(3)7α－羥基的引入；(4)Aldol反應(yīng)引入側(cè)鏈，同時得到8α－羥基；(5)7位羥基氧化為酮；(6)7位羥基構(gòu)型的翻轉(zhuǎn)；(7)7位羥基的糖苷化；(8)脫除保護(hù)基得到目標(biāo)化合物。此類化合物顯示了極強(qiáng)的抗腫瘤活性，可以用于制備藥物。
文檔編號A61P35/00GK101089008SQ20071004158
公開日2007年12月19日 申請日期2007年6月1日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月1日
發(fā)明者俞飚, 張一純 申請人:中國科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所