專利名稱：一種含三七葉提取物的藥物組合物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及三七葉提取物及其藥物組合物。
背景技術(shù)：
癲癇又俗稱羊羔風(fēng)，是由于腦細胞過度放電所引起的反復(fù)發(fā)作的突然而短暫的腦功能失調(diào)，表現(xiàn)為運動、感覺、意識、植物神經(jīng)、精神等不同障礙，或可兼而有之。臨床上以突然意識喪失，發(fā)則仆倒、四肢抽搐、口吐涎沫或口中怪叫，蘇醒時一如常人為主要表現(xiàn)。
癲癇系多發(fā)病之一，在我國發(fā)病率約為37/10萬，患病率為3‰～7‰。我國現(xiàn)有癲癇患者近600萬，且以27萬/年的速率增長。本病常在兒童期和青春期發(fā)病，因病程長，給患者帶來的痛苦很大。
一般認為，癲癇的發(fā)病率和年齡有關(guān)。主要是少年時代發(fā)病，隨年齡增長發(fā)病人數(shù)逐年減少，30歲以前發(fā)病者占66％，50歲以上發(fā)病者不及15％。癲癇不同發(fā)作類型的發(fā)病率有年齡依賴性。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，幼年期的高發(fā)病率主要是由于產(chǎn)傷、新生兒窒息、先天畸形等多種原因所致。成年及中年人大約穩(wěn)定在20～40/10萬人的水平。不同年齡階段其發(fā)作類型也不一樣，如嬰兒痙攣僅見于嬰兒期癲癇。典型失神發(fā)作雖然反映了可能是持續(xù)終身的原發(fā)性全身性癲癇，但超出兒童期和青春期是很少見的。
目前，市場上主要的抗癲癇藥物副作用比較多，常見的主要是對血液細胞的抑制，包括白細胞下降，血小板下降或者是貧血；對內(nèi)臟的影響，常常是肝、腎功能的改變。還有中樞神經(jīng)系統(tǒng)的改變、消化道的刺激，以及新生兒無論在死亡率和發(fā)病率都有增加，也包括先天性畸形的發(fā)病率等。會出現(xiàn)嗜睡乏力、視力模糊以及記憶力受損等副作用，而且還存在停藥反跳、耐藥、依賴等現(xiàn)象，給疾病的治療帶來不利的影響。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含三七葉提取物的藥物組合物，用于治療或預(yù)防癲癇癥，所述藥物以三七葉提取物為主要成分，含三七葉總皀苷，以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為40mg～330mg。其中人參皀苷Rb3(C53H90O22)的優(yōu)選含量為50mg或100mg。
本發(fā)明所述及的藥物能治療或預(yù)防癲癇癥的發(fā)生，且在服用時不會引起嗜睡、精神不振或精神亢奮等副作用，該藥物可加入常規(guī)輔料，根據(jù)任何常規(guī)方法制備成治療癲癇癥的藥物，亦可采用緩控釋技術(shù)將其制成緩控釋制劑。
說明書附1是全細胞膜片鉗的神經(jīng)元鈉電流記錄圖。(正常的鈉電流)。
圖2是全細胞膜片鉗的神經(jīng)元鈉電流記錄圖。(加入三七總皂苷后的鈉電流)。
圖3是全細胞膜片鉗的神經(jīng)元鈉電流記錄圖。(洗去三七總皂苷后的鈉電流)。
圖4是動作電位的平均時程(HZ)和平均幅度(PA)圖。(對照組)。
圖5是動作電位的平均時程(HZ)和平均幅度(PA)圖。(三七葉提取物片劑作用10min)。
圖6是動作電位的平均時程(HZ)和平均幅度(PA)圖。(三七葉提取物片劑作用15min)。
具體實施例方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的說明。
實施例1取三七葉提取物[含三七葉總皀苷，以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為50g]。先將磷酸氫鈣36g、淀粉58g、糊精58g、微粉硅膠58g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，包衣，即得片劑。
實施例2取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為100g]。先將磷酸氫鈣30g、淀粉50g、糊精50g、微粉硅膠50g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，包衣，即得片劑。
實施例3取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為50g]。先將淀粉30g、糊精30g、微粉硅膠60g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，填充膠囊，即得膠囊劑。
實施例4取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為100g]。先將淀粉10g、糊精10g、微粉硅膠50g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，填充膠囊，即得膠囊劑。
實施例5取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為50g]。先將乳糖36g、淀粉58g、交聯(lián)聚維酮58g、微粉硅膠58g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，即得分散片。
實施例6取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為100g]。先將乳糖30g、淀粉30g、交聯(lián)聚維酮50g、微粉硅膠50g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，即得分散片。
實施例7取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為50g或100g]。先將甘露醇、糊精、甜菊素(1∶2∶0.03)混勻，再加入三七葉提取物制粒，干燥，整粒，分裝，即得顆粒劑。
實施例8取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為300g]。先將羥丙甲纖維素100g、乳糖50g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，包衣，即得緩釋片。
實施例9取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為300g]。先將聚乙二醇120g、乳糖30g混勻，再加入三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制粒，干燥，整粒，加入硬脂酸鎂混勻，壓片，包衣，即得緩釋片。
實施例10取三七葉提取物[含三七葉總皀苷以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為300g]。先將羥丙甲纖維素100g、乳糖50g混勻，再加入部分三七葉提取物混勻，再加入羥丙甲纖維素漿，制丸，干燥，噴入剩余三七葉提取物及羥丙甲纖維素，干燥，整粒，填充膠囊，即得緩釋小丸膠囊。
實施例11相關(guān)藥效實驗(一)最大電休克實驗(MES)1材料1.1實驗動物 清潔級昆明小鼠，雌雄各半，體重18-24g，動物均購自中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。
1.2儀器與藥品BL-420E生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟電子有限公司)；自制角膜電極；苯巴比妥1.3藥液制備 取三七總皂苷粉末溶于生理鹽水，配制成30mg/ml三七總皂苷溶液(低濃度)和60mg/ml三七總皂苷溶液(高濃度)1.4實驗方法 實驗前先篩選合格的老鼠，將角膜電極以生理鹽水浸濕后，緊密貼緊小鼠眼球，給予電刺激參數(shù)頻率50Hz、波寬10ms、強度45V、串長15個的直流電串刺激，以前肢屈曲、后肢強直性伸直為驚厥指標。選出達到指標的小鼠40只，雌雄各半，隨機分四組，每組10只模型組(生理鹽水)，三七總皂苷低濃度組(300mg/kg)，三七總皂苷高濃度組(600mg/kg)，陽性藥苯巴比妥組(50mg/kg)。灌胃給藥7d。第8d末次給藥30min后，進行MES實驗，記錄小鼠出現(xiàn)后肢強直的個數(shù)。正常組10只，自由攝食。
1.5統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)用SPSS 11.0軟件和Excel2003進行統(tǒng)計，進行配對t檢驗。
2.實驗結(jié)果三七總皂苷有抗電休克小鼠驚厥的作用三七總皂苷低濃度組和三七總皂苷高濃度組均有抗電休克小鼠驚厥的作用，能顯著減少發(fā)生后肢發(fā)生強直的小鼠個數(shù)，見表1。
表1 三七總皂苷對電休克小鼠驚厥的作用(n＝10)

注與模型組相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01(二)皮魯卡品癲癇模型實驗1材料1.1實驗動物 清潔級昆明小鼠，雌雄各半，體重18-24g，動物均購自中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心。
1.2儀器與藥品 皮魯卡品，苯巴比妥1.3藥液制備 取三七總皂苷粉末溶于生理鹽水，配制成30mg/ml三七總皂苷溶液(低濃度)和60mg/ml三七總皂苷溶液(高濃度)1.4實驗方法 小鼠35只，雌雄各半，隨機分五組，每組7只正常組自由攝食，模型組(生理鹽水)，三七總皂苷低濃度組(300mg/kg)，三七總皂苷高濃度組(600mg/kg)，陽性藥苯巴比妥組(50mg/kg)。灌胃給藥7d。第8d末次給藥30min后，除正常組外，其余四組腹腔注射皮魯卡品350mg/kg，進行行為學(xué)觀察，依據(jù)Racine的癇性發(fā)作分級標準判斷動物是否癇性發(fā)作，4級和5級發(fā)作為全身性驚厥或大發(fā)作。記錄1小時內(nèi)的發(fā)作等級，驚厥潛伏期(第一次出現(xiàn)4級以上癇性發(fā)作的時間)，發(fā)作次數(shù)(1小時內(nèi)的4級以上癇性發(fā)作的次數(shù))，1小時內(nèi)的死亡個數(shù)。
1.5統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)用SPSS 11.0軟件和Excel2003進行統(tǒng)計，進行配對t檢驗。
2.實驗結(jié)果三七總皂苷有抗皮魯卡品小鼠驚厥的作用三七總皂苷低濃度組和三七總皂苷高濃度組均有抗皮魯卡品致小鼠驚厥的作用，能顯著減少發(fā)作等級，發(fā)作次數(shù)，死亡個數(shù)；增大驚厥潛伏期，見表2。
表2三七總皂苷對皮魯卡品小鼠驚厥的作用(n＝7)

注與模型組相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01(三)自發(fā)活動實驗1材料1.1實驗動物 清潔級昆明小鼠，雌雄各半，體重16-24g，動物均購自中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心1.2儀器與藥品 動物活動箱用無色有機玻璃制成的25cm×20cm×15cm長方形箱，其底部上放入木屑墊料；秒表1.3藥液制備 取三七總皂苷粉末溶于生理鹽水，配制成30mg/ml三七總皂苷溶液(低濃度)和60mg/ml三七總皂苷溶液(高濃度)1.4實驗方法 小鼠24只，雌雄各半，隨機分三組，每組8只正常組自由攝食，三七總皂苷低濃度組(300mg/kg)， 三七總皂苷高濃度組(600mg/kg)，灌胃給藥7d。第8d末次給藥30min后，把小鼠投入用無色有機玻璃制成的25cm×20cm×15cm長方形活動箱中適應(yīng)3分鐘，然后記錄2分鐘內(nèi)小鼠走動時間以及雙前肢向上抬舉次數(shù)。
1.5統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)用SPSS 11.0軟件和Excel2003進行統(tǒng)計，進行配對t檢驗。
2.實驗結(jié)果三七總皂苷有抗小鼠自發(fā)活動的作用三七總皂苷低濃度組和三七總皂苷高濃度組均有抗小鼠自發(fā)活動的作用，能顯著減少走動時間，前肢向上抬舉次數(shù)，見表3。
表3 三七總皂苷對小鼠自發(fā)活動的作用(n＝8，x±SD)

注與正常組相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01(四)培養(yǎng)大腦皮層神經(jīng)元細胞實驗1材料1.1實驗動物 出生5-6天的SD乳鼠，清潔級，雌雄不限，購自中山大學(xué)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心1.2實驗步驟 將乳鼠斷頭取腦，取大腦皮層神經(jīng)元進行細胞培養(yǎng)，取培養(yǎng)了6-10天的大腦皮層神經(jīng)元進行全細胞膜片鉗技術(shù)，記錄正常條件下神經(jīng)元鈉通道電流的幅度和失活時間，加入62.5μg/ml的三七總皂苷，記錄神經(jīng)元鈉通道電流的幅度和失活時間，洗脫三七總皂苷后，記錄神經(jīng)元鈉通道電流的幅度和失活時間。
3.實驗結(jié)果3.1三七總皂苷對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道最大激活電流峰值的影響三七總皂苷對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道最大激活電流峰值有極為顯著的抑制作用。洗脫后鈉通道最大激活電流峰值恢復(fù)到接近正常水平，與control相比沒有顯著性差異。見表4。
表4三七總皂苷對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道最大激活電流峰值的影響

注與正常組相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.013.2三七總皂苷對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道失活時間的影響三七總皂苷對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道失活時間有極為顯著的延長作用。洗脫后鈉通道失活時間恢復(fù)到接近正常水平，與control相比沒有顯著性差異。見表5。
表5三七總皂苷對大鼠大腦皮層神經(jīng)元鈉通道失活時間的影響

注與正常組相比，“*”表示P＜0.05，“**”表示P＜0.01全細胞膜片鉗的神經(jīng)元鈉電流記錄圖如

圖1、圖2和圖3所示。
(五)大鼠腦片實驗1材料與方法1.1、研究對象Sprague-Dawley(SD)大鼠，出生16-19天，由中山大學(xué)北校區(qū)實驗動物中心提供。
1.2、化學(xué)試劑KCl，NaCl，CaCl2，MgCl2，NaHCO3，NaH2PO4，D-Glucouse分析純級，購自廣州化學(xué)制劑廠。
1.3、溶液需配置人工腦脊液，灌流用正常腦脊液、電極內(nèi)液，切片腦脊液。
1.4、儀器設(shè)備分析化學(xué)常用儀器(玻璃器皿、電子秤)，膜片鉗設(shè)備，玻璃微電極拉制裝置生理學(xué)常用手術(shù)器材(動物)，振動切片機，腦片孵育杯，5％CO2+95％O2混合氣體供應(yīng)裝置。
1.5方法本實驗采用全細胞膜片鉗技術(shù)，記錄大鼠腦片神經(jīng)元細胞在正常腦脊液和加入藥物時的放電情況。在高阻封接下，通過負反饋系統(tǒng)將細胞膜的靜息電位鉗制在-65mV。此時向電極內(nèi)施加脈沖試負壓，破壞電極內(nèi)細胞膜，打通細胞內(nèi)環(huán)境與電極內(nèi)液，此時形成大約100MΩ-500MΩ左右的阻抗。在電流鉗的模式下測量記錄細胞的動作電位。
2.實驗結(jié)果2.1動作電位的平均時程(HZ)和平均幅度(PA)圖，如圖4、圖5及圖6所示。
表6三七總皂苷對動作電位平均幅度的影響(n＝6)

注與正常組相比，“*”表示P＜0.05表7三七總皂苷對動作電位平均時程的影響(n＝6)

注與正常組相比，“*”表示P＜0.05當(dāng)給刺激電流300pA時，對照組和加藥15min組之間動作電位振幅的P值有顯著性差異，表明加入三七總皂苷后15min時能顯著抑制動作電位的振幅。對照組和加藥15min組之間動作電位時程的P值有顯著性差異，表明加入三七總皂苷后15min時能顯著延長動作電位的時程。
當(dāng)給刺激電流200pA時，對照組和加藥10min組，加藥15min組之間動作電位振幅的P值有顯著性差異，表明加入三七總皂苷后10min時和15min時均能顯著抑制動作電位的振幅。對照組和加藥10，15min組之間動作電位時程的P值有顯著性差異，表明加入三七總皂苷后能顯著延長動作電位的時程。
權(quán)利要求
1.一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于所述藥物以三七葉提取物為主要成分，含三七葉總皀苷，以人參皀苷Rb3(C53H90O22)計為40mg～330mg。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于人參皀苷Rb3(C53H90O22)的優(yōu)選含量為50mg或100mg。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于其單次服用劑量為40～330mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于其單次服用最優(yōu)劑量為50mg或100mg。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4之一所述的一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于其輔料為含淀粉、乳糖、甘露醇、磷酸氫鈣、羧甲基淀粉或其鹽及基團取代物、糊精、殼聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)聚維酮、纖維素類及其衍生物、聚乙二醇類，其中淀粉為淀粉、木薯淀粉、玉米淀粉、可溶性淀粉、預(yù)膠化淀粉；纖維素類可為甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、微晶纖維素；聚乙二醇類為聚乙二醇200～20000。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4之一所述的一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于將三七葉提取物采用藥劑學(xué)上的制劑技術(shù)或緩控釋技術(shù)制備成治療癲癇癥的普通制劑或緩控釋制劑。
7.權(quán)利要求1所述的一種含三七葉提取物的藥物組合物的用途是用于治療或預(yù)防癲癇癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含三七葉提取物的藥物組合物，其特征在于所述藥物以三七葉提取物為主要成分，含三七葉總皀苷，以人參皀苷Rb
文檔編號A61P25/00GK101066288SQ20071002736
公開日2007年11月7日 申請日期2007年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月2日
發(fā)明者向飛軍, 項輝, 楊斌, 徐鐵峰, 黃掌欣, 朱穎虹, 郭靜, 陸啟春, 寧瑞儀, 傅詠梅 申請人:廣東環(huán)球制藥有限公司, 中山大學(xué)