專利名稱：：膽堿酯酶活性增強劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種膽堿酯酶活性增強劑，其包括作為活性成分的阿拉伯膠(GA)。其特別涉及一種預(yù)防和域治療由于肝損傷或作為各種試劑副作用的膽堿酯酶活性抑制而導(dǎo)致的膽堿酯酶活性降低的藥物。技術(shù)背景近來，在我國農(nóng)業(yè)中已經(jīng)開始控制化學農(nóng)藥的使用，但是，在從國外進口的蔬菜中還是可以發(fā)現(xiàn)大量的農(nóng)藥，這己經(jīng)成為了一個難題。已知當含有機磷的農(nóng)藥與食物一同^A時，血液和/或腦中的膽堿酯酶活性會被長期抑制，而且，會降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中穿過毒蠅堿受體的膽堿活性[參見非專利文獻l]。膽堿酯酶是生物活體中一種普遍存在的酶，而且其常常被各種試劑抑制，特別是抗癌齊蜮有機磷化合物以及膽堿酯^W制劑如新斯的明(neostigmm)等，而膽堿酯酶活性的斷氐是導(dǎo)致各種試齊翻作用的原因之一[專利文獻l]。GA是一種從阿拉伯膠樹(AcaciaSenegal)(豆科)或更多種不確定金合歡種類(Acacmspecies)(豆科)的莖和/或枝中獲得的膠狀滲出物。阿拉伯膠樹(AcaciaSenegal)最初來自于非洲的塞內(nèi)加爾和i矣塞俄比亞之間的干旱地帶，而現(xiàn)在廣泛分布于印度。其是一種大約6m高的小樹，并且具有灰色的光滑樹皮以及鋸齒狀的樹枝。其特點是在每片樹葉上附著有三*剌，其中中間的棘刺是彎曲的，而且有米色的花。GA是一種天然采集的樹脂，是無色或淺黃色的透明球狀塊。有時其也會具有乳白色不透明的外觀。大多數(shù)在工業(yè)上應(yīng)用的商購GA是采集自該物種的球形膠狀滲出物。其他采自Acacisseyal的膠狀滲出物也是可商購的。自從公元前以來，就已經(jīng)將所述取自金合歡種類(Acacmspecies)的莖和/或枝的膠狀滲出物用作漿糊使用。因為所述的膠狀滲出物產(chǎn)自非洲并且通過阿拉伯半島出口到其他國家，所以其被叫作阿拉伯膠。GA是無色觀。在其表面上有許多裂縫，并且容易折斷，當其折斷時，新的表面是玻璃狀的并常常放出光芒。GA沒有氣味、沒有味道且是有粘性的。GA的主要成分是阿拉伯酸(79%^81%)，其以Ca、Mg和/或K的鹽存在。將GA酸7jC解會得到L-阿拉伯糖、D-半乳糖、L-鼠李糖以及D-葡糖醛酸。此外，也會有痕量的水角率酶和氧化酶與少量的r"物質(zhì)和蛋白質(zhì)一起產(chǎn)生。GA在過去已經(jīng)被用作粘合劑來固定色素，而目前仍然被用作粘合齊,于透明或不透明水性顏料。除了水f頓料之外，GA還作為乳化劑被廣泛應(yīng)用于糖食中，如糖果或軟飲料，并且在制造藥物的糖衣片^漿時作為添加劑。GA是一種常見的原料，而且包括大約35%的GA的粘合劑也被用作能給水性顏料賦予透明性和/或能給用水性顏料畫的圖畫以光澤的介質(zhì)，以及在生產(chǎn)水性顏料時被用作粘合劑。3%的GA溶液作為粘合劑對于鄉(xiāng)U后的毛筆是很有用的。自古i扱時代以來，GA已經(jīng)被用作民間藥物來治療牙周病和牙槽膿溢(治療牙齦出血、除去牙齦潰瘍、或皿牙齒生長；)，肺疾病以及肝疾病。目前，GA作為調(diào)味乳化齊M頓來保持果汁和冰^鄉(xiāng)成分的均一性，作為食品添加齊,保持糖果的形狀以及供壓片的藥物的穩(wěn)定劑或者防止液體配方中的成分發(fā)生歧化(不均勻)。盡管已有報道說阿拉伯膠具有降低人血液中膽固醇和三酸甘油酯水平的作用[非專利文獻2]、改善腸內(nèi)菌群的作用[非專利文獻3]以M醋胺酚誘導(dǎo)的肝中^W保護作用[非專利文獻4]，而對于阿拉伯膠作為腎炎中的腎上腺皮M^激素試劑效果增強劑的作用，以及阿拉伯膠作為腎上腺皮質(zhì)激素試劑副作用降低劑的作用并沒有被報道。[專利文獻l]TokkyoKokai7-228529(1995).[非專利文獻l]J.E.Gibson,R.K.D,PeteersonandB.AShurdut,Environ.HealthPerspect.106(1998),303-305;Toxiceffectofpesticides:inCD.Klaassen(Ed),CasarettandDoull，sToxicology,TheBasicScienceofPoisons,McGrawHill,NewYork1996,643~689,D.J.Ecobichon[非專禾ij文獻2]RossAH,EastwoodMA^BiydonWG,Anderson取AndersonDM.,AmJClinNutr.,37,368-75,1983.[非專利文獻3]Phillips,G.O.,FoodAddit.Contam.15,251-264,1998.[非專利文獻4]Gamalel-dinAM,MostafaAHAl-ShabanahOAAl-BekaMAHNagi畫.，PharmacologicalResearch,48,631-635,2003.發(fā)明詳述本發(fā)明的目的是為了提供一種能夠抑制由農(nóng)藥或其他試劑所導(dǎo)致的膽堿酯酶活性降低、或者能在提高膽堿酯酶的活性的同時而沒有副作用的藥物。本發(fā)明的焦點在于自古以來就在阿拉伯和/或非洲地區(qū)作為民間藥物使用的GA，而且已完成的本發(fā)明發(fā)現(xiàn)GA能抑制由毒死蜱，一種有機磷農(nóng)藥，所導(dǎo)致的膽堿酯酶活性的斷氐。在一對艮道中已經(jīng)提出了GA在預(yù)防和/或治療肝損傷中的功效，但是該功效是由抗氧化活性或?qū)φT導(dǎo)損傷肝臟的物質(zhì)吸收的抑制作用來解釋的，這對于GA來說均是已知的。如下述的實施例所述，當同時施加GA和毒^i卑時，膽堿酯酶活性的降低被抑制了，但LDH等的增加卻沒有顯著的變化。這意GA顯著抑制了由于毒死蜱所導(dǎo)致的膽堿酯酶活性的降低，而不育封胸樹毒的吸收。因此，本發(fā)明在預(yù)防和/或治療肝損傷時，育,特異性地控制膽堿酯酶的活性。作為本發(fā)明中的水溶性膠體，采自金合歡種類(Acaciaspecies)(豆科)如阿拉伯膠樹和Acacmseyal的蓬和/或枝的膠狀滲出物可以以其完整的形式4頓。從容易獲得和容易配制的角棘說，更ifc^所繊體的千燥粉斜口/^^f述膠體提取物。優(yōu)選的提取翻隄水。水性提取物可以直接使用，或在濃縮、稀釋和/或提純后艦。"B喿粉末和/或提取物也可以在用柱色譜法純化后fOT。本發(fā)明中所述的增強劑例如是口月艮的。所述增強劑的每日劑量取決于配方、病人的性別、年齡和體重，但常為1至100g，10至50g，更,10至20g，而且其以在水或熱水中的溶液的形劃艮用，或者以水性飲料的形劃艮用。當其是飲料形式時，必要時可以在飲料配方中加入一定量的甜味劑如糖、蜂蜜、甘油和阿斯巴甜，香料如蒜和姜，芳香劑如水果香精，抗氧化劑如乙二胺二鈉和硫"戈硫勝內(nèi)，氨基酸如亮氨酸、蛋氨酸、賴氨酸和?；撬?，以及維生素如維生素A、維生素B、維生素C、維生素D、維生素E以及煙翻安。天然果汁如橙汁、葡萄柚汁和蔬菜汁(甘藍，大麥新葉)，和/或天然藥材如人參和幼鹿茸的提取物也可以加入至斷述的口月艮t欠料的配方中。實施例測試GA對由有機磷農(nóng)藥導(dǎo)致的膽堿酯酶活性陶氐的效果。1.動物^il了由SHIMZULaboratorySuppliesco.JLtd.提供的體重為25-30g的雄性ddY小鼠。將它們飼養(yǎng)游鵬和濕度均能自動控制的環(huán)境中，飼料和水可自由獲取。2.試劑GA從SANKYOFoodsIndustryCoip.獲得。毒死蜱(CP)，膽堿酯酶(ChE)、乳酸脫氫酶(LDH)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)的試-^i式劑盒是從WakoPureChemicalIndustries,Ltd獲得的，所有的其他i式劑均是商購的。3.方法將小鼠分為下列4組，每組5只小鼠。1)組l(對照)口mS水和棉籽油4周。2)組2(GA):口月艮蹄GA(1200mg/kg/day)的鹽^C4周。3)組3(CP):口月艮MCP(8mg/kg/day/0.2ml)的棉籽油4周。4)組4(CP+GA):口月艮棘CP(8mg/kg/day/0.2ml)的棉籽油和蹄GA(1200mg/kg/day)的鹽水4周。4.血清酶的測定方法在最后給藥24h之后，在戊巴比妥麻醉下取每組小鼠的血液樣品。將通過心臟穿刺獲得的血液樣品在4t:下離心(2000xg)15min，以得到用于測試酶的血清樣品。每一種酶(ChE,LDH,GOT,和GPT)的活性用該酶的試驗i式劑盒測定。5.統(tǒng)計分析將結(jié)果表示為各組的平均值土標準差。不同組間的變量對比ililStudentst-檢驗來評價。當pO.01時認為結(jié)果在統(tǒng)計學上是顯著的。6.結(jié)果結(jié)果見表1。表lCP和GA對血清中酶活性的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*p<0.01每天施加GA對于血清中的酶活性沒有影響(組2)。施加CP則顯著附氐了ChE活性，但同時略微提高了血清中的LDH、GOT和GPT(組3)。CP和GA組合使用顯著抑制了ChE的降低，但對于提高血清中LDH、GOT和GPT沒有影響。工業(yè)實用性由于GA僅會特異性的抑制ChE活性的降低而對LDH等并沒有影響，所以本發(fā)明t,用作預(yù)防和/或治療僅是ChE活性的特效藥。權(quán)利要求1.膽堿酯酶活性增強劑，其包括從金合歡種類(Acaciaspecies)的莖和/或枝中獲得的天然水溶性膠體。2.根據(jù)木又利要求1中的增強劑，其用于治療特別涉及膽堿酯酶活性的肝損傷。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2中的增強劑，其中的天然7K溶性膠體愚可拉伯膠。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項中的增強劑，其中的金合歡種類(Acacmspecies)是阿拉伯|$才對。全文摘要本發(fā)明提供了一種膽堿酯酶增強劑。包括阿拉伯膠作為活性成分的增強劑能夠預(yù)防和/或治療由肝損傷或作為各種試劑副作用的膽堿酯酶抑制作用而導(dǎo)致的膽堿酯酶活性的降低。文檔編號A61P1/16GK101325962SQ20068003452公開日2008年12月17日申請日期2006年9月21日優(yōu)先權(quán)日2005年9月22日發(fā)明者三宅義雅,平田規(guī)子,松田秀秋申請人:弗里特隆有限公司