專利名稱：作為VEGF-R2抑制劑的咪唑并[1,2-a]吡啶化合物的制作方法
專利說明作為VEGF-R2抑制劑的咪唑并[1，2-a]吡啶化合物
背景技術(shù)：
不希望的血管生成是多種疾病的標志，例如視網(wǎng)膜病變、銀屑病、類風濕性關節(jié)炎、年齡相關的黃斑變性(AMD)和癌癥(實體瘤)。(Folkman，Nature Med.，1，27-31(1995))。因為腫瘤需要血液供給來保持生存，所以血管生成是關于癌癥疾病過程的重要部分(E.Ruoslahti，Nature Rev.Cancer，2，83-90(2002))。因此，開發(fā)新的用于抑制血管生成的藥物代表著有希望的癌癥治療方法(R.Kerbel和J.Folkman，Nature Rev.Cancer，2，727-739(2002))。另一種抑制腫瘤血管生成的可能益處是該方法可以減少常規(guī)化療的毒副作用或藥物誘導抗性(Judah Folkman，Endogenous Inhibitors ofAngiogenesis，The Harvey Lectures，Series 92，pages 65-82，Wiley-Liss Inc.，(1998))。
顯示出涉及血管生成過程的蛋白激酶之一是生長因子受體酪氨酸激酶家族的成員，稱為VEGF-R2(血管內(nèi)皮生長因子受體2，也稱為KDR(激酶插入域受體))。VEGF-R2主要在內(nèi)皮細胞上表達，與有效的血管生成生長因子VEGF結(jié)合并且通過活化其細胞內(nèi)激酶活性來介導隨后的信號轉(zhuǎn)導。因此，可以預期直接抑制VEGF-R2激酶活性將會引起血管生成減少，即使在外源性VEGF的存在下也可以實現(xiàn)(參見Strawn等人，CancerResearch，56，3540-3545(1996))，已經(jīng)顯示VEGF-R2突變體不能介導信號轉(zhuǎn)導(Millauer等人，Cancer Research，56，1615-1620(1996))。最近的研究進一步表明VEGF-R2作為癌癥藥物治療的靶點的重要性(S.Rafii等人，Nature Rev.Cancer，2，826-835(2002)和Y.Shaked等人，Cancer Cell，7，101-111(2004))，該研究證明了VEGF-R2在衍生自骨髓的循環(huán)內(nèi)皮前體細胞上表達，該細胞也有助于血管生成和腫瘤生長。另外，在成年人中，VEGF-R2除了介導VEGF的血管生成活性外似乎不具有其他功能。
已經(jīng)建議通過應用抑制VEGF-R2激酶活性的化合物來治療血管生成。例如，WIPO International Publication No.WO 97/34876公開的作為VEGF-R2抑制劑的某些噌啉衍生物，其被認為用于治療與異常血管生成和/或血管滲透性的增加有關的疾病狀態(tài)，包括糖尿病(高血糖癥)、銀屑病、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、粉瘤、動脈再狹窄(restinosis)、自身免疫性疾病、急性炎癥、伴有視網(wǎng)膜血管增殖的眼病以及癌癥。
另外，WO 03/092595提供了某些咪唑并[1，2-a]吡啶基化合物，該化合物抑制、調(diào)節(jié)和/或調(diào)控酪氨酸激酶信號轉(zhuǎn)導。
但是，仍然需要有效的蛋白激酶抑制劑。
本發(fā)明提供了新的抑制VEGF-R2的咪唑并[1，2-a]吡啶基化合物并且因此用于治療VEGF-R2介導的或VEGF-R2依賴性疾病，例如治療多種形式的癌癥。
發(fā)明概述 本發(fā)明提供了式I化合物或其可藥用鹽 式(I)化合物
其中 R1是(a)任選被-(CH2)1-4NR2R3取代的2-吡啶酮基；或者 (b)苯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、唑基、吡啶基、N-氧代-吡啶基或嘧啶基，以上所有基團任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺酰基、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基； R2是氫或任選被羥基取代的C1-C6烷基； R3是氫或任選被羥基、三氟甲基或吡咯烷基取代的C1-C6烷基；或者R2、R3與它們所連接的氮原子形成哌啶基，任選被C1-C6烷基取代的哌嗪基，或嗎啉基； R4是噻唑基、吡啶基或任選被1-3個選自鹵素、氨基、甲基、三氟甲基和硝基的取代基取代的苯基； R5是C(O)NHR6、OC(O)NHR6、NHC(O)CH2R6、NHC(O)NHR6或C(S)NHR6； 對于OC(O)NHR6、NHC(O)CH2R6、NHC(O)NHR6而言，n是0-4，并且對于C(O)NHR6和C(S)NHR6而言，n是1-4；并且 R6是(a)未取代的四氫苯并噻唑基；或者 (b)苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺?；?，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺?；?，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基。
本發(fā)明還提供了抑制哺乳動物的VEGF-R2的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的式I化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明還提供了阻斷血管生成的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的式I化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明還提供了治療哺乳動物的易感性瘤的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的式I化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明還提供了治療哺乳動物的許多疾病狀態(tài)的方法，所述的疾病狀態(tài)包括高血糖癥、銀屑病、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、粉瘤、動脈再狹窄、自身免疫性疾病、急性炎癥和伴有視網(wǎng)膜血管增殖的眼病，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的式I化合物或其可藥用鹽。
本發(fā)明還提供了藥物制劑，該藥物制劑包含式I化合物或其可藥用鹽，以及一種或多種可藥用賦形劑。
本發(fā)明還提供了式I化合物或其可藥用鹽在制備用于抑制VEGF-R2的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了式I化合物或其可藥用鹽在制備用于阻斷血管生成的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療易感性瘤的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了式I化合物或其可藥用鹽在制備用于治療許多選自以下的疾病狀態(tài)的藥物中的用途高血糖癥、銀屑病、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、粉瘤、動脈再狹窄、自身免疫性疾病、急性炎癥和伴有視網(wǎng)膜血管增殖的眼病。
發(fā)明詳述 上式中應用的通用化學術(shù)語具有它們的通用含義。例如，術(shù)語“C1-C6烷基”包括直鏈和支鏈烷基并且包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基和己基。術(shù)語“C2-C6鏈烯基”包括直鏈和支鏈鏈烯基并且包括乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基、異丁烯基、仲丁烯基、叔丁烯基、戊烯基、異戊烯基和己烯基。術(shù)語“C3-C6環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。術(shù)語“C1-C6烷氧基”包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、異戊氧基和己氧基。術(shù)語“鹵素”表示氯、溴、氟或碘。術(shù)語“(C1-C6烷基)磺酰基”表示被C1-C6烷基取代的磺?；?br> 術(shù)語“哺乳動物”表示任何哺乳動物綱的多種溫血脊椎動物，最優(yōu)選人，其特征在于皮膚上覆蓋毛發(fā)并且在雌性中具有哺育后代的產(chǎn)奶乳腺。
術(shù)語“易感性瘤”被定義為其生存、生長或轉(zhuǎn)移取決于VEGF-R2的瘤。
雖然所有的式I化合物都是VEGF-R2的有用抑制劑，但是某些種類的化合物是優(yōu)選的。以下段落描述了這些優(yōu)選的種類。
a)R1是吡啶基； b)R1是吡啶-2-基； c)R1是吡啶-4-基； d)R1是取代的吡啶基； e)R1是取代的吡啶-2-基； f)R1是取代的吡啶-4-基； g)R1是被2-嗎啉基丙基取代的吡啶基； h)R1是噻吩基； i)R1是噻吩-2-基； j)R1是噻吩-3-基； k)R1是苯基； l)R1是甲基磺?；交?； m)R4是苯基； n)R4是取代的苯基； o)R4是鹵苯基； p)R4是氯苯基； q)R4是2-氯苯基； r)R4是氟苯基； s)R4是2-氟苯基； t)n是0； u)n是1； v)R5是NHC(O)NHR6； w)R5是C(O)NHR6； x)R6是取代的吡唑基； y)R6是被C1-C6烷基取代的吡唑基； z)R6是5-叔丁基-吡唑-3-基； aa)R6是取代的苯基； bb)R6是三氟甲基苯基； cc)R6是間三氟甲基苯基； dd)R6是取代的噻二唑基； ee)R6是被C1-C6烷基取代的噻二唑基； ff)R6是5-叔丁基-噻二唑-2-基； gg)R6是取代的異唑基； hh)R6是被C1-C6烷基取代的異唑基； ii)R6是5-叔丁基-異唑-3-基； jj)R6是3-叔丁基-異唑-5-基； kk)R6是取代的噻唑基； ll)R6是被C1-C6烷基取代1-2次的噻唑基； mm)R6是5-叔丁基-噻唑-2-基； nn)R6是5-叔丁基-4-嗎啉-4-基甲基-噻唑-2-基； oo)R6是4-甲基-5-異丙基噻唑-2-基； pp)R6是4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基環(huán)丙基)噻唑-2-基； qq)R6是取代的吡啶基； rr)R6是4-叔丁基-6-嗎啉基甲基吡啶-2-基； ss)R6是4-三氟甲基吡啶-2-基； tt)R1是吡啶基，R4是苯基，n是1，R5是CONHR6并且R6是3-三氟甲基苯基； uu)R1是吡啶基，R4是氟苯基，n是1，R5是CONHR6并且R6是5-叔丁基-噻二唑-2-基； vv)R1是吡啶基，R4是氟苯基，n是1，R5是CONHR6并且R6是4-甲基-5-異丙基-噻唑-2-基； ww)R1是吡啶基，R4是氟苯基，n是1，R5是CONHR6并且R6是4-叔丁基-6-嗎啉基甲基吡啶-2-基； xx)R1是2-(2-嗎啉基丙基)吡啶-4-基，R4是氟苯基，n是1，R5是CONHR6并且R6是4-三氟甲基吡啶基；對映異構(gòu)體和外消旋體； yy)R1是吡啶基，R4是氟苯基，n是1、R5是CONHR6并且R6是4-二甲基氨基-5-甲基環(huán)丙基噻唑-2-基； zz)R1是吡啶基，R4是氟苯基，n是1，R5是CONHR6并且R6是4-嗎啉基甲基-5-叔丁基-噻唑-2-基； aaa)式I化合物是2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺； bbb)式I化合物是N-(5-叔丁基-[1，3，4]噻二唑-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺； ccc)式I化合物是2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(5-異丙基-4-甲基-噻唑-2-基)-乙酰胺； ddd)式I化合物是N-(4-叔丁基-6-嗎啉-4-基甲基-吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺； eee)式I化合物是2-(2-氟-4-{7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺； fff)式I化合物是N-[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺； ggg)式I化合物是2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(5-叔丁基-4-嗎啉-4-基甲基-噻唑-2-基)-乙酰胺； hhh)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是苯基、噻吩基、噻唑基或吡啶基，以上所有基團任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；⑾趸?、-磺酰基(CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基； iii)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是任選被以下基團取代的4-吡啶基-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基；并且R6是苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺酰基，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺?；臍溥拎?，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基； jjj)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是任選被以下基團取代的2-吡啶基-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基；并且R6是苯基、吡啶基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基或異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺酰基，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺?；?，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基； kkk)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是任選被以下基團取代的苯基-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基；并且R6是苯基、吡啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基或異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺酰基，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺?；?，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基； lll)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是任選被以下基團取代的噻吩基或噻唑基-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺酰基、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基；并且R6是苯基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基或異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺酰基，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺?；?，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基； mmm)權(quán)利要求1的化合物，其中R1是任選被以下基團取代的3-吡啶基-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基；并且R6是苯基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基或異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺?；?，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺酰基，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基； nnn)式I化合物，其選自HCl鹽、二HCl鹽、琥珀酸鹽、L-酒石酸鹽和HBr鹽； ooo)式I化合物，其選自HCl鹽和HBr鹽；以及 ppp)式I化合物，其是琥珀酸鹽。
可以理解的是，以上種類可以組合以形成另外優(yōu)選的種類。
本發(fā)明另外優(yōu)選的種類是式II化合物或其可藥用鹽
其中 R1是(a)任選被-(CH2)1-4NR2R3取代的2-吡啶酮基；或者 (b)苯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、唑基、吡啶基、N-氧代-吡啶基或嘧啶基，以上所有基團任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基； R2是氫或任選被羥基取代的C1-C6烷基； R3是氫或任選被羥基、三氟甲基或吡咯烷基取代的C1-C6烷基；或者R2、R3與它們所連接的氮原子形成哌啶基，任選被C1-C6烷基取代的哌嗪基，或嗎啉基； R4是噻唑基、吡啶基或任選被1-3個選自鹵素、氨基、甲基、三氟甲基和硝基的取代基取代的苯基；并且 R6是(a)未取代的四氫苯并噻唑基；或者 (b)苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺?；?，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺酰基，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基。
本發(fā)明另外優(yōu)選的種類是式III化合物或其可藥用鹽
其中 R1是(a)任選被-(CH2)1-4NR2R3取代的2-吡啶酮基；或者 (b)苯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、唑基、吡啶基、N-氧代-吡啶基或嘧啶基，以上所有基團任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基； R2是氫或任選被羥基取代的C1-C6烷基； R3是氫或任選被羥基、三氟甲基或吡咯烷基取代的C1-C6烷基；或者R2、R3與它們所連接的氮原子形成哌啶基，任選被C1-C6烷基取代的哌嗪基，或嗎啉基； R4是噻唑基、吡啶基或任選被1-3個選自鹵素、氨基、甲基、三氟甲基和硝基的取代基取代的苯基；并且 R6是(a)未取代的四氫苯并噻唑基；或者 (b)苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺?；?，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺?；?，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基。
本發(fā)明另外的實施方案是式(IV)化合物或其可藥用鹽
其中 R1是(a)任選被C1-C6烷基或-(CH2)1-4NR2R3取代的2-吡啶酮基；或者 (b)苯基、噻吩基、噻唑基、噻二唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、唑基、異唑基、吡啶基或嘧啶基，以上所有基團可以任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，或1-2個獨立地選自C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、鹵素和(C1-C6烷基)磺?；?、-磺?；?CH2)0-4NR2R3或-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基； R2是氫或C1-C6烷基； R3是氫，任選被以下基團取代的C1-C6烷基吡咯烷基、哌啶基、任選被C1-C4烷基取代的哌嗪基、或嗎啉基；或者R2、R3與它們所連接的氮原子形成吡咯烷基、哌啶基，任選被C1-C4烷基取代的哌嗪基，或嗎啉基； R4是噻唑基、噻吩基、吡啶基或任選被鹵素取代1-2次的苯基； n是0-4； R5是C(O)NHR6、OC(O)NHR6、NHC(O)CH2R6或NHC(O)NHR6； R6是任選被1-3個獨立地選自鹵素、C1-C6烷基、C1-C4烷氧基、氰基、二甲基氨基、二氟甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、甲基磺酰基、二甲基異唑基氨磺?；?O-苯基的取代基取代的苯基，任選被三氟甲基取代的吡啶基，任選被1-2個獨立地選自甲苯基和任選被羥基、哌啶基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基的取代基取代的吡唑基，(C1-C6烷基)異唑基，(C1-C6烷基)噻唑基，(C1-C6烷基)異噻唑基，(C1-C6烷基)噻二唑基； R7是氫或C1-C6烷基。
本發(fā)明化合物是VEGF-R2(已經(jīng)顯示出涉及血管生成過程的蛋白激酶)抑制劑。VEGF-R2主要在內(nèi)皮細胞上表達，與有效的血管生成生長因子VEGF結(jié)合，隨后通過活化其細胞內(nèi)激酶活性來介導信號轉(zhuǎn)導。因此，本領域技術(shù)人員將意識到直接抑制VEGF-R2的激酶活性會導致血管生成降低，因此影響治療其中異常血管生成和/或血管滲透性增加為標志的病癥，例如糖尿病(高血糖癥)、銀屑病、類風濕性關節(jié)炎、卡波西肉瘤、血管瘤、急性和慢性腎病、粉瘤、動脈再狹窄、自身免疫性疾病、急性炎癥、伴有視網(wǎng)膜血管增殖的眼病以及癌癥。血管生成抑制劑在治療癌癥中的用途是文獻中已知的，例如參見J.Rak等人，Cancer Research，554575-4580，1995。血管生成在癌癥中的作用已經(jīng)在很多類型的癌癥和組織中得到體現(xiàn)乳腺癌(G.Gasparinin和A.L.Harris，J.Clin.Oncol.，1995，13765-782；M.Toi等人，Japan.J.Cancer Res.，1994，851045-1049)、膀胱癌(A.J.Dickinson等人，Br.J.Urol.，1994，74762-766)、結(jié)腸癌(L.M.Ellis等人，Surgery，1996，120(5)871-878)和口腔腫瘤(J.K.Williams等人，Am J.Surg.，1994，168373-380)。相信用本發(fā)明化合物治療敏感的優(yōu)選瘤包括以下癌癥腦癌、泌尿生殖道癌、淋巴系統(tǒng)癌、胃癌、喉癌、肺癌(包括小細胞肺癌和非小細胞肺癌)、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、組織細胞癌、淋巴瘤、肝細胞癌、婦科癌癥(例如卵巢癌)、卡波西肉瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤(包括星細胞瘤、成神經(jīng)管細胞瘤和腦膜瘤)、結(jié)腸直腸癌、頭和頸癌、黑素瘤、慢性淋巴細胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤、急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、惡性間皮瘤、脊髓發(fā)育不良綜合征(例如真性紅細胞增多癥、血小板增多)、胃癌和腎細胞癌。
本領域技術(shù)人員將意識到在式I化合物中引入某些取代基將產(chǎn)生不對稱現(xiàn)象。本發(fā)明預期所有的對映異構(gòu)體和對映異構(gòu)體和立體異構(gòu)體的混合物，即立體異構(gòu)純形式(例如幾何異構(gòu)純、對映異構(gòu)純或非對映異構(gòu)純)和對映異構(gòu)體和立體異構(gòu)體的混合物。通過已知方法可以將對映異構(gòu)體和立體異構(gòu)體混合物拆分為它們的組分對映異構(gòu)體或立體異構(gòu)體，所述的方法例如手性相高效液相色譜法或?qū)⒒衔锝Y(jié)晶為手性鹽絡合物。也可通過已知的不對稱合成方法，從立體異構(gòu)純或?qū)τ钞悩?gòu)純的中間體、試劑和催化劑獲得對映異構(gòu)體和立體異構(gòu)體。
可藥用鹽預期在本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明化合物是堿并且這些化合物的鹽可以與無機或有機酸形成，所述的酸例如HCl、二HCl、琥珀酸、L-酒石酸和HBr，優(yōu)選HCl、二HCl和琥珀酸。
本發(fā)明化合物可以通過應用以下流程圖中所示的反應以及文獻中已知的或?qū)嶒灧椒ㄖ辛信e的其它標準操作來制備。因此，這些流程圖不受用于說明目的的所列化合物或任何特別取代基限制。
以下流程圖用于制備式I化合物，其中R5是NHC(O)CH2R6或NHC(O)NHR6。除非另有說明，所有其它變量如上定義。
流程圖I
式I化合物的脲(AE)通常可以通過胺(AA)與氨基甲酸酯(AB)、氨基甲酰氯(AC)或芳基異氰酸酯(AD)反應制備，以上所有試劑是可商購的或直接通過那些本領域已知的方法制備。式I化合物的酰胺(AG)通?？梢酝ㄟ^胺(AA)與酰氯(AF)反應制備。
必不可少的胺(AA)中間體可以如流程圖II中所示用已知的7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(AH)制備。X是Cl、Br或I，Y是硼酸、硼酸酯或三烴基錫烷。除非另有說明，所有其它變量如上定義。
流程圖II
或者
通過Pd催化的交叉偶聯(lián)或通過硼酸酯的中間體在咪唑并[1，2-a]吡啶基團的7位引入芳基得到二芳基化合物(AI)。用NIS或NBS將中間體(AI)的3位進行選擇性鹵化，隨后在該位置進行第二次交叉偶聯(lián)。氨基或氨基烷基或者潛在的氨基或氨基烷基是芳基硼酸鹽偶聯(lián)對的取代基?；蛘?，如流程圖II所示，通過(AK)和(AL)中間體首先在3位進行偶聯(lián)，然后再在7位進行。需要指出的是在咪唑并[1，2-a]吡啶的7位引入芳基的交叉偶聯(lián)反應可以在形成脲之后，在反應順序的最后進行(未列出)。
式I的酰胺可以如流程圖III所示制備。除非另有說明，所有變量如上所述。
流程圖III
或者
由Pd(0)催化的(AJ)或(AK)和與連有羧酸(或保護酸)的烷基連接的苯基硼酸的交叉偶聯(lián)得到(AM)。應用本領域眾所周知的標準方法將羧酸基團偶聯(lián)到胺上得到(AN)?；蛘?，在芳基偶聯(lián)到咪唑并[1，2-a]吡啶環(huán)之前，可以應用標準方法從鹵苯基酸(AO)制備酰胺(AP)。如流程圖III所示，在這種情況下，芳基(AP)上的鹵化物取代基轉(zhuǎn)化為硼酸酯(AQ)用于偶聯(lián)到(AJ)或(AK)上。在這種情況下，鹵素占據(jù)了(AN)中咪唑并[1，2-a]吡啶環(huán)的7位，進行第二次Pd(0)催化的偶聯(lián)得到以上流程圖I中描述的要求的化合物。
式I的氨基甲酸酯可以如流程圖IV所示制備。除非另有說明，所有變量如上定義。
流程圖IV
通過醇(AM’)與異氰酸酯結(jié)合形成氨基甲酸酯(AR)。用醇(例如羥基甲基苯基硼酸)在咪唑并[1，2-a]吡啶(AK或AJ)的3位通過Pd(0)催化的交叉偶聯(lián)合成該原料(AM’)。如制備脲所示，在任何時刻通過第二次Pd(0)偶聯(lián)在咪唑并[1，2-a]吡啶的7位引入芳基。
式I化合物(其中R1是吡啶酮基、甲氧基取代的吡啶基或二(取代的)氨基吡啶基)可以如流程圖V所示制備。除非另有說明，所有其它變量如上定義。
流程圖V
在合成的最后，通過2-氟吡啶基(AS)的親核芳香取代引入二烷基氨基得到(AT)。類似的策略，應用酸性甲醇解得到(AU)并且用HBr裂解甲醚得到吡啶酮基(AV)。
流程圖II的芳基溴化物R1X可以如流程圖VI所示制備。R7如上所述。
流程圖VI
如流程圖VI所示，通過5-溴-2-溴甲基-吡啶(AW)與仲胺的烷基化反應，在咪唑并[1，2-a]吡啶的7位的芳基上引入作為取代基的烷基-或二烷基氨基甲基吡啶基。然后芳基溴化物能直接參與上述的反應。
流程圖VII
如流程圖VII所示，也可以制備來自酰胺類的化合物，該反應通過Pd(0)催化的3-H咪唑并[1，2-a]吡啶中間體(AH)或(AI)與被保護的(PG)溴苯基乙酸酯的芳基化反應形成偶聯(lián)的酸(AY)。叔丁基是作為PG指定的適合的酯保護基，其隨后在酸性條件下裂解。然后，可以應用草酰氯/DMF原位形成酰氯或應用偶聯(lián)劑DMTMM/NMM或HATU/二異丙基乙基胺來形成酰胺(AN)。

或者，應用以上酰胺形成的方法由溴芳基酸(AZ)來制備酰胺(BA)，并且BA通過與(AH)或(AI)進行Pd(0)催化的芳基化反應而偶聯(lián)。在這種情況下與(AH)進行Pd(0)催化的芳基化反應，隨后如上所述在氯取代的位點進行加工。
本領域技術(shù)人員將意識到不是所有的式I化合物中的取代基都將耐受用于合成化合物的某些反應條件。這些基團可以在合成中的方便時刻引入或者當必需或需要時被保護，然后脫保護。本領域技術(shù)人員將意識到保護基可以在合成本發(fā)明化合物的任何方便時刻除去。引入和除去氮和氧保護基的方法在本領域中是眾所周知的，參見例如Greene和Wuts，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，第三版，John Wiley and Sons，New York，第7章(1999)。另外，本領域技術(shù)人員將意識到在很多情況中，基團引入的順序并不重要。產(chǎn)生式I化合物需要的步驟的特別順序可以取決于合成的特別化合物、起始化合物和被取代的基團的相對不穩(wěn)定性。
縮略語 AIBN2，2’-偶氮二(2-甲基丙腈)；BINAP外消旋-2，2’-二(二苯膦)-1，1’-聯(lián)萘；9-BBN9-硼二環(huán)[3，3，1]壬烷；Boc2O二碳酸二-叔丁基酯；TBDMSCl或TBDMSiCl叔丁基-二甲基甲硅烷基氯；TBAF叔丁胺-氫氟化物；MS(ES)電噴霧質(zhì)譜；THF四氫呋喃；DMEA二甲基乙基胺；DMSO二甲亞砜；DMF二甲基甲酰胺；DME二甲基乙二醇；DCM二氯甲烷；Dioxane1，4-二烷；DMAP4-二甲基氨基吡啶；h小時；LDA-Lawesson試劑2，4-二-(4-甲氧基苯基)-1，3-二硫雜-2，4-二phosphetone-2，4-二硫化物；二異丙基氨基鋰；NISN-碘琥珀酰亞胺；min分鐘；NBSN-溴琥珀酰亞胺；MeOH甲醇；EtOH95％乙醇；RBF、RB圓底燒瓶；RBSN圓底單頸燒瓶；SiO2硅膠；EtOAc、AcOEt乙酸乙酯；ESIMS電噴霧離子化質(zhì)譜；HPLC高壓液相色譜；ISCOISCO牌高壓液相色譜；S-Phos2-二環(huán)己基-膦基-2’，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯；Pd(TPP)4四(三苯膦)-鈀(0)；DMTMM4-(4，6-二甲氧基-[1，3，5]三嗪-2-基)-4-甲基-嗎啉-4-；氯化物；NMMN-甲基嗎啉；HATUO-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲-六氟磷酸酯；NMP1-甲基-2-吡咯烷酮；PdCl2(dppf)CH2Cl21，1’-二-(二苯膦基)二茂鐵-鈀(II)二氯化物二氯甲烷絡合物；X-Phos2-二環(huán)己基膦基-2’，4’，6’-三-異丙基-1，1’-聯(lián)苯；NMP1-甲基-2-吡咯烷酮；Pearlman’s催化劑氫氧化鈀，20重量％鈀炭。
制備1 5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2H-吡唑-3-基胺 A.2-(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-基)-乙醇 將2-肼基-乙醇(3mL，1.1當量)和濃鹽酸(0.5mL)加入至4，4-二甲基-3-氧代-戊腈(5.0g，0.04mol)的無水乙醇(50mL)溶液中。將反應物回流4小時，然后冷卻至室溫并且用水和乙酸乙酯稀釋。將有機物用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后用硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。用己烷和二氯甲烷研磨，得到白色固體(4.8g，66％)，MS(ES)，m/z 184(M+1)。
B.5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2H-吡唑-3-基胺 將在DMF(7mL)中的TBDMSCl(3.38g，1.2當量)和咪唑(3.18g，2.5當量)加入至2-(5-氨基-3-叔丁基-吡唑-1-基)-乙醇(3.42g，0.019mol)中并且在室溫和氮氣下攪拌過夜。反應物用乙酸乙酯和水稀釋。將有機層用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮，得到固體(5.5g，99％)，無需進一步純化即可應用，MS(ES)，m/z298(M+1)。
按照1999年10月27日提交的，2000年5月11日的PCT申請WO200026202(第52頁)中描述的通用方法，制備以下中間體 制備6 2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-(5-叔丁基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯 在氮氣下，將5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2H-吡唑-3-基胺(5.5g，0.018mol)溶于THF(100mL)中并且冷卻至0℃。通過注射器加入吡啶(1.6mL，1.1當量)，然后滴加2，2，2-三氯乙基氯甲酸酯(2.7mL，1.1當量)。在0℃下將反應物攪拌1小時，然后移去冷卻浴并且將反應物攪拌總計5小時。反應物用乙酸乙酯和水稀釋。將有機層用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。得到殘留物(8.7g，產(chǎn)率100％)，無需進一步純化即可應用。MS(ES)，m/z474(M+1)。
應用類似于制備6的方法，從商購的原料或在制備1-5中描述的那些原料制備以下中間體 制備22 3-碘-7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶 將N-碘琥珀酰胺加入至7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(6.10g，40mmol)(Yamanaka，Motosuke等人，Chemical & Pharmaceutical Bulletin(1991)，39(6)，1556-67)的干燥乙腈(100mL)溶液中。攪拌30分鐘。將沉淀過濾，然后用乙腈洗滌。將沉淀從乙腈中重結(jié)晶得到白色固體。濃縮濾液，用乙酸乙酯稀釋，用10％亞硫酸氫鈉(NaHSO3)、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且蒸發(fā)。無需進一步純化而應用合并的固體(8.0g，73％)。1H NMR(DMSO)δ8.33(d，1H，J＝7.3Hz)，7.79(d，1H，J＝2.0Hz)，7.72(s，1H)，7.07(dd，1H，J＝7.3和2.0Hz)。
制備23 4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷(dioxaborolan)-2-基)-吡唑-1-磺酸二甲酰胺 A.吡唑-1-磺酸二甲酰胺 將4-碘吡唑(9.24g，48.0mmol)溶于THF(100mL)中并且分批加入NaH(2.26g，63.6mmol，60％在油中)并且在0℃下攪拌30分鐘。滴加二甲基氨磺酰氯(6.18mL，57.6mmol)并且在0℃下攪拌1小時以及在室溫下攪拌1小時。用飽和NaHCO3將反應猝滅并且用CH2Cl2萃取，經(jīng)無水MgSO4干燥，過濾并且濃縮。將殘留物進行色譜(己烷/乙酸乙酯1∶0至2∶1)得到澄清油狀物(11.8g，82％產(chǎn)率)，MS(ES)，m/z 176(M+1)。
B.4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-吡唑-1-磺酸-二甲酰胺 將吡唑-1-磺酸-二甲酰胺(7.0g，23.2mmol)、乙酸鉀(6.3g，69.8mmol)、二(頻哪醇)二硼(6.5g，25.5mmol)和DMSO(140mL)混合并且在氮氣流下脫氣。加入PdCl2(dppf)·CH2Cl2(0.51g，0.70mmol)并且將反應物加熱至80℃過夜。將反應物用水稀釋并且用乙酸乙酯萃取。將合并的有機物用水洗滌并且經(jīng)無水MgSO4干燥，過濾并且濃縮。應用作為混合物的含33％二吡唑雜質(zhì)的標題化合物。
制備24 4-溴-2-乙基-吡啶 按照Journal Organic Chemistry，Vol.50，No.22，1985，page 4410-4411描述的通用方法制備標題化合物。在THF(100mL)中將4-溴吡啶鹽酸鹽(4.17g，0.021mol)制成漿液(slurry)并且在氮中冷卻至-78℃。通過注射器滴加乙基溴化鎂(15.7mL，3.0M乙醚溶液，2.2當量)。在-78℃下將反應物攪拌10分鐘，然后移去冰浴并且使反應溫至室溫。用20％氯化銨(水溶液)將反應猝滅，然后用乙醚稀釋。將有機物用水、1N鹽酸(水溶液)洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。將殘留物重新溶于甲苯(100mL)中并且在氮氣下放置。將四氯-1，2-苯醌(5.8g，1.1當量)溶于乙酸(50mL)中并且滴加至反應物中。將反應物在室溫下攪拌過夜。通過加入1N NaOH(水溶液)使混合物呈堿性，然后用乙酸乙酯萃取。有機層用1N鹽酸(水溶液)酸化并且用乙酸乙酯萃取。將有機物留出。水層用1N NaOH(水溶液)堿化并且用DCM萃取。有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾并且真空濃縮，得到棕色殘留物(2.64g，66％)。LCMS(ES)，m/z 188(M+1，溴化物模式)。
按照與制備24相同的方法制備以下物質(zhì) 制備26 1-(4-氯-比啶-2-基)-丙-2-酮 用類似于以下制備162 A的方法，應用4-氯-2-甲基吡啶制備標題化合物。MS(ES)，m/z 170(M+1)。
制備27 3-碘-7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶 A.7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶 向圓底燒瓶中加入7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.25g，1.6mmol)、三環(huán)己基膦(55mg，0.12當量)、乙酸鉀(0.24g，1.5當量)、二(頻哪醇)二硼(0.46g，1.1當量)和二烷(10mL)?；旌衔镉玫獨鈴氐酌撗酰缓蠹尤肴?二亞芐基丙酮)二鈀(0)(75mg，0.05當量)并且將反應物在氮氣下加熱至80℃過夜。將反應物用硅藻土過濾并且用DCM洗滌，然后濃縮至干燥。將2-溴吡啶(0.14mL，1.5mmol)、S-Phos(75mg，0.125當量)、磷酸鉀(0.62g，2當量)、二烷(10mL)和水(5mL)加入至殘留物中?；旌衔镉玫獨鈴氐酌撗酰尤胍宜徕Z(II)(16mg，0.05當量)，將反應物回流過夜。濃縮反應物至干燥并且在DCM中制成漿液。通過硅藻土過濾該漿液并且用DCM洗滌。濃縮濾液，然后通過硅膠柱純化(EtOAc至5％MeOH∶DCM)，得到殘留物(0.325g，＞100％)。MS(ES)，m/z 196(M+1)。
B.3-碘-7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶 將7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.3g，1.5mmol)溶于無水乙醇(10mL)中并且加入NIS(0.35g，1當量)。在氮氣下，將反應物加熱至50℃達30分鐘，然后用乙酸乙酯稀釋。有機層用1N NaOH洗滌，然后用飽和氯化鈉洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到淡棕黃色固體(0.4g，82％)。MS(ES)，m/z 322(M+1)。
按照類似于制備27的方法制備以下物質(zhì) 制備38 4-(3-溴-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-1-(3-哌啶-1-基-丙基)-1H-吡啶-2-酮 A.4-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-1H-吡啶-2-酮 按照類似于制備27的方法制備該中間體，除了應用4-溴-2-氟-吡啶作為偶聯(lián)對。MS(ES)，m/z 214(M+1)。在N2氣氛下，將圓底燒瓶中的中間體2-氟吡啶和5N鹽酸加熱至80℃達2小時。冷卻，將50mL 2M NH3加入至MeOH和DCM中，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并且用DCM(10×)萃取。過濾水層并且與DCM萃取液合并，在減壓下除去DCM得到1.26g(26％總的)。MS(ES)，m/z 212(M+1)。
B.4-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-1-(3-哌啶-1-基-丙基)-1H-吡啶-2-酮 在氮氣下，在RBF中裝入(850mg，4.0mmol)、1-(3-氯丙基)胡椒堿HCl(1.18g，6mmol)、DMF(40mL)和Cs2CO3(2.8g，8.8mmol)、NaI(450mg，3mmol)并且加熱至78℃達24小時。過濾反應物并且用DCM沖洗固體。合并DCM和濾液并且在減壓下除去，然后通過Varian SCX(10g)柱(該柱用水和甲醇預洗滌)純化，產(chǎn)物用(20％)2 N在甲醇中的NH3/(80％)DCM洗脫。在減壓下，從包含級分的產(chǎn)物中蒸發(fā)溶劑。應用(40g ISCO)SiO2進行色譜，用梯度為0％至10％2 M在MeOH中的NH3(用DCM平衡)洗脫。蒸發(fā)溶劑，得到象牙色固體410mg(30％)。MS(ES)，m/z 337(M+1)。
C.4-(3-溴-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-1-(3-哌啶-1-基-丙基)-1H-吡啶-2-酮 按照類似于制備78 B的方法制備標題化合物，除了應用EtOH和乙腈作為溶劑。MS(ES)，m/z 415，417溴同位素(M+1)。
制備39 7-[2-(3，3-二乙氧基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶 在氮氣下，在圓底燒瓶中加入9-BBN(0.5 M在THF中，42.2mL，2當量)。通過注射器加入丙烯醛二乙基縮醛(3.4mL，2.1當量)并且在室溫下攪拌過夜。第二天，在另外的燒瓶中將7-(2-氯-吡啶-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(2.42g，11mmol)、磷酸鉀(4.47g，2當量)、S-Phos(0.54g，12.5mol％)、二烷(90mL)和水(45mL)混合。用氮氣脫氣，然后在氮氣下加入乙酸鈀(II)(0.118g，5mol％)。通過套管向該溶液中加入第一個燒瓶中的物質(zhì)。將反應物在80℃下加熱5.5小時。濃縮至干燥。在DCM中制成漿液，然后過濾除去不溶物質(zhì)。用DCM洗滌。濃縮濾液并且通過二氧化硅填料純化(1∶1己烷∶乙酸乙酯→乙酸乙酯→5％甲醇DCM→10％甲醇DCM)得到殘留物(4.15g，＞100％)，可以用于下一步。MS(ES)，m/z 326(M+1)。
制備40 7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶 在氮氣下，將1-(4-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-吡啶-2-基)-丙-2-酮(3.9g，15.5mmol)溶于甲醇(400mL)中。加入嗎啉鹽酸鹽(38.4g，20當量)，隨后加入3分子篩(7.8g，制成粉末并且在100℃下真空箱內(nèi)干燥過夜)。攪拌5分鐘，然后通過注射器加入氰基硼氫化鈉(1.0M在THF中，28mL，1.8當量)并且在室溫下攪拌5天。過濾除去不溶物質(zhì)，用甲醇洗滌。濃縮至干燥，然后用20％NaOH(水溶液)堿化并且用乙酸乙酯萃取。有機物用飽和氯化鈉水溶液洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥。過濾并且濃縮，然后通過硅膠純化(乙酸乙酯→5％甲醇DCM→10％甲醇DCM→5％2M在甲醇中的NH3∶DCM→10％2M在甲醇中的NH3∶DCM)，得到棕黃色固體產(chǎn)物(3.7g，74％)。MS(ES)，m/z 323(M+1)。
應用類似于制備40的方法制備以下物質(zhì) 制備42 [2-(4-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-吡啶-2-基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯 在氮氣下，將2-(4-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-吡啶-2-基)-1-甲基-乙基胺(0.1g，0.4mmol)溶于THF(10mL)和DCM(10mL)的混合物中。加入二碳酸二-叔丁基酯(0.095g，1.1當量)。在室溫下攪拌45分鐘，然后用乙酸乙酯稀釋。將有機物用水、1N NaOH(水溶液)萃取，然后用氯化鈉水溶液萃取。有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，然后過濾并且濃縮。通過硅膠純化(10％甲醇∶DCM)得到產(chǎn)物(0.125g，89％)。MS(ES)，m/z 353.2(M+1)。
制備42A 3-碘-7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 A.7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 在80℃和氮氣下，將7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(100g，152.5mmol，1當量)、4-甲基磺?；交鹚?157.3g，786.8mmol，1.2當量)、Pd(PPh3)4(19g，16.3mmol，0.025當量)和碳酸銫(472.4g，1.44mol，2.2當量)在無水DME(2000mL)和EtOH(1000mL)的混合物中混合物加熱24小時。將混合物冷卻至室溫并且通過硅藻土過濾以除去Pd催化劑。加入水(5000mL)并且用CH2Cl2(3×2000mL)萃取該溶液。將有機相經(jīng)MgSO4干燥并且蒸發(fā)。向粗品中加入2000mL CH2Cl2并且加熱至回流。通過過濾除去不溶物質(zhì)并且蒸發(fā)溶劑得到黃色固體。用乙醚洗滌固體得到150g預期的化合物，為淡黃色固體(產(chǎn)率85％)。MS(ES)，m/z 273(M+1)。
B.3-碘-7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 在0℃下，用NIS(83.5g，371.3mmol，1當量)處理7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(101g，371.3mmol，1當量)的2000mL CH3CN溶液。將混合物在室溫下攪拌1小時。除去溶劑并且將殘留物溶于5000mLCH2Cl2中，用10％NaOH溶液、飽和NaHSO3、水和飽和氯化鈉溶液洗滌。經(jīng)MgSO4干燥并且蒸發(fā)。用己烷研磨得到的固體，過濾并且真空干燥，得到110g標題化合物，為黃色固體(產(chǎn)率75％)。MS(ES)，m/z 399(M+1)。
制備43 4-(3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-苯甲酸甲基 應用類似于制備3-碘-7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶的方法制備標題化合物。MS(ES)，m/z 379(M+1)。
制備44 4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]- 將3-碘-7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(2.50g，6.28mmol)、(4-氨基甲基苯基)硼酸、HCl(1.29g，6.91mmol)和K2CO3(3.47g，25.11mmol)在1，4-二烷(30mL)和水(15mL)中混合。向混合物鼓入氮氣5分鐘。加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.132g，0.188mmol)。連接回流冷凝器并且將混合物加熱至110℃。攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將混合物在真空下濃縮至干燥。將產(chǎn)生的固體在二氯甲烷/甲醇中制成漿液并且通過硅藻土521過濾。真空濃縮溶液得到黃色固體。通過柱色譜純化(乙酸乙酯→5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的2M在甲醇中的NH3)，得到產(chǎn)物(1.57g，66％)。MS(ES)，m/z 378(M+1)。
按照制備44制備以下物質(zhì) 制備55 4-(7-吡啶-3-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 A.4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 向圓底燒瓶中加入7-氯-3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶(3.0g，0.011mol)，加入4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯胺(2.6g，1.1當量)、碳酸鉀(4.5g，3當量)、二烷(40mL)和水(20mL)。用N2將混合物徹底脫氧，然后加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.23g，0.03當量)并且在氮氣下將反應物回流過夜。濃縮反應物至干燥并且在DCM中制成漿液。通過硅藻土過濾該漿液并且用DCM洗滌。濃縮濾液，然后通過硅膠填料純化(EtOAc至5％MeOH∶DCM至10％MeOH∶DCM)得到淡灰色固體(2.6g，100％)。MS(ES)，m/z 244(M+1)。
B.4-(7-吡啶-3-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 向圓底燒瓶中加入4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺(0.5g，2.1mmol)、吡啶-3-硼酸(0.38g，1.5當量)、磷酸鉀(0.87g，2當量)、2-二環(huán)己基膦基-2’，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯(即S-Phos，0.105g，0.125當量)、1，4-二烷(10mL)和水(5mL)?；旌衔镉肗2徹底脫氧，然后加入乙酸鈀(II)(23mg，0.05當量)并且將反應物回流過夜。濃縮反應物至干燥并且在DCM中制成漿液。通過硅藻土過濾該漿液并且用DCM洗滌。濃縮濾液，然后經(jīng)二氧化硅填料純化(EtOAc至5％MeOH∶DCM至10％MeOH∶DCM)，得到黃色固體(0.39g，66％)。MS(ES)，m/z 287(M+1)。
按照類似于制備55的方法制備以下物質(zhì) 制備62 4-(7-噻吩-3-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基胺 將4-(7-噻吩-3-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐腈(0.087g，0.29mmol)溶于THF(8mL)中。在室溫下，將BH3·Me2S溶液(2M，1.0mL，2.0mmol)加入至上述溶液中。將溶液攪拌15分鐘，然后在50℃下加熱3.5小時。將混合物在0℃下冷卻并且緩慢酸化至pH＝1并且攪拌30分鐘。反應混合物用固體NaOH堿化至pH＝12-14，然后用乙酸乙酯萃取。萃取物用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且蒸發(fā)，得到0.07g。MS(ES)，m/z 306(M+1)。
按照類似于制備62的方法制備以下物質(zhì) 制備64 4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 A.7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶方法A 向裝有磁力攪拌器、溫控加熱套、在氮氣氣氛下和冷凝器的250mL圓底燒瓶中加入7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(4.0g，26.2mmol)、4-吡啶硼酸(3.54g，28.8mmol，1.1當量)、2-二環(huán)己基膦基-2’，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯(600mg)[在該反應中X-Phos可以用作替代配基]、Pd(OAc)2(145mg)、K3PO4(11.1g，52.6mmol)和二烷∶水2∶1(170mL)。當用氮氣針通氣時將反應物溫熱，然后加熱至65℃達18小時。將反應物冷卻至室溫并且轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并且吸去底層(25mL)。加入EtOAc并且在減壓下蒸發(fā)溶劑。將固體再次溶于EtOAc中并且在減壓下蒸發(fā)以共沸除去痕量水。將棕色固體溶于CH2Cl2和5％MeOH中，然后應用SiO2進行色譜，用緩慢梯度0％至10％2M在甲醇中的NH3(用CH2Cl2平衡)洗脫。在減壓下蒸發(fā)產(chǎn)物級分，得到淡黃色/棕黃色固體4.5g(89％)。MS(ES)，m/z 196(M+1)。
A.7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶方法B 1)在氮氣下，在250mL圓底燒瓶中裝入7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(5.07g，33.2mmol，1當量)、二(頻哪醇)二硼(10.18g，40.1mmol，1.2當量)、碳酸鉀(6.86g，49.6mmol，1.5當量)、Pd(OAc)2(370mg，1.6mmol，0.05當量)、三環(huán)己基膦(914mg，3.3mmol，0.10當量)、二甘醇二甲醚(50mL)和水(68μL)。將反應混合物加熱至100℃達24小時，然后在室溫下攪拌過周末。將混合物過濾并且用2×10mL二甘醇二甲醚沖洗。將固體在50mL水中制成漿液達1小時，然后過濾并且用2×10mL水沖洗。將濕的濾餅(～10g)在60℃下真空干燥過夜，得到標題化合物(6.54g，26.8mmol，81％產(chǎn)率)，為灰色固體，HPLC測定純度為99.3％。
2)在氮氣下，在裝有攪拌棒和冷凝器的100mL圓底燒瓶中裝入4-溴吡啶鹽酸鹽(3.98g，20.5mmol，1當量)、7-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(5.47g，22.4mmol，1.1當量)、Pd(OAc)2(90mg，401mmol，0.02當量)、三苯膦(217mg，827mmol，0.04當量)、K3PO4(8.6g，40.5mmol，2當量)、1-丙醇(36mL)和水(12mL)。將反應混合物加熱至回流(90℃)過夜，然后冷卻至室溫。分層并且向PrOH層加入40mL MTBE和40mL 1M HCl。水層用40mL MTBE洗滌并且用6mL 1-丙醇沖洗2次。向水層中加入甲醇(4mL)，將其加熱至45℃，然后加入9mL 5M NaOH。冷卻反應混合物并且在25℃下放入晶種。1.5小時后過濾反應混合物并且用2×4mL水(含10％甲醇)沖洗，然后用8mLMTBE(有助于將濾餅中的水除去并且容易干燥)沖洗。將固體在60℃下真空干燥。分離得到標題化合物(2.90g)，為黃色固體，產(chǎn)率73％，HPLC(在215nm)測定純度為98％。
B.3-碘-7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶 在裝有磁力攪拌器、溫控加熱套、氮氣的250mL圓底燒瓶中裝入7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(3.35g，17.2mmol)、NIS(3.8g，16.8mmol)、EtOH(3A)。將反應物加熱至65℃達1小時。該反應可以通過SiO2TLC(100％EtOAc)監(jiān)控。再加入NIS(3.8g，16.8mmol)并且將反應物加熱至65℃達1小時。在冰浴上冷卻的同時將反應物混合30分鐘，然后過濾并且用MeOH沖洗固體。將固體風干并且在40℃下在真空箱內(nèi)干燥得到4.59g(產(chǎn)率83％)。從濾液中可獲得其他產(chǎn)物。MS(ES)，m/z 322(M+1)。
C.4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 在裝有磁力攪拌器、溫控加熱套、在N2氣氛下和冷凝器的250mL圓底燒瓶中裝入3-碘-7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(4.95g，15.4mmol)、4-氨基苯基硼酸(1.07g)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)苯胺(2.69g)[合并這些得到總硼酸(18.5mmol，1.2當量)]、二甲氧基乙烷(140mL)、2M K2CO3(40mL，28.8mmol，1.1當量)和Pd(PPh3)4(836mg)。在通入N2的同時將反應物溫熱，然后加熱至65℃達18小時。將反應物冷卻至室溫并且轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并且吸去底層(25-30mL)。在減壓下蒸發(fā)除去DME并且將殘留物溶于MeOH(1L)和2M在MeOH中的NH3(10mL)中。過濾溶液除去Pd(0)并且在減壓下蒸發(fā)以吸附到SiO2膠上。真空干燥SiO2并且應用SiO2進行色譜，洗脫梯度0％至10％2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)。在減壓下蒸發(fā)溶劑，得到亮黃色固體2.6g(60％)。MS(ES)，m/z 286(M+1)。
按照制備64制備以下物質(zhì) 制備71 1-(5-溴-吡啶-2-基)-3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲 將(5-叔丁基-異唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.480g，1.52mmol，1.0當量)和5-溴-吡啶-2-基胺(0.263g，1.52mmol，1.0當量)溶于DMSO(2mL)中。加入三乙胺(0.22mL，1.52mmol，1.0當量)。將反應混合物在80℃下攪拌16小時，冷卻，然后用乙醚(100mL)稀釋，用飽和氯化鈉水溶液(2×20mL)、水(2×20mL)洗滌，干燥，過濾并且濃縮，得到棕色油狀物。通過硅膠快速色譜純化該油狀物，應用0-10％在二氯甲烷中的乙酸乙酯梯度，得到0.302g(58％)標題化合物，為棕色固體。MS(ES)，m/z 339、341(M+1)。
按照類似于制備71的方法制備以下物質(zhì) 以下中間體基本應用與以下實施例64相同的方法制備 制備75 {4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯 A.[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-氨基甲酸叔丁酯 向3-碘-7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(4.80g，17.2mmol，1.0當量)的二烷(90mL)的懸浮液中加入2M Na2CO3(30mL)和(4-氨基甲基苯基)硼酸(3.88g，20.7mmol，1.2當量)。將混合物脫氧并且充入氮氣。將反應混合物在85℃下攪拌3天。加入(Boc)2O(4.51g，20.7mmol，1.2當量)并且將混合物在60℃下攪拌20分鐘。將混合物在真空下濃縮至干燥。將產(chǎn)生的固體在二氯甲烷/甲醇中制成漿液并且用硅藻土521過濾。真空濃縮溶液，得到黃色固體(5.60g)。進行硅膠快速色譜，應用0-10％的MeOH/DCM的梯度，得到4.50g(12.6mmol，73％)標題化合物，為淡黃色固體產(chǎn)物。MS(ES)，m/z 358(M+1)。
B.{4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯 將[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-氨基甲酸叔丁酯(1.90g，5.30mmol，1.0當量)懸浮于二烷/水(2∶1，36mL)中。加入2-氟-5-吡啶硼酸(0.75g，5.30mmol，1.0當量)、K3PO4(2.25g，10.6mmol，2.0當量)和S-phos(0.272g，0.66mmol，0.125當量)。將混合物脫氧并且充入氮氣。將混合物在80℃和氮氣下攪拌16小時。在溶液冷卻后形成白色固體。將白色固體過濾，用水(3×15mL)、EtOAc(3×15mL)洗滌。收集固體(1.50g)。通過硅膠快速色譜純化濾液，用0-5％的MeOH/DCM梯度，得到標題化合物(0.52g)，為淡黃色固體。將色譜產(chǎn)物和濾過的固體合并，得到淡黃色固體(2.02g，4.83mmol)。MS(ES)，m/z 419(M+1)。
按照類似于制備75的方法制備以下物質(zhì) 制備78 4-(7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 A.7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶 在500mL圓底燒瓶中，將7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(7.5g，49.2mmol)的250mL 1，4-二烷懸浮液與二(頻哪醇)二硼(13.74g，54.1mmol，1.1當量)、乙酸鉀(7.24g，73.8mmol，1.5當量)和三環(huán)己基膦(1.66g，5.9mmol，0.12當量)攪拌。將得到的漿液通過2個循環(huán)的抽真空和向漿液中鼓入氮氣10分鐘來使其脫氧。將燒瓶裝上回流冷凝器并且加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(2.25g，2.45mmol，0.05當量)并且將混合物在80℃和氮氣下攪拌過夜。將熱的混合物經(jīng)～1cm硅藻土墊過濾，用50mL 1，4-二烷洗滌，然后將合并的濾液濃縮并且洗滌，得到棕色糊狀固體。將部分固體(32.8mmol)懸浮于80mL二烷中，與41.25mL 2M的碳酸鈉水溶液(82.5mmol，2.5當量)和2-溴噻唑(4.38mL，8.07g，49.2mmol，1.5當量)合并，然后通過抽真空和向懸浮液中鼓入氮氣進行脫氧2次。加入四(三苯膦)鈀(1.89g，1.64mmol，0.05當量)，將燒瓶裝上回流冷凝器并且將混合物在100℃和氮氣下攪拌過夜。將深棕-黑色的熱混合物通過1cm硅藻土墊過濾，用50mL1，4-二烷洗滌，然后將濾液和洗滌液合并，等體積裝入3個25g SCXMega Bond-Eluttm SCX柱(Varian)(每個柱用200mL 1∶1 CH2Cl2∶MeOH預洗滌)。用真空輔助裝置上樣后，每個柱用300mL 1∶1 CH2Cl2∶MeOH洗滌，然后用160mL 1∶1 CH2Cl2∶2M NH3-MeOH洗脫。將合并的洗脫液真空濃縮并且通過330g硅膠柱純化，應用0-5％在二氯甲烷中的甲醇梯度。將合并的純凈級分濃縮并且干燥，得到3g(45％)7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶，為棕黃色固體。MS(ES)，m/z 202(M+1)。
B.3-溴-7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶 將7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(1.14g，5.66mmol)溶于25mL無水乙醇中，然后加入NBS(1.0g，5.66mmol)，將混合物在室溫下攪拌15分鐘，用35mL二氯甲烷稀釋，然后應用于10g SCX Mega Bond-ElutTM柱(Varian)(用150mL 1∶1 CH2Cl2∶MeOH預洗滌)。將SCX柱用300mL 1∶1CH2Cl2∶MeOH洗滌，用150mL CH2Cl2∶2M NH3-MeOH洗脫并且將洗脫液濃縮并且干燥，得到1.07g(67％)標題化合物，為棕黃色固體。MS(ES)280、282。
C.4-(7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 將3-溴-7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(1.07g，3.82mmol)和4-氨基苯基硼酸鹽酸鹽(793mg，4.58mmol，1.2當量)溶于15mL二烷和7mL 2N碳酸鈉水溶液中，然后用上述的真空/鼓入氮氣進行脫氧。加入四(三苯膦)鈀(0)(221mg，0.191mmol，0.05當量)，將反應燒瓶裝上回流冷凝器并且將混合物在氮氣和攪拌下加熱至95℃達約16小時。將深棕色反應混合物冷卻，用乙酸乙酯(～40mL)稀釋并且在分液漏斗中分層。將有機層經(jīng)固體硫酸鎂干燥，過濾，然后應用于10g SCX Mega Bond-ElutTM柱(Varian)(用100mL 1∶1 CH2Cl2∶MeOH預洗滌)。上樣后，用另外的200-250mLCH2Cl2∶MeOH溶液洗滌柱，然后用100mL CH2Cl2∶2M NH3-MeOH洗脫產(chǎn)物，濃縮為棕-橙色油狀物并且通過快速色譜純化，用0-5％在二氯甲烷中的甲醇的梯度。合并純凈級分并且濃縮，干燥后得到750mg(67％)標題化合物，為黃-棕色固體。MS(ES)，m/z 293(M+1)。
制備79 2-氯-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 A.2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺 在RBF中，在氮氣下，將4-溴-2-氯-苯基胺(4.2g，20mmol)溶于二烷(80mL)中。加入三乙胺(10mL，3.6當量)，然后通入氮氣脫氣。歷經(jīng)約5分鐘，通過注射器滴加4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷(8.5mL，2.9當量)。再通入氮氣5分鐘，然后加入[1，1’-二(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.603g，3.7mol％，與二氯甲烷的1∶1絡合物)。在氮氣下放置并且在80℃下加熱過夜。反應物冷卻后，通過硅藻土過濾，用己烷洗滌。濃縮濾液至干燥并且應用粗品。
B.2-氯-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺 將3-碘-7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(2.18g，6.8mmol)、2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基胺(上步得到的粗物質(zhì)，過量)、碳酸鉀(2.8g，3當量)、二烷(30mL)和水(15mL)混合。用氮氣徹底脫氣，然后加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.143g，3mol％)。將反應物在80℃下加熱過夜。濃縮至干燥，然后在DCM中制成漿液并且通過硅藻土過濾，用DCM洗滌。濃縮濾液，然后通過硅膠填料純化(己烷→1∶1己烷∶乙酸乙酯→2.5％甲醇∶DCM→5％甲醇∶DCM)，得到橙-黃色固體(1.42g，46％)。MS(ES)，m/z 321.1(M+1)。
按照類似于以上的方法制備以下物質(zhì) 制備82 3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-丙酸 在2-5mL反應容積的微波容器中，在DME和水的混合物(1∶1)(4mL)中，在四(三苯膦)鈀(0)(36.3mg，0.031mmol，0.10當量)和碳酸鈉(99.8mg，0.942mmol，3.0當量)的存在下，將3-碘-7-(4-甲磺酰基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(125.0mg，0.314mmol，1.0當量)與[4-(2-羧基乙基)苯基硼酸(122mg，0.628mmol，2.0當量)混合。用膜將容器密封，然后放入微波腔內(nèi)。將混合物攪拌20秒，然后應用微波輻射將溫度從室溫升至100℃。一旦達到所需溫度，將反應混合物在該溫度下保持3小時。在打開前將反應容積冷卻至室溫。將反應混合物應用于SCX樹脂，用二氯甲烷、甲醇洗脫，然后用在甲醇中的2.0M氨洗脫。應用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在減壓下將甲醇氨級分濃縮至干燥。得到殘留物(139.0mg)，無需另外純化。MS(ES)，m/z 421(M+1)。
按照類似于制備82的方法制備以下物質(zhì) 制備84 2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺 A.2-(4-溴-苯基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺 在室溫下，將4-溴苯基乙酸(10.00g，46.50mmol)、二異丙基乙基胺(12.02g，16.20mL，93.00mmol)和1，1’-羰基二咪唑(8.29g，51.15mmol)溶于四氫呋喃(200mL)中。將內(nèi)容物在氮氣下攪拌1小時。加入間-三氟甲基苯胺(15.00g，93.00mmol)并且將反應物在室溫下攪拌過夜。濃縮反應物接近干燥，將其溶于二氯甲烷(250mL)中并且用2N NaOH(200mL)、水(100mL)和1N鹽酸(2×200mL)萃取。將有機層用飽和氯化鈉水溶液(100mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮。將干燥物質(zhì)上樣至硅膠(100g)并且在硅膠上進行色譜，用二氯甲烷作為洗脫劑，得到產(chǎn)物(13.00g，78.1％)。MS(ES)，m/z 356/358(M+1)。
B.2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺 將2-(4-溴-苯基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(3.00，8.38mmol)、二(頻哪醇)二硼(2.65g，10.48mmol)、乙酸鉀(1.23g，12.57mmol)和三環(huán)己基膦(295mg，1.05mmol)溶于無水二烷(95mL)中。在室溫下用氮氣將反應物脫氧10分鐘。向反應物中加入乙酸鈀(II)(95mg，0.42mmol)。裝上回流冷凝器并且將反應混合物加熱至80℃達15小時。將反應物冷卻并且用乙酸乙酯(200mL)稀釋。用水(3×100mL)萃取/洗滌乙酸乙酯溶液，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮至干燥。將粗固體溶于溫的二氯甲烷中并且緩慢加入己烷。冷卻，形成晶體，再向有機物中加入己烷，攪拌2小時后，過濾懸浮液，得到產(chǎn)物(3.00g，88.5％)。用己烷洗滌。MS(ES)，m/z 404(M-1)。
按照類似于制備49的方法制備以下物質(zhì) 制備92 N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙酰胺 A.2-(4-溴-苯基)-N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺 將4-溴苯基乙酸(25.39，118.07mmol)溶于乙醚(200mL)中。加入無水吡啶(1mL)并且將反應物冷卻至0℃，然后加入草酰氯(18.44g，12.86mL，145.32mmol)。15分鐘后，使反應物達到環(huán)境溫度。在1.5小時時，加入DMF(0.4mL)并且再攪拌1小時。濃縮至稠的琥珀色油狀物。用二氯甲烷(118mL)稀釋，得到1N(4-溴-苯基)-乙酰氯(118mmol)儲備液。
將4-氯-3-三氟甲基苯胺(4.13g，21.1mmol)與N，N-二異丙基乙基胺(13.57g，18.29mL，105mmol)溶于無水二氯甲烷(21mL)中并且冷卻至0℃。將儲備的酰氯的二氯甲烷(21.1mL)溶液滴加至冰冷的苯胺溶液中。在環(huán)境溫度下攪拌過夜。用二氯甲烷(100mL)進一步稀釋并且用1NHCl(1×50mL)、水(1×50mL)、1N NaOH(2×50mL)和飽和氯化鈉水溶液(50mL)洗滌。有機物經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到粗酰胺。在硅膠上進行色譜，應用1∶1的(15％在二氯甲烷中的乙酸乙酯)/己烷。從二氯甲烷/己烷中重結(jié)晶。(2.78g，7.08mmol，42.2％)，MS(ES)，m/z 390/392(M+1)。
B.N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙酰胺 應用類似于制備84的方法。MS(ES)，m/z 438(M-1)。
按照類似于制備92的方法制備以下物質(zhì) 制備97 4-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-丁酰胺 將4-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-丁酰胺(0.47g，1.15mmol)、7-氯-3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.29g，1.05mmol)和固體碳酸鉀(0.48g，3.45mmol)懸浮于二烷(4mL)和水(2mL)中。反應物在室溫下用氮氣脫氧10分鐘。向反應物中加入反式-二氯二(三苯膦)鈀(II)(22mg，0.03mmol)。裝上回流冷凝器并且將反應物加熱至105℃歷經(jīng)周末。將反應物冷卻，用二氯甲烷稀釋并且通過硅藻土過濾。濃縮濾液，然后在硅膠上進行色譜，應用0-3％的甲醇/乙酸乙酯，得到產(chǎn)物(301mg，57％)。MS(ES)，m/z 458(M+1)。
按照類似于制備97的方法制備以下物質(zhì) 制備99 C-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-噻唑-2-基}-甲基胺 A.[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-噻唑-2-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯 向(4-三甲基錫烷基-噻唑-2-基-甲基)-氨基甲酸叔丁酯(0.480g，1.27mmol，1.0當量)[如在2003年11月10日提交的PCT申請WO 2004046101，2004年6月3日中制備]的無水二烷(4mL)溶液中加入7-氯-3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.354g，1.27mmol，1.0當量)和LiCl(0.162g，3.0當量)。加入Pd(PPh3)4(0.102g，0.07當量)。將反應混合物脫氧并且充入氮氣。在90℃下攪拌過夜，冷卻，然后用5％MeOH/DCM(100mL)稀釋，用飽和氯化鈉水溶液(2×20mL)、水(2×20mL)洗滌，干燥，過濾并且濃縮。在硅膠上進行色譜，先用50％-100％的EtOAc/DCM梯度，然后用5％MeOH/DCM梯度，得到0.180g標題化合物，無需進一步純化即可用于下一步。MS(ES)，m/z 365(M+1)。
B.{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-噻唑-2-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯 向[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-噻唑-2-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(0.180g，0.49mmol，1.0當量)的二烷/水(2∶1，6mL)懸浮液中加入4-(甲基磺?；?-苯硼酸(0.108g，1.1當量)、K3PO4(0.208g，2.0當量)、S-phos(0.025g，12.5％當量)和Pd(OAc)2(0.006g，0.05當量)。將反應混合物脫氧并且充入氮氣并且在100℃下攪拌4小時。將混合物冷卻至室溫并且用5∶95MeOH/DCM(100mL)稀釋。用飽和氯化鈉水溶液(2×20mL)、水(2×20mL)洗滌，干燥，過濾并且濃縮。將殘留物在硅膠上純化，用0-80％的EtOAc/己烷梯度，然后用5∶95MeOH/DCM，得到0.160g標題化合物，為淡黃色固體。
C.{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-噻唑-2-基}-甲基胺 向{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-噻唑-2-基甲基]-氨基甲酸叔丁酯(0.160g，0.33mmol，1.0當量)的1∶1MeOH/DCM(20mL)溶液中加入HCl(4M在二烷中，6mL)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時，然后在60℃下攪拌2小時。在真空下蒸發(fā)反應混合物并且無需進一步純化即可應用。
制備100 2-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺 應用類似于制備99B的方法，將3-碘-7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶(655mg，2.35mmol)與2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(1.00g，2.47mmol)偶聯(lián)。MS(ES)，m/z430(M+1)。
按照類似于制備100的方法制備以下物質(zhì) 制備102 7-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶 將4-碘-吡啶-2-基胺(4.00g，18.18mmol)和氯乙醛(2.77mL，21.82mmol)在乙醇(40mL)中混合。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至83℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將產(chǎn)生的溶液過濾，得到棕黃色固體產(chǎn)物(1.40g，32％)。MS(ES)，m/z 245(M+1)。
制備103 7-乙炔基-咪唑并[1，2-a]吡啶 A.7-[(三異丙基硅烷基)-乙炔基]-咪唑并[1，2-a]吡啶 將7-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶(2.64g，10.82 mmol)、乙炔基-三異丙基-硅烷(3.61mL，16.23mmol)、碘化銅(I)(0.103g，0.541mmol)和三乙胺(7.54mL，54.09mmol)在1，4-二烷(50mL)中混合。向混合物中鼓入氮氣5分鐘。加入[1，1’-二(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.442g，0.541mmol，與二氯甲烷1∶1的絡合物)。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至85℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。通過硅藻土521過濾混合物。真空濃縮溶液，得到深棕色油狀物并且這樣即可應用。MS(ES)，m/z 299(M+1)。
B.7-乙炔基-咪唑并[1，2-a]吡啶 將7-[(三異丙基硅烷基)-乙炔基]-咪唑并[1，2-a]吡啶(3.23g，10.82mmol)和四丁基氟化銨(1.19mL，1.19mmol，1.0M在THF中)在THF(5mL)中混合。在室溫下將混合物攪拌40分鐘，然后真空濃縮，得到黑色油狀物。通過柱色譜(乙酸乙酯)純化，得到產(chǎn)物(1.10g，71％)。MS(ES)，m/z143.1(M+1)。
制備104 7-(1H-[1，2，3]三唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 在耐壓燒瓶中，將7-乙炔基-咪唑并[1，2-a]吡啶(1.10g，7.74mmol)、碘化銅(I)(0.074g，0.387mmol)和三甲基甲硅烷基疊氮化物(1.53mL，11.61mmol)在DMF∶甲醇的9∶1混合物(13.8mL)中混合。用聚四氟乙烯螺旋帽將瓶密封并且將反應混合物加熱至100℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將混合物在真空下濃縮至干燥。將產(chǎn)生的固體在二氯甲烷中制成漿液并且通過硅藻土521過濾。真空濃縮溶液，得到橙色固體。通過柱色譜(乙酸乙酯→5％在二氯甲烷中的甲醇→8％在二氯甲烷中的甲醇)純化，得到產(chǎn)物(0.82g，57％)。MS(ES)，m/z 186(M+1)。
制備105 3-碘-7-(1H-[1，2，3]三唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 應用類似于制備27B的方法，用7-(1H-[1，2，3]三唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶，得到標題化合物。MS(ES)，m/z 312(M+1)。
制備106 7-(2，6-二甲基-吡啶-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 應用類似于制備27A的方法，從7-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶和4-溴-2，6-二甲基吡啶(Acta.Chemica.Scandinavica.B42，(1988)第373-377頁)制備。MS(ES)，m/z 224(M+1)。
制備107 5-(1-甲基-環(huán)丙基)-[1，3，4]噻二唑-2-基胺 將1-甲基環(huán)丙烷-1-甲酸(10.00 g，99.88mmol)和氨基硫脲(9.10g，99.88mmol)在二烷(110mL)中混合。在N2下，將混合物加熱至90℃，然后歷經(jīng)25分鐘滴加磷(III)酰氯(9.14mL，99.88mmol)。將反應混合物在90℃下攪拌6小時，然后在室溫下攪拌8小時。輕輕倒在200g冰上并且加入氫氧化銨使其成堿性。過濾除去固體，濾液用乙酸乙酯萃取。用水洗滌有機層。將產(chǎn)生的有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到產(chǎn)物(2.54g，16％)。MS(ES)，m/z 156(M+1)。
制備108 4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基胺二鹽酸鹽 A.2-氨基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-4-甲酸甲酯 將(1-甲基-環(huán)丙基)-甲醇(5.00g，58.05mmol)、4-甲基嗎啉N-氧化物(10.20g，87.08mmol)和4埃的分子篩(5.6g)在二氯甲烷(200mL)中混合。將反應混合物在N2和室溫下攪拌20分鐘。加入四丙基過鐐酸銨(1.02g，2.90mmol)并且攪拌5小時。在硅膠填料上純化，用CH2Cl2洗脫。合并包含產(chǎn)物的級分并且真空濃縮，殘留一些CH2Cl2。將該物質(zhì)直接用于下步反應。
將1-甲基-環(huán)丙烷甲醛(4.88g，58.01mmol)和二氯乙酸甲酯(5.46mL，52.74mmol)在乙醚(20mL)中混合，冷卻至0℃。滴加鈉(1.21g，52.74mmol)的甲醇(20mL)溶液。將反應混合物在0℃和N2下攪拌4小時。用乙醚/水萃取混合物。將產(chǎn)生的有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到澄清液體。將液體與硫脲(4.42g，58.01mmol)在甲醇(25mL)中混合。將反應混合物在60℃和N2下加熱14小時。真空濃縮并且在硅膠填料上純化，用己烷→3％在二氯甲烷中的甲醇→5％在二氯甲烷中的甲醇洗脫，得到產(chǎn)物(5.10g，歷經(jīng)兩步46％)。MS(ES)，m/z 213(M+1)。
B.2-叔丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-4-甲酸 將2-氨基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-4-甲酸甲酯(5.10g，24.03mmol)和二碳酸二-叔丁基酯(5.24g，24.03mmol)在吡啶(15mL)中混合。將反應物攪拌1小時，然后加入三甲基硅烷醇鉀(17.12g，120.13mmol)的THF(100mL)溶液。將反應混合物在N2下攪拌14小時?；旌衔镉靡宜嵋阴?1N鹽酸萃取。有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將產(chǎn)生的有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮。在硅膠填料上純化，用己烷→5％在二氯甲烷中的甲醇洗脫，得到產(chǎn)物(4.55g，64％)。MS(ES)，m/z 243(M+1，產(chǎn)物-叔丁基)。
C.[4-羥基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯 將2-叔丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-4-甲酸(2g，6.7mmol)溶于THF(100mL)中并且在氮氣下冷卻至0℃。加入三乙胺(0.93 mL，1當量)，然后滴加氯甲酸異丁酯(0.87mL，1當量)。在0℃下攪拌30分鐘，然后過濾，用THF洗滌。將濾液冷卻至0℃，然后一次性加入硼氫化鈉(0.76g，3當量)，然后滴加甲醇(4.1mL，15當量)。在0℃下45分鐘后，除去冷卻浴并且溫至室溫達15分鐘。用約50mL 1N HCl(水溶夜)將反應猝滅(小心)。用DCM萃取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機物。將有機物經(jīng)MgSO4干燥，然后過濾并且濃縮。在硅膠上純化(2∶1己烷∶乙酸乙酯→1∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到白色固體(1.11g，58％)。LCMS(ES)，m/z 299(M+1，產(chǎn)物-叔丁基)。
D.[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯 在氮氣下，將[4-羥基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(1.11g，3.9mmol)溶于DCM(50mL)中。加入三苯膦(2.05g，2當量)，然后加入四溴化碳(2.6g，2當量)。在室溫下攪拌15分鐘，然后濃縮并且在硅膠上純化(己烷→9∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到溴化物(1.02g，75％)。將該物質(zhì)重溶于THF(40mL)中并且加入二甲基胺(7.3mL，2M THF溶液，5當量)并且在室溫下攪拌4小時。過濾反應物，用THF洗滌。濃縮濾液，得到產(chǎn)物(0.9g，99％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ11.2(bs，1H)，3.34(s，2H)，2.15(s，6H)，1.43(s，9H)，1.28(s，3H)，0.80(m，2H)，0.73(m，2H)。
E.4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基胺二鹽酸鹽 在氮氣下，將[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-氨基甲酸叔丁酯(0.9g，2.9mmol)溶于二烷(40mL)中，然后加入在二烷中的4M HCl(7.2mL，10當量)并且在室溫下攪拌過夜。LCMS顯示大部分是原料。將反應物在40℃下加熱過夜。LCMS顯示部分轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物。升高溫度至60℃并且加熱過夜。LCMS顯示反應完成。出現(xiàn)白色沉淀，過濾分離固體。固體出現(xiàn)吸濕。將固體重溶于甲醇中并且濃縮，得到白色固體(0.784g，95％)。MS(ES)，m/z 212(M+1)。
制備109 5-叔丁基-4-二甲基氨基甲基-噻唑-2-基胺 應用類似于制備108的方法制備。用SCX柱(10g VARIAN bond elut)分離產(chǎn)物，用1∶1甲醇∶二氯甲烷洗脫，然后用1∶12M在甲醇中的NH3∶二氯甲烷洗脫。濃縮后者，得到標題化合物(0.190g，＞100％)。MS(ES)，m/z 169(M+1，產(chǎn)物-NMe2)。
按照類似于制備108/109的方法制備以下物質(zhì) 制備110 2-(2-氨基-噻唑-5-基)-丙-2-醇 在-78℃和氮下，以滴加方式將正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，24mL，38mmol，2.0當量)加入至2-氨基噻唑(1.90g，18.97mmol，1.0當量)的無水THF(80mL)溶液中。在-78℃下，向混合物中緩慢加入三甲基氯硅烷(4.8mL，38mmol，2.0當量)。將反應混合物緩慢溫至0℃并且將混合物在0℃下攪拌10分鐘。將溶液冷卻至-78℃并且以滴加方式加入正丁基鋰(1.6M的己烷溶液，12mL，19mmol，1.0當量)。最后加入丙酮(1.4mL，19mmol，1.0當量)。將反應混合物在-78℃下攪拌10分鐘，然后在室溫下攪拌30分鐘。在-78℃下，用氯化銨(飽和的，10mL)將反應猝滅。然后溫至室溫。加入乙酸乙酯(200mL)。有機層用飽和氯化鈉水溶液(3×30mL)、水(2×30mL)洗滌。有機相經(jīng)硫酸鎂干燥并且將干燥的物質(zhì)過濾。真空濃縮。通過柱色譜純化(0％→5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇)，得到產(chǎn)物(1.38g，46％)。MS(ES)，m/z 159(M+1)。
按照類似于制備110的方法制備以下物質(zhì) 制備113 5-環(huán)丁基-噻唑-2-基胺 在H2(52psi)下，在Pearlman催化劑(0.16g)的存在下，將1-(2-氨基-噻唑-5-基)-環(huán)丁醇在三氟乙酸(16mL)中氫化過夜。將催化劑過濾。用甲醇洗滌。真空濃縮。向殘留物中加入二氯甲烷(100mL)。有機層用碳酸氫鈉(飽和的，2×30mL)、飽和氯化鈉水溶液(2×20mL)和水(2×30mL)洗滌。有機相經(jīng)MgSO4干燥并且將干燥的物質(zhì)過濾。真空濃縮。通過柱色譜純化(0％→5％在二氯甲烷中的甲醇)，得到產(chǎn)物(0.508g，60％)。MS(ES)，m/z155(M+1)。
制備114 5-異丙基4-吡咯烷-1-基甲基-噻唑-2-基胺 A.4-甲基-1-吡咯烷-1-基-戊-1，2-二酮 在0℃和氮氣下，將草酰氯(5.3mL，60.24mmol，1.6當量)緩慢加入至4-甲基-2-氧代戊酸(4.90g，37.65mmol，1.0當量)的二氯甲烷(50mL)溶液中。最后加入二甲基甲酰胺(2滴)。將反應混合物攪拌過夜。真空濃縮。加入二氯甲烷(100mL)。在0℃和氮氣下，將該溶液緩慢加入至吡咯烷(6.90g，97.02mmol，2.6當量)的二氯甲烷(50mL)溶液中。加入后，將反應混合物在室溫下攪拌1小時。用HCl(1N)洗滌直至水層呈酸性，然后用飽和氯化鈉水溶液(2×20mL)和水(2×30mL)洗滌。有機相經(jīng)MgSO4干燥并且將干燥的物質(zhì)過濾。真空濃縮。通過柱色譜純化(0％→5％在二氯甲烷中的乙酸乙酯)，得到產(chǎn)物(4.60g，66％)。
B.3-溴-4-甲基-1-吡咯烷-1-基-戊-1，2-二酮 在68℃下，將在氯仿(120mL)中的4-甲基-1-吡咯烷-1-基-戊-1，2-二酮(4.50g，24.56mmol，1.0當量)加入至溴化銅(II)(16.45g，73.67mmol，3.0當量)的乙酸乙酯(200mL)溶液中。將反應混合物攪拌過夜。通過硅藻土填料過濾，用二氯甲烷洗滌。真空濃縮。得到6.12g棕色油狀物(23.3mmol，95％)，無需進一步純化即可用于下一步驟。
C.(2-氨基-5-異丙基-噻唑-4-基)-吡咯烷-1-基-甲酮 將3-溴-4-甲基-1-吡咯烷-1-基-戊-1，2-二酮(3.0g，11.44mmol，1當量)加入至硫脲(1.31mmol，1.5當量)的乙醇(40mL)溶液中。在回流下將反應混合物攪拌過夜。真空濃縮。加入二氯甲烷(200mL)。有機層用碳酸氫鈉(飽和的，2×30mL)、飽和氯化鈉水溶液(2×20mL)和水(2×30mL)洗滌。有機相經(jīng)MgSO4干燥并且將干燥的物質(zhì)過濾。真空濃縮。通過柱色譜純化(0％→5％在二氯甲烷中的乙酸乙酯)，得到產(chǎn)物(4.60g，66％)。MS(ES)，m/z 240(M+1)。
D.5-異丙基-4-吡咯烷-1-基甲基-噻唑-2-基胺 按照類似于制備3-嗎啉-4-基甲基-5-三氟甲基-苯基胺的方法制備。MS(ES)，m/z 226(M+1)。
制備115 5-叔丁基-4-(2-二甲基氨基-乙氧基)-2-甲基-苯基胺 在微波容器中，將4-氨基-2-叔丁基-5-甲基-酚(600mg，3.2mmol)、N，N-二甲基胺溴乙烷HBr鹽(820mg，3.4mmol)和氫氧化鉀(750mg，13.4mmol)在1，2-二甲氧基乙烷中的混合物在150-170℃下用＜10瓦特的輻射加熱5分鐘。反應物冷卻后，通過硅藻土過濾并且用二氯甲烷洗滌。濃縮濾液并且通過硅膠柱色譜純化，用100％DCM至5％在DCM中的MeOH至5％在DCM中的(2N在MeOH中的氨))梯度，得到紅棕色標題化合物(26％產(chǎn)率)。LCMS(ES)，m/z 251(M+1)。
制備116 3-叔丁基-5-嗎啉-4-基甲基-苯基胺 A.4-(3-叔丁基-5-碘-芐基)-嗎啉 在氮氣下，將1-叔丁基-3-碘-5-甲基-苯(1g，3.6mmol，按照Chem.Soc.Perkin Trans.1，1987，第859-866頁制備)溶于四氯化碳(20mL)中。加入NBS(0.71g，1.1當量)，然后加入AIBN(0.06g，0.1當量)并且在70℃下加熱過夜。在早晨過濾，用己烷洗滌。濃縮濾液并且應用粗品。在氮氣下，將該殘留物溶于THF(10mL)中并且冷卻至0℃。通過注射器滴加嗎啉(0.64mL，2當量)并且在冷卻下攪拌5分鐘。除去冰浴并且溫至室溫。1小時后，濃縮至干燥并且將殘留物在硅膠上純化(己烷→4∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到產(chǎn)物(0.785g，歷經(jīng)兩步60％)。MS(ES)，m/z 360.1(M+1)。
B.3-叔丁基-5-嗎啉-4-基-甲基-苯基胺 將4-(3-叔丁基-5-碘-芐基)-嗎啉(0.785g，2.2mmol)、二苯酮亞胺(0.44mL，1.2當量)、叔丁醇鈉(0.29g，1.4當量)、外消旋的BINAP(0.061g，4.5mol％)和THF(10mL)混合。用氮氣脫氣，然后加入二(二亞芐基丙酮)鈀(0.037g，3mol％)并且將反應物在50℃和氮氣下加熱過夜。早晨加入約4mL 5N HCl(水溶液)并且在50℃下加熱1小時。冷卻至室溫，然后用乙酸乙酯稀釋，用1N NaOH(水溶液)使其變成堿性。有機物用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物用MgSO4干燥，過濾并且真空濃縮。在硅膠上純化(4∶1己烷∶乙酸乙酯→10％甲醇∶DCM)，得到產(chǎn)物(0.449g，83％)。MS(ES)，m/z 249.3(M+1)。
按照類似于制備116的方法制備以下物質(zhì) 制備118 1-(3-氨基-苯基)-2，2-二甲基-丙-1-酮 A.1-(3-碘-苯基)-2，2-二甲基-丙-1-酮 在圓底燒瓶中，將NaOtBu(3.6g，4當量)、THF(10mL)和NMP(10mL)混合。在氮氣下放置并且冷卻至0℃。將1-(3-碘-苯基)-丙-1-酮(2g，9.4mmol)溶于THF(10mL)中并且滴加至反應物中。然后立即通過注射器加入碘代甲烷(2.3mL，4當量)。在0℃下攪拌5小時。用水將反應猝滅，然后用乙酸乙酯稀釋。有機物用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。通過硅膠色譜純化(己烷→5％EtOAc∶己烷)，得到2.0g澄清液體。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.70(m，2H)，7.66(m，1H)，7.40(m，1H)，1.23(s，9H)。
B.1-(3-氨基-苯基)-2，2-二甲基-丙-1-酮 將1-(3-碘-苯基)-2，2-二甲基-丙-1-酮(2.0g，8.3mmol)、二苯酮亞胺(1.7mL，1.2當量)、外消旋的BINAP(0.23g，4.5mol％)、NaOtBu(1.1g，1.4當量)和THF(30mL)混合。用氮氣徹底脫氣，然后加入二(二亞芐基丙酮)鈀(0.14g，3mol％)并且在氮氣下放置。將反應物在50℃下加熱過夜。第二天早晨加入約8mL 5N HCl(水溶液)并且在50℃下再加熱1小時。冷卻至室溫，然后用乙酸乙酯稀釋并且用1N NaOH(水溶液)使其變成堿性。有機物用飽和氯化鈉水溶液洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。通過硅膠色譜純化(己烷→9∶1己烷∶EtOAc→4∶1己烷∶EtOAc)，得到黃色殘留物(1.2g，82％)。MS(ES)，m/z 178(M+1)。
制備119 3-(6-氨基-4-叔丁基-吡啶-3-基)-N，N-二甲基-丙烯酰胺 A.5-溴-4-叔丁基-吡啶-2-基胺 將4-叔丁基-吡啶-2-基胺(3g，20mmol)溶于無水乙腈(25mL)中。加入N-溴琥珀酰亞胺(3.56g，20mmol)。將反應物在室溫下黑暗中攪拌過夜。用EtOAc稀釋并且用1N NaOH(水溶液)和飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌。萃取有機層。水層用DCM進一步洗滌。將合并的有機層干燥(MgSO4)并且通過硅膠柱色譜純化(EtOAc/己烷)，得到2g標題化合物(44％)。LCMS(ES)，m/z 231(M+1)。
B.3-(6-氨基-4-叔丁基-吡啶-3-基)-N，N-二甲基-丙烯酰胺 向5-溴-4-叔丁基-吡啶-2-基胺(330mg，1.4mol)、N，N-二甲基丙烯酰胺(0.22mL，2.1mmol)、三乙胺(0.4mL，2.1mmol)在甲苯(4mL)中的混合物中通入氮氣脫氣3分鐘。在氮氣下，加入乙酸鈀(II)(60mg，0.28mmol)和四(三苯膦)鈀(0)(690mg，0.6mmol)。將反應物在密閉的容器和120℃下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫，通過硅藻土過濾并且濃縮。通過硅膠柱色譜純化(100％DCM至3％在DCM中的MeOH)，得到標題化合物(81％產(chǎn)率)。LCMS(ES)，m/z 248(M+1)。
按照類似于制備119的方法制備以下物質(zhì) 制備121 2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-[3-(嗎啉-4-羰基)-5-三氟甲基-苯基]-乙酰胺 A.嗎啉-4-基-(3-硝基-5-三氟甲基-苯基)-甲酮 將3-硝基-5-三氟甲基-苯甲酸(2.9g，12.6mmol)和1-羥基-7-氮雜苯并三唑(25mL 0.5M的DMF溶液)溶于THF中。加入1，3-二環(huán)己基碳二亞胺(2.6g，12.6mmol)和嗎啉(1g，11mmol)。將混合物在室溫下攪拌48-72小時。用DCM稀釋產(chǎn)生的懸浮液并且用飽和氯化銨水溶液將反應猝滅。有機層用飽和氯化鈉水溶液和水進一步洗滌，干燥(MgSO4)并且濃縮，得到黃-白色殘留物。通過硅膠柱色譜純化，梯度為100％己烷至50％在乙酸乙酯中的己烷，得到標題化合物，為2.5g白色固體(75％產(chǎn)率)。LCMS(ES)，m/z 305(M+1)。
B.(3-氨基-5-三氟甲基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮 在室溫下，將嗎啉-4-基-(3-硝基-5-三氟甲基-苯基)-甲酮(830mg，2.7mmol)溶于甲醇(40mL)中。加入氯化銨(3g，56mmol)并且攪拌10分鐘，然后加入Zn粉(5g，76mmol)，再攪拌5-10分鐘。過濾并且用MeOH洗滌。濃縮得到2g包含過量氯化銨的白色固體物質(zhì)。LCMS(ES)，m/z275(M+1)。無需進一步純化即可用于下一步驟。
C.2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-[3-(嗎啉-4-羰基)-5-三氟甲基-苯基]-乙酰胺 將(4-溴-2-氟-苯基)-乙酸(692mg，3.0mmol)溶于THF(24mL)中并且加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(618mg，3.2mmol)，攪拌10分鐘。將上步獲得的(3-氨基-5-三氟甲基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(740mg，排除過量的氯化銨)與Et3N(3.3mL，23mmol)溶于DCM(24mL)中。向胺混合物中加入活化的酸并且在室溫下攪拌過夜。將產(chǎn)生的懸浮液用EtOAc稀釋并且用飽和NaHCO3和飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機層干燥(MgSO4)，濃縮并且通過硅膠柱色譜純化(EtOAc/己烷梯度)，得到標題化合物(15％產(chǎn)率)。LCMS(ES)，m/z 491(M+1)。
按照類似于制備121的方法制備以下物質(zhì) 制備123 3-嗎啉-4-基甲基-5-三氟甲基-苯基胺 將(3-氨基-5-三氟甲基-苯基)-嗎啉-4-基-甲酮(1.2g，4.3mmol)溶于THF中并且滴加BH3-Me2S溶液(6.5mL，13.1mmol，2M在THF中)。在室溫下攪拌3小時。加入另一部分BH3-Me2S溶液(2.2mL，4.3mmol，2M在THF中)并且在65℃和氮氣下加熱1.5小時。冷卻至室溫并且小心滴加1N HCl/水1∶1(8mL)將反應猝滅，攪拌30-60分鐘。通過EtOAc萃取并且用飽和NaHCO3水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌。通過硅膠柱色譜純化，梯度為100％DCM至6％在DCM中的甲醇至5％在DCM中的(2N在MeOH中的NH3)，得到標題化合物(600mg，54％產(chǎn)率)。LCMS(ES)，m/z 261(M+1)。
制備124 4-二甲基氨基甲基-吡啶-2-基胺 A.2-氨基-N，N-二甲基-異煙酰胺 在0℃和氮氣下，將二甲基胺(13mL，26mmol，2M在THF中)滴加至LDA(7.3mL，13mmol，1.8M在醚/庚烷中)中。攪拌30分鐘并且加入2-氨基-4-吡啶-甲酸甲酯(2g，13mmol，在3mL無水THF和2mL無水醚中)。密封并且在85℃下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫并且用水將反應猝滅。用EtOAc稀釋并且分離上部有機層。進一步用飽和碳酸氫鈉水溶液和醚萃取水層，然后用DCM萃取水層。將所有有機層合并，干燥(MgSO4)并且濃縮。通過強陽離子交換(SCX)柱純化，得到粗產(chǎn)物，無需進一步純化即可用于下一步驟。LCMS(ES)，m/z 166(M+1)。
B.4-二甲基氨基甲基-吡啶-2-基胺 應用與制備3-嗎啉-4-基甲基-5-三氟甲基-苯基胺中描述的相同方法，得到預期化合物。無需色譜純化即可用于下一步驟。
制備125 4-環(huán)丙基-吡啶-2-基胺 A.4-環(huán)丙基-吡啶 向裝有無水THF(60mL)的3頸圓底燒瓶中加入吡啶(6.1mL，75mmol)并且冷卻至-20℃。加入CuI(463mg，2.5mmol)，然后通過注射器滴加氯甲酸乙酯(4.8mL，50mmol)并且攪拌。在相同的溫度下，歷經(jīng)10-15分鐘通過注射器滴加環(huán)丙基溴化鎂溶液(100mL，0.5M在醚中，50mmol)。在-20℃下攪拌15分鐘，然后在室溫下攪拌2小時。用醚(200mL)稀釋反應物并且在室溫下通過NH4Cl(20％水溶液)將反應猝滅。有機層用30-50mL20％NH4Cl/NH4OH(1∶1)緩沖液、水、10％HCl、水和飽和氯化鈉水溶液依次洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥并且濃縮，得到粗品橙-棕色/黃色油狀物。通過硅膠柱色譜純化，梯度為己烷至50％己烷/醚，得到二氫吡啶中間體。
將粗品二氫吡啶中間體(3.3g，約17mmol)與硫(純的，656mg，20mmol)在190-200℃下加熱100分鐘，同時蒸餾乙醇。乙醇除去完成后，真空蒸餾殘留物，得到標題化合物，30％產(chǎn)率(兩步)。LCMS(ES)，m/z 120(M+1)。
B.4-環(huán)丙基-吡啶-2-基胺 在150-160℃和氮氣下，將4-環(huán)丙基-吡啶(600mg，5mmol)、N，N-二甲基苯胺(1.4mL，11mmol)和NaNH2(50％在甲苯中，468mg，6mmol)在甲苯中回流過夜。將混合物冷卻并且用水和乙酸乙酯稀釋。用最少量的水萃取有機層。干燥有機層(無水MgSO4、Na2SO4和K2CO3的組合物)，濃縮并且通過硅膠柱色譜純化，得到標題化合物，12％產(chǎn)率。LCMS(ES)，m/z 135(M+1)。
按照類似于制備125的方法制備以下物質(zhì) 制備128 2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-[5-(1-甲基-環(huán)丙基)-[1，3，4]噻二唑-2-基]-乙酰胺 將(4-溴-2-氟-苯基)-乙酸(3.81g，16.35mmol)和5-(1-甲基-環(huán)丙基)-[1，3，4]噻二唑-2-基胺(2.54g，16.35mmol)在THF(45mL)中混合。在N2下加入4-甲基-嗎啉(2.16mL，19.62mmol)，然后加入4-(4，6-二甲氧基-[1，3，5]三嗪-2-基)-4-甲基-嗎啉-氯化物(5.43g，19.62mmol)。將反應混合物在N2下攪拌14小時。用乙酸乙酯/水萃取。用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮。將產(chǎn)生的固體用乙酸乙酯/己烷研磨，過濾并且干燥，得到松散的白色固體標題化合物(2.86g，47％)。MS(ES)，m/z370、372(M+1)。
制備129 4-(3-氨基-5-三氟甲基-苯甲?；?-哌嗪1-甲酸叔丁酯 A.4-(3-硝基-5-三氟甲基-苯甲?；?-哌嗪1-甲酸叔丁酯 按照與制備128相同的方法制備標題化合物。MS(ES)，m/z 402(M-1)。
B.4-(3-氨基-5-三氟甲基-苯甲?；?-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 在室溫下，用10％在活性炭上的鈀(400mg)將4-(3-硝基-5-三氟甲基-苯甲?；?-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(4.8g，11.9mmol)在甲醇(120mL)中氫化3小時。過濾并且濃縮，得到白色固體標題化合物(3.94g，10.55mmol，89％)。MS(ES)，m/z 372(M-1)。無需純化即可用于下一步驟。
按照類似于制備128的方法制備以下物質(zhì) 制備153 4-[7-(2-二乙基氨基甲基-吡啶-4-基)]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-2-氟-苯基胺 將二乙基-(4-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-吡啶-2-基甲基)-胺(1.00g，3.57mmol)、4-溴-2-氟-苯基胺(1.36g，7.13mmol)和乙酸鉀(0.700g，7.13mmol)在DMSO(4mL)中混合。用N2將混合物脫氣10分鐘。加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.250g，0.357mmol)，將反應混合物在N2和100℃下攪拌14小時。應用SCX柱(10g Varian bond elut)純化，用1∶1甲醇∶二氯甲烷洗脫，然后用1∶12M在甲醇中的NH3∶二氯甲烷洗脫。通過反相色譜純化，應用25cm×50.8mm(i.d.)柱，w/10微米顆粒；(MeCN/0.03％HClH2O(5∶95)至100％MeCN；30分鐘)。將獲得的化合物在乙酸乙酯和1N NaOH之間分配。有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到標題化合物(0.286g，21％)。MS(ES)，m/z 390(M+1)。
制備154 4-[4-(3-{4-[3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲基]-3-氟-苯基}-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-苯甲?；鵠-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 將4-(3-{4-[3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲基]-3-氟-苯基}-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-苯甲酸(2.00g，3.89mmol)、哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.09g，5.84mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.821g，4.28mmol)、三乙胺(1.63mL，11.68mmol)和1-羥基苯并三唑(0.579g，4.28mmol)在DMF(50mL)中混合。在室溫下攪拌14小時。在乙酸乙酯和1N NaOH之間分配，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮。將產(chǎn)生的固體在CH2Cl2/己烷中研磨，過濾并且干燥，得到類白色固體產(chǎn)物(1.53g，58％)。MS(ES)，m/z 683(M+1)。
按照類似于以上方法制備以下物質(zhì) 制備157 (4-{7-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-氨基甲酸叔丁酯 將[4-(7-硼酸-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-氨基甲酸叔丁酯(1.86g，5.07mmol)、(4-溴-苯基)-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮(1.6g，5.65mmol)、碳酸鈉(1.08g，10.14mmol)在1，4-二烷(50mL)和水(5mL)中混合。向混合物中鼓入氮氣5分鐘。加入四-(三苯膦)鈀(0)(0.29g，0.25mmol)。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至80℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。加入乙酸乙酯/水(300mL/100mL)。水相用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有機相用飽和氯化鈉水溶液(50mL)萃取，然后有機相經(jīng)無水硫酸鎂干燥。過濾有機相并且濃縮濾液，得到殘留物。通過色譜純化(己烷→50％乙酸乙酯/己烷→5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇→10％2N在二氯甲烷中的氨甲醇)，得到標題產(chǎn)物(0.87g，33％)。MS(ES)，m/z526(M+1)。
制備158 {4-[3-(4-氨基甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-吡啶-2-基甲基}-二乙基胺三鹽酸鹽 A.4-碘-2-甲基-吡啶 在氮氣下，將4-氯-2-甲基-吡啶(1.2g，9.4mmol)溶于THF(10mL)中。向反應物中滴加4M在二烷中的HCl(2.4mL，1.0當量)，得到白色沉淀。攪拌5分鐘，然后濃縮至干燥。向固體中加入碘化鈉(4.8g，3.4當量)和乙腈(40mL)并且在氮氣下回流過夜。用DCM稀釋，然后用K2CO3和NaHSO3溶液(分別約為10％和5％)洗滌。有機物經(jīng)MgSO4干燥，然后過濾并且濃縮。通過硅膠純化(己烷→9∶1己烷∶乙酸乙酯→4∶1己烷∶乙酸乙酯)，得到澄清油狀物(1.1g，53％)。MS(ES)，m/z 220.0(M+1)。
B.二乙基-(4-碘-吡啶-2-基甲基)-胺 在氮氣下，將4-碘-2-甲基-吡啶(1.1g，5mmol)、NBS(0.98g，1.1當量)和四氯化碳(50mL)在圓底燒瓶中混合。加入AIBN(82mg，0.1當量)并且將反應物在回流下加熱過夜。過濾反應物，用己烷洗滌。濃縮濾液至10-20mL體積。重溶于THF(20mL)中并且在氮氣下冷卻至0℃。通過注射器滴加二乙胺(1.04mL，2當量)并且在0℃下攪拌1小時。除去冰浴并且溫至室溫?？傆?小時后，濃縮至干燥并且通過硅膠純化(1∶1己烷∶乙酸乙酯→乙酸乙酯)，得到棕黃色液體(0.51g，35％歷經(jīng)兩步)。MS(ES)，m/z291.0(M+1)。
C.{4-[7-(2-二乙基氨基甲基-吡啶-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯 將{4-[7-(硼酸)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯(0.46g，1.3mmol)、二乙基-(4-碘-吡啶-2-基甲基)-胺(0.51g，1.4當量)、Na2CO3(0.265g在1.25mL H2O中)和DME(20mL)混合。用氮氣脫氣，然后加入四(三苯膦)鈀(72mg，5mol％)并且在80℃和氮氣下加熱過夜。直接上樣至VarianMegaElutSCX柱(10g柱，用甲醇預洗滌)，盡可能多的輕輕倒出Na2CO3。用甲醇沖洗以除去雜質(zhì)，然后粗產(chǎn)物用2M在甲醇中的NH3洗脫。真空濃縮溶液，然后通過硅膠色譜純化(乙酸乙酯→5％甲醇∶DCM→10％甲醇∶DCM)，得到黃色殘留物(0.246g，40％)。MS(ES)，m/z 486.2(M+1)。
D.{4-[3-(4-氨基甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-吡啶-2-基甲基}-二乙基-胺三鹽酸鹽 在氮氣下，將{4-[7-(2-二乙基氨基甲基-吡啶-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯(0.24g，0.49mmol)溶于二烷(10mL)中。向反應物中加入4M在二烷中的HCl(5mL)并且攪拌2小時。濃縮至干燥并且應用三HCl鹽粗品(0.321g，粗品)。MS(ES)，m/z 386.2(M+1)。
按照類似于制備158的方法制備以下物質(zhì) 制備162 7-[6-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-2-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶 A.1-(6-氯-吡啶-2-基)-丙-2-酮 將2-氯-6-甲基吡啶(15g，177mmol)、THF(120mL)加入至充分攪拌N2吹洗的RBF中并且在含有干冰/丙酮的真空瓶中冷卻至-78℃。歷經(jīng)15分鐘，通過加樣漏斗緩慢加入1.6M在二烷中的正BuLi(80mL，128mmol)。在-78℃下，將反應物混合30分鐘，然后歷經(jīng)10分鐘加入二甲基乙酰胺(15.3g，16.3mL，175mmol)。通過緩慢加入甲醇將反應猝滅。在減壓下通過除去溶劑進行濃縮。將殘留物與(1∶1)己烷∶EtOAc混合并且過濾。將濾液分為2份在(120g，ISCO)SiO2上進行色譜，用20％至50％EtOAc(用己烷平衡)梯度洗脫。在減壓下除去溶劑，得到金色油狀物6.97g(35.2％)并且可以回收5.6g 2-氯-6-甲基吡啶。MS(ES)，m/z170(M+1)。
B.1-(6-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-吡啶-2-基)-丙-2-酮 應用類似于制備21步驟A的條件，從1-(6-氯-吡啶-2-基)-丙-2-酮和7-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶制備。MS(ES)，m/z 170(M+1)。
C.7-[6-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-2-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶 在氮氣下，在充分混合的圓底燒瓶中裝入1-(6-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基-吡啶-2-基)-丙-2-酮(1.8g，7.2mmol)、嗎啉單HCl鹽(16g，129mmol)、3分子篩(粉末狀，在110℃下真空箱干燥24小時，3.6g)、甲醇(200mL)和1M在THF中的NaCNBH3溶液(12.9mL，12.9mmol)。在室溫下攪拌24小時。在減壓下通過硅藻土過濾除去溶劑。溶于DCM中并且用5NNaOH調(diào)節(jié)pH至10并且用DCM(5×)萃取。在減壓下濃縮DCM并且在硅膠(120g，ISCO)上進行色譜，用0％至10％2M在MeOH中的NH3(用DCM平衡)慢梯度洗脫。在減壓下除去溶劑，得到澄清油狀物1.67g(72％)。MS(ES)，m/z 323(M+1)。
制備163 7-[6-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-3-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶 按照類似于制備7-[6-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-2-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶的方法制備。在第一步中LDA與原料5-溴-2-甲基吡啶一起應用。MS(ES)，m/z 323(M+1)。
制備164 4-溴-2-氟-苯基乙酸叔丁酯 將4-溴-2-氟-苯基乙酸(15g，0.064mol)、二氯甲烷(30mL)和濃硫酸(1.1mL)在2L不銹鋼Parr容器中混合。將容器和內(nèi)容物在干冰-丙酮浴中冷卻。用干冰-丙酮冷凝器新蒸餾異丁烯(60mL)并且將異丁烯加入至冷卻的Parr容器中。密封并且用氮氣(20psig)將容器加壓，使反應物溫至室溫的同時攪拌并且在室溫下繼續(xù)攪拌18小時。用干冰將容器冷卻至10-15℃，放氣并且小心加入150mL冰冷的飽和碳酸鈉溶液并且混合。輕輕倒出容器內(nèi)容物，用二氯甲烷(100mL)沖洗容器，攪拌混合物并且分離各相。水相每次用100mL二氯甲烷萃取兩次，合并有機層并且用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并且濃縮，得到18.61g(90％)標題化合物，為淡橙色油狀物。MS(ES)m/z 288/290(M+1)。
制備165 4-叔丁基-6-嗎啉-4-基甲基-吡啶-2-基胺 A.(4-叔丁基-吡啶-2-基)-嗎啉-4-基-甲酮 將4-叔丁基-吡啶-2-甲酸鹽酸鹽(11.14g，51.8mmol)懸浮于50mL二氯甲烷中，加入4-甲基嗎啉(10.48g，11.4mL，104mmol)，攪拌，加入100mL THF并且將懸浮液攪拌數(shù)分鐘。向攪拌的懸浮液中加入N，N’-羰基二咪唑(8.4g，51.8mmol)，注意適量排出氣體并且輕的(light)懸浮液在室溫下攪拌30-90分鐘。通過移液管加入嗎啉(13.54g，13.61mL，155mmol)，在室溫下攪拌過夜。懸浮液用400mL二氯甲烷稀釋，用400mL飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌并且水相用100mL二氯甲烷反萃取。合并有機層并且用300mL飽和碳酸氫鈉溶液洗滌(1次)并且用飽和氯化鈉水溶液稀釋(3次)。有機層經(jīng)MgSO4干燥，濃縮得到油狀物并且在400g硅膠柱上純化，梯度為歷經(jīng)20分鐘0→10％在EtOAc中的丙酮。合并，濃縮并且干燥級分，得到10.24g粘稠無色油狀物。LCMS(ES)，m/z 249(M+1)。
B.(4-叔丁基-1-氧基-吡啶-2-基)-嗎啉-4-基-甲酮 將(4-叔丁基-吡啶-2-基)-嗎啉-4-基-甲酮(10.24g，41.2mmol)溶于二氯甲烷(21mL)中，加入甲基三氧代錸(VII)(MTO，620mg，2.48mmol，0.06當量)并且攪拌，得到淡橄欖綠色溶液。用室溫水浴套住燒瓶，通過移液管加入8.5mL過氧化氫水溶液，得到淡黃色乳狀液，將其排出氣體。在室溫下將乳狀液攪拌過夜，然后加入MnO2(25mg)的5mL水懸浮液以猝滅過量過氧化物。攪拌45-60分鐘直至氣體排出減少，混合物通過濾紙過濾，然后在真空下蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到粘稠黃色油狀物。在400g硅膠柱上純化，梯度為歷經(jīng)20分鐘0→20％在丙酮中的甲醇。合并，濃縮并且干燥適當?shù)募壏?，得?.49g(87％)標題化合物，為粘稠泡沫狀物。LCMS(ES)，m/z 265(M+1)。
C.(6-氨基-4-叔丁基-吡啶-2-基)-嗎啉-4-基-甲酮 將(4-叔丁基-1-氧基-吡啶-2-基)-嗎啉4-基-甲酮(9.8g，37mmol)溶于無水吡啶(29.33g，30mL，370mmol)中，加入對甲苯磺酰氯(10.58g，55.5mmol，1.5當量)，在燒瓶上裝上回流冷凝器并且將澄清的棕-紅色溶液在氮氣下加熱至45℃過夜。在50℃浴溫下真空除去揮發(fā)物，得到粘稠棕-紅色油狀物。在徹底攪拌下將該油狀物溶于乙醇胺(55mL)中，得到深棕-紅色溶液。用水將燒瓶冷卻以在約為室溫下保持反應并且攪拌30-60分鐘?；旌衔镉?00mL冷水和50mL 1N NaOH稀釋，攪拌并且加入一些大塊冰。攪拌漿液并且用玻璃漏斗過濾棕黃-黃色固體。將濾餅溶于二氯甲烷(150mL)中，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到橙-白色固體。在400g硅膠柱上純化該固體，應用梯度為歷經(jīng)30分鐘0→5％在二氯甲烷中的甲醇。濃縮級分并且在高真空下干燥，得到6.02g類白色固體。從濾液(以上)中萃取其他物質(zhì)(每次用200mL二氯甲烷萃取3次)。合并有機層，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮得到棕-橙色油狀物。將該油狀物溶于15mL二氯甲烷中并且應用于400g硅膠柱上并且用純丙酮洗脫產(chǎn)物。濃縮并且干燥純凈級分，得到2.0g產(chǎn)物。純回收8.02g(82％)標題化合物。LCMS(ES)，m/z264(M+1)。
D.4-叔丁基-6-嗎啉-4-基甲基-吡啶-2-基胺 將(6-氨基-4-叔丁基-吡啶-2-基)-嗎啉-4-基-甲酮(6.02g，22.86mmol)懸浮于40mL無水THF中。在室溫下滴加2M BH3-Me2S絡合物的THF溶液(34.3mL，68.6mmol，3當量)。在加入BH3-Me2S/THF溶液時，懸浮液在完成加入后變成澄清和亮黃色。在室溫和氮氣氣氛下攪拌過夜。通過緩慢加入MeOH(24mL)小心地將反應猝滅，在60℃下攪拌3小時并且真空濃縮。殘留物在300g硅膠柱上純化，梯度為歷經(jīng)2分鐘0→2％在二氯甲烷中的甲醇，然后歷經(jīng)40分鐘2→40％在二氯甲烷中的甲醇。濃縮并且干燥純凈的級分，得到2.0g(35％)標題化合物，為白色固體。LCMS(ES)，m/z 250(M+1)。
制備166 N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙酰胺 A.2-(4-溴-苯基)-N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺 將4-溴-苯基乙酸(5g，23.3mmol)溶于125mL二氯甲烷中。加入1mLDMF，攪拌得到澄清溶液，然后通過注射器分批加入草酰氯(3.25g，2.23mL，25.5mmol)并且在室溫下攪拌15-30分鐘直至停止排氣。通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去揮發(fā)物，得到澄清黃色油狀物。將該油狀物溶于100mL戊烯穩(wěn)定的氯仿中，在冰上冷凍并且在燒瓶上安裝滴液漏斗。將4-氨基-2-三氟甲基-芐腈(4.65g，25mmol)和吡啶(6.05g，6.19mL，76.5mmol)的200mL戊烯穩(wěn)定的氯仿裝入滴液漏斗中。將芐腈溶液加入至冷卻的酰氯溶液中，歷經(jīng)30分鐘進行攪拌，除去冰浴并且在室溫下攪拌過夜。將反應混合物用200mL二氯甲烷稀釋，每次用250mL 1N NaHSO4洗滌2次，用飽和氯化鈉水溶液洗滌1次，然后經(jīng)MgSO4干燥并且濃縮，得到棕色固體。在Biotage 75L硅膠柱上純化(4.5∶4.5∶1 CH2Cl2∶己烷∶乙醚)，得到4.33g(48％)標題化合物，為淡黃-乳白色固體。LCMS(ES)，m/z 381、383(M-1)。
B.N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙酰胺 將2-(4-溴-苯基)-N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(4.23g，11mmol)溶于125mL二烷中，加入二(頻哪醇)二硼(3.5g，13.8mmol)、三環(huán)己基膦(386mg，1.38mmol)和無水乙酸鉀(1.62g，16.5mmol)。向混合物中鼓入氮氣至少15分鐘以脫氧，然后加入乙酸鈀(II)(123mg，0.55mmol)，在燒瓶上裝上回流冷凝器并且在80℃和氮氣氣氛下加熱4小時。冷卻反應混合物并且將其通過50g硅膠柱，用400mL EtOAc。濃縮澄清的棕色洗脫液，得到棕黃-灰色固體并且從二氯甲烷-己烷中重結(jié)晶，得到3.7g(78％)標題化合物，為棕黃-灰色晶體。LCMS(ES)，m/z 429(M-1)。
制備167 2-(4-溴-苯基)-N-(6-甲基-4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺 將4-溴-苯基乙酸(660mg，3.07mmol)和6-甲基-4-三氟甲基-吡啶-2-基胺(500mg，2.84mmol)溶于10mL干燥的THF中。加入4-甲基-嗎啉(345mg，0.375mL，3.4mmol)，在氮氣氣氛下攪拌數(shù)分鐘，然后加入DMTMM(865mg，3.12mmol)并且將淡黃色漿液攪拌過夜。用90mLEtOAc稀釋漿液并且用飽和NaHCO3水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌兩次，然后有機層經(jīng)MgSO4干燥并且濃縮，得到乳白色結(jié)晶固體。在120g硅膠柱上純化該固體，用0→5％在二氯甲烷中的EtOAc，得到660mg(62％)標題化合物，為白色結(jié)晶固體。LCMS(ES)，m/z 373/375(M+1)。
制備168 4-叔丁基-6-甲基-吡啶-2-基胺 A.2-甲基-4-叔丁基-吡啶 在冰浴中冷卻甲基鋰的醚溶液(200mL，1.6M，320.00mmol)并且滴加4-叔丁基-吡啶(20.28g，150.00mmol)。一旦加入底物，將反應物溫至環(huán)境溫度達3小時。將反應物濃縮至接近干燥以除去醚，然后加入無水甲苯(200mL)并且加熱至回流達20-21小時。在冰浴中冷卻，同時緩慢并小心地加入冰以將反應猝滅。加入水(200mL)，然后水溶液用乙酸乙酯(3×250mL)萃取并且分層。合并，干燥，過濾并且濃縮有機萃取物，得到油狀物。油狀物在硅膠上進行色譜，梯度為歷經(jīng)25分鐘0→50％乙酸乙酯己烷，得到標題化合物(16.60g，111.23mmol)。MS(ESI)，m/z 150(M+1)。
B.4-叔丁基-2-甲基-吡啶1-氧化物 在劇烈攪拌下，將2-甲基-4-叔丁基-吡啶(16.60g，111.23mmol)溶于二氯甲烷(80mL)中并且加入甲基三氧代錸(VII)(0.139g，0.56mmol)。在室溫下，加入30％過氧化氫(40mL)并且劇烈攪拌18小時。通過滴加二氧化錳水溶液(100mg在20mL中)將反應猝滅。停止排氣后，水溶液變成灰色混濁液，分層并且水層用二氯甲烷(3×100mL)重新萃取。將有機層合并，干燥、過濾并且濃縮，得到分析純的標題化合物(16.60g，100.61mmol)。MS(ESI)，m/z 166(M+1)。
C.2-氯-6-甲基-4-叔丁基-吡啶 將磷酰氯(15mL)加入至4-叔丁基-2-甲基-吡啶1-氧化物(2.00g，12.10mmol)中并且加熱至100℃達36小時。蒸發(fā)過量的磷酰氯。在攪拌下用冰和水小心處理油狀物并且用碳酸氫鹽水溶液處理使其為堿性。用二氯甲烷(3×75mL)萃取并且合并，干燥，過濾并且濃縮。將粗產(chǎn)物在硅膠上進行色譜，應用梯度(0→5→8％)在二氯甲烷中的乙酸乙酯，得到標題化合物(0.82g，4.46mmol)。MS(ESI)，m/z 184(M+1)。
D.4-叔丁基-6-甲基-吡啶-2-基胺 在圓底燒瓶中，將2-氯-6-甲基-4-叔丁基-吡啶(0.18g，1.00mmol)、二苯酮亞胺(0.22g，1.2mmol)、叔丁醇鈉(0.14g，1.4mmol)和BINAP(0.09g，0.02mmol)混合并且懸浮于甲苯中。向懸浮液中鼓入氮氣5分鐘，然后加入Pd2(dba)3(0.03g，0.03mmol)并且加熱至90℃達18小時。將粗反應物上樣至硅膠中并且用(0→3％)在二氯甲烷中的甲醇洗脫，得到亞胺中間體，然后將其溶于四氫呋喃(6mL)和5N HCl(6mL)中并且在60℃下攪拌2.5小時。濃縮反應物至干燥，然后重溶于甲醇中并且經(jīng)SCX，得到標題化合物(0.07g，0.43mmol)。MS(ESI)，m/z 165(M+1)。
制備169 4-叔丁基-6-二甲基氨基甲基-吡啶-2-基胺 A.2-溴甲基-4-叔丁基-6-氯-吡啶 將2-氯-6-甲基-4-叔丁基-吡啶(3.00g，16.33mmol)、N-溴琥珀酰亞胺(3.20g，17.97mmol)和AIBN(0.03g，0.16mmol)溶于四氯化碳(60mL)中并且加熱至回流。加熱6小時后，在環(huán)境溫度下將內(nèi)容物攪拌過夜。然后將內(nèi)容物濃縮至干燥并且干燥上樣至硅膠填料上并且用二氯甲烷洗脫，得到標題化合物(1.90g，7.23mmol)。MS(ES)，m/z 263(M+1)。
B.(4-叔丁基-6-氯-吡啶-2-基甲基)-二甲基胺 將2N二甲基胺(9.00mL，18.08mmol)的四氫呋喃、N，N-二異丙基乙基胺(2.80g，3.80mL，21.69mmol)溶液攪拌，同時加入2-溴甲基-4-叔丁基-6-氯-吡啶(1.90g，7.23mmol)的四氫呋喃(20mL)溶液。在環(huán)境溫度下攪拌2.5小時，反應物用碳酸氫鈉水溶液(80mL)稀釋并且水層用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。將有機物合并，干燥，過濾并且濃縮，得到標題化合物(99％)(1.64g，7.23mmol)。MS(ES)，m/z 227(M+1)。
C.芐基-(4-叔丁基-6-二甲基氨基甲基-吡啶-2-基)-胺 按照類似于制備168D的方法，用芐基胺而不是二苯酮亞胺處理(4-叔丁基-6-氯-吡啶-2-基甲基)-二甲基胺(1.64g，7.23mmol)，進行色譜后得到(0.88g，2.96mmol) D.4-叔丁基-6-二甲基氨基甲基-吡啶-2-基胺 在室溫下，將濃硫酸(20mL)加入至芐基-(4-叔丁基-6-二甲基氨基甲基-吡啶-2-基)-胺(0.88g，2.96mmol)中并且攪拌1.5小時。用飽和的碳酸氫鹽溶液小心調(diào)節(jié)水溶液pH值。水相用乙酸乙酯(3×75mL)萃取并且合并，干燥，過濾并且濃縮，得到殘留物。將殘留物溶于甲醇中并且將該物質(zhì)進行SCX色譜。濃縮甲醇氨洗脫液并且將胺進行填料色譜，得到標題化合物(0.56g，2.7mmol)。MS(ES)，m/z 208(M+1)。
應用類似于制備169的方法制備以下中間體 按照類似于制備128的方法制備以下物質(zhì) 制備174 N-(4-叔丁基-6-甲基-吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺 A.[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸叔丁酯 如在制備153中描述的，將4-溴-2-氟-苯基乙酸叔丁酯(3.65g，18.68mmol)與7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(5.40g，18.68mmol)偶聯(lián)。MS(ES)，m/z 404(M+1)。
B.[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸二鹽酸鹽 將[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸叔丁酯(1.36g，3.369mmol)懸浮于水(8mL)和4 N在二烷中的鹽酸(40mL)中并且在環(huán)境溫度下攪拌3小時。真空濃縮，定量得到標題化合物(1.42g，3.69mmol)。MS(ES)，m/z 348(M+1)。
C.N-(4-叔丁基-6-甲基-吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺 將[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸二鹽酸鹽(0.66g，1.57mmol)、4-叔丁基-6-甲基-吡啶-2-基-胺(0.26g，1.57mmol)、HATU(0.72g，1.57mmol)和二異丙基乙基胺(8.12g，11.2mL，6.28mmol)在DMF(10mL)中混合并且在環(huán)境溫度下攪拌3小時。將反應物傾倒至預洗滌(甲醇)的Varian SCX柱(25g)上并且每次用30mL二氯甲烷(2×)和甲醇(3×)洗滌該柱。產(chǎn)物用2N甲醇氨(75mL)洗脫并且將溶液濃縮至干燥。將粗產(chǎn)物在硅膠上進行色譜，應用0-5％在二氯甲烷中的甲醇。從二氯甲烷/醚/己烷中重結(jié)晶，得到N-(4-叔丁基-6-甲基-吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺(0.17g)。MS(ES)，m/z494(M+1)。
制備175 {4-[3-(4-氨基甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-苯基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮，二鹽酸鹽 將(4-{7-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-氨基甲酸叔丁酯(0.87g，1.65mmol)和4N在1，4-二烷中的HCl(15mL，60mmol)在1，4-二烷(35mL)中混合并且攪拌過夜(16小時)。濃縮漿液得到殘留物。將殘留物溶于甲醇(50mL)中并且濃縮，得到標題化合物(0.90g，100％)。MS(ES)，m/z 426(M+1，游離堿)。
制備176 2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-(5-叔丁基-[1，3，4]噻二唑-2-基)-乙酰胺 將(4-溴-2-氟-苯基)-乙酸(1.10g，4.72mmol)和N-(5-叔丁基-[1，3，4]噻二唑-2-基)胺(0.89g，5.67mmol)溶于無水四氫呋喃(10mL)中。加入N-甲基嗎啉(0.62mL，5.67mmol)和DMTMM(1.57g，5.67mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌2小時。濃縮得到固體。加入水(40mL)并且劇烈攪拌10分鐘。將白色固體過濾并且從乙酸乙酯和己烷中重結(jié)晶，得到1.13g產(chǎn)物，為白色固體。濃縮濾液并且通過快速硅膠色譜純化(0-20％乙酸乙酯/己烷)，進一步得到0.51g，合并產(chǎn)量為1.64g(4.39mmol，93％)。MS(ES)，m/z372/374(M+1)。
實施例1 1-(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[4-(7-噻吩-3-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-脲
將4-(7-噻吩-3-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基胺(0.058g，0.19mmol)、(5-叔丁基-2-對甲苯基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.093g，0.23mmol)和二異丙基乙基胺(0.071g，0.55mmol)溶于DMSO(3.6mL)中。將混合物在62℃下加熱8小時。溶劑蒸發(fā)后，反應物用水和乙酸乙酯稀釋。水相用乙酸乙酯萃取并且將合并的有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌并且蒸發(fā)至干燥。殘留物通過硅膠柱色譜純化(二氯甲烷/乙酸乙酯梯度)，得到0.023g(21％產(chǎn)率)預期化合物MS(ES)，m/z 561(M+1)。
按照類似于實施例1的方法制備以下物質(zhì) a)70℃，18小時。通過預洗滌的SCX柱；在硅膠上進行色譜；并且在含痕量MeOH的EtOAc中制成漿液。
實施例63 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(2-氟-4-{7-[4-(4-異丙基-哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲
將1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(2-氟-4-{7-[4-(4-哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲鹽酸鹽(0.290g，0.469mmol)溶于甲醇(5mL)和丙酮(0.041mL，0.563mmol)中。加入乙酸(0.032mL，0.563mmol)，將混合物攪拌5分鐘。加入氰基硼氫化鈉(0.053g，0.845mmol)。將混合物在室溫下攪拌14小時。濃縮至干燥并且用1N HCl(5mL)將反應猝滅。在乙酸乙酯和1N NaOH之間分配，用飽和氯化鈉水溶液洗滌，有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮。通過柱色譜純化(己烷→5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的2M在甲醇中的NH3)，得到產(chǎn)物(0.019g，7％)。MS(ES)，m/z 624(M+1)。
實施例64 1-{4-[7-(4-甲磺酰基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
在氮氣環(huán)境和室溫下，將4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基胺(2.37g，6.28mmol)和二異丙基乙基胺(2.44g，3.28mL，18.84mmol)溶于二甲亞砜中。加入3-三氟甲基苯基異氰酸酯(1.17g，6.28mmol)并且將混合物攪拌2.5小時。將反應物傾倒在甲醇預洗滌的Varian SCX柱(50g)上。用二氯甲烷、1∶1甲醇/二氯甲烷和甲醇(每次150mL)洗滌該柱。將標題化合物用2N NH3/甲醇(300mL)洗脫。將甲醇溶液濃縮至干燥并且在硅膠上進行色譜，應用0→3→5→10％甲醇/二氯甲烷，分別歷經(jīng)4，5，30分鐘。將產(chǎn)物溶于熱的CHCl3(65mL)中，然后用己烷(5mL)處理并且冷卻。將獲得的沉淀真空干燥，得到產(chǎn)物(2.33g，66％)。MS(ES)，m/z565(M+1)。
按照類似于實施例64的方法制備以下物質(zhì) 實施例99 1-(3-氯-苯基)-3-{4-[7-(6-哌嗪-1-基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-脲
A.1-{4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 用類似于實施例55的方法制備。MS(ES)，m/z 458(M+1)。
B.1-(3-氯-苯基)-3-{4-[7-(6-哌嗪-1-基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基]-脲 將1-{4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲(270mg，.41mmol)、哌嗪(53mg。0.62mmol)、DMSO(12mL)、K2CO3(283mg，2.1mmol)裝入帶隔膜帽的小瓶中。加熱至70℃并且混合24小時。冷卻并且加入水。溶于MeOH中并且用Varian SCX(25g)柱(用水和甲醇預洗滌)純化，產(chǎn)物用(15％)2N在甲醇中的NH3/(85％)DCM洗脫。在減壓下蒸發(fā)包含級分的產(chǎn)物。應用(40g，ISCO)SiO2進行色譜，用梯度為0％至5％2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)進行洗脫。蒸發(fā)溶劑，在40℃下真空干燥48小時，得到標題化合物29.1mg(13.5％)。524.0(ES)，m/z(M+1)。
實施例100 1-(3-叔丁基-苯基)-3-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-脲
將光氣(20％在甲苯中，3.2mL)溶于CHCl3中。在0℃下向冷卻的溶液中滴加3-叔丁基苯胺(0.149g，1.0mmol)和三乙胺(0.202g，2.0mmol)的CHCl3溶液。完成后將混合物在室溫下攪拌6小時。通入氮氣流除去過量的光氣，然后蒸發(fā)。再用甲苯蒸發(fā)至干燥。粗品氨基甲酰氯無需純化用于下一步驟。
將上述物質(zhì)溶于CHCl3中并且在冰浴中冷卻。向溶液中加入7-[(4-吡啶基)-咪唑并吡啶-3-基]-4-苯胺(0.114g，0.40mmol)和三乙胺(0.202g)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。用CHCl3稀釋。調(diào)節(jié)溶液pH至pH4-5并且用CHCl3萃取并且有機層用飽和NaCl溶液洗滌。將合并的有機層濃縮并且在硅膠上進行色譜，得到標題化合物，105mg(產(chǎn)率57％)。MS(ES)，m/z462(M+1)。
按照類似于實施例100的方法制備以下物質(zhì) 實施例106 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-2-三氟甲基-苯基]-脲
在氮氣下，將4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-2-三氟甲基-苯基胺(0.4g。1.1mmol)溶于DCM(40mL)中。加入三乙胺(0.39mL，2.5當量)，然后小心加入三光氣(0.13g，0.4當量)。在室溫下15分鐘后，加入5-叔丁基-異唑-3-基胺(0.19g，1.2當量)并且在室溫下攪拌2天。用水將反應猝滅并且用乙酸乙酯稀釋。有機物用1N NaOH洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物經(jīng)MgSO4干燥，然后過濾并且濃縮。通過反相純化(5％MeCN∶0.03％在水中的HCl→65％MeCN∶0.03％在水中的HCl)。包含級分的產(chǎn)物用乙酸乙酯稀釋，然后用1N NaOH洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物經(jīng)MgSO4干燥，然后過濾并且濃縮，得到游離堿(0.33g，類白色固體，56％)。MS(ES)，m/z 521.1(M+1)。
按照類似于實施例106的方法制備以下物質(zhì) 實施例118 1-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2H-吡唑-3-基)-3-{4-[7-(4-甲磺酰基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲
A.1-{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2H-吡唑-3-基}-3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲 按照類似于實施例1的方法，從4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基胺和{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2H-吡唑-3-基}-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯制備標題化合物。MS(ES)，m/z 701(M+1)。
B.1-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2H-吡唑-3-基)-3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲 在N2下，在圓底燒瓶中將1-{5-叔丁基-2-[2-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基)-乙基]-2H-吡唑-3-基}-3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲(0.26g，0.37mmol)溶于THF(5mL)中。通過注射器加入TBAF(0.41mL 1M THF溶液，1.1當量)并且將反應物在室溫下攪拌20分鐘。將反應物直接上樣至硅膠柱上并且純化(EtOAc至5％甲醇∶DCM至10％2M在MeOH中的NH3∶DCM)，得到淡黃色固體(0.168g，77％)。MS(ES)，m/z 587(M+1)。
實施例119 1-[5-叔丁基-2-(2-嗎啉-4-基-乙基)-2H-吡唑-3-基]-3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲
A.甲磺酸2-[3-叔丁基-5-(3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲基)-吡唑-1-基]-乙酯 在N2下，在圓底燒瓶中將1-[5-叔丁基-2-(2-羥基-乙基)-2H-吡唑-3-基]-3-{4-[7-(4-甲磺酰基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲(0.2g，0.34mmol)和三乙胺(0.48mL，10當量)溶于DCM(20mL)中。滴加甲磺酰氯(0.13mL，4.8當量)并且將反應物在室溫下攪拌15分鐘。將粗品反應物直接上樣至硅膠上并且純化(EtOAc至5％MeOH∶DCM)，得到黃色固體(0.22g，97％)。MS(ES)，m/z 665(M+1)。
B.1-[5-叔丁基-2-(2-嗎啉-4-基-乙基)-2H-吡唑-3-基]-3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲 在圓底燒瓶中，將甲磺酸2-[3-叔丁基-5-(3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲基)-吡唑-1-基]-乙酯(75mg，0.11mmol)溶于DMF(2mL)中。加入嗎啉(0.1mL，10當量)并且將反應物在N2下加熱至70℃過夜。反應物用EtOAc稀釋，然后用水、1N NaOH和飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮?；衔镌诠枘z柱上純化(EtOAc至5％MeOH∶DCM至10％2 M在MeOH中的NH3∶DCM)，得到淡黃色固體(46mg，62％)。MS(ES)，m/z 656(M+1)。
按照類似于實施例119的方法制備以下物質(zhì) 實施例121 1-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
A.4-{[3-(3-三氟甲基-苯基)-脲基]-苯基}-硼酸 將100mL圓底燒瓶裝上隔膜、N2針頭和磁力攪拌器，加入(4-氨基苯基)-硼酸鹽酸鹽(2.46g，14.2mmol)、二異丙基乙基胺(3.6g，4.7mL，28.4mmol)、CH2Cl2(干燥)(40mL)、DMSO(2mL)。用N2將反應物脫氧4分鐘并且在室溫下加入3-三氟甲基苯基-異氰酸酯(15.7mg，0.012mL，0.084mmol)(17mL)溶液。將混合物攪拌24小時。在減壓下蒸發(fā)混合物，得到棕黃色固體7.6g并且其可以直接用于下一步反應。MS(ES)，m/z324(M+1)。
B.1-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 將100mL圓底燒瓶裝上隔膜、N2氣氛、冷凝器、磁力攪拌器、溫控加熱套，加入4-{[3-(3-三氟甲基苯基)-脲基]-苯基}-硼酸(6.10g，18.8mmol)、7-氯-3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶(5.0g，18mmol)、Cs2CO3(13.19g，40.5mmol)、DMF(70mL)、EtOH(12mL)。用N2將混合物脫氧并且加入Pd(PPh3)4(417mg)。將混合物加熱至70℃達18小時。將反應物傾倒入冰水(400mL)中并且混合15分鐘。過濾固體。將粗產(chǎn)物溶于CH2Cl2中并且應用SiO2進行色譜，用梯度為0％至8％2 M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)進行洗脫。將半純的產(chǎn)物在MeOH/CH2Cl2中制成漿液，然后用最小量的己烷研磨，得到黃色固體。真空箱干燥固體，得到標題化合物3.38g。從濃縮濾液得到另外的產(chǎn)物(1.0g)。MS(ES)，m/z 431(M+1)。
C.1-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 在5mL帶隔膜帽的小瓶中裝入小的磁力攪拌棒、1-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲(250mg，0.58mmol)、4-吡啶硼酸(77.4mg，0.63mmol，1.1當量)、S-phos(236mg)、Pd(OAc)2(60mg)、K3PO4(237mg，1.12mmol)、1，4-二烷∶H2O 2∶1。將反應物加熱至50℃達24小時，冷卻并且用Varian SCX(10g)柱(用水和甲醇預洗陂)純化并且產(chǎn)物用2N在甲醇中的NH3洗脫。在減壓下蒸發(fā)包含級分的產(chǎn)物并且將其溶于CH2Cl2中并且應用SiO2進行色譜，用梯度為0％至10％的2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)進行洗脫。在減壓下蒸發(fā)包含產(chǎn)物的級分，然后在40℃下真空箱內(nèi)干燥，得到黃色固體標題化合物61.8mg(22.5％)。MS(ES)，m/z 474(M+1)。
按照類似于實施例121C的方法制備以下物質(zhì) 實施例124 1-{4-[7-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
A.1-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 將50mL燒瓶中裝入磁力攪拌棒、4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基胺(720mg，2.79mmol)、二異丙基乙基胺(723mg，0.93mL，5.6mmol)和THF(28mL)。將N2通入燒瓶并且通過注射器加入3-三氟甲基苯基-異氰酸酯(1.04g，0.77mL，5.6mmol)。將反應物在室溫下混合24小時。真空蒸發(fā)反應物并且將殘留物應用SiO2進行色譜，用梯度為1％至15％的2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)進行洗脫。在減壓下蒸發(fā)包含產(chǎn)物的級分并且在40℃下真空箱內(nèi)干燥獲得的乳白色固體，得到標題化合物624mg(50.3％)。MS(ES)，m/z 445.3(M+1)。
B.1-{4-[7-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 在5mL帶隔膜帽的小瓶中裝入小的磁力攪拌棒、1-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲(208mg，0.46mmol)、6-甲氧基-吡啶-3-基-硼酸(0.51mmol，1.1當量)、2-二環(huán)己基膦基-2’，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯(23.6mg)、Pd(OAc)2(5mg)、K3PO4(218mg，1.03mmol)、二烷/H2O 2∶1(3mL)。反應物用N2脫氧并且加熱至40℃達24小時。冷卻混合物并且倒入含CH2Cl2(45mL)和H2O(2mL)的分液漏斗中。萃取CH2Cl2并且在減壓下蒸發(fā)。將殘留物與CH2Cl2和少量丙酮混合。將產(chǎn)生的固體過濾并且用少量CH2Cl2沖洗并且風干。在40℃下真空箱內(nèi)干燥固體，得到標題化合物，56％產(chǎn)率。MS(ES)，m/z 518(M+1)。
按照類似于實施例124B的方法制備以下物質(zhì) 實施例126 1-(5-叔丁基-2H-吡唑-3-基)-3-{4-[7-(4-甲磺酰基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-脲
向圓底燒瓶中加入1-(4-溴-苯基)-3-(5-叔丁基-2-H-吡唑-3-基)-脲(0.41g，1.2mmol)、三環(huán)己基膦(24mg，0.07當量)、乙酸鉀(0.36g，3當量)、二(頻哪醇)二硼(0.34g，1.1當量)和DMSO(5mL)。將該混合物用N2徹底脫氧，然后加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(33mg，0.03當量)并且加熱至100℃過夜。反應物用EtOAc稀釋并且用水洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機層通過硅藻土填料，然后經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到殘留物(0.72g)。出現(xiàn)MS(ES)，m/z 385.4(M+1)。向該殘留物中加入3-碘-7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.25g，0.62mmol)、碳酸鉀(0.26g，1.86mmol)、二烷(10mL)和水(5mL)。將該混合物用N2徹底脫氧，然后加入二氯-二(三苯膦)鈀(II)(13mg，0.03當量)并且將反應物在N2下回流過夜。濃縮反應物至干燥并且在丙酮中制成漿液并且過濾除去不溶物。濃縮濾液，然后通過硅膠柱純化(1∶1己烷∶EtOAc至1∶2己烷∶EtOAc至EtOAc至5％MeOH∶DCM)，得到粗產(chǎn)物。用DCM研磨，得到淡黃色固體(0.059g，18％)。MS(ES)，m/z 529(M+1)。
按照類似于實施例126的方法制備以下物質(zhì) 實施例143 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[2-(3-二乙基氨基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-2-氟-苯基)-脲
A.1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[2-(3，3-二乙氧基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-2-氟-苯基)-脲 按照類似于實施例99的方法制備。LCMS(ES)，m/z 601(M+1)。
B.1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(2-氟-4-{7-[2-(3-氧代-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲鹽酸鹽 將1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[2-(3，3-二乙氧基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-2-氟-苯基)-脲(1g，1.7mmol)在乙酸乙酯(35mL)中制成漿液。加入1N HCl水溶液(3.3mL，2當量)并且在室溫下攪拌。1.5小時后，濃縮至干燥，得到橙色固體(0.98g，105％)。MS(ES)，m/z527(M+1)。
C.1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[2-(3-二乙基氨基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-2-氟-苯基)-脲 在氮氣下，將1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(2-氟-4-{7-[2-(3-氧代-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲鹽酸鹽(0.5g，0.89mmol)溶于乙酸(20mL)中。加入二乙胺(0.46mL，5當量)并且在室溫下攪拌過夜。早晨，加入三乙酰氧基硼氫化鈉(0.38g，2當量)并且攪拌20分鐘。這時加入過量二乙胺并且在室溫下攪拌過夜。濃縮至干燥并且通過硅膠純化(10％甲醇∶DCM)，得到不純的產(chǎn)物。通過反相純化(25％MeCN∶0.03％在水中的HCl→100％MeCN)。包含級分的產(chǎn)物用乙酸乙酯稀釋，然后用1N NaOH洗滌，然后用飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到游離堿(0.083g，16％)，為黃色固體。LCMS(ES)，m/z 584.2(M+1)。
按照類似于實施例143的方法制備以下物質(zhì) 實施例147 1-(4-{7-[2-(2-氨基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-2-氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲二鹽酸鹽
A.{2-[4-(3-{4-[3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲基]-3-氟-苯基}-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-吡啶-2-基]-1-甲基-乙基}-氨基甲酸叔丁酯 按照類似于實施例99的方法，從{2-[4-(3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-吡啶-2-基]-1-甲基-乙基}-氨基甲酸叔丁酯制備。MS(ES)，m/z 628(M+1)。
B.1-(4-{7-[2-(2-氨基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-2-氟-苯基)-3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲二鹽酸鹽 按照類似于108E的方法制備。LCMS(ES)，m/z 528(M+1)。
實施例148 4-[4-(3-{4-[3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲基]-3-氟-苯基}-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-苯甲?；鵠-1-甲基哌嗪
按照類似于制備4-[4-(3-{4-[3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲基]-3-氟-苯基}-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-苯甲?；鵠-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的方法制備。MS(ES)，m/z 596(M+1)。
實施例149 1-(4-{7-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
A.(4-{7-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-氨基甲酸叔丁酯 將{4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯(0.500g，1.19mmol，1.0當量)和N-甲基哌嗪(0.53mL，4.78mmol，4.0當量)溶于DMSO(20mL)中。加入K2CO3(0.330g，2.0當量)。將反應混合物在80℃下攪拌過夜。將混合物傾倒入20mL冰中。過濾固體并且通過硅膠色譜純化，用0-5％MeOH/DCM梯度，得到標題化合物0.408g(0.82mmol，70％)，為淡黃色固體。固體可直接用于下面的反應B。MS(ES)，m/z 499(M+1)。
B.1-(4-{7-[6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-吡啶-3-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 按照類似于實施例105的方法制備。MS(ES)，m/z 586(M+1)。
按照類似于實施例149的方法制備以下物質(zhì) 實施例153 1-(3-叔丁基-異唑-5-基)-3-{4-[7-(6-嗎啉-4-基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲
將1-{4-[7-(6-嗎啉-4-基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯(0.40g，0.82mmol，1.0當量)溶于DCM/MeOH(2∶1，18mL)中。加入HCl(4.0M在二烷中，4mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。真空蒸發(fā)并且溶于DMSO(12mL)中。加入三乙胺(0.46mL，3.28mmol，4當量)和(3-叔丁基-異唑-5-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.130g，0.41mmol，1.0當量)。將反應混合物在80℃和氮氣下攪拌過夜。將反應混合物傾倒入40mL冰中。過濾固體并且通過硅膠色譜純化，應用0-5％MeOH/DCM梯度，得到標題化合物(0.328g，72％產(chǎn)率)。MS(ES)，m/z 552(M+1)。
按照類似于實施例153的方法制備以下物質(zhì) 實施例155 1-{4-[7-(6-甲基氨基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
將1-{4-[7-(6-嗎啉-4-基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲(0.220g，0.435mmol，1.0當量)溶于DMSO(2mL)中。加入K2CO3(0.120g，0.870mmol，2.0當量)。加入哌嗪(0.150g，1.74mmol，4.0當量)。將反應混合物在80℃和氮氣下攪拌過夜。將反應混合物傾倒入40mL冰中并且過濾。通過硅膠色譜純化黃色固體，應用0-5％MeOH/DCM梯度，得到標題化合物0.170g(0.33mmol，76％)，為淡黃色固體。MS(ES)，m/z 518(M+1)。
實施例156 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-{4-[7-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲
將{4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-氨基甲酸叔丁酯(0.990g，2.37mmol，1.0當量)溶于DCM/MeOH(3∶1，120mL)中。加入HCl(4.0M在二烷中，14mL)。將混合物在室溫下攪拌過夜。在真空下蒸發(fā)混合物并且將殘留物溶于MeOH/-二烷(1∶2，90mL)和三乙胺(2mL，14.22mmol，6當量)中。加入5-叔丁基-異唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯并且將反應混合物在80℃和氮氣下攪拌過夜。將反應混合物通過硅膠色譜純化，應用0-5％MeOH/DCM梯度，得到標題化合物0.708g(1.43mmol，60％)，為淡黃色固體。MS(ES)，m/z 497(M+1)。
實施例157 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-{4-[7-(6-氧代-1，6-二氫-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲
將1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-{4-[7-(6-甲氧基-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲(0.408g，0.82mmol，1.0當量)溶于HBr(～48％，4mL)中并且在80℃和氮氣下攪拌過夜。在真空下蒸發(fā)反應混合物并且在以下四步中純化1)快速SCX，2)反相HPLC，該混合物通過反相C18柱純化，HPLC應用梯度為5-65％乙腈∶0.03％HCl水溶液，3)快速SCX，和4)硅膠色譜，應用0-10％MeOH/DC梯度，得到標題化合物0.156g，為白色固體。MS(ES)，m/z 483(M+1)。
實施例158 1-{4-[7-(6-氧代-1，6-二氫-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
按照包含與制備1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-{4-[7-(6-氧代-1，6-二氫-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-脲相同的方法的步驟順序，從1-{4-[7-(6-氟-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲制備1-{4-[7-(6-氧代-1，6-二氫-吡啶-3-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲。MS(ES)，m/z 504(M+1)。
實施例159 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-{4-[7-(6-二甲基氨基甲基-吡啶-3-基)-咪唑并[ 1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-脲
A.(5-溴-吡啶-2-基甲基)-二甲基-胺 將5-溴-2-溴甲基-吡啶(1.7g，6.7mmol，1.0當量)(Bioorg.Med.Chem.Lett.1994，4(1)，99)放入250mL圓底短頸燒瓶中，溶于100mL THF中，冷卻至0℃并且用2M N，N-二甲基胺的THF溶液(9mL，18mmol，2.7當量)處理。2小時后，濃縮反應物，用50mL CH2Cl2稀釋并且用20mL水洗滌。將有機物干燥并且濃縮，得到0.90g(64％)標題化合物，為棕色油狀物。MS(ES)，m/z 217(M+1)。
B.1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-{4-[7-(6-二甲基氨基甲基-吡啶-3-基)-咪唑并[ 1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-脲 在100mL圓底短頸燒瓶中，將4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基胺(1g，4.1mmol，1當量)的30mL 1，4-二烷懸浮液與二(頻哪醇)二硼(1.56g，6.15mmol，1.5當量)、乙酸鉀(1.2g，12mmol，3當量)和2-聯(lián)苯-二環(huán)己基膦(0.29g，0.82mmol，0.20當量)一起攪拌。將產(chǎn)生的漿液用2個循環(huán)的抽真空和每次向漿液中鼓入氮氣10分鐘來脫氧。將燒瓶裝上回流冷凝器，加入乙酸鈀(0.046g，0.21mmol，0.05當量)并且將混合物在氮氣和80℃下攪拌過夜。將熱的混合物通過～1cm的硅藻土墊過濾，用50mL甲醇洗滌并且濃縮合并的濾液并且洗滌，得到中間體硼酸酯，為棕色糊狀固體。將固體溶于60mL 1，4-二烷/水(1∶1)中并且用(5-溴-吡啶-2-基甲基)-二甲基-胺(0.90g，3.6mmol)、四(三苯膦)鈀(0)(0.21g，0.18mmol)和碳酸鈉(1.1g，0.011mmol)處理。將產(chǎn)生的漿液用2個循環(huán)的抽真空和每次向漿液中鼓入氮氣10分鐘來脫氧。將燒瓶裝上回流冷凝器并且將混合物在氮氣和80℃下攪拌過夜。將反應物冷卻至室溫并且用1N HCl調(diào)至pH5。將混合物裝入25g SCX Mega Bond-Eluttm SCX柱(Varian)(用200mL 1∶1CH2Cl2∶MeOH預洗滌)。真空上樣后，用300mL 1∶1 CH2Cl2∶MeOH洗滌柱子，然后用160mL 2M NH3-MeOH洗脫。真空濃縮堿性洗脫液并且將中間體苯基胺溶于30mL DMSO中。加入三乙胺(0.50g，4.9mmol)和(5-叔丁基-異唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(1.3g，4.1mmol)，混合物用N2脫氧5分鐘并且在70℃下加熱過夜。將反應物冷卻至室溫并且用1NHCl調(diào)至pH5。將混合物裝入25g SCX Mega Bond-Eluttm柱(Varian)(用200mL 1∶1 CH2Cl2∶MeOH預洗滌)。真空上樣后用300mL 1∶1CH2Cl2∶MeOH洗滌柱子，然后用160mL 2M NH3-MeOH洗脫。真空濃縮堿性洗脫液。將產(chǎn)生的棕色油狀物通過反相色譜純化，應用25cm×50.8mm(i.d.)柱，w/10微米顆粒。用歷經(jīng)30分鐘MeCN/0.03％HClH2O(5∶95)至65∶35洗脫，得到0.35 g標題化合物(17％總的)。MS(ES)，m/z 510(M+1)。
實施例160 (3-三氟甲基-苯基)-氨基甲酸，4-[7-(4-甲磺酰基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基酯
A.[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-甲醇 將50mL圓底燒瓶裝上磁力攪拌器、溫控加熱套、N2氣氛、冷凝器，加入7-氯-3-碘-咪唑并[1，2-a]吡啶(1.0g，3.6mmol)、4-(羥基甲基)苯基硼酸(570mg，3.75mmol)、2M K2CO3(7mL)和二甲氧基乙烷DME(25mL)。用氮氣脫氧并且加入Pd(TPP)4(200mg，0.17mmol，5mol％)并且將反應物加熱至65℃達48小時。冷卻反應物并且吸走下層的水相(5mL)。在42℃真空下蒸發(fā)反應物以除去DME。將殘留物溶于CH2Cl2中并且用水(15mL)洗滌。濃縮CH2Cl2并且進行色譜，得到油狀物，放置凝固成乳白色固體670mg(72％)。MS(ES)，m/z 259.1(M+1)。
B.{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-甲醇 將100mL圓底燒瓶裝上磁力攪拌器、溫控加熱套、N2氣氛、冷凝器，加入[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-甲醇(1.11g，4.3mmol)、4-(甲磺酰基)-苯基硼酸(1.27g，6.4mmol)、2-二環(huán)己基-膦基-2’，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯(236mg)、Pd(OAc)2(60mg)、K3PO4(3.6g，16.9mmol)、二烷∶水2∶1(50mL)、EtOH-(3A)(5mL)。溫熱反應物，同時用N2針通氣，然后加熱至65℃達18小時。將反應物冷卻至室溫并且吸走底層(8mL)。在真空下蒸發(fā)反應物并且將殘留物溶于溫熱的MeOH中并且過濾除去Pd(0)固體。固體用溫熱的MeOH沖洗并且合并所有MeOH(總計1L)。在真空下用20g SiO2蒸發(fā)溶解的粗產(chǎn)物至干燥，然后應用SiO2進行色譜，用梯度為0％至10％2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)洗脫。在40℃下真空箱內(nèi)干燥產(chǎn)物2小時，得到黃色固體1.64g(100％)，懷疑有溶劑殘留。MS(ES)，m/z 379(M+1)。
C.(3-三氟甲基-苯基)-氨基甲酸4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基酯 向冰浴冷卻的、通有氮氣的帶隔膜帽的小瓶中加入在CH2Cl2(4mL)中的{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-甲醇(32mg，0.084mmol)。向小瓶加入(ααα)-三氟-間甲苯基-異氰酸酯(15.7mg，0.012mL，0.084mmol)。從冰浴中除去反應物并且在室溫下混合。向反應物中第二次加入(ααα)-三氟-間甲苯基-異氰酸酯(15.7mg，0.012mL，0.084mmol)并且加熱至35℃達6小時。將粗反應物應用SiO2進行色譜，用梯度為0％至8％2 M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)洗脫。在40℃下真空箱內(nèi)干燥產(chǎn)物24小時，得到標題化合物23.5mg(49％)。MS(ES)，m/z566(M+1)。
實施例161 1-[5-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-吡啶-2-基]-3-(間三氟甲基-苯基)-脲
A.1-(5-溴吡啶-2-基)-3-(間三氟甲基苯基)-脲 在室溫下，用滴加方式將3-三氟甲基苯基異氰酸酯(0.96mL，6.88mmol，1.0當量)加入至5-溴吡啶-2-基胺(1.190g，6.88mmol，1.0當量)的THF(20mL)溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌30分鐘。過濾固體并且用MeOH(2×10mL)洗滌。干燥固體，得到1.81g(5.0mmol，73％)標題化合物。MS(ES)，m/z 360、362(M+1)。
B.1-[5-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-吡啶-2-基]-3-(間三氟甲基-苯基)-脲 將二(頻哪醇)二硼(0.410g，1.59mmol，1.1當量)、三環(huán)己基膦(0.048g，12mol％)、乙酸鉀(0.211g，1.5當量)和三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(0.066g，5mmol％)加入至1-(5-溴吡啶-2-基)-3-(間三氟甲基苯基)-脲(0.520g，1.44mmol，1.0當量)的二烷(12mL)溶液中。將反應混合物脫氧并且在氮氣和80℃下攪拌約16小時并且冷卻至室溫。加入3-碘-7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.460g，1.44mmol，1.0當量)、碳酸鈉溶液(2M，3mL)和四(三苯膦)-鈀(0)(0.083g，5 mmol％)。將反應混合物脫氧并且在80℃下攪拌6小時，冷卻，然后如實施例115在SCX柱(Varian)上純化。濃縮SCX-洗脫物質(zhì)并且通過硅膠快速色譜純化，應用0-4％在二氯甲烷中的甲醇梯度，得到0.450g(0.99mmol，69％)標題化合物。MS(ES)，m/z 475(M+1)。
按照類似于實施例161的方法制備以下物質(zhì) 實施例165 1-(4-{7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
A.3-(4-硝基-苯基)-7-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 將7-氯-3-(4-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.417g，1.52mmol)、二(頻哪醇)二硼(0.426g，1.68mmol)、三環(huán)己基膦(0.051g，0.183mmol)和乙酸鉀(0.224g，2.29mmol)在1，4-二烷(20mL)中混合。在混合物中鼓入氮氣5分鐘。加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(0.070g，0.076mmol)。將混合物加熱至80℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。混合物通過硅藻土521過濾并且將產(chǎn)生的溶液濃縮，得到橙色油狀物，其可以直接應用(粗品)。MS(ES)，m/z 366(M+1)。
B.7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-3-(4-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 將3-(4-硝基-苯基)-7-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.556g，1.52mmol)、5-溴-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶HCl(0.447g，1.52mmol)和碳酸鉀(0.842g，6.09mmol)在1，4-二烷(20mL)和水(10mL)中混合。在混合物中鼓入氮氣5分鐘。加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.032g，0.046mmol)。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至110℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將混合物真空濃縮至干燥。將產(chǎn)生的固體在二氯甲烷/甲醇中制成漿液并且通過硅藻土521過濾。真空濃縮溶液。通過柱色譜純化(乙酸乙酯→10％在二氯甲烷中的甲醇)，得到產(chǎn)物(0.372g，59％，兩步)。MS(ES)，m/z 416(M+1)。
C.1-(4-{7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲 將7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-3-(4-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.318g，0.765mmol)、氯化鐵(III)(0.006g，0.038mmol)和1，1-二甲基肼(0.58mL，7.65mmol)在甲醇(10mL)中混合。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至70℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將混合物在另外的甲醇中制成漿液并且通過硅藻土521過濾。真空濃縮溶液。通過柱色譜純化(乙酸乙酯→5％在二氯甲烷中的甲醇→8％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇)，得到黃色固體中間體胺，4-{7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基胺，直接應用。MS(ES)，m/z386(M+1)。
將胺(0.164g，0.425mmol)、3-三氟甲基苯基異氰酸酯(0.060mL，0.425mmol)和三乙胺(0.119mL，0.851mmol)在DMSO(5mL)中混合。將混合物在室溫下攪拌90分鐘?；旌衔镉靡宜嵋阴ァ盟腿?。有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將產(chǎn)生的有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮。通過柱色譜純化(乙酸乙酯→5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇)，得到產(chǎn)物(0.056g，13％，兩步)。MS(ES)，m/z 573(M+1)。
實施例166 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲
A.7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-3-(4-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶 將3-(4-硝基-苯基)-7-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.556g，1.52mmol)、5-溴-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶HCl(0.447g，1.52mol)和碳酸鉀(0.842g，6.09mmol)在1，4-二烷(20mL)和水(10mL)中混合。在混合物中鼓入氮氣5分鐘。加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.032g，0.046mmol)。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至110℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將混合物真空濃縮至干燥。將產(chǎn)生的固體在二氯甲烷/甲醇中制成漿液并且通過硅藻土521過濾。真空濃縮溶液。通過柱色譜純化(乙酸乙酯→10％在二氯甲烷中的甲醇)，得到產(chǎn)物(0.372g，59％，兩步)。MS(ES)，m/z 416(M+1)。
B.1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲 將7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-3-(4-硝基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.372g，0.895mmol)、氯化鐵(III)(0.007g，0.045mmol)和1，1-二甲基肼(0.68mL，8.95mmol)在甲醇(10mL)中混合。裝上回流冷凝器并且將混合物加熱至70℃，攪拌過夜(15小時)并且冷卻至室溫。將混合物在另外的甲醇中制成漿液并且通過硅藻土521過濾。真空濃縮溶液，得到黃色固體中間體胺，4-{7-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-嘧啶-5-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基胺，直接應用。MS(ES)，m/z 386(M+1)。
將胺(0.323g，0.838mmol)、(5-叔丁基-異唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.291g，0.922mmol)和三乙胺(0.128mL，0.922mmol)在DMSO(10mL)中混合。將混合物加熱至70℃，攪拌過夜并且冷卻至室溫?；旌衔镉靡宜嵋阴ァ盟腿?。有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將產(chǎn)生的有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮。通過柱色譜純化(乙酸乙酯→10％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的2M在MeOH中的NH3)，得到產(chǎn)物(0.057g，11％，兩步)。MS(ES)，m/z 552(M+1)。
實施例167 N-(5-甲基-噻唑-2-基)-2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
A.[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸叔丁酯 應用實施例219(以下)的方法制備，應用4-溴-苯基乙酸叔丁酯和7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶作為偶聯(lián)對?；旌衔镉肧CX柱純化，應用1∶1CH2Cl2∶MeOH/1∶1 CH2Cl2∶2N NH3-MeOH。濃縮洗脫液，得到硬的黃-橙色固體并且將該固體在120g硅膠柱上純化，用100％CH2Cl2 5分鐘，然后歷經(jīng)35分鐘用0→5％在CH2Cl2中的MeOH梯度。合并并且濃縮適當級分，得到標題化合物，為黃色固體。MS(ES)，m/z 386(M+1)。
B.[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸 將[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸叔丁酯(370mg，0.96mmol)懸浮于10mL 4N HCl/二烷溶液中，加入1mL水并且將產(chǎn)生的澄清黃色溶液在室溫下攪拌過夜。濃縮至干燥，溶于CH2Cl2∶MeOH中并且通過上樣至10g SCX柱上純化并且用1∶1 CH2Cl2∶MeOH洗滌。游離堿用1∶1 CH2Cl2∶2N NH3-MeOH洗脫并且濃縮至干燥。LCMS(ES)，m/z330(M+1)。
C.N-(5-甲基-噻唑-2-基)-2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺 將[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸(130mg，0.39mmol)加入至5mL THF和3mL DMSO中，短暫溫熱至70℃，然后冷卻至室溫，得到略微混濁的黃色溶液。加入4-甲基嗎啉(48mg，52μL，0.47mmol，1.2當量)、2-氨基-5-甲基噻唑(54mg，0.47mmol，1.2當量)并且在室溫下攪拌10分鐘。向混合物中加入DMTMM(131mg，0.47mmol，1.2當量)并且在室溫下攪拌粘稠漿液。將產(chǎn)生的橙色溶液用30mL水稀釋，過濾并且保留絮狀固體。將固體溶于CH2Cl2和最少量的MeOH中，在40g硅膠柱上純化，100％CH2Cl2 5分鐘，然后歷經(jīng)35分鐘梯度為0→5％在CH2Cl2中的MeOH。合并，濃縮并且干燥適當級分，得到75mg標題化合物，為松散的黃色粉末。LCMS(ES)，m/z 426(M+1)。
實施例168 2-[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[3-(哌嗪-1-羰基)-5-三氟甲基-苯基]-乙酰胺
A.4-(3-{2-[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙?；被鶀-5-三氟甲基-苯甲?；?-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 按照類似于實施例219(以下)的方法制備。MS(ES)，m/z 703(M+1)。
B.2-[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[3-(哌嗪-1-羰基)-5-三氟甲基-苯基]-乙酰胺 將4-(3-{2-[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙?；被鶀-5-三氟甲基-苯甲酰基)-哌嗪1-甲酸叔丁酯(0.76g，0.108mmol)溶于1∶1 CH2Cl2∶MeOH(20mL)中并且加入2M在THF(2mL)中的HCl，然后攪拌2小時并且真空濃縮。上樣至Varian MegaElutSCX柱(10g柱，用甲醇預洗滌)，用甲醇沖洗以除去雜質(zhì)，然后粗產(chǎn)物用2M在甲醇中的NH3洗脫。真空濃縮溶液，然后通過硅膠色譜純化(0％→10％2M NH3甲醇∶DCM)，得到黃色殘留物(0.400g，49％，歷經(jīng)兩步)。MS(ES)，m/z603(M+1)。
實施例169 4-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-丁酰胺
將4-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-丁酰胺(0.15g，0.32mmol)、4-吡啶硼酸(0.04g，0.35mmol)、S-Phos(0.02g，0.04mmol)和K3PO4(0.13g，0.63mmol)與二烷(3.5mL)和水(1.5mL)混合并且在室溫下攪拌，同時將反應物用氮氣脫氣5分鐘。加入二乙酸鈀(0.01g，0.04mmol)。加熱至100-105℃達20小時。冷卻并且用水(10mL)和二氯甲烷稀釋。然后將有機層在Varian SCX柱(10g)(在甲醇中預平衡)上過濾，用水、甲醇、二氯甲烷和甲醇各30mL洗滌。粗產(chǎn)物用2N甲醇氨(50mL)洗脫。真空濃縮氨溶液至干燥，得到殘留物，將殘留物在硅膠上進行色譜(歷經(jīng)30分鐘0→3％在乙酸乙酯中的甲醇)，得到4-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-丁酰胺(0.10g，0.19mmol)。MS(ESI)，m/z 501(M+1)。
按照類似于實施例169的方法制備以下物質(zhì) 實施例172 N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
將3-碘-7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(321mg，1mmol)、N-(4-氰基-3-三氟甲基-苯基)-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-乙酰胺(473mg，1.1mmol)懸浮于5mL二烷中，加入2M碳酸鈉水溶液(1.25mL，2.5mmol)，通過向懸浮液中鼓入氮氣脫氧至少15分鐘。加入四(三苯膦)鈀(0)(58mg，0.05mmol)，燒瓶上裝上回流冷凝器并且在70℃和氮氣氣氛下加熱16小時。將反應混合物冷卻至室溫，用EtOAc(70mL)稀釋，用20mL飽和氯化鈉水溶液洗滌，分層并且將水層用40mL EtOAc反萃取。合并有機層，經(jīng)MgSO4干燥，直接在10g SCX柱(用1∶1二氯甲烷∶MeOH預洗滌)上過濾。分別用1∶1二氯甲烷∶MeOH和1∶1二氯甲烷∶2NNH3-MeOH洗滌和從柱上洗脫產(chǎn)物，然后真空濃縮洗脫液，得到黃色油狀物。油狀物在40g硅膠柱上純化，用100％二氯甲烷5分鐘，然后梯度為歷經(jīng)35分鐘0-＞5％在二氯甲烷中的MeOH。合并并且濃縮純凈級分，得到118mg(37％)標題化合物，為黃色晶體。LCMS(ES)，m/z 498(M+1)。
實施例173 2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
游離堿方法A，形式III 在室溫下，將7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(19.5g，100mmol)、2-(4-溴-苯基)-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(35.8g，100mmol)、乙酸鉀(49.0g，500mmol)、四丁基溴化銨(32.2g，100mmol)和NMP(250mL)裝入3L燒瓶中。用氮氣吹洗燒瓶并且加入乙酸鈀(1.1g，5mol％)和三-(2，4-二-叔丁基苯基)亞磷酸鹽(3.2g，5mol％)。用氮氣吹洗燒瓶并且加熱至120℃達2小時。使反應物達到室溫并且加入250mL水。用濃HCl將溶液調(diào)至pH＝1并且加入200mL乙酸乙酯。分層并且將水層用NaOH調(diào)至pH＝10。漿液在室溫下攪拌過夜，過濾，用水洗滌，收集并且在60℃下真空干燥，得到35.78g黃色固體。黃色固體在硅膠色譜上純化，用二烷(63.5％)/庚烷(34％)/2M在MeOH中的氨(2.5％)洗脫。洗脫液通過第二個硅膠柱進一步純化，用THF(42％)/二氯甲烷(55.5％)/2M在MeOH中的氨(2.5％)，得到30g標題化合物，為黃色固體(HPLC測定純度＞99％)。將部分標題化合物(5g)在回流下在乙腈(15mL)中加熱30分鐘，然后冷卻至環(huán)境溫度。將黃色懸浮液在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘，冷卻至0℃，過濾并且在60℃下真空干燥，得到4.77g黃色固體，熔點217℃。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.7(m，3H)，8.25(s，IH)，8.15(s，IH)，7.9(m，3H)，7.7(d，1H)，7.65(d，2H)，7.55(m，3H)，7.4(m，2H)，3.8(s，2H)。
游離堿形式II多晶型物的制備 將2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(0.5g)和甲醇(5mL)加熱至回流，得到溶液。滴加水(約2mL)直至到達濁點。繼續(xù)加熱并且攪拌樹膠狀固體直至固體結(jié)晶。歷經(jīng)45分鐘將懸浮液冷卻至環(huán)境溫度，然后過濾并且在60℃下真空箱內(nèi)干燥，得到0.47g形式II多晶型物。mp 202℃。
游離堿形式I多晶型物的制備 將2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(190g)和甲醇(1530mL)在5 L燒瓶中在攪拌下加熱至60℃，得到溶液。緩慢加入水(670mL)直至到達濁點。將混濁的溶液冷卻至50℃，此時油狀物開始從溶液中分離。使混合物冷卻至環(huán)境溫度并且攪拌過夜(18小時)，得到晶體的懸浮液。在冰/水浴中冷卻懸浮液，過濾并且在60℃下真空箱內(nèi)干燥，得到163g形式I多晶型物。mp193℃。
琥珀酸鹽 將2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(4.5g，9.4mmol)加入至異丙醇(120mL)中并且加熱至80℃，得到溶液。通過加熱至80℃將琥珀酸(1.11g，9.4mmol)溶于異丙醇(15mL)中。合并兩溶液并且濃縮至體積為70mL，得到懸浮液。將懸浮液冷卻至0℃，過濾并且干燥，得到4.7g琥珀酸鹽，為黃色固體。將4.4g粗產(chǎn)物從異丙醇(40mL)中重結(jié)晶，得到3.66g黃色固體。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ2.40(s，4H)，3.76(s，2H)，7.37-7.88(m，11H)，8.11(s，1H)，8.22(s，1H)，8.66(m，3H)，10.56(s，1H)，12.12(s，2H)。
單鹽酸鹽 將2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(4.5g，9.4mmol)溶于回流的異丙醇(80mL)中，然后一次性加入5N HCl(1.88mL，9.4mmol)。將混合物冷卻至23℃并且蒸發(fā)溶劑，得到非結(jié)晶固體。將該固體懸浮于水(100mL)中并且在攪拌下加熱至90℃，然后冷卻至23℃并且攪拌過夜。將懸浮液過濾并且干燥，得到3.75g單鹽酸鹽，為淡橙色固體。1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)δ3.81(s，2H)，7.36-8.14(m，12H)，8.34(s，1H)，8.74(m，3H)，10.84(s，1H)。
游離堿方法B無定形 將3-碘-7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.39g，1.21mmol)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(0.73g，1.80mmol)和碳酸鉀(0.50g，3.63mmol)懸浮于二烷(14mL)和水(7mL)的溶液中。反應物在室溫下用氮氣脫氧10分鐘。向反應物中加入反式-二氯二(三苯膦)-鈀(II)(22mg，0.03mmol)。裝上回流冷凝器并且將反應物加熱至105℃達3小時。將反應物冷卻并且用乙酸乙酯(75mL)稀釋并且分層。水層用EtOAc(2×30mL)萃取。合并有機物，經(jīng)MgSO4干燥并且在Varian SCX柱(10g)(用甲醇預洗滌)上過濾。用二氯甲烷、1∶1甲醇/二氯甲烷和甲醇(每次50mL)洗脫該柱，標題化合物用2N NH3/甲醇(100mL)洗脫。濃縮甲醇溶液至干燥并且在硅膠上進行色譜，應用歷經(jīng)45分鐘8→10％在1∶1乙酸乙酯∶二氯甲烷中的甲醇梯度，得到標題化合物(0.32g，54％)。MS(ES)，m/z 473(M+1)。
按照類似于實施例173游離堿方法B的方法制備以下物質(zhì) 實施例203 按照類似于實施例126的方法制備以下物質(zhì) 實施例204 2-[2-氨基-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺
將2-[2-硝基-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺(0.18g，0.35mmol)和甲酸銨(0.11g，1.82mmol)懸浮于無水甲醇(5mL)中并且在溶液中鼓入氮氣5分鐘。在正氮氣流下，向溶液中加入10％Pd/C(0.03，0.03mmol)并且將反應物在室溫下攪拌18小時。反應物通過硅藻土墊過濾并且用甲醇(40mL)洗滌該墊。濃縮溶液，然后將殘留物在硅膠上進行色譜，應用梯度為(0→2→5％)在二氯甲烷中的甲醇，得到標題化合物(0.03g，0.05mmol)。MS(ES)，m/z 489(M+1)。
實施例205 N-[3-(1-二甲基氨基-1-甲基-乙基)-苯基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
A.(1-{3-[2-(4-溴-2-氟-苯基)-乙?；被鵠-苯基}-1-甲基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯 將(4-溴-2-氟-苯基)乙酸(1.49g，6.39mmol)溶于25mL戊烯穩(wěn)定的氯仿中并且加入羥基苯并三唑水合物(0.95g，7.03mmol)，得到漿液。加入1-[3-(二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.47g，7.67mmol)并且將產(chǎn)生的澄清溶液在室溫下攪拌15分鐘。加入[1-(3-氨基-苯基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯并且在室溫下攪拌90分鐘。反應物用20mL二氯甲烷稀釋并且用飽和NaHCO3、1N NaHSO4洗滌并且用飽和氯化鈉水溶液稀釋，然后經(jīng)MgSO4干燥并且濃縮，得到脆性棕黃色泡沫狀物。將泡沫狀物在120g硅膠柱上純化，用100％CH2Cl25分鐘，然后用梯度為歷經(jīng)40分鐘0→10％在CH2Cl2中的EtOAc。濃縮并且干燥純凈級分，得到2.11g(71％)標題化合物，為脆性白色泡沫狀物。LCMS(ES)，m/z 463/465(M-1)。
B.[1-(3-{2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙?；被鶀-苯基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯 用如在實施例219(以下)描述的偶聯(lián)方法制備，用(1-{3-[2-(4-溴-2-氟-苯基)-乙?；被鵠-苯基}-1-甲基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(0.465g，1mmol)和7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.195g，1mmol)，在快速色譜后得到450mg(77％)標題化合物，為黃-綠色泡沫狀物。LCMS(ES)，m/z 580(M+1)。
C.N-[3-(1-氨基-1-甲基-乙基)-苯基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺 將[1-(3-{2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙?；被鶀-苯基)-1-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(450mg，0.77mmol)溶于2mL二烷和1mL水中，得到澄清黃色溶液。加入8mL 4N HCl-二烷溶液并且在室溫下攪拌1-2小時。真空除去揮發(fā)物并且用10g SCX柱使游離堿為硬的黃色固體。濃縮SCX洗脫液并且在40g硅膠柱上通過快速色譜純化，用95∶5 CH2Cl2∶MeOH，然后用95∶5 CH2Cl2∶2 N NH3-MeOH。濃縮純的級分，得到313mg(84％)標題化合物，為淡黃色泡沫狀物。LCMS(ES)，m/z 480(M+1)。
D.N-[3-(1-二甲基氨基-1-甲基-乙基)-苯基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺 將N-[3-(1-氨基-1-甲基-乙基)-苯基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺(185mg，0.385mmol)溶于3mL無水乙醇中，加入乙酸鈉(190mg，2.31mmol)和低聚甲醛(129mg，1.43mmol)并且在氮氣和室溫下一起攪拌15分鐘。加入氰基硼氫化鈉(90mg，1.43mmol)并且在氮氣和室溫下攪拌16小時。將反應混合物用10mL 1N HCl水溶液稀釋并且將澄清黃色溶液在室溫下攪拌15分鐘。用1N NaOH水溶液將溶液調(diào)至pH～8，每次用20mL二氯甲烷萃取2次。合并有機層，經(jīng)MgSO4干燥并且濃縮，得到黃色膜狀物。將膜狀物在旋轉(zhuǎn)色譜上純化，應用1mm厚圓盤以及93∶7 CH2Cl2∶2 N NH3-MeOH作為洗脫液。濃縮并且干燥純的級分，得到131mg(67％)標題化合物，為黃色泡沫狀物。LCMS(ES)，m/z508(M+1)。
實施例206 N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-[3-(7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-丙酰胺
A.3-(3-溴-苯基)-N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-丙酰胺 在室溫下，將3-(3-溴-苯基)-丙酸(1.930g，8.43mmol，1.0當量)、3-氨基-5-叔丁基異唑(1.299g，9.27mmol，1.1當量)的THF(30mL)溶液攪拌10分鐘。向混合物中加入4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉氯化物(DMTMM，2.56g，1.1當量)和N-甲基嗎啉(0.1mL)。將反應混合物在室溫下攪拌約16小時，真空濃縮，然后加入DCM(100mL)，用飽和氯化鈉水溶液2×20mL)和水(2×20mL)洗滌，干燥，過濾并且濃縮。將濃縮的物質(zhì)通過硅膠快速色譜純化，應用二氯甲烷，得到1.25g(3.56mmol，42％)標題的酰胺，為白色固體。MS(ES)，m/z 351、353(M+1)。
B.N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-[3-(7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-丙酰胺 向3-(3-溴-苯基)-N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-丙酰胺(1.090g，3.1mmol，1.0當量)的DMSO(10mL)溶液中加入二(頻哪醇)二硼(0.794g，3.1mmol，1.0當量)、乙酸鉀(0.912g，3.0當量)和[1，1’-二(二苯膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.068g，3mmol％)。將反應混合物脫氧，在氮氣和80℃下攪拌約16小時并且冷卻至室溫。加入乙醚(160mL)，用飽和氯化鈉水溶液(2×30mL)和水(2×30mL)洗滌，干燥，過濾并且濃縮，得到1.30g棕色固體。將部分固體(0.370g，0.93mmol，1.0當量)溶于二烷(20mL)中，然后加入3-溴-7-噻唑-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.260g，0.93mmol，1.0當量)、碳酸鈉溶液(2M，4mL)和四(三苯膦)鈀(0)(0.054，mmol％)。將反應混合物用氮氣脫氧并且在80℃下攪拌16小時。如實施例173，將混合物在5g SCX柱(Varian)上純化。濃縮SCX洗脫液并且通過硅膠快速色譜純化，應用0-4％甲醇/二氯甲烷梯度，得到0.168g(0.36mmol，40％)標題化合物，為淡黃色固體。MS(ES)，m/z 472(M+1)。
按照類似于實施例206的方法制備以下物質(zhì) 實施例209 N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-(4-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙磺?；?-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-乙酰胺
A.[2-(4-溴-苯磺?；?-乙基]-氨基甲酸叔丁酯 將(4-溴苯磺?；?-乙腈(10.41g，40.02mmol)懸浮于THF中并且冷卻至0℃并且向懸浮液中加入硼烷-甲硫醚絡合物(10M，12mL，120mmol)，將其緩慢溫熱至環(huán)境溫度。第二天，緩慢加入甲醇直至排氣停止將反應猝滅。濃縮反應物至干燥并且加入更多甲醇并且回流3小時。濃縮反應物至干燥，然后溶于二氯甲烷中并且用1N HCl(2×150mL)萃取。應用50％NaOH和Na2CO3使酸性萃取物水溶液變成堿性。水溶液用二烷(500mL)和碳酸二叔丁酯(10.91g，50.00mmol)處理3天。反應物用二氯甲烷稀釋，分層并且水溶液用二氯甲烷重新萃取。有機萃取物用飽和氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到粗油狀物。在硅膠上進行色譜，應用(0→5→8％)在二氯甲烷中的乙酸乙酯，得到標題化合物(4.20g，11.53mmol)。MS(ES)，m/z 307/309(M+1-叔丁基)。
B.{2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯磺?；鵠-乙基}-氨基甲酸叔丁酯 應用類似于制備84B的方法，其中將[2-(4-溴-苯磺?；?-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(4.10g，11.25mmol)轉(zhuǎn)化為硼酸酯(3.03g，7.36mmol)。MS(ES)，m/z 353(M+1-叔丁基)。
C.2-(4-{7-[4-(2-氨基-乙磺酰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-乙酰胺 應用類似于實施例115的方法，將N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺(0.700g，1.71mmol)與{2-[4-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-苯磺?；鵠-乙基}-氨基甲酸叔丁酯(0.775g，1.88mmol)偶聯(lián)。粗萃取物用SCX離子交換色譜處理，在此期間一些BOC基團被裂解。從SCX柱上洗脫并且用2 N在二烷(125mL)中的HCl和10mL甲醇處理2小時。真空蒸發(fā)，得到中間體(0.87g，1.38mmol)。MS(ES)，m/z 616(M+1)。
D.N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-(4-{7-[4-(2-二乙基氨基-乙磺?；?-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-乙酰胺 在室溫和氮氣下，將2-(4-{7-[4-(2-氨基-乙磺?；?-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-乙酰胺(0.87g，1.38mmol)與乙酸(1mL)、甲醇(20mL)和乙醛(0.152g，3.45mmol)混合10分鐘。在環(huán)境溫度下加入氰基硼氫化鈉。反應在3小時內(nèi)完成。真空蒸發(fā)，重溶于甲醇和二氯甲烷中并且上樣至SCX柱。用二氯甲烷(50mL)和甲醇(50mL)洗滌該柱并且用甲醇氨洗脫。在硅膠上進行色譜(0→2→4→5％)甲醇和二氯甲烷，得到標題化合物(21.0mg)。MS(ES)，m/z 614(M+1)。
實施例210 3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-N-(3-三氟甲基-苯基)-丙酰胺
在催化量的DMF(20μL)的存在下，將3-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-丙酸(132mg，0.314mmol，1.0當量)與無水二氯甲烷(6.0mL)混合。歷經(jīng)30秒通過注射器加入2.0M在二氯甲烷中的草酰氯(235μL，1.5當量)，然后在室溫下攪拌18小時。在減壓下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮反應物至干燥。
在DMAP(26.6mg，0.218mmol，0.3當量)、3-三氟甲基-苯基胺(181μL，1.45mmol，2.0當量)和吡啶(235μL，2.90mmol，4.0當量)的存在下，將粗品酰氯中間體溶于無水二氯甲烷(3.0mL)中并且使其在室溫下攪拌24小時。將反應混合物應用于SCX樹脂(10g)中，用二氯甲烷、甲醇洗脫，然后用2M在甲醇中的氨洗脫。在減壓下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮甲醇氨級分至干燥。殘留物進行HPLC純化，得到133.0mg標題化合物。MS(ES)，m/z564(M+1)。
按照類似于實施例210的方法制備以下物質(zhì) 實施例216 2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-硫代乙酰胺
向2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(0.240g，0.51mmol，1.0當量)的六甲基磷酰胺(2.5mL)溶液中加入Lawesson試劑(0.246g，0.61mmol，1.2當量)。將反應混合物在80℃下攪拌過夜。將混合物冷卻至室溫并且上樣至Varian MegaElutSCX柱上(5g柱，用甲醇預洗滌)。用甲醇沖洗以除去雜質(zhì)，然后粗產(chǎn)物用2M在甲醇中的NH3洗脫。真空濃縮溶液，然后進行HPLC純化，得到黃色泡沫狀物(0.078g，31％)。MS(ES)，m/z 489(M+1)。
實施例217 N-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-2-(間三氟甲基-苯基)-乙酰胺
A.N-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-2-(間三氟甲基-苯基)-乙酰胺 在40mL帶隔膜帽的小瓶中通入N2，加入4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基胺(125mg，0.48mmol)，磁力攪拌棒，二氯甲烷(6mL)，在冰浴中冷卻小瓶并且緩慢加入1mL(間三氟甲基-苯基乙酰氯的二氯甲烷溶液，0.48mmol)。加入異丙基乙基胺(0.8mL)和THF(2mL)。從冰浴中移走小瓶并且加熱至40℃達6小時。加入痕量的MeOH并且在真空下蒸發(fā)溶劑并且將油狀物溶于最少量的CH2Cl2中并且應用SiO2進行色譜，用梯度為0.5％至5％2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)進行洗脫。分離產(chǎn)物，在40℃下真空箱內(nèi)干燥24小時，得到144mg(67％)。MS(ES)，m/z444(M+1)。
B.N-{4-[7-(4-甲磺?；?苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-芐基}-2-(間三氟甲基-苯基)-乙酰胺 在12mL帶隔膜帽的小瓶中通入N2，加入N-[4-(7-氯-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-芐基]-2-(間三氟甲基-苯基)-乙酰胺(144mg，0.32mmol)、4-(甲基磺?；?苯基硼酸(89mg，0.44mmol)、2-二環(huán)己基膦基-2’，6’-二甲氧基-1，1’-聯(lián)苯(23.6mg)[X-Phos在本反應中可以選擇性作為配基應用]、Pd(OAc)2(6mg)、K3PO4(218mg，1.02mmol)、1，4-二烷∶H2O 2∶1(5mL)。小瓶用氮氣再次脫氧，然后加熱至45℃達24小時。冷卻反應物并且轉(zhuǎn)移至分液漏斗中并且棄去底部水層。在真空下蒸發(fā)溶劑并且將殘留物溶于含痕量MeOH的CH2Cl2中。將粗反應物在SiO2上進行色譜，用梯度為0％至8％2M在MeOH中的NH3(用CH2Cl2平衡)進行洗脫。產(chǎn)物在40℃下真空箱內(nèi)干燥24小時，得到38.6mg(21％)。MS(ES)，m/z 564.3(M+1)。
按照類似于實施例217的方法制備以下物質(zhì) 實施例219 N-(4-叔丁基-吡啶-2-基)-2-{2-氟-4-[7-(6-甲基-吡啶-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
在攪拌的帶隔膜帽的小瓶中加入2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-(4-叔丁基-吡啶-2-基)-乙酰胺(400mg，1.09mmol)、7-(6-甲基-吡啶-2-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶(228mg，1.09mmol)、KOAc(213mg，2.18mmol)、PdCl2(PPh3)2并且用N2針吹洗15分鐘，然后加入DMSO(5mL)并且用N2針脫氧并且將小瓶在80-90℃的油浴中放置24小時。將反應物冷卻，然后通過VarianSCX(10g)柱(用水和甲醇預洗滌)純化，用20％2 N在甲醇中的NH3/80％DCM洗脫產(chǎn)物。在減壓下從包含級分的產(chǎn)物中蒸發(fā)溶劑。應用(40g，ISCO)SiO2進行色譜，用梯度為0％至10％的2 M在MeOH中的NH3(用DCM平衡)洗脫。蒸發(fā)溶劑并且通過反相色譜純化(C-18，含0.1％TFA的乙腈/H2O)。中和，萃取并且除去溶劑。在真空箱內(nèi)干燥，得到118.4mg(21.9％)。MS(ES)，m/z 494(M+1)。
按照類似于實施例219的方法制備以下物質(zhì) 實施例225 2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(5-異丙基-4-甲基-噻唑-2-基)-乙酰胺
將7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0242g，1.24mmol)、2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-(5-異丙基-4-甲基-噻唑-2-基)-乙酰胺(0.460g，1.24mmol)和乙酸鉀(0.243g，2.48mmol)在DMSO(5mL)中混合?；旌衔镉肗2脫氣10分鐘，然后加入二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.087g，0.124mmol)。將反應物在100℃和N2下攪拌14小時。應用SCX柱(10g VARIAN bond elut)純化，用1∶1甲醇∶二氯甲烷洗脫，然后用1∶12M在甲醇中的NH3∶二氯甲烷洗脫。后者通過反相色譜純化，應用25cm×50.8mm(i.d.)柱w/10微米顆粒(MeCN/0.03％HCl H2O(5∶95)至100％MeCN；30分鐘)。用乙酸乙酯∶1NNaOH萃取得到化合物。有機層用飽和氯化鈉水溶液洗滌，得到的有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到產(chǎn)物(0.068g，11％)。MS(ES)，m/z486(M+1)。
按照類似于實施例219的方法制備以下物質(zhì) 實施例263 N-(4-叔丁基-6-嗎啉-4-基甲基-吡啶-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
將[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸二鹽酸鹽(6.24g，14.84mmol)和4-叔丁基-6-嗎啉-4-基甲基-吡啶-2-基胺(3.70g，14.84mmol)溶于無水DMF(40mL)中。加入二異丙基乙基胺(8.5mL，48.97mmol)和HATU(6.21g，16.32mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌40分鐘。用乙酸乙酯(800mL)稀釋。用飽和氯化鈉水溶液(3×100mL)、碳酸氫鈉(飽和的，3×100mL)、水(3×100mL)洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾干燥試劑并且濃縮，得到油狀物。將粗產(chǎn)物在硅膠上進行色譜(0-4％2M氨甲醇/二氯甲烷)。從二氯甲烷/醚/己烷中重結(jié)晶，得到標題化合物5.50g(9.5mmol，64％)，白色固體產(chǎn)物。MS(ES)，m/z 579(M+1)。
按照類似于實施例219的方法制備以下物質(zhì) 實施例275 N-(5-叔丁基-[1，3，4]噻二唑-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
將2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-(5-叔丁基-[1，3，4]噻二唑-2-基)-乙酰胺(0.86g，2.31mmol)和7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.45g，2.31mmol)溶于二甲亞砜(2.5mL)中。加入乙酸鉀(0.46g，4.62mmol)和反式-二氯二(三苯膦)鈀(II)(0.16g，0.23mmol)，脫氧并且充入氮氣(2×)。將反應混合物在100℃和氮氣下攪拌過夜。加入冰水(16mL)，過濾固體并且通過快速硅膠色譜純化(0-5％甲醇/二氯甲烷)，得到0.72g(1.48mmol，64％)黃色固體標題化合物。MS(ES)，m/z 487.0(M+1)。
按照類似于實施例219的方法制備以下物質(zhì) 實施例292 2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(5-異丙烯基-噻唑-2-基)-乙酰胺
在制備實施例2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-(1-羥基-1-甲基-乙基)-噻唑-2-基]-乙酰胺的過程中分離得到。MS(ES)，m/z 470(M+1)。
從相應的甲醇合成中類似分離以下物質(zhì) 實施例295和296 (R)-和(S)-N-(4-叔丁基-吡啶-2-基)-2-(2-氟-4-{7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-乙酰胺
用類似于實施例219的方法制備外消旋體并且通過手性HPLC(柱.46×15cm Chiralcel OD-H，洗脫100％3A乙醇w/0.2％DMEA，流速0.6mL/min，UV260nm)分離為對映異構(gòu)體，手性LC特征在于兩種對映異構(gòu)體純度均為約99％。對映異構(gòu)體AMS(ES)，m/z607(M+1)；對映異構(gòu)體BMS(ES)，m/z 607(M+1)。
實施例297和298 (R)-和(S)-24561102-(2-氟-4-{7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺
將7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶(1.0g，3.1mmol)、2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺(1.29g，1.1當量)、乙酸鉀(0.61g，2當量)和DMSO(5mL)在RBF中混合。用氮氣徹底脫氣，然后加入二氯-二(三苯膦)鈀(II)(0.22g，10mol％)并且將反應物在90℃下加熱過夜。用乙酸乙酯和1N NaOH(水溶液)稀釋。有機物用水、1NNaOH(水溶液)和鹽水萃取。有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮至干燥。通過反相純化(25％MeCN∶0.03％在水中的HCl→100％MeCN，C18柱)。進行色譜后物質(zhì)不純。合并所有包含產(chǎn)物的級分。用乙酸乙酯稀釋，然后用1N NaOH洗滌，然后用鹽水洗滌。有機物經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到不純的游離堿(1.17g)。在硅膠上純化(3％MeOH∶DCM→6％MeOH∶DCM→10％MeOH∶DCM→10％2M在MeOH中的NH3∶DCM)，得到淡黃色固體(0.977g)。在60℃下真空箱內(nèi)干燥過夜。第二根硅膠柱(3％MeOH∶DCM→6％MeOH∶DCM→10％MeOH∶DCM)，得到純凈產(chǎn)物(0.656g)。在60℃下真空箱內(nèi)干燥過夜，得到0.57g產(chǎn)物(30％)。LCMS(ES)，m/z 619(M+1)。通過手性HPLC(柱.46×15cm ChiralcelOD-H，洗脫100％3A乙醇w/0.2％DMEA，流速0.6mL/min，UV260nm)分離對映異構(gòu)體，手性LC特征在于得到兩種對映異構(gòu)體純度均為約99％。實施例297，異構(gòu)體17.3分鐘，實施例298，異構(gòu)體28.8分鐘。注意絕對立體化學未測定。
實施例299和300 (R)-和(S)-N-(5-叔丁基-噻唑-2-基)-2-(2-氟-4-{7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-乙酰胺
用類似于實施例219的方法制備外消旋體并且通過手性HPLC(柱.46×15cm Chiralcel OD-H，洗脫100％3A乙醇w/0.2％DMEA，流速0.6mL/min，UV260nm)分離為對映異構(gòu)體，手性LC特征在于兩種對映異構(gòu)體純度均為約99％。MS(ES)，m/z 613.3(M+1)。
實施例301和302 (R)-和(S)-2-(2-氟-4-{7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-N-[5-(1-甲基-環(huán)丙基)-[1，3，4]噻二唑-2-基]-乙酰胺
用類似于實施例219的方法制備外消旋體并且通過手性HPLC(柱46×15cm Chiralcel OD-H，洗脫100％3A乙醇w/0.2％DMEA，流速0.6mL/min，UV260nm)分離為對映異構(gòu)體，手性LC特征在于兩種對映異構(gòu)體純度均為約99％。MS(ES)，m/z 612.0(M+1)。
實施例303 N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-{4-[7-(1H-吡唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-乙酰胺
A.N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-{4-[7-(1-二甲基氨磺?；?1H-吡唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-乙酰胺 按照類似于實施例219的方法制備。MS(ES)，m/z 548(M+1)。
B.(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-{4-[7-(1H-吡唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-乙酰胺 將N-(5-叔丁基-異唑-3-基)-2-{4-[7-(1-二甲基氨磺?；?1H-吡唑-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-乙酰胺溶于等體積的CH2Cl2、甲醇和1N在醚中的HCl中，然后濃縮，得到固體。將固體溶于HOAc中并且攪拌1小時。濃縮并且通過硅膠色譜純化，用0→5％在CH2Cl2中的MeOH。MS(ES)，m/z 441(M+1)。
用類似于實施例303的方法制備以下實施例 實施例305 2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-(四氫-吡喃-4-基)-噻唑-2-基]-乙酰胺
A.2-[2-氟-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-(4-羥基-四氫-吡喃-4-基)-噻唑-2-基]-乙酰胺 用類似于制備219的方法制備標題化合物。MS(ES)，m/z 530(M+1)。
B.2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-(四氫-吡喃-4-基)-噻唑-2-基]-乙酰胺 將化合物2-[2-氟-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-(4-羥基-四氫-吡喃-4-基)-噻唑-2-基]-乙酰胺(0.186g，0.35mmol，1.0當量)溶于三氟乙酸(8mL)中。向混合物中加入Pearlman催化劑(0.12g)。在氫氣氣氛(50psi)下將反應混合物攪拌過夜。真空濃縮。通過柱色譜純化(0％→5％在二氯甲烷中的2M氨甲醇)，得到標題化合物(1.38g，46％)。MS(ES)，m/z514(M+1)。
用類似于實施例305的方法制備以下實施例 實施例307 N-[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
將2-(4-溴-2-氟-苯基)-N-[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-乙酰胺(0.45g，1.06mmol)、7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶(0.206g，1當量)、乙酸鉀(0.52g，5當量)、四丁基溴化銨(0.34g，1當量)、三(2，4-二-叔丁基苯基)亞磷酸鹽(0.034g，5mol％)和NMP(10mL)混合。用氮氣脫氣，然后加入乙酸鈀(II)(0.012g，5mol％)并且在氮氣下放置。在120℃下加熱24小時，然后在室溫下再攪拌一天。用乙酸乙酯稀釋，然后用水、1NNaOH(水溶液)和飽和氯化鈉水溶液洗滌。有機物經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮。通過反相C18柱HPLC純化，應用梯度為5至65％至100％乙腈∶0.03％HCl水溶液，然后通過用乙酸乙酯∶1N NaOH(水溶液)萃取得到游離堿。有機物經(jīng)MgSO4干燥，過濾并且濃縮，得到產(chǎn)物(118mg棕黃色固體，21％)。MS(ES)，m/z 541(M+1)。
用類似于實施例307的方法制備以下化合物 實施例309 N-[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺
將[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸，二鹽酸鹽(0.190g，0.452mmol)和4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基胺(0.105g，0.497mmol)在DMF(4mL)中混合。加入N，N-二異丙基乙基胺(0.26mL，1.49mmol)，然后加入O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲-六氟磷酸酯(0.190g，0.500mmol)。將反應混合物在N2下攪拌14小時。應用SCX柱(10g VARIAN BondElut)純化，用1∶1甲醇∶二氯甲烷洗脫，然后用1∶12M在甲醇中的NH3∶二氯甲烷洗脫。通過反相色譜純化，應用25cm×50.8mm(i.d.)柱w/10微米顆粒(MeCN/0.03％HCl H2O(5∶95)至100％MeCN；30分鐘)。在乙酸乙酯和1N NaOH之間分配。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機層，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到標題化合物(0.054g，22％)。MS(ES)，m/z 541(M+1)。
按照類似于實施例309的方法制備以下物質(zhì) 實施例315 2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-叔丁基-4-嗎啉-4-基甲基-噻唑-2-基]-乙酰胺
將[2-氟-4-(7-吡啶-2-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酸，二鹽酸鹽(0.500g，1.19mmol)和5-叔丁基-4-嗎啉-4-基甲基-噻唑-2-基胺(0.334g，1.31mmol)在DMF(6mL)中混合。加入N，N-二異丙基乙基胺(0.54mL，3.93mmol)，然后加入O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲-六氟磷酸酯(0.498g，1.13mmol)。將反應混合物在N2下攪拌過周末。應用SCX柱(10g VARIAN BondElut)純化，用1∶1甲醇∶二氯甲烷洗脫，然后用1∶12M在甲醇中的NH3∶二氯甲烷洗脫。濃縮后者并且通過反相色譜純化，應用25cm×50.8mm(i.d.)柱w/10微米顆粒(MeCN/0.03％HCl H2O(5∶95)至100％MeCN；30分鐘)。在乙酸乙酯和1N NaOH之間分配。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并且濃縮，得到標題化合物(0.190g，27％)。MS(ES)，m/z585(M+1)。
按照類似于實施例309的方法制備以下物質(zhì) 實施例317 2-{4-[7-(1-氧基-吡啶-4-基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基]-苯基}-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺
將2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺(0.80g，1.69mmol)溶于6mL二氯甲烷中，加入MTO(約2mg，8.5μmol，0.005當量)，攪拌至溶解，然后加入2mL水和0.245mL 30％過氧化氫水溶液，得到深黃色漿液。在室溫下攪拌16-24小時，加入另外的MTO(約2mg)和過氧化氫(0.245mL)，在室溫下攪拌24小時。最后，加入另外的2mg MTO和0.50mL過氧化氫溶液，在室溫下攪拌16小時。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去溶劑，得到黃色固體。將固體溶于二氯甲烷-甲醇中，應用于120g硅膠柱上并且用歷經(jīng)5分鐘梯度為0→＞10％在二氯甲烷中的甲醇洗脫。當未反應的起始乙酰胺洗脫后，用500mL二氯甲烷重新平衡柱并且用歷經(jīng)30分鐘梯度為0→＞10％在二氯甲烷中的1N NH3-甲醇洗脫。合并并且濃縮純凈級分，得到黃色脆性泡沫狀物和黃色玻璃狀物。將玻璃狀物和泡沫狀物重新懸浮于乙醚中，真空除去溶劑，然后在50℃和高真空下干燥，得到330mg(40％)標題化合物，為結(jié)晶黃色固體。LCMS(ES)，m/z 489(M+1)，487(M-)。
實施例318 1-(4-{7-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-3-(3-三氟甲基-苯基)-脲
將{4-[3-(4-氨基甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-苯基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮，二鹽酸鹽(0.30g，0.56mmol)、3-三氟甲基苯基異氰酸鹽(1.1mL，0.73mmol)和三乙胺(0.4mL，2.9mmol)在DMSO(10mL)中混合。將溶液通過10g SCX柱過濾，用甲醇→2N在甲醇中的氨洗脫。濃縮包含產(chǎn)物的級分，得到殘留物。通過色譜純化(5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的2N氨甲醇)，得到產(chǎn)物(0.18g，52％)。MS(ES)，m/z 613(M+1)。
實施例319 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(4-{7-[4-(4-甲基-哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-芐基)-脲
將{4-[3-(4-氨基甲基-苯基)-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基]-苯基}-(4-甲基-哌嗪-1-基)-甲酮，二鹽酸鹽(0.30g，0.56mmol)、(5-叔丁基-異唑-3-基)-氨基甲酸2，2，2-三氯-乙酯(0.2g，0.63mmol)和三乙胺(0.4mL，2.9mmol)在DMSO(10mL)中混合。將混合物加熱至70℃，攪拌5小時并且冷卻至室溫。將溶液通過10g SCX柱過濾，用甲醇→2N在甲醇中的氨洗脫。濃縮包含產(chǎn)物的級分，得到殘留物。通過色譜純化(5％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的甲醇→10％在二氯甲烷中的2N氨甲醇)，得到產(chǎn)物(0.048g，15％)。MS(ES)，m/z 592(M+1)。
實施例320 1-(5-叔丁基-異唑-3-基)-3-(2-氟-4-{7-[4-(哌嗪-1-羰基)-苯基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-脲鹽酸鹽
將4-[4-(3-{4-[3-(5-叔丁基-異唑-3-基)-脲基]-3-氟-苯基}-咪唑并[1，2-a]吡啶-7-基)-苯甲?；鵠-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.53g，2.24mmol)溶于CH2Cl2(25mL)中，向其中加入HCl(5.6mL，4M在二烷中)。在室溫下攪拌3小時，然后真空濃縮，得到淡棕色固體產(chǎn)物(1.60，115％)。MS(ES)，m/z 582(M+1，游離堿)。
本發(fā)明化合物優(yōu)選制備成通過多種途徑給藥的藥物組合物。最優(yōu)選的是口服施用的組合物。這些藥物組合物和制備方法是本領域中眾所周知的。參見例如REMINGTONTHE SCIENCE AND PRACTICE OFPHARMACY(A.Gennaro等人編，19thed.，Mack Publishing Co.，1995)。
式I化合物通常在很寬的劑量范圍內(nèi)有效。例如，每日正常劑量范圍為約0.1至約500mg/kg體重。在某些情況中低于上述范圍下限的劑量水平可能是足夠的，而在另一些情況中可以應用更大劑量而不會引起任何有害的副作用，因此上述劑量范圍不旨在以任何方式限制本發(fā)明的范圍?？梢岳斫鉃閷嶋H施用的化合物的量將由主治醫(yī)生根據(jù)相關情況決定，這些相關情況包括待治療的疾病、選擇的施用途徑、實際施用的化合物、個體患者的年齡、體重和響應以及患者癥狀的嚴重程度。
進行以下試驗以測定本發(fā)明化合物抑制VEGF-R2磷酸化的IC50值。
自磷酸化酶試驗 A.VEGFR2(KDR)的克隆與純化 VEGFR2(KDR-CD，從人心臟cDNA文庫中克隆)的分離催化結(jié)構(gòu)域(氨基酸807-1356)通過標準PCR方法(pCR-Script以獲得質(zhì)粒P340)克隆，應用下列引物作為BamHI/HindIII片段上游引物5’-CCATGGATCCAGATGAACTCCC-3’；下游引物5’-GAAGCTTAAACAGGAGGAGAGCTCAG-3’，鑒定其核苷酸序列并且將其亞克隆到pFASTBac-HISTM載體系統(tǒng)(Gibco-BRL)中(以得到質(zhì)粒B344)用于桿狀病毒表達。(Carroll等人，J.Biol.Chem，268，12837-42(1993)。KDR-CD在Sf9細胞(Gibco-BRL)中表達成N-端6×His的融合蛋白并且按照標準親和色譜方法純化(例如Amersham Pharmacia BiotechAffinity Chromatography Principles and Methods#18-1022-29)。簡而言之，將15-25g沉淀在裂解緩沖液(50mM Tris pH7.5、150mM NaCl、0.5％NP40(CalbioChem)，新鮮加入20mM巰基乙醇、10mM咪唑、1mMPMSF(蛋白酶抑制劑(苯基甲磺酰氟化物)，購自Sigma)、1×不含EDTA的完全蛋白酶抑制劑(Boehringer Mannheim))中在冰上裂解30分鐘。通過在4℃下、30,000g離心20分鐘使細胞裂解液變?yōu)槌吻?，通過0.2M過濾器過濾并且應用于NiNTATM柱(Qiagen)。未結(jié)合的蛋白依次用RIPA緩沖液(50mM Tris pH 7.5、150mM NaCl、1％NP40、1mM EDTA、0.25％脫氧膽酸納、20mM巰基乙醇)洗滌，用裂解緩沖液洗滌以及最后用1×激酶緩沖液(KB)(100mM HEPES pH 7.5、10mM MnCl2、5mM巰基乙醇)洗滌而除去。KDR蛋白用包含200mM咪唑的線性梯度的1×KB洗脫10柱體積。合并峰級分(基于SDS-PAGE凝膠分析)，通過CentriconTM濃縮至～1mg/mL并且經(jīng)HR26/10脫鹽柱(Amersham Pharmacia)在1×KB中脫鹽。估計本制備的KDR純度為～40％，體外自磷酸化反應后的抗磷酸酪氨酸western分析僅可以檢測到KDR酪氨酸激酶活性。
B.KDR-CD體外自磷酸化激酶試驗 激酶反應包含在40μL反應體積中的1μg總蛋白，其中包含終濃度為4％(v/v)DMSO、1μM ATP、在1×KB中的1μCi/rxn 33P-ATP(購自NEN)。將20μM-1.0nM系列稀釋的化合物加入至上述反應物中以測定化合物活性；試驗化合物可以在加入放射性標記物之前先與KDR酶在30℃下預孵育30分鐘。放射性標記反應在30℃下進行20分鐘，然后加入含有3mMATP的100μL 25％TCA以終止反應，然后用50μL 1mg/mL BSA沉淀。將猝滅的反應物轉(zhuǎn)移至MultiScreenTM-FC板(Millipore)上并且在室溫下孵育1小時。將板過濾，用250μL10％TCA洗滌3次并且吸干。加入MicroScintTM20(Packard)并且將板在Wallac MicrobetaTM上計數(shù)。Dougher-Vermazen，M.等人，Biochem Biophys Res Commun 205(1)728-738(1994)。IC50值通過logistic四參數(shù)曲線擬合計算。對于本文中包含的所有實施例，IC50值均小于1.0×10-6M。
所有值應用在標記反應開始之前將化合物和酶預孵育30分鐘而測定并且代表至少兩次不同測定的平均值 實施例 IC50(nM) 39 28 130 42 173 26 196 106 289 41 303 46 在PC-3前列腺腫瘤異種移植物中的體內(nèi)功效 在雄性SCID小鼠后協(xié)腹(rear flank)皮下植入0.2mL細胞懸浮液，該細胞懸浮液是在包含5×106 PC-3人前列腺腺癌細胞(購自ATCC)的無血清培養(yǎng)基中制備的。將實施例130在1％CMC/.25％Tween 80中制備成懸浮液并且在腫瘤長至約150-200mg(通過1×w2×0.536計算體積，其中l(wèi)是長的垂直直徑，w是短的垂直直徑，這些數(shù)據(jù)由測徑器測量)后開始通過口服管飼法施用21天。實施例130每天施用兩次(間隔12小時)，劑量為15、7.5和3.75mg/kg，而30mg/kg劑量每天施用一次。每組各包含8只小鼠，其中一組每天接受0.2mL CMC/Tween賦形劑2次作為對照組。統(tǒng)計分析通過雙向方差分析(ANOVA)進行并且在研究結(jié)束時所有治療組與對照組均存在統(tǒng)計學差異(p＜0.001)。
平均腫瘤體積和標準誤差
權(quán)利要求
1.式(I)化合物或其可藥用鹽
其中
R1是(a)任選被-(CH2)1-4NR2R3取代的2-吡啶酮基；或者
(b)苯基、噻吩基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、唑基、吡啶基、N-氧代-吡啶基或嘧啶基，以上所有基團任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；⑾趸?、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基；
R2是氫或任選被羥基取代的C1-C6烷基；
R3是氫或任選被羥基、三氟甲基或吡咯烷基取代的C1-C6烷基；或者R2、R3與它們所連接的氮原子形成哌啶基，任選被C1-C6烷基取代的哌嗪基，或嗎啉基；
R4是噻唑基、吡啶基或任選被1-3個選自鹵素、氨基、甲基、三氟甲基和硝基的取代基取代的苯基；
R5是C(O)NHR6、OC(O)NHR6、NHC(O)CH2R6、NHC(O)NHR6或C(S)NHR6；
對于OC(O)NHR6、NHC(O)CH2R6、NHC(O)NHR6而言，n是0-4，并且對于C(O)NHR6和C(S)NHR6而言，n是1-4；并且
R6是(a)未取代的四氫苯并噻唑基；或者
(b)苯基、吡啶基、嘧啶基、吡唑基、噻唑基、異噻唑基、噻二唑基、異唑基，以上所有基團任選被1-3個獨立地選自以下的取代基取代任選被羥基、二甲基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，任選被二甲基氨基羰基取代的C2-C6鏈烯基，C1-C6烷氧基，三氟甲基，二氟甲氧基，三氟甲氧基，二甲基氨基乙氧基，苯氧基，甲苯基，鹵素，甲基磺?；?，二甲基氨基，二乙基氨基，氰基，任選被羥基、甲氧基、甲氧基乙氧基或甲基取代的C3-C6環(huán)烷基，3，4-二甲基異唑-5-基-氨基磺酰基，四氫吡喃基，四氫吡喃基氨基羰基，C2-C6烷基羰基，嗎啉基羰基和哌嗪基羰基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R5是C(O)NHR6。
3.權(quán)利要求1或2的化合物，其中R1是苯基、噻吩基、噻唑基或吡啶基，以上所有基團任選被以下基團取代-(CH2)0-4NR2R3，任選被氨基、吡咯烷基或嗎啉基取代的C1-C6烷基，或1-2個獨立地選自C1-C4烷氧基、鹵素、(C1-C6烷基)磺?；?、硝基、-磺?；?CH2)0-4NR2R3和-羰基(CH2)0-4NR2R3的取代基。
4.權(quán)利要求1的化合物，其是2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺。
5.權(quán)利要求1的化合物，其是N-(5-叔丁基-[1，3，4]噻二唑-2-基)-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺。
6.權(quán)利要求1的化合物，其是2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(5-異丙基-4-甲基-噻唑-2-基)-乙酰胺。
7.權(quán)利要求1的化合物，其是2-(2-氟-4-{7-[2-(2-嗎啉-4-基-丙基)-吡啶-4-基]-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基}-苯基)-N-(4-三氟甲基-吡啶-2-基)-乙酰胺。
8.權(quán)利要求1的化合物，其是N-[4-二甲基氨基甲基-5-(1-甲基-環(huán)丙基)-噻唑-2-基]-2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-乙酰胺。
9.權(quán)利要求1的化合物，其是2-[2-氟-4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-[5-叔丁基-4-嗎啉-4-基甲基-噻唑-2-基]-乙酰胺。
10.權(quán)利要求1-9中任意一項的化合物，其中可藥用鹽選自HCl鹽、二HCl鹽、琥珀酸鹽、L-酒石酸鹽和HBr鹽。
11.結(jié)晶的2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺。
12.權(quán)利要求11的結(jié)晶的2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺，其熔點為217℃。
13.權(quán)利要求11的結(jié)晶的2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺，其熔點為202℃。
14.權(quán)利要求11的結(jié)晶的2-[4-(7-吡啶-4-基-咪唑并[1，2-a]吡啶-3-基)-苯基]-N-(3-三氟甲基-苯基)-乙酰胺，其熔點為193℃。
15.權(quán)利要求1至14中任意一項的化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，其用作藥物。
16.抑制哺乳動物的VEGF-R2的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的權(quán)利要求1-14中任意一項的化合物。
17.阻斷血管生成的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的權(quán)利要求1-14中任意一項的化合物。
18.治療哺乳動物的易感性瘤的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的權(quán)利要求1-14中任意一項的化合物。
19.抑制哺乳動物的腫瘤血管生成的方法，該方法包括給需要該治療的哺乳動物施用VEGF-R2抑制量的權(quán)利要求1-14中任意一項的化合物。
20.藥物制劑，該藥物制劑包含權(quán)利要求1-14中任意一項的化合物以及可藥用載體、稀釋劑或溶劑化物。
全文摘要
本發(fā)明提供了是VEGF-R2抑制劑的式(I)化合物以及應用這些化合物的方法。
文檔編號A61P35/04GK101128461SQ200680006004
公開日2008年2月20日 申請日期2006年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月24日
發(fā)明者D·A·鮑爾達, T·P·伯克霍德爾, J·R·克萊頓, Y·郝, P·C·海特, J·R·亨利, J·M·諾貝洛克, D·曼德爾, J·A·麥克林恩, D·M·雷米克, M·E·萊帕拉, Z-Q·王, Y·Y·M·伊普, B·鐘 申請人:伊萊利利公司