專(zhuān)利名稱(chēng)：：新穎的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物的制作方法新穎的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物本發(fā)明涉及新穎的營(yíng)養(yǎng)藥物性(nutmceutical)組合物。糖尿病是一種普遍的慢性病，迄今無(wú)法治愈。糖尿病的發(fā)生和流行呈指數(shù)級(jí)增加，并且是發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家最為常見(jiàn)的代謝疾病之一。糖尿病是多種原因引起的復(fù)雜疾病，其特征為受損的碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪代謝以及胰島素分泌和/或胰島素耐受抵抗。這引起提高的空腹血糖濃度和餐后血糖濃度，如果不處理則引起并發(fā)癥。該疾病有兩種主要的種類(lèi)胰島素依賴(lài)型糖尿病(IDDM,T1DM)和非胰島素依賴(lài)型糖尿病(NIDDM，T2DM)。T1DM-1型糖尿病。T2DIv^2型糖尿病。T1DM和T2DM糖尿病與高血糖癥、血內(nèi)膽固醇過(guò)高癥和高脂血癥相關(guān)。T1DM和T2DM中各自的絕對(duì)胰島素缺乏和對(duì)胰島素不敏感引起肝、肌肉和脂肪組織葡萄糖利用降低以及血糖水平提高。未控制的高血糖癥與提高的和過(guò)早的死亡相關(guān)，因?yàn)樵黾恿宋⒀芗膊『痛笱芗膊〉娘L(fēng)險(xiǎn)，所述疾病包括腎病、神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病、高血壓、中風(fēng)和心臟病。近期證據(jù)表明嚴(yán)格的血糖控制是預(yù)防T1DM和T2DM中這些并發(fā)癥的主要因素。因此，通過(guò)藥物或療法的最佳血糖控制是治療糖尿病的重要途徑。T2DM治療最初涉及飲食和生活方式的改變，當(dāng)這些手段不能維持適當(dāng)?shù)难强刂茣r(shí)，用口服降血糖藥和/或外源胰島素治療患者。目前治療T2DM的口服藥劑包括控制胰島素分泌的藥劑(磺脲劑)、促進(jìn)肝內(nèi)胰島素活動(dòng)的藥劑(縮二胍劑)、胰島素增感劑(噻唑垸二酮)和抑制葡萄糖吸收的藥劑(a-葡糖苷酶抑制劑)。然而，目前可得的試劑通常不能長(zhǎng)期維持合適的血糖控制，因?yàn)橐认偌?xì)胞功能的逐漸喪失引起高血糖癥的逐漸惡化。隨著時(shí)間進(jìn)展，能夠維持目的血糖水平的患者比例顯著降低，施用附加的/其他的藥劑成為必須。另外，藥物可能具有有害的副作用，并涉及高初始失效率和次級(jí)失效率。最后，降血糖藥的使用可有效控制血糖水平，但不能預(yù)防糖尿病所有的并發(fā)癥。因此，用于治療所有類(lèi)型糖尿病的現(xiàn)有方法不能達(dá)到血糖量正常和預(yù)防糖尿病并發(fā)癥的理想。因此，盡管治療T1DM和T2DM的療法選擇基本上依賴(lài)于施用胰島素和口服降血糖藥物，仍需要具有最小副作用的安全有效的營(yíng)養(yǎng)添加劑用于治療和預(yù)防糖尿病。許多患者對(duì)能夠最小化伴隨高劑量藥物的副作用并產(chǎn)生額外臨床益處的其他替代療法感興趣?；加刑悄虿〉幕颊邔?duì)具有溫和抗糖尿病效應(yīng)并且沒(méi)有主要副作用的被認(rèn)為是"天然"的治療方法非常感興趣，所述治療可以用做輔佐治療。T2DM是漸進(jìn)的慢性病，直到負(fù)責(zé)產(chǎn)生胰島素的胰腺細(xì)胞(胰島P-細(xì)胞)發(fā)生顯著損傷時(shí)才會(huì)被識(shí)別。因此，對(duì)發(fā)展飲食添加劑存在增長(zhǎng)的興趣，所述飲食添加劑可用于預(yù)防0細(xì)胞損傷并從而預(yù)防顯性T2DM在風(fēng)險(xiǎn)人群(特別是有患T2DM高風(fēng)險(xiǎn)的老年人)中發(fā)展。由于葡萄糖和脂質(zhì)對(duì)e細(xì)胞有損傷，所以可通過(guò)降低血糖和/或血脂水平來(lái)保護(hù)胰腺3細(xì)胞?？赏ㄟ^(guò)不同的機(jī)制降低血糖水平，例如通過(guò)增強(qiáng)胰島素敏感性和/或通過(guò)降低肝糖產(chǎn)生。也可通過(guò)不同的機(jī)制降低血脂水平，例如通過(guò)增強(qiáng)脂質(zhì)氧化和/或脂質(zhì)儲(chǔ)存。保護(hù)胰腺e細(xì)胞的另一可能策略為降低氧化應(yīng)激(oxidativestress)。氧化應(yīng)激也可引起3細(xì)胞損傷及引起胰島素分泌損失和發(fā)展為顯性T2DM。因此，T2DM是由多種器官位點(diǎn)共存缺陷引起的復(fù)雜疾病肌肉和脂肪組織對(duì)胰島素的抵抗、有缺陷的胰腺胰島素分泌、無(wú)限制的肝糖產(chǎn)生。這些缺陷通常伴隨脂質(zhì)異常和內(nèi)皮官能障礙?？紤]到T2DM的多重病理生理學(xué)損傷，組合療法是處理該疾病的吸引人的療法。本發(fā)明涉及包含蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和亮氨酸的新穎的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物。該包含亮氨酸的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物還可包含未水解的蛋白質(zhì)和碳水化合物作為治療或預(yù)防糖尿病或其他葡萄糖耐量受損相關(guān)病癥(如X綜合癥和肥胖癥)的活性成分。另一方面，本發(fā)明涉及這類(lèi)化合物作為用于所述治療或預(yù)防的營(yíng)養(yǎng)添加劑的用途，例如作為多維生素制劑的添加劑，所述制劑包含維持正常代謝功能所必需但不在體內(nèi)合成的維生素和礦物質(zhì)。另一方面，本發(fā)明涉及治療1型和2型糖尿病以及用于在患有前驅(qū)糖尿病(pre-diabetes)或葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥的個(gè)體中預(yù)防T2DM的方法，其包括對(duì)需要這類(lèi)治療的受試者施用亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解的蛋白質(zhì)和/或碳水化合物。本發(fā)明的組合物尤其旨在治療T1DM和T2DM，并在患有前驅(qū)糖尿病或葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥的個(gè)體中預(yù)防T2DM。本發(fā)明涉及包含一種氨基酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的組合物。優(yōu)選所述一種氨基酸為亮氨酸。"一種氨基酸"或"是亮氨酸的一種氨基酸"在本文中應(yīng)理解為在旨在根據(jù)本發(fā)明使用的組合物或成分中存在的多種氨基酸中，至少70wtn/。的存在氨基酸為一種氨基酸(例如亮氨酸)，優(yōu)選至少80wt%、更優(yōu)選至少90wt。/。的存在的氨基酸為一種氨基酸，而存在少于30wt%,優(yōu)選少于20wt%、更優(yōu)選少于10wt。/。的其他氨基酸。該一種氨基酸(優(yōu)選亮氨酸)和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的組合有利的用于提高血液中的血漿胰島素，特別是對(duì)于2型糖尿病或前驅(qū)糖尿病。令人驚奇的是，發(fā)現(xiàn)與水解產(chǎn)物組合的一種氨基酸可用于2型糖尿病或前驅(qū)糖尿病，優(yōu)選降低血中餐后葡萄糖濃度或提高血中餐后胰島素分泌。令人驚奇的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)與兩種氨基酸(例如亮氨酸和苯丙氨酸)與水解產(chǎn)物的組合相比，使用亮氨酸和水解產(chǎn)物的組合給出相等的、甚至更好的結(jié)果。包含活性成分(即亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和/或碳水化合物)組合的組合物協(xié)同刺激胰島素分泌并促進(jìn)葡萄糖到胰島素敏感的目標(biāo)組織(如脂肪組織、骨骼肌和肝)的分配，并從而對(duì)糖尿病的治療起到促進(jìn)效應(yīng)。本文中使用的術(shù)語(yǔ)"營(yíng)養(yǎng)藥物性(nutmceutical)"表示了同時(shí)在營(yíng)養(yǎng)領(lǐng)域及醫(yī)藥領(lǐng)域應(yīng)用中的有效性。因此，新穎的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物可作為食物和飲料的添加劑，也可作為藥物制劑用于腸道或非腸道應(yīng)用，所述藥物制劑可以是固體制劑，例如膠囊或藥片，或是液體制劑，例如溶液或懸浮液。從前文明顯可知，術(shù)語(yǔ)"營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物"也包括含有亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和/或碳水化合物以及上面指明的活性成份的食物和飲料。可通過(guò)將蛋白質(zhì)來(lái)源與單一蛋白酶或蛋白酶組合共同溫育制備蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。這類(lèi)蛋白酶可以是任何類(lèi)型的蛋白酶，包括但不僅限于內(nèi)蛋白酶、氨肽酶、羧肽酶或雙氨肽酶和三氨肽酶。蛋白質(zhì)來(lái)源原則上可以是任何蛋白質(zhì)來(lái)源。優(yōu)選的來(lái)源是酪素或乳清蛋白。根據(jù)本發(fā)明的包含乳清蛋白的組合物可以是任何包含乳清蛋白的組合物，例如奶、奶油和奶酪乳清。乳清蛋白制劑可以以若干形式獲得，如乳清蛋白濃縮物(WPC)和乳清蛋白分離物(WPI)。用于水解的適當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)底物也包括全脂奶、脫脂奶、酸酪素、酶凝干酪素、酸乳清產(chǎn)品或奶酪乳清產(chǎn)品。另外，蔬菜底物如小麥麩、磨碎的大麥和得自例如大豆、水稻或玉米的蛋白質(zhì)組分是合適的底物?？赏ㄟ^(guò)將蛋白質(zhì)底物與一種蛋白水解酶或多種蛋白水解酶的組合接觸來(lái)制備蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。使用多于一種蛋白酶的情況下，這些蛋白酶可同時(shí)加入蛋白質(zhì)底物中?；蛘?，蛋白酶可以以預(yù)定的順序加入蛋白質(zhì)中。任選地，添加下一個(gè)蛋白酶前將水解過(guò)程中較早使用的蛋白酶滅活?？赏ㄟ^(guò)多種途徑進(jìn)行滅活，方法的選擇取決于需要被滅活的蛋白酶。滅活處理包括但不僅限于熱處理和pH變化。另外，可使用市售蛋白酶。蛋白質(zhì)底物的水解程度(DH)是一個(gè)重要的參數(shù)。蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物能夠達(dá)到的DH取決于大量參數(shù)，包括但不僅限于具體蛋白酶的選擇、允許水解進(jìn)行的時(shí)間、反應(yīng)條件(pH、溫度、鹽濃度等)和進(jìn)行蛋白酶水解之前對(duì)蛋白質(zhì)底物的預(yù)處理。適用于本發(fā)明加工的水解產(chǎn)物DH范圍可以是5-50，優(yōu)選10-40，更優(yōu)選15-35。水解產(chǎn)物可含有游離氨基酸。測(cè)定DH的方法為本領(lǐng)域?qū)＜宜?，例如由Church等描述的OPA方法(AnalBiochem(l985)146,343)?？梢酝ㄟ^(guò)多種途徑對(duì)水解產(chǎn)物進(jìn)一步加工，所述方法包括但不僅限于噴霧干燥、超濾、冷凍干燥、真空干燥。干燥后將干材料研磨并/或過(guò)濾以獲得特定顆粒大小范圍的組分?？上蛩猱a(chǎn)物中添加化合物以促進(jìn)干燥或影響干燥的水解產(chǎn)物的最終特性，如其結(jié)塊的趨勢(shì)或其可濕性。根據(jù)本發(fā)明，令人驚奇地發(fā)現(xiàn)包含亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物，或亮氨酸和未水解蛋白質(zhì)，或亮氨酸、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物，或亮氨酸、未水解蛋白質(zhì)和碳水化合物的組合物協(xié)同剌激胰腺的胰島素分泌并促進(jìn)葡萄糖分配到胰島素敏感的目標(biāo)組織。組合物的效應(yīng)比起通過(guò)亮氨酸或蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)或碳水化合物單獨(dú)效應(yīng)疊加所估計(jì)的預(yù)期效應(yīng)大得多。因此，包含亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和/或碳水化合物協(xié)同提高胰腺的胰島素分泌并促進(jìn)葡萄糖分配到胰島素敏感的目標(biāo)組織。因此，包含亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和/或碳水化合物的組合物能夠用于預(yù)防或治療T1DM和T2DM，并用于在患有前驅(qū)糖尿病、葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥的個(gè)體中預(yù)防T2DM。使用亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和/或碳水化合物(其各自顯示不同的作用機(jī)制)的組合對(duì)達(dá)到和維持糖尿病患者中目標(biāo)血糖水平有效。由于它們的不同作用，所以本發(fā)明考慮了上述活性成分的組合以便利用它們的協(xié)同效應(yīng)和多器官效應(yīng)。由于組合物的各個(gè)活性成分不同的作用機(jī)制，該組合物不僅改善血糖控制，而且引起一些配置中藥物劑量降低并使負(fù)作用最小化。由于它們不同的作用機(jī)制和位點(diǎn)，上述飲食添加劑的具體組合還利用協(xié)同效應(yīng)達(dá)到大于單一制劑可以達(dá)到的葡萄糖降低度。因此，雖然T1DM和T2DM治療中選擇的療法主要依賴(lài)于施用胰島素和口服降血糖藥物，但是合適的營(yíng)養(yǎng)學(xué)療法對(duì)于成功治療糖尿病也非常重要。多維生素和礦物質(zhì)添加劑可以添加進(jìn)本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物中以獲得適當(dāng)數(shù)量的某些食譜中缺失的必需營(yíng)養(yǎng)。多維生素和礦物質(zhì)添加劑還可用于疾病預(yù)防和防止?fàn)I養(yǎng)缺失和不足，所述營(yíng)養(yǎng)缺失和不足由糖尿病患者中有時(shí)觀察到的生活方式和日常不當(dāng)飲食模式引起。另外，氧化應(yīng)激也涉及胰島素抵抗的發(fā)展?；钚匝蹩赏ㄟ^(guò)破壞胰島素受體信號(hào)級(jí)聯(lián)削弱胰島素刺激的葡萄糖吸收。用抗氧化劑如a生育酚(維生素E)、抗壞血酸(維生素C)控制氧化應(yīng)激可具有治療糖尿病的價(jià)值。因此，多維生素添加劑的攝入可添加進(jìn)上述活性物質(zhì)以保持良好平衡的營(yíng)養(yǎng)。氨基酸(優(yōu)選亮氨酸)和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的另一重要用途是提高需要提高糖原水平人員的糖原水平，或提高有此需要的人員的胰島素分泌。后一用途可提供給例如運(yùn)動(dòng)員和其他從事體育鍛煉的人員。蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和氨基酸(優(yōu)選亮氨酸)可作為添加劑適當(dāng)?shù)赜糜谌魏文芰垦a(bǔ)充品或代謝營(yíng)養(yǎng)品中。能量補(bǔ)充品或營(yíng)養(yǎng)品可以是飲料形式，如運(yùn)動(dòng)飲料、能量飲料或其他軟飲，或適用于運(yùn)動(dòng)員或需要提高糖原水平或提高胰島素產(chǎn)生的其他人員的任何其他營(yíng)養(yǎng)品制劑。能量補(bǔ)充品或營(yíng)養(yǎng)品優(yōu)選是可以口服的形式。提高的糖原水平或提高的胰島素分泌可引起例如糖原儲(chǔ)存的更快重建和降解的肌肉蛋白質(zhì)的更快重建。運(yùn)動(dòng)飲料是推想用于給運(yùn)動(dòng)員再補(bǔ)充水分以及恢復(fù)電解質(zhì)、糖和其他營(yíng)養(yǎng)物的飲料。運(yùn)動(dòng)飲料通常是等滲的，這意味著它們含有與人體相同比例的營(yíng)養(yǎng)物。(來(lái)源http:〃en.wikipedia.org/wiki/Sports_drink)能量飲料是含有(合法)興奮劑、微生物(特別是維生素B)和礦物質(zhì)，旨在為使用者提供能量爆發(fā)的飲料。普遍成分包括咖啡因、瓜拉那(Guarana)(得自瓜拉那植物的咖啡因)、牛磺酸、多種形式的人參、麥芽糊精、肌醇、肉毒堿、肌酸、葡糖醛酸內(nèi)酯和銀杏。有的可含有高水平的糖或葡萄糖。許多這類(lèi)飲料被調(diào)味和/或調(diào)色。(來(lái)源http:〃en.wikipedia.org/wiki/Energy—drink)軟飲是不含酒精，與含酒精的硬飲相對(duì)的飲料。通常該術(shù)語(yǔ)僅用于冷飲。熱巧克力、熱茶和熱咖啡不認(rèn)為是軟飲。該術(shù)語(yǔ)最初僅涉及碳酸飲料，且仍然通常以該方式使用。(來(lái)源http:〃en.wikipedia.org/wiki/Soft—drink)在本發(fā)明優(yōu)選的一個(gè)方面，本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物含有亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。亮氨酸以給服用者提供從每kg體重約O.OOlg到每kg體重約1g的每日劑量的量適當(dāng)存在于本發(fā)明的組合物中。食物或飲料適當(dāng)?shù)暮忻糠菁s0.05g到每份約50g.的亮氨酸。如果營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物是藥物制劑，該藥物制劑可含有亮氨酸的量為每劑量單元(如每膠囊或藥片)約0.001g到約1g，或?qū)σ后w制劑而言每日劑量約0.035g到每日劑量約70g。蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物以給服用者提供每kg體重約0.01g到每kg體重約3g的每日劑量的量適當(dāng)存在于本發(fā)明的組合物中。食物或飲料適當(dāng)?shù)暮忻糠菁s0.1g到每份約100g的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。如果營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物是藥物制劑，該藥物制劑可含有蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的量為每劑量單元(如每膠囊或藥片)約0.01g到約5g，或?qū)σ后w制劑而言每日劑量約0.7g到每日劑量約210g。在本發(fā)明優(yōu)選的另一方面，該組合物含有上述亮氨酸和未水解的蛋白質(zhì)。未水解的蛋白質(zhì)以給服用者提供每kg體重約0.01g到每kg體重約3g的每日劑量的量適當(dāng)存在于本發(fā)明的組合物中。食物或飲料適當(dāng)?shù)暮忻糠菁s0.1g到每份約100g的未水解蛋白質(zhì)。如果營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物是藥物制劑，該藥物制劑可含有未水解蛋白質(zhì)的量為每劑量單元(如每膠囊或藥片)約0.01g到約5g，或?qū)σ后w制劑而言每日劑量約0.7g到每日劑量約210g。在本發(fā)明優(yōu)選的另一方面，組合物含有如上所述亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和碳水化合物。碳水化合物以給服用者提供每kg體重約O.Olg到每kg體重約7g的每日劑量的量適當(dāng)存在于本發(fā)明的組合物中。食物或飲料適當(dāng)?shù)暮忻糠菁s0.5g到每份約200g的碳水化合物。如果營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物是藥物制劑，該藥物制劑可含有碳水化合物的量為每劑量單元(如每膠囊或藥片)約0.05g到約10g，或?qū)σ后w制劑而言每日劑量約0.7g到每日劑量約490g。優(yōu)選的本發(fā)明營(yíng)養(yǎng)藥物性組合物包含亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或未水解蛋白質(zhì)和/或碳水化合物，特別是下列組合亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物；亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物；亮氨酸和未水解蛋白質(zhì)；亮氨酸和未水解蛋白質(zhì)和碳水化合物；最優(yōu)選亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的組合。劑量范圍(對(duì)70kg重的人而言)亮氨酸每天0.005g-70g蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每天0.07g-210g未水解蛋白質(zhì)每天0.07g-210g碳水化合物每天O.lg-490g圖例圖1:2型糖尿病患者(T2D)和健康對(duì)照受試者(CON)攝取碳水化合物(CHO;空心條)，碳水化合物和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物(CHO+PRO;陰影條)和碳水化合物、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和游離亮氨酸(CHO+PRO+LEU;實(shí)心條)后4小時(shí)內(nèi)血漿胰島素濃度(A)和應(yīng)答(B)的均值(士SEM)。*:與CHO試驗(yàn)相比有顯著差異，P<0.05，#:與CHO+PRO試驗(yàn)相比有顯著差異，P<0.05。相同試驗(yàn)的各組間未發(fā)現(xiàn)胰島素應(yīng)答差異。每組n=10。圖2:2型糖尿病患者(T2D)和健康對(duì)照受試者(CON)攝取碳水化合物(CHO;空心條)，碳水化合物和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物(CHO+PRO;陰影條)和碳水化合物、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和游離亮氨酸(CHO+PRO+LEU;實(shí)心條)后4小時(shí)內(nèi)血糖濃度(A)和應(yīng)答(B)的均值(士SEM)。*:與CHO試驗(yàn)相比有顯著差異，PO.05,#:糖尿病組相比有顯著差異，PO.Ol。每組11=10。圖3:2型糖尿病患者(T2D)和健康對(duì)照受試者(CON)攝取碳水化合物(CHO;空心條)，碳水化合物和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物(CHO+PRO;陰影條)和碳水化合物、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和游離亮氨酸(CHO+PRO+LEU;實(shí)心條)后4小時(shí)內(nèi)血漿必需氨基酸(除亮氨酸外，EAA-LEU)和非必需氨基酸(NEAA)應(yīng)答的均值(土SEM)。*:與CHO試驗(yàn)相比有顯著差異，PO.05,#:與CHO+PRO試驗(yàn)相比有顯著差異，P<0.05。相同試驗(yàn)的各組間未發(fā)現(xiàn)氨基酸應(yīng)答差異。每組11=10。下述實(shí)施例將更進(jìn)一步地闡述本發(fā)明。A.可以用下列組分按照傳統(tǒng)配制工序來(lái)制備藥物組合物實(shí)施例1軟明膠膠囊使用下列組分按照傳統(tǒng)工序來(lái)制備軟明膠膠囊活性成份亮氨酸0.1g，蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物0.3g其它組分甘油、水、明膠、植物油實(shí)施例2硬明膠膠囊使用下列組分按照傳統(tǒng)工序來(lái)制備硬明膠膠囊活性成份亮氨酸0.3g，蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物0.7g其它組分填料適量的乳糖或纖維素或纖維素衍生物潤(rùn)滑劑如果需要的話(huà)，硬脂酸鎂(0.5%)實(shí)施例3藥片使用下列組分按照傳統(tǒng)工序來(lái)制備藥片活性成份亮氨酸0.4g，未水解蛋白質(zhì)0.4g其它組分微晶纖維素、二氧化硅(Si02)、硬脂酸鎂、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉。B.可以使用下列組分按照傳統(tǒng)工序來(lái)制備食物產(chǎn)品實(shí)施例4含30%果汁的軟飲典型份量240ml活性成份該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和作為碳水化合物來(lái)源的麥芽糊精。亮氨酸每份0.5g-5g蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每份1.5g-15g麥芽糊精每份3g-30gI.用下述組分制備軟飲復(fù)合物果汁濃縮物和水溶性香料l.l橙汁濃縮物60.3。白利糖度(Brix)，5.15%酸度檸檬濃縮物43.5。白利糖度，32.7%酸度水溶性橙味香料水溶性杏味香料水[g]657.9995.9613.436.7126.461.2顏料[g]/3-胡蘿卜素10%CWS0.89水67.651.3酸和抗氧化劑抗壞血酸4.11無(wú)水梓檬酸0.69水43.181.4穩(wěn)定劑果膠0.20苯甲酸鈉2.74水65.601.5油溶性香料油溶性橙味香料0.34蒸餾得到的甜橙油0.341.6活性成份以上文提到的濃度存在的活性成份(這指上文提到的活性成份亮氨酸、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和麥芽糊精)。果汁濃縮物和水溶性香料在沒(méi)有空氣摻入的條件下混合起來(lái)。顏料被溶于去離子水中?？箟难岷蜋幟仕崛苡谒?。苯甲酸鈉溶于水中。攪拌下加入果膠，煮沸令其溶解。冷卻所述溶液。甜橙油和油溶性香料預(yù)先混合起來(lái)。1.6中提到的活性成份被干燥地混合起來(lái)，然后優(yōu)選攪拌添加到果汁濃縮物混合物(1.1)中。為制備所述的軟飲復(fù)合物，3丄1至3丄6的所有部分都被混合到一起，然后用Turrax以及高壓均質(zhì)機(jī)(Pl=200bar，p2=50bar)對(duì)其進(jìn)行均質(zhì)。II.用下述組分來(lái)制備瓶裝糖漿軟飲復(fù)合物水糖漿，60°白利糖度-所述瓶裝糖漿的組分被混合到一起。用水將所述瓶裝糖漿稀釋到1L，成為現(xiàn)成可用的飲料。變化可以對(duì)所述飲料進(jìn)行巴氏消毒來(lái)代替使用苯甲酸鈉。所述飲料還可經(jīng)過(guò)碳酸化。74.5050.00150.00實(shí)施例5五谷面包典型份量50g活性成份該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和未水解蛋白質(zhì)和碳水化合物(以五谷粉的形式)亮氨酸每份0.5g-5g未水解蛋白質(zhì)每份1.5g-15g其他組分[%]五谷粉(fivecerealflour)(碳水化合物來(lái)源)56.8水39.8酵母2.3鹽1.1所述酵母被溶于一部分水中。將所有組分混合到一起制成面團(tuán)。在揉捏過(guò)程結(jié)束時(shí)加鹽。發(fā)酵之后，對(duì)面團(tuán)進(jìn)行再次處理，并將其分開(kāi)，然后制成塊狀。烘焙之前，用水沖刷所述的塊表面，并撒上面粉。程序:螺旋揉捏系統(tǒng):面團(tuán)發(fā)酵面團(tuán)溫度發(fā)酵時(shí)間烘焙烤箱供倍溫度烘焙時(shí)間第一檔4分鐘，第二檔5分鐘60分鐘220C-240C30分鐘荷蘭式烤箱250oC/220oC50-60分鐘實(shí)施例6Milano類(lèi)型的曲奇餅典型份量:活性成份:30g該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物(以550型小麥粉的形式)亮氨酸每份0.3g-3g蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每份0.9g-9g其他組分[%〗小麥面粉，550型(碳水化合物來(lái)源)41.0糖20.5脂肪/黃油20.5全蛋(液)18.0檸檬香料適量烘焙劑適量在攪拌條件下將所有組分緩慢加入，制成甜酥點(diǎn)心團(tuán)(sweetshortpastry)。之后，將所述點(diǎn)心團(tuán)冷藏(4°C)至少2小時(shí)，之后將其抹平成厚度為大約5mm。烘焙前切成小塊，在表面刷上蛋黃。烘焙烤箱烘焙溫度烘焙時(shí)間鼓風(fēng)式烤箱(fanoven)15分鐘實(shí)施例7吐司面包典型份量100g活性成份該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和未水解蛋白質(zhì)和碳水化合物(以550型小麥粉的形式)亮氨酸每份0.6g-6g蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每份1.8g-18g其他組分[%]小麥面粉，550型(碳水化合物來(lái)源)55.4水33.2酵母2.8鹽1.1脂肪/黃油5.5麥芽0.6乳化烘焙劑1.4所述酵母被溶于一部分水中。所有組分被混合到一起，形成面團(tuán)。在揉捏過(guò)程結(jié)束時(shí)加入鹽。之后，對(duì)所述面團(tuán)進(jìn)行再次處理，將其分開(kāi)，放置于烘焙用烤模上以發(fā)酵。烘焙之后，所述的塊直接從模子里取出。螺旋揉捏系統(tǒng):面團(tuán)發(fā)酵:面團(tuán)溫度:發(fā)酵時(shí)間烘焙第一檔5-6分鐘，第二檔3-4分鐘無(wú)220C-240C40分鐘烤箱烘焙溫度:烘焙時(shí)間:荷蘭式烤箱220oC35-40分鐘實(shí)施例8酸奶-凝固型(Yoghurtsettype)，3.5%的脂肪典型份量225g活性成份該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物(以糖的形式)亮氨酸每份0.5g-5g蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每份1.5g-15g其他組分[%]全脂奶(3.8%的脂肪)90.5脫脂奶粉2.0糖(碳水化合物來(lái)源)5.0培養(yǎng)物2.5所述的奶被加熱至35°C，然后加入奶粉、穩(wěn)定劑、糖和活性成份。該混合物被加熱至65°C以溶解所有組分。然后在高壓均質(zhì)機(jī)中(p!=150bar,p2=50bar)于65°C下對(duì)所述混合物進(jìn)行均質(zhì)。再在80°C下對(duì)該乳狀物進(jìn)行20分鐘的巴氏消毒。冷卻到45。C后，加入天然酸奶/培養(yǎng)物，混勻。再將該混合物裝入若干杯子，在45°C下發(fā)酵3-4小時(shí)，直到pH達(dá)到4.3，然后將其貯藏在4。C下。實(shí)施例9酸奶-攪拌型，3.5%的脂肪典型份量225g該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物(以糖的形式)亮氨酸每份0.1g-lg蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每份0.3g-3g其他組分[%]全脂奶(3.8%的脂肪)90.2脫脂奶粉2.0穩(wěn)定劑0.3糖(碳水化合物來(lái)源)5.0培養(yǎng)物2.5所述的奶被加熱至35°C，然后加入奶粉、穩(wěn)定劑、糖和活性成份。該混合物被加熱至65°C以溶解所有組分，然后在高壓均質(zhì)機(jī)中(Pl=150bar,p2=50bar)于65°C下對(duì)所述混合物進(jìn)行均質(zhì)。再在80°C下對(duì)該乳狀物進(jìn)行20分鐘的巴氏消毒。冷卻到45。C后，加入天然酸奶/培養(yǎng)物，混勻，接著在45。C下發(fā)酵3-4小時(shí)，直到pH達(dá)到4.3。經(jīng)過(guò)冷卻及有力的攪拌之后，所述酸奶被裝進(jìn)若干杯子，在4。C貯藏。實(shí)施例10冰淇淋，8%的脂肪典型份量85g活性成份該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物(以葡萄糖漿的形式)亮氨酸每份0.1g-lg蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每份0.3g-3g其他組分[g]奶(3.7%的脂肪)600.00奶油(35%的脂肪)166.00脫脂奶粉49.10糖(碳水化合物來(lái)源)109.0080%的葡萄糖漿(碳水化合物來(lái)源)70.00冰淇淋穩(wěn)定劑5.00香料適量顏料適量將糖、脫脂奶粉和穩(wěn)定劑加入到奶和奶油中，混勻，加熱至45。C。然后將貯存液形式的顏料和葡萄糖漿以及活性成份加進(jìn)去。該混合物被加熱進(jìn)行巴氏消毒(80°C，20分鐘)。然后進(jìn)行均質(zhì)步驟。之后，該混合物在持續(xù)攪拌下被冷卻，在5°C下加入香料。將該混合物在5°C下成熟至少4小時(shí)，再通過(guò)冰淇淋機(jī)(膨脹率約為100%)。所述冰淇淋被裝入若干杯子，貯藏于-20。C至-30。C。-實(shí)施例11酒膠糖(winegum)活性成份該食物產(chǎn)品中加入了亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和碳水化合物(以冰糖和葡萄糖漿DE38的形式)亮氨酸每30g0.05g-0.5g蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物每30g0.15g-1.5g其他組分[g]明膠，200Bloom80.0水I125.0冰糖(碳水化合物來(lái)源)290.0水II120.0葡萄糖漿DE38(碳水化合物來(lái)源)390.0擰檬酸10.0香料2.0顏料足量總量(約)1000.0將明膠分散于水I中，攪拌，通過(guò)蒸氣浴加熱或使用微波爐令其溶解。將糖和水II混合，煮沸直到獲得澄清溶液。從熱源上移開(kāi)。趁著溶解有糖的溶液還是熱的，將其與糖漿混合。緩慢加入明膠溶液。保持靜置，直至表面泡沫能被除去，并達(dá)到60°C-65°C。在攪拌下加入香料、檸檬酸和顏料溶液以及活性成份。將其倒入淀粉盤(pán)(starchtmy)上印制的模子中，在室溫放置至少48小時(shí)。移走淀粉粉末，用油或蠟拋光。在室溫干燥并裝入密封小袋中。實(shí)施例12該實(shí)施例顯示共攝取(coingestion)促胰島素蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物(含有或不含額外的亮氨酸)與一團(tuán)碳水化合物組合后的餐后血漿胰島素和葡萄糖應(yīng)答。十位確診的長(zhǎng)期男性2型糖尿病患者和十位健康對(duì)照受試者參與3組試驗(yàn)，其中在攝入不同飲料組合物(碳水化合物，CHO;碳水化合物加蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物，CHO+PRO;或碳水化合物、蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和游離亮氨酸，CHO+PRO+LEU)后確定血糖、胰島素和氨基酸應(yīng)答。與CHO試驗(yàn)(pO.05)相比，2型糖尿病患者在CHO+PRO和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中的血漿胰島素應(yīng)答分別為141%和204%，而對(duì)照組在CHO+PRO和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中的血漿胰島素應(yīng)答分別為66%和221%。與CHO試驗(yàn)(pO.05)相比，2型糖尿病患者和對(duì)照中伴隨血糖應(yīng)答分別為15，降低12%和92，降低97%。血漿亮氨酸濃度與胰島素應(yīng)答密切相關(guān)(F0.43,PO.OOl)。我們得出結(jié)論碳水化合物攝取后共攝取含有或不含額外游離亮氨酸的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物促進(jìn)胰島素應(yīng)答，從而顯著降低確診的長(zhǎng)期2型糖尿病患者的餐后葡萄糖偏離。對(duì)象和方法對(duì)象十位確診的長(zhǎng)期男性2型糖尿病患者和十位健康的(年齡和BMI匹配)對(duì)照受試者被選擇參與該研究。受試者的特征列于表1。排除標(biāo)準(zhǔn)為受損的腎功能或肝功能、肥胖癥(BMI〉35kg/m2)、心臟病、高血壓、糖尿病并發(fā)癥和外源胰島素治療。所有的2型糖尿病患者均使用口服降血糖藥物(甲福明二甲雙胍和/或磺酰脲)。篩選前兩天停用降血糖藥物，且在各試驗(yàn)前2天停用磺酰脲而不停用甲福明二甲雙胍。所有的受試者己被告知實(shí)驗(yàn)的性質(zhì)和風(fēng)險(xiǎn)后獲得他們的書(shū)面知情同意書(shū)。所有的臨床試驗(yàn)由地方醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。表l:受試者特征<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>1數(shù)值表達(dá)為均值士SEM22hOGTT后的血糖濃度3如別處所述(22)2小時(shí)OGTT后的口腔葡萄糖胰島素敏感性指數(shù)^與對(duì)照組的差異P0.01"與基底值的差異P0.01篩選在被選擇參加本研究前，所有的受試者進(jìn)行了口腔葡萄糖耐受測(cè)試(OGTT)。禁食過(guò)夜后，受試者開(kāi)車(chē)或通過(guò)公共交通在上午8:00到達(dá)實(shí)驗(yàn)室。向肘前靜脈插入導(dǎo)管(BaxterBV，Utrecht,theNetherlands)并取出靜脈血，然后攝取75g葡萄糖(溶于250ml水中)。吃完后每30分鐘采血直到t=120分鐘。測(cè)量血糖濃度以根據(jù)世界衛(wèi)生組織1999號(hào)標(biāo)準(zhǔn)(參閱Alberti,K.G.&Zimmet,P.Z.(1998)Definition,diagnosisandclassificationofdiabetesmellitusanditscomplications.Part1:diagnosisandclassificationofdiabetesmellitusprovisionalreportofaWHOconsultation.DiabetMed15:539-553)確定葡萄糖不耐性和/或2型糖尿病。此外，如Mari等，J.J.(2001).DiabetesCare24:539-548所述，對(duì)2小時(shí)OGTT使用血糖濃度和血漿胰島素濃度用口內(nèi)葡萄糖胰島素敏感性(OGIS)指數(shù)評(píng)估胰島素敏感性。設(shè)計(jì)各受試者參與3個(gè)試驗(yàn)，每個(gè)試驗(yàn)間隔至少7天，其中攝取3種不同的飲料組合物(CHO:碳水化合物，CHO+PRO:碳水化合物加酪素蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物或CHO+PRO+LEU碳水化合物、酪素蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物和亮氨酸)后測(cè)定血漿葡萄糖、胰島素和氨基酸應(yīng)答。受試者置于仰臥位置并在4小時(shí)內(nèi)保持不活動(dòng)。飲料以隨機(jī)順序和雙盲方式提供。流程過(guò)夜禁食后，受試者開(kāi)車(chē)或通過(guò)公共交通在上午8:00到實(shí)驗(yàn)室報(bào)到。向肘前靜脈插入特氟隆(Teflon)導(dǎo)管(BaxterBV,Utrecht,theNetherlands)進(jìn)行靜脈血采樣并收集靜脈血樣品。t=0時(shí)受試者喝下一種(4mL/kg)實(shí)驗(yàn)飲料。第一個(gè)小時(shí)內(nèi)每15分鐘采血樣，之后每隔30分鐘采血樣直至t=240分鐘，血樣用于測(cè)量血漿葡萄糖和胰島素濃度。血漿氨基酸濃度以1小時(shí)的間隔測(cè)定。測(cè)試前的飲食和活動(dòng)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，所有的受試者保持他們?nèi)粘５娘嬍澈蜕眢w運(yùn)動(dòng)模式。此外，受試者在各項(xiàng)試驗(yàn)前至少3天禁止重體力活和/或鍛煉訓(xùn)練并在首項(xiàng)試驗(yàn)前2天增加每日食物攝取以保證他們的飲食攝取盡可能與其他試驗(yàn)前一致。各試驗(yàn)前的傍晚，受試者進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的進(jìn)餐(43.80kJ/kg體重；由60。/。能量(Eny。)碳水化合物、28%脂肪和12%蛋白質(zhì)組成)。飲料受試者得到一顆大丸劑(4mL/kg)，其含有0.7g/kg碳水化合物(50%葡萄糖和50%麥芽糖糊精，CHO)與0.3g/kg酪素蛋白水解產(chǎn)物(CHO+PRO)或0.3g/kg酪素蛋白水解產(chǎn)物和0.1g/kg亮氨酸(CHO+PRO+LEU)。葡萄糖和麥芽糖糊精得自AVEBE(Veendam,theNetherlands),晶體亮氨酸來(lái)自BUFA(Uitgeest,theNetherlands)，酪素蛋白水解產(chǎn)物由DSMFoodSpecialties(Delft,theNetherlands)制備。酪素水解產(chǎn)物(InsuvitalTM)得自使用中性蛋白酶和脯氨酰特異性?xún)?nèi)蛋白酶對(duì)酪蛋白酸鈉的酶促水解。飲料通過(guò)每升飲料添加0.2g糖精鈉(sodiumsaccharinate)、1.8g檸檬酸和5g奶油香草香料(QuestInternational,Naarden,theNetherlands)統(tǒng)一調(diào)味。血樣分析血樣收集于含有EDTA的管中并在1000g和4。C離心10分鐘。血衆(zhòng)等分試樣在液氮中瞬時(shí)冷凍并儲(chǔ)存在-8(TC直至分析。使用COBASFARA半自動(dòng)分析儀(Roche)分析葡萄糖濃度(UniKitIII，Roche，Basel)。通過(guò)放射性免疫測(cè)定(HI-14K,LincoresearchInc，StCharles,USA)測(cè)定血槳胰島素。用正纈氨酸作為內(nèi)標(biāo)，使用具有水合茚三酮衍生化的后柱的離子交換色譜(JEOL,AminoTacJLC-500/V)來(lái)分析游離氨基酸。分析前用5-磺基水楊酸將樣品去蛋白。為了測(cè)定HbAlc含量，將3ml血樣收集在含EDTA的管中并通過(guò)高效液相色譜(Bio-RadDiamat，Munich，Germany)分析。統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表達(dá)為均值土SEM。血槳應(yīng)答計(jì)算為曲線下基線值以上的區(qū)域面積。為了按時(shí)間比較試驗(yàn)之間血漿代謝物濃度，進(jìn)行雙通道重復(fù)測(cè)量方差分析(ANOVA)。使用單通道重復(fù)測(cè)量ANOVA檢測(cè)各組中時(shí)間改變的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。在顯著的F比值情況下進(jìn)行Scheffe's事后比較(Scheffe'spost-hoctest)以便定位特定差異。對(duì)于非時(shí)間依賴(lài)性的變量，使用多通道ANOVA或者學(xué)生t檢驗(yàn)(Students，t-test)。顯著性設(shè)定于0.05水平可信度。所有的計(jì)算使用StatView5.0(SASInstitureinc.,Cary，NC,USA)進(jìn)行。結(jié)果血漿胰島素濃度各組和各試驗(yàn)間基線血漿胰島素濃度類(lèi)似，且2型糖尿病和對(duì)照組分別為11.2±1.5mU/L和13.0±1.1mU/L(圖1A，P=0.1)。攝取不同的飲料后，2型糖尿病患者中CHO試驗(yàn)的血槳胰島素水平?jīng)]有提高而CHO+PRO和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中有所提高(PO.05)。在對(duì)照組中，飲料攝取后第一小時(shí)內(nèi)觀察到血漿胰島素濃度的強(qiáng)烈上升(PO.05)。該上升在CHO+PRO禾BCHO+PRO+LEU試驗(yàn)中最為明顯。在所有的試驗(yàn)中，每組的血漿胰島素濃度在實(shí)驗(yàn)的最后一小時(shí)都返回基線濃度。糖尿病組中，與CHO試驗(yàn)相比，CHO+PRO和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中胰島素應(yīng)答(基線值上AUC)分別為141±40%和204±37%(PO.05,圖1B)。對(duì)照組中，與CHO試驗(yàn)相比，CHO+PRO和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中胰島素應(yīng)答分別為66±22。％和221±82%(PO.05)。此外在對(duì)照組中，CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中胰島素應(yīng)答顯著高于CHO試驗(yàn)(P0.05)。相同試驗(yàn)中各組間未觀察到胰島素應(yīng)答差異.血糖濃度與正常血糖對(duì)照相比，2型糖尿病患者的禁食血糖濃度更高(8.6士0.6相對(duì)于5.7±0.1mmol/L，P<0.01)。攝取不同的飲料后，在所有的試驗(yàn)中，糖尿病患者的血糖濃度與其匹配的對(duì)照相比仍然顯著偏高(PO.01,圖2A)。飲料攝取后第一小時(shí)2型糖尿病患者中血糖濃度顯著提高，之后數(shù)值恢復(fù)到接近基線值(圖2A)。測(cè)試飲料攝取后第一個(gè)30分鐘對(duì)照組到血糖濃度提高，之后血糖濃度也恢復(fù)到基線值。對(duì)照組中，與CHO試驗(yàn)相比，CHO+PRO禾卩CHO+PRO+LEU試驗(yàn)的血糖濃度降低得更快，導(dǎo)致t=45分鐘和t=60分鐘時(shí)更低的血糖濃度(PO.05，圖2A)。將餐后葡萄糖應(yīng)答表達(dá)為曲線下基線值以上區(qū)域面積(圖2B)后，與CHO試驗(yàn)相比，2型糖尿病組的CHO+PRO試驗(yàn)和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中的葡萄糖應(yīng)答分別降低15±5%和12±3%，對(duì)照組CHO+PRO試驗(yàn)和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中的葡萄糖應(yīng)答分別降低92±2%和97±3%。所有試驗(yàn)中與對(duì)照相比，糖尿病患者的血糖應(yīng)答顯著偏高(PO.Ol，圖2B)。2型糖尿病患者中葡萄糖應(yīng)答與伴隨的胰島素應(yīng)答成負(fù)相關(guān)(F0.48,PO.01)。血漿氨基酸濃度禁食血漿氨基酸濃度公布于表2。200680002592.4說(shuō)明書(shū)第22/24頁(yè)表2:<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>1數(shù)值(^mol/L)表達(dá)為均值土SEM對(duì)于2型糖尿病患者11=10，對(duì)于對(duì)照n-10、必需氨基酸。*與對(duì)照組差異P<0.05。與匹配的對(duì)照相比，2型糖尿病患者在基線上的血漿必需氨基酸(EAA)和非必需氨基酸(NEAA)濃度更高(P0.05)，其中必需氨基酸亮氨酸25(144.9±3.2相對(duì)于122.8±3.0umol/L)，異亮氨酸(79.1±2.3相對(duì)于66.0±2.0umol/L)，賴(lài)氨酸(204.2±5.4相對(duì)于187.8±4.7wmol/L)和纈氨酸(252.4±4.9相對(duì)于216.7士5.0umol/L);非必需氨基酸丙氨酸(431±17.0相對(duì)于370.3±19.2wmol/L)，谷氨酰胺(109.7±5.9相對(duì)于94.3±4.3"mol/L)和脯氨酸(94.7±5.8相對(duì)于77.1±3.1umol/L)。與對(duì)照受試者相比，基底、禁食狀態(tài)下2型糖尿病患者中血漿精氨酸(110士0.6相對(duì)于128.1±7.0umol/L)和天冬氨酸(34.8土1.2相對(duì)于39.0±1.1"mol/L)濃度偏低。表3提供了血漿游離氨基酸應(yīng)答(計(jì)算為曲線下基線值上方區(qū)域面積)的完整總結(jié)。表3:飲料攝取后血漿氨基酸應(yīng)答1<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>i數(shù)值為曲線下方區(qū)域減去基線的面積(mmol/L/4h)，并表達(dá)為均值士SEM，2型糖尿病11=10，對(duì)照n-10、必需氨基酸。*各試驗(yàn)間與對(duì)照組差異P<0.05。+組內(nèi)與CHO試驗(yàn)差異PO.05。#組內(nèi)與CHO+PRO試驗(yàn)差異PO.05。通常，氨基酸應(yīng)答在CHO試驗(yàn)中為陰性，在CHO+PRO試驗(yàn)中為陽(yáng)性，并在CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中共攝取亮氨酸后為一個(gè)中間值。觀察到了胰島素應(yīng)答分別與血漿中下列氨基酸的增加表現(xiàn)出非常強(qiáng)的正相關(guān)性亮氨酸(PO.001)、瓜氨酸(PO.001)、半胱氨酸(PO.04)、賴(lài)氨酸(PO.OOl)、甲硫氨酸(P0.04)、鳥(niǎo)氨酸(PO.01)和脯氨酸(P<0.01)。當(dāng)計(jì)算對(duì)非必需氨基酸(NEAA)的應(yīng)答和對(duì)必需氨基酸(NEAA)的應(yīng)答(除補(bǔ)充的亮氨酸外，EAALEU)時(shí)，觀察到了下述2型糖尿病患者的應(yīng)答(圖3A)和對(duì)照組的應(yīng)答(圖3B)。在2型糖尿病組中，EAA-LEU應(yīng)答在CHO試驗(yàn)中是陰性的，并且在CHO+PRO試驗(yàn)和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中顯著更高(-27.7±5.8相對(duì)于31.2±6.1及11.5土4.6mmol/L/4h，PO.05)。此外，與CHO+PRO試驗(yàn)相比較，CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中的EAA-LEU應(yīng)答顯著更低(60±4%,PO.05)。血漿NEAA應(yīng)答在CHO試驗(yàn)中是陰性的，并且在糖尿病人的CHO+PRO試驗(yàn)和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中顯著更高(-28.8土14.7相對(duì)于23.1士8.8及10.2士13.8讓ol/L/4h，PO.05)。在對(duì)照組中也有類(lèi)似的發(fā)現(xiàn)。在CHO試驗(yàn)中觀察到了陰性的血漿EAA-LEU應(yīng)答，并在CHO+PRO試驗(yàn)和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中觀察到了顯著更高的EAA-LEU應(yīng)答(-35.0±6.7相對(duì)于.37.9±5.1以及12.7±4.1mmol/L/4h，P<0.05)。在CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中額外的亮氨酸導(dǎo)致了與CHO+PRO試驗(yàn)相比較降低了65±5%的血漿EAA-LEU應(yīng)答(PO.05)。NEAA應(yīng)答在CHO試驗(yàn)中是陰性的，并在CHO+PRO試驗(yàn)和CHO+PRO+LEU試驗(yàn)中顯著更高(-60.8士13.6相對(duì)于27.6±10.6禾B11.2±9.8mmol/L/4h，PO.05)。各組之間未觀察到氨基酸應(yīng)答的差異。權(quán)利要求1.組合物，其包含一種氨基酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述一種氨基酸為亮氨酸。3.如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其還包含碳水化合物。4.如權(quán)利要求1-3中任意一項(xiàng)所述的組合物，其適用于在患有前驅(qū)糖尿病或葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥或確定的2型糖尿病的個(gè)體中治療或預(yù)防2型糖尿病(T2DM)。5.如權(quán)利要求1所述的組合物，其中存在未水解的蛋白質(zhì)。6.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的組合物，其含有足夠數(shù)量的亮氨酸，能對(duì)受試者施用每kg體重0.005g到約每kg體重1g的日劑量。7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的組合物，其含有足夠數(shù)量的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物，能對(duì)受試者施用每kg體重0.01g到每kg體重約3g的日劑量。8.權(quán)利要求5所述的組合物，其含有足夠數(shù)量的未水解蛋白質(zhì)，能對(duì)受試者施用每kg體重0.01g到每kg體重約3g的日劑量。9.權(quán)利要求3中任一項(xiàng)所述的組合物，其含有足夠數(shù)量的碳水化合物，能對(duì)受試者施用每kg體重0.01g到每kg體重約7g的日劑量。10.—種劑量單元，其含有權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)所述的組合物。11.權(quán)利要求IO所述的劑量單元，其中所述劑量單元形式為固體形式。12.含有0.01g到約5g亮氨酸的劑量單元。13.權(quán)利要求10-12中任一項(xiàng)所述的劑量單元，其中所述劑量單元包含約O.lg到約50g的蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。14.權(quán)利要求10-13中任一項(xiàng)所述的劑量單元，其中所述劑量單元包含約O.lg到約50g的未水解蛋白質(zhì)。15.權(quán)利要求10-14中任一項(xiàng)所述的劑量單元，其中所述劑量單元包含約0.3g到約150g的碳水化合物。16.如權(quán)利要求l-9中任意一項(xiàng)所述的組合物，其為食物或飲料，或是用于食物或飲料的添加劑組合物。17.亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的組合的用途，所述亮氨酸以足夠向向服用者提供每kg體重0.001g至每kg體重約1g的每日劑量的量來(lái)使用，所述蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物以足夠向服用者提供每kg體重0.01g至每kg體重約3g的每日劑量的量來(lái)使用。18.權(quán)利要求17所述的用途，其中所述組合存在于食物或飲料中，或用于食物或飲料的添加劑組合物中。19.權(quán)利要求18所述的用途，其中所述組合旨在在患有前驅(qū)糖尿病或葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥的個(gè)體中用于治療1型或2型糖尿病，或用于預(yù)防2型糖尿病。20.權(quán)利要求19所述的用途，其中所述組合用于制備藥物組合物，所述藥物組合物用于在患有前驅(qū)糖尿病或葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥的個(gè)體中治療1型或2型糖尿病，或用于預(yù)防2型糖尿病。21.用于在患有前驅(qū)糖尿病或葡萄糖耐量受損(IGT)或肥胖癥的個(gè)體中治療1型或2型糖尿病，或用于預(yù)防2型糖尿病的方法，其包括對(duì)需要這類(lèi)治療的受試者施用亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。22.亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物提高血漿胰島素的用途。23.亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物提高2型糖尿病或前驅(qū)糖尿病的血漿胰島素的用途。24.亮氨酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物降低2型糖尿病或前驅(qū)糖尿病的餐后血糖濃度的用途。25.亮氮酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物提高2型糖尿病或前驅(qū)糖尿病的餐后血液胰島素濃度的用途。全文摘要本發(fā)明描述了一種組合物，其中包含一種氨基酸和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物。文檔編號(hào)A61K38/01GK101106914SQ200680002592公開(kāi)日2008年1月16日申請(qǐng)日期2006年1月16日優(yōu)先權(quán)日2005年1月18日發(fā)明者盧卡斯·約翰尼斯·科尼利厄斯·魯恩范,斯文·沃爾夫拉姆申請(qǐng)人:帝斯曼知識(shí)產(chǎn)權(quán)資產(chǎn)管理有限公司