專利名稱：三肽砜和四肽砜的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及三肽砜(tripeptide sulfone)和四肽砜(tetrapeptidesulfone)、含有其的藥物組合物、其藥物應(yīng)用以及其制備。
背景技術(shù)：
美國專利第5599903號(hào)；第5763570號(hào)；第5767086號(hào)；第5786336；和第5955432號(hào)；歐洲專利公開第0 645 397號(hào)；和PCT國際公開號(hào)WO 95/08563和WO 96/40205披露了是還原的谷胱甘肽(L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰甘氨酸)的類似物的多種三肽和四肽化合物，包括下面化學(xué)式的化合物[WO 95/08563] 以及它們的C1-10烷基或者鏈烯基或者C7-12芳烷基酯、酰胺，以及混合的酯/酰胺，其中Z為S，O，或C；n為1至3；當(dāng)Z為S或O且n為1時(shí)，X是可選包含1或2個(gè)不相鄰的O，S，或N雜原子，未取代或者用鹵素，-NO、-NO2、-NR2、-OR、或-SR(其中R為H或C1-4烷基)單取代或者二取代的C1-20烴基；當(dāng)Z為S且n為2時(shí)，一個(gè)X是按上述定義，而另一個(gè)X是C1-4烷基；以及當(dāng)Z為C且n為3時(shí)，一個(gè)X是按上述定義，而另兩個(gè)X獨(dú)立地是H或者C1-4烷基；YCO是γ-glu、β-asp、glu、asp、γ-glu-gly、β-asp-gly、glu-gly、asp-gly；以及AAc是通過肽鍵連接至該化合物其余部分的氨基酸。
這些化合物據(jù)稱具有多種用途，包括作為用于表征谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)同功酶、確定細(xì)胞和組織的GST補(bǔ)體(complement)的試劑，作為色譜親合配體，粘合劑以及酶抑制劑；以及在治療學(xué)上，用于增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性、提高骨髓中粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞(GM)祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓的分化、減輕化療劑的骨髓破壞效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
TLK117，在那些專利和出版物中被確定為TER117，并不同地命名為γ-Glu-Cys(Bz)-苯基Gly、γE-C(Bz)-_G、γE-C(Bz)-PG、γE-C(芐基)-_G、和芐基PG，就是這些化合物中的一種。TLK117是具有以下化學(xué)式的化合物
并且可以命名為L-γ-谷氨酰基-S-(苯甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸。TLK117抑制GST P1-1的IC50大約為400nM。TLK199，在那些專利和出版物中被確定為TER199，是TLK117的二乙酯；而TLK261和TLK262則分別是二甲酯和二異丙酯。
美國公開申請(qǐng)?zhí)?003/0100511和PCT國際公開號(hào)WO00/44366披露了以下化學(xué)式化合物的二酯的脂質(zhì)制劑，包括脂質(zhì)體制劑 其中每個(gè)酯為1-25C；YCO為γ-glu或者β-asp；G*是苯基甘氨酸；Z是CH2、O、或S；以及X是6-8C的烷基、芐基或者萘基，或者其藥用鹽；或者以下化學(xué)式的化合物
其中R1和R2獨(dú)立地選自直鏈或支鏈的烷基基團(tuán)(1-25C)、環(huán)烷基基團(tuán)(6-25C)、取代的烷基基團(tuán)(2-25C)、雜環(huán)基(6-20C)、醚或聚醚(3-25C)，或者其中R1-R2(2-20C)一起形成具有該化學(xué)式的大環(huán)；以及R3是6-8C的烷基、芐基、或萘基，或者其藥用鹽。
Townsend等人的Mol.Cancer Ther.，1(12)，1089-1095(2002)披露了以下化學(xué)式的化合物 “乙烯基砜”，是canfosfamide的GST-介導(dǎo)裂解的兩個(gè)產(chǎn)物之一，canfosfamide是以下化學(xué)式的GST-活化的抗癌劑， 其披露在美國專利第5556942號(hào)和PCT國際公開號(hào)WO 95/09866中，在那里其被稱為TER 286。
許多疾病是以減少的骨髓為特征，包括骨髓增生異常綜合癥(MDS)，一種形式的白血病前期病，其中骨髓產(chǎn)生不足量的三種主要血液成分(白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板)中的一種或多種。骨髓抑制-血細(xì)胞水平的降低以及骨髓中新血細(xì)胞產(chǎn)生的減少，也是很多常用化療藥的普遍的毒性作用。
TLK199已經(jīng)顯示在體外誘導(dǎo)HL-60前髓細(xì)胞性白血病細(xì)胞的分化，增強(qiáng)體外和體內(nèi)的細(xì)胞毒劑的活性，并刺激正常人外周血中造血祖細(xì)胞的所有三個(gè)譜系的集落的形成。在臨床前試驗(yàn)中，TLK199已經(jīng)顯示出增加正常動(dòng)物中以及其白細(xì)胞因使用順鉑或者氟尿嘧啶的治療被消耗的動(dòng)物中的白血細(xì)胞的產(chǎn)生。類似的效果可能提供一種治療MDS的新方法。TLK199目前正在被進(jìn)行用于治療MDS的二期臨床試驗(yàn)的評(píng)價(jià)。來自該試驗(yàn)的中間結(jié)果(報(bào)告于2004和2005 American Society of Hematology會(huì)議)證實(shí)了TLK199被很好地耐受并且導(dǎo)致多譜系血液改善。這些結(jié)果還啟示出TLK199在治療化療引起的血細(xì)胞減少方面的潛在作用。
開發(fā)出用于人的GST P1-1的強(qiáng)效抑制劑，以增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒素效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用，是合乎需要的。

發(fā)明內(nèi)容
在第一方面，本發(fā)明提供以下化學(xué)式的化合物
其中X為L-γ-谷氨?；蛘週-γ-谷氨酰基甘氨?；?；Y為H，可選取代的烷基、可選取代的雜烷基、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、或者可選取代的雜芳烷基；以及Z為C5-9烷基、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、或者可選取代的雜芳烷基；以及它們的C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯或者二酯；以及這些化合物的鹽及其單酯和二酯的鹽。
該化合物(尤其是以酸形式)在體外是GST P1-1的抑制劑，典型地是選擇性的抑制劑。在二酯形式中，它們也已經(jīng)顯示出在來自體外HL-60細(xì)胞的GSTπ的免疫沉淀反應(yīng)方面有效，并且對(duì)體外的HL-60細(xì)胞有細(xì)胞毒性。它們也在增強(qiáng)體外HL-60細(xì)胞的分化方面有活性，并且一種化合物已經(jīng)顯示出增強(qiáng)從體外鼠骨髓細(xì)胞的粒細(xì)胞/單核細(xì)胞集落的形成。從這一點(diǎn)以及從與TLK117、TLK199和有關(guān)的化合物的結(jié)構(gòu)相似性看，本發(fā)明的化合物因此有望在人的治療方面起作用以致增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓細(xì)胞的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
在第二方面，本發(fā)明涉及包含本發(fā)明第一方面的化合物和可選的一種或多種賦形劑的藥物組合物。
在第三方面，本發(fā)明涉及通過給予本發(fā)明第一方面的化合物或者本發(fā)明第二方面的藥物組合物的治療方法，尤其是對(duì)人的治療方法，以用于下列中的一項(xiàng)或多項(xiàng)增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的毒性、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓細(xì)胞的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用，以及涉及本發(fā)明第一方面的化合物在制備用于下列中的一項(xiàng)或多項(xiàng)的藥物中的應(yīng)用增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的毒性、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓細(xì)胞的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
在第四方面，本發(fā)明涉及制備本發(fā)明第一方面的化合物的方法。
在第五方面，本發(fā)明提供下面化學(xué)式的化合物 其中X是N-α-R1-L-γ-谷氨?；騈-α-R1-L-γ-谷氨?；拾滨；?，其中R1為氨基保護(hù)基團(tuán)；以及Y和Z按照對(duì)本發(fā)明第一方面的化合物所定義；
以及它們的C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯和二酯；以及這些化合物及其單酯和二酯的鹽。這些化合物可用作制備本發(fā)明第一方面化合物的中間體。
本發(fā)明的優(yōu)選具體實(shí)施方式
由如提交的本申請(qǐng)的說明書和權(quán)利要求2-20的特征加以特征化，本發(fā)明的具體實(shí)施方式
的特征還在于這些化合物的藥物組合物、方法和用途。
具體實(shí)施例方式
定義“烷基”是指通過從碳原子上去除一個(gè)氫原子而衍生自飽和或不飽和(但非芳香不飽和)的C1-C10、優(yōu)選C1-C6碳?xì)浠衔锏膯蝺r(jià)基團(tuán)，其可以是直鏈、支鏈、或環(huán)形，例如甲基、乙基、丙基、1-丙烯基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯-1-基、環(huán)丙基甲基、環(huán)己基、和環(huán)己基甲基。飽和烷基和C1-C6烷基是代表性的。注意，本申請(qǐng)中“烷基”的定義比傳統(tǒng)的定義更廣，并且包括更經(jīng)常稱作“環(huán)烷基”、“環(huán)烷基烷基”、“鏈烯基”、和“炔基”的基團(tuán)。
“取代的烷基”是被多達(dá)三個(gè)鹵原子和/或選自-CN、-NO2、-OR、和-NR2(其中，每個(gè)R獨(dú)立地為氫、或C1-3烷基)的取代基所取代的烷基。因此，例如，取代的烷基基團(tuán)包括如三氟甲基和3-氯丙基的基團(tuán)。優(yōu)選的取代的C5-6環(huán)烷基是環(huán)戊基和環(huán)己基，其被1或2個(gè)、特別是1個(gè)選自鹵素、羥基、甲基、三氟甲基和甲氧基，尤其是氟、氯、或甲基的基團(tuán)所取代。
“雜烷基”是指其中1或2個(gè)亞甲基基團(tuán)被O、S、SO2、或NR(其中R為H或C1-3烷基)替代的“烷基”(如上文所定義的)，包括如3-氧戊基的直鏈基團(tuán)；含有5或6個(gè)環(huán)原子的單環(huán)，如2-四氫呋喃基、2-吡咯烷基、3-哌啶基、2-哌嗪基、4-二氫吡喃基、和3-嗎啉基；以及諸如四氫呋喃-2-基甲基和哌啶-3-基乙基的基團(tuán)。優(yōu)選的C5-6環(huán)雜烷基基團(tuán)是其中1個(gè)環(huán)亞甲基基團(tuán)被O、S、SO2、NH、或N-甲基替代的環(huán)戊基或者環(huán)己基；并且包括2-和3-四氫呋喃基、3-和4-四氫吡喃基、4-四氫硫代吡喃基及其S，S-二氧化物，以及2-、3-、和4-哌啶基?！叭〈碾s烷基”是以相同于上述取代的烷基的方式取代的雜烷基。
“芳基”是指通過從碳原子上去除一個(gè)氫原子而衍生自含有6至14個(gè)環(huán)碳原子的芳香烴的單價(jià)基團(tuán)，其可以為單環(huán)(例如，苯基)，稠多環(huán)(例如，萘基)，或者聯(lián)多環(huán)(例如聯(lián)苯基)。
“取代的芳基”是指用多達(dá)3個(gè)取代基取代的芳基，這些取代基選自鹵原子、-CN、-NO2、-OH，可選鹵-取代的C1-3烷基(例如，乙基、三氟甲基)、可選鹵-取代的C1-3烷氧基、苯氧基、(C5-6雜芳基)氧基、甲?；?、羧基、C1-3烷氧羰基、以及-NR2(其中每個(gè)R獨(dú)立地為H或者C1-3烷基)。
“芳烷基”是指用芳基取代的烷基，如芐基和苯乙基?！叭〈姆纪榛笔侵钙渲蟹蓟屯榛械囊粋€(gè)或兩個(gè)被取代的芳烷基，其取代方式與上述對(duì)取代的芳基和取代的烷基所描述的相同。
“鹵素”或“鹵代”是指F、Cl、或者Br。
“雜芳基”是指通過從碳原子上去除一個(gè)氫原子而衍生自含有5-14個(gè)環(huán)碳原子的芳香烴、其中1至4個(gè)環(huán)碳原子被O、S、N或NR(其中R為H或C1-3烷基)替代的單價(jià)基團(tuán)，并且可以是含有5或6個(gè)環(huán)原子的單環(huán)(如呋喃基、噻吩基、吡咯基、呃唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、噠嗪基、和嘧啶基)；稠二環(huán)(如苯并咪唑基、苯并三唑基、和喹啉基)；或者聯(lián)二環(huán)，尤其是(C5-6雜芳基)-苯基，如4-(2-吡啶基)苯基。優(yōu)選的C5-6雜芳基基團(tuán)是2-和3-呋喃基、2-和3-噻吩基，以及2-、3-和4-吡啶基?！叭〈碾s芳基”是指以對(duì)上述取代的芳基同樣的方式取代的雜芳基。
“雜芳烷基”是指用雜芳基取代的烷基，如2-吡咯基甲基?！叭〈碾s芳烷基”是指以與對(duì)上述取代的烷基同樣的方式取代的雜芳烷基。
“鹽”描述于題為“本發(fā)明的化合物”部分中。
“氨基保護(hù)基”是在合成本發(fā)明第一方面的化合物過程中能夠保護(hù)該化合物或其中間體中的谷氨?；?氨基基團(tuán)，并隨后在不影響本發(fā)明第一方面化合物的其余部分的情況下而可移除的基團(tuán)。常用的這類基團(tuán)包括叔丁氧羰基和芐氧羰基，通過酸解可以方便地去除；對(duì)于芐氧羰基還可以用催化加氫方便地去除。氨基保護(hù)基團(tuán)在有機(jī)合成領(lǐng)域并且特別是肽合成領(lǐng)域是熟知的。適宜的這類基團(tuán)以及其去除條件描述一些書籍中，例如Synthesis of Peptides andPeptidomimetics，Workbench edition，M.Goodman，ed.，Georg ThiemeVerlag，Stuttgart，Germany，2004，和Protective groups in organicsynthesis，3 ed.，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，eds.，John Wiley & Sons，Inc.，New York，New York，U.S.A.，1999，并且對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說是眾所周知的。
“有效治療量”是指，當(dāng)通過一種治療方法向哺乳動(dòng)物、尤其是人給藥，以便進(jìn)行治療時(shí)，足以對(duì)該疾病(其以治療為目的)的治療起作用的量。對(duì)哺乳動(dòng)物疾病的“處理”或“治療”包括下列中的一個(gè)或多個(gè)(1)抑制疾病的發(fā)展，例如，阻止其發(fā)展，(2)消除疾病，例如，使疾病消退或者治愈疾病，
(3)防止疾病復(fù)發(fā)，以及(4)減輕疾病癥狀。
本發(fā)明的化合物及其制備本發(fā)明第一方面的化合物是以下化學(xué)式的化合物 其中X為L-γ-谷氨?；蛘週-γ-谷氨酰基甘氨?；?；并且Y為H，可選取代的烷基、可選取代的雜烷基、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、或者可選取代的雜芳烷基；Z為可選取代的C5-9烷基、可選取代的C5-9雜烷基、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、或者可選取代的雜芳烷基；以及它們的C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯或者二酯；以及這些化合物及其單酯和二酯的鹽。
本發(fā)明第一方面的優(yōu)選化合物包括那些具有下列一個(gè)或多個(gè)特征的化合物
1.X為L-γ-谷氨?；?.Y為可選取代的C5-6環(huán)烷基、可選取代的C5-6的環(huán)雜烷基、可選取代的苯基、或者可選取代C5-6雜芳基；尤其Y是環(huán)戊基、環(huán)己基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、或者可選取代的苯基；更尤其是環(huán)己基或者更尤其是苯基，可選地用1或2個(gè)氟、氯、甲基、羥基、甲氧基、或三氟甲基基團(tuán)取代；例如其中苯基為未取代、或者被取代并且其中一個(gè)取代基在4-位，尤其是其中只有一個(gè)取代基的那些基團(tuán)；3.Z是C5-9烷基，或者是苯基，1-或2-萘基，2-、3-或4-聯(lián)苯基，或者2-、3-或4-(C5-6雜芳基)苯基，每一個(gè)可選地用1至3個(gè)鹵素、氰基、羥基、羧基、三氟甲基、或者-R、-OR、-COOR或-NR2基團(tuán)(其中R為C1-3烷基)取代；尤其是苯基或2-、3-或4-聯(lián)苯基，或者2-、3-或4-(C5-6雜芳基)苯基，每一個(gè)可選地用氟、氯、氰基、羥基、甲氧基、甲基、或三氟甲基取代；4A.該化合物為二酸；或者4B.該化合物為二酯、尤其是C1-6烷基二酯，更尤其是C1-3烷基二酯。
通常，具有更多數(shù)目這些特征的化合物要比具有更少數(shù)目這些特征的化合物優(yōu)選；尤其是，在具有少于全部特征的化合物上增加其中一個(gè)特征通常將得到一個(gè)比沒有該特征的化合物優(yōu)選的化合物。
本發(fā)明化合物的適宜的鹽(參見Berge et al.，J.Pharm.Sci.，661(1971)，非窮舉)是當(dāng)無機(jī)堿(例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鈣)或者有機(jī)堿(例如，乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、乙二胺、緩血酸胺、N-甲基葡糖胺)與羧基基團(tuán)反應(yīng)時(shí)所形成的化合物，以及當(dāng)無機(jī)酸(例如，氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和氯磺酸)或者有機(jī)酸(例如，乙酸、丙酸、草酸、蘋果酸、馬來酸、丙二酸、富馬酸、或者酒石酸，以及烷基磺酸或者芳烴磺酸如甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸，取代的苯磺酸如氯苯磺酸和甲苯磺酸、萘磺酸和取代的萘磺酸、萘二磺酸和取代的萘二磺酸，以及樟腦磺酸)反應(yīng)形成該化合物的氨基基團(tuán)的酸加成鹽時(shí)生成的化合物。這些鹽優(yōu)選用藥用酸和堿形成。用于該化合物的適宜的鹽是酸加成鹽，尤其是用無機(jī)酸形成，如氫氯酸鹽。
通過本發(fā)明的方法制備本發(fā)明第一方面的化合物包括(a)氧化以下化學(xué)式的化合物(“硫化物”) 其中X為L-γ-谷氨酰基或者L-γ-谷氨?；拾滨；?，或者為N-α-R1-L-γ-谷氨酰基或者N-α-R1-L-γ-谷氨?；拾滨；?，其中R1為氨基保護(hù)基團(tuán)，并且Y和Z按照對(duì)本發(fā)明第一方面的化合物所定義；或者其C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯或者二酯；以得到本發(fā)明第一或第五方面的化合物；(b)如果Y為N-α-R1-L-γ-谷氨酰基或者N-α-R1-L-γ-谷氨?；拾滨；?，對(duì)得到的作為本發(fā)明第五方面化合物的砜進(jìn)行去保護(hù)則得到本發(fā)明第一方面的化合物；以及可選地
(c)如果在步驟(a)或者步驟(b)中制得的本發(fā)明第一方面的化合物是二酸，則形成該化合物的單酯或者二酯；或者(d)如果在步驟(a)或者步驟(b)中制得的化合物是單酯或者二酯，去酯化該化合物，以制備該化合物的二酸；以及(e)形成步驟(a)至步驟(d)任一步中制得的化合物的鹽。
在步驟(a)中，氧化硫原子以制備本發(fā)明第一方面的化合物(如果谷氨?；被鶊F(tuán)未被保護(hù))或者本發(fā)明第五方面的化合物(如果谷氨酰基氨基基團(tuán)被R1-保護(hù))。
典型地，將該硫化物溶解在適宜的溶劑中，加入氧化劑，將反應(yīng)混合物在足夠的溫度下保持足夠的時(shí)間以完成該氧化。適宜的溶劑/氧化劑組合包括C2-3鏈烷酸/過氧化氫/過氧鏈烷酸組合如乙酸/過氧乙酸和乙酸/過氧化氫/過氧乙酸，以及使用C2-3過氧鏈烷酸或者過氧三氟乙酸兼作為溶劑和氧化劑。在用例如二甲硫的試劑消耗掉過量的氧化劑后(如果需要)，只需通過濃縮分離出本發(fā)明第一(或第五)方面的化合物。特別適宜的溶劑/氧化劑組合包括其中該氧化發(fā)生在雙相體系中的混合體系，其中將該硫化物溶解在非極性疏質(zhì)子溶劑例如一種酯(例如，乙酸異丙酯)中并且氧化是在水性溶液中進(jìn)行。用于這些雙相氧化的適宜的氧化劑包括硼酸鹽和過氧化物如過硼酸鹽和過硫酸鹽，例如過硫酸銨、過硫酸鈉或過硫酸鉀，并且特別適宜的氧化劑是單過硫酸鉀，例如OXONETM(2KHSO5·KHSO4·K2SO4)。在分離水相和非水相后，并且在可選的洗滌該非水相以確保完全除去任何氧化劑之后，通過濃縮將本發(fā)明第一(或第五)方面的化合物從非水相中分離出來。
在可選的步驟(b)中，本發(fā)明第五方面的化合物的R1-保護(hù)的氨基基團(tuán)被去保護(hù)以制備本發(fā)明第一方面的化合物。
本發(fā)明第五方面的化合物可以通過任何適宜的用于除去氨基保護(hù)基團(tuán)而又不影響分子其余部分的方法進(jìn)行去保護(hù)。當(dāng)該氨基保護(hù)基團(tuán)是酸解可去除的基團(tuán)時(shí)，其可以通過強(qiáng)酸如三氟乙酸并可選地在二氯甲烷存在下方便地去保護(hù)。當(dāng)該氨基保護(hù)基團(tuán)是催化可去除的氨基保護(hù)基團(tuán)時(shí)，其可以通過催化還原或者異構(gòu)化而方便地去保護(hù)，即使例如芐氧羰基的基團(tuán)一般被認(rèn)為是催化可去除的，其也可以用酸解除去。
對(duì)于催化還原，通常將化合物溶解在適宜的溶劑中，如C1-4烷醇、或者極性質(zhì)子溶劑、或者在非極性疏質(zhì)子溶劑中，尤其是在水存在下，例如有水存在的乙酸異丙酯中，并且在還原催化劑(通常為鈀催化劑，例如鈀黑、硫酸鋇載鈀、以及碳載鈀)存在下與氫或者氫供體例如環(huán)己烯或者1，4-環(huán)己二烯接觸。對(duì)于催化異構(gòu)化，使用零價(jià)的鈀絡(luò)合物，例如四(三苯基膦)鈀(0)，通常在親核的烯丙基基團(tuán)清除劑如仲胺的存在下進(jìn)行。在除去該催化劑后，方便地用酸加成鹽(在可選的步驟(e)中)分離出本發(fā)明第一方面的化合物，在可選的步驟(c)和步驟(d)中，本發(fā)明第一方面的化合物被酯化(如果是二酸以及希望得到一種酯)，或者被去酯化(如果是酯以及希望得到二酸)。這些酯化或去酯化反應(yīng)是常規(guī)方法，并且可以通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的任何方法實(shí)現(xiàn)；具體而說，常規(guī)的酯化方法包括本發(fā)明第一方面的二酸化合物與產(chǎn)生該希望的酯的醇反應(yīng)，使用該醇作溶劑，在鹵代硅烷如氯代三乙基硅烷存在下，在室溫和該醇的沸騰溫度之間的溫度下進(jìn)行。
在可選的步驟(e)中，形成本發(fā)明第一方面的化合物的鹽。其通常是酸加成鹽(參見前面對(duì)“鹽”的定義)。方便地，這是在形成本發(fā)明第一方面的化合物之后立即進(jìn)行；其可以通過加入一種將成為該鹽的反溶劑的溶劑，諸如非質(zhì)子溶劑，例如，烴或者如二氯甲烷的鹵代烴，然后加入所選的酸以形成該鹽，尤其是以單獨(dú)無水酸的形式或者在非質(zhì)子溶劑中，例如氯化氫氣體實(shí)現(xiàn)。如果必要或者希望，可以加入其他的對(duì)于該鹽的反溶劑，例如，醚如乙醚、甲基叔丁基醚、以及四氫呋喃，尤其是甲基叔丁基醚。
用于該方法的起始原料(“硫化物”)是三肽和四肽，可選地被單酯化或者二酯化，可選地在谷氨酰基氨基處被保護(hù)，并且?guī)в杏肸-CH2-基團(tuán)烷基化的半胱氨酸硫。
這些S-烷基化的谷胱甘肽類似物是通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的肽合成的傳統(tǒng)方法方便制得的。
當(dāng)適宜的S-烷基化的半胱氨酸對(duì)于肽合成不是方便易得時(shí)，可以使用許多常規(guī)的S-保護(hù)基團(tuán)如三苯甲基中的一種進(jìn)行肽合成，然后將得到的S-保護(hù)肽例如通過酸解進(jìn)行去保護(hù)。典型地，可選地在清除劑的存在下，將該S-保護(hù)的肽溶解在一種足夠強(qiáng)以除去該酸解可去除的S-保護(hù)基團(tuán)但不至于強(qiáng)到除去任何氨基保護(hù)基團(tuán)的酸中。合適的這樣的酸包括三氟乙酸和其他的強(qiáng)酸，例如三氟甲磺酸，可選地在例如二氯甲烷的共溶劑的存在下；適宜的清除劑包括芳香醚和硫化物，如茴香醚和硫代茴香醚，苯酚如甲(苯)酚，以及，最有效地，硅烷，包括三烷基硅烷例如三乙基硅烷和三異丙基硅烷和硅烷聚合物如聚甲基氫硅氧烷；并且特別適合的去保護(hù)劑是在聚甲基氫硅氧烷存在下的三氟乙酸。該S-去保護(hù)的肽可以通過加入反溶劑例如諸如烴或者醚的非質(zhì)子非極性溶劑而從反應(yīng)混合物中分離出來。
然后，用其中L為如鹵素(氯或溴)的離去基團(tuán)，化學(xué)式為Z-CH2-L的化合物或可選取代的烷基磺酸鹽或芳烴磺酸鹽對(duì)該S-去保護(hù)肽的硫醇鹽(硫羥酸鹽)陰離子進(jìn)行烷基化，以制備合適的S-烷基化肽。這在谷氨?；繁槐Ｗo(hù)以便最小化副反應(yīng)時(shí)能方便地做到，而且甚至在該胺未被保護(hù)時(shí)也可以做到。
典型地，將S-去保護(hù)肽溶解于在一種適宜溶劑(例如，C1-6烷醇、二醇如1，2-乙二醇或1，3-丙二醇、醚如2-甲氧基乙醇，1，2-二甲氧基乙烷，或四氫呋喃等)中的強(qiáng)堿(例如，堿金屬或堿土金屬氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽、磷酸鹽或醇鹽，或氫氧化銨；或有機(jī)胺堿如四甲基胍、DBU(1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-7-烯)，等)溶液中，以形成硫醇鹽陰離子，加入化學(xué)式為Z-CH2-L的化合物(通常過量)，反應(yīng)混合物在適宜的溫度下保持適宜的時(shí)間，直到反應(yīng)完全。便利的反應(yīng)條件是使用20％的四氫呋喃水溶液和大約10倍過量的碳酸氫鈉。
該硫化物也可以按下述制備用一個(gè)適宜的Z-CH2-基團(tuán)烷基化一個(gè)(可選保護(hù)的)半胱氨酸，然后通過常規(guī)的肽合成方法形成三肽或四肽，其中，首先與化學(xué)式 的氨基酸偶聯(lián)，然后與一個(gè)(可選保護(hù)的)L-γ-谷氨酰胺或者L-γ-谷氨酰基甘氨酸偶聯(lián)；或者首先與一個(gè)(可選保護(hù)的)L-γ-谷氨酰胺或者L-γ-谷氨?；拾彼崤悸?lián)，然后與化學(xué)式 的氨基酸偶聯(lián)。
化學(xué)式為 的許多氨基酸如D-苯基甘氨酸、D-(4-氯苯基)甘氨酸、D-(4-羥苯基)甘氨酸、D-(3-噻吩基)甘氨酸、和D-環(huán)己基甘氨酸，可以以溶解的形式商業(yè)獲得，并且在某些情況下以酯的形式獲得。其它的可以以外消旋形式獲得，但通過任何熟知的溶解氨基酸的方法可以溶解。還有一些可以通過氨基酸合成的已知方法制備。
該硫化物可以被制成二酸(但是這可能涉及谷氨?；?羧基以及氨基的中間保護(hù))或者被制成單酯或二酯，這取決于起始氨基酸的情況。如果該硫化物被制成二酸，在該硫化物氧化成砜之前其可以被單酯化或二酯化(通常在氨基保護(hù)過程中)，并且酯化條件通常將與酯化本發(fā)明第一方面的化合物所用的條件類似。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在利用自身知識(shí)和本披露內(nèi)容(包括實(shí)施例)的情況下，將不難制備本發(fā)明第一和第五方面的化合物。
化合物的用途和制備方法本發(fā)明第一方面的化合物(尤其是以酸形式)是GST P1-1的抑制劑，典型地是選擇性的抑制劑。它們也在增強(qiáng)體外HL-60細(xì)胞的分化方面有活性，并且一種化合物已經(jīng)顯示出增強(qiáng)從體外鼠骨髓細(xì)胞的粒細(xì)胞/單核細(xì)胞集落的形成。因此這些化合物有望在人的治療方面起作用用于增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果(因?yàn)镚ST、尤其是GST P1-1，其在很多腫瘤組織中有所提高，與腫瘤細(xì)胞對(duì)化療劑的抗性有關(guān)；因此一種GST抑制劑將降低腫瘤細(xì)胞清除化療劑的能力)、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性(還是因?yàn)镚ST的同功酶抑制)、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
本發(fā)明第五方面的化合物和本發(fā)明第四方面的方法可用于制備本發(fā)明第一方面的化合物。
本發(fā)明第二方面是包含本發(fā)明第一方面化合物、可選也包括賦形劑如藥用賦形劑的藥物組合物，治療方法，包括通常以治療有效量給予這些化合物或者含有這些化合物的藥物組合物，以及這些化合物在癌癥治療和生產(chǎn)用于癌癥治療的藥物中的應(yīng)用。
這些化合物可以采用任何適合于所治療的受治療者和受治療者的癥狀的狀態(tài)的途徑進(jìn)行給藥。給藥的途徑包括但不限于，通過注射給藥，包括靜脈注射、腹膜內(nèi)注射、肌內(nèi)注射和皮下注射，通過經(jīng)粘膜或經(jīng)皮遞送，通過局部施藥，鼻內(nèi)噴霧，栓劑給藥等，或可以口服給藥。含有這些化合物的藥物組合物可選地是脂質(zhì)體制劑、乳劑、設(shè)計(jì)成穿過粘膜給藥的制劑或經(jīng)表皮給藥的制劑。對(duì)于每一種給藥方法合適的制劑可以在，例如，RemingtonThe Scienceand Practice of Pharmacy，20 ed.，A.Gennaro，ed.，Lippincott Williams& Wilkins，Philadelphia，Pennsylvania，U.S.A.，2003中找到。典型的組合物可以是口服的，或者是靜脈注射的溶液，和含有所述化合物，并一般也含有一種或多種藥物學(xué)上可接受的賦形劑。典型的劑型是片劑、靜脈注射的溶液和用于重配成靜脈注射溶液的凍干粉、以及也用于靜脈注射的脂質(zhì)體制劑和凍干脂質(zhì)體制劑。
本發(fā)明第一方面的化合物的治療有效劑量為約10～2000mg/m2體表面積，特別是50～1000mg/m2。給藥可以以1～35天的間隔進(jìn)行；例如，約250～1000mg/m2以1～5周的間隔，特別是以1、2、3或4周的間隔，或者以更高的頻率進(jìn)行，包括在幾天內(nèi)(例如，5或7天)以1次/天的頻率進(jìn)行給藥，而每2、3或4周重復(fù)這種給藥，或者在6～72h時(shí)間段內(nèi)持續(xù)輸液，也以每2、3或4周重復(fù)這種給藥。一種典型的策略可以是每三周用五天的時(shí)間每天給藥一次。
制備和實(shí)施例下面的實(shí)施例給出了有用中間體的制備和通過本發(fā)明方法的本發(fā)明化合物的合成，以及本發(fā)明第一方面的化合物作為治療劑的應(yīng)用。
制備例1和2描述了用于半胱氨酸或者三肽和四肽半胱氨酸(“硫化物”)的S-烷基化的試劑的制備。為了方便起見，該試劑被稱為芐基溴(α-溴甲苯)的衍生物。
制備例14-(2-吡啶基)芐基溴的制備將2mL 4-(2-吡啶基)甲苯(1.98g，11.7mmol)、2.5g N-溴代琥珀酰亞胺(NBS)(14.0mmol)、和23mg α，α′-偶氮二異丁腈(AIBN)(0.14mmol)懸浮在35mL四氯甲烷中，然后回流24小時(shí)。過濾產(chǎn)物，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)從濾液中除去溶劑。加入等摩爾量的氯仿和水并萃取產(chǎn)物。分離氯仿層并干燥，然后除去溶劑。得到2g粘稠狀黃色固體4-(2-吡啶基)芐基溴。
制備例24-(2-甲氧基苯基)芐基溴的制備將171mg 4-溴甲苯(1mmol)、152mg 2-甲氧苯基硼酸(1mmol)、1mg二乙酸鈀(4μmol)、322mg N-丁基溴化胺(1mmol)、和2MNa2CO3水溶液1.9mL(3.8mmol)置于可微波處理的壓力小瓶中并加熱到150℃保持5min。在冷卻至室溫后，將產(chǎn)物倒入分液漏斗中，并各加入30ml水和30ml乙醚。萃取后，分出各層，并且水層另用30ml乙醚洗滌。合并醚萃取液，用MgSO4干燥，在真空下通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。得到固體產(chǎn)品2-甲氧基-4′-甲基聯(lián)苯，160mg(81％產(chǎn)率)，NMR檢測(cè)純度為95％。
將160mg 2-甲氧基-4′-甲基聯(lián)苯(0.81mmol)、158mg NBS(0.91mmol)、和1mg AIBN(0.006mmol)懸浮在7mL四氯甲烷中，然后回流24小時(shí)。過濾產(chǎn)物，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)從濾液中除去溶劑。加入等摩爾量的乙醚和水并萃取產(chǎn)物。分離醚層并用MgSO4干燥，過濾，并除去溶劑，獲得油狀的4-(2-甲氧基苯基)芐基溴128mg。
4′-(2-氰基苯基)芐基溴可以用該方法由2-氰基苯基硼酸制備。
其它的用可選取代的苯基或者可選取代的C5-6雜芳基取代的芐基溴化物可以用這些制備的方法很容易地制備。
制備例3描述了S-烷基化的半胱氨酸的制備。
制備例3N-α-(叔丁氧羰基)-S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酸的制備將1.0g N-α-(叔丁氧羰基)-L-半胱氨酸(4.52mmol)溶解在9mL四氫呋喃和9mL 1M的NaOH水溶液的混合物中，NaOH水溶液已通過往其中鼓入氬氣而脫氣。加入1.12g 4-(溴甲基)聯(lián)苯(4.53mmol)在5ml四氫呋喃(THF)中的溶液，并且在鼓入氬氣和室溫的條件下攪拌該溶液8小時(shí)。真空下通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去THF，殘留物用水稀釋并用乙醚洗滌。用6M的HCl水溶液酸化水相至pH為3，并用乙酸乙酯萃取三次。合并的有機(jī)萃取物用水、飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，然后干燥并濃縮，以得到1.44g N-α-(叔丁氧羰基)-S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酸白色固體(82％產(chǎn)率)。
其它(可選取代的)S-烷基化的半胱氨酸可以通過該制備的方法容易地制備。
制備例4至制備例6描述了一些“硫化物”的制備。
制備例4L-γ-谷氨酰基-S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸的制備鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸是從330mg N-α-(芐氧羰基)-L-γ-谷氨?；?L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸通過將該氨基保護(hù)的肽溶解在乙腈/水中，加入大約10倍過量的碳酸氫鈉，并加入微過量的4-(溴甲基)聯(lián)苯、然后在氮?dú)庀卤３衷摲磻?yīng)直至完成而制得。用水稀釋反應(yīng)混合物，用乙醚洗滌，分離水相并用鹽酸酸化至pH2-3，然后用乙酸乙酯萃取。有機(jī)相用無水MgSO4干燥、過濾，并減少體積以得到N-α-(芐氧羰基)-L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸。將約300mg該氨基保護(hù)的硫化物溶解在2mL 95∶5的三氟乙酸(TFA)∶二氯甲烷(帶1滴水)中，并在45℃下攪拌過夜，用制備的HPLC純化，以得到L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸。分離該鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸。如果希望的話，該氨基保護(hù)的硫化物可以被已經(jīng)直接引入氧化步驟(a)中，以制備本發(fā)明第五方面的化合物。
通過類似方法制備例如L-γ-谷氨酰基-S-{[4-(2-吡啶基)苯基]甲基}-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸的化合物，及其氨基保護(hù)的類似物。
其它硫化物，包括是單酯和二酯的硫化物可以通過類似的方法容易制得。
制備例5L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯的制備鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯是從30mg L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸，通過用乙醇和氯化三甲基硅烷進(jìn)行酯化作用而制得，得到L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯。分離出該鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯。
通過類似方法制備諸如L-γ-谷氨?；?S-{[4-(2-吡啶基)苯基]甲基}-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯的化合物。通過類似方法可以方便地制得該硫化物的其它酯，尤其是二酯。
制備例6L-γ-谷氨酰基-S-[(4-聯(lián)苯基)甲基]-L-半胱氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸的制備D-環(huán)己基甘氨酸乙酯是從500mg D-環(huán)己基甘氨酸(3.1mmol)、通過將該酸懸浮在15mL乙醇中，加入2.02mL氯化三甲基硅烷(5當(dāng)量)，并將該混合物在50℃加熱18小時(shí)而制得。在真空下除去揮發(fā)性成分，并將殘留物溶解在乙酸乙酯中，用NaHCO3水溶液洗滌，然后用鹽水洗滌兩次，用MgSO4干燥，過濾，并蒸發(fā)以得到401mg D-環(huán)己基甘氨酸乙酯油狀固體。
將588mg(1.9mmol)的N-α-(叔丁氧羰基)-S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酸溶解在5mL二甲基甲酰胺(DMF)中，加入860mg(1.2當(dāng)量)的O-苯并三唑-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸脲(HBTU)，和990μL(3當(dāng)量)的二異丙基乙胺。3min后，加入溶解在4mL DMF中的D-環(huán)己基甘氨酸乙酯360mg(1當(dāng)量)，在室溫下攪拌該混合物2小時(shí)，然后分離粗產(chǎn)物N-α-(叔丁氧羰基)-S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸乙酯。將二肽溶解在10mL 20％的TFA/二氯甲烷中，并在室溫下攪拌2小時(shí)，然后通過在真空下去除揮發(fā)物而分離粗產(chǎn)物。該粗產(chǎn)物S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸三氟乙酸酯可以直接用于下一步，或者可以被進(jìn)一步處理。
將N-α-(叔丁氧羰基)-O-α-叔丁基-L-γ-谷氨酰胺溶解在2mLDMF中，加入174mg(1.2當(dāng)量)的HBTU和330μL(5當(dāng)量)的二異丙基乙胺。5min后，加入溶解于2mL DMF中的200mg(0.38mmol)的粗S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸三氟乙酸酯，在室溫下攪拌該混合物2小時(shí)。將混合物倒入0.1N的檸檬酸水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌四次，用MgSO4干燥，并且蒸發(fā)掉揮發(fā)物，以得到棕色油狀的N-α-(叔丁氧羰基)-O-α-叔丁基-L-γ-谷氨?；?S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸。將其溶解在10mL 20％的TFA/二氯甲烷中并在室溫下攪拌24小時(shí)。在真空下除去揮發(fā)物并用反相HPLC純化產(chǎn)物，然后分離47mg鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸。如果希望的話，該保護(hù)的硫化物也可以被已經(jīng)直接引入到氧化步驟(a)中。
以類似方法制備鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?S-(4-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-(4-氯苯基)甘氨酸。
合成實(shí)施例1L-γ-谷氨酰基-3-[(苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，1A的合成向溶解于乙酸中的100mg(0.2mmol)的L-γ-谷氨?；?S-(苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸鹽酸鹽(TLK117鹽酸鹽)加入200μL、過乙酸在乙酸中的32％溶液(0.95mmol)。反應(yīng)混合物保持在室溫，用LCMS跟蹤反應(yīng)。反應(yīng)完成后，在真空下濃縮反應(yīng)混合物至固態(tài)，然后將該固體放在50％乙腈/水中，過濾，并且殘留物用更多的乙腈/水洗滌。凍干濾液，然后該殘留物和濾液用制備的HPLC純化，再凍干含產(chǎn)物的餾分。在溶解于乙腈/水中并凍干之后，用甲醇/醚研碎并在真空下干燥，得到固體產(chǎn)物L(fēng)-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，，1A，通過LC(ELSD檢測(cè))純度為96％。質(zhì)子NMR譜(DMSO-d6)與設(shè)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。類似地以更大的規(guī)模(分別為0.4mmol和11mmol)再制備兩份該物質(zhì)，使用2.3-2.5倍過量的過乙酸，并稍微改變?nèi)軇┍嚷屎蛿?shù)量。每種情況均得到同樣的產(chǎn)品。
合成實(shí)施例2L-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯，1B的合成向溶解于3ml乙酸中的123mg(0.22mmol)L-γ-谷氨酰基-S-(苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯鹽酸鹽中加入225μL、32％的過乙酸在乙酸中的溶液(1.06mmol)。反應(yīng)混合物保持在室溫，用LCMS跟蹤反應(yīng)。反應(yīng)完成后，在真空下濃縮反應(yīng)混合物至固態(tài)，然后將該固體放在甲醇/二甲亞砜/水中，用制備的HPLC純化，并且再次凍干含產(chǎn)物的餾分。得到固體產(chǎn)物L(fēng)-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯，1B。質(zhì)子NMR譜(DMSO-d6)與設(shè)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。
合成實(shí)施例3 L-γ-谷氨酰基-3-[(苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二異丙酯，1D的合成向懸浮于6ml異丙醇中的309mg(0.61mmol)L-γ-谷氨?；?S-(苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸鹽酸鹽中加入767μL的氯化三甲基硅烷(6.05mmol)。在室溫和氮?dú)庀聰嚢柙摲磻?yīng)混合物，這時(shí)候逐漸形成白色沉淀。將混合物加熱至50℃，另加入300μL氯化三甲基硅烷，并將反應(yīng)混合物保持在升高的溫度。在數(shù)小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)反應(yīng)完成了85％(其余部分為單酯)；過濾已經(jīng)形成的沉淀，用異丙醇洗滌，干燥(得到240mg)，溶解在甲醇中，用制備的HPLC并用95∶5水/乙腈(帶0.01％鹽酸)作為溶劑進(jìn)行純化。將87mg(0.16mmol)的二異丙酯溶解在2mL乙酸中，用82μL過乙酸溶液(2.5當(dāng)量)進(jìn)行氧化。反應(yīng)完成后，加入2ml甲醇，用制備的HPLC并用95∶5水/乙腈(帶0.01％三氟乙酸)作為溶劑進(jìn)行純化，并凍干含產(chǎn)物的餾分。得到固體產(chǎn)物L(fēng)-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二異丙酯鹽酸鹽，HPLC檢測(cè)純度為98％。質(zhì)子NMR譜(DMSO-d6)與設(shè)計(jì)的結(jié)構(gòu)一致。
合成實(shí)施例4L-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二甲酯，1C的合成鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二甲酯，1C是從500mg(0.98mmol)的L-γ-谷氨酰基-S-(苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸鹽酸鹽，用合成實(shí)施例3的方法，在酯化中用甲醇代替異丙醇，用氧化該二異丙酯相同的方式氧化該二甲酯，使用三次溶解/凍干循環(huán)操作進(jìn)行純化而制得。HPLC檢測(cè)純度為98％。
合成實(shí)施例5L-γ-谷氨?；?3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，11A的合成鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，11A是以三個(gè)步驟從330mg N-α-(芐氧羰基)-L-γ-谷氨?；?L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸制得，通過將氨基保護(hù)的肽溶解于乙腈/水中，加入約10倍過量的碳酸氫鈉，并加入稍微過量的4-(溴甲基)聯(lián)苯，然后將反應(yīng)保持在氮?dú)庀轮钡酵瓿?。用水稀釋該反?yīng)混合物，用乙醚洗滌，分離水相，并用鹽酸將其酸化至pH2-3，然后用乙酸乙酯萃取。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾，并降低體積，以得到N-α-(芐氧羰基)-L-γ-谷氨?；?3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸。該氨基保護(hù)的硫化物約300mg被溶解于2mL 95∶5的三氟乙酸∶二氯甲烷(帶1滴水)中，并在45℃下攪拌過夜，用制備的HPLC純化，以得到L-γ-谷氨酰基-3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸。用與前面實(shí)施例中相同的方式氧化該去保護(hù)的硫化物，以得到鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨酰基-3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸酯，11A，，HPLC檢測(cè)純度為92％。
合成實(shí)施例6L-γ-谷氨?；?3-[(2-聯(lián)苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，4A的合成鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?3-[(2-聯(lián)苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，4A是用合成實(shí)施例5的方法以三步從500mgN-α-(芐氧羰基)-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸制得，用2-(溴甲基)-聯(lián)苯作為該保護(hù)的肽的烷化劑。HPLC檢測(cè)純度為99％。
合成實(shí)施例7L-γ-谷氨酰基-3-[(2-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二乙酯，4B的合成鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?3-[(2-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸二甲酯，4B是從143mg L-γ-谷氨酰基-S-(2-聯(lián)苯基甲基)-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸鹽酸鹽(實(shí)施例6中的中間體)，通過用乙醇和氯化三甲基硅烷酯化，然后氧化該二乙酯(如合成實(shí)施例3)得到。HPLC檢測(cè)純度為94％。
合成實(shí)施例8L-γ-谷氨?；?3-[(2-萘基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，3A的合成鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?3-[(2-萘基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，3A是以三步從N-α-(芐氧羰基)-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰-D-苯基甘氨酸，使用合成實(shí)施例5的方法制得，用2-(溴甲基)萘作為該保護(hù)肽的烷化劑。HPLC檢測(cè)純度為92％。
以類似方法制備鹽酸鹽形式的L-γ-谷氨?；?3-[(5-硝基呋喃-2-基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，14A。HPLC檢測(cè)純度為99％。
本發(fā)明第一方面的代表性化合物在下面的表1中給出表1本發(fā)明第一方面的二酸化合物
#表示A連接至化合物的磺酰基硫原子的連接點(diǎn)用以上討論的一種方法制備化合物1A至12A的二乙酯1B至12B；用質(zhì)譜分析，每個(gè)化合物得到對(duì)應(yīng)于其質(zhì)量的質(zhì)量峰(M/z)，通常有正離子峰M+H，或者負(fù)離子峰M-H。也制備了二酸1A的二甲酯和二異丙酯1C和1D，并通過質(zhì)譜分析，每個(gè)化合物得到正離子質(zhì)量峰M+H。
本發(fā)明的其它化合物可以類似地制備，使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)自身經(jīng)驗(yàn)并參考了本說明后所熟知的方法進(jìn)行。
體外分析實(shí)施例這些實(shí)施例舉例說明了在預(yù)言性的體外試驗(yàn)中本發(fā)明化合物(以及比較化合物TLK117和TLK199中的一個(gè)或者另一個(gè)，以及“乙烯基砜”及其二乙酯)的效果。
重組的人GST P1-1，A1-1和M1-1同功酶，和兔的多克隆抗人GSTπ抗體獲自美國加利福尼亞州圣地亞哥的EMD Bioscences公司。小鼠的單克隆抗人GSTπ抗體獲自美國加利福尼亞州Carpinteria市的Dakoctyomation公司。IRDye800聯(lián)結(jié)的親合純化山羊抗兔IgG抗體獲自美國賓夕法尼亞州Gilbertsville市的Rockland Immunochemicals公司。人癌細(xì)胞系HL-60(前髓細(xì)胞性白血病)獲自美國馬里蘭州貝塞斯達(dá)的國家癌癥研究所。RPMI 1640培養(yǎng)基和Iscove’s改進(jìn)的杜爾貝科培養(yǎng)基(IMDM)獲自美國加利福尼亞卡爾斯巴德市的Invitrogen公司。CellTiter-GloTM分析試劑盒獲自美國威斯康星州麥迪遜市的Promega公司，并按照制造商的指示說明使用。藻紅蛋白聯(lián)結(jié)的抗-CD11b抗體和藻紅蛋白聯(lián)結(jié)的同型對(duì)照抗體獲自美國加利福尼亞州圣何塞市的BD Biosciences公司。MethoCultTMM3234甲基纖維素培養(yǎng)基(2.5％甲基纖維素在IMDM中，補(bǔ)加了胎牛血清、牛血清蛋白、人重組胰島素、h轉(zhuǎn)鐵蛋白、2-巰基乙醇，和L-谷氨酰胺)獲自加拿大范庫弗峰州的StemCell Technologies公司，并按照制造商的指示說明進(jìn)行稀釋(至1％甲基纖維素的濃度)。
體外實(shí)施例1谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶同功酶的抑制。本實(shí)施例說明了這些化合物作為谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶同功酶GST P1-1，A1-1，和M1-1的抑制劑的體外效果。GST P1-1的抑制被認(rèn)為預(yù)示著在本發(fā)明第三方面的治療方法中的有效性，因?yàn)門LK199(在這些試驗(yàn)中測(cè)試的是TLK117的二乙酯)已經(jīng)顯示了在人中的骨髓刺激活性以及在動(dòng)物模型中的化學(xué)增強(qiáng)活性。
重組的人GST P1-1，A1-1和M1-1同功酶分別以0.02、0.011、和0.0083單位/ml的最終濃度使用(1單位是在20℃和pH6.5時(shí)每min結(jié)合1μmol的1-氯-2，4-二硝基苯(CDNB)成為還原的谷胱甘肽(GSH)的酶的量)，在試驗(yàn)緩沖劑(100mM的KH2PO4/K2HPO4，0.1mM EDTA，pH6.5的水中)中。GSH被制備成在水中的100mM的儲(chǔ)液，CDNB制成在乙醇中的100mM的儲(chǔ)液，二者皆用試驗(yàn)緩沖劑稀釋至適宜的濃度(以獲得用于評(píng)價(jià)該同功酶的2×Km的最終濃度)。這些測(cè)試的化合物(二酸、1A至12A的化合物以及TLK117)被溶解在二甲亞砜(DMSO)中，并用DMSO稀釋至用于試驗(yàn)的合適的濃度(8個(gè)濃度，該變化范圍的中點(diǎn)接近預(yù)期的IC50-導(dǎo)致50％抑制的酶活性的濃度)。對(duì)于每一次試驗(yàn)，測(cè)試的化合物和GSH被加到該同功酶中。在將CDNB溶液加到該同功酶/化合物/GSH溶液中之后，立即在一個(gè)SpectraMax盤式讀數(shù)器(plate reader)(美國加利福尼亞州桑尼維爾市的Molecular Devices公司)上連續(xù)記錄下在340nm處的吸收達(dá)5min。在測(cè)試化合物的不同濃度下從吸收/時(shí)間曲線的斜率計(jì)算出每一化合物的GST抑制活性。所有試驗(yàn)在兩個(gè)相同的孔中進(jìn)行，用二甲亞砜(DMSO)對(duì)照，最終的DMSO濃度保持在2％。這些試驗(yàn)的結(jié)果在下面的表2中給出。
體外實(shí)施例2在HL-60細(xì)胞中的細(xì)胞毒性。本實(shí)施例說明了本發(fā)明的化合物對(duì)HL-60人白血病細(xì)胞系的體外細(xì)胞毒性。
在96-孔的板中接種Log-階段細(xì)胞，每孔在150μL RPMI 1640培養(yǎng)基中接種1500細(xì)胞，培養(yǎng)基補(bǔ)以10％胎牛血清(FBS)和1％L-谷氨酰胺，并在37℃的空氣/5％ CO2下培育4-5小時(shí)。將測(cè)試化合物(二乙酯、化合物1B至12B和TLK199)溶解并順序稀釋在DMSO中(8個(gè)濃度，該變化范圍的中點(diǎn)接近預(yù)期的CC50)。在再一次以1∶50稀釋在補(bǔ)充的RPMI 1640培養(yǎng)基中后，加入50μL稀釋的化合物以達(dá)到0.5％的最終DMSO濃度。然后培育細(xì)胞72小時(shí)(大約三個(gè)重復(fù)時(shí)間)。然后通過離心(在20℃下，1200rpm，5min)收獲該細(xì)胞，移出100μL的培養(yǎng)液上清液并用同樣體積的CellTiter-Glo試劑取代。在室溫下連續(xù)攪拌培育10min之后，用發(fā)光計(jì)(光度計(jì))對(duì)板讀數(shù)，活細(xì)胞的數(shù)目與觀察到的發(fā)光成正比。
全部試驗(yàn)在三個(gè)相同的孔中進(jìn)行，用DMSO溶劑對(duì)照。從發(fā)光/濃度曲線計(jì)算CC50(導(dǎo)致50％生長抑制的濃度)。這些試驗(yàn)的結(jié)果在下面的表2中給出。
體外實(shí)施例3GSTπ免疫沉淀反應(yīng)試驗(yàn)。本試驗(yàn)說明了本發(fā)明化合物在導(dǎo)致GSTπ免疫沉淀反應(yīng)上的有益效果。這些結(jié)果被認(rèn)為預(yù)示著在本發(fā)明第三方面的治療方法中的有效性，因?yàn)門LK199(在這些試驗(yàn)中測(cè)試的是TLK117的二乙酯)已經(jīng)顯示了在人中的骨髓刺激活性以及在動(dòng)物模型中的化學(xué)增強(qiáng)活性。
HL-60細(xì)包以6×105細(xì)包/mL被接種，在20mL RPMI-1640培養(yǎng)基中補(bǔ)充以10％胎牛血清，1mM谷氨酰胺和20μM在T75細(xì)頸瓶中的慶大霉素，在37℃和5％ CO2的空氣中培養(yǎng)過夜。用0.1％ DMSO或20μM在含有0.1％ DMSO的培養(yǎng)基中的測(cè)試化合物(二乙酯，化合物1B到12B和TLK199)處理這些細(xì)胞達(dá)2小時(shí)。然后處理，通過離心分離收集這些細(xì)胞，并用磷酸鹽緩沖鹽水洗滌兩次。將細(xì)胞小球重懸浮在1mL溶解緩沖液(lysis buffer)中(50mM Tris，pH8.0，120mM NaCl，0.5％ NP-40表面活性劑，100mM NaF；在使用前已往其中加入蛋白酶和磷酸(酯)酶抑制劑(Roche Diagnostics，Indianapolis，Indiana，U.S.A.))，并在4℃溫和攪動(dòng)培育30min。通過10min、13,000rpm的離心除盡該細(xì)胞溶解物(cell lysate)以除去細(xì)胞碎片。為了免疫沉淀反應(yīng)，將2.1μg的小鼠單克隆抗人GSTπ抗體加入到1mg/mL全蛋白的500μL細(xì)胞溶解物中。在4℃下培養(yǎng)過夜后，向該混合物中加入30μL的蛋白A/G瓊脂糖珠(Pierce，Rockford，IL)，并在4℃下培育1小時(shí)。然后通過離心收集該珠，在溶解緩沖液中洗滌三次，重懸浮在10μL非還原性十二烷基硫酸鋰樣品緩沖液(Invitrogen，Carlsbad，California，U.S.A.)中。該懸浮的樣品在95℃下加熱5min，經(jīng)過在4-12％凝膠上的SDS-PAGE處理，隨后使用兔多克隆抗人GSTπ抗體，IRDye800結(jié)合的、親合純化的山羊抗兔IgG抗體進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。GSTπ蛋白譜帶被可視化并且在Odyssey紅外掃描儀(Li-Cor，Lincoln，Nebraska，U.S.A.)上定量譜帶強(qiáng)度。將由化合物處理的譜帶強(qiáng)度與其相應(yīng)的DMSO對(duì)照品進(jìn)行比較并表示成抑制百分?jǐn)?shù)。這些結(jié)果示于下面的表2中列。
表2 本發(fā)明二酸化合物的GST同功酶抑制及本發(fā)明二乙酯化合物的HL-60細(xì)胞毒性和GSTπ免疫沉淀反應(yīng)

NM-未測(cè)值；*-二乙酯未制出本發(fā)明的二酸化合物是GST P1-1的強(qiáng)有力的抑制劑，并且對(duì)于GST P1-1通常還有相對(duì)于兩種其它的人GST同功酶GST A1-1和GST M1-1的選擇性。二乙酯全部顯示出良好的在HL-60細(xì)胞中的細(xì)胞毒性，并且很多(化合物)在免疫沉淀反應(yīng)分析中被測(cè)出具有相當(dāng)?shù)腉STπ抑制。
其中一些本發(fā)明的二乙酯化合物還被測(cè)試出具有增強(qiáng)HL-60細(xì)胞的分化的能力。這證實(shí)了本發(fā)明化合物在體外刺激HL-60人白血病細(xì)胞系的有益效果。這些結(jié)果被認(rèn)為預(yù)示著在人的骨髓刺激方面的效能，因?yàn)樵诖朔治鲋性鰪?qiáng)分化的TLK199已經(jīng)顯示出對(duì)人的骨髓刺激活性。在37℃和空氣/5％ CO2下將Log-階段細(xì)胞(1×105細(xì)胞/mL)在2mL體外實(shí)施例2中使用的補(bǔ)充的(supplemented)RPMI 1640培養(yǎng)基中培育24小時(shí)，并將試驗(yàn)化合物溶解在DMSO中，DMSO的最終濃度為0.1％。通過離心(1250rpm，5min，20℃)收獲細(xì)胞并用2mL含有2％ FBS的冰冷磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)洗滌，然后用10μL藻紅蛋白-結(jié)合的抗-CD11b抗體或者10μL藻紅蛋白-結(jié)合的同型對(duì)照抗體染色。在冰上靜置30min后，將細(xì)胞重懸浮在2mL含2％FBS的冰冷PBS中。通過離心(1250rpm，5min，20℃)收獲細(xì)胞并將其重懸浮在0.4mL含2％ FBS的PBS中。CD11b的特定細(xì)胞表面表達(dá)，一種用于粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的標(biāo)記物是通過流式細(xì)胞測(cè)量術(shù)，使用FACSCalibur分析儀(BDBiosciences)檢測(cè)的。所有的分析均進(jìn)行三份，用DMSO對(duì)照。分化的程度被表達(dá)為來自DMSO對(duì)照品的信號(hào)的倍數(shù)。多種試驗(yàn)化合物增強(qiáng)了HL-60細(xì)胞的分化。
從這些結(jié)果和這些化合物與TLK199的結(jié)構(gòu)相似性，這些化合物，尤其是二酯可望在治療上用于增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的毒性、提高骨髓細(xì)胞中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
制劑實(shí)施例本實(shí)施例例舉了本發(fā)明化合物尤其是二酯的適宜的制劑。
用于口服給藥的固體制劑通過組合以下物質(zhì)而制得化合物25.0％w/w硬脂酸鎂 0.5％w/w淀粉 2.0％w/w羥丙基甲基纖維素 1.0％w/w微晶纖維素71.5％w/w并且將該混合物進(jìn)行壓縮以形成片劑或者填充到含有例如250mg的該化合物的硬明膠膠囊中。如果有必要，可以通過施加成膜劑(例如，羥丙基甲基纖維素)、顏料(例如，二氧化鈦)和增塑劑(例如，鄰苯二甲酸二乙酯)的懸浮液對(duì)片劑進(jìn)行涂敷，然后通過蒸發(fā)溶劑來干燥該膜。
用于IV給藥的制劑是通過在磷酸鹽緩沖鹽水中溶解該化合物(例如以藥用鹽的形式)至1％w/v的濃度；并將該溶液消毒滅菌(例如通過滅菌過濾)，然后封裝在容納例如250mg的本發(fā)明化合物的無菌容器中而制得的。
可替換地，凍干制劑通過將該化合物(又例如以藥用鹽形式)溶解在合適的緩沖液(例如上述磷酸鹽緩沖鹽水的磷酸鹽緩沖液)中，對(duì)該溶液進(jìn)行滅菌，然后將其分裝進(jìn)合適的無菌小瓶中，凍干該溶液以除去水，然后密封小瓶而制得?？赏ㄟ^加入消毒水而重配該凍干制劑，并且該重配的溶液可以進(jìn)一步用例如0.9％氯化鈉靜脈輸注液或者5％葡萄糖靜脈輸注液加以稀釋以用于給藥。
可替換地，按照美國公開申請(qǐng)?zhí)?003/0100511(例如，實(shí)施例4和5)的方法，用本發(fā)明化合物代替此公開的化合物9，可以制得脂質(zhì)體制劑，并且可以按該公開所述進(jìn)行凍干。
治療實(shí)施例本實(shí)施例例舉了用于本發(fā)明化合物的適宜的治療方法。
將上述制劑實(shí)施例中描述的以靜脈給藥制劑形式的本發(fā)明化合物在30min內(nèi)以50mg/m2的初始劑量靜脈給予患有骨髓增生異常綜合癥的病人，并將該劑量增大至100mg/m2、200mg/m2、400mg/m2、和600mg/m2。每三周給藥5天，每天給予該化合物一次。
雖然已經(jīng)結(jié)合具體實(shí)施方式
和實(shí)施例描述了本發(fā)明作，但對(duì)參考了該技能和本披露內(nèi)容的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說顯而易見的是具體披露的物質(zhì)和方法的等同替換也可以用于本發(fā)明，并且這些等同替換包括在所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種以下化學(xué)式的化合物 其中X為L-γ-谷氨酰基或者L-γ-谷氨?；拾滨；?；Y為H，可選取代的烷基、可選取代的雜烷基、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、或可選取代的雜芳烷基；以及Z為C5-9烷基、可選取代的芳基、可選取代的芳烷基、可選取代的雜芳基、或者可選取代的雜芳烷基；或者其C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯或者二酯；或者所述化合物或其單酯或二酯的鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其中，X為L-γ-谷氨?；?。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物，其中，Y為可選取代的C5-6環(huán)烷基、可選取代的C5-6環(huán)雜烷基、可選取代的苯基、或者可選取代C5-6雜芳基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的化合物，其中，Y是環(huán)戊基、環(huán)己基、噻吩基、呋喃基、吡啶基、或者可選取代的苯基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中，Y是環(huán)己基。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的化合物，其中，Y是苯基，可選地用1或2個(gè)氟、氯、甲基、羥基、甲氧基、或三氟甲基基團(tuán)取代。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其中，所述苯基未被取代。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，其中，所述苯基被取代，并且所述取代基之一在4-位。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物，其中，只有一個(gè)取代基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，Z是C5-9烷基，或者是苯基，1-或2-萘基，2-、3-或4-聯(lián)苯基，或者2-、3-或4-(C5-6雜芳基)苯基，每一個(gè)可選地用1至3個(gè)鹵素、氰基、羥基、羧基、三氟甲基、或者-R、-OR、-COOR或-NR2基團(tuán)(其中R為C1-3烷基)取代。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的化合物，其中，Z是苯基，可選地用氟、氯、氰基、羥基、甲氧基、甲基、或三氟甲基取代。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的化合物，其中，Z是苯基。
13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的化合物，其中，Z是2-、3-或4-聯(lián)苯基，或2-、3-或4-(C5-6雜芳基)苯基，每一個(gè)可選地用氟、氯、氰基、羥基、甲氧基、甲基、或三氟甲基取代。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的化合物，其中，Z是2-、3-或4-聯(lián)苯基，或者2-、3-或4-(C5-6雜芳基)苯基。
15.根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項(xiàng)所述的化合物，其為二酸。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項(xiàng)所述的化合物，其為二酯。
17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的化合物，其為C1-6烷基二酯。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的化合物，其為C1-3烷基二酯。
19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的化合物，其為二乙酯。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其選自L-γ-谷氨?；?3-[(苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-{[(4-氯苯基)甲基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-[(2-萘甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-[(2-聯(lián)苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-{[(2’-氰基-4-聯(lián)苯基)甲基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-{[(8-喹啉基)甲基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-{[4-(2-吡啶基)苯基甲基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-{[(1-異喹啉基)甲基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨酰基-3-{[(1-甲基苯并三唑-5-基)甲基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-{[2-(1-萘基)乙基]磺?；鶀-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨?；?3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺酰基]-L-丙氨酰-D-苯基甘氨酸，L-γ-谷氨酰基-3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-環(huán)己基甘氨酸，以及L-γ-谷氨?；?3-[(4-聯(lián)苯基甲基)磺?；鵠-L-丙氨酰-D-(4-氯苯基)甘氨酸，以及它們的二乙酯，以及這些所述化合物及其二乙酯的鹽。
21.一種含有權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)的化合物的藥物組合物。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，進(jìn)一步包括賦形劑。
23.權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)所述的化合物在用于制備下列一項(xiàng)或多項(xiàng)的藥物中的應(yīng)用增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的毒性、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓細(xì)胞的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
24.下列一項(xiàng)或多項(xiàng)的治療方法增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的毒性、提高骨髓中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓細(xì)胞的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用，包括給予權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)所述的化合物或者權(quán)利要求21至22中任一項(xiàng)所述的組合物。
25.一種以下化學(xué)式的化合物 其中X是N-α-R1-L-γ-谷氨?；騈-α-R1-L-γ-谷氨?；拾滨；渲蠷1為氨基保護(hù)基團(tuán)；以及Y和Z如在權(quán)利要求1中所限定；或其C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯或者二酯；或者所述化合物或其單酯或二酯的鹽。
26.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，包括(a)氧化一種以下化學(xué)式的化合物 其中X為L-γ-谷氨?；蛘週-γ-谷氨酰基甘氨?；?；或者為N-α-R1-L-γ-谷氨酰基或者N-α-R1-L-γ-谷氨?；拾滨；?，其中R1為氨基保護(hù)基團(tuán)，以及Y和Z如權(quán)利要求1所限定；或其C1-10烷基、苯基-C1-3烷基、或者(C5-6雜芳基)-C1-3烷基的單酯或者二酯；(b)如果Y為N-α-R1-L-γ-谷氨酰基或者N-α-R1-L-γ-谷氨?；拾滨；?，則對(duì)所得的砜進(jìn)行去保護(hù)以得到權(quán)利要求1的化合物；以及可選地(c)如果在步驟(a)或者步驟(b)中制備的權(quán)利要求1所述的化合物是二酸，則形成所述化合物的單酯或者二酯；或者(d)如果在步驟(a)或者步驟(b)中制備的化合物是單酯或者二酯，則去酯化所述化合物，以制備所述化合物的所述二酸；以及(e)形成在步驟(a)至(d)中任一步所制備的所述化合物的鹽。
27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中，R1是催化可去除的氨基保護(hù)基團(tuán)。
全文摘要
本發(fā)明涉及三肽砜和四肽砜、含有其的藥物組合物、其藥物用途以及其制備。該化合物可用于增強(qiáng)化療劑在腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞毒性效果、選擇性地產(chǎn)生在腫瘤細(xì)胞中的毒性、提高骨髓細(xì)胞中GM祖細(xì)胞的產(chǎn)生、刺激骨髓的分化、減輕化療劑的骨髓抑制效果、以及調(diào)節(jié)骨髓的造血作用。
文檔編號(hào)A61K38/06GK101080418SQ200680001366
公開日2007年11月28日 申請(qǐng)日期2006年1月5日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月6日
發(fā)明者史蒂文·R·修, 納塔利婭·奧雷科埃切亞 申請(qǐng)人:泰立克公司