專(zhuān)利名稱(chēng)：含芒果苷的藥用組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含芒果苷的藥用組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
芒果苷(mangiferin)，又名芒果素、知母寧，是從漆樹(shù)科植物芒果葉或百合科植物知母等植物中提取的天然多酚類(lèi)化合物，分子式C19H18O11，分子量422。其化學(xué)結(jié)構(gòu)如下 芒果苷的藥理研究表明其具有多種生物活性，如抗氧化、抗腫瘤、抗菌、抗病毒、降糖、抗炎、利膽、免疫調(diào)節(jié)等等。但因本品幾乎不溶于水，溶解性差，生物利用度低，而一定程度上限制了其作為新藥的研發(fā)。
為此，我們通過(guò)大量的研究，發(fā)明了一種含芒果苷的藥用組合物，該組合物可以有效地增加芒果苷的溶解性，提高生物利用度，并可將其制成注射劑等各種劑型，從而更好地使該化合物發(fā)揮藥效。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種含芒果苷的藥用組合物及其制備方法，在不改變芒果苷結(jié)構(gòu)的前提下，增加芒果苷水溶性，克服芒果苷溶解性差之缺陷，并增加其生物利用度。其特征是選擇環(huán)糊精衍生物作為包合材料，將芒果苷制成包合物，以此增加芒果苷在水中的溶解度。環(huán)糊精與芒果苷的比例可以是3g-30g∶1g范圍的任何一種比例。所說(shuō)的環(huán)糊精衍生物包括各種取代基的α-環(huán)糊精衍生物、β-環(huán)糊精衍生物、羥丙基-γ-環(huán)糊精衍生物及磺丁基醚-β-環(huán)糊精衍生物等。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是將芒果苷加入適量的有機(jī)溶劑溶解，在攪拌情況下，滴加到水溶解的環(huán)糊精衍生物溶液中，繼續(xù)攪拌混合溶液，使環(huán)糊精衍生物將芒果苷包合完全。由此制備具有較好水溶性的制劑。
具體工藝如下取1重量份的芒果苷，用約150重量份60％乙醇加熱溶解；取3-30重量份的環(huán)糊精衍生物，加兩倍環(huán)糊精衍生物量的水?dāng)嚢枞芙猓镰h(huán)糊精衍生物溶液呈粘稠狀。
將兩份溶液放入水浴中，高速攪拌情況下，將芒果苷溶液滴加到環(huán)糊精衍生物溶液中。繼續(xù)攪拌溶液，直至呈粘稠狀。得到芒果苷環(huán)糊精混合物。
本發(fā)明提供的芒果苷包合物用作化療增效藥的大鼠有效劑量范圍為15-30mg/日，按照不同種類(lèi)動(dòng)物間劑量換算公式折到人體為150-300mg/日/人。給藥途徑為口服，每日3次。因動(dòng)物與人體之間的差異，故允許實(shí)際臨床應(yīng)用劑量有所調(diào)整。亦可采用其它給藥途徑。
本發(fā)明提供的藥用組合物加入一種或多種藥用輔料制成任何一種藥劑學(xué)上的劑型。
具體實(shí)施例方式下列實(shí)施例旨在進(jìn)一步舉例描述本發(fā)明，而不是以任何方式限制本發(fā)明，在不背離本發(fā)明的精神和原則的前提下，對(duì)本發(fā)明所做的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員容易實(shí)現(xiàn)的任何改動(dòng)都將落入本發(fā)明的待批權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
制備例1芒果葉用95％乙醇滲漉提取，減壓回收乙醇，稠膏依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，回收溶劑得到石油醚提取部、乙酸乙酯提取部、水層沉淀物。其中水層沉淀物用55％乙醇熱提冷卻得到黃色針狀結(jié)晶，經(jīng)反復(fù)純化處理得到芒果苷。HPLC測(cè)定芒果苷含量為90％。
制備例2知母飲片水煎煮兩次，每次1小時(shí)，水煎液濃縮，80％乙醇沉淀，取上清液，減壓回收乙醇，上大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至清，30％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓回收乙醇，減壓干燥，即得。HPLC測(cè)定芒果苷含量為88％。
實(shí)施例1取芒果苷100mg，用60％乙醇約15mL加熱使之溶解；稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精3.0g，加水5mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續(xù)攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓干燥，即得。
實(shí)施例2取芒果苷100mg，用70％乙醇約15mL加熱使之溶解；稱(chēng)取羥丙基-β-環(huán)糊精0.3g，加水15mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續(xù)攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓干燥，即得。
實(shí)施例3取芒果苷100mg，用65％乙醇約15mL加熱使之溶解；稱(chēng)取α-環(huán)糊精1.0g，加水10mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續(xù)攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓干燥，即得。
實(shí)施例4取芒果苷100mg，用丙酮約5mL加熱使之溶解；稱(chēng)取β-環(huán)糊精1.0g，加水5mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續(xù)攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓干燥，即得。
實(shí)施例5取芒果苷100mg，用無(wú)水乙醇約15mL加熱使之溶解；稱(chēng)取羥丙基-γ-環(huán)糊精1.0g，加水5mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續(xù)攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓干燥，即得。
實(shí)施例6取芒果苷100mg，用甲醇約15mL加熱使之溶解；稱(chēng)取磺丁基醚-β-環(huán)糊精1.0g，加水20mL室溫下攪拌溶解。滴加芒果苷溶液。加完溶液，繼續(xù)攪拌，直至溶液呈粘稠狀，減壓干燥，即得。
制劑制備例1芒果苷環(huán)糊精包合物注射液的制備取芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物10g，加入1000ml重蒸餾水中，溶解，過(guò)0.22um濾膜，120℃滅菌15min，即得。
制劑制備例2芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物膠囊的制備芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物200g，過(guò)80目篩，加入微晶纖維素100克作為稀釋劑組成配方，混勻，裝膠囊，即得，含藥量為100mg/粒。
試驗(yàn)例1芒果苷環(huán)糊精包合物溶解度測(cè)定分別精密稱(chēng)取研成細(xì)粉芒果苷5mg和芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物500mg，置于25±2℃50ml蒸餾水中，每隔5分鐘強(qiáng)力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況。芒果苷仍有可見(jiàn)溶質(zhì)顆粒，其水溶解度小于0.1mg/ml，屬水幾乎不溶物質(zhì)；芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精則完全溶解。另精密稱(chēng)取研成細(xì)粉芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物1000mg，置于25℃±2℃30ml蒸餾水中，每隔5分鐘強(qiáng)力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況，芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精有少量可見(jiàn)溶質(zhì)顆粒。因此芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精水溶解度大于10mg/ml，屬水略溶物質(zhì)。
試驗(yàn)例2芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物與芒果苷口服生物利用度比較。
1.藥液配制稱(chēng)取芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物適量，加去離子水溶解，配成濃度為5mg/mL溶液，為樣A；稱(chēng)取芒果苷適量，加1％羧甲基纖維素鈉溶液混懸，制成5mg/mL混懸液，為樣B。
2.灌胃給藥方案大鼠禁食16h，自由飲水，分別灌胃給藥樣A和樣B，劑量分別為50mg/kg。分別于給藥前5min和給藥后15min、30min、45min、60min、90min、120min、180min、240min、300min、、360min、480min取血，分離血清。
3.樣品處理血漿樣品的處理精密吸取血漿便樣品0.2mL，精密加入冷藏的10％三氯乙酸40μL，渦旋3min，12000r/min離心10min，吸取上清液約120μL置于尖底進(jìn)樣瓶中，HPLC自動(dòng)進(jìn)樣。
4樣品的測(cè)定4.1儀器1100系列高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司)；包括G1312A二元泵，G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器，4.2血漿樣品測(cè)定的色譜條件色譜柱島津Shim packCLC ODS柱(150mm×6mm，5μm)；流動(dòng)相甲醇 乙腈1.2％KH2PO4水溶液(24∶2∶74)；流速0.8mL/min檢測(cè)波長(zhǎng)254nm柱溫40℃。
4.3結(jié)果表1芒果苷包合物與芒果苷的生物利用度比較

上述結(jié)果顯示口服芒果苷羥丙基-β-環(huán)糊精包合物血藥濃度(Cmax)遠(yuǎn)高于口服芒果苷血藥濃度(Cmax)，表明芒果苷包合物生物利用度有較大提高。試驗(yàn)例3芒果苷包合物腫瘤增效作用研究1.藥物按照制劑制備例2制備的芒果苷包合物。順鉑由山東省德州制藥廠生產(chǎn)。
2.動(dòng)物Wistar大鼠，SPF級(jí)，雌雄各半，150～180g，室溫18～25℃，濕度40～60％。由昆明醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼料由廣東省醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，自由攝食和飲水，每日更換飲水瓶一次。
3.實(shí)驗(yàn)方法3.1造模Walker256細(xì)胞系引自上海醫(yī)藥工業(yè)研究院藥理室，將細(xì)胞系在1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)，把細(xì)胞濃度調(diào)成約1×106，無(wú)菌下將0.5ml細(xì)胞注射到剛斷奶的Wistar大鼠腹腔中，6-8天長(zhǎng)成腹水瘤。再將腹水瘤鼠處死，收集腹水于無(wú)菌小瓶中，取0.5ml細(xì)胞于消毒皮膚后行皮下注射到斷奶大鼠腋下制成實(shí)體瘤，8-10天將動(dòng)物處死，無(wú)菌下取瘤組織置于盛有1640培養(yǎng)基的平皿中，將腫瘤切成1mm3大小的瘤塊備用。另取大鼠，雌雄不拘，分模型組、順鉑組、芒果苷包合物高中低劑量組、芒果苷包合物高中低劑量組與順鉑合用組，共8組。將動(dòng)物于2％戊巴比妥鈉靜脈注射麻醉下切開(kāi)腹腔，暴露肝臟，用眼科手術(shù)鑷輕輕在肝上打一遂道，將瘤塊植入，壓迫止血，關(guān)腹后靜脈注射1ml生理鹽水放回籠中飼養(yǎng)。
3.2分組將肝癌大鼠按體重隨機(jī)分為8組，每組10只。分別為模型組、順鉑組、芒果苷包合物高中低劑量組、芒果苷包合物高中低劑量組與順鉑合用組。按表2所示劑量和給藥方式每日給藥一次，連續(xù)給藥14天。
4.檢測(cè)指標(biāo)末次給藥24小時(shí)后處死，取血，剝?nèi)×鼋M織。
5.1瘤重與抑瘤率抑瘤率％＝(1-給藥組平均瘤重/模型組平均瘤重)×100％根據(jù)各組抑瘤率，按Burgi修正公式對(duì)聯(lián)合用藥組進(jìn)行療效判斷。即Q＝聯(lián)合用藥組抑瘤率/(順鉑組抑瘤率+芒果苷組抑瘤率-順鉑組抑瘤率×芒果苷組抑瘤率)若q值為0.85～1.15為單純相加，q＞1.15為增強(qiáng)，q＜0.85為拮抗。
5.結(jié)果芒果苷溶液對(duì)順鉑抑瘤的增效作用表2芒果苷對(duì)肝癌大鼠抑瘤率的影響

與模型組比較*，P＜0.05；**，P＜0.01。與相應(yīng)化療藥組比較#，P＜0.05；##，P＜0.01。與相同劑量芒果苷溶液組比較△，P＜0.05；△△，P＜0.01。
結(jié)果表明，較低劑量的順鉑(0.5mg/kg)肝癌的抑瘤活性較低，抑瘤率只達(dá)24.3％。芒果苷包合物只在30mg/kg劑量下表現(xiàn)出較明顯的抑瘤活性，抑瘤率為23.4％。當(dāng)芒果苷包合物與順鉑聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，抑瘤活性明顯提高，各組與模型組比較具有顯著性差異。芒果苷包合物15mg/kg和30mg/kg與順鉑合用時(shí)q值為1.41和1.79，大于1.15，表明芒果苷包合物對(duì)順鉑的抑瘤有一定的增效作用。
7結(jié)論芒果苷包合物與順鉑聯(lián)用可明顯增強(qiáng)順鉑的抑瘤活性。
權(quán)利要求
1.一種含芒果苷和環(huán)糊精衍生物的藥物組合物，其特征在于芒果苷被包含在環(huán)糊精衍生物中，二者配比為芒果苷1g、環(huán)糊精衍生物3g-30g。
2.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于芒果苷被包含在環(huán)糊精衍生物中，二者配比為芒果苷1g、環(huán)糊精衍生物3g-10g。
3.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于環(huán)糊精衍生物可以選自各種取代基的α-環(huán)糊精衍生物、β-環(huán)糊精衍生物、羥丙基-γ-環(huán)糊精衍生物及磺丁基醚-β-環(huán)糊精衍生物等。
4.權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于環(huán)糊精衍生物優(yōu)選為羥丙基-β-環(huán)糊精。
5.權(quán)利要求1的藥物組合物的制備方法，其特征在于取芒果苷，用適當(dāng)溶劑溶解；取環(huán)糊精衍生物，加適量的水?dāng)嚢枞芙?，高速攪拌情況下，將芒果苷溶液滴加到環(huán)糊精衍生物溶液中。繼續(xù)攪拌溶液，直至呈粘稠狀。得到芒果苷環(huán)糊精混合物。
6.權(quán)利要求1的藥用組合物加入一種或多種藥用輔料制成任何一種藥劑學(xué)上的劑型。
全文摘要
一種含芒果苷的藥用組合物及其制備方法，具體為芒果苷被包含在環(huán)糊精衍生物中，且二者配比為芒果苷1g、環(huán)糊精衍生物3g－30g范圍內(nèi)，可有效增加芒果苷的溶解度與生物利用度。
文檔編號(hào)A61P37/00GK1977855SQ20061016684
公開(kāi)日2007年6月13日 申請(qǐng)日期2006年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月9日
發(fā)明者滕厚雷, 于翠翠, 邵萌, 翟大偉, 李子香, 劉軍鋒 申請(qǐng)人:海南盛科天然藥物研究院有限公司