專(zhuān)利名稱(chēng)：18α－甘草酸衍生物及其制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及甘草酸衍生物及其制備方法和用途，具體涉及18α-甘草酸的酯類(lèi)衍生物及其制備方法和用途。
背景技術(shù)：
甘草酸(Glycyrrhizin，GC)是由甘草中提取的有效活性成分，國(guó)內(nèi)外已對(duì)其生物活性進(jìn)行了廣泛研究并用于臨床多年，其具有抗炎、抗變態(tài)反應(yīng)、抗生物氧化、調(diào)節(jié)免疫功能、阻止Ca2+內(nèi)流、腎上腺皮質(zhì)激素的解離作用以及穩(wěn)定溶酶體膜等多方面的藥理作用，其中抗炎作用是甘草酸抗肝損傷的主要機(jī)理。
甘草酸為五環(huán)三萜皂甙，甘草酸三萜組成部分中D/E環(huán)由于相鄰環(huán)之間旋轉(zhuǎn)空間受阻使C(17)-C(18)鍵方向改變，D/E環(huán)的連接為順式或反式，即C(18)的氫為β構(gòu)型或α構(gòu)型。天然甘草酸主要為18β-甘草酸，18α-甘草酸在甘草中的含量?jī)H為痕量，一般須由18β-甘草酸通過(guò)構(gòu)象轉(zhuǎn)化制得。現(xiàn)代大量的藥理、生化研究表明，藥理和毒理研究證實(shí)，18α-甘草酸比18β-甘草酸抗炎作用強(qiáng)，肝臟靶向性高，副作用小，安全性強(qiáng)，更適用于臨床肝病的治療。
公開(kāi)號(hào)為CN1381462A和CN1381463A的發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)了18α-甘草酸的鹽及其制備方法和用途。由于18β-甘草酸鹽和18α-甘草酸鹽都存在口服生物利用度低的問(wèn)題，都必須使用靜脈注射才能達(dá)到良好的療效，由于肝病需長(zhǎng)期治療，這給患者帶來(lái)了極大的不便和巨大的痛苦。如何解決甘草制劑口服生物利用度低的問(wèn)題成為臨床中急需解決的問(wèn)題之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供18α-甘草酸酯衍生物，其有著良好的穩(wěn)定性和脂溶性，能明顯提高口服生物利用度。
本發(fā)明所述的18α-甘草酸酯衍生物，具有如下所示的結(jié)構(gòu)通式
其中R1、R2、R3為H、C1～6的烷基或特戊酰氧甲基，R1、R2、R3可以相同或不同，且R1、R2、R3不能同時(shí)為H，所述的C1～6的烷基為-CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、-CH(CH3)3、-CH2CH2CH2CH2CH3、-CH(CH3)CH2CH2CH3、-CH(CH2CH3)2、-C(CH3)2CH2CH3、-CH(CH3)CH(CH3)2、-CH2CH2CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)CH2CH3、-CH2C(CH3)3、-CH2CH2CH2CH2CH2CH3、-CH2CH(CH3)CH2CH2CH3、-CH2CH2CH(CH3)CH2CH3、-CH2CH2CH2CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)CH(CH3)2、-CH2C(CH3)2CH2CH3、-CH2CH2C(CH3)3、-CH2CH(CH2CH3)2、-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3、-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3、-CH(CH3)CH2CH(CH3)2、-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)、-CH(CH2CH3)CH(CH3)2、-C(CH3)(CH2CH3)2、-C(CH3)2CH2CH2CH3、-C(CH3)2CH(CH3)2。
其中的C1～6的烷基優(yōu)選C1～4的烷基，更優(yōu)選為甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基。
其中當(dāng)R2為H時(shí)R1、R3可以相同或不同，優(yōu)選R1和R3相同，可以為C1～6的烷基或特戊酰氧甲基。
優(yōu)選R2、R3同時(shí)為H，R1為C1～6的烷基或特戊酰氧甲基。
進(jìn)一步優(yōu)選R2、R3同時(shí)為H，R1為C1～4的烷基或特戊酰氧甲基。
本發(fā)明可以列舉的化合物包括
18α，20β-甲氧酰基-11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸(也稱(chēng)為18α-甘草酸甲酯)；18α，20β-乙氧酰基-11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸(也稱(chēng)為18α-甘草酸乙酯)；18α，20β-正丙氧酰基-11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸(也稱(chēng)為18α-甘草酸丙酯)；18α，20β-異丙氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸(也稱(chēng)為18α-甘草酸異丙酯)；18α，20β-正丁氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸(也稱(chēng)為18α-甘草酸丁酯)；18α-甘草酸二甲酯18α-甘草酸三甲酯18α-甘草酸二乙酯18α-甘草酸三乙酯18α-甘草酸二丙酯18α-甘草酸三丙酯18α-甘草酸二丁酯18α-甘草酸三丁酯18α-甘草酸單特戊酰氧甲酯；18α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯；18α-甘草酸三特戊酰氧甲酯。
本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供18α-甘草酸酯衍生物的制備方法，此方法可以方便，低成本地獲得高純度、適于藥用的18α-甘草酸酯衍生物。
本發(fā)明所述的18α-甘草酸酯衍生物可由如下方法獲得將市售的甘草酸或其鹽在濃的堿水溶液中加熱攪拌，冷卻后調(diào)pH值至2～4，過(guò)濾，水洗，干燥，得18α-甘草酸。
其中，18α-甘草酸烷基酯可按如下方式制備
將18α-甘草酸溶解于低級(jí)醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯(約0.5～1h)，加畢繼續(xù)攪拌0.5～10h，得18α-甘草酸烷基酯。
其中，18α-甘草特戊酰氧甲酯可按如下方式制備將18α-甘草酸懸浮于DMF中，加入N，N-二環(huán)己基-4-嗎啉(DCM)和特戊酸氯甲酯以及三乙胺，升溫至40～70℃，保溫?cái)嚢?～5小時(shí)，得18α-甘草酸特戊酰氧甲酯。
本發(fā)明的再一個(gè)目的在于提供18α-甘草酸的酯衍生物在治療肝病中的用途。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明所述的18α-甘草酸酯衍生物具有良好的口服抗肝損傷作用，可以作為肝病藥物用于臨床使用，由于其在化學(xué)結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)，具有更為優(yōu)良的親酯性，因此相比于目前已有的甘草酸類(lèi)制劑，其在口服給藥中具有更為優(yōu)良的生物利用度。
本發(fā)明的還一個(gè)目的在于提供18α-甘草酸的酯衍生物的組合物，該組合物以18α-甘草酸的酯衍生物為主要活性成份，還可以包括藥學(xué)上可接受的藥物載體，該組合物可以制成各種制劑形式。
本發(fā)明的18α-甘草酸的酯衍生物可加入輔料制備成為口服制劑，所述的口服制劑包括片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、微丸膠囊。其中片劑為普通片劑、分散片、緩釋片、腸溶片、口腔貼片、口腔崩解片、含片、咀嚼片、泡騰片，膠囊為普通膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊，丸劑為滴丸，微丸膠囊為緩釋微丸膠囊、腸溶微丸膠囊。其中優(yōu)選普通片劑、緩釋片、腸溶片、普通膠囊、腸溶膠囊、緩釋微丸膠囊、腸溶微丸膠囊。最優(yōu)選腸溶片、腸溶膠囊和腸溶微丸膠囊。
本發(fā)明的18α-甘草酸的酯衍生物制劑可按常規(guī)技術(shù)制備。所述的片劑的制備是將18α-甘草酸的酯衍生物與一種或一種以上輔料過(guò)篩、混勻后，用干法或濕法制成片劑，其中還可包括用公知的方法包衣的過(guò)程。膠囊劑是指將一定量的18α-甘草酸的酯衍生物加輔料或不加輔料在制成粉末或顆粒后充填于空心膠囊中而制成的藥物制劑?？招哪z囊是由明膠或其他適宜的藥用材料(如甲基纖維素、海藻酸鈣)加輔料制成的具有彈性的兩節(jié)圓筒，并能互相緊密套合。微丸膠囊劑是將18α-甘草酸的酯衍生物微粉化與輔料加適量水制成混懸劑，在流化床中與微丸丸心制成含藥微丸，其制作過(guò)程還可包括包衣的過(guò)程，最后再測(cè)定含量后灌裝膠囊。
本發(fā)明的18α-甘草酸的酯衍生物制劑，相比于以往的甘草制劑，其具有口服生物利用度高的特點(diǎn)，而相比于以往的注射劑型其不僅具有服用方便、不需長(zhǎng)期住院治療等優(yōu)點(diǎn)，更有利于提高用藥的安全性，減少醫(yī)療事故的發(fā)生。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例118α-甘草酸的制備在5升1M的NaOH水溶液中加入500g甘草酸，加熱至70℃攪拌5h，冷卻后調(diào)pH值至2～4，過(guò)濾，水洗，干燥，得18α-甘草酸382g，產(chǎn)率76.4％。
實(shí)施例218α，20β-甲氧酰基-11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸的制備 將10g18α-甘草酸溶于100ml甲醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯3ml(約0.5h)，加畢繼續(xù)攪拌1h，過(guò)濾，真空干燥，得目標(biāo)化合物，即18α-甘草酸甲酯6.0克，熔點(diǎn)244～247℃。
實(shí)施例318α，20β-乙氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸的制備 將10g18α-甘草酸溶于100ml乙醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯3ml(約1h)，加畢繼續(xù)攪拌5h，過(guò)濾，真空干燥，得目標(biāo)化合物，即18α-甘草酸乙酯7.3克，熔點(diǎn)235～238℃。
實(shí)施例418α，20β-丙氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸的制備 將10g18α-甘草酸溶于100ml正丙醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯3ml(約1h)，加畢繼續(xù)攪拌2h，過(guò)濾，真空干燥，得目標(biāo)產(chǎn)物即18α-甘草酸正丙酯5.2克，熔點(diǎn)220～2248℃。
實(shí)施例518α，20β-異丙氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸的制備 將10g18α-甘草酸溶于100ml異丙醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯3ml(約0.5h)，加畢繼續(xù)攪拌2h，過(guò)濾，真空干燥，得目標(biāo)產(chǎn)物，即18α-甘草酸異丙酯5.9克，熔點(diǎn)209～206℃。
實(shí)施例618α，20β-丁氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸的制備 將10g18α-甘草酸溶于100ml正丁醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯3ml(約1h)，加畢繼續(xù)攪拌10h，過(guò)濾，真空干燥，得目標(biāo)化合物，即18α-甘草酸正丁酯7.8克，熔點(diǎn)187～184℃。
實(shí)施例718α-甘草酸單特戊酰氧甲酯的制備 502g18α-甘草酸懸浮于1200ml DMF中，加入417.6gDCM和184.3g特戊酸氯甲酯以及100ml三乙胺，升溫至50℃，保溫?cái)嚢?h，濾去不溶物，減壓濃縮，殘余物甲苯提取(5000ml×2)，濾餅回收DCM。濾液減壓回收甲苯，向殘余液中加入1200ml水，攪拌4小時(shí)，至有大量白色固體析出，將固體濾出，加入甲醇600ml中溶解，用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，母液加活性碳50g，于50℃脫色30min，過(guò)濾，于50℃減壓蒸干，于70℃減壓干燥8小時(shí)，得18α-甘草酸單特戊酰氧甲酯白色結(jié)晶性粉末182g，熔點(diǎn)125～129℃。
實(shí)施例818α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯的制備
502g18α-甘草酸懸浮于1200ml DMF中，加入417.6g DCM和368.5g特戊酸氯甲酯以及100ml三乙胺，升溫至50℃，保溫?cái)嚢?小時(shí)，濾去不溶物，減壓濃縮，殘余物甲苯提取(5000ml×2)，濾餅回收DCM。濾液減壓回收甲苯，向殘余液中加入1200ml水，攪拌4小時(shí)，至有大量白色固體析出，將固體濾出，加入甲醇600ml中溶解，用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，母液加活性碳50g，于50℃脫色30min，過(guò)濾，于50℃減壓蒸干，于70℃減壓干燥8小時(shí)，得18α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯白色結(jié)晶性粉末182g，熔點(diǎn)101～104℃。
實(shí)施例918α-甘草酸三特戊酰氧甲酯的制備 502g18α-甘草酸懸浮于1200ml DMF中，加入417.6gDCM和552.8g新戊酸氯甲酯以及100ml三乙胺，升溫至50℃，保溫?cái)嚢?小時(shí)，濾去不溶物，減壓濃縮，殘余物甲苯提取(5000ml×2)，濾餅回收DCM。濾液減壓回收甲苯，向殘余液中加入1200ml水，攪拌4小時(shí)，至有大量白色固體析出，將固體濾出，加入甲醇600ml中溶解，用無(wú)水硫酸鎂干燥，過(guò)濾，母液加活性碳50g，于50℃脫色30min，過(guò)濾，于50℃減壓蒸干，于70℃減壓干燥8小時(shí)，得18α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯白色結(jié)晶性粉末182g，熔點(diǎn)91～95℃。
實(shí)施例10 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)我們將動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果列于Tab.1，由Tab.1可見(jiàn)，模型組(Mod)ALT、AST較正常組(Nor)顯著升高(p＜0.01 p＜0.05)，表明動(dòng)物IP0.1％CCl4，10ml/kg后引起急性肝損傷。灌胃給予18α-甘草酸正丙酯(GZ1，5％葡萄糖溶液)60mg/kg后能顯著降低血中ALT、AST活性(p＜0.01)，抑制率分別為72.4％、48.0％；灌胃給予異甘草酸鎂(GM，5％葡萄糖溶液)60mg/kg后能顯著降低血中ALT、AST活性(p＜0.01，p＜0.05)，抑制率分別為58.4％、45.5％；灌胃給予18α-甘草酸單特戊酰氧甲酯(DZ2，5％葡萄糖溶液)60mg/kg后能顯著降低血中ALT、AST活性(p＜0.01，p＜0.05)；灌胃給予18α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯(DZ3，5％葡萄糖溶液)60mg/kg后也能顯著降低血中ALT、AST活性(p＜0.01，p＜0.05)。
Tab1.甘草酸類(lèi)化合物對(duì)急性四氯化碳性肝損傷的保護(hù)作用的比較(x±s)

△△P＜0.01△P＜0.05 VS Nor，**P＜0.01*P＜0.05 VS MOD.
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明18α-甘草酸正丙酯、18α-甘草酸單特戊酰氧甲酯、18α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯在灌胃給藥中的療效明顯優(yōu)于異甘草酸鎂，而其中以18α-甘草酸正丙酯在保肝降酶方面的作用最為顯著。
權(quán)利要求
1.18α-甘草酸酯衍生物，具有如下所示的結(jié)構(gòu)通式 其中R1、R2、R3為H、C1～6的烷基或特戊酰氧甲基，R1、R2、R3可以相同或不同，且R1、R2、R3不能同時(shí)為H。
2.權(quán)利要求1所述的18α-甘草酸酯衍生物，其中R2為H，R1和R3相同為C1～6的烷基或特戊酰氧甲基。
3.權(quán)利要求1所述的18α-甘草酸酯衍生物，其中R2、R3同時(shí)為H。
4.權(quán)利要求1所述的18α-甘草酸酯衍生物，其中R1、R2、R3為C1～4的烷基。
5.權(quán)利要求1所述的18α-甘草酸酯衍生物，是18α，20β-甲氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸；18α，20β-乙氧酰基-11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸；18α，20β-正丙氧酰基-11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸；18α，20β-異丙氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸；18α，20β-正丁氧?；?11-氧代正齊墩果烷-12-烯-3β基-2-O-β-D-葡萄吡喃糖醛羧基-α-D-葡萄吡喃糖苷醛酸；18α-甘草酸單特戊酰氧甲酯18α-甘草酸雙特戊酰氧甲酯。
6.權(quán)利要求1所述的18α-甘草酸烷基酯可按如下方式制備將18α-甘草酸溶解于低級(jí)醇中，在室溫下，緩慢滴加乙酰氯約0.5～1h，加畢繼續(xù)攪拌0.5～10h，得18α-甘草酸烷基酯。
7.權(quán)利要求1所述的18α-甘草特戊酰氧甲酯可按如下方式制備將18α-甘草酸懸浮于DMF中，加入N，N-二環(huán)己基-4-嗎啉和特戊酸氯甲酯以及三乙胺，升溫至40～70℃，保溫?cái)嚢?～5小時(shí)，得18α-甘草酸特戊酰氧甲酯。
8.權(quán)利要求1所述的18α-甘草酸的酯衍生物在制備治療肝病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及甘草酸衍生物及其制備方法和用途，具體涉及18α－甘草酸的酯類(lèi)衍生物及其制備方法和用途。
文檔編號(hào)A61P1/00GK101062937SQ200610040050
公開(kāi)日2007年10月31日 申請(qǐng)日期2006年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月29日
發(fā)明者張喜全, 夏春光, 丁琴羅, 徐宏江, 耿文軍, 于飛 申請(qǐng)人:江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司