專(zhuān)利名稱(chēng)：一種丹參微乳的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含有丹參脂溶性成分和水溶性成分以及藥物載體的丹參微乳中藥制劑的制備方法。
背景技術(shù)：
一味丹參散，功同四物湯。研究發(fā)現(xiàn)，丹參作為活血化淤藥，能夠顯著擴(kuò)張冠脈、增加冠脈流量、改善微循環(huán)、保護(hù)心臟的作用，能抑制和解除血小板聚集、提高機(jī)體耐缺氧能力、抗炎、抗脂質(zhì)過(guò)氧化和清除自由基等，因而廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的臨床治療。目前一般認(rèn)為，丹參具有活血化淤活性的有效部位主要為水溶性酚酸類(lèi)和脂溶性菲醌類(lèi)。兩類(lèi)活性成份均表現(xiàn)出抗血小板聚集作用、抗血栓作用、抗氧化損傷作用、抗動(dòng)脈粥樣硬化、縮小心肌梗死面積、降低心肌耗氧量以及防治心肌缺血再灌注損傷等作用。而且，新的研究表明，在缺氧損傷條件下，水溶性成份丹酚酸B與脂溶性成份丹參酮IIA不同配比均可提高心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的活力，降低LDH水平，降低NO的釋放和ET的分泌，而且效果優(yōu)于二者單獨(dú)給藥效果。
然而目前現(xiàn)有的丹參制劑中，將丹參脂溶性活性成份和水溶性活性成份同時(shí)包含的制劑有丸劑、片劑、滴丸劑等，由于丹參酮類(lèi)物質(zhì)具有菲醌類(lèi)的片狀剛性結(jié)構(gòu)，在水中幾乎不溶，生物利用度低，嚴(yán)重影響了藥物的臨床療效；而且丹參酮等脂溶性成份在丹參注射液中含量極少，甚至幾乎沒(méi)有。
如何解決丹參酮類(lèi)脂溶性成份的溶解性能或溶出速度是提高中藥丹參臨床效果的瓶頸。為了克服該缺點(diǎn)，可以采用制備環(huán)糊精包含物、納米粒、固體分散體等方法，如已有丹參酮納米脂質(zhì)體、丹參酮微乳制劑的報(bào)道。然而從中藥的多靶點(diǎn)的作用機(jī)理來(lái)看，丹參的其他活性成份并未包裹于丹參酮納米脂質(zhì)體和丹參酮微乳中，未能體現(xiàn)中藥丹參的整體效應(yīng)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提出一種將提取的脂溶性成分和水溶性成份分別溶于微乳油相和水相制備成丹參微乳中藥制劑的方法，以便有效發(fā)揮丹參脂溶性成分和水溶性成分的協(xié)同作用，展現(xiàn)中藥丹參多靶點(diǎn)、多方位的整體作用特點(diǎn)。
本發(fā)明的所提出的丹參微乳的制備方法，包括以下工藝步驟(1)用超臨界流體萃取技術(shù)從丹參提取含有丹參酮的脂溶性活性成分將藥材原料丹參粉碎成中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入占藥材原料質(zhì)量百分比為10～45％的乙醇作夾帶劑，在以下條件萃取溫度為30～50℃、萃取壓力為20～30MPa、解析I壓力10～15MPa、解析I溫度為40～50℃、解析II壓力6～9MPa，于恒溫恒壓下進(jìn)行循環(huán)萃取，得呈深棕紅色懸濁液體的丹參萃取物；將所得的丹參萃取物經(jīng)雙層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液；將所得的濾液通過(guò)減壓濃縮回收乙醇，濃縮至原體積的1/5～1/10時(shí)，過(guò)濾，刮除其過(guò)濾物上層深棕紅色的膏狀物后，其過(guò)濾物的剩余部分再用回收乙醇洗滌至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B；將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。
(2)取超臨界萃取后留于萃取釜中的丹參藥材殘?jiān)尤?～10倍量水，經(jīng)浸泡后，用超聲萃取，濾取藥液，再將濾液過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，然后用占被萃取的丹參藥材殘?jiān)|(zhì)量10～25倍量的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分，再收集乙醇洗脫液，減壓濃縮并回收乙醇，溫度控制在50℃～65℃，將濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。
(3)制備丹參微乳劑由助乳化劑、乳化劑、油相材料和水相材料組成的液-液分散體系作為藥用微乳載體，各成分占微乳載體總量的質(zhì)量百分比分別為助乳化劑0～20％，乳化劑0.1％～64％，油相材料0.1～46％，水相材料20％～95％；將占油相材料的質(zhì)量百分比為0.2％～2％的所述的丹參脂溶性提取物溶于由乳化劑、助乳化劑和油相材料組成的混合物中，制得丹參微乳的有機(jī)相；將占水相材料的質(zhì)量百分比為0％～5％的所述的丹參水溶性提取物溶于水相材料中，制得丹參微乳水相；將丹參微乳水相滴加到溫度為20℃～50℃，高速攪拌的丹參微乳有機(jī)相中，調(diào)節(jié)PH值為4.0～6.8，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后，即得丹參微乳。
在所述的微乳載體中，其水相材料組份可在20％～95％很寬的范圍內(nèi)調(diào)配，使其他組份所占的比例也可在較寬的范圍變化。
本發(fā)明進(jìn)一步的優(yōu)選方案是所述的藥用微乳載體組份中，助乳化劑的用量占微乳載體總量的1％～8％(質(zhì)量百分比)，乳化劑的用量占微乳載體總量的5％～20％(質(zhì)量百分比)，油相材料用量占微乳載體總量的5％～17％(質(zhì)量百分比)，水相材料用量占微乳載體總量的60％～85％(質(zhì)量百分比)；在所制的丹參微乳的有機(jī)相中，丹參脂溶性提取物占油相材料的質(zhì)量百分比為0.2％～2.0％。
所述的助乳化劑由乙醇、甘油、丙二醇或聚乙二醇400/600中的一種或幾種組成。
所述的乳化劑由表面活性劑Solutrol HS 15、吐溫-80、聚氧乙烯-40-氫化蓖麻油、泊洛沙姆-188、卵磷脂或蔗糖脂肪酸酯中一種或幾種組成。
所述的油相材料由油酸乙酯、油酸、豆油、茶油、玉米油、芝麻油、橄欖油、單油酸甘油酯、辛酸葵酸甘油脂、維生素E、煙酸維生素E、菜籽油、蓖麻油、小麥胚芽油、卵黃磷脂、肉豆蔻酸異丙酯、辛酸葵酸甘油脂中的一種或幾種組成。
所述的水相材料可為水或不同濃度的丹參水溶性成份提取物的水溶液(即所述的丹參微乳水相)。
在本發(fā)明的制備方法中，所述的水相材料中可加入占微乳載體總量的質(zhì)量百分比為0.15％～0.25％苯甲酸或0.05％-0.1％尼伯金作防腐抑菌劑；在所述的水相材料中還可加入占微乳載體總量的質(zhì)量百分比為0.1％～0.2％抗氧劑，抗氧劑由L-抗壞血酸棕櫚酸酯、亞硫酸鹽、焦硫酸鹽、亞硫酸氫鹽中的一種或幾種組成。
在所述的藥用微乳載體的進(jìn)一步優(yōu)化組分中，所述的乳化劑與油相材料的質(zhì)量百分比總和控制的小于40.0％的范圍內(nèi)。
根據(jù)不同的臨床給藥需求，本發(fā)明所制得的丹參微乳可制備成口服液劑、軟膠囊或液體型硬膠囊應(yīng)用。
本發(fā)明采用超臨界萃取技術(shù)和超聲提取技術(shù)分別提取了丹參脂溶性活性成分和水溶性活性成分，并將脂溶性成分和水溶性成份分別溶于微乳油相和水相制備成丹參微乳。整個(gè)過(guò)程均在較低溫度進(jìn)行，能有效的避免丹參熱敏性活性成分的分解破壞，而且微乳作為油-水分散體系，可同時(shí)載有丹參脂溶性活性成分和水溶性成份，并可顯著提高丹參脂溶性活性成分(丹參酮)的溶解度，促進(jìn)其吸收，提高生物利用度，更好的發(fā)揮丹參多方位、多靶點(diǎn)協(xié)同作用、減少用藥劑量和毒副作用。
本發(fā)明所制備的丹參微乳的藥效動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果如下1)大鼠在體腸吸收的實(shí)驗(yàn) 制備與丹參微乳處方中除不含油酸乙酯和油酸，其余各組分含量均相同的丹參混懸液，進(jìn)行大鼠載體腸吸收研究，比較不同時(shí)刻大鼠腸體內(nèi)脂溶性成分(以丹參酮IIA為指標(biāo)成分)殘留情況(見(jiàn)圖1)，間接考察丹參脂溶性成分在體腸吸收情況。結(jié)果表明，丹參微乳可明顯促進(jìn)丹參脂溶性成分的吸收，從而提高丹參有效成分的生物利用度。
2)對(duì)高脂血癥大鼠血流變學(xué)的影響 通過(guò)測(cè)定不同給藥組高脂血癥大鼠全血粘度、紅細(xì)胞壓積、血小板最大聚集率等指標(biāo)，比較丹參微乳與丹參酮混懸液、丹酚酸微乳液分別改善高脂血癥大鼠血液流變學(xué)的效果差異。結(jié)果見(jiàn)圖2。其結(jié)果表明丹參微乳可以同時(shí)顯著降低高脂血癥大鼠的全血粘度、抑制血小板聚集，其效果優(yōu)于丹參酮混懸液微乳和丹酚酸微乳，說(shuō)明采用微乳載藥體系給藥可以明顯促進(jìn)藥物的吸收、提高藥物的生物利用度，其作用效果顯著優(yōu)于丹參酮混懸液組。
3)對(duì)垂體后葉素致大鼠急性心肌缺血的保護(hù) 通過(guò)測(cè)定不同給藥組大鼠經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血后血清中的磷酸肌酸激酶(PCK)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活性，比較丹參微乳與丹參酮混懸液、丹酚酸微乳液分別對(duì)注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血的改善效果。結(jié)果見(jiàn)圖3A、圖3B、圖3C、圖3D。其結(jié)果表明丹參微乳、丹參酮混懸液、丹酚酸微乳均可在一定程度上改善注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血，提高心肌組織SOD活性，減少M(fèi)DA、PCK、LDH的生成，且以丹參復(fù)合微乳療效最為顯著，優(yōu)于丹參酮混懸液、丹酚酸微乳的作用。說(shuō)明微乳載藥體系可明顯促進(jìn)丹參酮的吸收，提高生物利用度，并且丹參酮和丹酚酸聯(lián)合用藥可增加療效。


圖1表示不同時(shí)間TanIIA的殘留率曲線；圖2表示對(duì)高脂血癥大鼠血流變學(xué)的影響；
圖3A表示不同給藥組大鼠經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血后血清中的磷酸肌酸激酶(PCK)含量的測(cè)定結(jié)果；圖3B表示不同給藥組大鼠經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血后血清中的乳酸脫氫酶(LDH)含量的測(cè)定結(jié)果；圖3C表示不同給藥組大鼠經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血后血清中的丙二醛(MDA)含量的測(cè)定結(jié)果；圖3D表示不同給藥組大鼠經(jīng)舌下靜脈注射垂體后葉素誘導(dǎo)的急性心肌缺血后血清中的超氧化物歧化酶(SOD)活性的測(cè)定結(jié)果；圖3A、圖3B、圖3C、圖3D中，甲組為模型組，乙組為正常對(duì)照組，丙組為丹參微乳組，丁組為丹參酮混懸液組，戊組為丹酚酸微乳組。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例一丹參微乳的制備將優(yōu)質(zhì)丹參藥材粉碎成20目顆粒大小的中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入藥材量30％的95％的乙醇作夾帶劑，當(dāng)滿(mǎn)足以下條件萃取溫度為40℃、萃取壓力為22MPa、解析I壓力11MPa、解析I溫度為45℃、解析II壓力7MPa時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，并保持恒溫恒壓。以CO2循環(huán)流速11kg/h·kg萃取2.0h后，從出料口出料，得丹參粗提物，為深棕紅色懸濁液體。將丹參萃取物經(jīng)栓層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液，濾液進(jìn)一步減壓回收乙醇(65℃水浴)，濃縮至原體積的1/5時(shí)，過(guò)濾，輕輕刮除其過(guò)濾物上層的深棕紅色膏狀物，再用回收乙醇洗滌該過(guò)濾物的剩余部分至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B，將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。
將超臨界萃取后的丹參藥材殘?jiān)尤?倍量水，浸泡過(guò)夜后，超聲萃取45min，濾取藥液，藥渣加入6倍水再次超聲萃取45min，濾取藥液，合并藥液，過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，以丹參藥材量的15倍95％的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分(丹酚酸類(lèi))，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，溫度控制在65℃，濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。
稱(chēng)取1.20g的丹參脂溶性活性成分提取物，加入Solutrol HS-15 108.0g、無(wú)水乙醇27.0g、油酸22.5g、油酸乙酯67.5g組成混合有機(jī)相中，超聲溶解后，制備成微乳有機(jī)相；稱(chēng)取丹參水溶性活性成分提取物16.96g，L-抗壞血酸棕櫚酸酯2.0g，溶于1000mL水中為微乳水相。將水相逐滴加入油相中(40℃水浴條件下)，邊加邊攪拌，使其形成澄清、透明、紅棕色微乳，調(diào)節(jié)PH值至6.8，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾、分裝，制成丹參微乳口服液(10mL/支)120支。
實(shí)施例二丹參微乳的制備將優(yōu)質(zhì)丹參藥材粉碎成20目顆粒大小的中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入藥材量40％的95％的乙醇作夾帶劑，當(dāng)滿(mǎn)足以下條件萃取溫度為50℃、萃取壓力為28MPa、解析I壓力13MPa、解析I溫度為50℃、解析II壓力9MPa時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，并保持恒溫恒壓。以CO2循環(huán)流速11kg/h·kg萃取2.0h后，從出料口出料，得丹參粗提物，為深棕紅色懸濁液體。將丹參萃取物經(jīng)雙層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液，濾液進(jìn)一步減壓回收乙醇(65℃水浴)，濃縮至原體積的1/10時(shí)，過(guò)濾，輕輕刮除其過(guò)濾物上層的深棕紅色膏狀物，再用回收乙醇洗滌該過(guò)濾物的剩余部分至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B，將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。
將超臨界萃取后的丹參藥材殘?jiān)尤?0倍量水，浸泡過(guò)夜后，超聲萃取30min，濾取藥液，藥渣加入8倍水再次超聲萃取45min，濾取藥液，合并藥液，過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，以丹參藥材量的20倍95％的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分(丹酚酸類(lèi))，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，溫度控制在65℃，濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。
稱(chēng)取1.20g的丹參脂溶性活性成分提取物，加入吐溫-80 108.0g、丙二醇27.0g、辛酸葵酸甘油脂23.0g、維生素E 0.50g、油酸乙酯60.0g組成混合有機(jī)相中，超聲溶解后，制備成微乳有機(jī)相；稱(chēng)取丹參水溶性活性成分提取物10.0g，L-抗壞血酸棕櫚酸酯1.40g，尼泊金甲酯1.0g，溶于1000mL水中為微乳水相。將水相逐滴加入油相中(40℃水浴條件下)，邊加邊攪拌，使其形成澄清、透明、紅棕色微乳，調(diào)節(jié)PH值至6.8，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾、分裝，制成丹參微乳口服液。
實(shí)施例三丹參微乳的制備將優(yōu)質(zhì)丹參藥材粉碎成20目顆粒大小的中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入藥材量10％的95％的乙醇作夾帶劑，當(dāng)滿(mǎn)足以下條件萃取溫度為50℃、萃取壓力為30MPa、解析I壓力15MPa、解析I溫度為40℃、解析II壓力7MPa時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，并保持恒溫恒壓。以CO2循環(huán)流速11kg/h·kg萃取3.5h后，從出料口出料，得丹參粗提物，為深棕紅色懸濁液體。將丹參萃取物經(jīng)雙層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液，濾液進(jìn)一步減壓回收乙醇(65℃水浴)，濃縮至原體積的1/5時(shí)，過(guò)濾，輕輕刮除其過(guò)濾物上層的深棕紅色膏狀物，再用回收乙醇洗滌該過(guò)濾物的剩余部分至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B，將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。
將超臨界萃取后的丹參藥材殘?jiān)尤?0倍量水，浸泡過(guò)夜后，超聲萃取45min，濾取藥液，藥渣加入6倍水再次超聲萃取45min，濾取藥液，合并藥液，過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，以丹參藥材量的20倍95％的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分(丹酚酸類(lèi))，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，溫度控制在65℃，濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。
稱(chēng)取0.40g的丹參脂溶性活性成分提取物，加入聚氧乙烯-40-氫化蓖麻油108.0g、丙二醇27.0g、乙二醇60015.0g、茶油22.5g、小麥胚芽油15.0g、油酸乙酯67.5g組成混合有機(jī)相中，超聲溶解后，制備成微乳有機(jī)相；稱(chēng)取丹參水溶性活性成分提取物20.5g，亞硫酸鈉1.3g，溶于1000mL水中為微乳水相。將水相逐滴加入油相中(40℃水浴條件下)，邊加邊攪拌，使其形成澄清、透明、紅棕色微乳，調(diào)節(jié)PH值至6.8，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾、分裝，制成丹參微乳口服液。
實(shí)施例四丹參微乳的制備將優(yōu)質(zhì)丹參藥材粉碎成20目顆粒大小的中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入藥材量25％的95％的乙醇作夾帶劑，當(dāng)滿(mǎn)足以下條件萃取溫度為35℃、萃取壓力為25MPa、解析I壓力13MPa、解析I溫度為40℃、解析II壓力6MPa時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，并保持恒溫恒壓。以CO2循環(huán)流速11kg/h·kg萃取3.0h后，從出料口出料，得丹參粗提物，為深棕紅色懸濁液體。將丹參萃取物經(jīng)栓層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液，濾液進(jìn)一步減壓回收乙醇(65℃水浴)，濃縮至原體積的1/5時(shí)，過(guò)濾，輕輕刮除其過(guò)濾物上層的深棕紅色膏狀物，再用回收乙醇洗滌該過(guò)濾物的剩余部分至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B，將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。
將超臨界萃取后的丹參藥材殘?jiān)尤?0倍量水，浸泡過(guò)夜后，超聲萃取45min，濾取藥液，藥渣加入6倍水再次超聲萃取45min，濾取藥液，合并藥液，過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，以丹參藥材量的20倍95％的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分(丹酚酸類(lèi))，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，溫度控制在65℃，濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。
稱(chēng)取1.8g的丹參脂溶性活性成分提取物，加入Solutrol HS-15108.0g、無(wú)水乙醇27.0g、聚乙二醇60010.0g、油酸22.5g、維生素E 0.40g、油酸乙酯67.5g組成混合有機(jī)相中，超聲溶解后，制備成微乳有機(jī)相；稱(chēng)取丹參水溶性活性成分提取物16.0g，亞硫酸鈉0.70g，尼泊金甲酯0.40g，溶于400mL水中為微乳水相。將水相逐滴加入油相中(40℃水浴條件下)，邊加邊攪拌，使其形成澄清、透明、紅棕色微乳，調(diào)節(jié)PH值至6.8，然后經(jīng)壓制法制得微乳軟膠囊。
實(shí)施例五丹參微乳的制備將優(yōu)質(zhì)丹參藥材粉碎成20目顆粒大小的中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入藥材量35％的95％的乙醇作夾帶劑，當(dāng)滿(mǎn)足以下條件萃取溫度為35℃、萃取壓力為25MPa、解析I壓力12MPa、解析I溫度為45℃、解析II壓力8MPa時(shí)，開(kāi)始循環(huán)萃取，并保持恒溫恒壓。以CO2循環(huán)流速11kg/h·kg萃取2.0h后，從出料口出料，得丹參粗提物，為深棕紅色懸濁液體。將丹參萃取物經(jīng)栓層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液，濾液進(jìn)一步減壓回收乙醇(65℃水浴)，濃縮至原體積的1/7時(shí)，過(guò)濾，輕輕刮除其過(guò)濾物上層的深棕紅色膏狀物，再用回收乙醇洗滌該過(guò)濾物的剩余部分至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B，將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。
將超臨界萃取后的丹參藥材殘?jiān)尤?倍量水，浸泡過(guò)夜后，超聲萃取45min，濾取藥液，藥渣加入6倍水再次超聲萃取45min，濾取藥液，合并藥液，過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，以丹參藥材量的15倍95％的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分(丹酚酸類(lèi))，收集乙醇洗脫液，減壓回收乙醇，溫度控制在65℃，濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。
稱(chēng)取1.20g的丹參脂溶性活性成分提取物，加入Solutrol HS-15 108.0g、甘油27.0g、聚乙二醇60015.0g、油酸22.5g、維生素E 0.40g、肉豆蔻酸異丙酯67.5g組成混合有機(jī)相中，超聲溶解后，制備成微乳有機(jī)相；稱(chēng)取丹參水溶性活性成分提取物8.0g，亞硫酸氫鈉1.0g，尼泊金甲酯0.5g，溶于400mL水中為微乳水相。將水相逐滴加入油相中(40℃水浴條件下)，邊加邊攪拌，使其形成澄清、透明、紅棕色微乳，調(diào)節(jié)PH值至6.8，然后經(jīng)灌制得微乳液硬膠囊。
權(quán)利要求
1.一種丹參微乳的制備方法，其特征在于包括以下工藝步驟(1)用超臨界流體萃取技術(shù)從丹參提取含有丹參酮的脂溶性活性成分將藥材原料丹參粉碎成中細(xì)粉，置于超臨界萃取釜中，以超臨界CO2作為抽提劑，加入占藥材原料質(zhì)量百分比為10～45％的乙醇作夾帶劑，在以下條件萃取溫度為30～50℃、萃取壓力為20～30MPa、解析I壓力10～15MPa、解析I溫度為40～50℃、解析II壓力6～9MPa，于恒溫恒壓下進(jìn)行循環(huán)萃取，得呈深棕紅色懸濁液體的丹參萃取物；將所得的丹參萃取物經(jīng)雙層濾紙過(guò)濾，收集濾餅A和濾液；將所得的濾液通過(guò)減壓濃縮回收乙醇，濃縮至原體積的1/5～1/10時(shí)，過(guò)濾，刮除其過(guò)濾物上層深棕紅色的膏狀物后，其過(guò)濾物的剩余部分再用回收乙醇洗滌至表層無(wú)紅棕色膏狀物，得濾餅B；將濾餅B與濾餅A合并混勻，即得丹參脂溶性活性成分。(2)取超臨界萃取后留于萃取釜中的丹參藥材殘?jiān)尤?～10倍量水，經(jīng)浸泡后，用超聲萃取，濾取藥液，再將濾液過(guò)潔凈F2D大孔樹(shù)脂進(jìn)行富集，然后用占被萃取的丹參藥材殘?jiān)|(zhì)量10～25倍量的乙醇洗脫大孔樹(shù)脂吸附的丹參水溶性活性成分，再收集乙醇洗脫液，減壓濃縮并回收乙醇，溫度控制在50℃～65℃，將濃縮后的藥液噴霧干燥，即得丹參水溶性活性成分。(3)制備丹參微乳劑由助乳化劑、乳化劑、油相材料和水相材料組成的液-液分散體系作為藥用微乳載體，各成分占微乳載體總量的質(zhì)量百分比分別為助乳化劑0～20％，乳化劑0.1％～64％，油相材料0.1～46％，水相材料20％～95％；將占油相材料的質(zhì)量百分比為0.2％～2％的所述的丹參脂溶性提取物溶于由乳化劑、助乳化劑和油相材料組成的混合物中，制得丹參微乳的有機(jī)相；將占水相材料的質(zhì)量百分比為0％～5％的所述的丹參水溶性提取物溶于水相材料中，制得丹參微乳水相；將丹參微乳水相滴加到溫度為20℃～50℃，高速攪拌的丹參微乳有機(jī)相中，調(diào)節(jié)PH值為4.0～6.8，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后，即得丹參微乳。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于所述的藥用微乳載體組份中，助乳化劑的用量占微乳載體總量的1％～8％，乳化劑的用量占微乳載體總量的5％～20％，油相材料用量占微乳載體總量的5％～17％，水相材料用量占微乳載體總量的60％～85％。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的丹參微乳的制備方法，其特征是在所制的丹參微乳的有機(jī)相中，所述的丹參脂溶性提取物占油相材料的質(zhì)量百分比為0.2％～2.0％。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于所述的助乳化劑由乙醇、甘油、丙二醇或聚乙二醇400/600中的一種或幾種組成。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于所述的乳化劑由表面活性劑Solutrol HS 15、吐溫-80、聚氧乙烯-40-氫化蓖麻油、泊洛沙姆-188、卵磷脂或蔗糖脂肪酸酯中一種或幾種組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于所述的油相材料由油酸乙酯、油酸、豆油、茶油、玉米油、芝麻油、橄欖油、單油酸甘油酯、辛酸葵酸甘油脂、維生素E、煙酸維生素E、菜籽油、蓖麻油、小麥胚芽油、卵黃磷脂、肉豆蔻酸異丙酯、辛酸葵酸甘油脂中的一種或幾種組成。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于在所述的水相材料中加有占微乳載體總量的質(zhì)量百分比為0.15％～0.25％苯甲酸或0.05％-0.1％尼伯金作防腐抑菌劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于在所述的水相材料中加有占微乳載體總量的質(zhì)量百分比為0.1％～0.2％抗氧劑，抗氧劑由L-抗壞血酸棕櫚酸酯、亞硫酸鹽、焦硫酸鹽、亞硫酸氫鹽中的一種或幾種組成。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于在所述的藥用微乳載體組份中，所述的乳化劑與油相材料的質(zhì)量百分比總和小于40.0％。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的丹參微乳的制備方法，其特征在于所述的丹參微乳制備成口服液劑、軟膠囊或液體型硬膠囊。
全文摘要
一種丹參微乳的制備方法，包括以下工藝步驟用超臨界流體萃取技術(shù)從丹參提取含有丹參酮的脂溶性活性成分，用超聲提取技術(shù)提取丹參水溶性活性成分，再將丹參脂溶性提取物溶于由乳化劑、助乳化劑和油相材料組成的混合物中，制得丹參微乳的有機(jī)相，將丹參水溶性提取物溶于水相材料中，，制得丹參微乳水相，然后將丹參微乳水相滴加到丹參微乳有機(jī)相中，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后，即得丹參微乳。本發(fā)明方法所制備的丹參微乳同時(shí)載有丹參脂溶性活性成分和水溶性成份，并可顯著提高丹參脂溶性活性成分(丹參酮)的溶解度，促進(jìn)其吸收，提高生物利用度，更好的發(fā)揮丹參多方位、多靶點(diǎn)協(xié)同作用、減少用藥劑量和毒副作用。
文檔編號(hào)A61K9/107GK1895352SQ20061003595
公開(kāi)日2007年1月17日 申請(qǐng)日期2006年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月15日
發(fā)明者張忠義, 李紅磊, 雷正杰, 周本杰, 季愛(ài)民 申請(qǐng)人:南方醫(yī)科大學(xué)珠江醫(yī)院