專利名稱：新的4－苯亞甲基－哌啶衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及為具有改善的體內(nèi)特征的NR2B選擇性NMDA受體拮抗劑或?yàn)橹苽銷MDA受體拮抗劑的中間體的新4-苯亞甲基-哌啶衍生物。
背景技術(shù)：
N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)廣泛表達(dá)的配體門控的陽離子通道。NMDA受體與神經(jīng)元的發(fā)育和可塑性變化有關(guān)。由谷氨酸，NMDA受體的天然配體過度活化NMDA受體可以引起細(xì)胞的鈣超載。這觸發(fā)了改變細(xì)胞功能并最終可導(dǎo)致神經(jīng)元的死亡的細(xì)胞內(nèi)級聯(lián)事件。NMDA受體拮抗劑可用于治療許多伴隨谷氨酸過度釋放或任意原因引起的NMDA受體過度活化的疾病。[Curr Opin InvestigDrugs.2003 4826-32]。
NMDA受體是由至少一個NR1亞單位與一種或多種四NR2亞單位(NR2A-D)構(gòu)成的異聚體。由不同的NR2亞單位構(gòu)成的NMDA受體在CNS中的空間分布和藥理學(xué)敏感性是不同的。由于其限制性分布(在前腦和脊髓的膠狀質(zhì)中密度最高)這些亞單位中特別令人感興趣的是NR2B亞單位[Neuropharmacology，38，611-623(1999)]。這種亞型的選擇性化合物是可得的并且已經(jīng)證明在中風(fēng)[stroke，28，2244-2251(1997)]、創(chuàng)傷性腦損傷[Brain Res.，792，291-298(1998)]、帕金森病[Exp.Neurol.，163，239-243(2000)]、神經(jīng)性和炎性疼痛[Neuropharmacology，38，611-623(1999)]的動物模型中是有效的。
而且，NMDA受體的NR2B亞型選擇性拮抗劑提供了優(yōu)于NMDA受體非選擇性拮抗劑的治療優(yōu)勢。通道阻滯劑類型的非選擇性NMDA拮抗劑苯環(huán)利定和氯胺酮誘發(fā)人體的致幻覺反應(yīng)、幻覺、煩躁不安、緊張和健忘。這些嚴(yán)重的副反應(yīng)妨礙了它們作為潛在性藥物在臨床上的應(yīng)用。屬于此類的化合物也導(dǎo)致了動物行為異常，例如刺激運(yùn)動活動，誘發(fā)健忘癥和損害運(yùn)動協(xié)調(diào)。動物中這些反應(yīng)的嚴(yán)重程度被認(rèn)為可預(yù)知臨床副反應(yīng)的強(qiáng)度。預(yù)期NR2B亞型選擇性拮抗劑不具有這些副反應(yīng)的大多數(shù)。據(jù)報(bào)道在動物行為研究中一些NR2B選擇性化合物[Ro 63-1908in J.Pharmacol.Exp.Ther.，302(2002)940-948and Ro 25-6981in Behav.Pharmacol.，14(2003)477-487]增加了自發(fā)活動，而對于另一種NR2B選擇性拮抗，CP-101，606，以及屬于其他類的Ro 256981沒有觀察到這樣的副作用[Neuropharmcology，38，611-623(1999)]。其他人證實(shí)了直到56mg/kg s.c.和100mg/kgi.p.CP-101，606也缺乏運(yùn)動刺激作用[Soc.Neurosc.Abstr.21，439.9.1995.]。因此，根據(jù)我們最全的知識，CP-101，606是唯一的一貫被報(bào)道缺乏運(yùn)動刺激作用的NR2B選擇性拮抗劑。由于CP-101，606口服效力弱并且根據(jù)公開的信息僅發(fā)現(xiàn)其通過靜脈途徑施用于人類，而且它具有多晶形CYP 2D6介導(dǎo)的代謝[Drug Metabolism and Disposition 3176-87]，因此仍十分需要副作用低(高治療指數(shù))、口服效力良好(生物利用度)和具有良好發(fā)展的用于治療目的，特別是口服治療的新NR2B拮抗劑。
本發(fā)明化合物的飽和類似物在專利第WO2003010159號中描述為NR2B亞型選擇性NMDA拮抗劑。然而，式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物的相近結(jié)構(gòu)的類似物在文獻(xiàn)中是未知的。
發(fā)明概述發(fā)現(xiàn)本發(fā)明式(I)的新4-苯亞甲基-哌啶衍生物是對含有NR2B亞單位的受體具有選擇性的功能活性的NMDA拮抗劑。我們還發(fā)現(xiàn)苯亞甲基-哌啶類在體內(nèi)具有與其飽和的苯甲基-哌啶類似物相似的止痛效能。令人驚訝地，雖然后者分子以其最大有效止痛劑量或稍微超過其最大有效止痛劑量會引起運(yùn)動刺激，但本發(fā)明的測試化合物直到40-60倍的止痛劑量也沒有運(yùn)動刺激作用。該特征可提供優(yōu)于具有較低治療指數(shù)的NR2B選擇性NMDA拮抗劑的治療優(yōu)勢。令人驚訝地，后者分子在稍微超過其止痛劑量范圍時產(chǎn)生了運(yùn)動刺激作用，而本發(fā)明的化合物直至40-60倍于止痛劑的劑量前無運(yùn)動刺激作用。該特征可以提供優(yōu)于具有較低治療指數(shù)的NR2B選擇性NMDA拮抗劑的治療作用。
發(fā)明詳述因此本發(fā)明首先涉及式(I)的新4-苯亞甲基-哌啶衍生物 -其中含義為X和Y獨(dú)立地為氫或鹵素原子，羥基，氰基，硝基，氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的C1-C4烷氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的芳氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的芳烷基氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的C1-C4烷基磺酰胺基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的C1-C4烷?；０坊?，芳基磺酰胺基，C1-C4烷基磺酰氧基，羧基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4烷基-SO2-NH-CH2-，NH2-(CH2)1-4-SO2-NH-，NH2-(CH2)1-4-(CO)-NH-，氨磺?；鵞NH2-SO2-]，甲?；鵞-CHO]，氨基-甲基[-CH2-NH2]，羥甲基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧甲基，鹵代甲基，四唑基，或C1-C4烷氧基，任選由氨基取代的C1-C4烷氧羰基，C1-C6烷酰氧基，苯基或C1-C4烷氧基，或在特定的情況下，相鄰的X和Y基團(tuán)與一個或多個相同或不同的另外的雜原子和-CH＝和/或-CH2-基形成任選取代的4-7元的同環(huán)-或雜環(huán)，優(yōu)選嗎啉，吡咯，吡咯烷，氧代-或硫代-吡咯烷，吡唑，吡唑烷，咪唑，咪唑烷，氧代-或硫代-咪唑或咪唑烷，1，4-噁嗪，噁唑，噁唑烷，氧代-或硫代-噁唑烷，氧代-或硫代-噻唑烷，或3-氧代-1，4-噁嗪環(huán)，Z是氫或鹵素原子，硝基，氨基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基-及其旋光對映體，外消旋化合物及鹽。
而且，本發(fā)明的目的是含有式(I)的新4-苯亞甲基-哌啶衍生物或其旋光對映體或外消旋化合物或鹽作為活性成分的藥物組合物。
本發(fā)明的進(jìn)一步的目的是生產(chǎn)式(I)新4-苯亞甲基-哌啶衍生物和制造含這些化合物的藥劑的方法，以及使用這些化合物治療的方法，即給治療的哺乳動物-包括人-施用有效量的本發(fā)明式(I)的新苯亞甲基-哌啶衍生物本身或藥劑形式。
根據(jù)本發(fā)明，式(I)的羧酸酰胺化合物可通過以下方法制備。
為了生產(chǎn)式(I)的化合物，其中X，Y和Z如式(I)所定義，使式(II)的仲胺 -其中Z具有與式(I)同樣的含義-在堿存在下在適宜的溶劑中與乙基草酰氯反應(yīng)將得到式(III)的酯化合物 -其中Z具有與式(I)同樣的含義-使用氫氧化堿進(jìn)行皂化并將得到的式(IV)的草酰胺酸(oxalamid acid) -其中Z的含義如上文式(I)所述-或其反應(yīng)性衍生物與式(V)的苯胺反應(yīng)
-其中X和Y的含義如前文式(I)所給出-，然后在特定的情況下將所得的式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物-其中X，Y，Z如式(I)所定義-通過已知的方法通過引入新的取代基和/或修飾或除去存在的基團(tuán)，和/或通過成鹽和/或通過將化合物從鹽中游離，和/或通過使用光學(xué)活性的酸或堿將所得的外消旋化合物拆分而轉(zhuǎn)變成另外的式(I)化合物。
式(II)的羧酸和式(V)的苯胺反應(yīng)，即形成酰胺鍵優(yōu)選通過由式(II)的羧酸制備活性衍生物并且優(yōu)選在堿存在下與式(V)的苯胺反應(yīng)來進(jìn)行。
在溶劑(例如二甲基甲酰胺，乙腈，氯代烴或烴)中在形成酰胺鍵期間羧酸轉(zhuǎn)換成活性衍生物優(yōu)選在原位進(jìn)行?；钚缘难苌锟梢允酋；?例如由羧酸與亞硫酰氯制備)，混合酸酐(例如在堿，例如三乙胺存在下由羧酸與氯甲酸異丁酯制備)，活性酯(例如在堿，如三乙胺存在下由羧酸和羥基苯并三唑和二環(huán)己基-碳二亞胺或六氟磷酸O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲(HBTU)制備)?；钚匝苌镌谑覝睾?℃之間制備。必需的反應(yīng)時間是6-20h。反應(yīng)混合物通過柱色譜法使用Kieselgel 60(Merck)作為吸附劑和適當(dāng)?shù)南疵搫ζ溥M(jìn)行純化。將適當(dāng)?shù)募壏譂饪s得到純化產(chǎn)物。產(chǎn)物的性質(zhì)和量通過HPLC-MS法進(jìn)行測定。
式(V)的苯胺可以商購獲得或通過不同的已知方法來合成。在實(shí)施例中描述了某些無法商購獲得的式(V)苯胺和式(IV)羧酸的合成。
如上所述，本發(fā)明式(I)的新4-苯亞甲基-哌啶衍生物是高效和選擇性的NMDA受體拮抗劑，并且大部分化合物是NMDA受體NR2B亞型的選擇性拮抗劑。為了表征化合物的NR2B選擇性NMDA拮抗劑效能，我們使用了主要表達(dá)含有NR2B亞單位的NMDA受體的培養(yǎng)的皮層神經(jīng)元。為了證明其選擇性，使用由NR1/NR2A亞單位組合轉(zhuǎn)染的HEK-293細(xì)胞。我們分別使用小鼠福爾馬林和運(yùn)動活性試驗(yàn)來測定有效的NR2B選擇性拮抗劑的體內(nèi)止痛效能和副作用傾向。。
試驗(yàn)方案重組NMDA受體的表達(dá)為了證明化合物的NR2B選擇性，即研究它們對含有NR2A的NMDA受體的作用，我們在穩(wěn)定表達(dá)具有NR1/NR2A亞單位組成的重組NMDA受體的細(xì)胞株上對最有效的化合物進(jìn)行測試。使用陽離子脂質(zhì)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法將亞克隆至可誘導(dǎo)的哺乳動物表達(dá)載體的人NR1和NR2A亞單位的cDNAs引入缺乏NMDA受體的HEK293細(xì)胞中[Biotechniques，22，982-987.(1997)；Neurochemistry International，43，19-29.(2003)]。使用對新霉素和潮霉素的耐藥性來篩選具有載體和單克隆細(xì)胞株的克隆，由對NMDA暴露產(chǎn)生最高應(yīng)答的克隆來建立。在熒光鈣測量中測試了化合物對NMDA誘發(fā)的細(xì)胞溶質(zhì)鈣升高的抑制作用。在誘導(dǎo)過程中還存在氯胺酮(500μM)以防止細(xì)胞毒性。
使用熒光平板讀數(shù)器通過測量大鼠皮層細(xì)胞培養(yǎng)物的細(xì)胞內(nèi)鈣濃度來評價(jià)NMDA拮抗劑的體外效能細(xì)胞內(nèi)鈣的測量在源于17天大的Charles River大鼠胚胎的原代新生皮層細(xì)胞培養(yǎng)物上進(jìn)行(新生皮層細(xì)胞培養(yǎng)物的制備詳見Johnson，M.I.；Bunge，R.P.(1992)Primary cell cultures ofperipheral and central neurons and glia.InProtocols for NeuralCell Culture，edsFedoroff，S.，Richardson A.，The Humana PressInc.，51-75)。分離后，將細(xì)胞加到標(biāo)準(zhǔn)的96-孔微量培養(yǎng)板上，在37℃95％空氣-5％CO2氣氛中保持培養(yǎng)直到進(jìn)行鈣測量。
3-7天后將該培養(yǎng)物用于體外的細(xì)胞內(nèi)的鈣測量。這里認(rèn)為細(xì)胞的體外成熟(age)主要表達(dá)含有NR2B的NMDA受體[MbI.Pharmacol.45，846-853.(1994)]。在測試前使細(xì)胞裝載熒光Ca2+-敏感染料，F(xiàn)luo-4/AM(2μM)。通過用于測量的溶液(140mM NaCl，5mM KCl，2mM CaCl2，5mM HEPES，5mM HEPES-Na，20mM葡萄糖，10μM甘氨酸，pH＝7.4)洗滌細(xì)胞兩次來停止裝載。洗滌后將測試化合物加入在上述溶液的細(xì)胞中(90μl/孔)。使用熒光平板讀數(shù)器進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)鈣的測量Fluo-4-熒光的升高，因此細(xì)胞內(nèi)鈣濃度是由應(yīng)用40μM NMDA所誘導(dǎo)的。在不同濃度的化合物存在下通過測量鈣升高的減少來評價(jià)測試化合物的抑制效能。
使用由至少三個獨(dú)立實(shí)驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)計(jì)算劑量-反應(yīng)曲線和IC50值?；衔镌趩我粷舛赛c(diǎn)的抑制效能表示為NMDA反應(yīng)的抑制百分?jǐn)?shù)。S形的濃度-抑制曲線與數(shù)據(jù)相吻合并且IC50值確定為產(chǎn)生由該化合物引起的半數(shù)最大抑制作用的濃度。
在表1中，列出了該試驗(yàn)所測定的本發(fā)明最有效的化合物的NR2B拮抗劑效能。表2給出了幾種已知的選擇性NR2B拮抗劑參照化合物和非選擇性NMDA受體拮抗劑MK-801的結(jié)果。
表1通過熒光法在皮層細(xì)胞(NR2B活性)或轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞(NR2A活性)上測定的化合物的NMDA拮抗劑活性
+IC50在500和1000nM之間++IC50在50和500nM之間+++IC50小于50nM
-沒有測試N.E.無效，即抑制作用小于30％表2通過熒光法在皮層細(xì)胞(NR2B活性)或轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞(NR2A活性)上測定的參照化合物的NMDA拮抗劑活性
參照化合物如下CI-10416-(2-[4-(4-氟-苯甲基)-哌啶-1-基]-乙烷亞磺酰基}-3H-苯并噁唑-2-酮Co 1012441-[2-(4-羥苯氧基)乙基]-4-羥基-4-(4-甲基苯甲基)哌啶EMD 958856-[3-(4-氟苯甲基)哌啶-1基]丙酰]-2，3-二氫-苯并噁唑-2-酮CP-101，606(1S，2S)-1-(4-羥苯基)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-1-丙醇Ro 256981R-(R*，S*)-1-(4-羥苯基)-2-甲基-3-[4-(苯基甲基)哌啶-1-基]-1-丙醇。
艾芬地爾赤-2-(4-苯甲基哌啶子基)-1-(4-羥苯基)-1-丙醇MK-801(+)-5-甲基-10，11-二氫-5H-二苯并[a，d]環(huán)庚烯-5，10-亞胺測定體內(nèi)效力的小鼠福爾馬林試驗(yàn)已知將稀釋的福爾馬林注射入大鼠或小鼠的后爪可引起兩階段的用舔/咬其損傷爪所用的時間測量的疼痛相關(guān)行為。第二階段通常定義為福爾馬林注射后在15-60min時間間隔內(nèi)檢測出的疼痛相關(guān)事件，峰活性在大約30min。已知NMDA受體參與福爾馬林注射的第二階段的反應(yīng)并且這種行為反應(yīng)對于NMDA受體的阻斷敏感[Dickenson，A.andBesson J.-M.(Editors)Chapter 1，pp.6-7Animal models ofAnalgesia；and Chapter 8，pp.180-183Mechanism of CentralHypersensitivityExcitatory Amino Acid Mechanisms and TheirControl-In Pharmacology of Pain.Springer-Verlag (Berlin)1997.]。因此，我們使用福爾馬林試驗(yàn)的第二階段的來表征化合物的體內(nèi)效力，認(rèn)為抑制第二階段的反應(yīng)表明了抵抗化學(xué)誘導(dǎo)的持續(xù)性疼痛的止痛作用[Hunker，S.，等Formalin test in mice，a UsefulTechnique for Evaluating Mild Analgesics，Journal ofNeuroscience Methods，14(1985)69-76.]。
使用雄性NMRI小鼠(20-25g)。試驗(yàn)前禁食任何固體食物大約16小時但動物可自由攝入20％的葡萄糖溶液。使動物在玻璃圓筒中適應(yīng)1個小時(cc.直徑15cm)，然后移至后部有鏡子的相同圓筒中以便于觀察。試驗(yàn)物質(zhì)混懸于5％的tween-80中(每kg體重10ml)。在注射福爾馬林15min前通過管飼法口服施用(將在0.9％鹽水中的20μ11％甲醛通過皮下注入右后爪的背側(cè)面)。在福爾馬林注射后，測量從20至25分鐘舔和咬注射的爪子的時間。為確定ED50值，將不同劑量(至少五個劑量)的試驗(yàn)物質(zhì)給予5只小鼠的組并將結(jié)果表示為同一天相對于載體對照組觀察的舔所花費(fèi)時間的抑制百分?jǐn)?shù)。通過Boltzman′s S形曲線擬合計(jì)算ED50值(即，產(chǎn)生50％抑制作用的劑量)。
小鼠自發(fā)運(yùn)動活性的測定在試驗(yàn)中使用重20-22g的雄性NMRI小鼠。
在四通道活性監(jiān)視器測定自發(fā)運(yùn)動活性。該裝置由沿著盒子所有底軸(bottom axis)裝配的2×16對光電池的丙烯酸盒(43cm×43cm×32cm)組成。為了檢測豎立反應(yīng)(rearing response)沿著盒子兩個對邊在10cm高處放置另外列的光電池(16對)。
實(shí)驗(yàn)組由10只動物組成。在口服施用測試化合物或載體(tween-80)三十分鐘后，分別將動物放入四個盒子中的一個，時間為一小時。以15min間隔以一個小時內(nèi)使光束中斷的次數(shù)來測定水平和垂直運(yùn)動。
計(jì)算每組水平活動數(shù)據(jù)的平均值±SE，然后測定與對照組(載體-處理)相比的百分率變化。當(dāng)化合物的作用使光束中斷增加超過50％時認(rèn)為其產(chǎn)生運(yùn)動刺激作用。因此，定義為無刺激作用的劑量(LMAfree)產(chǎn)生小于50％的增加。
表3表示本發(fā)明所選擇的某些化合物(表格上部)和它們相近的苯甲基-哌啶類似物(表格下部)在止痛和運(yùn)動活性試驗(yàn)中獲得的結(jié)果。[A＝2-(4-苯甲基-哌啶-1-基)-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基)-乙酰胺和B＝2-[4-[4-甲基-苯甲基]-哌啶-1-基-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-1H-吲哚-5-基)-乙酰胺]。因此，對1-A和24-B的不同之處僅在于雙鍵的存在而不是單鍵。
表3兩種類型的NR2B拮抗劑在福爾馬林試驗(yàn)和運(yùn)動活性(LMA)試驗(yàn)中的表征。計(jì)算治療指數(shù)(TI)
*小于50％認(rèn)為無副反應(yīng)非選擇性NMDA受體拮抗劑MK-801和選擇性NR2B拮抗劑CI-1041(Soc Neurosci Abst 2000，26(Part 2)Abst 527.4.)，CP-101，606和Ro-256981的止痛和運(yùn)動活性數(shù)據(jù)在表4中給出。
表4NMDA拮抗劑參照化合物在福爾馬林試驗(yàn)和運(yùn)動活性(LMA)試驗(yàn)中的表征。計(jì)算治療指數(shù)(TI)
*CP-101,606和Ro-256981在20mg/kg時產(chǎn)生的福爾馬林反應(yīng)抑制作用分別僅為38％和12％。
可見NMDA受體的非選擇性拮抗劑，MK-801在藥理學(xué)活性劑量范圍內(nèi)增加了運(yùn)動活性。LMA的刺激作用是不利的副作用。某些選擇性NR2B拮抗劑化合物如在專利申請WO 2003010159中描述的參照分子CI-1041或苯甲基-哌啶化合物[A＝2-(4-苯甲基-哌啶-1-基)-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基)-乙酰胺和B＝2-[4-[4-甲基-苯甲基]-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-1H-吲哚-5-基)-乙酰胺]所表現(xiàn)出的產(chǎn)生鎮(zhèn)痛的劑量與刺激運(yùn)動活性的劑量之間也幾乎沒有區(qū)別。令人驚訝地，后者分子的苯亞甲基-哌啶的變型，即，本發(fā)明的化合物在直到很高的劑量也沒有引起活動過度(表3)。當(dāng)具有體內(nèi)高效能的試驗(yàn)苯甲基哌啶的TIs范圍為1至8時，它們苯亞甲基哌啶對應(yīng)物的TIs在相當(dāng)高的范圍內(nèi)，在46和64之間或更高。在表面上進(jìn)行微小的結(jié)構(gòu)修正后顯著不同的曲線是沒有預(yù)料到的。
具有高TI的NR2B拮抗劑特別地有利于可用NR2B拮抗劑治療的疾病的藥物治療。在苯亞甲基哌啶中存在對持續(xù)疼痛模型具有高效力和高治療指數(shù)的化合物。本發(fā)明的化合物具有比先前的專利化合物更加有利的關(guān)于可能的治療用途的曲線。
有利地可以使用在NR2B部位作用的NMDA拮抗劑治療的疾病，如Loftis最近的綜述[Pharmacology Therapeutics，9755-85(2003)]，包括精神分裂癥，帕金森病，亨廷頓病，由缺氧和局部缺血引起的興奮性中毒，癲癇發(fā)作，藥物濫用，和疼痛，特別是任何原因的神經(jīng)性，炎性和內(nèi)臟的疼痛[Eur.J.Pharmacol，429，71-78(2001)]。
由于與非選擇性NMDA拮抗劑相比它們具有減少副作用的傾向，NR2B選擇性拮抗劑可用于NMDA拮抗劑有效的疾病，例如肌萎縮性側(cè)索硬化[Neurol.Res.，21309-12(1999)]，例如酒精，阿片樣物質(zhì)或可卡因戒斷綜合征[Drag and alcohol depend.，59，1-15(2000)]，肌痙攣[Neurosci.Lett.，73，143-148(1987)]，不同起因的癡呆[ExpertOpin.Investig.Drugs，9，1397-406(2000)]，焦慮，抑郁，偏頭疼，低血糖，視網(wǎng)膜的變性疾病(例如CMV視網(wǎng)膜炎)，青光眼，哮喘，耳鳴，聽力損失[Drug News Perspect，11，523-569(1998)和WO.00/00197國際專利申請]。
因此，有利地有效量的本發(fā)明的化合物可用于治療大腦或脊髓的創(chuàng)傷性損傷，阿片類物質(zhì)治療疼痛的耐受和/或依賴，濫用藥物例如乙醇，阿片樣物質(zhì)或可卡因的戒斷綜合征，局部缺血性CNS疾病，慢性神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默病，帕金森病，亨廷頓病，疼痛和慢性疼痛狀態(tài)，例如神經(jīng)性疼痛。
本發(fā)明的化合物以及它們藥學(xué)上可接受的鹽可以以此或適宜的藥物組合物形式使用。這些組合物(藥物)可以是固體，液體或半液體形式并且可加入實(shí)踐中通常使用的藥物助劑和輔助材料，例如載體，賦形劑，稀釋劑，穩(wěn)定劑，潤濕劑或乳化劑，pH-和滲透壓-調(diào)節(jié)劑，調(diào)味劑，或芳香劑，以及增進(jìn)制劑或供應(yīng)制劑的添加劑。
在特定情形下起到治療作用所需要的劑量可以在大范圍內(nèi)改變并滿足個體需要，這取決于疾病的階段，所治療患者的狀況和體重，以及患者對活性成分的敏感性，施用途徑和治療天數(shù)。活性成分的實(shí)際使用劑量可以由熟悉患者所接受治療的知識領(lǐng)域的主治醫(yī)生來安全地確定。
包含根據(jù)本發(fā)明活性成分的藥物組合物的一個劑量單元通常包含0.01至100mg的活性成分，當(dāng)然可能在一些組合物中活性成分的量超過了上文定義的上限或下限。
藥物組合物的固體形式可以是例如片劑，糖衣片，膠囊，丸劑或用于注射劑制備的凍干粉末安瓿劑。液體組合物是可注射和可輸注的組合物，液體藥物，充填液和滴劑。半液體組合物可以是軟膏，香脂，乳膏，振搖混合物和栓劑。
為了施用簡單，如果藥物組合物所包括的劑量單元含施用一次或幾次或施用其二分之一或三分之一或四分之一的量的活性成分，是適合的。這樣的劑量單元是例如片劑，該片劑能夠用其促進(jìn)對分或四分的凹槽來粉碎以利于準(zhǔn)確施用需要量的活性成分。
片劑可以用酸溶層包衣以確保在離開胃之后釋放活性成分內(nèi)容物。這樣的片劑包腸溶衣。通過將活性成分裝入膠囊也能得到類似的效果。
口服施用的藥物組合物可以包括例如作為賦形劑的乳糖或淀粉，作為粘合劑或?；瘎┑聂燃谆w維素鈉，甲基纖維素，聚乙烯吡咯烷酮或淀粉糊。加入作為崩解劑的馬鈴薯淀粉或微晶纖維素，但也可使用超支鏈淀粉或甲醛酪蛋白?；?、膠體硅酸、硬脂精、硬脂酸鈣或硬脂酸鎂可用作抗粘著劑或滑潤劑。
片劑可以例如通過濕法制粒后壓制來制備。在適當(dāng)?shù)脑O(shè)備中用粘合劑水溶液、醇溶液或醇水溶液將混合的活性成分和賦形劑以及在特定情況下部分崩解劑制粒，然后將顆粒干燥。將其他崩解劑、滑潤劑和抗粘著劑加入在干燥的顆粒中，并將混合物壓制成片劑。在特定情況下，制備的片劑具有等分槽以便于施用。
片劑可由活性成分和適當(dāng)?shù)闹鷦┑幕旌衔锿ㄟ^壓制直接制備。在特定情況下，片劑可用通常在制藥實(shí)踐中使用的添加劑例如穩(wěn)定劑、調(diào)味劑、著色劑，例如糖、纖維素衍生物(甲基纖維素或乙基纖維素、羧甲基纖維素鈉等)、聚乙烯吡咯烷酮、磷酸鈣、碳酸鈣、食用著色劑、食用酒精(food lace)、芳香劑、氧化鐵顏料等包衣。在膠囊劑情況中，將活性成分和助劑的混合物裝在膠囊中。
液體口服組合物，例如懸浮液、糖漿劑、酏劑，可通過用水、二醇、油、醇、著色劑和調(diào)味劑進(jìn)行制備。
為直腸施用，將組合物配制成栓劑或灌腸劑。栓劑除活性成分外可含稱為前栓動物脂的載體。載體可以是植物油，例如氫化植物油、C12-C18脂肪酸甘油三酯(優(yōu)選商品名為Witepsol的載體)。將活性成分與熔化的前栓動物脂均勻混合并模制成栓劑。
為胃腸外施用，將組合物配制成注射液。為制備注射液，將活性成分溶解在蒸餾水和/或不同的有機(jī)溶劑中，例如乙二醇醚，在特定條件下，存在增溶劑例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單月桂酸酯、單油酸酯或單硬脂酸酯(Tween 20，Tween 60，Tween 80)。注射液還可包括不同的助劑，例如保存劑例如乙二胺四乙酸鹽，以及pH調(diào)節(jié)劑和緩沖液和特定條件下的局部麻醉藥如利多卡因。在裝入安瓿前將含本發(fā)明活性成分的注射液過濾，在裝入后將其滅菌。
如果活性成分吸濕，那么通過凍干可使其穩(wěn)定。
表征方法通過與質(zhì)量選擇性檢測器相連的高效液相色譜使用具有Microplate Sampler的HP1100二元梯度色譜系統(tǒng)(Agilent，Waldbronn)，由Chemstation軟件控制來對本發(fā)明的化合物進(jìn)行表征。使用HP二極管陣列檢測器在225和240nm獲得UV光譜。所有的試驗(yàn)使用裝備有電噴射離子化源的HP MSD(Agilent，Waldbronn)單一四極光譜儀來確定結(jié)構(gòu)。
合成產(chǎn)物溶解于1ml DMSO中(Aldrich，德國)。使用DMSO將100μl的各種溶液稀釋至1000μl體積。在由Supelco(Bellefonte，Pennsylvania)獲得的Discovery RP C-16 Amide，5cm×4.6mm×5μm柱上使用1ml/分鐘的流速進(jìn)行分析色譜試驗(yàn)以進(jìn)行鑒別。獲得的化合物由它們K′值(純度，容量因子)表征。K′因子由下式進(jìn)行計(jì)算k′＝(tR-t0)/t0其中k′＝容量因子，tR＝保留時間和t0＝洗脫液保留時間洗脫液A是包含0.1％水的三氟乙酸(TFA)(Sigma，德國)，洗脫液B是包含0.1％TFA和5％洗脫液A的95％乙腈(Merck，德國)。使用梯度洗脫，由100％的洗脫液A開始在5分鐘內(nèi)變化到100％的洗脫液B。
下列實(shí)施例舉例說明本發(fā)明，對本發(fā)明無任何限制。
實(shí)施例12-(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基)-乙酰胺1a)1-苯甲基-4-苯亞甲基-哌啶在氬氣下，在0℃向攪拌的在1350ml二甲基甲酰胺中的133.2g(704mmol)的N-苯甲基-4-哌啶酮(Aldrich)和161g(705mmol)苯甲基-磷酸二乙酯(Aldrich)的溶液中加入40.5g(60％，37.5mmol)的氫化鈉。將反應(yīng)混合物在20℃攪拌2h，逐滴加入100ml乙醇，傾入1500ml水并使用乙醚萃取。有機(jī)層經(jīng)過硫酸鈉干燥并濃縮。粗制品在下一步中使用。Mp.油。
1b)4-苯亞甲基-哌啶鹽酸鹽在0℃下向攪拌的在21二氯乙烷中的先前得到的粗制1-苯甲基-4-苯亞甲基-哌啶(～704mmol)的溶液中逐滴加入80ml(741mmol)的1-氯乙基-氯甲酸酯。將反應(yīng)混合物在0℃攪拌1h和回流1h，然后濃縮并將殘留物溶解于11甲醇中，回流1h。濃縮反應(yīng)混合物并使用丙酮對殘留物進(jìn)行結(jié)晶得到103.25g(70.1％)的標(biāo)題化合物。Mp.186℃(丙酮)。
1c)(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-氧代-乙酸乙酯在10℃以下向攪拌的在11氯仿中的103.25g(0.492mol)的4-苯亞甲基-哌啶鹽酸鹽和144.55ml(1.039mol)的三乙胺溶液中逐滴加入55.75ml(0.499mol)的乙基草酰氯，將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?h。然后將200ml水和200ml 8％的碳酸氫鈉溶液加入混合物中，分離有機(jī)層，經(jīng)過硫酸鈉干燥并濃縮。粗品在下步中使用。Mp.油。
1d)(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-氧代-乙酸向攪拌的在200ml乙醇中的先前得到的粗制(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-氧代-乙酸乙酯(～0.492mol)溶液中加入在300ml水和500ml乙醇中的27.6g(0.69mol)氫氧化鈉的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?h后冷卻并使用鹽酸酸化。收集固體沉淀，用水洗滌得到107.32g(88.9％)的標(biāo)題化合物。Mp.125℃(乙醇-水)。
1e)2-(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基)-乙酰胺49mg(0.2mmol)(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-氧代-乙酸，33μl(0.24mmol)三乙胺，30mg(0.2mmol)6-氨基-3H-苯并噁唑-2-酮[J.Chem.Soc，321.(1938)]79.6mg(0.21mmol)HBTU[六氟磷酸O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲(Advanced Chem.Tech.)]和1ml二甲基甲酰胺的混合物在室溫下攪拌24h。通過柱色譜法使用Kieselgel60(Merck)作為吸附劑和甲苯∶甲醇＝4∶1為洗脫劑對反應(yīng)混合物進(jìn)行純化。產(chǎn)物的性質(zhì)和量通過如上所述的HPLC-MS法測定。K′＝9.66。我們使用上述方法制備以下式(I)的化合物
表5
實(shí)施例2藥物組合物的制備；
a)片劑將0.01-50％的式(I)的活性成分，15-50％的乳糖，15-50％的馬鈴薯淀粉，5-15％的聚乙烯吡咯烷酮，1-5％的滑石粉，0.01-3％的硬脂酸鎂，1-3％的膠體二氧化硅和2-7％的過支鏈淀粉混合，然后通過濕法制粒并壓制成片劑。
b)糖衣片，薄膜包衣片將按照上述方法制備的片劑用由腸或胃溶薄膜組成的，或由糖或滑石粉組成的層包衣。糖衣片用蜂蠟和carnuba臘的混合物拋光。
c)膠囊將0.01-50％的式(I)活性成分，1-5％的十二烷基硫酸鈉，15-50％的淀粉，15-50％的乳糖，1-3％的膠體二氧化硅和0.01-3％的硬脂酸鎂充分混合，將混合物過篩并填充至硬明膠膠囊中。
d)混懸液成分0.01-15％的式(I)活性成分，0.1-2％的氫氧化鈉，0.1-3％的檸檬酸，0.05-0.2％的尼泊金(4-羥基苯甲酸甲酯鈉)，0.005-0.02％的對羥基苯甲酸丙酯，0.01-0.5％的卡波普(聚丙烯酸)，0.1-5％的96％乙醇，0.1-1％的矯味劑，20-70％的山梨醇(70％水溶液)和30-50％的蒸餾水。
在劇烈攪拌下，按小份將卡波普加至在20ml蒸餾水中的尼泊金和枸櫞酸溶液中，并將溶液放置10-12h。然后在攪拌下加入在1ml蒸餾水中的氫氧化鈉，山梨醇水溶液并最終加入乙醇覆盆子香精。往載體中按小份加入活性成分并使用浸漬勻漿機(jī)懸浮。最后用蒸餾水將該懸浮劑加至所需最終體積，且將該懸浮糖漿過膠體研磨設(shè)備。
e)栓劑對每種栓劑，將0.01-15％的式(I)活性成分和1-20％的乳糖充分混合，然后將50-95％的栓劑前動物脂肪(例如Witepsol 4)熔化并冷卻至35℃，用勻化器將活性成分和乳糖的混合物在其中混合。將所得混合物冷卻塑模。
f)凍干粉安瓿組合物
以注射用雙蒸水制成5％的甘露醇或乳糖溶液，將該溶液過濾以獲得滅菌溶液。0.01-5％式(I)活性成分的水溶液也以注射用雙蒸水制成，并將此溶液過濾以獲得滅菌溶液。在無菌條件下將這兩種溶液混合，在安瓿中裝入1ml，將安瓿內(nèi)容物凍干，且將安瓿在氮?dú)庀旅芊?。在施用前，將安瓿?nèi)容物溶解在滅菌水或0.9％(生理的)滅菌氯化鈉水溶液中。
權(quán)利要求
1.式(I)新的4-苯亞甲基-哌啶衍生物 -其中含義為X和Y獨(dú)立地為氫或鹵素原子，羥基，氰基，硝基，氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的C1-C4烷氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的芳氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的芳烷基氨基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的C1-C4烷基磺酰胺基，任選由一個鹵素原子或多個鹵素原子取代的C1-C4烷?；０坊?，芳基磺酰胺基，C1-C4烷基磺酰氧基，羧基，三氟甲基，三氟甲氧基，C1-C4烷基-SO2-NH-CH2-，NH2-(CH2)1-4-SO2-NH-，NH2-(CH2)1-4-(CO)-NH-，氨磺酰基[NH2-SO2-]，甲?；鵞-CHO]，氨基-甲基[-CH2-NH2]，羥甲基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧甲基，鹵代甲基，四唑基，或C1-C4烷氧基，C1-C4烷氧羰基，C1-C6烷酰氧基，苯基或C1-C4烷氧基，任選由氨基取代，或在特定的情況下，相鄰的X和Y基團(tuán)與一個或多個相同或不同的另外的雜原子和-CH＝和/或-CH2-基形成任選取代的4-7元的同環(huán)-或雜環(huán)，優(yōu)選嗎啉，吡咯，吡咯烷，氧代-或硫代-吡咯烷，吡唑，吡唑烷，咪唑，咪唑烷，氧代-或硫代-咪唑或咪唑烷，1，4-噁嗪，噁唑，噁唑烷，氧代-或硫代-噁唑烷，氧代-或硫代-噻唑烷，或3-氧代-1，4-噁嗪環(huán)，Z是氫或鹵素原子，硝基，氨基，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，氰基，三氟甲基，三氟甲氧基-及其旋光對映體，外消旋化合物及鹽。
2.屬于權(quán)利要求1的范圍的下組的4-苯亞甲基-哌啶衍生物的化合物2-(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基)乙酰胺2-(4-苯亞甲基-哌啶-1-基)-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噻唑-6-基)乙酰胺2-[4-(4-氯-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噁唑-6-基)乙酰胺2-[4-(4-氯-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并咪唑-5-基)乙酰胺2-[4-(4-氯-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噻唑-6-基)乙酰胺2-[4-(4-甲基-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并咪唑-5-基)乙酰胺2-[4-(4-甲基-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噻唑-6-基)乙酰胺2-[4-(4-甲氧基-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并咪唑-5-基)乙酰胺2-[4-(4-甲氧基-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噻唑-5-基)乙酰胺N-(4-甲磺酰氨基-苯基)-2-[4-(4-甲氧基-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-乙酰胺2-[4-(4-氟-苯亞甲基)-哌啶-1-基]-2-氧代-N-(2-氧代-2，3-二氫-苯并噻唑-6-基)乙酰胺及其旋光對映體，外消旋化合物及鹽。
3.含有有效量的式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物-其中X，Y，Z含義如權(quán)利要求1-或其鹽作為活性成分和實(shí)踐中通常使用的輔助材料，例如載體，賦形劑，稀釋劑，穩(wěn)定劑，潤濕劑或乳化劑，pH-和滲透壓-調(diào)節(jié)劑，調(diào)味劑或芳香劑，以及增進(jìn)制劑或供應(yīng)制劑的添加劑的藥物組合物。
4.制備式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物的方法，-其中X，Y，Z的含義如權(quán)利要求1，其特征在于使式(II)的仲胺 -其中Z具有與式(I)同樣的含義-在堿存在下在適宜的溶劑中與乙基草酰氯反應(yīng)將得到式(III)的酯化合物 -其中Z具有與式(I)同樣的含義-使用氫氧化堿進(jìn)行皂化并將得到的式(IV)的草酰胺酸 -其中Z的含義如上文式(I)所述-或其反應(yīng)性衍生物與式(V)的苯胺反應(yīng) -其中X和Y的含義如前文式(I)所給出-在二氯甲烷中，然后任選將所得式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物-其中X，Y，Z的含義如權(quán)利要求1所列出-通過已知的方法通過引入新的取代基和/或修飾或除去存在的基團(tuán)，和/或通過成鹽和/或?qū)⒒衔飶柠}中游離而轉(zhuǎn)變成另外的式(I)化合物。
5.如權(quán)利要求4的方法，其特征在于在堿存在的情況下使式(IV)的羧酸的活性衍生物-其中Z含義如權(quán)利要求1所列出-和式(V)的苯胺-其中X和Y含義如權(quán)利要求1所列出-在堿的存在下反應(yīng)。
6.如權(quán)利要求4的方法，其特征在于使式(IV)的羧酸的活性衍生物-其中Z含義如權(quán)利要求1所列出-和式(V)的苯胺-其中X和Y含義如權(quán)利要求1所列出-在二甲基甲酰胺中在三乙胺和六氟磷酸O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲(HBTU)存在的情況下反應(yīng)。
7.制備具有NR2B選擇性NMDA受體拮抗劑作用的藥物組合物的方法，其特征在于將式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物-其中X，Y，Z的含義如權(quán)利要求1所列出-或其旋光對映體或外消旋化合物或藥學(xué)上可接受的鹽作為活性成分和實(shí)踐中通常使用的輔助材料，例如載體，賦形劑，稀釋劑，穩(wěn)定劑，潤濕劑或乳化劑，pH-和滲透壓-調(diào)節(jié)劑，調(diào)味劑，或芳香劑，以及增進(jìn)制劑或供應(yīng)制劑的添加劑混合。
8.治療和緩解哺乳動物-包括人-的以下疾病-大腦或脊髓的創(chuàng)傷性損傷，與人免疫缺陷病毒(HIV)相關(guān)的神經(jīng)元損傷，肌萎縮性側(cè)索硬化，阿片類物質(zhì)治療疼痛的耐受和/或依賴，濫用藥物例如乙醇、阿片樣物質(zhì)或可卡因的戒斷綜合征，局部缺血性CNS疾病，慢性神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓病，疼痛和慢性疼痛狀態(tài)，例如神經(jīng)性疼痛或癌癥相關(guān)疼痛，癲癇，焦慮，抑郁，偏頭疼，精神病，肌肉痙攣，不同原因的癡呆，低血糖，視網(wǎng)膜的變性疾病，青光眼，哮喘，耳鳴，氨基糖苷抗生素誘發(fā)的聽力損失的癥狀的方法，其特征在于如此給所治療的哺乳動物施用有效量/數(shù)量的式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物-其中X，Y，Z的含義如權(quán)利要求1所列出-或其旋光對映體或外消旋化合物或藥學(xué)上可接受的鹽或?qū)⑵渑c在藥學(xué)上通常應(yīng)用的載體、填充劑等組合使用。
9.式(I)的4-苯亞甲基-哌啶衍生物-其中X，Y，Z的含義如權(quán)利要求1所列出-或其旋光對映體或外消旋化合物或藥學(xué)上可接受的鹽制備用于治療和緩解哺乳動物，包括人的以下疾病癥狀的藥物的用途，疾病包括大腦或脊髓的創(chuàng)傷性損傷，與人免疫缺陷病毒(HIV)相關(guān)的神經(jīng)元損傷，肌萎縮性側(cè)索硬化，阿片類物質(zhì)治療疼痛的耐受和/或依賴，濫用藥物例如乙醇、阿片樣物質(zhì)或可卡因的戒斷綜合征，局部缺血性CNS疾病，慢性神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默病、帕金森病、亨廷頓病，疼痛和慢性疼痛狀態(tài)，例如神經(jīng)性疼痛或癌癥相關(guān)疼痛，癲癇，焦慮，抑郁，偏頭疼，精神病，肌肉痙攣，不同原因的癡呆，低血糖，視網(wǎng)膜的變性疾病，青光眼，哮喘，耳鳴，氨基糖苷抗生素誘發(fā)的聽力損失。
全文摘要
本發(fā)明涉及用作NMDA拮抗劑，特別是含有NR2B亞單位的受體拮抗劑和鎮(zhèn)痛劑的式(I)的新4－苯亞甲基－哌啶衍生物。
文檔編號A61P25/28GK1989128SQ200580024374
公開日2007年6月27日 申請日期2005年7月21日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月29日
發(fā)明者I·博爾扎, C·霍瓦特, S·福爾考什, I·杰爾詹, J·納吉, S·科洛科, K·高爾戈齊, K·沙吉 申請人:匈牙利吉瑞大藥廠