專利名稱：用于治療糖尿病的雜芳基氨基吡唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及雜芳基氨基吡唑化合物、藥物組合物和治療糖尿病及其相關(guān)疾病的方法。
背景技術(shù)：
糖尿病的特征在于葡萄糖代謝能力削弱，尤其表現(xiàn)為糖尿病患者的血糖水平升高。依據(jù)基本缺陷，糖尿病被分成兩大類。當(dāng)患者的胰腺中缺乏產(chǎn)生胰島素的β-細(xì)胞時，就會產(chǎn)生I型糖尿病，即胰島素依賴型糖尿病(IDDM)。當(dāng)患者的β細(xì)胞功能受損以及胰島素作用變化時，就會產(chǎn)生II型糖尿病，即非胰島素依賴型糖尿病(NIDDM)。
目前治療I型糖尿病患者的方法是注射胰島素，而大多數(shù)II型糖尿病患者都是利用能夠刺激β細(xì)胞功能或能夠增強患者對胰島素的組織敏感性的藥物進(jìn)行治療?，F(xiàn)有用于治療II型糖尿病的藥物包括α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、胰島素促分泌素和二甲雙胍。
經(jīng)過一段時間后，幾乎有一半的II型糖尿病患者都會對這些藥物失去響應(yīng)。在飲食調(diào)節(jié)、鍛煉及口服藥物不足以控制血糖后，才進(jìn)行胰島素治療。胰島素治療的缺點是需要進(jìn)行藥物注射，并且可能導(dǎo)致低血糖和體重增加。
由于目前治療方法存在上述問題，所以需要新的II型糖尿病療法。尤其需要能保持正常(葡萄糖依賴的)胰島素分泌的新療法。這類新藥物應(yīng)該具有下列特征依賴于葡萄糖促進(jìn)胰島素分泌(即化合物只在葡萄糖水平升高時才刺激胰島素分泌)；首次和二次失敗率較低；保存胰島細(xì)胞功能。
INS-1細(xì)胞是胰島β細(xì)胞胰島素分泌的模型。在β-巰基乙醇存在下維持時，這些細(xì)胞保留原位胰島β細(xì)胞的許多特征。細(xì)胞可響應(yīng)生理上相關(guān)的葡萄糖濃度分泌胰島素，EC50為6mM葡萄糖(Hohmeier等，Diabetes 49424，2002)。這些細(xì)胞還響應(yīng)多種已知的促分泌素分泌胰島素，所述促分泌素包括能夠提高胞內(nèi)環(huán)AMP、除葡萄糖之外的營養(yǎng)成分以及氯化鉀的藥物。INS-1細(xì)胞的這種特征進(jìn)一步證明，這些細(xì)胞保留了許多參與胰島素分泌響應(yīng)的信號傳導(dǎo)途徑，由此適用于鑒定能影響這些途徑的化合物。因此，INS-1細(xì)胞可作為鑒定工具，用于鑒定在葡萄糖存在下可刺激胰島素分泌的化合物，而這樣的化合物可用于治療糖尿病及其相關(guān)疾病。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供下式(I)的雜芳基氨基吡唑衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中 為選自以下的取代的雜芳族環(huán)基
R為H或(C1-C6)烷基；R1為H，任選被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任選被鹵素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)環(huán)烷基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和鹵素，(C1-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和氰基；R2為H，鹵素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、鹵素和(C1-C6)烷基，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，嘧啶基，噻吩基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，苯并噻吩基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，或呋喃基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素；R3為(C1-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，
(C2-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多四個選自以下的取代基取代任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4為任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)鹵代烷基，(C1-C3)鹵代烷氧基，或鹵素；n＝0、1、2或3；X為CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5為H、(C1-C6)烷基、任選被鹵素取代的苯基、或任選在苯環(huán)上被鹵素取代的芐基；R6為H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成哌啶、嗎啉、硫代嗎啉或哌嗪環(huán)，所述哌嗪任選在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7為H，(C1-C6)烷基，芐基，任選在芳環(huán)上被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；
前提條件是式(I)化合物不是下列化合物 上文中的術(shù)語在本文中具有下列含義術(shù)語“鹵素”是指F、Br、Cl和I。
術(shù)語“(C1-C3)烷基”和“(C1-C6)烷基”分別是指具有約1至約3個碳原子或者約1至約6個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基。這類基團包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、丁基、異丁基、叔丁基、戊基、己基等。
術(shù)語“(C3-C6)烯基”指含有雙鍵以及約3至約6個碳原子的直鏈或支鏈不飽和烴基。雙鍵可位于鏈中任何兩個有效碳原子之間。這類基團包括但不限于烯丙基、異丙烯基、2-丁烯基、2-乙基-2-丁烯基、1-己烯基等。
術(shù)語“(C3-C6)炔基”指含有三鍵以及約3至約6個碳原子的直鏈或支鏈不飽和烴基。三鍵可位于鏈中任何兩個有效碳原子之間。這類基團包括但不限于炔丙基、2-丁炔基、1-甲基-2-丁炔基、3-己炔基等。
術(shù)語“(C3-C6)環(huán)烷基”括例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基等。
術(shù)語“(C1-C4)烷氧基”“(C1-C6)烷氧基”分別是指分別具有約1至約4個碳原子和約1至約6個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，所述基團連接至氧原子。烷氧基取代基通過該氧原子與分子的其余部分相連。這類基團包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。
術(shù)語“(C1-C3)鹵代烷氧基”指在C上被鹵素原子取代的(C1-C3)烷氧基。這類基團包括但不限于三氟甲氧基、二氟甲氧基、2，2-二氟乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、2-氯乙氧基、3-氯丙氧基、1-氟-2，2-二氯乙氧基等。
術(shù)語“(C1-C3)鹵代烷基”和“(C2-C3)鹵代烷基”分別是指在C上被鹵素原子取代的(C1-C3)烷基和(C2-C3)烷基。這類基團包括但不限于三氟甲基、二氟乙基、1-氟-2，2-二氯乙基、3-氯丙基、4-溴己基等。
術(shù)語“[三(C1-C4)烷基甲硅烷基]”是指帶有三個(C1-C4)烷基取代基的硅基團，獨立地選取各個取代基。上述基團通過硅原子與分子的其余部分相連。這類基團包括但不限于三甲基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基等。
術(shù)語“(C1-C6)烷硫基”是指具有約1至約6個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，所述基團連接至硫原子。上述烷硫基取代基通過硫原子與分子的其余部分相連。這類基團包括但不限于甲硫基、乙硫基、正丙硫基、異丙硫基等。
術(shù)語“任選取代的”是指這樣修飾的部分可具有0個到至少所指出的最高數(shù)量的取代基。只要在化學(xué)上可能并其是化學(xué)穩(wěn)定的，各個取代基可置換所修飾部分中的任何氫原子。在任何部分含有兩個以上取代基時，獨立于任何其它取代基選取各個取代基，因此各取代基可以是相同或不同的。
在式(I)中，以下雜環(huán)基的連接點是標(biāo)有虛線(---)的鍵 各個基團上的X基固定在以上基團連接點的鄰位。以上基團中的任選的R4(最多n個)可以位于任何有效碳原子上。
新化合物的其它形式本發(fā)明化合物還包括它的(a)立體異構(gòu)體，(b)藥學(xué)上可接受的鹽，(c)互變異構(gòu)體，(d)被保護的酸和共軛酸和(e)前藥。
這些化合物的立體異構(gòu)體可包括但不限于對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、外消旋混合物及它們組合。這類立體異構(gòu)體可通過常規(guī)方法制備和分離，利用對映異構(gòu)體原料反應(yīng)或者分離本發(fā)明化合物的異構(gòu)體。異構(gòu)體可包括幾何異構(gòu)體。幾何異構(gòu)體的實例包括但不限于雙鍵的順式異構(gòu)體或反式異構(gòu)體。本發(fā)明化合物的其它異構(gòu)體也是包括在內(nèi)。異構(gòu)體可以采用上述抑制劑的純凈形式或者與其它異構(gòu)體的混合物形式。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括用于生成堿金屬鹽或者用于生成游離酸或游離堿的加成鹽的常用鹽。鹽的性質(zhì)并不重要，只要是藥學(xué)上可接受的。合適的藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可用無機酸或有機酸制備。這類無機酸的實例有鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。適宜的有機酸可選自脂族酸、環(huán)脂族酸、芳族酸、雜環(huán)酸、羧酸和磺酸類有機酸。有機酸和磺酸類有機酸的實例包括但不限于甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、葡糖醛酸、馬來酸、富馬酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、鄰氨基苯甲酸、甲磺酸、水楊酸、4-羥基苯甲酸、苯基乙酸、扁桃酸、恩波酸(撲姆酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、2-羥基乙磺酸、甲苯磺酸、磺胺酸、環(huán)己基氨基磺酸、硬脂酸、藻酸、N-羥基丁酸、水楊酸、半乳糖二酸和半乳糖醛酸及它們的組合。
本發(fā)明化合物的互變異構(gòu)體包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。由此，例如羰基包括其羥基互變異構(gòu)體。
被保護的酸包括但不限于酯、羥基氨基衍生物、酰胺和磺酰胺。
本發(fā)明包括前藥和前藥的鹽。為了提高母體化合物的性能，前藥的制備在本領(lǐng)域是公知的；這類性能包括溶解性、吸收性、生物穩(wěn)定性和釋放時間(參見如“Pharmaceutical Dosage Form and DrugDelivery Systems”(第6版)，Ansel等編輯，Williams & Wilkins，p.27-29，(1995)，通過引用結(jié)合到本文)。常用的前藥被設(shè)計成利用主要的藥物生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)，也被認(rèn)為屬于本發(fā)明范圍內(nèi)。主要的藥物生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)包括N-脫烷基化反應(yīng)、O-脫烷基化反應(yīng)、脂族羥基化反應(yīng)、芳族羥基化反應(yīng)、N-氧化反應(yīng)、S-氧化反應(yīng)、脫氨基反應(yīng)、水解反應(yīng)、葡糖醛酸化反應(yīng)、硫酸化反應(yīng)和乙酰化反應(yīng)(參見如Goodman and Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics(第9版)，Molinoff等編輯，McGraw-Hill，p11-13，(1996)，通過引用結(jié)合到本文)。
在Journal of Organic Chemistry各卷的第一期中有本領(lǐng)域普通有機化學(xué)工作者使用的縮寫詞綜合列表；這種列表通常是標(biāo)題為Standard List of Abbreyiations的表格。所述列表包含的縮寫詞及本領(lǐng)域普通有機化學(xué)工作者使用的所有縮寫詞通過引用結(jié)合到本文。
對于本發(fā)明目的而言，化學(xué)元素根據(jù)Periodic Table of theElements，CAS版，Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87鑒定。所述列表包含的縮寫詞及本領(lǐng)域普通有機化學(xué)工作者使用的所有縮寫詞通過引用結(jié)合到本文。
對于本發(fā)明目的而言，化學(xué)元素根據(jù)Periodic Table of theElements，CAS版，Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87鑒定。
通用制備方法通常，本發(fā)明所用化合物可利用市售或根據(jù)常規(guī)化學(xué)方法合成制備的原料，通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)、已知的類似方法和/或本文介紹的方法制備。下列制備方法用于幫助讀者合成本發(fā)明化合物。除非另有說明，否則在各反應(yīng)流程中，R1-R7、X、和 具有上文定義的相同含義。
反應(yīng)流程A說明了制備式(Ia)化合物[R為H的式(I)化合物]的一般方法。采用Ullmann型條件(例如含乙酸銅(II)的DMF，在封閉管中加熱16小時)，使式(III)氨基吡唑與式(IV)的2-氯-、2-溴-、2-碘-或2-三氟甲基磺酸酯基-雜芳基羧酸、羧酸酯或羧酰胺偶合?；蛘哌€可以采用Buchwald型條件(例如含碳酸銫、BINAP和鈀催化劑(例如Pd2(dba)3或Pd(OAc)2)的無水甲苯，在氬氣氛下加熱至110℃ 16小時)，式(III)與式(IV)的2-氯、2-溴、2-碘或2-三氟甲基磺酸酯基-雜芳基羧酸酯、羧酰胺或磺酰胺偶合。
反應(yīng)流程A 反應(yīng)流程B圖示說明式(Id)化合物[X為COOH的式(I)化合物]和式(Ie)化合物[X為CONR5R6的式(I)化合物]的制備方法。通常在溫和的堿水溶液中，將式(Ib)酯化合物[X為CO2R7的式(I)，按照反應(yīng)流程A制備]水解為式(Id)的酸化合物。然后，式(Id)可以與胺R5R6NH反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為式(Ie)的酰胺，任選使用偶合劑(例如HOBT、EDCI和三乙胺)的混合物?；蛘?，式(Ic)的腈化合物[X為CN的式(I)化合物]可以直接在堿水溶液中水解，得到式(If)的伯酰胺化合物[X為CONR5R6且R5和R6為H的式(I)化合物]。
反應(yīng)流程B 反應(yīng)流程C說明了制備R2為碘、氯或氟的式(I)化合物的通用方法。式(Ig)化合物[R2為H的式(I)化合物]可以用諸如N-碘代丁二酰亞胺(NIS)或N-氯代丁二酰亞胺(NCS)的試劑碘化或氯化，得到式(Ih)化合物[R2為I或Cl的式(I)化合物]。類似地，將式(Ig)化合物用氟化劑(例如Selectfluor)處理，得到式(Ii)化合物[R2為F的式(I)化合物]。
反應(yīng)流程C 反應(yīng)流程D概述了制備X＝SO2NH2的式(I)化合物的通用方法。
式(Ij)的N，N-二芐基磺酰胺化合物通過反應(yīng)流程A介紹的Buchwald型偶合反應(yīng)制備，并且可以用硫酸脫芐基化，得到式(Ik)化合物。
反應(yīng)流程D R為(C1-C6)烷基的式(Im)化合物如下制備在例如反應(yīng)流程E所示的標(biāo)準(zhǔn)條件下，N-烷基化相應(yīng)的式(Ia)化合物(R為H)。這些條件包括烷基化劑(例如碘甲烷)和堿(例如氫化鈉)，并且此反應(yīng)在惰性溶劑例如DMF中進(jìn)行。當(dāng)X為羧酸酯時，進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)水解(即NaOH、H2O)，得到R為烷基且X為CO2H的式(I)化合物。
反應(yīng)流程E (Ia)(I)，當(dāng)R＝H時R＝(C1-C6)烷基(Im)(I)，當(dāng)R為(C1-C6)烷基時當(dāng)X＝CO2烷基時，額外水解步驟得到R為(C1-C6)烷基且X＝CO2H的式(I)化合物中間體的合成中間體可以是市售的，或通過本領(lǐng)域已知的標(biāo)準(zhǔn)方法和/或以下方法之一的類似方法制備。
5-氨基吡唑式(III)的5-氨基吡唑原料可以是市售的，或者可按照下述反應(yīng)流程F、G或H制備。
在反應(yīng)流程F中，任選取代的乙腈與適當(dāng)取代的酯(VI)和堿進(jìn)行縮合反應(yīng)，得到氰基酮(VII)。必要時，R1為任選取代的苯基的式(VI)酯可以用相應(yīng)的式R1-Br溴代化合物制備，例如使其與BuLi和CO2反應(yīng)，生成式R1-COOH酸，它可被酯化為式(VI)。然后，使式(VII)化合物與式(II)的取代肼或式(V)的取代腙反應(yīng)，得到所需的氨基吡唑(III)。如果氰基酮(VII)是市售的，則可以省去第一步驟。
反應(yīng)流程F 在反應(yīng)流程G中，使式(VIII)的腈與乙腈反應(yīng)，形成烯氨基腈(IX)，然后與肼(II)或腙反應(yīng)，生成(IIIa)[R2＝H的式(III)化合物]。
反應(yīng)流程G 反應(yīng)流程H說明了通過溴化反應(yīng)和Suzuki偶合反應(yīng)引入除氫之外的R2基團，從而使式(IIIa)的氨基吡唑轉(zhuǎn)化為其它的式(III)氨基吡唑。
反應(yīng)流程H *合適的硼酸酯包括
R2B(OR′)2，其中R′為低級烷基，或兩個R′基團可構(gòu)成環(huán)，例如 以及三聚硼酸酯，例如 下文中間體B-I中介紹了氨基吡唑的制備實例。
肼和腙式(II)肼和式(V)腙原料均是市售的，或者在為苯基肼時(R3＝任選取代的苯基)可以按照反應(yīng)流程I制備，其中將取代的苯胺轉(zhuǎn)化為重氮鹽中間體，隨后用氯化錫(II)作還原劑將重氮鹽還原。
反應(yīng)流程I Ropt sub＝任選取代基(IIa)，[(II)，R3＝任選取代的苯基]在鈀催化劑和堿存在下，用苯基鹵或苯基三氟甲磺酸酯和腙(例如二苯甲酮腙)，按照反應(yīng)流程J制備N-苯基腙。
反應(yīng)流程J Ropt sub＝任選取代基W＝Cl，Br，I，或OTf在下文中間體A中介紹了芳基肼的制備實例。在中間體B步驟1和中間體C步驟2中介紹了芳基腙的制備實例。
鹵代吡啶和鹵代嘧啶羧酸和磺酰胺衍生物用于和5-氨基吡唑偶合的鹵素吡啶-和鹵素嘧啶羧酸衍生物是市售的，或者可通過本領(lǐng)域公知的簡單方法制備。吡啶或嘧啶上的其它取代基可以通過標(biāo)準(zhǔn)方法引入，例如反應(yīng)流程K中用于制備3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的方法。
反應(yīng)流程K 下文的中間體J介紹了這類制備方法的一個實例。
反應(yīng)流程L說明了2-鹵素吡啶磺酰胺中間體的制備方法。將2-氯-3-氨基吡啶與亞硝酸鈉/酸和磺酰氯反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為2-氯吡啶磺酰氯。然后，將此化合物與二芐基胺反應(yīng)，得到所需2-氯吡啶3-磺酰胺中間體。按照反應(yīng)流程A和D介紹的方法，以上化合物可以轉(zhuǎn)化為最終產(chǎn)物。
反應(yīng)流程L 本發(fā)明的具體實施例以下具體實施例用于說明本發(fā)明，但決不應(yīng)該解釋為對本發(fā)明范圍的任何限制。
縮寫詞當(dāng)下列縮寫詞在本發(fā)明公開文本中使用時，它們具有以下含義abs 無水Ac 乙?；鵄cOH乙酸amu 原子質(zhì)量單位aq 水溶液BINAP2，2′-雙(二苯基膦基)-1，1′-聯(lián)萘Bn 芐基Boc 叔丁氧基羰基BTMAICl2二氯碘酸芐基三甲基銨Bu 丁基CDCl3 氘氯仿CDI 羰基二咪唑Celite硅藻土過濾劑的品牌，Celite Corporation的注冊商標(biāo)CI-MS化學(xué)電離質(zhì)譜conc 濃的d二重峰DCM 二氯甲烷dd 雙重峰的雙重峰ddd 雙重峰的雙重峰的雙重峰DMAP 4-(N，N-二甲基)氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲亞砜DMSO-d6 二甲亞砜-d6DOWEX66 Dowex氫氧化物，弱堿性陰離子，大孔，25-50目
dppf 1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽EI電子轟擊電離EI-MS 電子轟擊-質(zhì)譜equiv 當(dāng)量ES-MS 電噴霧質(zhì)譜Et乙基Et2O乙醚Et3N三乙胺EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇g 克GC-MS 氣相色譜-質(zhì)譜h 小時Hex己烷1H NMR 質(zhì)子核磁共振HOAT 1-羥基-7-氮雜-苯并三唑HOBT 1-羥基苯并三唑HPLC 高效液相色譜HPLC ES-MS 高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜KOtBu 叔丁醇鉀L 升LC-MS 液相色譜/質(zhì)譜LDA二異丙基氨基鋰m 多重峰M 摩爾ml 毫升m/z質(zhì)荷比
Me 甲基MeCN乙腈MeOH甲醇mg 毫克MHz 兆赫min 分鐘mmol 毫摩爾mol 摩爾mp 熔點MS 質(zhì)譜N正常NaOAc 乙酸鈉NBS N-溴代丁二酰亞胺NCS N-氯代丁二酰亞胺NIS N-碘代丁二酰亞胺NMM 4-甲基嗎啉NMR 核磁共振Pd2(dba)3 三(二亞芐基丙酮)合二鈀(O)Pd(OAc)2 乙酸鈀Pd(PPh3)4 四(三苯基膦)合鈀(O)Pd/C 披鈀碳Pd(dppf)Cl2 二氯化[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)Ph 苯基ppm 百萬分之一Pr 丙基psi 每平方英寸磅數(shù)PTSA 對甲苯磺酸q四重峰
qt 五重峰RfTLC保留因子rt 室溫RT 保留時間(HPLC)s 單峰TBAF 四丁基氟化銨TBDMS 叔丁基二甲基甲硅烷基TBDMSCl叔丁基二甲基甲硅烷基氯TBS叔丁基二甲基甲硅烷基TFA三氟乙酸THF四氫呋喃TLC薄層色譜TMS四甲基甲硅烷v/v體積/單位體積vol體積w/w 重量/單位重量通用實驗方法用注射器或?qū)Ч苻D(zhuǎn)移對空氣和水份敏感的液體和溶液，并穿過橡膠隔片引入到反應(yīng)容器中。商品級試劑和溶劑沒有進(jìn)行純化，直接使用。術(shù)語“減壓濃縮”是指在大約15mm Hg柱下使用Buchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。所有溫度均報告為未修正的攝氏溫度(℃)。薄層色譜(TLC)在EM Science的襯有預(yù)涂覆玻璃的硅膠60A F-254 250μm板上進(jìn)行。在Biotage系統(tǒng)上用32-63微米60A預(yù)填充硅膠柱進(jìn)行柱色譜(快速色譜)處理。用制備型反相HPLC色譜純化，其中采用Gilson 215系統(tǒng)，通常用YMC Pro-C18 AS-342(150×20mm I.D.)柱。通常，所用的流動相為H2O(A)和MeCN(B)的混合物。水中可以包含或不包含0.1％TFA。典型的梯度為

電子轟擊質(zhì)譜(EI-MS)是通過Hewlett Packard 5989A質(zhì)譜儀獲得，質(zhì)譜儀配備有Hewlett Packard 5890 Gas Chromatograph，采用J&W DB-5柱(0.25μM涂層；30m×0.25mm)。離子源維持在250℃，在50-800amu，以2秒/次處掃描光譜。
利用下述方式獲得高壓液相色譜-電噴霧質(zhì)譜(LC-MS)(A)Hewlett-Packard 1100HPLC，配備有四元泵，設(shè)定在254nm的可變波長檢測器，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，電噴霧電離的Finnigan LCQ離子阱質(zhì)譜儀。根據(jù)離子源中離子數(shù)量，采用可變離子時間在120-1200amu掃描光譜。洗脫劑為A含0.02％TFA的2％乙腈/水，B含0.018％TFA的2％水/乙腈。梯度洗脫10％至95％B，3.5分鐘，流速為1.0ml/min，開始保持0.5分鐘，最后在95％B時保持0.5分鐘?？偟牟僮鲿r間為6.5分鐘。
或者(B)Gilson HPLC系統(tǒng)，配備兩個Gilson 306泵，Gilson 215自動取樣器，Gilson二極管陣列檢測器，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，及z-spray電噴霧電離的Micromass LCZ單四極質(zhì)譜儀。在1.5秒種內(nèi)，在120-800amu掃描光譜。由模擬通道獲得ELSD(EvaporativeLight Scattering Detector(蒸發(fā)光散射檢測器))數(shù)據(jù)。洗脫液為A含0.02％TFA的2％乙腈/水，B含0.018％TFA的2％水/乙腈。梯度洗脫10％至90％B，3.5分鐘，流速1.5ml/min，開始保持0.5分鐘，最后在90％B時保持0.5分鐘?？偟牟僮鲿r間為4.8分鐘。在柱轉(zhuǎn)換和再生中使用另外的切換閥。
在300/400MHz Varian Mercury-plus光譜儀上測定常規(guī)一維NMR光譜。將樣品溶解在Cambridge Isotope Labs的氘化溶劑中，轉(zhuǎn)移至5mm ID Wilmad NMR管。在293K獲得光譜?；瘜W(xué)位移記錄為ppm，并提及適當(dāng)?shù)娜軇┬盘?，例如對?H光譜2.49ppm(DMSO-d6)、1.93ppm(CD3CN)、3.30ppm(CD3OD)、5.32ppm(CD2Cl2)及7.26ppm(CDCl3)；對于13C光譜39.5ppm(DMSO-d6)、1.3ppm(CD3CN)、49.0ppm(CD3OD)、53.8ppm(CD2Cl2)及77.0ppm(CDCl3)。
中間體的合成肼中間體A(2，6-二甲基苯基)肼鹽酸鹽的制備 在攪拌下，向2，6-二甲基苯胺(5.0g，41.3mmol)和50％HCl水溶液(45ml)的冷溶液(0℃)中，緩慢加入NaNO2(2.85g，41.3mmol)和水(22.5ml)的冷溶液(0℃)。在加入期間嚴(yán)密監(jiān)測溫度，不要超過5℃。加入完畢后，將含重氮鹽中間體的鮮橙色溶液在相同溫度攪拌20分鐘。在0℃、約5分鐘內(nèi)，將SnCl2(11.0g，57.8mmol)和濃HCl(30ml)的混合物加入到反應(yīng)混合物中。將反應(yīng)混合物升至室溫，攪拌6小時。過濾收集沉淀，用少量冷水洗滌。真空干燥得到標(biāo)題化合物(白色無定形固體，7.00g，98％)。產(chǎn)物直接用于下一步驟，無需再純化。ES-MS m/z 137.0(MH+)；HPLC RT(min)1.09。
5-氨基吡唑中間體B3-叔丁基-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 步驟1二苯基甲酮(2-甲氧基-5-甲基苯基)腙的制備 在室溫、攪拌下，向3-碘-4-甲氧基甲苯(19.84g，80mmol，1當(dāng)量)、二苯甲酮腙(17.99g，88mmol，1.1當(dāng)量)、Xantphos(93mg，0.16mmol，0.2mol％)、Pd(OAc)2(36mg，0.16mmol，0.2mol％)和無水甲苯(96ml)的脫氣懸浮液中，一次性加入NaOtBu(11.09g，112mmol，1.4當(dāng)量)。將混合物加熱至85℃，攪拌12小時。冷卻反應(yīng)混合物，用200ml EtOAc和100ml水稀釋，然后分離各層。分離除去出作為水層的不溶Pd殘余物。有機相依次用2×100ml水、鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。減壓濃縮溶液，得到橙黃色固體。將固體在50ml MeOH中研磨，過濾收集，用50ml MeOH洗滌。抽吸干燥，得到標(biāo)題化合物(黃色固體，24.16g，收率95％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，3.56(s，3H)，6.53(dd，1H)，6.72(d，1H)，7.30(m，6H)，7.46(d，2H)，7.56(m，1H)，7.62(m，2H)，7.79(s，1H).ES-MS m/z 317.1(MH+)；HPLC RT(min)4.26.
步驟23-叔丁基-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 將步驟1的產(chǎn)物(20.0g；63.2mmol；1當(dāng)量)、4，4-二甲基-3-氧代戊腈(23.75g；189.6mmol；3eq)、對甲苯磺酸一水合物(18.03g；94.8mmol；1.5當(dāng)量)和無水EtOH(400ml)懸浮液加熱至回流，攪拌12小時。反應(yīng)物顏色變?yōu)辄S褐色，然后變?yōu)榫G色。RP-HPLC證實反應(yīng)完成50-60％。冷卻反應(yīng)物至室溫，然后加入100ml 1N HCl。將反應(yīng)物再加熱至回流，攪拌12小時。此后，RP-HPLC顯示反應(yīng)完成。冷卻混合物，減壓蒸發(fā)EtOH。殘余物用300ml EtOAc和100ml 1N HCl稀釋，分離各層。水層用EtOAc(4×75ml)萃取。合并的有機層和水層通過RP-HPLC分析；發(fā)現(xiàn)有機層包含大量產(chǎn)物、PTSA和雜質(zhì)，而水層僅包含所需產(chǎn)物和少許PTSA。由此，合并的EtOAc層用2N HCl(4×50ml)萃取。再次分析這些合并的酸層和EtOAc層；有機層中不再含有產(chǎn)物，而酸層中存在大量產(chǎn)物。所有合并的酸層再用100ml Et2O洗滌一次，然后加入固體NaHCO3，堿化至pH～8。這樣得到粉紅色固體，過濾收集，用2×50ml水洗滌。將固體在300ml Et2O中研磨，過濾收集，用100ml Et2O洗滌。真空干燥，得到標(biāo)題化合物(乳白色固體，13.3g，收率81％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.18(s，9H)，2.25(s，3H)，3.74(s，3H)，4.69(s，2H)，5.25(s，1H)，7.01(m，2H)，7.13(dd，1H).ES-MS m/z 260.2(MH+)；HPLC RT(min)1.47.
中間體C3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 步驟12-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯的制備 在0-5℃冷卻下，向2-羥基-3-甲氧基甲苯(17.0g，0.123mol)、三乙胺(19.72ml，0.141mol)和二氯甲烷(425ml)的混合物中，緩慢加入三氟甲磺酸酐(45.13g，0.160mol)。將混合物升至室溫，攪拌2小時。TLC(洗脫劑5％EtOAc/己烷)顯示原料消失。將反應(yīng)混合物真空濃縮至干。硅膠色譜純化(用己烷至10％EtOAc/己烷作洗脫劑)，得到34.37g(99.4％)透明油狀2-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.25(t，1H)，6.90(t，2H)，3.90(s，3H)，2.37(s，3H)；GC MS m/z270(M+)；RT(min)8.70.
步驟2二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙的制備
將2-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯(3.0g，0.011mol)、二苯甲酮腙(2.38g，0.012mol)、BINAP(0.691g，0.001mol)、碳酸銫(5.06g，0.016mol)和甲苯(50ml)的混合物用氮脫氣。加入乙酸鈀(II)(0.075g，0.33mol)，將混合物加熱至100℃ 16小時。通過TLC(洗脫劑5％EtOAc/己烷)判斷完全反應(yīng)。冷卻混合物至室溫，真空濃縮，硅膠色譜純化(采用己烷至10％EtOAc/己烷梯度)，得到3.40g(97％)二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.65(m，2H)，7.55(m，3H)，7.40(m，2H)，7.30(m，3H)，6.85(m，2H)，6.68(m，1H)，3.70(s，3H)，2.67(s，3H)；ES-MS m/z 317.1(MH+)；HPLC RT(min)4.23.
步驟33-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 將二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙(12.1g，0.038mol)、4，4-二甲基-3-氧代戊腈(8.62g，0.069mol)對甲苯磺酸一水合物(43.65g，0.229mol)和EtOH(217ml)的懸浮液加熱至回流16小時。通過TLC(洗脫劑5％EtOAc/己烷)判斷反應(yīng)完成。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，真空濃縮。將殘余物懸浮于水(150ml)，用乙醚(6×100ml)萃取。TLC(洗脫劑15％EtOAc/己烷)監(jiān)測過量4，4-二甲基-3-氧代戊腈的萃取。水層用固體NaHCO3緩慢堿化至pH～9.0。水層用二氯甲烷(2×200，1×150ml)萃取。有機層用水(150ml)、鹽水(100ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，然后真空濃縮至干。產(chǎn)物經(jīng)硅膠色譜純化(用10-45％EtOAc/己烷梯度作洗脫劑)，得到3.28g(33％)3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.32(t，1H)，6.92(t，2H)，5.50(s，1H)，3.82(s，3H)，2.02(s，3H)，1.29(s，9H)；ES-MS m/z 260(MH+)；HPLC RT(min)1.46.
中間體D3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺的制備 步驟15，5-二甲基-3-氧代己腈的制備 在500ml干燥圓底燒瓶中，將乙腈(6.31，153.6mmol)的THF(50ml)溶液用LiHMDS(156.3ml，1.0M THF溶液)在-78℃處理。在-78℃向此溶液中加入3，3-二甲基丁酸甲酯的THF(50ml)溶液。將溶液升至室溫，加入NaHCO3(100ml，飽和溶液)。分離各層，水層用乙醚(3×100ml)萃取。合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，減壓濃縮，得到所需產(chǎn)物，將其直接用于下一步驟，無需再純化。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ3.47(s，2H)，2.44(s，2H)，1.03(s，9H).
步驟23-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺的制備 在5，5-二甲基-3-氧代己腈(1.5g，10.77mmol)(步驟1)和(2-甲基苯基)肼鹽酸鹽(1.62，10.24mmol)的混合物中加入HCl水溶液(1N，150ml)，使反應(yīng)混合物回流16小時。將所得溶液冷卻至室溫，用NaOH水溶液(1N)堿化至pH 8。收集沉淀，在60℃烘箱真空干燥固體，得到1.6g(61％)所需產(chǎn)物1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.27-7.38(m，4H)，5.42(s，1H)，3.54(br，s，2H)，2.40(s，2H)，2.12(s，3H)，0.96(s，9H)；ES-MS m/z244.2(MH+)；HPLC RT(min)1.01.
中間體E3-環(huán)戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 步驟13-環(huán)戊基-3-氧代丙腈的制備 在70℃，向NaH(2.75g，687mmol)的THF(15ml)懸浮液中滴加環(huán)戊烷甲酸甲酯(8.00g，62.4mmol)和無水乙腈(3.91ml，74.9mmol)的THF(5ml)溶液。將混合物在70-72℃攪拌16小時，冷卻至室溫，用乙酸乙酯和HCl水溶液稀釋。有機層用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。除去溶劑，得到3-環(huán)戊基-3-氧代丙腈，將其直接使用無需再純化。
步驟23-環(huán)戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備
將(2-甲基苯基)肼鹽酸鹽(2.00g，14.6mmol)、上一步驟的粗制3-環(huán)戊基-3-氧代丙腈(2.32g，～14.6mmol)和甲苯(6ml)的溶液加熱至回流16小時。減壓除去溶劑，所得殘余物經(jīng)硅膠色譜純化(用己烷/EtOAc(3∶1，v/v)作為洗脫劑)。減壓濃縮，得到淺橙色固體3-環(huán)戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.19g，62％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.58-1.82(m，6H)，2.00-2.16(m，2H)，2.17-2.21(s，3H)，2.93-3.11(m，1H)，3.42-3.58(s，2H)，5.41-5.46(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)7.29-7.37(m，2H)；ES-MS m/z 241.9(MH+)；HPLC RT(min)1.69.
中間體F3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 將4，4-二甲基-3-氧代戊腈(36.7g，0.29mol)、(2-甲基苯基)肼鹽酸鹽(47.7g，0.29mol)和冰乙酸(7.03g，6.7ml，0.12mol)溶于無水乙醇(585ml)，回流加熱18小時。減壓除去溶劑后，加入EtOAc和水(各500ml)，然后小心加入碳酸氫鈉(42g，0.50mol)。加入己烷(500ml)后，分離出有機相，用鹽水(500ml)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥?；旌衔锿ㄟ^在燒結(jié)玻璃漏斗上的硅膠墊(500g)過濾。硅膠墊用己烷/EtOAc(1∶1，v/v)洗脫，減壓濃縮濾液。所得固體與己烷/EtOAc(9∶1，v/v)研磨，過濾，洗滌，真空干燥，得到無色固體產(chǎn)物(61.5g，93％)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ1.29(s，9H)，2.12(s，3H)，3.56(br，2H)，5.48(s，1H)，7.28(m，2H)，7.31(m，2H).
中間體G3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 步驟13-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈的制備 向4-氟苯甲腈(5.00g，41.3mmol)和乙腈(4.35ml，82.5mmol)的甲苯(100ml)溶液中加入叔丁醇鉀(13.9g，124mmol)。將混合物攪拌24小時，然后通過緩慢加入碳酸氫鈉水溶液猝滅。所得懸浮液用二氯甲烷(3×50ml)萃取。有機溶液用水洗滌，干燥(Na2SO4)，減壓濃縮。將殘余物用EtOH/Et2O研磨，得到3-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈(6.20g，93％，白色固體)1H NMR(300MHz，丙酮-d6)δ4.23(s，1H)，6.20(s，2H)，7.22(ddd，2H)，7.71(m，2H).
步驟23-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備
向3-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈(600mg，3.70mmol)的1N HCl(6ml)溶液中加入(2-甲基苯基)肼鹽酸鹽(558mg，3.51mmol)。將反應(yīng)物回流16小時，然后冷卻至室溫。緩慢加入1N氫氧化鈉水溶液，從而將所得混合物堿化至pH 12。過濾收集沉淀，然后用EtOH/Et2O重結(jié)晶，得到中間體(800mg，81％，淺橙色固體)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ2.20(s，3H)，2.14(br s，2H)，5.91(s，1H)，7.06(t，2H)，7.36(d，4H)，7.75(m，2H).
直接使用此產(chǎn)物無需再純化。
中間體H3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺的制備 步驟14-溴-3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 向3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.00g，7.71mmol)(中間體C)的乙酸(15ml)溶液中滴加溴(1170mg，0.38ml，7.33mmol)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物5分鐘，然后用水(100ml)稀釋，引起固體沉淀。過濾收集固體，然后溶于EtOAc。有機相用飽和NaHCO3和鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，減壓濃縮，得到含少量雜質(zhì)的產(chǎn)物(2683mg，102％)。ES-MS m/z 338.2(MH+)；HPLC RT(min)3.06。
步驟23-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺的制備 向4-溴-3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.6g，7.68mmol)的DMF(15ml)溶液中加入甲基環(huán)硼氧烷(6.66ml，46.08mmol)，二氯化[1，1′-雙(二苯基膦基)-丁烷]鈀(II)(481.97mg，0.80mmol)和碳酸鉀(3.3g，23.04mmol)。在155℃攪拌反應(yīng)混合物18小時。反應(yīng)物用水(100ml)稀釋，用EtOAc(3×25ml)萃取。合并的有機萃取液用鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)，減壓濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜純化(90％己烷/EtOAc)，得到產(chǎn)物(1.7g，77％，純白色固體)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.24(s，9H)，1.96(s，3H)，1.99(s，3H)，3.71(s，3H)，4.25(s，2H)，6.85(d，1H)，6.94(d，1H)，7.23-7.29(m，1H).ES-MS m/z 274.2(MH+)；HPLC RT(min.)1.78.
中間體I4-(4-氟苯基)-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備
步驟14-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 向3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(7.78g，41.7mmol)的乙酸(90ml)溶液中加入溴(6.64g，41.6mmol)的乙酸(10ml)溶液。攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。將水加入到反應(yīng)混合物中，混合物用冷KOH溶液(1N)堿化。收集白色固體4-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺，無需純化直接用于下一步驟。
步驟24-(4-氟苯基)-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制備 將4-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2g，7.52mmol)、4-氟苯基硼酸(2.10g，11.3mmol)和Pd(PPh3)4(434mg，0.38mmol)溶于DMF(20ml)，加入Na2CO3(飽和水溶液，18ml)。將混合物脫氣10分鐘，然后在110℃加熱2小時。將反應(yīng)混合物稀釋，濾出固體。減壓濃縮溶劑，殘余物經(jīng)硅膠快速色譜純化(10-40％乙酸乙酯/己烷)，得到1.2g(90％純度，51％)標(biāo)題化合物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.25-7.34(m，6H)，7.08(t，2H)，3.62(s，2H)，2.20(s，3H)，2.14(s，3H).
中間體J3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的制備 步驟13-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸的制備 向3，6-二氯吡啶-2-甲酸(7.10mmol 1.36g)的二烷(15ml)溶液中滴加甲醇鈉(21.31mmol 1.15g)的甲醇溶液。將混合物在85℃攪拌14小時，冷卻至室溫，用乙酸乙酯和HCl水溶液稀釋。有機層用水和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。除去溶劑，得到3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸，無需純化直接用于下一步驟。
步驟23-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的制備 在氬氣氛、室溫下，將亞硫酰二氯(5ml)加入到3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸(7.10mmol，1.30g)中，然后將混合物加熱回流2小時。在冷卻至室溫后，減壓除去過量亞硫酰二氯，得到黃色油狀酰氯。在0℃、攪拌下緩慢加入無水甲醇，將反應(yīng)溶液升至室溫，攪拌4小時。除去過量甲醇，將殘余物用飽和NaHCO3中和，用EtOAc萃取。有機層經(jīng)MgSO4干燥后蒸發(fā)，得到產(chǎn)物白色固體，將其直接使用無需再純化。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.84(s，3H)，3.86(s，3H)，7.05(d，1H)，7.92(d，1H).
本發(fā)明的實施例實施例12-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸的制備 將2-氯-6-甲基煙酸(122mg，0.71mmol)、碳酸鉀(108mg，0.78mmol)、3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(中間體F，163mg，0.71mmol)、乙酸銅(II)(2.6mg，0.014mmol)和DMF(2ml)的混合物在封閉管中加熱(150℃)16小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(用乙酸乙酯作洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)。得到182.2mg(70％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.14(d，1H)，7.14-7.51(m，4H)，7.01(s，1H)，6.80(d，1H)，2.53(s，3H)，2.10(s，3H)，1.40(s，9H)；ES-MS m/z 365.3(MH+)；HPLC RT(min)3.23.
利用以上實施例1的條件并替代使用適當(dāng)?shù)脑?，類似地制備了實施?1-75和147-150，見下表1。
實施例22-{[3-環(huán)戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸的制備 將2-氯煙酸(113mg，0.72mmol)、碳酸鉀(199mg，1.44mmol)、3-環(huán)戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(174mg，0.72mmol)(中間體E)、乙酸銅(II)(6.5mg，0.04mmol)和DMF(3ml)的混合物在封閉管中加熱(150℃)16小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到59.7mg(23％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.69(s，1H)，8.36(dd，1H)，8.16(dd，1H)，7.52(d，2H)，7.32-7.41(m，2H)，6.93(dd，1H)，6.82(s，1H)，3.11-3.22(m，1H)，2.19-2.21(m，2H)，1.94(s，3H)，1.65-1.89(m，6H)；ES-MS m/z 363.2(MH+)，HPLC RT(min)3.57.
實施例33-{[1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}異煙酸的制備 將3-碘異煙酸(180mg，0.72mmol)、碳酸鉀(199mg，1.44mmol)、1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-胺(202mg，0.72mmol，用市售2-苯基乙腈作為腈來源，按照中間體F的相同方法合成)、乙酸銅(II)(6.5mg，0.04mmol)和DMF(1ml)的混合物在封閉管中加熱(150℃)16小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到29.1mg(10％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD3CN)δ9.39(br s，1H)，7.93(s，1H)，7.86-7.90(m，2H)，7.05-7.45(m，8H)，2.38(s，3H)，2.15(s，3H)；ES-MS m/z 403.1(MH+)，HPLC RT(min)2.40.
實施例43-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制備 將3-溴吡啶-2-甲酸(71mg，0.35mmol)、碳酸鉀(53mg，0.39mmol)、3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(80mg，0.35mmol)(中間體F)、乙酸銅(II)(1.3mg，0.007mmol)和DMF(1ml)的混合物在封閉管中加熱(150℃)16小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾。濃縮混合物至干，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到2.8mg(2.3％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.11(dd，2H)，7.79(dd，1H)，7.32-7.45(m，4H)，6.45(s，1H)，2.11(s，3H)，1.40(s，9H)；ES-MS m/z 351.0(MH+)，HPLC RT(min)2.46.
實施例55-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酸的制備 將5-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酸(89mg，0.44mmol)、碳酸鉀(66mg，0.48mmol)、1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(123mg，0.44mmol，按照中間體G的類似方法合成)、乙酸銅(II)(1.6mg，0.009mmol)和DMF(1ml)的混合物在封閉管中加熱(150℃)16小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到24.2mg(12.3％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.95(s，1H)，8.90(s，1H)，7.85(dd，2H)，7.10-7.28(m，5H)，7.62(s，1H)，2.58(s，3H)，2.38(s，3H)，2.14(s，3H)；ES-MS m/z 406.3(MH+-CO2)，HPLC RT(min)4.07.
實施例62-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]煙酰胺的制備 步驟12-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]煙酸的制備 向3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(600mg，3.46mmol)和2-氯煙酸(546mg，3.46mmol)的DMF(6ml)溶液中加入碳酸鉀(543mg，3.93mmol)和乙酸銅(II)(18mg)。將混合物在150℃攪拌18小時，然后冷卻至室溫，用乙酸乙酯(2x)和水稀釋。用1N HCl水溶液將溶液調(diào)節(jié)至pH 2-3?；旌衔镉肊tOAc(3×5ml)萃取，然后合并的有機萃取液用鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，減壓濃縮。殘余物經(jīng)HPLC純化(20-90％乙腈/水)，得到產(chǎn)物(126mg，18％，灰白色固體)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.19(s，3H)，6.62(s，1H)，6.77(m，1H)，7.34(m，1H)，7.45(m，2H)，7.53(m，2H)，8.16(d，1H)，8.22(d，1H)，12.32(s，1H)；ES-MS m/z295.1(MH+)；HPLC RT(min)2.17.
步驟22-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]煙酰胺的制備 向2-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]煙酸(40mg，0.14mmol)、EDCI(52mg，0.27mmol)、HOAT(37mg，0.27mmol)、三乙胺(0.06ml，0.41mmol)和二氯甲烷(4ml)的溶液中，加入氨(7N)的甲醇(0.2ml)溶液。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物16小時。有機層用水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，隨后減壓濃縮。產(chǎn)物經(jīng)硅膠制備板純化(1000微米，EtOAc/己烷(2∶1，v/v))，得到產(chǎn)物(白色固體，22mg，55％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.2(s，3H)，6.63(s，1H)，6.89(m，1H)，7.38(m，1H)，7.50(m，4H)，7.71(s，1H)，8.15(d，1H)，8.24(s，1H)，8.33(d，1H)，11.56(s，1H)；ES-MS m/z 294.1(MH+)；HPLC RT(min)2.02.
實施例72-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酰胺的制備 將2-氯煙酰胺(59mg，0.37mmol)、碳酸鉀(57mg，0.41mmol)、3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(100mg，0.37mmol)(中間體G)、乙酸銅(II)(1.4mg，0.007mmol)和DMF(1ml)的混合物在封閉管中加熱(150℃)16小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到20mg(14％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.88(s，1H)，8.48(dd，1H)，7.89(dd，2H)，7.74(dd，1H)，7.35-7.50(m，4H)，7.28(s，1H)，7.12(t，2H)，6.82(dd，1H)，5.85(br，s，2H)，2.16(s，3H)；ES-MS m/z388.2(MH+)，HPLC RT(min)3.61.
使用以上實施例7的條件并替代使用適當(dāng)原料，類似地制備了實施例76-94，見下表1。
實施例82-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸的制備 步驟12-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸乙酯的制備 向干燥的15ml試管中加入3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺(200mg，0.82mmol)(中間體D)、2-氯煙酸乙酯(185mg，0.82mmol)、Pd2(dba)3(37.6mg，0.041mmol)、BINAP(51.2mg，0.082mmol)和Cs2CO3(535.6mg，1.64mmol)。將燒瓶脫氣后加入甲苯(2ml)，加熱混合物至110℃ 20小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到275mg(85％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.04(s，1H)，8.44(dd，1H)，8.21(dd，1H)，7.34-7.48(m，4H)，6.82(dd，1H)，6.75(s，1H)，4.19(q，2H)，2.57(s，2H)，2.12(s，3H)，1.28(t，3H)，1.02(s，9H)；ES-MS m/z 393.3(MH+)；HPLC RT(min)4.33.
步驟22-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸的制備 向2-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸乙酯(266mg，0.68mmol)(步驟1)在混合物乙醇(1ml)和THF(1ml)中的溶液加入氫氧化鋰一水合物(284mg，6.8mmol)的水(2ml)溶液，將混合物加熱至40℃ 1小時。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，加入0.5N鹽酸溶液將溶液pH調(diào)節(jié)至5，濃縮至干。將粗制產(chǎn)物重新溶于甲醇，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到240mg(97％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.39(s，1H)，8.43(dd，1H)，8.14(dd，1H)，7.25-7.42(m，4H)，6.81-6.86(m，2H)，2.57(s，2H)，2.05(s，3H)，1.00(s，9H)；ES-MS m/z 365.3(MH+)；HPLCRT(min)3.67.
利用以上實施例8的條件并替代使用適當(dāng)?shù)脑?，類似地制備了實施?5-116和129-146，見下表1。在實施例116的步驟1中采用Pd2(dba)3或Pd(OAc)2，得到相似收率。
實施例92-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸的制備 步驟12-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸乙酯的制備 向干燥的15ml試管中加入1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(300mg，1.04mmol，按照中間體G的相同方法合成)、2-氯煙酸乙酯(194mg，1.04mmol)、Pd2(dba)3(48mg，0.05mmol)、BINAP(65mg，0.10mmol)和Cs2CO3(679mg，2.09mmol)。將燒瓶脫氣后加入甲苯(4ml)，然后加熱混合物至110℃ 20小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到410mg(90％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.17(s，1H)，8.46(dd，1H)，8.22(dd，1H)，7.89(dd，2H)，7.48-7.64(m，4H)，7.23(s，1H)，7.12(t，2H)，7.84(dd，1H)，4.24(q，2H)，1.32(t，3H)；ES-MS m/z 437.2(MH+)；HPLC RT(min)4.38.
步驟22-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸的制備 向2-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸乙酯(410mg，0.94mmol)在混合物乙醇(4ml)和THF(4ml)中的溶液加入氫氧化鋰一水合物(115mg，2.74mmol)的水(8ml)溶液，然后加熱混合物至40℃ 1小時。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，加入0.5N鹽酸溶液將溶液pH調(diào)節(jié)至5(混合物變渾濁)。濾出固體，用水再次洗滌。在60℃烘箱真空干燥固體，得到380mg所需產(chǎn)物(99％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.18(s，1H)，8.45(dd，1H)，8.24(dd，1H)，7.87(dd，2H)，7.47-7.62(m，4H)，7.23(s，1H)，7.12(t，2H)，6.85(dd，1H)；ES-MS m/z 351.2(MH+)；HPLC RT(min)2.58.
實施例103-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制備
步驟13-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}吡啶-2-甲酸乙酯的制備 向裝有3-羥基吡啶-2-甲酸(25g，179.5mmol)的1L干燥燒瓶中，加入400ml乙醇和100ml甲苯，再加入10ml硫酸。將混合物加熱(95℃)回流3天。在冷卻至室溫后，將混合物濃縮至原體積的1/4，用600ml乙酸乙酯和200ml水稀釋。水層用200ml乙酸乙酯萃取，合并的有機層用飽和NaHCO3(3×200ml)、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥。濾出固體，減壓濃縮溶劑，得到21.9g 3-羥基吡啶-2-甲酸乙酯(73％)，無需純化直接用于下一步驟。將該酯(21.9g，131mmol)溶于吡啶，冷卻至-40℃，然后加入三氟甲磺酸酐(48g，170mmol)。反應(yīng)混合物升至0℃30分鐘，然后升至室溫再過30分鐘。加入水(100ml)猝滅反應(yīng)物?；旌衔镉靡宜嵋阴?3×200ml)萃取，合并的有機層用飽和碳酸氫鈉(200ml)、水(200ml)、鹽水(200ml)洗滌，經(jīng)硫酸鈉干燥。濾出固體，減壓除去溶劑，得到39g(99％)所需產(chǎn)物，無需純化直接用于下一步驟。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.73(dd，1H)，7.72(dd，1H)，7.62(dd，1H)，4.46(q，2H)，1.42(t，3H).
步驟23-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸乙酯的制備 向干燥的100ml燒瓶中加入3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(1.68g，6.9mmol，用中間體A按照中間體F的相同方法合成)、3-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}吡啶-2-甲酸乙酯(1.88g，6.28mmol)(步驟1)、Pd2(dba)3(0.28g，0.31mmol)、BINAP(0.39g，0.63mmol)和Cs2CO3(4.1g，12.5mmol)。將燒瓶脫氣后加入甲苯(10ml)，然后加熱混合物至110℃ 4小時。冷卻混合物至室溫，通過硅藻土墊過濾(乙酸乙酯作為洗脫劑)，濃縮至干，經(jīng)硅膠快速色譜純化(10-30％乙酸乙酯/己烷)，得到1.4g(57％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.29(s，1H)，8.19(dd，1H)，7.82(dd，1H)，7.41(dd，1H)，7.31(dd，1H)，7.19(d，2H)，6.18(s，1H)，4.28(q，2H)，2.01(s，6H)，1.39(s，9H)，1.32(t，3H)；ES-MS m/z 393.2(MH+)；HPLC RT(min)3.57.
在此步驟中將Pd2(dba)3用Pd(OAc)2代替后，得到相似的收率。
步驟33-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制備 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸乙酯(2.10g，5.35mmol)在混合物乙醇(5ml)和THF(5ml)中的溶液加入氫氧化鋰一水合物(1.12mg，26.8mmol)的水(10ml)溶液，然后加熱混合物至40℃ 1小時。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，加入0.5N鹽酸將溶液pH調(diào)節(jié)至5，濃縮混合物至干。將粗制混合物重新溶于甲醇，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到1.65g(85％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.22(br，s，1H)，9.52(s，1H)，8.03(dd，1H)，7.86(dd，1H)，7.50(dd，1H)，7.30(dd，1H)，7.18(d，2H)，2.02(s，6H)，1.37(s，9H)；ES-MS m/z 321.3(MH+)；HPLC RT(min.)2.56.
實施例114-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸的制備 步驟14-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯的制備 向干燥的15ml試管中加入3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(106mg，0.44mmol，按照中間體F的相同方法合成)、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(101mg，0.44mmol)、Pd2(dba)3(20mg，0.022mmol)、BINAP(27mg，0.044mmol)和Cs2CO3(199mg，0.61mmol)。將燒瓶脫氣后加入甲苯(2ml)，加熱混合物至110℃ 20小時。冷卻混合物至室溫，通過硅膠墊(乙酸乙酯作為洗脫劑)過濾，濃縮至干，經(jīng)HPLC純化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到81mg(42％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.23(s，1H)，8.72(s，1H)，7.24(dd，2H)，7.16(s，1H)，6.78(s，1H)，4.20(q，2H)，2.64(s，3H)，2.38(s，3H)，2.04(s，3H)，1.34(s，9H)，1.28(t，3H)；ES-MS m/z 440.2(MH+)；HPLC RT(min)4.66.
步驟24-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸的制備 向4-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(71mg，0.16mmol)在混合物乙醇(0.5ml)和THF(0.5ml)中的溶液加入氫氧化鋰一水合物(68mg，1.6mmol)的水(1ml)溶液，加熱混合物至40℃ 1小時。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，加入0.5N鹽酸將溶液pH調(diào)節(jié)至5，濃縮混合物至干。將粗制混合物重新溶于甲醇，經(jīng)HPLC純化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到66mg(99％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.50(s，1H)，8.65(s，1H)，7.17(dd，2H)，7.12(s，1H)，6.83(s，1H)，2.68(s，3H)，2.27(s，3H)，1.97(s，3H)，1.35(s，9H)；ES-MS m/z412.2(MH+)；HPLC RT(min)3.94.
實施例123-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-4-氟-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制備 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(實施例10，50mg，0.14mmol)的CH3CN(1ml)溶液中，加入[(1-(氯甲基)-4-氟-1，4-二氮陽離子雙環(huán)[2.2.2]辛烷雙(四氟硼酸鹽)](SELECTFLUORTM)(48mg，0.14mmol)，在室溫下攪拌混合物16小時。濃縮混合物，殘余物經(jīng)HPLC純化(10％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到22mg(42％)標(biāo)題化合物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.18(s，1H)，8.04(d，1H)，7.50(dd，1H)，7.42(m，1H)，7.28(m，1H)，7.13(m，2H)，2.12(s，6H)，1.40(s，9H).ES-MS m/z 383.1(MH+)；HPLC RT(min)3.21.
實施例133-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-4-碘-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制備 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(實施例10，50mg，0.14mmol)在混合物乙酸/二氯甲烷(各1ml)中的溶液加入N-碘代丁二酰亞胺(31mg，0.14mmol)。在室溫下攪拌溶液12小時，然后加入水(10ml)。用KOH(1.0M冰冷溶液)將反應(yīng)混合物堿化至pH 9。水層用二氯甲烷(50ml)萃取，隨后，有機相用飽和亞硫酸鈉、鹽水洗滌，濃縮至干。粗制產(chǎn)物經(jīng)HPLC純化，得到所需產(chǎn)物(51mg，75％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.70(s，1H)，9.20(s，1H)，8.04(m，1H)，7.45(m，1H)，7.20(m，2H)，7.10(m，2H)，2.12(s，6H)，1.50(s，9H).ES-MS m/z490.9(MH+)；HPLC RT(min)3.40.
實施例143-{[3-叔丁基-4-氯-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制備 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(實施例10，50mg，0.14mmol)在混合物乙酸/二氯甲烷(各1ml)中的溶液加入N-氯代丁二酰亞胺(18mg，0.14mmol)。在室溫下攪拌溶液12小時，然后加入水(10ml)。用KOH(1.0M冰冷溶液)將反應(yīng)混合物堿化至pH 9。水層用二氯甲烷(50ml)萃取，隨后有機相用飽和亞硫酸鈉、鹽水洗滌，濃縮至干。粗制產(chǎn)物經(jīng)HPLC純化，得到所需產(chǎn)物(42mg，76％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.45(s，1H)，9.30(s，1H)，8.04(d，1H)，7.50(m，1H)，7.25(m，2H)，7.15(m，2H)，2.02(s，6H)，1.43(s，9H).ES-MS m/z 399.0(MH+)；HPLC RT(min)3.33.
實施例152-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-氟-2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-N，N-二甲基煙酰胺的制備 向2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-氟-2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸(實施例140，按照實施例8的類似方法制備，50mg，0.13mmol)的CH3CN(1ml)溶液中，加入1滴二甲基甲酰胺，再加入乙二酰氯(9μl，0.13mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時，然后加入甲胺(16μl 40％的水溶液，0.25mmol)。在室溫下再次攪拌混合物1小時，濃縮至干。將殘余物溶于甲醇(1ml)，通過octyl固相萃取管過濾，經(jīng)HPLC純化(10％-90％乙腈/水梯度洗脫)得到33mg(70％)所需產(chǎn)物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.30(d，1H)，8.23(s，1H)，7.50(d，1H)，7.15-7.30(m，3H)，6.80(t，1H)，6.60(s，1H)，3.77(s，3H)，2.95(br s，6H)，1.70(q，2H)，1.32(s，6H)，0.85(t，3H).ES-MS m/z 426.2(MH+)；HPLC RT(min)3.57.
利用上述實施例15的條件并替代使用適當(dāng)?shù)脑希愃频刂苽淞藢嵤├?51-156，見下表1。
實施例163-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲酰胺的制備 步驟13-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲腈的制備 將3-溴吡啶-2-甲腈(150mg，0.98mmol)、3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-胺(179mg，0.98mmol)、碳酸銫(638mg，1.96mmol)、BINAP(98mg，0.16mmol)和Pd2(dba)3(90mg，0.10mmol)的混合物溶于無水甲苯(2ml)，在氮氣氛下加熱至80℃ 24小時。冷卻反應(yīng)混合物至室溫，用乙酸乙酯稀釋，過濾后減壓濃縮。殘余物經(jīng)硅膠色譜純化(EtOAc/己烷(1∶9-1∶4，v/v)作為洗脫劑)。得到黃色油狀產(chǎn)物(145mg，58％)。ES-MSm/z 256.1(MH+)；HPLC RT(min)2.37。
步驟23-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲酰胺的制備 向3-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲腈(100mg，0.39mmol)的MeOH(1ml)溶液中，加入KOH水溶液(3M，1ml)，在40℃攪拌混合物48小時。減壓除去有機溶劑，水層用1N HCl水溶液酸化至pH 1-2。混合物用乙酸乙酯(3x)萃取。減壓除去溶劑后，粗制殘余物經(jīng)制備型HPLC純化(用20％-90％乙腈/水梯度洗脫)，得到油狀標(biāo)題產(chǎn)物(6.2mg，6％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.35(s，9H)，3.72(s，3H)，6.80(s，1H)，7.39-7.42(m，2H)，8.08-8.11(m，1H).ES-MS m/z 274.1(MH+)，HPLC RT(min)1.47.
采用以上制備實施例1-16的方法，并且用適當(dāng)?shù)闹虚g體作原料，類似地制備了本發(fā)明的其它化合物。這些化合物列于下表1中。
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本文所用各種術(shù)語的定義如下。
當(dāng)介紹本發(fā)明要素或其優(yōu)選實施方案時，“所述”是指一個或多個該要素。術(shù)語“包含”、“包括”和“具有”是指除了所列要素之外，還可以為其它要素。
本文所用術(shù)語“患者”包括哺乳動物(如人和動物)。
術(shù)語“治療”包括任何過程、作用、應(yīng)用、療法等，其中給予包括人的患者醫(yī)療救助，從而直接或間接改善患者的病癥，或者減緩患者病癥或疾病的發(fā)展。
術(shù)語“聯(lián)合治療”是指給予兩種以上治療藥物以治療糖尿病病癥和/或疾病。這樣的給藥包括以基本上同時的方式聯(lián)合給予兩種以上的治療藥物，例如采用包含固定比例活性成分的單一膠囊，或者采用多個獨立的膠囊，每一種抑制劑包含于獨立的膠囊。另外，這樣的給藥包括以序貫方式使用各類治療藥物。
術(shù)語“治療有效”是指所給予的各種藥物劑量能夠改善糖尿病病癥或疾病的嚴(yán)重程度，同時避免或最小化與所實施的治療相關(guān)的副作用。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”是指主題項適合在藥品中使用。
本發(fā)明化合物可用于治療糖尿病，包括I型和II型糖尿病(非胰島素依賴型糖尿病)。這種治療還可延緩糖尿病的發(fā)作和糖尿病并發(fā)癥。本發(fā)明化合物可用于預(yù)防糖耐量減低患者發(fā)展為II型糖尿病?？梢岳帽景l(fā)明方法中本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的其它疾病或病癥包括青少年成熟期突發(fā)型糖尿病(MODY)(Herman等，Diabetes 4340，1994)；成人隱性自身免疫性糖尿病(LADA)(Zimmet等，DiabetesMed.11299，1994)；糖耐量減低(IGT)(Expert Committee onClassification of Diabetes Mellitus，Diabetes Care 22(增刊1)S5，1999)；空腹血糖異常(IFG)(Charles等，Diabetes 40796，1991)；妊娠糖尿病(Metzger，Diabetes，40197，1991)；以及X代謝綜合癥(metabolic syndrome X)。
本發(fā)明化合物也可有效用于治療例如肥胖癥、動脈粥樣硬化疾病、高血脂、高膽固醇血癥、低HDL水平、高血壓、心血管疾病(包括動脈粥樣硬化、冠心病、冠狀動脈疾病和高血壓)、腦血管疾病和外周血管疾病。
本發(fā)明化合物也可用于治療涉及例如以下情況的生理疾病產(chǎn)生脂質(zhì)累積細(xì)胞的細(xì)胞分化、調(diào)節(jié)胰島素敏感性以及血糖水平，它們涉及例如異常的胰腺β細(xì)胞功能、胰島素分泌瘤和/或由于抗胰島素的自身抗體、抗胰島素受體的自身抗體或刺激胰腺β細(xì)胞的自身抗體引起的自身免疫性低血糖癥；導(dǎo)致形成動脈粥樣硬化斑的巨噬細(xì)胞分化；炎癥反應(yīng)；致癌作用；增生；脂肪細(xì)胞基因表達(dá)；脂肪細(xì)胞分化；胰腺β細(xì)胞量減少；胰島素分泌；對胰島素的組織敏感性；脂肉瘤細(xì)胞生長；多囊卵巢疾病；持續(xù)無排卵；雄激素過多；孕酮生成；類固醇生成；細(xì)胞的氧化還原電勢和氧化應(yīng)激；一氧化氮合酶(NOS)生成；γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶、過氧化氫酶、血漿甘油三酯、HDL和LDL膽固醇水平增高等。
本發(fā)明化合物也在本發(fā)明方法中用于治療糖尿病繼發(fā)性病因(Expert Committee on Classification of Diabetes Mellitus，Diabetes Care22(增刊1)S5，1999)。這類繼發(fā)性病因包括糖皮質(zhì)激素過量、生長激素過量、嗜鉻細(xì)胞瘤和藥物引起的糖尿病?？赡苷T發(fā)糖尿病的藥物包括但不限于pyriminil、煙酸、糖皮質(zhì)激素、苯妥英、甲狀腺激素、β腎上腺素能藥、α干擾素以及治療HIV感染的藥物。
在治療糖尿病及其相關(guān)疾病中，本發(fā)明化合物可單獨使用，或者與其它本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的療法和/或化合物聯(lián)合使用?；蛘?，可在聯(lián)合治療中部分或全部使用本文介紹的的方法和化合物。
本發(fā)明化合物也可與治療糖尿病的其它已知藥物聯(lián)合給予，所述藥物包括PPAR激動劑、磺酰脲類藥物、非磺酰脲類促分泌素、α葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、胰島素促分泌素、降低肝臟葡萄糖輸出的化合物、胰島素和減肥藥。這類藥物可在給予本發(fā)明化合物之前、同時或之后給予。胰島素包括長效或短效形式以及胰島素制劑。PPAR激動劑包括任何PPAR亞型或它們的組合。例如PPAR激動劑可包括PPAR-α、PPAR-γ、PPAR-δ或者任意兩種或三種PPAR亞型的組合。PPAR激動劑包括如羅格列酮、曲格列酮和吡格列酮?；酋ｋ孱愃幬锇ㄈ绺窳斜倦?、格列美脲、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲和格列吡嗪。當(dāng)與本發(fā)明化合物一起給藥時，可用于治療糖尿病的α-葡糖苷酶抑制劑包括阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖。可用于治療糖尿病的胰島素增敏劑包括PPAR-γ激動劑，例如格列酮類(例如曲格列酮、吡格列酮、恩格列酮、MCC-555、羅格列酮等)；雙胍類，例如二甲雙胍和苯乙雙胍；蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制劑；二肽基肽酶IV(DPP-IV)抑制劑；噻唑烷二酮類和非噻唑烷二酮類。當(dāng)與本發(fā)明化合物一起給藥時，可用于治療糖尿病的降低肝臟葡萄糖輸出的化合物包括二甲雙胍，例如格華止和格華止XR。當(dāng)與本發(fā)明化合物一起給藥時，可用于治療糖尿病的胰島素促分泌素包括磺酰脲類和非磺酰脲類藥物GLP-1、GIP、分泌素、那格列奈、美格列奈、瑞格列奈、格列本脲、格列美脲、氯磺丙脲、格列吡嗪。GLP-1包括半衰期比天然GLP-1長的GLP-1衍生物，例如脂肪酸衍生的GLP-1和毒蜥外泌素(exendin)。在本發(fā)明的一個實施方案中，本發(fā)明化合物可與胰島素促分泌素聯(lián)合使用，從而增強胰腺β細(xì)胞對胰島素促分泌素的敏感性。
在本發(fā)明方法中，本發(fā)明化合物還可與減肥藥聯(lián)合使用。減肥藥包括β-3激動劑、CB-1拮抗劑、神經(jīng)肽Y5抑制劑、食欲抑郁劑(例如西布曲明(Meridia))和脂酶抑制劑(例如奧利司他(Xenical))。
在本發(fā)明方法中，本發(fā)明化合物也可與常用于糖尿病患者脂質(zhì)障礙的藥物聯(lián)合使用。這類藥物包括但不限于HMG-CoA還原酶抑制劑、煙酸、煙酸、降血脂藥(例如甾烷醇(stanol)酯；甾烯醇(stenol)苷類，例如替奎安；氮雜環(huán)丁酮類，例如依澤替米貝)、ACAT抑制劑(例如阿伐麥布)、膽汁酸螯合劑、膽汁酸重攝取抑制劑、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運抑制劑和貝酸衍生物。HMG-CoA還原酶抑制劑包括例如洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、利伐他汀(rivastatin)、伊伐他汀、西立伐他汀和ZD-4522。貝酸衍生物包括例如氯貝特、非諾貝特、苯扎貝特、環(huán)丙貝特、芐氯貝特(beclofibrate)、依托貝特和吉非貝齊。螯合劑包括例如考來烯胺、考來替泊以及交聯(lián)葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物。
本發(fā)明化合物也可與抗高血壓藥聯(lián)合使用，例如β-阻斷劑和ACE抑制劑。與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的其它抗高血壓藥的實例包括鈣通道阻斷劑(L型和T型；例如地爾硫、維拉帕米、硝苯地平、氨氯地平和mybefradil)、利尿藥(例如氯噻嗪、氫氯噻嗪、氟甲噻嗪、氫氟甲噻嗪、芐氟噻嗪、甲基氯噻嗪、三氯甲噻嗪、泊利噻嗪、芐噻嗪、ethacrynic acid tricrynafen、氯噻酮、呋塞米、musolimine、布美他尼、氨苯蝶啶(triamtrenene)、阿米洛利、螺內(nèi)酯)、腎素抑制劑、ACE抑制劑(例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、施瑞普利(ceranopril)、西拉普利(cilazopril)、地拉普利、噴托普利、喹那普利、雷米普利、賴諾普利)、AT-1受體拮抗劑(例如氯沙坦、厄貝沙坦、纈沙坦)、ET受體拮抗劑(例如西他生坦、atrsentan、中性內(nèi)肽酶(NEP)抑制劑、血管肽酶抑制劑(NEP-ACE雙重抑制劑)(例如奧馬曲拉和gemopatrilat)和硝酸鹽。
這類聯(lián)合治療可以給予兩種以上藥物的任意組合(例如本發(fā)明化合物與胰島素增敏劑和減肥藥)。這類聯(lián)合治療可以給予上述的藥物組合物形式。
根據(jù)測定哺乳動物的上述確定疾病治療功效的公知方法，并將其測試結(jié)果與治療這些疾病的已知藥物的測試結(jié)果進(jìn)行比較，很容易確定本發(fā)明化合物治療各種適應(yīng)癥的有效劑量。治療一種上述疾病所需的活性成分(例如化合物)劑量可以根據(jù)例如以下因素在很寬范圍內(nèi)變化所用的具體化合物和劑量單位、給藥方式、治療周期、所治療患者的年齡和性別以及所治療疾病的性質(zhì)和程度。
活性成分的給藥總量一般在約0.0001mg/kg體重/天至約200mg/kg體重/天，優(yōu)選約0.01mg/kg體重/天至約200mg/kg體重/天。單位劑量可含約0.05mg至約1500mg活性成分，可每天給予一次或多次。通過注射(包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下和胃腸外注射)以及使用滴注技術(shù)的日給藥劑量可以為約0.01mg/kg至約200mg/kg。每日直腸劑量方案可以為0.01mg/kg至200mg/kg總體重。透皮給藥需要維持的日劑量為0.01mg/kg至200mg/kg。
當(dāng)然，每個患者的具體初始劑量方案和持續(xù)劑量方案必須根據(jù)臨床醫(yī)生確定的病癥性質(zhì)和嚴(yán)重程度、所用具體化合物的活性、患者年齡、患者飲食、給藥時間、給藥途徑、藥物排泄速率、藥物組合等而變化。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可利用常規(guī)的治療測試，確定所需的治療方式和本發(fā)明化合物的給藥次數(shù)。
通過對需要治療的患者給予適當(dāng)配制的藥物組合物，本發(fā)明化合物可用于實現(xiàn)所需的藥理效果。對于本發(fā)明目的而言，患者是需要治療特定病癥或疾病的哺乳動物，包括人。因此，本發(fā)明包括含有藥學(xué)上可接受的載體和治療有效量的化合物的藥物組合物。藥學(xué)上可接受的載體是指在與活性成分有效活性相容的濃度下(這樣載體的任何副作用均不會損害活性成分的有益作用)，對患者相對無毒和無害的任何載體。化合物的治療有效量是指產(chǎn)生療效或?qū)λ委熖囟ú“Y產(chǎn)生影響的劑量。采用任何有效的常規(guī)劑量單元形式(包括例如立即釋放制劑和定時釋放制劑)，可將本發(fā)明化合物與藥學(xué)上可接受的載體一起通過口服、胃腸外、局部等途徑給藥。
對于口服給藥，化合物可以配制為固體或液體制劑，例如膠囊劑、丸劑、片劑、錠劑、糖錠、熔化物、散劑、溶液劑、混懸劑或乳劑，它們可根據(jù)本領(lǐng)域生產(chǎn)藥物組合物的已知方法制備。固體單元劑型可以是一般的硬質(zhì)明膠膠囊劑或軟質(zhì)明膠膠囊劑，其中包含表面活性劑、潤滑劑和惰性填料(例如乳糖、蔗糖、磷酸鈣和玉米淀粉)。
在另一實施方案中，本發(fā)明化合物可以用常規(guī)片劑基(例如乳糖、蔗糖和玉米淀粉)以及下述助劑制備片劑粘合劑，例如阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠；崩解劑，用于在給藥后幫助于崩解和溶解片劑，例如馬鈴薯淀粉、海藻酸、玉米淀粉和瓜爾膠；潤滑劑，用來改善片劑成粒的流動性并預(yù)防片劑原料粘附在制片沖模和沖頭表面，例如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅；染料；著色劑；以及矯味劑，用來改善片劑外觀并使其更易被患者接受。用于口服液體劑型的合適賦形劑包括稀釋劑，例如水和醇(例如乙醇、苯甲醇和聚乙二醇)，可添加或不添加藥學(xué)上可接受的表面活性劑、懸浮劑或乳化劑。各種其它材料可以用于包衣或者在其它方面改善劑量單位的物理形式。例如片劑、丸劑或膠囊劑可以包被蟲膠、食糖或者以上二者。
可分散的散劑和顆粒劑適用于制備水性混懸劑。它們可提供與分散劑或濕潤劑、懸浮劑及一種或多種防腐劑相混合的活性成分。適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑的實例已在上文中給出。還可使用其它賦形劑，例如上述甜味劑、矯味劑和著色劑。
本發(fā)明藥物組合物也可以為水包油乳劑。油相可以是植物油，例如液體石蠟或植物油混合物。合適的乳化劑可以是(1)天然樹膠，例如阿拉伯膠和西黃蓍膠，(2)天然磷脂，例如大豆和卵磷脂，(3)由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如山梨糖醇酐單油酸酯，(4)所述偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。乳劑還可以包含甜味劑和矯味劑。
油性混懸劑的制備可將活性成分懸浮于植物油，例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油；或者懸浮于礦物油，例如液體石蠟。油性混懸劑可包含增稠劑，例如蜂蠟、固體石蠟或鯨蠟醇?；鞈覄┻€可包含一種或多種防腐劑，例如對羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯；一種或多種著色劑；一種或多種矯味劑；以及一種或多種甜味劑，例如蔗糖或糖精。
糖漿劑或酏劑可用甜味劑配制，例如丙三醇、丙二醇、山梨醇或蔗糖。這類制劑還可包含緩和劑、防腐劑、矯味劑和著色劑本發(fā)明化合物還可以胃腸外(即皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或腹膜內(nèi))給藥，注射劑量的化合物加入生理上可接受的稀釋劑以及藥用載體，所述載體可以是無菌的液體或液體混合物，例如水、鹽水、葡萄糖水溶液及相關(guān)的糖溶液；醇；二元醇；甘油縮酮；醚；油；脂肪酸；脂肪酸酯或甘油酯；或乙酰化脂肪酸甘油酯；并且添加或不添加藥學(xué)上可接受的表面活性劑、懸浮劑或乳化劑以及其它藥用輔料。
本發(fā)明胃腸外組合物的溶液中通常包含約0.5％至約25％(重量)活性成分。還可使用有益的防腐劑和緩沖劑。為了最小化或消除對注射部位的刺激，這類組合物可包含親水-親油平衡(HLB)為約12至約17的非離子表面活性劑。在這類制劑中，表面活性劑含量為約5％至約15％(重量)。表面活性劑可以是具有上述HLB的單個組分，也可以是具有所需HLB的兩種以上組分的混合物。
藥物組合物可以為無菌注射水性混懸劑形式。這類混懸劑可利用適宜分散劑或濕潤劑和懸浮劑按照已知的方法配制，所述分散劑或濕潤劑可以是天然磷脂、環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物、環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物、環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物、或環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物。
無菌注射制劑也可以是胃腸外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液劑或混懸劑?？墒褂玫南♂寗┖腿軇┌ɡ缢?、林格(Ringer)溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌不揮發(fā)油類通常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。用于此目的時，可使用任何溫和的不揮發(fā)油類，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(例如油酸)可用于制備注射劑。
本發(fā)明組合物也可以栓劑形式直腸給藥。這些組合物可如下制備將藥物(例如化合物)與合適的無刺激賦形劑混合，所述賦形劑在常溫度下為固體，而在直腸溫度下為液體，因此，將在直腸中融化而釋放出藥物。這類材料包括例如可可油和聚乙二醇。
在本發(fā)明方法中使用的另一種制劑采用透皮給藥裝置(“貼劑”)。這類透皮貼劑可用于連續(xù)或非連續(xù)浸入控制量的本發(fā)明化合物。給予藥物的透皮貼劑的制造和使用在本領(lǐng)域是公知的(參見美國專利5,023,252，通過引用結(jié)合到本文)。這類貼劑可制成連續(xù)、脈動或按需給予藥物。
可能需要通過機械輸送裝置將藥物組合物給予患者。制造和使用用于給予藥物的機械輸送裝置在本領(lǐng)域中是公知的。例如，對大腦直接給藥的直接給藥技術(shù)通常涉及將藥物輸送導(dǎo)管置入患者的腦室系統(tǒng)，從而避開血腦屏障。美國專利US 5,011,472(通過引用結(jié)合到本文)介紹了一種這樣的植入輸送系統(tǒng)，它用于將藥物輸送至身體特定解剖學(xué)部位。
必要時，本發(fā)明組合物還可包含其它常規(guī)的藥學(xué)上可接受的配合成分，通常稱為載體或稀釋劑?？杉尤肟寡趸瘎?例如抗壞血酸)或其它合適的防腐劑，以保存本發(fā)明任何組合物?？梢圆捎弥苽溥m當(dāng)劑型的組合物的常規(guī)方法。
本發(fā)明化合物可以單獨給予，或者與一種或多種其它藥物聯(lián)合給予，前提是這種聯(lián)合給藥不會引起不可接受的副作用。例如，本發(fā)明化合物可與已知的減肥藥、已知的抗糖尿病或其它適應(yīng)癥的藥物以及它們的混合物或組合物聯(lián)合應(yīng)用。
本發(fā)明化合物也可在研究和診斷中以游離堿或組合物形式應(yīng)用，或用作分析參考標(biāo)準(zhǔn)等。因此，本發(fā)明包括含惰性載體和有效量的本文介紹方法鑒定的化合物或者其鹽或酯的組合物。惰性載體是指不與所攜帶化合物相互作用并且為所攜帶化合物提供載體、輸送工具、增量和示蹤材料等的任何材料?；衔锏挠行Я渴侵改軌虍a(chǎn)生療效或者對進(jìn)行的特定過程產(chǎn)生影響的劑量。
適合皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)等給藥的制劑以及合適的藥用載體可通過本領(lǐng)域公知的方法制備，用于配制和給藥的技術(shù)是本領(lǐng)域公知的(參見例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack PublishingCo.，Easton，Pa.，第20版，2000)。
對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員顯而易見的是，根據(jù)本文闡述，可以對本發(fā)明作出不偏離原有精神或范圍的改變和改進(jìn)。
生物學(xué)評價為了更好地理解本發(fā)明，給出了下列實施例。這些實施例僅用于示例說明，而不應(yīng)解釋為對本發(fā)明范圍的任何限制。上文提及的所有出版物均通過引用全部結(jié)合到本文。
通過本領(lǐng)域公知的體外、離體和體內(nèi)測定法可證明本發(fā)明化合物活性。例如為了證明某個藥物治療糖尿病及其相關(guān)疾病(例如X綜合癥、糖耐量減低、空腹血糖異常和高胰島素血癥)的功效，可采用下述測定法。
體外測定法由INS-1細(xì)胞分泌胰島素從X-射線誘導(dǎo)的大鼠胰島瘤分離出INS-1細(xì)胞(Asfari等，Endocrinology 130167，1992)。在Biocoat Collagenl Cellware 96孔板中，以每孔30,000個細(xì)胞接種INS-1細(xì)胞，孵育4-5天。將細(xì)胞用調(diào)節(jié)至3mM葡萄糖的完全培養(yǎng)基(RPMI 1640，10％胎牛血清，100μg/ml青霉素/鏈霉素，0.5mM丙酮酸鈉，10mM HEPES以及50μMβ-巰基乙醇)處理2天。處理兩天后，用含3mM葡萄糖的Krebs-RingerBicarbonate-HEPES(KRBH)洗滌細(xì)胞。然后在相同緩沖液中孵育細(xì)胞30分鐘。加入所需濃度葡萄糖和化合物后再孵育細(xì)胞2小時。收集上清液。
為了測定所分泌的胰島素量，將上清液與抗胰島素抗體和示蹤量125I-胰島素的磷酸緩沖鹽溶液(含0.5％牛血清白蛋白)混合。加入A蛋白包被的SPA(閃爍親近測定)珠。將各板孵育5-20小時，在閃爍計數(shù)器中計數(shù)，從而測出胰島素水平。將特定濃度下的化合物活性表達(dá)成相對于對照的刺激胰島素分泌倍數(shù)。
由分散的大鼠胰島細(xì)胞分泌胰島素按照下述方法，測定了大量本發(fā)明化合物介導(dǎo)的分散大鼠胰島細(xì)胞的胰島素分泌。從雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)分離出Langerhans胰島，用膠原酶消化。將胰島細(xì)胞用胰蛋白酶處理分散，接種到V型底的96孔板中，沉淀。將細(xì)胞在加有或不加本發(fā)明化合物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)過夜。吸出培養(yǎng)基，在37℃下，用含3mM葡萄糖的Krebs-Ringer-HEPES緩沖液預(yù)孵育細(xì)胞30分鐘。除去預(yù)孵育的緩沖液，在本發(fā)明化合物存在或不存在下，用含適當(dāng)葡萄糖濃度(例如8mM)的Krebs-Ringer-HEPES緩沖液在37℃孵育適當(dāng)時間。在部分研究中，還包括適當(dāng)濃度的GLP-1或毛喉素。取出部分上清液，通過SPA測量其胰島素含量。結(jié)果表示為“相對對照的倍數(shù)”(FOC)。
在該測定中，由分散的大鼠胰島細(xì)胞分泌胰島素的增加定義為至少1.4倍的增加。
體內(nèi)測定化合物對大鼠腹膜內(nèi)葡萄糖耐量的影響大鼠在經(jīng)口管飼后，測量本發(fā)明化合物的體內(nèi)活性。對禁食過夜的大鼠給予口服劑量的溶媒對照或化合物。3小時后，測量基礎(chǔ)血糖水平，腹膜內(nèi)給予大鼠2g/kg葡萄糖。15分鐘、30分鐘和60分鐘后再測定血糖水平。在IPGTT(腹膜內(nèi)葡萄糖耐量測試)后，本發(fā)明代表性化合物相對于溶媒顯著地降低了血糖水平。
對心血管參數(shù)影響的測量方法還評價心血管參數(shù)(例如心率和血壓)。SHR大鼠每天口服一次溶媒或試驗化合物，持續(xù)兩周。按照Grinsell等(Am.J.Hypertens.，13370-375，2000)介紹的尾套法(tail-cuff method)，測量血壓和心率。按照Shen等(J.Pharmacol.Exp.Therap.，2781435-1443，1996)介紹的方法，監(jiān)測猴子的血壓和心率。
甘油三酯水平的測量方法給hApoAl小鼠(Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME)放血(從眼靜脈或尾靜脈)，根據(jù)相同的平均血清甘油三酯水平分組。每天口服(結(jié)合藥學(xué)上可接受的賦形劑，管飼)一次試驗化合物，持續(xù)8天。然后給小鼠再次從眼靜脈或尾靜脈放血，測量血清甘油三酯水平。在所有情況下，都使用Technicon Axon Autoanalyzer(BayerCorporation，Tarrytown，NY)測量甘油三酯水平。
HDL-膽固醇水平的測量方法為了測量血漿HDL-膽固醇水平，給hApoAl小鼠放血，根據(jù)相同的平均血漿HDL-膽固醇水平分組。小鼠每天口服一次溶媒或試驗化合物，持續(xù)7天，然后在第8天再次放血。用Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter，F(xiàn)ullerton，CA)分析血漿中的HDL-膽固醇。
總膽固醇、HDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖水平的測量方法在另一種體內(nèi)測定法中，給肥胖猴子放血，然后每天口服一次溶媒或試驗化合物，持續(xù)4周，然后再次放血。用Synchron ClinicalSystem(CX4)(Beckman Coulter，F(xiàn)ullerton，CA)分析血清中的總膽固醇、HDL-膽固醇、甘油三酯和葡萄糖。按照Oliver等(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 985306-5311，2001)介紹的方法，用NMR光譜進(jìn)行脂蛋白亞型分析。
上述說明書中提及的所有出版物和專利通過引用結(jié)合到本文。本發(fā)明組合物和方法的不偏離本發(fā)明范圍和精神的各種改進(jìn)和改變，對本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。盡管結(jié)合具體的實施方案介紹了本發(fā)明，但應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明要求保護的范圍不應(yīng)僅僅限于這些具體的實施方案。實際上，實施本發(fā)明的上述方式的各種變化如果對于分子生物學(xué)或相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員顯而易見的，那么這些變化都屬于所附權(quán)利要求范圍。僅利用常規(guī)實驗方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員就能夠識別或確定許多與本發(fā)明所述具體實施方案等同的方案。這樣的等同實施方案也包括在所附權(quán)利要求范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種下式(I)的雜芳基氨基吡唑衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中 為選自以下的取代的雜芳族環(huán)基 R為H或(C1-C6)烷基；R1為H，任選被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任選被鹵素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)環(huán)烷基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和鹵素，(C1-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和氰基；R2為H，鹵素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、鹵素和(C1-C6)烷基，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，嘧啶基，噻吩基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，苯并噻吩基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，或呋喃基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素；R3為(C1-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C2-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多四個選自以下的取代基取代任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4為任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)鹵代烷基，(C1-C3)鹵代烷氧基，或鹵素；n＝0、1、2或3；X為CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5為H、(C1-C6)烷基、任選被鹵素取代的苯基、或任選在苯環(huán)上被鹵素取代的芐基；R6為H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成哌啶、嗎啉、硫代嗎啉或哌嗪環(huán)，所述哌嗪任選在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7為H，(C1-C6)烷基，芐基，任選在芳環(huán)上被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；前提條件是式(I)化合物不是下列化合物
2.權(quán)利要求1的化合物及其藥物可接受的鹽，其中 為選自以下的取代的雜芳族環(huán)基 R為H或(C1-C6)烷基；R1為H，任選被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任選被鹵素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)環(huán)烷基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和鹵素，(C1-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和氰基；R2為H，鹵素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、鹵素和(C1-C6)烷基，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，嘧啶基，噻吩基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，苯并噻吩基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，或呋喃基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素；R3為(C1-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C2-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多四個選自以下的取代基取代任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4為任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)鹵代烷基，(C1-C3)鹵代烷氧基，或鹵素；n＝0、1、2或3；X為CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5為H、(C1-C6)烷基、任選被鹵素取代的苯基、或任選在苯環(huán)上被鹵素取代的芐基；R6為H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成哌啶、嗎啉、硫代嗎啉或哌嗪環(huán)，所述哌嗪任選在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7為H，(C1-C6)烷基，芐基，任選在芳環(huán)上被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和(C1-C6)烷硫基。
3.權(quán)利要求1的化合物及藥學(xué)上可接受的鹽，其中 為選自以下的取代的雜芳族環(huán)基 R為H或(C1-C6)烷基；R1為H，任選被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任選被鹵素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)環(huán)烷基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和鹵素，(C1-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和氰基；R2為H，鹵素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、鹵素和(C1-C6)烷基，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素，嘧啶基；R3為(C1-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C2-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多四個選自以下的取代基取代任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4為任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)鹵代烷基，(C1-C3)鹵代烷氧基，或鹵素；n＝0、1或2；X為CO2R7或CONR5R6；R5為H或(C1-C6)烷基；R6為H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以與它們所連接的氮原子一起構(gòu)成哌啶、嗎啉、硫代嗎啉或哌嗪環(huán)，所述哌嗪任選在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7為H或(C1-C6)烷基。
4.權(quán)利要求1的化合物及藥學(xué)上可接受的鹽，其中 為選自以下的取代的雜芳族環(huán)基 R為H或(C1-C6)烷基；R1為H，任選被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任選被鹵素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)環(huán)烷基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和鹵素，(C1-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和氰基；R2為H，鹵素，(C1-C6)烷基，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素；R3為(C1-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C2-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多四個選自以下的取代基取代任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4為任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)鹵代烷基，(C1-C3)鹵代烷氧基，或鹵素；n＝0、1或2；X為CO2R7或CONR5R6；R5為H或(C1-C6)烷基；R6為H或(C1-C6)烷基；R7為H或(C1-C6)烷基。
5.權(quán)利要求1的化合物及藥學(xué)上可接受的鹽，其中 為選自以下的取代的雜芳族環(huán)基 R為H或(C1-C6)烷基；R1為H，任選被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任選被鹵素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)環(huán)烷基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和鹵素，(C1-C3)鹵代烷基，或，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代鹵素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C3)鹵代烷氧基和氰基；R2為H，鹵素，(C1-C6)烷基，苯基，任選被最多兩個選自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和鹵素；R3為(C1-C6)烷基，(C3-C6)環(huán)烷基，(C2-C3)鹵代烷基，或苯基，任選被最多四個選自以下的取代基取代任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、鹵素、(C1-C3)鹵代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)鹵代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4為任選被一個(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)鹵代烷基，(C1-C3)鹵代烷氧基，或鹵素；n＝0、1或2；X為CO2R7或CONR5R6；R5為H或(C1-C6)烷基；R6為H或(C1-C6)烷基；R7為H或(C1-C6)烷基。
6.權(quán)利要求1的化合物，其選自下列化合物(1)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(2)2-{[3-環(huán)戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(3)3-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸；(4)2-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(5)2-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(6)3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸；(7)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(8)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(9)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(10)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(11)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(12)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟煙酸；(13)2-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟煙酸；(14)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟煙酸；(15)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟煙酸；(16)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟煙酸；(17)2-{[3-環(huán)己基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(18)2-{[1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(19)2-{[1-(2-甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(20)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(21)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(22)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(23)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(24)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(25)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(26)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(27)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基煙酸；(28)2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-甲氧基-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(29)2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(30)2-{[3-叔丁基-1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(31)2-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；(32)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}煙酸；和(33)3-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸。
7.一種藥物組合物，該藥物組合物包含有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體。
8.一種藥物組合物，該藥物組合物包含治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽以及藥學(xué)上可接受的載體和一種或多種藥物。
9.權(quán)利要求14的藥物組合物，其中所述藥物選自PPAR配體、胰島素促分泌素、磺酰脲類藥物、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、降低肝臟葡萄糖輸出的化合物、胰島素、胰島素衍生物、雙胍類、蛋白酪氨酸磷酸酶-1B、二肽基肽酶IV、11β-HSD抑制劑、減肥藥、HMG-CoA還原酶抑制劑、煙酸、降血脂藥、ACAT抑制劑、膽汁酸螯合劑、膽汁酸重攝取抑制劑、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運抑制劑、貝酸衍生物、β阻斷劑、ACE抑制劑、鈣通道阻斷劑、利尿藥、腎素抑制劑、AT-1受體拮抗劑、ET受體拮抗劑、中性內(nèi)肽酶抑制劑、血管肽酶抑制劑和硝酸鹽。
10.一種治療糖尿病的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求7的藥物組合物的步驟。
11.權(quán)利要求10的方法，其中所述糖尿病選自I型糖尿病、II型糖尿病、青少年成熟期突發(fā)型糖尿病、成人隱性自身免疫性糖尿病和妊娠糖尿病。
12.一種治療X綜合癥的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求7的藥物組合物的步驟。
13.一種治療糖尿病相關(guān)疾病的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求7的藥物組合物的步驟。
14.權(quán)利要求13的方法，其中所述糖尿病相關(guān)疾病選自高血糖癥、高胰島素血癥、糖耐量減低、空腹血糖異常、血脂異常、高甘油三酯血癥和胰島素抵抗。
15.一種治療或預(yù)防糖尿病繼發(fā)性病因的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求7的藥物組合物的步驟。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述繼發(fā)性病因選自糖皮質(zhì)激素過量、生長激素過量、嗜鉻細(xì)胞瘤和藥物引起的糖尿病。
17.一種治療糖尿病的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物以及一種或多種藥物的步驟。
18.權(quán)利要求17的方法，其中所述藥物選自PPAR激動劑、磺酰脲類藥物、非磺酰脲類促分泌素、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、胰島素促分泌素、降低肝臟葡萄糖輸出的化合物、胰島素和減肥藥。
19.權(quán)利要求18的方法，其中所述糖尿病選自I型糖尿病、II型糖尿病、青少年成熟期突發(fā)型糖尿病、成人隱性自身免疫性糖尿病和妊娠糖尿病。
20.一種治療X綜合癥的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物以及一種或多種藥物的步驟。
21.權(quán)利要求20的方法，其中所述藥物選自PPAR激動劑、磺酰脲類藥物、非磺酰脲類促分泌素、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、胰島素促分泌素、降低肝臟葡萄糖輸出的化合物、胰島素和減肥藥。
22.一種治療糖尿病相關(guān)疾病的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物以及一種或多種藥物的步驟。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述糖尿病相關(guān)疾病選自高血糖癥、高胰島素血癥、糖耐量減低、空腹血糖異常、血脂異常、高甘油三酯血癥和胰島素抵抗。
24.權(quán)利要求23的方法，其中所述藥物選自PPAR激動劑、磺酰脲類藥物、非磺酰脲類促分泌素、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、胰島素促分泌素、降低肝臟葡萄糖輸出的化合物、胰島素和減肥藥。
25.一種治療或預(yù)防糖尿病繼發(fā)性病因的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物以及一種或多種藥物的步驟。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述藥物選自PPAR激動劑、磺酰脲類藥物、非磺酰脲類促分泌素、α-葡糖苷酶抑制劑、胰島素增敏劑、胰島素促分泌素、降低肝臟葡萄糖輸出的化合物、胰島素和減肥藥。
27.一種治療糖尿病、X綜合癥、糖尿病相關(guān)疾病或糖尿病繼發(fā)性病因的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物以及一種或多種藥物的步驟，所述藥物選自HMG-CoA還原酶抑制劑、煙酸、降血脂藥、ACAT抑制劑、膽汁酸螯合劑、膽汁酸重攝取抑制劑、微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運抑制劑、貝酸衍生物、β阻斷劑、ACE抑制劑、鈣通道阻斷劑、利尿藥、腎素抑制劑、AT-1受體拮抗劑、ET受體拮抗劑、中性內(nèi)肽酶抑制劑、血管肽酶抑制劑和硝酸鹽。
28.權(quán)利要求27的方法，其中所述糖尿病相關(guān)疾病選自高血糖癥、高胰島素血癥、糖耐量減低、空腹血糖異常、血脂異常、高甘油三酯血癥和胰島素抵抗。
29.權(quán)利要求17-28中任一項的方法，其中權(quán)利要求1的化合物與一種或多種藥物以單一藥物制劑形式給藥。
30.一種治療心血管疾病的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的多肽或權(quán)利要求7的藥物組合物的步驟。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述心血管疾病選自動脈粥樣硬化、冠心病、冠狀動脈疾病和高血壓。
32.一種治療肥胖癥的方法，該方法包括對需要治療的患者給予治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求7的藥物組合物的步驟。
33.一種刺激有需要的患者的胰島素分泌的方法，該方法包括對所述患者給予權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求7的藥物組合物。
34.權(quán)利要求1的化合物，用于治療和/或預(yù)防糖尿病和糖尿病相關(guān)疾病。
35.一種藥物，包含至少一種權(quán)利要求1的化合物和至少一種藥學(xué)上可接受、藥用安全的載體或賦形劑。
36.權(quán)利要求1的化合物在制備用于治療和/或預(yù)防糖尿病和糖尿病相關(guān)疾病的藥物中的用途。
37.權(quán)利要求35的藥物，用于治療和/或預(yù)防糖尿病。
全文摘要
本發(fā)明涉及雜芳基氨基吡唑化合物、藥物組合物以及治療糖尿病和相關(guān)疾病的方法。
文檔編號A61K31/4155GK1946715SQ200580012855
公開日2007年4月11日 申請日期2005年2月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月27日
發(fā)明者J·魯多爾夫, P·維肯斯, 莊智媛, 陳利冰, S·馬努森, A·奧拉格, 漆寧 申請人:拜爾藥品公司