專利名稱：作為丙型肝炎病毒ns3絲氨酸蛋白酶抑制劑的3,4－(環(huán)戊基)－稠合的脯氨酸化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的丙型肝炎病毒(″HCV″)蛋白酶抑制劑、含有一或多個這類抑制劑的醫(yī)藥組合物、制備這類抑制劑的方法，以及使用這類抑制劑治療丙型肝炎和相關(guān)病癥的方法。本發(fā)明還公開新的化合物，其含有作為HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制劑的雙環(huán)P2部分。本申請要求2004年2月27日提交的美國臨時申請系列號60/548,655的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒(HCV)是(+)-有意義單股RNA病毒，其已經(jīng)成為非-甲，非-乙型肝炎(NANBH)的主要病因，特別是在與血液-有關(guān)的NANBH(BB-NANBH)(參見，國際專利申請公布號WO 89/04669和歐洲專利申請公布號EP 381 216)中。NANBH與其它類型的病毒引起的肝臟疾病，如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、δ型肝炎病毒(HDV)、巨細胞病毒(CMV)和Epstein-Barr病毒(EBV)，以及其它形式的肝臟疾病，如酒精中毒和原發(fā)膽汁性肝硬化顯然有別。
最近，已經(jīng)鑒定、克隆并表達多肽加工和病毒復(fù)制所需的HCV蛋白酶。(參見，例如美國專利第5,712,145號)。這種大約3000個氨基酸的多蛋白，從氨基終端到羧基終端，含有殼包核酸蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)，以及數(shù)個非-結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、2、3、4a、5a和5b)。NS3是大約68kda的蛋白，由HCV基因組的大約1893個核苷酸編碼，并具有兩個不同的結(jié)構(gòu)域(a)絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域，由大約200個N-終端的氨基酸所組成；以及(b)在蛋白的C-終端的RNA-依賴性ATP酶結(jié)構(gòu)域。由于在蛋白序列、整體三維結(jié)構(gòu)和催化機制上的類似性，因而認為NS3蛋白酶是胰凝乳蛋白酶家族的成員。其它胰凝乳蛋白酶樣的酶是彈性蛋白酶、因子Xa、凝血酶、胰蛋白酶、血纖維蛋白溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCV NS3絲氨酸蛋白酶負責(zé)在NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合處的多肽(多蛋白)的蛋白水解作用，并因此負責(zé)在病毒復(fù)制期間產(chǎn)生四個病毒蛋白。這制備出HCV NS3絲氨酸蛋白酶，一種有吸引力的抗病毒化學(xué)療法的標靶。本發(fā)明化合物可抑制這類蛋白酶。它們也可調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
已經(jīng)確定NS4a蛋白，一種大約6kda的多肽，是NS3的絲氨酸蛋白酶活性的輔因子。由NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶自動切割NS3/NS4a接合發(fā)生在分子內(nèi)(即順式)，而以分子間的方式加工其它切割位置(即反式)。
HCV蛋白酶的天然切割位置的分析，顯示在P1處出現(xiàn)半胱氨酸并在P1′處出現(xiàn)絲氨酸，且在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合處中嚴格地保留這些殘基。NS3/NS4a接合處在P1處含有蘇氨酸，并在P1′處含有絲氨酸。假定在NS3/NS4a處的Cys→Thr取代，說明在該接合處需要順而非反式加工。參見，例如，Pizzi等(1994)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)91888-892，F(xiàn)ailla等(1996)Folding & Design 135-42。NS3/NS4a切割位置也比其它位置更容忍突變生成。參見，例如，Kollykhalov等(1994)J.Virol.687525-7533。也發(fā)現(xiàn)在切割位置的上游區(qū)中的酸性殘基需要有效的切割。參見，例如，Komoda等(1994)J.Virol.687351-7357。
已經(jīng)報告了HCV蛋白酶的抑制劑，包括抗氧化劑(參見，國際專利申請公布號WO 98/14181號)、某些肽和肽類似物(參見，國際專利申請公布號WO 98/17679號，Landro等(1997)Biochem.369340-9348，Ingallinella等(1998)Biochem.378906-8914，Llinàs-Brunet等(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.81713-1718)、以70-氨基酸多肽水蛭蛋白酶抑制劑(eglin)c為基礎(chǔ)的抑制劑(Martin等(1998)Biochem.3711459-11468，抑制劑親和力選自人類胰臟分泌胰蛋白酶抑制劑(hPSTI-C3)和微型抗體(minibody)節(jié)目(repertoires)(MBip)(Dimasi等(1997)J.Virol.717461-7469)、cVHE2(一種″駱駝化的(camelized)″可變結(jié)構(gòu)域抗體片段)(Martin等(1997)Protein Eng.10607-614)，以及α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等(1997)J.Hepat.2742-28)。最近已經(jīng)公開一種核酶，其被設(shè)計成選擇性地破壞丙型肝炎病毒RNA(參見，BioWorldToday 9(217)4(1998年11月10日，1998))。
也參考1998年4月30日發(fā)表的PCT公布號WO 98/17679(VertexPharmaceuticals incorporated)；1998年5月28日發(fā)表的WO 98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)；以及1999年2月18日發(fā)表的WO 99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)。
HCV已經(jīng)涉及肝臟的肝硬化，并引起肝細胞癌。目前，罹患HCV感染的患者的預(yù)后很差。HCV感染比其它形式的肝炎更難治療，因為缺乏與HCV感染有關(guān)的免疫力或減輕。目前的數(shù)據(jù)指出在診斷出肝硬化后的四年內(nèi)，存活率低于50％。診斷出患有局限性可切除的肝細胞癌的患者，具有10-30％的五年存活率，而患有局限性不可切除的肝細胞癌的那些患者僅具有低于1％的五年存活率。
參考WO 00/59929(美國專利第6,608,027號，受讓人BoehringerIngelheim(Canada)Ltd.；2000年10月12日發(fā)表)，其公開具有下式的肽衍生物
參考A.Marchetti等，Synlett，S1，1000-1002(1999)描述的HCV NS3蛋白酶的抑制劑的雙環(huán)類似物的合成。其中公開的化合物具有下式 也參考W.Han等，Bioorganic & Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，其描述某些含有烯丙基和乙基官能度的α-酮酰胺、α-酮酯和α-二酮的制備。
也參考WO 00/09558(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日發(fā)表)，其公開下式的肽衍生物
其中在本文中定義各種部分(elements)。該系列的示例性化合物為 也參考WO 00/09543(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日發(fā)表)，其公開下式的肽衍生物
其中在本文中定義各種部分。該系列的示例性化合物為 也參考美國專利6,608,027(Boehringer Ingelheim Canada)，其公開下列類型的NS3蛋白酶抑制劑 其中在本文中定義各種部分。
丙型肝炎的現(xiàn)行治療包括干擾素-α(INFα)和利巴韋林與干擾素的聯(lián)合治療。參見，例如，Beremguer等(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)98-112。這些治療苦惱于低的持續(xù)反應(yīng)率和頻繁的副作用。參見，例如Hoofnagle等(1997)N.Engl.J.Med.336:347。目前，沒有可供HCV感染使用的疫苗。
進一步參考2001年10月11日發(fā)表的WO 01/74768(受讓人VertexPharmaceuticals Inc)，其公開某些具有下列通式的化合物(R在本文中定義)，作為丙型肝炎病毒的NS3-絲氨酸蛋白酶抑制劑 在上述WO 01/74768中公開的特殊化合物具有下式 PCT公布號WO 01/77113；WO 01/081325；WO 02/08198；WO02/08256；WO 02/08187；WO 02/08244；WO 02/48172；WO 02/08251；以及2002年1月18日提交的正在待審的美國專利申請系列號10/052,386公開了作為丙型肝炎病毒的NS-3絲氨酸蛋白酶抑制劑的各種類型的肽和/或其它化合物。這些申請的公開內(nèi)容全部以引用的方式和結(jié)合到本文中。
需要HCV感染的新的治療和療法。需要可用來治療或預(yù)防或改善丙型肝炎的一或多種癥狀的化合物。
需要治療或預(yù)防或改善丙型肝炎的一或多種癥狀的方法。
需要使用在本文中提供的化合物，調(diào)節(jié)絲氨酸蛋白酶，特別是HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的活性的方法。
需要使用在本文中提供的化合物，調(diào)節(jié)HCV多肽的加工的方法。
發(fā)明概述在本發(fā)明的許多實施方案中，提供了新型的HCV蛋白酶抑制劑、含有一或多個所述化合物的藥用組合物、制備包含一或多個此類化合物的藥用組合物的方法，以及使用一或多個這類化合物或一或多個這類制劑治療或預(yù)防HCV或改善一或多種丙型肝炎的癥狀的方法。也提供調(diào)節(jié)HCV多肽與HCV蛋白酶的相互作用的方法。在本文公開的化合物的中，抑制HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的化合物是優(yōu)選的。本發(fā)明公開化合物或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物具有在結(jié)構(gòu)式1中所示的通用結(jié)構(gòu) 式1其中R1為H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳烷基-和雜芳烷基，或在NR9R10中的R9和R10彼此連接，使NR9R10形成四至八元的雜環(huán)基，而同樣獨立地，在CHR9R10中的R9和R10彼此連接，使CHR9R10形成四至八元的環(huán)烷基；R2和R3可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基；Y選自下列部分 其中G為NH或O；且R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基，或者(i)R17和R18彼此獨立地連接，形成三至八元的環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)同樣獨立地，R15和R19彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(iii)同樣獨立地，R15和R16彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(iv)同樣獨立地，R15和R20彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(v)同樣獨立地，R22和R23彼此連接，形成三至八元的環(huán)烷基或四至八元的雜環(huán)基；且(vi)同樣獨立地，R24和R25彼此連接，形成三至八元的環(huán)烷基或四至八元的雜環(huán)基；其中每個所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的，或任選由一個或多個選自以下的部分獨立地取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；⒎蓟酋；?、亞磺酰氨基(sulfonamido)、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、酰氨基(carboxamido)、烷氧基羰氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代、氰基和硝基。
在上文提及的定義中，優(yōu)選的烷基由1至10個碳原子構(gòu)成，優(yōu)選的烯基或炔基由2至10個碳原子構(gòu)成，優(yōu)選的環(huán)烷基由3至8個碳原子構(gòu)成，而優(yōu)選的雜烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基(雜環(huán)基)具有1至6個氧、氮、硫或磷原子。
由式1代表的化合物，本身或與在本文中公開的一或多種其它的適當藥物聯(lián)合，可用于治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)及相關(guān)病癥，并可用來調(diào)解丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性，預(yù)防HCV，或改善丙型肝炎的一或多種癥狀?？衫帽景l(fā)明的化合物，以及包含這類化合物的藥用組合物或制劑，來進行這類調(diào)節(jié)、治療、預(yù)防或改善。不受理論的限制，相信HCV蛋白酶可能是NS3或NS4a蛋白酶。本發(fā)明的化合物可抑制這類蛋白酶。它們也可調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
詳細描述在一個實施方案中，本發(fā)明公開由結(jié)構(gòu)式1代表的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，其中各部分如上所定義。
在另一個實施方案中，R1為NR9R10，且R9為H，R10為H或R14，
其中R14為H、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
在另一個實施方案中，R14選自下列基團 在另一個實施方案中，R2選自下列部分

在進一步的實施方案中，R3選自下列的基團
其中R31為OH或O-烷基；且R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
在另外的實施方案中，R3選自下列部分
在另一個實施方案中，G為NH。
在進一步的實施方案中，Y選自下列的部分
其中R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基，或者(i)R17和R18彼此獨立地連接，形成三至八元的環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)同樣獨立地，R15和R19彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(iii)同樣獨立地，R15和R16彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；且(iv)同樣獨立地，R15和R20彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；其中每個所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的，或任選由一個或多個選自以下的部分獨立地取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；喕酋０被?、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、酰氨基、烷氧基羰氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代、氰基和硝基。
在另外的實施方案中，該部分 為選自下列的基團 其中Y32為選自下列的基團
在進一步的實施方案中，Y選自
在另外的實施方案中，所述部分 為選自下列的結(jié)構(gòu)
在另外的實施方案中，R1為NHR14，其中R14為選自下列的基團 R2為選自下列的部分
R3為選自下列的部分
該部分 選自
且Y選自
本發(fā)明其它的實施方案公開在表1中所示的化合物。
表1

















也在表1A中提供根據(jù)本發(fā)明的另外的化合物表1A



如同上文使用的，并在本公開全文中，除非另外指明，應(yīng)理解下列的術(shù)語具有下列的意義″患者″包括人和動物。
″哺乳動物″意指人及其它哺乳動物。
″烷基″意指可以是直鏈或支鏈脂肪族烴基，且在鏈中包含大約1到大約20個碳原子。優(yōu)選的烷基基團在鏈中含有大約1到大約12個碳原子。更優(yōu)選的烷基基團在鏈中含有大約1到大約6個碳原子。支鏈意指一或多個低級烷基基團，如甲基、乙基或丙基，與直鏈的烷基鏈連接。″低級烷基″意指在鏈中具有大約1至大約6個碳原子的基團，其可以是直鏈或支鏈。術(shù)語″取代的烷基″意指該烷基基團可被一或多個取代基取代，其可以是相同或不同的，每個取代基各自獨立選自鹵代、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基)2、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。合適的烷基基團的非限制性實例包括甲基、乙基、正-丙基、異丙基和叔-丁基。
″烯基″意指含有至少一個碳-碳雙鍵的脂肪族烴基，且其可以是直鏈或支鏈，且在鏈中包含大約2到大約15個碳原子。優(yōu)選的烯基基團在鏈中具有大約2到大約12個碳原子；而更優(yōu)選在鏈中具有大約2到大約6個碳原子。支鏈意指一或多個低級烷基基團，如甲基、乙基或丙基，與直鏈的烯基鏈連接?！宓图壪┗逡庵冈阪溨芯哂写蠹s2至大約6個碳原子的基團，其可以是直鏈或支鏈。術(shù)語″取代的烯基″意指該烯基基團可被一或多個取代基取代，所述取代基可以是相同或不同的，各自獨立選自鹵代、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合適的烯基基團的非限制性實例包括乙烯基、丙烯基、正-丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正-戊烯基、辛烯基和癸烯基。
″炔基″意指含有至少一個碳-碳三鍵的脂肪族烴基，且其可以是直鏈或支鏈，且在鏈中包含大約2到大約15個碳原子。優(yōu)選的炔基基團在鏈中具有大約2到大約12個碳原子；而更優(yōu)選在鏈中具有大約2到大約4個碳原子。支鏈意指一或多個低級烷基基團，如甲基、乙基或丙基，與直鏈的炔基鏈連接?！宓图壢不逡庵冈阪溨芯哂写蠹s2至大約6個碳原子的基團，其可以是直鏈或支鏈。合適的炔基基團的非限制性實例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。術(shù)語″取代的炔基″意指該炔基基團可被一或多個取代基取代，其可以是相同或不同的，每個取代基各自獨立選自烷基、芳基和環(huán)烷基。
″芳基″意指芳香族單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其包含大約6到大約14個碳原子，優(yōu)選大約6到大約10個碳原子。所述芳基可任選由″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定義。合適的芳基基團的非限制性實例包括苯基和萘基。
″雜芳基″意指包括大約5到大約14個環(huán)原子，優(yōu)選大約5到大約10個環(huán)原子的芳香族單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其中一或多個環(huán)原子是碳以外的元素，例如氮、氧或硫，它們可單獨或組合存在。優(yōu)選的雜芳基含有大約5到大約6個環(huán)原子。所述″雜芳基″可任選由″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定義。在雜芳基詞根名字前的前綴氮雜、氧雜或硫雜，意指分別出現(xiàn)至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子?？扇芜x將雜芳基的氮原子氧化成相應(yīng)的N-氧化物。合適的雜芳基的非限制性實例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮)、異唑基、異噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋呫基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喔啉基、2，3-二氮雜萘基(phthalazinyl)、羥吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋呫基、吲哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。術(shù)語″雜芳基″也意指部分飽和的雜芳基部分，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。
″芳烷基″或″芳基烷基″意指芳基-烷基-基團，其中該芳基和烷基如同前文所述。優(yōu)選的芳烷基包括低級烷基基團。合適的芳烷基基團的非限制性實例包括芐基、2-苯乙基和萘甲基。通過烷基與母體部分連接。
″烷芳基″意指烷基-芳基-基團，其中該烷基和芳基如同前文所述。優(yōu)選的烷芳基包括低級烷基基團。合適的烷芳基基團的非限制性實例為甲苯基。通過芳基與母體部分連接。
″環(huán)烷基″意指非-芳香族單-或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其包括大約3至大約10個碳原子，優(yōu)選大約5至大約10個碳原子。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)含有大約5至大約7個環(huán)原子。環(huán)烷基可任選由一或多個″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在上文中的定義。合適的單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。合適的多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括1-萘烷基、降冰片基(norbornyl)、金剛烷基等，以及部分飽和的物質(zhì)，例如茚滿基、四氫萘基等。
″鹵素″或″鹵代″意指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯和溴。
″環(huán)系統(tǒng)取代基″意指與芳香族或非-芳香族環(huán)系統(tǒng)連接的取代基，其例如代替在該環(huán)系統(tǒng)上可用的氫。環(huán)系統(tǒng)取代基可以是相同或不同的，各自獨立選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷芳基、雜芳烷基、雜芳烯基、雜芳炔基、烷基雜芳基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、?；?、芳?；?、鹵代、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳氧羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺酰基、芳基磺?；?、雜芳基磺?；⑼榱蚧?、芳硫基、雜芳硫基、芳烷硫基、雜芳烷硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可以是相同或不同的，并各自獨立選自氫、烷基、芳基、環(huán)烷基和芳烷基?！瀛h(huán)系統(tǒng)取代基″也可意指單一部分，其同時代替在環(huán)系統(tǒng)上的兩個相鄰碳原子上的兩個可用的氫(每個碳上一個H)。這類部分的實例是亞甲二氧基、亞乙二氧基、-C(CH3)2-等，其形成例如 的部分。
″雜環(huán)基″意指非芳香族的飽和單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其包含大約3至大約10個環(huán)原子，優(yōu)選大約5到大約10個環(huán)原子，其中在該環(huán)系統(tǒng)中的一或多個原子是碳以外的元素，例如氮、氧或硫，它們可單獨或組合存在。在環(huán)系統(tǒng)中不存在相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜環(huán)基包含大約5至大約6個環(huán)原子。在雜環(huán)詞根名字前的前綴氮雜、氧雜或硫雜，意指分別出現(xiàn)至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子。任何在雜環(huán)基環(huán)中的-NH均可以以被保護的基團，例如作為-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基團等存在；也將這類保護視為本發(fā)明的一部分。所述雜環(huán)基可任選由一或多個″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定義?？扇芜x將雜環(huán)基的氮或硫原子氧化成相對應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適的單環(huán)雜環(huán)基環(huán)的非限制性實例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻唑烷基、1，4-二氧六環(huán)基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯等。
應(yīng)注意到在本發(fā)明的環(huán)系統(tǒng)所含有的雜原子中，在與N、O或S相鄰的碳原子上沒有羥基基團，而且在與其它雜原子相鄰的碳原子上沒有N或S基團。因此，例如在環(huán)中 沒有-OH直接連接在標號為2和5的碳上。
也應(yīng)注意到互變異構(gòu)形式，例如下列的部分 在本發(fā)明的某些實施方案中認為它們是等同的。
″炔烷基″意指炔基-烷基-基團，其中該炔基和烷基如同前文所述。優(yōu)選的炔烷基含有低級炔基和低級烷基基團。通過烷基與母體部分連接。合適的炔烷基基團的非限制性實例包括炔丙基甲基。
″雜芳烷基″意指雜芳基-烷基-基團，其中該雜芳基和烷基如同前文所述。優(yōu)選的雜芳烷基含有低級烷基基團。合適的芳烷基基團的非限制性實例包括吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通過烷基與母體部分連接。
″羥烷基″意指HO-烷基-基團，其中烷基如同前述所定義。優(yōu)選的羥烷基含有低級烷基。合適的羥烷基基團的非限制性實例包括羥甲基和2-羥乙基。
″?；逡庵窰-C(O)-、烷基-C(O)-或環(huán)烷基-C(O)-基團，其中各種基團如同前文所述。通過羰基與母體部分連接。優(yōu)選的?；械图壨榛：线m的?；鶊F的非限制性實例包括甲?；?、乙酰基和丙?；?br> ″芳?；逡庵阜蓟?C(O)-基團，其中該芳基基團如同前文所述。通過羰基與母體部分連接。合適的基團的非限制性實例包括苯甲?；?-萘?；?。
″烷氧基″意指烷基-O-基團，其中該烷基基團如同前文所述。合適的烷氧基基團的非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基和正-丁氧基。通過醚氧與母體部分連接。
″芳氧基″意指芳基-O-基團，其中該芳基基團如同前文所述。合適的芳氧基基團的非限制性實例包括苯氧基和萘氧基。通過醚氧與母體部分連接。
″芳烷氧基″意指芳烷基-O-基團，其中該芳烷基如同前文所述。合適的芳烷氧基基團的非限制性實例包括芐氧基和1-或2-萘甲氧基。通過醚氧與母體部分連接。
″烷硫基″意指烷基-S-基團，其中該烷基基團如同前文所述。合適的烷硫基基團的非限制性實例包括甲硫基和乙硫基。通過硫與母體部分連接。
″芳硫基″意指芳基-S-基團，其中該芳基基團如同前文所述。合適的芳硫基基團的非限制性實例包括苯硫基和萘硫基。通過硫與母體部分連接。
″芳烷硫基″意指芳烷基-S-基團，其中該芳烷基基團如同前文所述。合適的芳烷硫基基團的非限制性實例是芐硫基。通過硫與母體部分連接。
″烷氧羰基″意指烷基-O-CO-基團。合適的烷氧羰基基團的非限制性實例包括甲氧羰基和乙氧羰基。通過羰基與母體部分連接。
″芳氧羰基″意指芳基-O-C(O)-基團。合適的芳氧羰基基團的非限制性實例包括苯氧羰基和萘氧羰基。通過羰基與母體部分連接。
″芳烷氧羰基″意指芳烷基-O-C(O)-基團。合適的芳烷氧羰基基團的非限制性實例為芐氧羰基。通過羰基與母體部分連接。
″烷基磺酰基″意指烷基-S(O2)-基團。優(yōu)選的基團是其中烷基基團為低級烷基的那些基團。通過磺酰基與母體部分連接。
″芳基磺酰基″意指芳基-S(O2)-基團。通過磺酰基與母體部分連接。
術(shù)語″取代的″意指由選自指定的基團代替在指明的原子上的一或多個氫，條件為在現(xiàn)有情況下不超過該指明的原子的正常價數(shù)，且該取代產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物。只要這類組合結(jié)果產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物，取代基和/或變量的組合就是允許的?！宸€(wěn)定的化合物″或″穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)″意指一化合物足夠穩(wěn)定，能承受從反應(yīng)混合物中分離至有用程度的純度，并配制成有效的治療劑。
當指示取代基、化合物、組合試劑等的數(shù)目時，術(shù)語″一或多個″或″至少一個″，依據(jù)前后文，意指出現(xiàn)或添加至少一個，并最高達到在化學(xué)或物理上可容許的最大數(shù)目的取代基、化合物、組合試劑等。這類技術(shù)和知識在本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的范圍內(nèi)。
術(shù)語″任選取代的″意指可視需要用指定的基團、原子團或部分取代。
對化合物而言，術(shù)語″分離的″或″以分離的形式″，意指所述化合物在從合成過程或天然來源或其組合中分離后的物理狀態(tài)。對化合物而言，術(shù)語″純化的″或″以純化的形式″，意指在從本文中描述或技術(shù)少熟練人員熟知的純化過程獲得該化合物后的物理狀態(tài)，其具有足夠的純度，可通過本文中描述的或技術(shù)少熟練人員熟知的標準分析技術(shù)鑒定。
也應(yīng)注意到，假設(shè)在本文的正文、流程、實施例和表格中，任何具有不飽和價數(shù)的碳或雜原子具有滿足價數(shù)的氫原子。
當稱化合物中的官能基是″保護的″時，這意指該基團是經(jīng)過修改的形式，從而使該化合物經(jīng)歷反應(yīng)時，在保護位置排除不想要的副反應(yīng)。將借通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員，以及通過參考教科書，例如T.W.Greene等，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York，識別合適的保護基團。
當任何變數(shù)(例如芳基、雜環(huán)、R2等)在任何成分或在式1中出現(xiàn)一次以上時，其在每次出現(xiàn)時的定義獨立于其在其它地方每次出現(xiàn)處的定義。
當在本文中使用時，術(shù)語″組合物″意欲包含含有指定量的特定成分的產(chǎn)物，以及任何直接或間接由指定量的特定成分的組合獲得的產(chǎn)物。
在本文中也設(shè)計本發(fā)明的化合物的前藥和溶劑合物。當在本文中使用時，術(shù)語″前藥″代表為藥物前體的化合物，當將其給予患者時，通過代謝或化學(xué)過程經(jīng)歷化學(xué)轉(zhuǎn)變，產(chǎn)生式1的化合物，或其鹽和/或溶劑合物。在T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel DeliverySystems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series中，以及在Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche編輯，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中提供了前藥的討論，兩者均通過引用結(jié)合到本文中。
″溶劑合物″意指本發(fā)明化合物與一或多種溶劑分子的物理締合。該物理締合涉及各種程度的離子和共價鍵結(jié)合，包括氫鍵。在某些例子中，溶劑合物將能夠分離，例如當將一或多個溶劑分子并入結(jié)晶固體的晶格中時。″溶劑合物″包括溶液-相和可分離溶劑合物兩者。合適的溶劑合物的非限制性實例包括乙醇化物、甲醇化物等。″水合物″為其中該溶劑分子為H2O的溶劑合物。
″有效量″或″治療有效量″意在敘述的本發(fā)明化合物或組合物的量在抑制CDK(s)上是有效的，并因此產(chǎn)生所需的治療、改善、抑制或預(yù)防效果。
可形成鹽的式1化合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。除非另外指明，在本文中提及式1化合物時，應(yīng)該理解也包括其鹽。當在本文中使用時，術(shù)語″鹽″表示與無機和/或有機酸形成的酸加成鹽，以及與無機和/或有機堿形成的堿加成鹽。此外，當式1化合物含有堿性部分，例如但不限于吡啶或咪唑，和酸性部分，例如但不限于羧酸兩者時，可形成兩性離子(″內(nèi)鹽″)，并也包括在本文中使用的術(shù)語″鹽″中。藥學(xué)上可接受的(即無毒性、生理學(xué)上可接受的)鹽是優(yōu)選的，雖然也可使用其它的鹽?？山柚缡故?化合物與一定量(如等當量)的酸或堿，在其中使鹽沉淀的介質(zhì)或在含水介質(zhì)中反應(yīng)，接著冷凍干燥，形成式1化合物的鹽。
示例性的酸加成鹽類包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(也稱為甲苯基磺酸鹽)等。此外，由例如P.Stahl等，Camille G.(編輯)藥用鹽手冊，特性、選擇和用途(Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use)，(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等，ThePractice of Medicinal Chemistry(1996)，Academic Press，New York；以及在The Orange Book(Food & Drug Administration，Washington，D.C.在其網(wǎng)址上)中，討論了一般認為適合用來從堿性藥學(xué)化合物來形成在藥學(xué)上有用的鹽類的酸。這些公開的內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
示例性的堿加成鹽包括銨鹽、堿金屬鹽，如鈉、鋰和鉀鹽、堿土金屬鹽，如鈣和鎂鹽，與有機堿(例如有機胺)所成的鹽，如二環(huán)己胺、叔-丁胺，以及與氨基酸如精氨酸、離氨酸等所成的鹽。可利用試劑將堿性含氮基團季銨化，如低級烷基鹵化物(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、二乙酯和二丁酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、十二烷基和硬脂?；穆然?、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵化物(例如芐基和苯乙基的溴化物)及其它。
為了本發(fā)明，所有預(yù)定為藥學(xué)上可接受的鹽的這類酸加成鹽和堿加成鹽均在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并認為所有的酸加成鹽和堿加成鹽均等于相應(yīng)的化合物的游離形式。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酯包括下列各組(1)通過羥基基團的酯化作用而獲得的羧酸酯，其中酯類的羧酸部分的非-羰基部分選自直鏈或支鏈的烷基(例如乙酰基、正-丙基、叔-丁基或正-丁基)、烷氧烷基(例如甲氧甲基)、芳烷基(例如芐基)、芳氧烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任選由例如鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，如烷基-或芳烷基磺酰基(例如甲烷磺?；?；(3)氨基酸酯(例如L-纈氨?；騆-異亮氨?；?；(4)膦酸酯和(5)單-、二-或三-磷酸酯?？赏ㄟ^例如C1-20醇或其反應(yīng)性衍生物，或通過2，3-二(C6-24)?；视?，將磷酸酯進一步酯化。
式1的化合物，及其鹽、溶劑合物、酯和前藥，可以其互變異構(gòu)形式存在(例如酰胺或亞氨基醚)。在本文中，所有的這類互變異構(gòu)形式被視為本發(fā)明的一部分。
打算使本發(fā)明的化合物(包括化合物的鹽、溶劑合物和前藥，以及前藥的鹽和溶劑合物)的所有的立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等)，如可能是因為在各種取代基上的不對稱碳而出現(xiàn)的那些異構(gòu)體，包括對映體形式(甚至可能在缺少不對稱碳時出現(xiàn))、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體形式均在本發(fā)明的范圍內(nèi)，位置異構(gòu)體(例如4-吡啶基和3-吡啶基)也是如此。本發(fā)明化合物的各立體異構(gòu)體可以是，例如基本上不含其它異構(gòu)體，或可以混合成為例如外消旋物，或帶有所有其它的，或其它選擇的立體異構(gòu)體。本發(fā)明的手性中心可具有S或R構(gòu)型，如同由IUPAC 1974推薦書定義的。術(shù)語″鹽″、″溶劑合物″、″前藥″等的使用，旨在等同地應(yīng)用在本發(fā)明化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、位置異構(gòu)體、外消旋物或前藥的鹽、溶劑合物和前藥上。
打算將式1化合物，以及式1化合物的鹽、溶劑合物和前藥的多形形式納入本發(fā)明內(nèi)。
應(yīng)了解式1化合物在本文中討論的治療應(yīng)用上的用途，可適用于每個化合物本身或一或多個式1化合物的混合或組合，如同在例如緊接著的下一段中說明的。相同的理解也適用于藥用組合物，其包含一種或多種這樣的化合物，以及涉及這樣的化合物的治療方法。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可具有藥理學(xué)特性；具體而言，式1化合物可以是HCV蛋白酶的抑制劑，每個化合物本身或一或多個式1化合物，可與一或多個選自式1中的化合物混合。所述化合物可用來治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)及相關(guān)病癥，并可用來調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性、預(yù)防HCV或改善丙型肝炎的一或多種癥狀。
可使用式1化合物來制備用來治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的藥物，例如，該方法包括使式1化合物與藥學(xué)上可接受的載體緊密接觸。
在其它的實施方案中，本發(fā)明提供藥用組合物，其包含作為活性成分的本發(fā)明的一種或多種化合物。藥用組合物通常還地包括至少一種藥學(xué)上可接受的載體稀釋劑、賦形劑或載體(在本文中統(tǒng)稱為載體原料)。因為其HCV抑制活性，這類藥用組合物具有治療丙型肝炎和相關(guān)病癥的用途。
在另一個實施方案中，本發(fā)明公開制備包含作為活性成分的本發(fā)明化合物的藥用組合物的方法。在本發(fā)明的藥用組合物和方法中，活性成分通常將與合適的載體原料混合給予，針對想要的給藥形式而適當?shù)剡x擇載體原料，即口服片劑、膠囊(填裝固體、填裝半固體或填裝液體)、構(gòu)成用的粉末、口服凝膠、酏劑、可分散的顆粒、糖漿、懸浮液等，并符合常規(guī)藥學(xué)實踐。例如，對于口服給藥用的片劑或膠囊形式，可將活性藥物組分與任何口服無毒性的藥學(xué)上可接受的惰性載體混合，如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘露糖醇、乙醇(液體形式)等。此外，在想要或需要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻入混合物中。散劑和片劑可包含從大約5到大約95％的本發(fā)明組合物。
合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖類、玉米增甜劑、天然和合成的樹膠，如阿拉伯樹膠、藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟。在潤滑劑中，可提及的用于這些劑型中的有硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括淀粉、甲基纖維素、瓜耳樹膠等。
合適時也可包括增甜劑和著色劑及防腐劑。在上文中提及的一些術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑等，在下文中有更詳細地討論。
此外，本發(fā)明的組合物可以持續(xù)釋放的形式配制，以便提供任一種或多種組分或活性成分的速率控制釋放，以發(fā)揮最大的治療效果，即HCV抑制活性等。持續(xù)釋放的適當劑型包括多層片劑，其含有具有不同崩解速率的各層，或充滿活性組分的控制釋放的聚合基質(zhì)，并制成片劑形式或含有這類充滿或包膠(encapsulated)多孔聚合基質(zhì)的膠囊。
液體形式的制劑包括溶液、懸浮液和乳劑。舉例來說，可提及水或水-丙二醇溶液，用于胃腸外注射，或為了口服溶液、懸浮液和乳劑，可加入增甜劑和鎮(zhèn)靜劑(pacifiers)。液體形式的制劑也可包括鼻內(nèi)給藥的溶液。
適合吸入的氣溶膠制劑可包括溶液和粉末形式的固體，可將其與藥學(xué)上可接受的載體，如惰性壓縮氣體，例如氮氣組合。
至于制備栓劑，首先熔化低熔點的蠟，如脂肪酸甘油酯，如可可脂的混合物，并通過攪拌或類似地混合使活性成分均勻地分散在其中。然后將熔化的均質(zhì)混合物倒入適當尺寸的模具中，使其冷卻并藉此固化。
也包括固體形式的制劑，計劃在臨用前將其轉(zhuǎn)變成液體形式的制劑，以供口服或胃腸外給藥。這類液體形式包括溶液、懸浮液和乳劑。
本發(fā)明的化合物也可經(jīng)皮傳遞。經(jīng)皮傳遞的組合物可采用霜劑、洗劑、氣溶膠和/或乳劑的形式，并可將其包括在本領(lǐng)域中用于該目的的傳統(tǒng)基質(zhì)或貯庫類型的經(jīng)皮貼片中。
本發(fā)明的化合物也可口服，靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)或皮下給藥。
本發(fā)明的化合物也可包括為單位劑型的制劑。在這類形式中，將制劑細分成含有適當量的活性組分的適當尺寸的單位劑量，例如達到所需目的的有效量。
在單位劑量的制劑中的本發(fā)明活性組合物的量，通常根據(jù)特殊的應(yīng)用，可從大約1.0毫克變化或調(diào)整到大約1,000毫克，優(yōu)選從大約1.0到大約950毫克，更優(yōu)選從大約1.0到大約500毫克，而典型的是從大約1到大約250毫克?？筛鶕?jù)患者的年齡、性別、體重和待治療疾病的嚴重性，改變所使用的實際劑量。這類技術(shù)為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知。
通常，可每天給予人含有活性成分的口服劑型1或2次。將根據(jù)臨床醫(yī)師的判斷調(diào)整給藥的用量和頻率。一般對于口服給藥推薦的日劑量方案可在每天大約1.0毫克到大約1,000毫克范圍內(nèi)，以單一或分開的劑量給予。
在下文中描述一些有用的名詞膠囊-意指由甲基纖維素、聚乙烯醇或變性明膠或淀粉制備的特殊容器或包封外殼，用以容納或含有包括活性成分的組合物。硬殼膠囊通常是由較高凝膠強度的骨和豬皮明膠的混合物制成。膠囊本身可含有少量的染料、不透明劑、塑化劑和防腐劑。
片劑-意指壓縮或模壓的固體劑型，其含有活性成分與合適的稀釋劑?？赏ㄟ^壓縮混合物或通過濕法制粒、干法制粒而獲得的顆粒，或通過壓緊來制備片劑。
口服凝膠-意指活性成分分散或溶解于親水性固體基質(zhì)內(nèi)。
構(gòu)成用的粉末-意指含有活性成分和適當稀釋劑的粉末混合物，可將其懸浮于水或果汁中。
稀釋劑-意指通常構(gòu)成大部分組合物或劑型的物質(zhì)。合適的稀釋劑包括糖，如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇；衍生自小麥、玉米、稻米和馬鈴薯的淀粉；以及纖維素，如微晶纖維素。稀釋劑在組合物中的量的范圍可從總組合物的大約10到大約90％重量，優(yōu)選從大約25到大約75％，更優(yōu)選從大約30到大約60％重量，甚至更優(yōu)選從大約12到大約60％。
崩解劑-意指加在組合物中幫助它瓦解(崩解)并釋放藥物的原料。合適的崩解劑包括淀粉；″可溶于冷水″的經(jīng)修飾的淀粉，如羧甲基淀粉鈉；天然和合成的樹膠，如槐樹豆膠、刺梧桐樹膠、瓜耳樹膠、黃蓍膠和瓊脂；纖維素衍生物，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素，如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；藻酸鹽，如藻酸和藻酸鈉；粘土，如膨潤土；以及泡騰混合物。崩解劑在組合物中的量d范圍可從組合物的大約2到大約15％重量，優(yōu)選從大約4到大約10％重量。
粘合劑-意指將粉末結(jié)合或″粘合″在一起，并通過形成顆粒使它們粘結(jié)的物質(zhì)，因此在配制時用來作為″粘附劑″。已經(jīng)在稀釋劑或填充劑中獲得粘合劑加上粘結(jié)強度。合適的粘合劑包括糖，如蔗糖；衍生自小麥、玉米、稻米和馬鈴薯的淀粉；天然的樹膠，如阿拉伯樹膠、明膠和黃蓍膠；海藻的衍生物，如藻酸、藻酸鈉和藻酸鈣銨；纖維素材料，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉，以及羥丙基甲基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；以及無機物，如硅酸鋁鎂。粘合劑在組合物中的量的范圍可從組合物的大約2到大約20％重量，更優(yōu)選從大約3到大約10％重量，甚至更優(yōu)選從大約3到大約6％重量。
潤滑劑-意指加在劑型中，使片劑、顆粒等在已經(jīng)壓縮后，能夠通過降低摩擦力或磨損而從模具或沖模中釋放的物質(zhì)。合適的潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點的蠟；以及水溶性潤滑劑，如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇和d′l-亮氨酸。通常在壓縮前很晚的步驟中才加入潤滑劑，因為它必須出現(xiàn)在顆粒的表面，并在它們和壓片機的部件之間。潤滑劑在組合物中的量的范圍可從組合物的大約0.2到大約5％重量，優(yōu)選從大約0.5到大約2％，更優(yōu)選從大約0.3到大約1.5％重量。
助流劑(Glident)-防止結(jié)塊并改善顆粒的流動特征的材料，使得流動平順并均勻。合適的助流劑包括二氧化硅或滑石。助流劑在組合物中的量的范圍可從總組合物的大約0.1％到大約5％重量，優(yōu)選從大約0.5到大約2％重量。
著色劑-提供給組合物或劑型顏色的賦形劑。這類賦形劑可包括食品級染料，并將食品級的染料吸附在合適的吸附劑上，如粘土或氧化鋁。著色劑的量可從組合物的大約0.1變化到大約5％重量，優(yōu)選從大約0.1到大約1％。
生物利用度-意指與標準物或?qū)φ战M相比較，活性藥物成分或治療部分從給予的劑型被吸收至全身循環(huán)內(nèi)的速率和程度。
制備片劑的傳統(tǒng)方法是已知的。這類方法包括干式方法，如直接壓縮和壓縮通過壓緊產(chǎn)生的顆粒，或濕式方法，或其它特殊程序。制備其它給藥形式，例如膠囊、栓劑等的傳統(tǒng)方法也是已熟知的。
本發(fā)明的另一實施方案公開上文公開的本發(fā)明化合物或藥用組合物在治療疾病，例如丙型肝炎等中的用途。該方法包括對患有這樣的疾病，且需要這類治療的患者，給予治療有效量的本發(fā)明化合物或藥用組合物。
在又一個實施方案中，可使用本發(fā)明的化合物，以單一療法模式或以聯(lián)合療法(例如雙重聯(lián)合、三重聯(lián)合等)模式，例如與抗病毒和/或免疫調(diào)節(jié)劑聯(lián)合使用來治療人類的HCV。這類抗病毒和/或免疫調(diào)節(jié)劑的實例，包括利巴韋林(得自Schering-Plough Corporation，Madison，New Jersey)和LevovirinTM(得自ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，California)、VP 50406TM(得自Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS 14803TM(得自ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，California)、HeptazymeTM(得自Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX 497TM(得自Vertex Pharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、胸腺素(Thymosin)TM(得自SciClone Pharmaceuticals，San Mateo，California)、MaxamineTM(得自Maxim Pharmaceuticals，SanDiego，California)、麥考酚酸嗎乙酯(得自Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、干擾素(例如干擾素α、PEG-干擾素α綴合物)等?！錚EG-干擾素α綴合物″是與PEG分子共價連接的干擾素α分子。代表性的PEG-干擾素α綴合物包括干擾素α-2a(RoferonTM，得自Hoffman La-Roche，Nutley，New Jersey)，為聚乙二醇化的干擾素α-2a的形式(例如以商標名PegasysTM出售)、干擾素α-2b(IntronTM，得自Schering-PloughCorporation)，以聚乙二醇化的干擾素α-2b的形式(例如以商標名PEG-IntronTM出售)、干擾素α-2c(Berofor αTM，得自Boehringer Ingelheim，Ingelheim，Germany)，或通過測定天然存在的干擾素α的共有序列定義的共有干擾素(InfergenTM，得自Amgen，Thousand Oaks，California)。
如同較早陳述的，本發(fā)明也包括本發(fā)明的化合物的互變異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、對映體和其它立體異構(gòu)體。因此，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員意識到一些本發(fā)明的化合物可以以合適的異構(gòu)形式存在。打算將這類變化包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明它的再一個實施方案公開制備在本文中公開的化合物的方法?？赏ㄟ^本領(lǐng)域已知的幾種技術(shù)制備該化合物。在下列的反應(yīng)方案中概述了示例性程序。不應(yīng)將示例解釋為對本發(fā)明的范圍的限制，其在附錄的權(quán)利要求書中定義。其它的機械路徑和類似結(jié)構(gòu)對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，將是顯而易見的。
應(yīng)該理解，雖然下列的示例性方案描述了數(shù)個代表性本發(fā)明化合物的制備，但任何天然和非天然氨基酸兩者的適當取代作用將導(dǎo)致形成以這樣的取代為基礎(chǔ)的所需化合物。打算將這類變化納入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
縮寫在方案、制備和實施例的描述中使用的縮寫如下THF四氫呋喃DMFN，N-二甲基甲酰胺EtOAc乙酸乙酯AcOH醋酸HOOBt3-羥基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮EDCl1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽NMMN-甲基嗎啉ADDP1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶DEAD偶氮二羧酸二乙酯MeOH甲醇EtOH乙醇Et2O乙醚DMSO二甲亞砜HOBtN-羥基苯并三唑PyBrOP溴-三-吡咯烷六氟磷酸鹽DCM二氯甲烷DCC1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺TEMPO2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基Phg苯基甘氨酸Chg環(huán)己基甘氨酸Bn芐基Bzl芐基Et乙基Ph苯基iBoc異丁氧羰基iPr異丙基
tBu或But叔-丁基Boc叔-丁氧羰基Cbz芐氧羰基Cp環(huán)戊二烯基Ts對-甲苯磺酰基Me甲基HATUO-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸鹽DMAP4-N，N-二甲氨基吡啶BOP苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸鹽PCC吡啶氯鉻酸鹽KHMDS六甲基二硅疊氮化鉀或雙(三甲基甲硅烷基氨化)鉀NaHMDS六甲基二硅疊氮化鈉或雙(三甲基甲硅烷基氨化)鈉LiHMDS六甲基二硅疊氮化鋰或雙(三甲基甲硅烷基氨化)鋰10％Pd/C10％披鈀碳(按重量計)TG硫甘油實施例中間體的合成乙基酯1a的合成 根據(jù)由Monn和Valli(J.Org.Chem.1994，59，2773-2778)描述的程序，合成乙基酯1a。
中間體1的合成 步驟A 在0℃下，分小份將硼氫化鈉(924.5mg)加至在乙醇(50mL)中的二環(huán)酮1a的不均勻混合物中。攪拌反應(yīng)物30分鐘，TLC分析(乙酸乙酯/己烷；1∶1)顯示所有的起始原料均已耗盡。通過加入AcOH(3mL)使該反應(yīng)猝滅。以250mL乙酸乙酯稀釋該混合物，并以碳酸氫鈉的飽和水溶液(2×50mL)和鹽水(1×40mL)洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并在減低的壓力下濃縮。通過柱層析純化殘余物，得到產(chǎn)率92％的產(chǎn)物。
步驟B 在0℃下，以1.08g 60％NaH的懸浮液處理，在130mL無水四氫呋喃中的環(huán)戊醇1b的溶液。移除冷卻浴并攪拌所得的黃色溶液30分鐘。加入二硫化碳(16.2mL)，并攪拌該反應(yīng)45分鐘。然后逐滴加入碘代甲烷(16.8mL)，并再攪拌該混合物1小時。通過小心地加入飽和氯化銨水溶液(30mL)使該反應(yīng)猝滅。以80mL乙醚萃取該混合物并分離各層。以乙醚(2×80mL)反萃取含水層。以水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌合并的有機層，經(jīng)硫酸鎂干燥，并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度己烷至30％在己烷中的丙酮)，得到產(chǎn)率63％的黃色油狀的黃原酸鹽產(chǎn)物。
步驟C 利用干燥氮氣將在90mL甲苯中的黃原酸鹽1c的溶液脫氣。加入AIBN(150.4mg)和氫化三-正-丁基錫(3.7mL)。再將該反應(yīng)混合物脫氣，并在95℃下攪拌1小時。TLC分析(丙酮/己烷；1∶9)顯示所有的起始原料均已耗盡。在減低的壓力下移除所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于250mL乙醚中，并以氟化鉀的飽和水溶液(2×30mL)洗滌。將有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并在減低的壓力下濃縮。經(jīng)硅膠柱層析純化殘余物(梯度己烷至20％在己烷中的乙酸乙酯)，得到產(chǎn)率98％的產(chǎn)物。
步驟D 在0℃下，將N-Cbz起始原料1d(2.5g)溶解于80mL三氟乙酸中，接著加入20mL二甲硫。在0℃下攪拌該反應(yīng)混合物5分鐘，并移除冷卻浴。再攪拌該反應(yīng)5小時。在減低的壓力下除去所有的揮發(fā)物，并使殘余物在二氯甲烷(250mL)和1N NaOH水溶液(50mL)之間分配。以二氯甲烷(2×80mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。不需進一步純化產(chǎn)物(1.46g，97％產(chǎn)率)。
步驟E 在0℃下，攪拌在80mL無水二氯甲烷和60mL無水二甲基甲酰胺中的N-Boc-叔-丁基亮氨酸(1.46g)的溶液，并以HATU(3.26g)處理。逐滴加入在二氯甲烷(10mL)中的外消旋胺1e(1.42g)，接著加入N-甲基嗎啉(2.7mL)。將該混合物逐漸加溫至室溫，并攪拌過夜。在減低的壓力(高真空)下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于350mL乙醚中。以1N HCl水溶液(30mL)、飽和的NaHCO3水溶液(30mL)、水(30mL)和鹽水(30mL)洗滌有機層。將有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度乙醚/己烷；1∶9至5∶5)，得到產(chǎn)率72％的非對映體的產(chǎn)物1f和1g。
步驟F 將氫氧化鋰一水合物(79mg)加入到15mL四氫呋喃/水/甲醇(1∶1∶1)溶液中的300mg酯1f的溶液中。在室溫下攪拌該反應(yīng)大約3小時，直到通過TLC分析(乙醚/己烷；4∶6)未檢測出更多的起始原料為止。在減低的壓力下濃縮該混合物，并使殘余物在二氯甲烷(100mL)和1NHCl水溶液(20mL)之間分配。以二氯甲烷(2×20mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。獲得產(chǎn)率91％的白色固體狀產(chǎn)物1，其不需進一步純化。
中間體2的合成 步驟A 在N2下，將酮亞胺2a(50g，187.1mmol)在無水THF(400mL)中的攪拌的溶液冷卻至-78℃，并以在THF中的K-tBuO的1M溶液(220mL，1.15當量)處理。將該反應(yīng)混合物加溫至0℃，并攪拌1小時，再以溴甲基環(huán)丁烷(28mL，249mmol)處理。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物48小時，并在真空中濃縮。將殘余物溶解于Et2O(300mL)中，并以HCl水溶液(2M，300mL)處理。在室溫下攪拌所得的溶液5小時，并以Et2O(1公升)萃取。以NaOH(50％水溶液)將含水層堿化至pH～12-14，并以CH2Cl2(3×300mL)萃取。將合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾并濃縮，得到純的胺(2b，18g)，為無色的油。
步驟B 在0℃下，以二羧酸二-叔-丁酯(23g，105.4mmol)處理胺2b(18g，105.2mmol)的CH2Cl2(350mL)溶液，并在室溫下攪拌12小時。在反應(yīng)完成(TLC)后，在真空中濃縮該反應(yīng)混合物，并將殘余物溶解于THF/H2O(200mL，1∶1)，并以LiOH·H2O(6.5g，158.5mmol)處理，然后在室溫下攪拌3小時。濃縮該反應(yīng)混合物，并以Et2O萃取堿性的液層。以濃HCl將含水層酸化至pH～1-2，并以CH2Cl2萃取。將合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾并在真空中濃縮，得到2c，為無色粘性油，其無需任何進一步的純化而用于下一步驟。
步驟C 以BOP試劑(41.1g，93mmol)、N-甲基嗎啉(27mL)、N，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(9.07g，93mmol)處理酸2c(15.0g，62mmol)的CH2Cl2(250mL)溶液，并在室溫下攪拌過夜。以1NHCl水溶液(250mL)稀釋該反應(yīng)混合物，分離各層，并以CH2Cl2(3×300mL)萃取含水層。將合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾并在真空中濃縮，通過層析法純化(SiO2，EtOAc/Hex 2∶3)，產(chǎn)生無色固體狀的酰胺2d(15.0g)。
步驟D 在0℃下，以LiAlH4的溶液(1M，93mL，93mmol)逐滴處理在無水THF(200mL)中的酰胺2d(15g，52.1mmol)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物1小時，并在0℃下小心地以KHSO4的溶液(10％水溶液)使其猝滅，然后攪拌0.5小時。以HCl水溶液(1M，150mL)稀釋該反應(yīng)混合物，并以CH2Cl2(3×200mL)萃取。以HCl水溶液(1M)、飽和的NaHCO3、鹽水洗滌合并的有機層，并干燥(MgSO4)。過濾該混合物，并在真空中濃縮，得到粘性無色油狀的2e(14g)。
步驟E 以Et3N(10.73mL，74.4mmol)和丙酮合氰化氫(10.86g，127.57mmol)處理在CH2Cl2(50mL)中的醛2e(14g，61.6mmol)的溶液，并在室溫下攪拌24小時。在真空中濃縮該反應(yīng)混合物，并以HCl水溶液(1M，200mL)稀釋，再萃取至CH2Cl2(3×200mL)中。以H2O、鹽水洗滌合并的有機層，干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮并通過層析法純化(SiO2，EtOAc/Hex 1∶4)，得到無色液體狀的2f(10.3g)。
步驟F 以氰醇2f處理用HCl飽和的甲醇*(通過在0℃下使HCl氣體鼓泡通過CH3OH(700mL)來制備)，并加熱至回流24小時。在真空中濃縮該反應(yīng)，產(chǎn)生2g，其無須純化而直接用于下一步驟中。
*或者，也可使用通過將AcCl加至無水甲醇中而制備的6M HCl。
步驟G 在-78℃下，以Et3N(45.0mL，315mmol)和Boc2O(45.7g，209mmol)處理在CH2Cl2(200mL)中的胺鹽酸鹽2g的溶液。然后在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物過夜，并以HCl(2M，200mL)稀釋，然后萃取至CH2Cl2內(nèi)。將合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，并通過層析法純化(EtOAc/Hex 1∶4)，產(chǎn)生羥基酯2h。
步驟H 以LiOH·H2O(645mg，15.75mmol)處理在THF/H2O(1∶1)中的甲基酯2h(3g，10.5mmol)的溶液，并在室溫下攪拌2小時。以HCl水溶液(1M，15mL)酸化該反應(yīng)混合物，并在真空中濃縮。在真空中將殘余物干燥，按定量產(chǎn)率得到2i。
步驟I 以NH4Cl(2.94g，55.5mmol)、EDCl(3.15g，16.5mmol)、HOOBt(2.69g，16.5mmol)和NMM(4.4g，44mmol)處理在CH2Cl2(50mL)和DMF(25mL)中的酸2i(得自上文)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物3天。在真空下移除溶劑，并以HCl水溶液(250mL)稀釋殘余物，然后以CH2Cl2萃取。以飽和的NaHCO3水溶液洗滌合并的有機層，干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，獲得2j，原樣在下列的步驟中使用它。(或者也可通過在0℃下，在50mLCH3OH中，使2f(4.5g，17.7mmol)與H2O2水溶液(10mL)、LiOH·H2O(820mg，20.8mmol)反應(yīng)0.5小時，直接獲得2j)。
步驟J 將在先前步驟中獲得的2j溶液，溶解于在二氧六環(huán)中的4N HCl中，并在室溫下攪拌2小時。在真空中濃縮該反應(yīng)混合物，得到固體狀的中間體2，其可直接使用不需進一步純化。
中間體3的合成 步驟A 將L-叔-亮氨酸(1當量，10g)慢慢地加至氫化鋁鋰的懸浮液(150mmol，在THF中的1M溶液)中?；亓髟摲磻?yīng)混合物6小時。將該混合物冷卻至0℃，并通過加入10mL的10％NaOH水溶液和10mL水使其猝滅。在室溫下攪拌該混合物10分鐘，然后以二碳酸二-叔-丁酯(1.1當量，18.22g)處理，并在60℃下攪拌該混合物過夜。通過硫酸鎂過濾該反應(yīng)混合物。濃縮濾液，并在硅膠上層析殘余物，得到產(chǎn)率62％的產(chǎn)物3b。
步驟B 將三苯膦(3當量)和醇3b(1當量)加入到50mL無水THF中的鄰苯二甲酰亞胺(1.01g)的溶液中。在冰-水浴中冷卻該混合物，并逐滴加入偶氮二羧酸二異丙酯(2.5當量)。在0℃下攪拌所得的混合物10分鐘，并加溫至室溫，再攪拌大約2.5小時，直到通過TLC(乙酸乙酯/己烷；3∶7)未檢測到更多的起始原料為止。在減低的壓力下濃縮該混合物。將殘余物再懸浮于80mL二氯甲烷中。濾掉固體。濃縮濾液至其一半的體積，并加入己烷(30mL)。濾掉固體。在減低的壓力下濃縮濾液，并在硅膠上層析殘余物(梯度乙酸乙酯/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物3c。
步驟C 將N-Boc保護的胺3c(1.4g)溶解于20mL在二氧六環(huán)中的4M HCl溶液中。攪拌該混合物大約2小時。在真空下除去所有的揮發(fā)物。對產(chǎn)物3d不需進行任何更進一步的純化。
步驟D 在0℃下，以光氣(10mL，在甲苯中的15％溶液)處理在20mL二氯甲烷和20mL飽和NaHCO3水溶液中的胺鹽酸鹽3d(1.14g)的混合物，并攪拌2小時。以100mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以30mL冷的飽和NaHCO3水溶液洗滌。將有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并進一步以10mL甲苯稀釋。濃縮該混合物，并保持產(chǎn)物3為在甲苯中的0.2M溶液。
中間體4的合成 步驟A 在0℃下，將溴化環(huán)丙基鎂(4當量，7.68mmol)加入到THF中的酰胺4a(0.5g，1當量)中。將該反應(yīng)物加溫至最高達室溫15分鐘后，在室溫下攪拌該反應(yīng)5小時，然后通過加入1N HCl使其猝滅。以EtOAc稀釋該反應(yīng)，并以鹽水洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥，通過柱層析以在己烷中的10％EtOAc純化，得到0.2g的產(chǎn)物4b。產(chǎn)率43.1％。
步驟B 將4M HCl(在二氧六環(huán)中)加至N-Boc保護的胺4b(0.2g)中。在室溫下攪拌該反應(yīng)50分鐘，TLC指出該反應(yīng)已經(jīng)完成。濃縮該混合物至干燥，得到0.162g的產(chǎn)物4c。
步驟C
在0℃下，將4c加入到CH2Cl2中的光氣(2當量，1.65mmol)、NaHCO3(5mL飽和水溶液)中。在室溫下攪拌該混合物2.5小時。通過漏斗分離。有機層經(jīng)Na2SO4(無水的)干燥。用冷卻浴將其濃縮至一半的體積。稀釋至10mL，得到所需的異氰酸酯4，為在二氯甲烷中的0.083M的溶液。
中間體5的合成 步驟A 在-78℃、氮氣氛下，將KHMDS(200mL在甲苯中的0.5M溶液)逐滴加入到無水THF(200mL)中的環(huán)己烷羧酸甲酯5a(11.1g，78mmol)的攪拌溶液中。當加入完成時，將該反應(yīng)維持于該溫度下0.5小時，然后加入芐基氯甲基醚(18.6mL，134mmol)。容許將該反應(yīng)物加溫至室溫過夜，并加入水(100mL)。含水處理提供了殘余物，通過硅膠柱層析純化，使用EtOAc；己烷(1∶10)作為洗脫液，得到所需的、不純的中間體醚(14.98g)，為無色的油。
在室溫下，使10％Pd/C(0.5g)和前述的粗品醚(4.1g)在MeOH(80mL)中的黑色懸浮液暴露在氮氣氛(氣球)下過夜。通過硅藻土墊過濾該反應(yīng)物，并以甲醇充分洗滌固體。在減低的壓力下濃縮合并的濾液，并通過硅膠柱層析純化粗產(chǎn)物，使用EtOAc；己烷(1∶5)，得到伯醇(5b；0.62g)，為無色的油。
步驟B 在0℃、氮氣氛下，將甲烷磺酰氯(0.31mL)加至伯醇(5b；0.62g)的攪拌溶液中，接著加入三乙胺(0.75mL)。在該溫度下攪拌所得的混合物0.5小時。將該反應(yīng)混合物萃取至EtOAc中，并以1M HCl、飽和NaHCO3水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)并濃縮。獲得黃色油狀的殘余物(甲磺酸鹽5c；0.74g)，其無須純化而直接用于下一步驟中。
步驟C 將二甲基甲酰胺(20mL；無水的；Aldrich)加至氫化鈉(0.56g，Aldrich)中，并在懸浮液中加入叔-丁基硫醇，同時在氮氣氛下，在冰浴中冷卻。一旦加入完成，便加入甲磺酸鹽(5c；按照上文從2.00g醇5b制備)，并在室溫下攪拌所得的混合物過夜。使反應(yīng)物在EtOAc和水之間分配，并分離有機相，干燥(MgSO4)。經(jīng)硅膠柱層析，使用EtOAc-己烷(2∶98)，得到甲基酯-硫化物(5d；1.75g)。在液相中加入EtOAc，并加入10％HCl水溶液，直到水層pH＝1為止。分離有機層，以水洗滌，干燥，并在減低的壓力下濃縮，得到白色固體狀的硫化物-羧酸(5e；0.747g)。
步驟D 將過硫酸氫鉀制劑(18.00g；Aldrich)加入到甲醇(75mL)中的硫化物(5e；2.287g)中，并在室溫下攪拌所得的白色懸浮液過夜。在減低的壓力下除去揮發(fā)物，并使白色固體在EtOAc和水之間分配。分離有機相，干燥并濃縮，提供砜(5f；2.52g；含有一些溶劑)。
步驟E 以DPPA(1當量，1.33mL，d 1.270)和三乙胺(1當量，0.85mL，d 0.726)處理在50mL甲苯中的酸5f(1.61g)的溶液。將該混合物加熱至100℃2小時。以飽和的NaHCO3水溶液稀釋該反應(yīng)混合物，并以二氯甲烷(2×100mL)萃取。以飽和的NaHCO3水溶液和鹽水洗滌合并的有機層。有機層經(jīng)MgSO4干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮，直到剩下大約20mL溶劑為止。使用甲苯將產(chǎn)物5的溶液調(diào)節(jié)為0.2M異氰酸酯的濃度。
中間體6的合成
步驟A 將肼(0.9mL，28.68mmol，1.4當量)加入到100mLMeOH中的鄰苯二甲酰亞胺3c(7g)的溶液中，并使該混合物回流(在N2下)6小時。TLC顯示存在一些起始原料，加入更多的肼(0.45mL)，并在室溫下繼續(xù)攪拌過夜。形成白色的沉淀物。濾掉固體，并濃縮濾液，產(chǎn)生白色固體狀的產(chǎn)物6a(4.48g)。
步驟B 將在100mL二氯甲烷中的胺6a(2.16g，10mmol)的溶液冷卻至0℃，并以三乙胺(2當量，2.8mL)處理。逐滴加入甲烷磺酰氯(1.2當量，0.93mL)。攪拌不均勻的混合物過夜(溫度0至25℃)。濾掉固體，并以飽和的氯化銨水溶液(100mL)和鹽水(100mL)洗滌濾液。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。將殘余物溶解于少量的二氯甲烷/乙酸乙酯(約10mL)中，并濾掉不溶的白色固體。經(jīng)硅膠柱層析純化濾液，得到濃稠半固體狀的產(chǎn)物6b(2.7g)。
步驟C 將在50mL無水DMF中的磺酰胺6b(2.2g，7.5mmol)的溶液冷卻至0℃，并以碳酸銫(3當量，7.34g)處理。逐滴加入碘甲烷(5當量，2.34mL)，并攪拌該混合物45分鐘。移除冷卻浴，并再攪拌該混合物4小時。通過加入飽和的氯化銨水溶液(100mL)使該反應(yīng)猝滅，并以乙酸乙酯(2×100mL)萃取。以水(200mL)、鹽水(200mL)洗滌合并的有機層，經(jīng)硫酸鈉干燥。過濾有機層并濃縮。在硅膠上層析殘余物，得到產(chǎn)物6c(2.16g)。
步驟D 在室溫下，將N-Boc保護的胺6c(2.1g，6.82mmol)溶解于20mL在二氧六環(huán)中的4M HCl中。攪拌該反應(yīng)混合物1小時，然后在減低的壓力下除去所有的揮發(fā)物，得到定量產(chǎn)率的產(chǎn)物6d。
步驟E 在0℃下，以光氣(在甲苯中的15％溶液)處理在二氯甲烷和飽和的NaHCO3水溶液中的胺鹽酸鹽6d的混合物，并攪拌2小時。以二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以冷的飽和NaHCO3水溶液洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并以甲苯進一步稀釋。濃縮該混合物，并調(diào)節(jié)產(chǎn)物6，使維持為在甲苯中的0.2M溶液。
中間體7的合成
根據(jù)對異氰酸酯6的描述，制備異氰酸脂7。在磺酰胺合成步驟中，使用2-噻吩磺酰氯代替甲烷磺酰氯。
中間體8的合成 步驟A 將Dess-Martin全碘烷(periodinane)(30.25g；Aldrich)加至4-戊炔-1-醇，8a(4.15g，Aldrich)的溶液中，并攪拌所得的混合物45分鐘，然后加入(叔-丁氧羰基亞甲基)三苯基正膦(26.75g；Aldrich)。攪拌所得的深色反應(yīng)物過夜，以乙酸乙酯稀釋，以亞硫酸鈉水溶液、飽和的碳酸氫鈉水溶液、水、鹽水洗滌，并干燥。在減低的壓力下除去揮發(fā)物，并通過硅膠柱層析純化殘余物，使用在己烷中的1％乙酸乙酯作為洗脫液，得到所需的化合物8b(3.92g)。也獲得一些不純的流份，但在此時將它擱置一邊。
步驟B 使用在正-丙醇(20mL；Aldrich)中的烯8b(1.9g)、在正-丙醇(40mL)中的氨基甲酸芐酯(4.95g；Aldrich)、在水(79mL)中的NaOH(1.29g)、次氯酸叔-丁酯(3.7mL)、在正-丙醇(37.5mL)中的(DHQ)2PHAL(0.423g；Aldrich)和鋨酸鉀脫水物(0.1544g；Aldrich)，以及在Angew.Chem.Int.Ed.Engl(1998)，35，(23/24)，第2813-7頁中提出的程序，得到粗產(chǎn)物，通過硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶5)，得到所需的氨基醇8c(1.37g，37％)，為白色固體。
步驟C 將在二氧六環(huán)中的4M HCl(20mL；Aldrich)加至酯8c(0.700g)中，并將所得的混合物在室溫下靜置過夜。在減低的壓力下除去揮發(fā)物，得到白色固體狀的酸8d(0.621g)。
步驟D 在室溫下將BOP試劑(3.65g；Sigma)加至羧酸8d(2.00g)的二氯甲烷(20mL)溶液和丙烯胺(0.616mL)中，接著加入三乙胺(3.45mL)，并攪拌所得的混合物過夜。使該反應(yīng)混合物在EtOAc和10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和的碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(硫酸鎂)。通過硅膠柱層析純化粗制的反應(yīng)產(chǎn)物，使用(EtOAc∶己烷；70∶30)作為洗脫液，提供所需的酰胺8e(1.73g)，為粘性黃色油。
步驟E 在室溫下攪拌在5mL三氟乙酸/二甲硫醚的4∶1混合物中的N-Cbz胺8e(85.8mg)的溶液大約3小時。在減低的壓力下除去所有的揮發(fā)物。將產(chǎn)物8置于高真空下大約3小時，并直接使用不需進一步純化。
中間體9的合成步驟1 將鋅粉(21g，320mmol)、二氯鋯苯(zirconecene dichloride)(14.04g，48mmol)加入到THF(200mL)中的1a(13.24g，40mmol，按照Monn和Valli，J.Org.Chem.，1994，59，2773-2778的描述來制備)的溶液中，且最后逐滴加入二溴甲烷(6.18mL，44mmol)。將該反應(yīng)混合物加熱至回流5小時。然后將其冷卻至室溫，然后使用冰浴冷卻至0℃。逐滴加入水(小心放熱的)，直到停止放出氣體為止。加入乙醚(400mL)，并通過硅藻土墊過濾該混合物。以乙醚(200mL)洗滌濾餅，并以水(2×500mL)、1N HCl水溶液(500mL)、水(500mL)、鹽水(500mL)洗滌合并的濾液，干燥(Na2SO4)，過濾并濃縮。通過快速層析法純化粗制的物質(zhì)，使用10/90至20/80的EtOAc/己烷，得到6.82g的9a，為淡黃色的油。
步驟2 在0℃、氮氣氛下，將二乙基鋅(1M在庚烷中，73mL，73mmol)加至二氯甲烷(100mL)中。在30分鐘內(nèi)逐滴加入三氟乙酸(5.6mL，73mmol)。維持溫度另外15-20分鐘。然后在20分鐘內(nèi)逐滴加入二碘甲烷(5.9mL，73mmol)，并維持溫度另外15-20分鐘。最后，逐滴加入在二氯甲烷(20mL)中的9a(4.8g，14.6mmol)的溶液。在16小時內(nèi)將該反應(yīng)混合物加溫至室溫。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并通過慢慢加入飽和的氯化銨溶液(200mL)使其猝滅。分離液層，并以二氯甲烷(125mL)萃取。以飽和的碳酸氫鈉、鹽水洗滌合并的有機層，干燥(Na2SO4)，過濾并濃縮。通過快速層析法純化粗制的物質(zhì)，使用15/85的EtOAc/己烷，得到2.89g的9b。
步驟3 將在二氧六環(huán)中的4M HCl(2mL)和催化量的10％披鈀碳加入到乙醇(100mL)中的9b(2.41g，7.03mmol)的充分攪拌的溶液中。在室溫下使用充滿氫氣的氣球氫化該混合物5小時。在此時加入其它部分的催化劑，并在16小時內(nèi)氫化該混合物。中止該反應(yīng)，通過硅藻土墊過濾，以乙醇洗滌，并濃縮濾液，得到1.74g的9，可直接使用不需進一步純化。
中間體10的合成 使用上述的氫化作用程序(步驟3)，使用氧化鉑(IV)代替10％披鈀碳，將化合物9b轉(zhuǎn)變?yōu)樗栉镔|(zhì)10。
合成 步驟A 將在200mL無水THF中的4，4-二甲基戊二酰亞胺11a(1.5當量，4.86g，Aldrich)的溶液冷卻至0℃，并以三苯膦(3當量，18.07g)和S-Boc-叔-丁基甘氨醇(glycinol)11b(5g，Aldrich)處理。逐滴加入偶氮二羧酸二異丙酯(2.5當量，11.3mL，d 1.027)，并在0℃下攪拌所得的溶液。在10分鐘后，該混合物變成淤漿，并繼續(xù)攪拌過夜(0至25℃)。在減低的壓力下濃縮該混合物，并將殘余物溶解于80mL乙醚中。加入己烷(100mL)，并濾掉沉淀的固體。濃縮濾液至其一半體積，并再度加入己烷(100mL)。濾掉固體。在減低的壓力下濃縮濾液。在硅膠上層析殘余物(乙酸乙酯/己烷；2∶8)，得到白色固體狀的產(chǎn)物11c(4.0g；51％)。
步驟B 將N-Boc保護的胺11c(3g)溶解于50mL在二氧六環(huán)中的4M HCl的溶液中。攪拌該反應(yīng)混合物大約1小時，直到通過TLC分析(乙酸乙酯/己烷；2∶8)確定起始原料已經(jīng)耗盡為止。在減低的壓力下除去所有的揮發(fā)物，得到白色固體狀的產(chǎn)物11d(2.4g，98％)。
步驟C 以40mL飽和的碳酸氫鈉水溶液處理在40mL二氯甲烷中的胺鹽酸鹽11d(1.0g)的溶液，并在0℃下劇烈地攪拌10分鐘。停止攪拌，并容許分離各層。通過針頭一次性在有機層(下層)中加入光氣(10mL在甲苯中的20％溶液)。在加入后立刻在0℃下劇烈地攪拌該混合物10分鐘，并在室溫下進一步攪拌2.5小時。以100mL二氯甲烷稀釋該混合物，并分離各層。以30mL冷的飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌有機層，并經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾有機層，并以50mL甲苯稀釋濾液。濃縮所得的溶液，并將產(chǎn)物11e保持為0.241M溶液。
步驟D 將在40mL無水DHF中的酸1(2.19g)的溶液冷卻至0℃，并以碳酸銫(1.2當量，1.22g)處理，接著加入芐基溴(1.2當量，0.85mL，d1.438)。攪拌該反應(yīng)混合物24小時(溫度0至25℃)。以乙酸乙酯(350mL)稀釋該混合物，并以水(3×50mL)洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度己烷對乙酸乙酯/己烷 25∶75)，得到澄清油狀的產(chǎn)物11f(2.1g；77％)。
步驟E 將N-Boc保護的胺11f(2.1g)溶解于50mL在二氧六環(huán)中的4MHCl溶液中。在室溫下攪拌所得的溶液，直到通過TLC分析(乙酸乙酯/己烷；25∶75)確定所有的起始原料均已耗盡為止。在1小時后，在減低的壓力下除去所有的揮發(fā)物，得到白色固體狀的產(chǎn)物11g(1.8g；98％)。
步驟F
在0℃下，以N-甲基嗎啉(2.5當量，0.7mL，d 0.920)處理在10mL無水二氯甲烷中的胺鹽酸鹽11g的溶液。攪拌所得的溶液5分鐘，接著加入異氰酸酯11e(1.3當量，13.6mL在甲苯中的0.241M溶液)。攪拌該反應(yīng)混合物5分鐘，并移除冷卻浴。進一步攪拌該混合物2小時。使該混合物在二氯甲烷(200mL)和1M HCl水溶液(50mL)之間分配。分離各層，并以飽和的碳酸氫鈉水溶液(50mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；5∶95至35∶65)，得到白色固體狀的產(chǎn)物11h(1.33g；84％)。
步驟G 將芐基酯11h(1.3g)溶解于30mL乙酸乙酯中，并以載于碳上的20％二氫氧化鈀(0.1mol％；145mg)處理。在50磅/平方英寸下氫化該不均勻的混合物2小時。以200mL二氯甲烷稀釋該混合物，并通過短硅藻土柱過濾。在減低的壓力下濃縮濾液，得到白色固體狀的產(chǎn)物11(1.1g；98％)。
合成
步驟A 按順序，以N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.1當量，986mg)、BOP試劑(1.1當量，4.47g)和N-甲基嗎啉(3.3當量，3.3mL，d 0.920)處理在100mL無水二氯甲烷和5mLDMF中的酸12a(2g)的溶液。將該混合物加熱至50℃過夜。將該反應(yīng)混合物濃縮至其體積的一半，并以400mL乙酸乙酯稀釋。以水(80mL)、1M HCl水溶液(80mL)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(80mL)和鹽水(80mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；5∶95至3∶7)，得到澄清油狀的產(chǎn)物12b。
步驟B 將在100mL無水THF中的酰胺12b(2.2g)的溶液冷卻至0℃。逐滴加入氫化鋁鋰溶液(1.3當量)。在5分鐘后移除冷卻浴，并使該混合物達到室溫。TLC分析(乙酸乙酯/己烷；2∶8)顯示所有的起始原料均已耗盡。通過加入數(shù)滴飽和的硫酸氫鈉水溶液，小心地使過量的LAH猝滅。以200mL乙醚稀釋該混合物，并分成小部分加入飽和的硫酸氫鈉水溶液，直到沉淀出白色固體為止。通過硅藻土過濾該混合物，并以50mL鹽水洗滌濾液。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度乙酸乙酯/己烷；5∶95至4∶6)，得到無色油狀的醛產(chǎn)物12c。
步驟C 以異腈(1.1當量，680mg)和乙酸(2當量，1.02mL，d 1.0149)處理在100mL無水二氯甲烷中的醛12c(1.8g)的溶液。攪拌該混合物過夜。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并在硅膠上層析殘余物(梯度乙酸乙酯/己烷；2∶8至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物12d。
步驟D 以氫氧化鋰一水合物處理在60mL THF/MeOH/水的1∶1∶1混合物中的乙酸酯12d(1.6g)的溶液，并攪拌大約1小時，直到通過TLC分析(乙酸乙酯/己烷；1∶1)確定所有的起始原料均已耗盡為止。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中除去揮發(fā)物，并以二氯甲烷(150mL)稀釋殘余物。分離各層，以30mL飽和的碳酸氫鈉水溶液稀釋含水層，并以二氯甲烷(3×80mL)萃取。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮，得到白色固體狀的產(chǎn)物12e。
步驟E 將N-Boc保護的胺12e(1.5g)溶解于20mL在二氧六環(huán)中的4MHCl中。攪拌該反應(yīng)混合物大約1小時，直到所有的起始原料均已耗盡為止。在真空下除去所有的揮發(fā)物，得到白色固體狀的產(chǎn)物12。
合成 依據(jù)對制備胺鹽酸鹽12描述的合成路徑，制備胺鹽酸鹽13。使用市售的N-Boc-D，L-正纈氨酸作為起始原料，并使用烯丙基異氰化物代替環(huán)丙基異氰化物，形成相應(yīng)的烯丙基酰胺。
合成 依據(jù)對制備胺鹽酸鹽12描述的合成路徑，制備胺鹽酸鹽14。使用N-Boc-D，L-正亮氨酸作為起始原料，并使用烯丙基異氰化物代替環(huán)丙基異氰化物，形成相應(yīng)的烯丙基酰胺。
合成 依據(jù)對制備胺鹽酸鹽12描述的合成路徑，制備胺鹽酸鹽15。使用市售的N-Boc-β-環(huán)丙基-D，L-丙氨酸作為起始原料，并使用烯丙基異氰化物代替環(huán)丙基異氰化物，形成相應(yīng)的烯丙基酰胺。
抑制劑的合成制備實施例A 步驟1 在0℃下，攪拌在5mL無水二氯甲烷和5mL無水DMF中的酸1(255mg)的溶液，并以HATU(368mg)處理。加入胺鹽酸鹽2(201mg)，接著加入N-甲基嗎啉(0.42mL)。將該反應(yīng)物逐漸加溫至室溫，并攪拌過夜。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于100mL乙酸乙酯中。以1N HCl水溶液(15mL)、飽和NaHCO3水溶液(15mL)、水(15mL)、鹽水(15mL)洗滌有機層，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮，得到所需的產(chǎn)物A1。不需對產(chǎn)物進行進一步的純化。
步驟2
以EDCl(1.3g)和二氯乙酸(0.42mL，d 1.563)處理在20mL甲苯/DMSO的1∶1混合物中的A1(360mg)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物大約3小時。以二氯甲烷(100mL)稀釋該反應(yīng)混合物，并以飽和的NaHCO3水溶液(15mL)、1N HCl水溶液(15mL)和鹽水(15mL)洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；2∶8至5∶5)，得到產(chǎn)率84％的產(chǎn)物A2。
步驟3 以10mL甲酸處理N-Boc保護的胺A2。攪拌所得的溶液2小時。在減低的壓力下除去所有的揮發(fā)物。不需對產(chǎn)物A3進行更進一步的純化。
步驟4 將N-甲基嗎啉(0.037mL，d 0.920)加入到1mL無水二氯甲烷中的胺鹽A3的溶液中。在冰水浴中冷卻所得的溶液，并慢慢地加入在甲苯中的異氰酸酯的溶液(2.5mL的0.135M溶液)。攪拌該混合物2小時(溫度0至25℃)。以60mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以15mL 1NHCl水溶液洗滌。以二氯甲烷(2×20mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物A(15mg)，產(chǎn)率20％。HRMS(FAB)C37H53N6O7[M+H]的計算值693.3976；實驗值693.3987。
制備實施例B 步驟1 將N-甲基嗎啉(0.037mL，d 0.920)加入到1mL無水二氯甲烷中的胺鹽A3的溶液中。在冰水浴中冷卻所得的溶液，并慢慢地加入在甲苯中的異氰酸酯4的溶液(0.64mL的0.538M溶液)。攪拌該混合物2小時(溫度0至25℃)。以60mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以15mL 1NHCl水溶液洗滌。以二氯甲烷(2×20mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物B(14.6mg)，產(chǎn)率22％。HRMS(FAB)C31H50N5O6[M+H]的計算值588.3761；實驗值588.3757。
制備實施例C 步驟1 將N-甲基嗎啉(0.037mL，d 0.920)加入到1mL無水二氯甲烷中的胺鹽A3的溶液中。在冰水浴中冷卻所得的溶液，并慢慢地加入在甲苯中的異氰酸酯5的溶液(1.4mL的0.250M溶液)。攪拌該混合物2小時(溫度0至25℃)。以60mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以15mL 1NHCl水溶液洗滌。以二氯甲烷(2×20mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物C(9.7mg)，產(chǎn)率13％。HRMS(FAB)C34H58N5O7S[M+H]的計算值680.4057；實驗值680.4066。
制備實施例D 步驟1 將N-甲基嗎啉(0.037mL，d 0.920)加入到1mL無水二氯甲烷中的胺A3的溶液中。在冰水浴中冷卻所得的溶液，并慢慢地加入在甲苯中的異氰酸酯6的溶液(1.0mL的0.340M溶液)。攪拌該混合物2小時(溫度0至25℃)。以60mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以15mL 1N HCl水溶液洗滌。以二氯甲烷(2×20mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物D(23mg)，產(chǎn)率32％。HRMS(FAB)C31H55N6O7S[M+H]的計算值655.3853；實驗值655.3870。
制備實施例E 步驟1 將N-甲基嗎啉(0.037mL，d 0.920)加入到1mL無水二氯甲烷中的胺A3的溶液中。在冰水浴中冷卻所得的溶液，并慢慢地加入在甲苯中的異氰酸酯7的溶液(1.4mL的0.250M溶液)。攪拌該混合物2小時(溫度0至25℃)。以60mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以15mL 1N HCl水溶液洗滌。以二氯甲烷(2×20mL)反萃取含水層。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物D(11.5mg)，產(chǎn)率14％。HRMS(FAB)C34H55N6O7S2[M+H]的計算值723.3574；實驗值723.3568。
制備實施例F 步驟1 在0℃下攪拌在10mL無水二氯甲烷和10mL無水DMF中的酸1(280mg)的溶液，并以HATU(1.4當量，405mg)處理。加入在二氯甲烷中的胺鹽8(1.3當量，569mg)。然后加入N-甲基嗎啉(4當量，0.33mL，d 0.920)。在-20℃下攪拌該反應(yīng)混合物48小時。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于200mL乙酸乙酯中。以水(30mL)、1N HCl水溶液(30mL)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(30mL)和鹽水(30mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。產(chǎn)物F1可直接使用，不需進一步純化。
步驟2 以Dess-Martin全碘烷(periodinane)(3當量，966mg)處理在20mL無水二氯甲烷中的羥基酰胺F1(415mg)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物45分鐘。以1M硫代硫酸鈉水溶液(15mL)和飽和的碳酸氫鈉水溶液(15mL)處理該混合物，并攪拌15分鐘。以二氯甲烷(3×50mL)萃取該混合物。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到無色油狀的產(chǎn)物F2。
步驟3 在室溫下，將N-Boc保護的胺F2(155mg)溶解于5mL在二氧六環(huán)中的4M HCl中。攪拌該混合物，直到通過TLC分析(丙酮/己烷；3∶7)確定所有的起始原料均已耗盡為止。在45分鐘后，在真空下除去所有的揮發(fā)物，得到白色固體狀的產(chǎn)物F3，可直接使用不需進一步純化。
步驟4 以N-甲基嗎啉(3.7當量，0.06mL，d 0.920)處理在2mL無水二氯甲烷中的胺鹽酸鹽F3(67mg)的溶液，并冷卻至0℃。逐滴加入異氰酸酯(0.75mL在甲苯中的0.2M溶液)，并攪拌該混合物過夜(溫度0至25℃)。以50mL二氯甲烷稀釋該反應(yīng)混合物，并以15mL 1M HCl水溶液和15mL飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至6∶4)，得到白色固體狀的產(chǎn)物F。HRMS(FAB)C36H58N5O7S[M+H]的計算值704.4057；
實驗值704.4071。
制備實施例G 步驟1 在0℃下攪拌在2mL無水二氯甲烷和1mL無水DMF中的酸11(60mg)的溶液，并以HATU(1.4當量，60mg)處理。加入胺鹽12(1.2當量，30mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當量，0.05mL，d 0.920)。攪拌該反應(yīng)混合物過夜(溫度0至25℃)。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于50mL乙酸乙酯中。以水(20mL)、1M HCl水溶液(10mL)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(10mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。產(chǎn)物G1可直接使用，不需進一步純化。
步驟2 以Dess-Martin全碘烷(periodinane)(2.0當量，95mg)處理在10mL無水二氯甲烷中的羥基酰胺G1(0.112mmol)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘。以1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理該混合物，并攪拌5分鐘。也加入飽和的碳酸氫鈉水溶液(20mL)，并繼續(xù)攪拌另外10分鐘。以二氯甲烷(3×30mL)萃取該混合物。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到白色固體狀的產(chǎn)物G(63mg；80％)。HRMS(FAB)C37H61N6O7[M+H]的計算值701.4601；實驗值701.4614。
制備實施例H 步驟1 在0℃下攪拌在2mL無水二氯甲烷和1mL無水DMF中的酸11(60mg)的溶液，并以HATU(1.4當量，60mg)處理。加入胺鹽13(1.2當量，30mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當量，0.05mL，d 0.920)。攪拌該反應(yīng)混合物過夜(溫度0至25℃)。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于50mL乙酸乙酯中。以水(20mL)、1M HCl水溶液(10mL)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(10mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。產(chǎn)物H1可直接使用，不需進一步純化。
步驟2 以Dess-Martin全碘烷(periodinane)(2.0當量，95mg)處理在10mL無水二氯甲烷中的羥基酰胺H1(0.112mmol)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘。以1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理該混合物，并攪拌5分鐘。也加入飽和的碳酸氫鈉水溶液(20mL)，并繼續(xù)攪拌另外10分鐘。以二氯甲烷(3×30mL)萃取該混合物。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到白色固體狀的產(chǎn)物H(64mg；82％)。HRMS(FAB)C37H61N6O7[M+H]的計算值701.4601；實驗值701.4607。
制備實施例I 步驟1 在0℃下攪拌在2mL無水二氯甲烷和1mL無水DMF中的酸11(60mg)的溶液，并以HATU(1.4當量，60mg)處理。加入胺鹽14(1.2當量，32mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當量，0.05mL，d 0.920)。攪拌該反應(yīng)混合物過夜(溫度0至25℃)。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于50mL乙酸乙酯中。以水(20mL)、1M HCl水溶液(10mL)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(10mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。產(chǎn)物I1可直接使用，不需進一步純化。
步驟2 以Dess-Martin全碘烷(periodinane)(2.0當量，95mg)處理在10mL無水二氯甲烷中的羥基酰胺I1(0.112mmol)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘。以1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理該混合物，并攪拌5分鐘。也加入飽和的碳酸氫鈉水溶液(20mL)，并繼續(xù)攪拌另外10分鐘。以二氯甲烷(3×30mL)萃取該混合物。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到白色固體狀的產(chǎn)物I(64mg；80％)。
制備實施例J
步驟1 在0℃下攪拌在2mL無水二氯甲烷和1mL無水DMF中的酸11(60mg)的溶液，并以HATU(1.4當量，60mg)處理。加入胺鹽15(1.2當量，31mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當量，0.05mL，d 0.920)。攪拌該反應(yīng)混合物過夜(溫度0至25℃)。在真空下除去所有的揮發(fā)物，并將殘余物溶解于50mL乙酸乙酯中。以水(20mL)、1M HCl水溶液(10mL)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(10mL)洗滌有機層。有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并在減低的壓力下濃縮。產(chǎn)物J1可直接使用，不需進一步純化。
步驟2 以Dess-Martin全碘烷(periodinane)(2.0當量，95mg)處理在10mL無水二氯甲烷中的羥基酰胺J1(0.112mmol)的溶液。在室溫下攪拌該反應(yīng)混合物30分鐘。以1M硫代硫酸鈉水溶液(10mL)處理該混合物，并攪拌5分鐘。也加入飽和的碳酸氫鈉水溶液(20mL)，并繼續(xù)攪拌另外10分鐘。以二氯甲烷(3×30mL)萃取該混合物。將合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾并濃縮。在硅膠上層析殘余物(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到白色固體狀的產(chǎn)物J(57mg；71％)。HRMS(FAB)C38H61N6O7[M+H]的計算值713.4601；實驗值713.4607。
本發(fā)明涉及新的HCV蛋白酶抑制劑?？稍谄湟种艸CV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的能力上，證明該用途。通過下列的體外測定，說明這類證明的一般程序。
HCV蛋白酶抑制活性的測定分光光度計測定可通過依據(jù)R.Zhang等，Analytical Biochemistry，270(1999)268-275描述的程序(其公開內(nèi)容以引用的方式結(jié)合到本文中)，對本發(fā)明的化合物進行HCV絲氨酸蛋白酶的分光光度測定。該測定以適合連續(xù)監(jiān)視HCV NS3蛋白酶活性的色原酯(chromogenic ester)酶解物的蛋白水解作用為基礎(chǔ)。該酶解物衍生自NS5A-NS5B接合序列的P側(cè)(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)，其C-終端羧基基團被用四個不同發(fā)色團的醇(3-或4-硝基酚、7-羥基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮苯酚)之一酯化。下文解釋了這些新的分光光度測定的酯酶解物的合成、鑒定和應(yīng)用，以便進行HCV NS3蛋白酶抑制劑的高通過量篩選和詳細的動力學(xué)評估。
材料和方法材料從Sigma Chemical Company(St.Louis，Missouri)獲得與測定有關(guān)的緩沖液的化學(xué)試劑。肽合成的試劑則得自AldrichChemicals、Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems (Framingham，Massachusetts)。以手工或在自動ABI 431A型合成器(得自AppliedBiosystems)上合成肽。UV/VIS分光計LAMBDA 12型得自PerkinElmer(Norwalk，Connecticut)，而96-孔UV培養(yǎng)板則獲自Corning(Corning，New York)。預(yù)熱塊可得自USA Scientific(Ocala，F(xiàn)lorida)，且96-孔培養(yǎng)板旋轉(zhuǎn)器(vortexer)則得自Labline Instruments(MelrosePark，Illinois)。具有單色儀的Spectramax Plus微量滴定板讀取器獲自Molecular Devices(Sunnyvale，California)。
酶制備通過使用先前發(fā)表的程序(D.L.Sali等，Biochemistry，37(1998)3392-3401)，制備重組的異種二聚體的HCV NS3/NS4a蛋白酶(strain la)。通過Biorad染色法，使用先前通過氨基酸分析定量的重組HCV蛋白酶標準物，確定蛋白濃度。在開始測定的前，使用BioradBio-Spin P-6預(yù)先包裝的管柱，以測定緩沖液(25mM MOPS pH6.5、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)交換酶儲備緩沖液(50mM磷酸鈉pH8.0、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷和10mM DTT)。
酶解物合成和純化按照R.Zhang等(出處同上)的報告，進行酶解物的合成，并通過使用標準方案(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)，使Fmoc-Nva-OH錨定在2-氯三苯甲基氯樹脂上來啟動。接著使用Fmoc化學(xué)，以手工或在自動ABI 431型肽合成器上組裝肽。通過在二氯甲烷(DCM)中的10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)處理30分鐘，或通過在DCM中的2％三氟乙酸(TFA)處理10分鐘，從樹脂上裂解N-乙?；彝耆Ｗo的肽片段。以共沸方式蒸發(fā)合并的濾液和DCM洗滌液(或以Na2CO3水溶液重復(fù)萃取)，除去在裂解時使用的酸。將DCM相經(jīng)Na2SO4干燥，并蒸發(fā)。
使用標準酸-醇偶聯(lián)程序(K.Holmber等，Acta Chem.Scand.，B33(1979)410-412)，組裝酯酶解物。將肽片段溶解于無水吡啶(30-60mg/mL)中，在其中加入10摩爾當量的發(fā)色團和催化量(0.1當量)的對-甲苯磺酸(pTSA)。加入二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC，3當量)，以啟動偶聯(lián)反應(yīng)。通過HPLC監(jiān)測產(chǎn)物形成，并可發(fā)現(xiàn)在室溫下12-72小時后完成反應(yīng)。在真空下蒸發(fā)吡啶溶劑，并通過與甲苯共沸蒸發(fā)進一步除去。用在DCM中的95％TFA處理2小時，將肽酯脫保護，并以無水的二乙醚萃取3次，除去過量的發(fā)色團。在C3或C8管柱上，使用30％至60％乙腈梯度(使用6倍的柱體積)，通過逆相HPLC純化脫保護的酶解物。在HPLC純化后的整體產(chǎn)率可能是大約20-30％。可通過電噴霧電離質(zhì)譜分析，證實分子質(zhì)量。以干粉形式將酶解物在干燥條件下儲存。
酶解物和產(chǎn)物的光譜在pH6.5測定緩沖液中，獲得酶解物和相應(yīng)的發(fā)色團產(chǎn)物的光譜。在最佳非高峰波長處(對3-Np和HMC為340nm，對PAP為370nm，而對4-Np為400nm)，在1-cm比色杯中，使用多倍稀釋測定消光系數(shù)。將最佳非高峰波長定義為在酶解物與產(chǎn)物之間，產(chǎn)生吸光度的最大分數(shù)差異(產(chǎn)物OD-酶解物OD/酶解物OD)的波長。
蛋白酶測定在30℃下，在96-孔微量滴定板中，使用200μl反應(yīng)混合物進行HCV蛋白酶測定。測定緩沖液條件(25mM MOPS pH6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麥芽糖苷，5μM EDTA和5uM DTT)是最適合NS3/NS4a異二聚體(heterodimer)的(D.L.Sali等，出處同上)。通常，將緩沖液、酶解物和抑制劑的150μl混合物放在孔中(DMSO的終濃度≤4％體積/體積)，并容許在30℃下預(yù)先溫育大約3分鐘。然后使用50μl在測定緩沖液中的預(yù)熱的蛋白酶(12nM，30℃)啟動反應(yīng)(終體積200μl)。在整個測定長度(60分鐘)內(nèi)，使用裝有單色儀的Spectromax Plus微量滴定板讀取器，在合適的波長下(對3-Np和HMC為340nm，對PAP為370nm，而對4-Np為400nm)，監(jiān)測培養(yǎng)板的吸光度變化(可利用使用截止濾紙的培養(yǎng)板讀取器獲得可接受的結(jié)果)。在合適的波長下，對作為無-酶水解作用的對照組的無酶空白組，監(jiān)視在Nva和發(fā)色團之間的酯鍵的氮白水解裂解作用。在30-倍酶解物濃度范圍(～6-200μM)內(nèi)，進行酶解物動力學(xué)參數(shù)的評估。使用線性回歸確定初速，并通過使用非線性回歸分析，使數(shù)據(jù)擬合Michaelis-Menten方程式，獲得動力學(xué)常數(shù)(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)。在假定酶完全是有活性的情況下計算轉(zhuǎn)換數(shù)(Turnovernumbers)(kcat)。
評估抑制劑和失活劑在固定濃度的酶和酶解物下，根據(jù)為了競爭性抑制動力學(xué)而重新整理的Michaelis-Menten方程式vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))，通過vo/vi對抑制劑濃度([I]o)作圖，以實驗方式確定競爭抑制劑Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常數(shù)(Ki)，其中vo為未被抑制的初速，vi為在抑制劑存在下，在任何給定的抑制劑濃度([I]o)下的初速，及[S]o是所使用的酶解物濃度。使用線性回歸擬合所得數(shù)據(jù)，并使用所得的斜率1/(Ki(1+[S]o/Km)來計算Ki值。在下文表2中示出一些本發(fā)明化合物所得的Ki*值(按毫微摩爾計)。
表2
表2A列舉另外的本發(fā)明化合物及其活性表2A


Ki*的范圍表示A≤75nM；75＜B≤250nM；C＞250nM。
雖然已經(jīng)結(jié)合上文所述的具體實施方案一起說明本發(fā)明，但其許多改變、修飾和其它變化對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言將是顯而易見的。打算使所有的這類改變、修飾和變化落入本發(fā)明的精神及范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物具有如式1所示的一般結(jié)構(gòu) 式1其中R1為H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳烷基-和雜芳烷基，或在NR9R10中的R9和R10彼此連接，使NR9R10形成四至八元的雜環(huán)基，而或者同樣獨立地，在CHR9R10中的R9和R10彼此連接，使CHR9R10形成四至八元的環(huán)烷基；R2和R3可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基；Y選自下列部分 其中G為NH或O；且R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基，或者(i)R17和R18彼此獨立地連接，形成三至八元的環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)同樣獨立地，R15和R19彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(iii)同樣獨立地，R15和R16彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(iv)同樣獨立地，R15和R20彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(v)同樣獨立地，R22和R23彼此連接，形成三至八元的環(huán)烷基或四至八元的雜環(huán)基；且(vi)同樣獨立地，R24和R25彼此連接，形成三至八元的環(huán)烷基或四至八元的雜環(huán)基；其中每個所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的，或任選由一個或多個選自以下的部分獨立地取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺酰基、芳基磺?；?、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基、烷氧基羰氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代、氰基和硝基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NR9R10，且R9為H，R10為H或R14，其中R14為H、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R14為選自下列的基團
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R2為選自下列的部分
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R3為選自下列的基團 其中R31為OH或O-烷基；和R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R3為選自下列的部分
7.權(quán)利要求1的化合物，其中G為NH。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中Y選自下列的部分 其中R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R22、R23、R24和R25各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基和雜芳烷基，或者(i)R17和R18彼此獨立地連接，形成三至八元的環(huán)烷基或雜環(huán)基；(ii)同樣獨立地，R15和R19彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；(iii)同樣獨立地，R15和R16彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；且(iv)同樣獨立地，R15和R20彼此連接，形成四至八元的雜環(huán)基；或其中每個所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基可以是未取代的，或任選由一個或多個選自以下的部分獨立地取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、酮基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基、烷氧基羰氨基、烷氧基羰氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代、氰基和硝基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中所述部分 選自 其中Y32為選自下列的基團
10.權(quán)利要求8的化合物，其中Y選自
11.權(quán)利要求1的化合物，其中所述部分 選自下列的結(jié)構(gòu)
12.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NHR14，其中R14為選自下列的基團 R2為選自下列的部分 R3為選自下列的部分 所述部分 選自 且Y選自
13.一種藥用組合物，它包括作為活性成分的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
14.權(quán)利要求13的藥用組合物，它用于治療與HCV有關(guān)的病癥。
15.權(quán)利要求14的藥用組合物，它還包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
16.權(quán)利要求15的藥用組合物，它還包含至少一種抗病毒劑。
17.權(quán)利要求16的藥用組合物，它還另外包含至少一種干擾素。
18.權(quán)利要求17的藥用組合物，其中所述至少一種抗病毒劑是利巴韋林，及至少一種干擾素是α-干擾素或聚乙二醇化的干擾素。
19.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的方法，所述方法包括給予需要這類治療的患者藥用組合物，所述藥用組合物包含治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述給予為口服或皮下給予。
21.權(quán)利要求1的化合物在制備治療與HCV有關(guān)的病癥的藥物中的用途。
22.一種制備用于治療與HCV有關(guān)的病癥的藥用組合物的方法，所述方法包括使至少一種權(quán)利要求1的化合物與至少一種藥學(xué)上可接受的載體產(chǎn)生緊密物理接觸。
23.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物選自具有下列結(jié)構(gòu)的化合物
24.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的藥用組合物，所述組合物包含治療有效量的一或多種權(quán)利要求23的化合物，以及藥學(xué)上可接受載體。
25.權(quán)利要求24的藥用組合物，它還含有至少一種抗病毒劑。
26.權(quán)利要求25的藥用組合物，它還另外含有至少一種干擾素或PEG-干擾素α綴合物。
27.權(quán)利要求26的藥用組合物，其中所述至少一種抗病毒制劑是利巴韋林，及所述至少一種干擾素是α-干擾素或聚乙二醇化的干擾素。
28.一種治療與丙型肝炎病毒有關(guān)病癥的方法，該方法包括給予有效量的一種或多種權(quán)利要求23的化合物。
29.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性的方法，該方法包括使HCV蛋白酶與一種或多種權(quán)利要求23的化合物接觸。
30.一種治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一或多種癥狀的方法，該方法包括給予有效量的一種或多種權(quán)利要求23的化合物。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述HCV蛋白酶是NS3/NS4a蛋白酶。
32.權(quán)利要求31的方法，其中所述化合物抑制HCV NS3/NS4a蛋白酶。
33.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工的方法，該方法包括在其中所述多肽被加工的條件下，使含有HCV多肽的組合物與一種或多種權(quán)利要求23的化合物接觸。
34.一種治療與HCV有關(guān)病癥的藥劑的方法，該方法包括給予需要這類治療的患者藥用組合物，所述組合物包含治療有效量的至少一種化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述選自下列的化合物
35.純化形式的權(quán)利要求1的化合物。
全文摘要
本發(fā)明公開新的式I的化合物，其具有HCV蛋白酶抑制劑活性，以及制備這類化合物的方法。在另一個實施方案中，本發(fā)明公開包含這類化合物的藥用組合物，以及使用它們來治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的方法。其中R
文檔編號A61K38/04GK1946692SQ200580012857
公開日2007年4月11日 申請日期2005年2月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月27日
發(fā)明者F·G·恩裘洛吉, S·文卡特拉曼, A·阿拉薩潘, F·貝拉斯克斯, V·M·吉里加瓦拉布漢 申請人:先靈公司