專利名稱：作為丙型肝炎病毒ns3絲氨酸蛋白酶抑制劑的硫化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的丙型肝炎病毒(″HCV″)蛋白酶抑制劑、含有一或多個這類抑制劑的醫(yī)藥組合物、制備這類抑制劑的方法，以及使用這類抑制劑治療丙型肝炎和相關(guān)病癥的方法。本發(fā)明還公開作為HCVNS3/NS4a絲氨酸蛋白酶抑制劑的新的化合物。本申請要求2004年2月27日提交的美國臨時申請系列號60/548,670的優(yōu)先權(quán)。
背景技術(shù)：
丙型肝炎病毒(HCV)是(+)-有意義單股RNA病毒，其已經(jīng)成為非-甲，非-乙型肝炎(NANBH)的主要病因，特別是在與血液-有關(guān)的NANBH(BB-NANBH)(參見，國際專利申請公布號WO 89/04669和歐洲專利申請公布號EP 381 216)中。NANBH與其它類型的病毒引起的肝臟疾病，如甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、δ型肝炎病毒(HDV)、巨細胞病毒(CMV)和Epstein-barr病毒(EBV)，以及其它形式的肝臟疾病，如酒精中毒和原發(fā)膽汁性肝硬化顯然有別。
最近，已經(jīng)鑒定、克隆并表達多肽加工和病毒復(fù)制所需的HCV蛋白酶。(參見，例如美國專利第5,712,145號)。這種大約3000個氨基酸的多蛋白，從氨基終端到羧基終端，含有殼包核酸蛋白(C)、包膜蛋白(E1和E2)，以及數(shù)個非-結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、2、3、4a、5a和5b)。NS3是大約68kda的蛋白，由HCV基因組的大約1893個核苷酸編碼，并具有兩個不同的結(jié)構(gòu)域(a)絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域，由大約200個N-終端的氨基酸所組成；以及(b)在蛋白的C-終端的RNA-依賴性ATP酶結(jié)構(gòu)域。由于在蛋白序列、整體三維結(jié)構(gòu)和催化機制上的類似性，因而認為NS3蛋白酶是胰凝乳蛋白酶家族的成員。其它胰凝乳蛋白酶樣的酶是彈性蛋白酶、因子Xa、凝血酶、胰蛋白酶、血纖維蛋白溶酶、尿激酶、tPA和PSA。HCV NS3絲氨酸蛋白酶負責(zé)在NS3/NS4a、NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合處的多肽(多蛋白)的蛋白水解作用，并因此負責(zé)在病毒復(fù)制期間產(chǎn)生四個病毒蛋白。這制備出HCV NS3絲氨酸蛋白酶，一種有吸引力的抗病毒化學(xué)療法的標(biāo)靶。本發(fā)明化合物可抑制這類蛋白酶。它們也可調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
已經(jīng)確定NS4a蛋白，一種大約6kda的多肽，是NS3的絲氨酸蛋白酶活性的輔因子。由NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶自動切割NS3/NS4a接合發(fā)生在分子內(nèi)(即順式)，而以分子間的方式加工其它切割位置(即反式)。
HCV蛋白酶的天然切割位置的分析，顯示在P1處出現(xiàn)半胱氨酸并在P1′處出現(xiàn)絲氨酸，且在NS4a/NS4b、NS4b/NS5a和NS5a/NS5b接合處中嚴(yán)格地保留這些殘基。NS3/NS4a接合處在P1處含有蘇氨酸，并在P1′處含有絲氨酸。假定在NS3/NS4a處的Cys→Thr取代，說明在該接合處需要順而非反式加工。參見，例如，Pizzi等(1994)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)91888-892，F(xiàn)ailla等(1996)Folding & Design 135-42。NS3/NS4a切割位置也比其它位置更容忍突變生成。參見，例如，Kollykhalov等(1994)J.Virol.687525-7533。也發(fā)現(xiàn)在切割位置的上游區(qū)中的酸性殘基需要有效的切割。參見，例如，Komoda等(1994)J.Virol.687351-7357。
已經(jīng)報告了HCV蛋白酶的抑制劑，包括抗氧化劑(參見，國際專利申請公布號WO 98/14181號)、某些肽和肽類似物(參見，國際專利申請公布號WO 98/17679號，Landro等(1997)Biochem.369340-9348，Ingallinella等(1998)Biochem.378906-8914，Llinas-Brunet等(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.81713-1718)、以70-氨基酸多肽水蛭蛋白酶抑制劑(eglin)c為基礎(chǔ)的抑制劑(Martin等(1998)Biochem.3711459-11468，抑制劑親和力選自人類胰臟分泌胰蛋白酶抑制劑(hPSTI-C3)和微型抗體(minibody)節(jié)目(repertoires)(MBip)(Dimasi等(1997)J.Virol.717461-7469)、cVHE2(一種″駱駝化的(camelized)″可變結(jié)構(gòu)域抗體片段)(Martin等(1997)Protein Eng.10607-614)，以及α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等(1997)J.Hepat.2742-28)。最近已經(jīng)公開一種核酶，其被設(shè)計成選擇性地破壞丙型肝炎病毒RNA(參見，BioWorldToday 9(217)4(1998年11月10日，1998))。
也參考1998年4月30日發(fā)表的PCT公布號WO 98/17679(VertexPharmaceuticals incorporated)；1998年5月28日發(fā)表的WO 98/22496(F.Hoffmann-La Roche AG)；以及1999年2月18日發(fā)表的WO 99/07734(Boehringer Ingelheim Canada Ltd.)。
HCV已經(jīng)涉及肝臟的肝硬化，并引起肝細胞癌。目前，罹患HCV感染的患者的預(yù)后很差。HCV感染比其它形式的肝炎更難治療，因為缺乏與HCV感染有關(guān)的免疫力或減輕。目前的數(shù)據(jù)指出在診斷出肝硬化后的四年內(nèi)，存活率低于50％。診斷出患有局限性可切除的肝細胞癌的患者，具有10-30％的五年存活率，而患有局限性不可切除的肝細胞癌的那些患者僅具有低于1％的五年存活率。
參考WO 00/59929(美國專利第6,608,027號，受讓人BoehringerIngelheim(Canada)Ltd.；2000年10月12日發(fā)表)，其公開具有下式的肽衍生物
參考A.Marchetti等，Synlett，S1，1000-1002(1999)描述的HCV NS3蛋白酶的抑制劑的雙環(huán)類似物的合成。其中公開的化合物具有下式 也參考W.Han等，Bioorganic & Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，其描述某些含有烯丙基和乙基官能度的α-酮酰胺、α-酮酯和α-二酮的制備。
也參考WO 00/09558(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日發(fā)表)，其公開下式的肽衍生物
其中在本文中定義各種部分(element)。該系列的示例性化合物為 也參考WO 00/09543(受讓人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日發(fā)表)，其公開下式的肽衍生物
其中在本文中定義各種部分。該系列的示例性化合物為 也參考美國專利6,608,027(Boehringer Ingelheim Canada)，其公開下列類型的NS3蛋白酶抑制劑 其中在本文中定義各種部分。
丙型肝炎的現(xiàn)行治療包括干擾素-α(INFα)和利巴韋林與干擾素的聯(lián)合治療。參見，例如，Beremguer等(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)98-112。這些治療苦惱于低的持續(xù)反應(yīng)率和頻繁的副作用。參見，例如Hoofnagle等(1997)N.Engl.J.Med.336347。目前，沒有可供HCV感染使用的疫苗。
進一步參考2001年10月11日發(fā)表的WO 01/74768(受讓人VertexPharmaceuticals Inc)，其公開某些具有下列通式的化合物(R在本文中定義)，作為丙型肝炎病毒的NS3-絲氨酸蛋白酶抑制劑 在上述WO 01/74768中公開的特殊化合物具有下式 PCT公布號WO 01/77113；WO 01/081325；WO 02/08198；WO02/08256；WO 02/081 87；WO 02/08244；WO 02/48172；WO 02/08251；以及2002年1月18日提交的正在待審的美國專利申請系列號10/052,386公開了作為丙型肝炎病毒的NS3-絲氨酸蛋白酶抑制劑的各種類型的肽和/或其它化合物。這些申請的公開內(nèi)容全部以引用的方式和結(jié)合到本文中。
需要HCV感染的新的治療和療法。需要可用來治療或預(yù)防或改善丙型肝炎的一或多種癥狀的化合物。
需要治療或預(yù)防或改善丙型肝炎的一或多種癥狀的方法。
需要使用在本文中提供的化合物，調(diào)節(jié)絲氨酸蛋白酶，特別是HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的活性的方法。
需要使用在本文中提供的化合物，調(diào)節(jié)HCV多肽的加工的方法。
發(fā)明概述在本發(fā)明的許多實施方案中，提供了新型的HCV蛋白酶抑制劑、含有一或多個所述化合物的藥用組合物、制備包含一或多個此類化合物的藥用組合物的方法，以及使用一或多個這類化合物或一或多個這類制劑治療或預(yù)防HCV或改善一或多種丙型肝炎的癥狀的方法。也提供調(diào)節(jié)HCV多肽與HCV蛋白酶的相互作用的方法。在本文公開的化合物的中，抑制HCV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶活性的化合物是優(yōu)選的。本發(fā)明公開化合物以及所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，所述化合物具有在結(jié)構(gòu)式1中所示的通用結(jié)構(gòu) 其中R1為H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳烷基-和雜芳烷基；A與M可以是相同或不同的，各自獨立選自R、OR、NHR、NRR′、SR、SO2R及鹵代基；或A與M互相連接，以使上文式I中所示的部分 形成3、4、6、7或8-元環(huán)烷基、4至8-元雜環(huán)基、6至10-元芳基或5至10-元雜芳基；E為C(H)或C(R)；
L為C(H)、C(R)、CH2C(R)或C(R)CH2；R、R′、R2和R3可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、環(huán)烷基-、雜烷基-、雜環(huán)基-、芳基-、雜芳基-、(環(huán)烷基)烷基-、(雜環(huán)基)烷基-、芳基-烷基-及雜芳基-烷基-；或者，NRR′中的R與R′互相連接，以使NRR′形成4至8-元雜環(huán)基；且Y選自下列部分 其中G為NH或O；且R15、R16、R17和R18可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基及雜芳烷基，或者，(i)R15和R16互相連接，以形成4至8-元環(huán)狀結(jié)構(gòu)，與(ii)同樣地，R17與R18獨立地互相連接，以形成3至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)基；其中所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基各自可為未取代的，或任選獨立被一或多個部分取代，所述部分選自羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳基硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；?、亞磺酰氨基(sulfonamido)、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、酮基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基(carboxamido)、烷氧羰基氨基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代基、氰基及硝基。
上文所指的陳述，″A與M互相連接，以使上文式I中所示的部分 形成3、4、6、7或8-元環(huán)烷基、4至8-元雜環(huán)基、6至10-元芳基或5至10-元雜芳基″，可如下述以非限制性方式說明。因此，例如在A與M連接以使上文式I中所示的部分 形成6元環(huán)烷基(環(huán)己基)的情況下，式I可描繪如下 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員應(yīng)該理解，當(dāng)上文部分中所示的A與M (M-L-E-A結(jié)合在一起)連接而形成3、4、7或8-元環(huán)烷基、4至8-元雜環(huán)基、6至10-元芳基或5至10-元雜芳基時，可達到關(guān)于式I的類似描述。
陳述″或者，(i)R15和R16互相連接，以形成4至8-元環(huán)狀結(jié)構(gòu)，與(ii)同樣地，R17與R18獨立地連接而形成3至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)基″意指下列可能性(i)R15與R16連接而形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，而R17與R18則不然；(ii)R17與R18連接而形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，而R15與R16則不然；及(iii)R15與R16連接而形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)，且R17與R18亦連接而形成環(huán)狀結(jié)構(gòu)。這些可能性可彼此獨立地存在。
在上文提及的R、R′、R2和R3的定義中，優(yōu)選的烷基由1至10個碳原子構(gòu)成，優(yōu)選的烯基或炔基由2至10個碳原子構(gòu)成，優(yōu)選的環(huán)烷基由3至8個碳原子構(gòu)成，而優(yōu)選的雜烷基、雜芳基或雜環(huán)烷基具有1至6個氧、氮、硫或磷原子。
由式1代表的化合物，本身或與在本文中公開的一或多種其它的適當(dāng)藥物聯(lián)合，可用于治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)及相關(guān)病癥，并可用來調(diào)解丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性，預(yù)防HCV，或改善丙型肝炎的一或多種癥狀?？衫帽景l(fā)明的化合物，以及包含這類化合物的藥用組合物或制劑，來進行這類調(diào)節(jié)、治療、預(yù)防或改善。不受理論的限制，相信HCV蛋白酶可能是NS3或NS4a蛋白酶。本發(fā)明的化合物可抑制這類蛋白酶。它們也可調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工。
詳細描述在一個實施方案中，本發(fā)明公開由結(jié)構(gòu)式1代表的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑合物或酯，其中各部分如上所定義。
在另一個實施方案中，R1為NR9R10，且R9為H，R10為H或R14，其中R14為H、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
在另一個實施方案中，R14選自下列基團
在另一個實施方案中，R2選自下列部分
在進一步的實施方案中，R3選自下列的基團
其中R31為OH或O-烷基；且
R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
在另外的實施方案中，R3選自下列部分
在進一步的實施方案中，Y選自下列的部分 其中R15、R16、R17和R18可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，或者R15與R16互相連接，以形成4至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)結(jié)構(gòu)，和/或R17與R18互相連接，以形成3至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)基，其中所述芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基各自可為未取代的，或任選獨立被一或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳基硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；喕酋０被?、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基、烷氧羰基氨基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代基、氰基及硝基。
在另一項實施方案中，Y選自 其中Y31選自


Y32選自 且Y12選自H、CO2H、CO2Me、OMe、F、Cl、Br、NH2、N(H)S(O2)CH3、N(H)C(O)CH3、NO2、S(O2)NH2、CF3、Me、OH、OCF3及C(O)NH2。
在另一項實施方案中，所述部分
選自下列結(jié)構(gòu)

在另一項實施方案中，所述部分 選自下列結(jié)構(gòu)
在另一項實施方案中，所述部分
選自下列結(jié)構(gòu)
在另一個其它實施方案中，R1為NHR14，其中R14選自 R2選自下列部分

R3選自下列部分
Y選自
其中Y31選自 Y32選自
且Y12選自H、CO2H、CO2Me、OMe、F、Cl、Br、NH2、N(H)S(O2)CH3、N(H)C(O)CH3、NO2、S(O2)NH2、CF3、Me、OH、OCF3和C(O)NH2；且所述部分 為
本發(fā)明的又一項實施方案公開下文表1中的化合物，以及稍后在表1、表3、表3A、表4、表4A及表5中所示的化合物表1
























在另一項實施方案中，本發(fā)明公開表2中的下列化合物表2

如同上文使用的，并在本公開全文中，除非另外指明，應(yīng)理解下列的術(shù)語具有下列的意義″患者″包括人和動物。
″哺乳動物″意指人及其它哺乳動物。
″烷基″意指可以是直鏈或支鏈脂肪族烴基，且在鏈中包含大約1到大約20個碳原子。優(yōu)選的烷基基團在鏈中含有大約1到大約12個碳原子。更優(yōu)選的烷基基團在鏈中含有大約1到大約6個碳原子。支鏈意指一或多個低級烷基基團，如甲基、乙基或丙基，與直鏈的烷基鏈連接。″低級烷基″意指在鏈中具有大約1至大約6個碳原子的基團，其可以是直鏈或支鏈。術(shù)語″取代的烷基″意指該烷基基團可被一或多個取代基取代，其可以是相同或不同的，每個取代基各自獨立選自鹵代、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、羥基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(環(huán)烷基)、-N(烷基)2、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。合適的烷基基團的非限制性實例包括甲基、乙基、正-丙基、異丙基和叔-丁基。
″烯基″意指含有至少一個碳-碳雙鍵的脂肪族烴基，且其可以是直鏈或支鏈，且在鏈中包含大約2到大約15個碳原子。優(yōu)選的烯基基團在鏈中具有大約2到大約12個碳原子；而更優(yōu)選在鏈中具有大約2到大約6個碳原子。支鏈意指一或多個低級烷基基團，如甲基、乙基或丙基，與直鏈的烯基鏈連接?！宓图壪┗逡庵冈阪溨芯哂写蠹s2至大約6個碳原子的基團，其可以是直鏈或支鏈。術(shù)語″取代的烯基″意指該烯基基團可被一或多個取代基取代，所述取代基可以是相同或不同的，各自獨立選自鹵代、烷基、芳基、環(huán)烷基、氰基、烷氧基和-S(烷基)。合適的烯基基團的非限制性實例包括乙烯基、丙烯基、正-丁烯基、3-甲基丁-2-烯基、正-戊烯基、辛烯基和癸烯基。
″炔基″意指含有至少一個碳-碳三鍵的脂肪族烴基，且其可以是直鏈或支鏈，且在鏈中包含大約2到大約15個碳原子。優(yōu)選的炔基基團在鏈中具有大約2到大約12個碳原子；而更優(yōu)選在鏈中具有大約2到大約4個碳原子。支鏈意指一或多個低級烷基基團，如甲基、乙基或丙基，與直鏈的炔基鏈連接?！宓图壢不逡庵冈阪溨芯哂写蠹s2至大約6個碳原子的基團，其可以是直鏈或支鏈。合適的炔基基團的非限制性實例包括乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。術(shù)語″取代的炔基″意指該炔基基團可被一或多個取代基取代，其可以是相同或不同的，每個取代基各自獨立選自烷基、芳基和環(huán)烷基。
″芳基″意指芳香族單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其包含大約6到大約14個碳原子，優(yōu)選大約6到大約10個碳原子。所述芳基可任選由″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定義。合適的芳基基團的非限制性實例包括苯基和萘基。
″雜芳基″意指包括大約5到大約14個環(huán)原子，優(yōu)選大約5到大約10個環(huán)原子的芳香族單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其中一或多個環(huán)原子是碳以外的元素，例如氮、氧或硫，它們可單獨或組合存在。優(yōu)選的雜芳基含有大約5到大約6個環(huán)原子。所述″雜芳基″可任選由″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定義。在雜芳基詞根名字前的前綴氮雜、氧雜或硫雜，意指分別出現(xiàn)至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子?？扇芜x將雜芳基的氮原子氧化成相應(yīng)的N-氧化物。合適的雜芳基的非限制性實例包括吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮)、異唑基、異噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋呫基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、噠嗪基、喹喔啉基、2，3-二氮雜萘基(phthalazinyl)、羥吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋呫基、吲哚基、氮雜吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、異喹啉基、苯并氮雜吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。術(shù)語″雜芳基″也意指部分飽和的雜芳基部分，例如四氫異喹啉基、四氫喹啉基等。
″芳烷基″或″芳基烷基″意指芳基-烷基-基團，其中該芳基和烷基如同前文所述。優(yōu)選的芳烷基包括低級烷基基團。合適的芳烷基基團的非限制性實例包括芐基、2-苯乙基和萘甲基。通過烷基與母體部分連接。
″烷芳基″意指烷基-芳基-基團，其中該烷基和芳基如同前文所述。優(yōu)選的烷芳基包括低級烷基基團。合適的烷芳基基團的非限制性實例為甲苯基。通過芳基與母體部分連接。
″環(huán)烷基″意指非-芳香族單-或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其包括大約3至大約10個碳原子，優(yōu)選大約5至大約10個碳原子。優(yōu)選的環(huán)烷基環(huán)含有大約5至大約7個環(huán)原子。環(huán)烷基可任選由一或多個″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在上文中的定義。合適的單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等。合適的多環(huán)環(huán)烷基的非限制性實例包括1-萘烷基、降冰片基(norbornyl)、金剛烷基等，以及部分飽和的物質(zhì)，例如茚滿基、四氫萘基等。
″鹵素″或″鹵代″意指氟、氯、溴或碘。優(yōu)選氟、氯和溴。
″環(huán)系統(tǒng)取代基″意指與芳香族或非-芳香族環(huán)系統(tǒng)連接的取代基，其例如代替在該環(huán)系統(tǒng)上可用的氫。環(huán)系統(tǒng)取代基可以是相同或不同的，各自獨立選自烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、芳烷基、烷芳基、雜芳烷基、雜芳烯基、雜芳炔基、烷基雜芳基、羥基、羥烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、鹵代、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳氧羰基、芳烷氧基羰基、烷基磺酰基、芳基磺?；?、雜芳基磺?；?、烷硫基、芳硫基、雜芳硫基、芳烷硫基、雜芳烷硫基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可以是相同或不同的，并各自獨立選自氫、烷基、芳基、環(huán)烷基和芳烷基?！瀛h(huán)系統(tǒng)取代基″也可意指單一部分，其同時代替在環(huán)系統(tǒng)上的兩個相鄰碳原子上的兩個可用的氫(每個碳上一個H)。這類部分的實例是亞甲二氧基、亞乙二氧基、-C(CH3)2-等，其形成例如 的部分。
″雜環(huán)基″意指非芳香族的飽和單環(huán)或多環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，其包含大約3至大約10個環(huán)原子，優(yōu)選大約5到大約10個環(huán)原子，其中在該環(huán)系統(tǒng)中的一或多個原子是碳以外的元素，例如氮、氧或硫，它們可單獨或組合存在。在環(huán)系統(tǒng)中不存在相鄰的氧和/或硫原子。優(yōu)選的雜環(huán)基包含大約5至大約6個環(huán)原子。在雜環(huán)詞根名字前的前綴氮雜、氧雜或硫雜，意指分別出現(xiàn)至少一個氮、氧或硫原子作為環(huán)原子。任何在雜環(huán)基環(huán)中的-NH均可以以被保護的基團，例如作為-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基團等存在；也將這類保護視為本發(fā)明的一部分。所述雜環(huán)基可任選由一或多個″環(huán)系統(tǒng)取代基″取代，所述取代基可以是相同或不同的，并如同在本文中的定義。可任選將雜環(huán)基的氮或硫原子氧化成相對應(yīng)的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。合適的單環(huán)雜環(huán)基環(huán)的非限制性實例包括哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、噻唑烷基、1，4-二氧六環(huán)基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、內(nèi)酰胺、內(nèi)酯等。
應(yīng)注意到在本發(fā)明的環(huán)系統(tǒng)所含有的雜原子中，在與N、O或S相鄰的碳原子上沒有羥基基團，而且在與其它雜原子相鄰的碳原子上沒有N或S基團。因此，例如在環(huán)中 沒有-OH直接連接在標(biāo)號為2和5的碳上。
也應(yīng)注意到互變異構(gòu)形式，例如下列的部分 在本發(fā)明的某些實施方案中認為它們是等同的。
″炔烷基″意指炔基-烷基-基團，其中該炔基和烷基如同前文所述。優(yōu)選的炔烷基含有低級炔基和低級烷基基團。通過烷基與母體部分連接。合適的炔烷基基團的非限制性實例包括炔丙基甲基。
″雜芳烷基″意指雜芳基-烷基-基團，其中該雜芳基和烷基如同前文所述。優(yōu)選的雜芳烷基含有低級烷基基團。合適的芳烷基基團的非限制性實例包括吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通過烷基與母體部分連接。
″羥烷基″意指HO-烷基-基團，其中烷基如同前述所定義。優(yōu)選的羥烷基含有低級烷基。合適的羥烷基基團的非限制性實例包括羥甲基和2-羥乙基。
″?；逡庵窰-C(O)-、烷基-C(O)-或環(huán)烷基-C(O)-基團，其中各種基團如同前文所述。通過羰基與母體部分連接。優(yōu)選的酰基含有低級烷基。合適的?；鶊F的非限制性實例包括甲?；⒁阴；捅；?。
″芳酰基″意指芳基-C(O)-基團，其中該芳基基團如同前文所述。通過羰基與母體部分連接。合適的基團的非限制性實例包括苯甲酰基和1-萘?；?。
″烷氧基″意指烷基-O-基團，其中該烷基基團如同前文所述。合適的烷氧基基團的非限制性實例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基和正-丁氧基。通過醚氧與母體部分連接。
″芳氧基″意指芳基-O-基團，其中該芳基基團如同前文所述。合適的芳氧基基團的非限制性實例包括苯氧基和萘氧基。通過醚氧與母體部分連接。
″芳烷氧基″意指芳烷基-O-基團，其中該芳烷基如同前文所述。合適的芳烷氧基基團的非限制性實例包括芐氧基和1-或2-萘甲氧基。通過醚氧與母體部分連接。
″烷硫基″意指烷基-S-基團，其中該烷基基團如同前文所述。合適的烷硫基基團的非限制性實例包括甲硫基和乙硫基。通過硫與母體部分連接。
″芳硫基″意指芳基-S-基團，其中該芳基基團如同前文所述。合適的芳硫基基團的非限制性實例包括苯硫基和萘硫基。通過硫與母體部分連接。
″芳烷硫基″意指芳烷基-S-基團，其中該芳烷基基團如同前文所述。合適的芳烷硫基基團的非限制性實例是芐硫基。通過硫與母體部分連接。
″烷氧羰基″意指烷基-O-CO-基團。合適的烷氧羰基基團的非限制性實例包括甲氧羰基和乙氧羰基。通過羰基與母體部分連接。
″芳氧羰基″意指芳基-O-C(O)-基團。合適的芳氧羰基基團的非限制性實例包括苯氧羰基和萘氧羰基。通過羰基與母體部分連接。
″芳烷氧羰基″意指芳烷基-O-C(O)-基團。合適的芳烷氧羰基基團的非限制性實例為芐氧羰基。通過羰基與母體部分連接。
″烷基磺?；逡庵竿榛?S(O2)-基團。優(yōu)選的基團是其中烷基基團為低級烷基的那些基團。通過磺?；c母體部分連接。
″芳基磺?；逡庵阜蓟?S(O2)-基團。通過磺?；c母體部分連接。
術(shù)語″取代的″意指由選自指定的基團代替在指明的原子上的一或多個氫，條件為在現(xiàn)有情況下不超過該指明的原子的正常價數(shù)，且該取代產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物。只要這類組合結(jié)果產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物，取代基和/或變量的組合就是允許的?！宸€(wěn)定的化合物″或″穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)″意指一化合物足夠穩(wěn)定，能承受從反應(yīng)混合物中分離至有用程度的純度，并配制成有效的治療劑。
當(dāng)指示取代基、化合物、組合試劑等的數(shù)目時，術(shù)語″一或多個″或″至少一個″，依據(jù)前后文，意指出現(xiàn)或添加至少一個，并最高達到在化學(xué)或物理上可容許的最大數(shù)目的取代基、化合物、組合試劑等。這類技術(shù)和知識在本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的范圍內(nèi)。
術(shù)語″任選取代的″意指可視需要用指定的基團、原子團或部分取代。
對化合物而言，術(shù)語″分離的″或″以分離的形式″，意指所述化合物在從合成過程或天然來源或其組合中分離后的物理狀態(tài)。對化合物而言，術(shù)語″純化的″或″以純化的形式″，意指在從本文中描述或技術(shù)少熟練人員熟知的純化過程獲得該化合物后的物理狀態(tài)，其具有足夠的純度，可通過本文中描述的或技術(shù)少熟練人員熟知的標(biāo)準(zhǔn)分析技術(shù)鑒定。
也應(yīng)注意到，假設(shè)在本文的正文、流程、實施例和表格中，任何具有不飽和價數(shù)的碳或雜原子具有滿足價數(shù)的氫原子。
當(dāng)稱化合物中的官能基是″保護的″時，這意指該基團是經(jīng)過修改的形式，從而使該化合物經(jīng)歷反應(yīng)時，在保護位置排除不想要的副反應(yīng)。將借通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員，以及通過參考教科書，例如T.W.Greene等，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York，識別合適的保護基團。
當(dāng)任何變數(shù)(例如芳基、雜環(huán)、R2等)在任何成分或在式1中出現(xiàn)一次以上時，其在每次出現(xiàn)時的定義獨立于其在其它地方每次出現(xiàn)處的定義。
當(dāng)在本文中使用時，術(shù)語″組合物″意欲包含含有指定量的特定成分的產(chǎn)物，以及任何直接或間接由指定量的特定成分的組合獲得的產(chǎn)物。
在本文中也設(shè)計本發(fā)明的化合物的前藥和溶劑合物。當(dāng)在本文中使用時，術(shù)語″前藥″代表為藥物前體的化合物，當(dāng)將其給予患者時，通過代謝或化學(xué)過程經(jīng)歷化學(xué)轉(zhuǎn)變，產(chǎn)生式1的化合物，或其鹽和/或溶劑合物。在T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel DeliverySystems(1987)14 of the A.C.S.Symposium Series中，以及在Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche編輯，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中提供了前藥的討論，兩者均通過引用結(jié)合到本文中。
″溶劑合物″意指本發(fā)明化合物與一或多種溶劑分子的物理締合。該物理締合涉及各種程度的離子和共價鍵結(jié)合，包括氫鍵。在某些例子中，溶劑合物將能夠分離，例如當(dāng)將一或多個溶劑分子并入結(jié)晶固體的晶格中時?！迦軇┖衔铩灏ㄈ芤?相和可分離溶劑合物兩者。合適的溶劑合物的非限制性實例包括乙醇化物、甲醇化物等。″水合物″為其中該溶劑分子為H2O的溶劑合物。
″有效量″或″治療有效量″意在敘述的本發(fā)明化合物或組合物的量在抑制CDK(s)上是有效的，并因此產(chǎn)生所需的治療、改善、抑制或預(yù)防效果。
可形成鹽的式1化合物也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。除非另外指明，在本文中提及式1化合物時，應(yīng)該理解也包括其鹽。當(dāng)在本文中使用時，術(shù)語″鹽″表示與無機和/或有機酸形成的酸加成鹽，以及與無機和/或有機堿形成的堿加成鹽。此外，當(dāng)式1化合物含有堿性部分，例如但不限于吡啶或咪唑，和酸性部分，例如但不限于羧酸兩者時，可形成兩性離子(″內(nèi)鹽″)，并也包括在本文中使用的術(shù)語″鹽″中。藥學(xué)上可接受的(即無毒性、生理學(xué)上可接受的)鹽是優(yōu)選的，雖然也可使用其它的鹽?？山柚缡故?化合物與一定量(如等當(dāng)量)的酸或堿，在其中使鹽沉淀的介質(zhì)或在含水介質(zhì)中反應(yīng)，接著冷凍干燥，形成式1化合物的鹽。
示例性的酸加成鹽類包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、富馬酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、萘磺酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽(也稱為甲苯基磺酸鹽)等。此外，由例如P.Stahl等，Camille G.(編輯)藥用鹽手冊，特性、選擇和用途(Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use)，(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等，ThePractice of Medicinal Chemistry(1996)，Academic Press，New York；以及在The Orange Book(Food&Drug Administration，Washington，D.C.在其網(wǎng)址上)中，討論了一般認為適合用來從堿性藥學(xué)化合物來形成在藥學(xué)上有用的鹽類的酸。這些公開的內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。
示例性的堿加成鹽包括銨鹽、堿金屬鹽，如鈉、鋰和鉀鹽、堿土金屬鹽，如鈣和鎂鹽，與有機堿(例如有機胺)所成的鹽，如二環(huán)己胺、叔-丁胺，以及與氨基酸如精氨酸、離氨酸等所成的鹽?？衫迷噭A性含氮基團季銨化，如低級烷基鹵化物(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、二乙酯和二丁酯)、長鏈鹵化物(例如癸基、十二烷基和硬脂?；穆然?、溴化物和碘化物)、芳烷基鹵化物(例如芐基和苯乙基的溴化物)及其它。
為了本發(fā)明，所有預(yù)定為藥學(xué)上可接受的鹽的這類酸加成鹽和堿加成鹽均在本發(fā)明的范圍內(nèi)，并認為所有的酸加成鹽和堿加成鹽均等于相應(yīng)的化合物的游離形式。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的酯包括下列各組(1)通過羥基基團的酯化作用而獲得的羧酸酯，其中酯類的羧酸部分的非-羰基部分選自直鏈或支鏈的烷基(例如乙?；?、正-丙基、叔-丁基或正-丁基)、烷氧烷基(例如甲氧甲基)、芳烷基(例如芐基)、芳氧烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任選由例如鹵素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，如烷基-或芳烷基磺酰基(例如甲烷磺?；?；(3)氨基酸酯(例如L-纈氨?；騆-異亮氨酰基)；(4)膦酸酯和(5)單-、二-或三-磷酸酯?？赏ㄟ^例如C1-20醇或其反應(yīng)性衍生物，或通過2，3-二(C6-24)酰基甘油，將磷酸酯進一步酯化。
式1的化合物，及其鹽、溶劑合物、酯和前藥，可以其互變異構(gòu)形式存在(例如酰胺或亞氨基醚)。在本文中，所有的這類互變異構(gòu)形式被視為本發(fā)明的一部分。
打算使本發(fā)明的化合物(包括所述化合物的鹽、溶劑合物、酯和前藥，以及前藥的鹽和溶劑合物)的所有的立體異構(gòu)體(例如幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等)，如可能是因為在各種取代基上的不對稱碳而出現(xiàn)的那些異構(gòu)體，包括對映體形式(甚至可能在缺少不對稱碳時出現(xiàn))、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體形式、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體形式均在本發(fā)明的范圍內(nèi)，位置異構(gòu)體(例如4-吡啶基和3-吡啶基)也是如此。本發(fā)明化合物的各立體異構(gòu)體可以是，例如基本上不含其它異構(gòu)體，或可以混合成為例如外消旋物，或帶有所有其它的，或其它選擇的立體異構(gòu)體。本發(fā)明的手性中心可具有S或R構(gòu)型，如同由IUPAC 1974推薦書定義的。術(shù)語″鹽″、″溶劑合物″、″前藥″等的使用，旨在等同地應(yīng)用在本發(fā)明化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、位置異構(gòu)體、外消旋物或前藥的鹽、溶劑合物和前藥上。
打算將式1化合物，以及式1化合物的鹽、溶劑合物、酯和前藥的多形形式納入本發(fā)明內(nèi)。
應(yīng)了解式1化合物在本文中討論的治療應(yīng)用上的用途，可適用于每個化合物本身或一或多個式1化合物的混合或組合，如同在例如緊接著的下一段中說明的。相同的理解也適用于藥用組合物，其包含一種或多種這樣的化合物，以及涉及這樣的化合物的治療方法。
根據(jù)本發(fā)明的化合物可具有藥理學(xué)特性；具體而言，式1化合物可以是HCV蛋白酶的抑制劑，每個化合物本身或一或多個式1化合物，可與一或多個選自式1中的化合物混合。所述化合物可用來治療疾病，例如HCV、HIV、AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)及相關(guān)病癥，并可用來調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶的活性、預(yù)防HCV或改善丙型肝炎的一或多種癥狀。
可使用式1化合物來制備用來治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的藥物，例如，該方法包括使式1化合物與藥學(xué)上可接受的載體緊密接觸。
在其它的實施方案中，本發(fā)明提供藥用組合物，其包含作為活性成分的本發(fā)明的一種或多種化合物。藥用組合物通常還地包括至少一種藥學(xué)上可接受的載體稀釋劑、賦形劑或載體(在本文中統(tǒng)稱為載體原料)。因為其HCV抑制活性，這類藥用組合物具有治療丙型肝炎和相關(guān)病癥的用途。
在另一個實施方案中，本發(fā)明公開制備包含作為活性成分的本發(fā)明化合物的藥用組合物的方法。在本發(fā)明的藥用組合物和方法中，活性成分通常將與合適的載體原料混合給予，針對想要的給藥形式而適當(dāng)?shù)剡x擇載體原料，即口服片劑、膠囊(填裝固體、填裝半固體或填裝液體)、構(gòu)成用的粉末、口服凝膠、酏劑、可分散的顆粒、糖漿、懸浮液等，并符合常規(guī)藥學(xué)實踐。例如，對于口服給藥用的片劑或膠囊形式，可將活性藥物組分與任何口服無毒性的藥學(xué)上可接受的惰性載體混合，如乳糖、淀粉、蔗糖、纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、滑石、甘露糖醇、乙醇(液體形式)等。此外，在想要或需要時，也可將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻入混合物中。散劑和片劑可包含從大約5到大約95％的本發(fā)明組合物。
合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖類、玉米增甜劑、天然和合成的樹膠，如阿拉伯樹膠、藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇和蠟。在潤滑劑中，可提及的用于這些劑型中的有硼酸、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括淀粉、甲基纖維素、瓜耳樹膠等。
合適時也可包括增甜劑和著色劑及防腐劑。在上文中提及的一些術(shù)語，即崩解劑、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑等，在下文中有更詳細地討論。
此外，本發(fā)明的組合物可以持續(xù)釋放的形式配制，以便提供任一種或多種組分或活性成分的速率控制釋放，以發(fā)揮最大的治療效果，即HCV抑制活性等。持續(xù)釋放的適當(dāng)劑型包括多層片劑，其含有具有不同崩解速率的各層，或充滿活性組分的控制釋放的聚合基質(zhì)，并制成片劑形式或含有這類充滿或包膠(encapsulated)多孔聚合基質(zhì)的膠囊。
液體形式的制劑包括溶液、懸浮液和乳劑。舉例來說，可提及水或水-丙二醇溶液，用于胃腸外注射，或為了口服溶液、懸浮液和乳劑，可加入增甜劑和鎮(zhèn)靜劑(pacifiers)。液體形式的制劑也可包括鼻內(nèi)給藥的溶液。
適合吸入的氣溶膠制劑可包括溶液和粉末形式的固體，可將其與藥學(xué)上可接受的載體，如惰性壓縮氣體，例如氮氣組合。
至于制備栓劑，首先熔化低熔點的蠟，如脂肪酸甘油酯，如可可脂的混合物，并通過攪拌或類似地混合使活性成分均勻地分散在其中。然后將熔化的均質(zhì)混合物倒入適當(dāng)尺寸的模具中，使其冷卻并藉此固化。
也包括固體形式的制劑，計劃在臨用前將其轉(zhuǎn)變成液體形式的制劑，以供口服或胃腸外給藥。這類液體形式包括溶液、懸浮液和乳劑。
本發(fā)明的化合物也可經(jīng)皮傳遞。經(jīng)皮傳遞的組合物可采用霜劑、洗劑、氣溶膠和/或乳劑的形式，并可將其包括在本領(lǐng)域中用于該目的的傳統(tǒng)基質(zhì)或貯庫類型的經(jīng)皮貼片中。
本發(fā)明的化合物也可口服，靜脈內(nèi)、鼻內(nèi)或皮下給藥。
本發(fā)明的化合物也可包括為單位劑型的制劑。在這類形式中，將制劑細分成含有適當(dāng)量的活性組分的適當(dāng)尺寸的單位劑量，例如達到所需目的的有效量。
在單位劑量的制劑中的本發(fā)明活性組合物的量，通常根據(jù)特殊的應(yīng)用，可從大約1.0毫克變化或調(diào)整到大約1,000毫克，優(yōu)選從大約1.0到大約950毫克，更優(yōu)選從大約1.0到大約500毫克，而典型的是從大約1到大約250毫克。可根據(jù)患者的年齡、性別、體重和待治療疾病的嚴(yán)重性，改變所使用的實際劑量。這類技術(shù)為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知。
通常，可每天給予人含有活性成分的口服劑型1或2次。將根據(jù)臨床醫(yī)師的判斷調(diào)整給藥的用量和頻率。一般對于口服給藥推薦的日劑量方案可在每天大約1.0毫克到大約1,000毫克范圍內(nèi)，以單一或分開的劑量給予。
在下文中描述一些有用的名詞膠囊-意指由甲基纖維素、聚乙烯醇或變性明膠或淀粉制備的特殊容器或包封外殼，用以容納或含有包括活性成分的組合物。硬殼膠囊通常是由較高凝膠強度的骨和豬皮明膠的混合物制成。膠囊本身可含有少量的染料、不透明劑、塑化劑和防腐劑。
片劑-意指壓縮或模壓的固體劑型，其含有活性成分與合適的稀釋劑。可通過壓縮混合物或通過濕法制粒、干法制粒而獲得的顆粒，或通過壓緊來制備片劑。
口服凝膠-意指活性成分分散或溶解于親水性固體基質(zhì)內(nèi)。
構(gòu)成用的粉末-意指含有活性成分和適當(dāng)稀釋劑的粉末混合物，可將其懸浮于水或果汁中。
稀釋劑-意指通常構(gòu)成大部分組合物或劑型的物質(zhì)。合適的稀釋劑包括糖，如乳糖、蔗糖、甘露糖醇和山梨糖醇；衍生自小麥、玉米、稻米和馬鈴薯的淀粉；以及纖維素，如微晶纖維素。稀釋劑在組合物中的量的范圍可從總組合物的大約10到大約90％重量，優(yōu)選從大約25到大約75％，更優(yōu)選從大約30到大約60％重量，甚至更優(yōu)選從大約12到大約60％。
崩解劑-意指加在組合物中幫助它瓦解(崩解)并釋放藥物的原料。合適的崩解劑包括淀粉；″可溶于冷水″的經(jīng)修飾的淀粉，如羧甲基淀粉鈉；天然和合成的樹膠，如槐樹豆膠、刺梧桐樹膠、瓜耳樹膠、黃蓍膠和瓊脂；纖維素衍生物，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉；微晶纖維素和交聯(lián)微晶纖維素，如交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；藻酸鹽，如藻酸和藻酸鈉；粘土，如膨潤土；以及泡騰混合物。崩解劑在組合物中的量d范圍可從組合物的大約2到大約15％重量，優(yōu)選從大約4到大約10％重量。
粘合劑-意指將粉末結(jié)合或″粘合″在一起，并通過形成顆粒使它們粘結(jié)的物質(zhì)，因此在配制時用來作為″粘附劑″。已經(jīng)在稀釋劑或填充劑中獲得粘合劑加上粘結(jié)強度。合適的粘合劑包括糖，如蔗糖；衍生自小麥、玉米、稻米和馬鈴薯的淀粉；天然的樹膠，如阿拉伯樹膠、明膠和黃蓍膠；海藻的衍生物，如藻酸、藻酸鈉和藻酸鈣銨；纖維素材料，如甲基纖維素和羧甲基纖維素鈉，以及羥丙基甲基纖維素；聚乙烯吡咯烷酮；以及無機物，如硅酸鋁鎂。粘合劑在組合物中的量的范圍可從組合物的大約2到大約20％重量，更優(yōu)選從大約3到大約10％重量，甚至更優(yōu)選從大約3到大約6％重量。
潤滑劑-意指加在劑型中，使片劑、顆粒等在已經(jīng)壓縮后，能夠通過降低摩擦力或磨損而從模具或沖模中釋放的物質(zhì)。合適的潤滑劑包括金屬硬脂酸鹽，如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鉀；硬脂酸；高熔點的蠟；以及水溶性潤滑劑，如氯化鈉、苯甲酸鈉、乙酸鈉、油酸鈉、聚乙二醇和d′l-亮氨酸。通常在壓縮前很晚的步驟中才加入潤滑劑，因為它必須出現(xiàn)在顆粒的表面，并在它們和壓片機的部件之間。潤滑劑在組合物中的量的范圍可從組合物的大約0.2到大約5％重量，優(yōu)選從大約0.5到大約2％，更優(yōu)選從大約0.3到大約1.5％重量。
助流劑(Glident)-防止結(jié)塊并改善顆粒的流動特征的材料，使得流動平順并均勻。合適的助流劑包括二氧化硅或滑石。助流劑在組合物中的量的范圍可從總組合物的大約0.1％到大約5％重量，優(yōu)選從大約0.5到大約2％重量。
著色劑-提供給組合物或劑型顏色的賦形劑。這類賦形劑可包括食品級染料，并將食品級的染料吸附在合適的吸附劑上，如粘土或氧化鋁。著色劑的量可從組合物的大約0.1變化到大約5％重量，優(yōu)選從大約0.1到大約1％。
生物利用度-意指與標(biāo)準(zhǔn)物或?qū)φ战M相比較，活性藥物成分或治療部分從給予的劑型被吸收至全身循環(huán)內(nèi)的速率和程度。
制備片劑的傳統(tǒng)方法是已知的。這類方法包括干式方法，如直接壓縮和壓縮通過壓緊產(chǎn)生的顆粒，或濕式方法，或其它特殊程序。制備其它給藥形式，例如膠囊、栓劑等的傳統(tǒng)方法也是已熟知的。
本發(fā)明的另一實施方案公開上文公開的本發(fā)明化合物或藥用組合物在治療疾病，例如丙型肝炎等中的用途。該方法包括對患有這樣的疾病，且需要這類治療的患者，給予治療有效量的本發(fā)明化合物或藥用組合物。
在又一個實施方案中，可使用本發(fā)明的化合物，以單一療法模式或以聯(lián)合療法(例如雙重聯(lián)合、三重聯(lián)合等)模式，例如與抗病毒和/或免疫調(diào)節(jié)劑聯(lián)合使用來治療人類的HCV。這類抗病毒和/或免疫調(diào)節(jié)劑的實例，包括利巴韋林(得自Schering-Plough Corporation，Madison，New Jersey)和LevovirinTM(得自ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，California)、VP 50406TM(得自Viropharma，Incorporated，Exton，Pennsylvania)、ISIS 14803TM(得自ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，California)、HeptazymeTM(得自Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，Colorado)、VX 497TM(得自Vertex Pharmaceuticals，Cambridge，Massachusetts)、胸腺素(Thymosin)TM(得自SciClone Pharmaceuticals，San Mateo，California)、MaxamineTM(得自Maxim Pharmaceuticals，SanDiego，California)、麥考酚酸嗎乙酯(得自Hoffman-LaRoche，Nutley，New Jersey)、干擾素(例如干擾素α、PEG-干擾素α共軛物)等?！錚EG-干擾素α共軛物″是與PEG分子共價連接的干擾素α分子。代表性的PEG-干擾素α共軛物包括干擾素α-2a(RoferonTM，得自Hoffman La-Roche，Nutley，New Jersey)，為聚乙二醇化的干擾素α-2a的形式(例如以商標(biāo)名PegasysTM出售)、干擾素α-2b(IntronTM，得自Schering-PloughCorporation)，以聚乙二醇化的干擾素α-2b的形式(例如以商標(biāo)名PEG-IntronTM出售)、干擾素α-2c(Berofor αTM，得自Boehringer Ingelheim，Ingelheim，Germany)，或通過測定天然存在的干擾素α的共有序列定義的共有干擾素(InfergenTM，得自Amgen，Thousand Oaks，California)。
如同較早陳述的，本發(fā)明也包括本發(fā)明的化合物的互變異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、對映體和其它立體異構(gòu)體。因此，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員意識到一些本發(fā)明的化合物可以以合適的異構(gòu)形式存在。打算將這類變化包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
本發(fā)明它的再一個實施方案公開制備在本文中公開的化合物的方法?？赏ㄟ^本領(lǐng)域已知的幾種技術(shù)制備該化合物。在下列的反應(yīng)方案中概述了示例性程序。不應(yīng)將示例解釋為對本發(fā)明的范圍的限制，其在附錄的權(quán)利要求書中定義。其它的機械路徑和類似結(jié)構(gòu)對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，將是顯而易見的。
應(yīng)該理解，雖然下列的示例性方案描述了數(shù)個代表性本發(fā)明化合物的制備，但任何天然和非天然氨基酸兩者的適當(dāng)取代作用將導(dǎo)致形成以這樣的取代為基礎(chǔ)的所需化合物。打算將這類變化納入本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在以下方法程序的描述中使用下列縮寫THF四氫呋喃DMFN，N-二甲基甲酰胺
EtOAc乙酸乙酯AcOH醋酸HOOBt3-羥基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮EDCl1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽NMMN-甲基嗎啉ADDP1，1′-(偶氮二羰基)二哌啶DEAD偶氮二羧酸二乙酯MeOH甲醇EtOH乙醇Et2O乙醚DMSO二甲亞砜HOBtN-羥基苯并三唑PyBrOP溴-三-吡咯烷六氟磷酸鹽DCM二氯甲烷DCC1，3-二環(huán)己基碳化二亞胺TEMPO2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧基Phg苯基甘氨酸Chg環(huán)己基甘氨酸Bn芐基Bzl芐基Et乙基Ph苯基DMF-DMAN，N-二甲基甲酰胺-縮二甲醇(dimethylacetal)iBoc異丁氧羰基iPr異丙基tBu或But叔-丁基Boc叔-丁氧羰基Cbz芐氧羰基
Cp環(huán)戊二烯基Ts對-甲苯磺酰基Me甲基HATUO-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸鹽DMAP4-N，N-二甲氨基吡啶BOP苯并三唑-1-基-氧基-三(二甲氨基)六氟磷酸鹽PCC吡啶氯鉻酸鹽KHMDS六甲基二硅疊氮化鉀或雙(三甲基甲硅烷基氨化)鉀NaHMDS六甲基二硅疊氮化鈉或雙(三甲基甲硅烷基氨化)鈉LiHMDS六甲基二硅疊氮化鋰或雙(三甲基甲硅烷基氨化)鋰10％Pd/C10％披鈀碳(按重量計)TG硫甘油制備目標(biāo)化合物的通用方案本發(fā)明化合物采用下文所述的通用方案(方法A-E)合成。
方法AN-Boc官能團1.01于酸性條件下的去保護提供其鹽酸鹽1.02，接著，使其在肽偶合方法下，與N-Boc-叔-亮氨酸偶合，得到1.03。在N-Boc去保護后，接著以適當(dāng)異氰酸酯處理，獲得脲1.05。所述甲酯的水解作用提供酸1.06。所述酸1.06與適當(dāng)?shù)腜1-P′伯酰胺部分的肽偶合，提供羥基酰胺1.07。氧化作用(Moffatt氧化作用或相關(guān)方法-參閱T.T.Tidwell，Synthesis，1990，857)或Dess-Martin Periodinane-J.Org.Chem.，(1983)48，4155)得到目標(biāo)化合物1.08。
方法B酸1.06與適當(dāng)?shù)腜1-P′仲酰胺部分的肽偶合，提供羥基酰胺1.09。氧化作用(Moffatt或Dess-Martin’s)，得到目標(biāo)化合物1.10。

方法C在另一種變化中，N-Boc-P2-P3-酸1.17與適當(dāng)?shù)腜1-P′酰胺部分的肽偶合，提供羥基酰胺1.11。氧化作用(Moffatt或Dess-MartinPeriodinane)，得到酮酰胺1.12。N-Boc官能團的去保護獲得其鹽酸鹽1.13。以適當(dāng)異氰酸酯(或異氰酸酯等同物)處理，，得到目標(biāo)化合物1.14。
方法D在又一種變化中，通過與氯甲酸4-硝基苯酯反應(yīng)，使該鹽酸鹽1.13轉(zhuǎn)化成氨基甲酸4-硝基苯酯1.15。以所選擇胺(或胺鹽酸鹽)進行后續(xù)處理，提供目標(biāo)化合物1.14。
方法E在再一種變化中，如上述使二肽鹽酸鹽1.03轉(zhuǎn)化成氨基甲酸4-硝基苯酯。以所選擇的胺(或胺鹽酸鹽)處理，提供脲衍生物1.05。水解作用及如方法A/B中所述進一步進行，提供目標(biāo)化合物1.14。
P1-P′部分的制備中間物10.11與10.12的制備步驟1.

于N2下，使酮亞胺10.01(50g，187.1mmol)在無水THF(400ml)中的攪拌溶液冷卻至-78℃，并以K-tBuO(220ml，1.15當(dāng)量)在THF中的1M溶液處理。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，并攪拌1小時，并用溴代甲基環(huán)丁烷(28ml，249mmol)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌48小時，并在真空中濃縮。使殘留物溶于Et2O(300ml)中，并以HCl水溶液(2M，300ml)處理。將所形成的溶液于室溫下攪拌5小時，并以Et2O(1升)萃取。以NaOH(50％水溶液)使水層呈堿性至pH～12-14，并以CH2Cl2(3×300ml)萃取。使合并的有機層脫水干燥(MgSO4)，過濾，并濃縮，得到純胺(10.02，18g)，為無色油。
步驟2.
于0℃下，用二碳酸二-叔-丁酯(23g，105.4mmol)處理胺10.02(18g，105.2mmol)在CH2Cl2(350ml)中的溶液，并在室溫下攪拌12小時。于反應(yīng)完成后(TLC)，使反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并使殘留物溶于THF/H2O(200ml，1∶1)中，并用LiOH·H2O(6.5g，158.5mmol)處理，并在室溫下攪拌3小時。使反應(yīng)混合物濃縮，并以Et2O萃取堿性水層。以濃HCl使水層酸化至pH～1-2，并用CH2Cl2萃取。使合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾，及在真空中濃縮，得到10.03，為無色粘稠油，將其用于下一步驟，無需任何進一步純化。
步驟3.
用BOP試劑(41.1g，93mmol)、N-甲基嗎啉(27ml)、N，O-二甲基羥基胺鹽酸鹽(9.07g，93mmol)處理酸10.03(15.0g，62mmol)在CH2Cl2(250ml)中的溶液，并于室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物以1NHCl水溶液(250ml)稀釋，并分離各層，且以CH2Cl2(3×300ml)萃取水層。使合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾，并在真空中濃縮，經(jīng)層析純化(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到酰胺10.04(15.0g)，為無色固體。
步驟4.
于0℃下，用LiAlH4溶液(1M，93ml，93mmol)逐滴處理酰胺10.04(15g，52.1mmol)在無水THF(200ml)中的溶液。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時，并在0℃下，用KHSO4溶液(10％水溶液)小心地使反應(yīng)猝滅，及攪拌0.5小時。將反應(yīng)混合物以HCl水溶液(1M，150ml)稀釋，并用CH2Cl2(3×200ml)萃取。將合并的有機層以HCl水溶液(1M)、飽和NaHCO3、鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)。過濾混合物，并在真空中濃縮，得到10.05，為粘稠無色油(14g)。
步驟5 將醛10.05(14g，61.6mmol)在CH2Cl2(50ml)中的溶液用Et3N(10.73ml，74.4mmol)與丙酮氰醇(10.86g，127.57mmol)處理，并于室溫下攪拌24小時。使反應(yīng)混合物于真空中濃縮，并用HCl水溶液(1M，200ml)稀釋，及萃取在CH2Cl2(3×200ml)中。將合并的有機層以H2O、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，經(jīng)層析純化(SiO2，EtOAc/己烷1∶4)，得到10.06(10.3g)，為無色液體。
步驟6.
于0℃下，用氰醇10.06處理通過使HCl氣體起泡通入CH3OH(700ml)中所制備的用HCl飽和的甲醇*，并加熱至回流24小時。使反應(yīng)物在真空中濃縮，得到10.07，將其使用于下一步驟而無需純化。
*或者，也可使用通過將AcCl加入至無水甲醇中制備的6M HCl。
步驟7.
于-78℃下，將胺鹽酸鹽10.07在CH2Cl2中的溶液(200ml)用Et3N(45.0ml，315mmol)與Boc2O(45.7g，209mmol)處理。然后，將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜，并用HCl(2M，200ml)稀釋，及萃取于CH2Cl2中。使合并的有機層干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，經(jīng)層析純化(EtOAc/己烷1∶4)，得到羥基酯10.08。
步驟8.
將甲酯10.08(3g，10.5mmol)在THF/H2O(1∶1)中的溶液用LiOHH2O(645mg，15.75mmol)處理，并于室溫下攪拌2小時。以HCl水溶液(1M，15ml)使反應(yīng)混合物酸化，并在真空中濃縮。使殘留物于真空中干燥，以定量產(chǎn)率得到10.09。
步驟9.
將酸10.09(得自上文)在CH2Cl2(50ml)與DMF(25ml)中的溶液用NH4Cl(2.94g，55.5mmol)、EDCI(3.15g，16.5mmol)、HOOBt(2.69g，16.5mmol)及NMM(4.4g，44mmol)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌3天。于真空下除去溶劑，并將殘留物以HCl水溶液(250ml)稀釋，并用CH2Cl2萃取。將合并的有機層以飽和NaHCO3水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，獲得10.10，將其原樣用于下面的步驟。(或者，10.10也可于0℃下，通過使10.06(4.5g，17.7mmol)與H2O2水溶液(10ml)、LiOH·H2O(820mg，20.8mmol)在50mlCH3OH中反應(yīng)0.5小時而直接獲得)。
步驟10.
使前一步驟中所獲得的10.10溶液溶于二氧六環(huán)中的4N HCl內(nèi)，并在室溫下攪拌2小時。使反應(yīng)混合物在真空中濃縮，獲得中間物10.11，為固體，無需進一步純化而使用。
步驟11.
采用基本上在上文步驟9、10中所述的程序，用適當(dāng)試劑從化合物10.09，獲得所需的中間體10.12。
中間體11.01的制備步驟1 向4-戊炔-1-醇11.02溶液(4.15g；Aldrich)中添加Dess-MartinPeriodinane(30.25g；Aldrich)，并將所形成的混合物攪拌45分鐘，然后添加(叔-丁氧羰基亞甲基)三苯基正膦(26.75g；Aldrich)。將所形成的深色反應(yīng)物攪拌過夜，用EtOAc稀釋，以亞硫酸鈉水溶液、飽和NaHCO3水溶液、水、鹽水洗滌，并干燥。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用己烷中的1％EtOAc作為洗脫液，得到所需的化合物11.03(3.92g)。也獲得一些不純流分，但此時擱置一旁。
步驟2 使用正-丙醇(20ml；Aldrich))中的烯烴11.03(1.9g)、正-丙醇(40ml)中的氨基甲酸芐酯(4.95g；Aldrich)、水(79ml)中的NaOH(1.29g)、次氯酸叔-丁酯(3.7ml)、正-丙醇(37.5ml)中的(DHQ)2PHAL(0.423g；Aldrich)及鋨酸鉀脫水物(0.1544g；Aldrich)，以及Angew.Chem.Int.Ed.Engl(1998)，35，(23/24)，第2813-7頁中所述程序，獲得粗產(chǎn)物，使其經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶5)，得到所需的氨基醇11.04(1.37g，37％)，為白色固體。
步驟3 向酯11.04(0.700g)中添加二氧六環(huán)中的4M HCl(20ml；Aldrich)，并使所得到的混合物于室溫下靜置過夜。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，獲得酸11.05(0.621g)，為白色固體。
步驟4 于室溫下，將BOP試劑(3.65g；Sigma)，接著是三乙胺(3.45ml)添加至羧酸11.05(2.00g)的二氯甲烷(20ml)溶液與烯丙基胺(0.616ml)中，并將所形成的混合物攪拌過夜。使反應(yīng)混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(硫酸鎂)。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用(EtOAc∶己烷；70∶30)作為洗脫液，提供所需的酰胺11.01(1.73g)，為粘稠黃色油。
中間體12.03與12.04的制備步驟1 使用基本上關(guān)于中間體10.11步驟3-8所述的程序，使化合物12.01轉(zhuǎn)化成所需的物質(zhì)12.02。
步驟2 使用基本上關(guān)于中間體10.11步驟9、10所述的程序，使化合物12.02轉(zhuǎn)化成所需的中間體12.03。
步驟3 使用基本上關(guān)于中間體10.12步驟11所述的程序，使化合物12.02轉(zhuǎn)化成所需的中間體12.03。
中間體13.01的制備步驟1 于0℃-5℃下，用2小時向1-硝基丁烷13.02(16.5g，0.16mol)與乙醛酸在H2O(28.1g，0.305mol)和MeOH(122ml)中的攪拌溶液中逐滴添加三乙胺(93ml，0.667mol)。使溶液溫?zé)嶂潦覝?，攪拌過夜，并濃縮至干燥，得到油狀物。然后，使油溶于H2O中，并以10％HCl酸化至pH＝1，接著以EtOAc萃取。將合并的有機溶液用鹽水洗滌，以Na2SO4干燥，過濾，并濃縮至干燥，獲得產(chǎn)物13.03(28.1g，99％產(chǎn)率)。
步驟2 向化合物13.03(240g，1.35mol)在醋酸(1.25L)中的攪拌溶液中添加10％Pd/C(37g)。使所形成的溶液于59psi下氫化3小時，接著在60psi下過夜。然后，使醋酸蒸發(fā)，并與甲苯共沸3次，接著以MeOH及乙醚研磨。然后過濾溶液，并與甲苯共沸兩次，得到13.04，為灰白色固體(131g，0.891mol，66％)。
步驟3 于0℃下，向氨基酸13.04(2.0g，13.6mmol)在二氧六環(huán)(10ml)與H2O(5ml)中的攪拌溶液中添加1N NaOH溶液(4.3ml，14.0mmol)。將所形成的溶液攪拌10分鐘，接著添加二碳酸二-叔-丁酯(0.110g，14.0mmol)，并于0℃下攪拌15分鐘。然后，使溶液溫?zé)嶂潦覝兀瑪嚢?5分鐘，并在冰箱中保持過夜，并濃縮至干燥，獲得粗制物質(zhì)。向此粗制物質(zhì)在EtOAc(100ml)與冰中的溶液中加入KHSO4(3.36g)與H2O(32ml)，并攪拌4-6分鐘。接著分離有機層，并以EtOAc將水層萃取兩次，且將合并的有機層以水、鹽水洗滌，以Na2SO4干燥，過濾，并濃縮至干燥，得到產(chǎn)物13.05，為透明膠狀物(3.0g，89％產(chǎn)率)。
步驟4
使用基本上關(guān)于中間體10.12，步驟11所述的程序，使化合物13.05轉(zhuǎn)化成所需的中間體13.01。
中間體14.01的制備步驟1 使用基本上關(guān)于中間體13.01，步驟1-3所述的程序，使化合物14.02轉(zhuǎn)化成所需的物質(zhì)14.03。
步驟2 使用基本上關(guān)于中間體10.12，步驟11所述的程序，使化合物14.03轉(zhuǎn)化成所需的中間體14.01。
中間體15.01的制備步驟1 于0℃下，向亞硝酸銀(9g，58.5mmol)在乙醚(25ml)中的懸浮液中慢慢地經(jīng)過添液漏斗(約15分鐘)加入4-碘-1，1，1-三氟丁烷15.02(10g，42.0mmol)在乙醚(25ml)中的溶液。將所形成的混合物于0℃下激烈攪拌，并溫?zé)嶂潦覝亍?0小時后，經(jīng)過硅藻土墊濾出固體物質(zhì)。使所形成的乙醚溶液于真空中濃縮，獲得15.03，為無色油，其無需進一步純化而使用。
步驟2 使用基本上關(guān)于中間體13.01，步驟1-3所述的程序，使化合物15.03轉(zhuǎn)化成所需的物質(zhì)15.04。
步驟3 使用基本上關(guān)于中間體10.12，步驟11所述的程序，使化合物15.04轉(zhuǎn)化成所需的中間體15.01。
中間體16.01的制備 如上文所述處理酸16.02(Winkler，D.；Burger，K.，Synthesis，1996，1419)(中間體10.12的制備)，獲得期望的中間體16.01。
P2/P3-P2部分的制備中間體20.01的制備 氨基酯20.01按照R.Zhang和J.S.Madalengoitia (J.Org.Chem.1999，64，330)的方法制成，但通過Boc-保護的氨基酸與甲醇制HCl的反應(yīng)而裂解Boc基團。
(注在所報告合成的一種變化中，將锍葉立德用其相應(yīng)的葉立德置換)。
中間體20.04的制備步驟1 于0℃下，用BOP試劑處理市售的氨基酸Boc-Chg-OH20.02(Senn化學(xué)品，6.64g，24.1mmol)與胺鹽酸鹽20.01(4.5g，22mmol)在CH2Cl2(100ml)中的溶液，并在室溫下攪拌15小時。使反應(yīng)混合物于真空中濃縮，然后將其以1M HCl水溶液稀釋，并萃取于EtOAc(3×200ml)中。將合并的有機層以飽和NaHCO3(200ml)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，并在真空中濃縮，及層析(SiO2，EtOAc/己烷3∶7)，獲得20.03(6.0g)，為無色固體。
步驟2 將甲酯20.03(4.0g，9.79mmol)在THF/H2O(1∶1)中的溶液用LiOH·H2O(401mg，9.79mmol)處理，并于室溫下攪拌3小時。以HCl水溶液使反應(yīng)混合物酸化，并于真空中濃縮，獲得所需的中間體游離酸20.04。
中間體20.07的制備步驟1 使Boc-叔-Leu 20.05(Fluka，5.0g，21.6mmol)在無水CH2Cl2/DMF(50ml，1∶1)中的溶液冷卻至0℃，并以胺鹽20.01(5.3g，25.7mmol)、NMM(6.5g，64.8mmol)及BOP試劑(11.6g，25.7mmol)處理。將反應(yīng)物于室溫下攪拌24小時，用HCl水溶液(1M)稀釋，并用CH2Cl2萃取。將合并的有機層用HCl(水溶液，1M)、飽和NaHCO3、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，過濾，并在真空中濃縮，經(jīng)層析純化(SiO2，丙酮/己烷1∶5)，得到20.06，為無色固體。
步驟2 使甲酯20.06溶液(4.0g，10.46mmol)溶于二氧六環(huán)中的4M HCl內(nèi)，并在室溫下攪拌3小時。使反應(yīng)混合物于真空中濃縮，獲得胺鹽酸鹽20.07，使用之而無需純化。
中間體20.10的制備步驟1 向1.17(10.4g，28mmol)在DCM(300ml)中的-20℃溶液中加入HATU(1.05當(dāng)量，29.4mmol，11.2g)、胺鹽、中間體12.03(1.0當(dāng)量，28mmol，5.48g)。于-20℃下10分鐘后，添加DIPEA(3.6當(dāng)量，100mmol，17.4ml)。將反應(yīng)物于此溫度下攪拌16小時。16小時后，將反應(yīng)物用EtOAc稀釋，并以NaHCO3、檸檬酸(10％w/w)及鹽水連續(xù)洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，及在真空中濃縮，得到14克所需的中間體20.08。
步驟2 以對實例198所述的方式(步驟8)，使羥基酰胺20.08氧化成所需的酮酰胺20.09。LC-MS＝507(M+H)+。
步驟3 按關(guān)于20.06轉(zhuǎn)變成20.07中所述，進行t-Boc官能團20.09的去保護，獲得所需的物質(zhì)20.10。
中間體21.01的制備步驟1 于室溫下，向N-Boc-3，4-脫氫脯氨酸21.02(5.0g，23.5mmol)、二碳酸二-叔-丁酯(7.5g，34.4mmol)及4-N，N-二甲氨基吡啶(0.40g，3.33mmol)在乙腈(100ml)中的攪拌溶液中添加三乙胺(5.0ml，35.6mmol)。于真空中濃縮之前，將所形成的溶液在此溫度下攪拌18小時。使深褐色殘留物經(jīng)快速柱層析純化，用10-25％EtOAc/己烷洗脫，得到產(chǎn)物21.03，為淡黃色油(5.29g，84％)。
步驟2 在室溫下，向脫氫脯氨酸衍生物21.03(10.1g，37.4mmol)、芐基三乙基氯化銨(1.60g，7.02mmol)在氯仿(120ml)中的攪拌溶液中添加50％氫氧化鈉水溶液(120g)。于此溫度下激烈攪拌24小時后，將暗色混合物以CH2Cl2(200ml)與乙醚(600ml)稀釋。分離各層后，將水溶液以CH2Cl2/Et2O(1∶2，3×600ml)萃取。使有機溶液干燥(MgSO4)，并濃縮。使殘留物經(jīng)快速柱層析純化，使用5-20％EtOAc/己烷，得到9.34克(71％)21.04，為灰白色固體。
步驟3 于室溫下，將21.04(9.34g，26.5mmol)在CH2Cl2(25ml)與CF3CO2H(50ml)中的溶液攪拌4.5小時，然后使其在真空中濃縮，獲得褐色殘留物21.05，將其使用于步驟4，無需進一步純化。
步驟4 將濃鹽酸(4.5ml)添加至得自步驟3的殘留物21.05在甲醇(70ml)中的溶液內(nèi)，并使所形成的混合物在油浴中溫?zé)嶂?5℃。18小時后，使混合物于真空中濃縮，得到褐色油21.01，無需進一步純化而使用。
中間體22.01的制備步驟1 將雙(三甲基甲硅烷基)氨化鉀(158ml，在甲苯中的0.5M溶液；79mmol)添加至溴化環(huán)丙基三苯基(33.12g；86.4mmol)在無水四氫呋喃(130ml)中的攪拌懸浮液中，于氮氣氛及室溫下，將所形成的橙色混合物攪拌1小時，然后添加THF(8ml)中的醛22.02(9.68g；42.2mmol)。接著，使反應(yīng)物于氮氣氛下回流2小時。冷卻后，添加甲醇、乙醚和Rochelles鹽。分離有機相，用鹽水洗滌，干燥，及在減壓下濃縮。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1∶99)至EtOAc-己烷(5∶95)，提供烯烴22.03(8.47g)，為黃色油。
步驟2 通過將14.2ml乙酰氯逐滴添加至冷甲醇中，并于室溫下，將所形成的溶液稀釋至200ml來制備1M HCl在MeOH/MeOAc中的溶液。
使氨基甲酸酯22.03(9.49g；37.5mmol)溶于甲醇(12ml)中，并添加至MeOH/MeOAc中的1M HCl(150ml)內(nèi)，同時在冰浴中冷卻。使所形成的混合物在此溫度下保持1小時，然后移除冰浴，并于室溫下持續(xù)攪拌過夜。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到黃色油，其無需純化而用于下一步驟。
使黃色油溶于THF(30ml)與MeOH(20ml)的混合物中，并以三乙胺(15ml；108mmol)處理，直到溶液pH＝9-10為止。放置在冰浴中后，以N-Boc-Gly-Osu(11.22g；41mmol)處理混合物。撤去冰浴，并將反應(yīng)物于室溫下攪拌1小時。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用二氯甲烷中的甲醇(1-3％)，提供所需的酰胺22.04(9.09g)。
步驟3 使醇22.04(9.09g；33.6mmol)溶于丙酮(118.5ml)中，并以2，2-二甲氧基丙烷(37.4ml；304mmol)與BF3∶Et2O(0.32ml；2.6mmol)處理，且將所形成的混合物在室溫下攪拌5.5小時。將反應(yīng)溶液用數(shù)滴三乙胺處理，并于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用己烷中的5-25％EtOAc，提供N，O-縮醛22.05(8.85g)。
步驟4 使氨基甲酸酯22.05(8.81g；28.4mmol)溶于乙腈(45ml)中，并在氮氣氛下使溶液冷卻至-40℃。添加吡啶(6.9ml；85.3mmol)，接著加入nitrosium tetrafluoroborate(NOBF4)(6.63g；56.8mmol)，并使所形成的反應(yīng)混合物保持低于0℃，直到TLC顯示無起始原料殘留為止(約2.25小時)。添加吡咯烷(20ml；240mmol)，并撤除冷卻浴，并在室溫下持續(xù)攪拌1小時，然后于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物快速地通過硅膠墊，得到黃色油。
使黃色油溶于無水苯(220ml)中，并添加乙酸鈀(0.317g；1.41mmol)，接著將所形成的混合物在氮氣氛下加熱至回流1.5小時。冷卻后，在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使深色殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1∶4)，提供i)反式-吡咯烷酮22.06(1.94g)，接著是ii)順式-吡咯烷酮22.07(1.97g)。
步驟5 將新鮮制備的MeOAc/MeOH中的1M HCl(10ml；如上述)添加至N，O-縮醛22.06中，并于室溫下攪拌1小時。于減壓下除去溶劑，并使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用二氯甲烷中的0-4％MeOH作為洗脫液，提供所需的醇22.08(1.42g)，黃色油。
步驟6 向內(nèi)酰胺22.08(1.29g；8.44mmol)在無水四氫呋喃(55ml)中的溶液內(nèi)，添加氫化鋰鋁(2.40g；63.2mmol)，并使所形成的混合物回流8小時。冷卻后，添加水，接著加入15％NaOH水溶液，并經(jīng)過硅藻土過濾所形成的混合物，且以THF和MeOH充分洗滌固體。于減壓下除去溶劑，并使殘留物再溶解于二氯甲烷中，干燥，并在減壓下濃縮，提供吡咯烷，可無需純化而使用。
于-60℃及氮氣氛下，將Hunigs堿(4.5ml；25.8mmol)添加至N-Boc-L-叔-Leu-OH(1.76g；7.6mmol)、粗制吡咯烷及HATU(2.89g；7.6mmol)在無水二氯甲烷(50ml)中的混合物中。使所形成的反應(yīng)物慢慢回復(fù)至室溫過夜。添加EtOAc，并將黃色溶液以稀HCl水溶液、碳酸氫鈉飽和水溶液、水、鹽水洗滌。使有機層干燥，并于減壓下濃縮。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶3)，得到所需的酰胺22.09(2.00g)。
步驟7 使醇22.09(2.00g；5.67mmol)溶于丙酮(116ml)中，并在冰浴中冷卻10分鐘。然后，將此溶液添加至已冷卻的Jones試劑(14.2ml；約2mmol/ml)中，并將所形成的混合物于5℃下攪拌0.5小時，且移除冰浴。在添加至EtOAc(100ml)中的硫酸鈉(28.54g)、硅藻土(15g)之前，將反應(yīng)物于室溫下再攪拌2小時。1分鐘后添加異丙醇(15ml)，然后再攪拌10分鐘，并過濾。使濾液在減壓下濃縮，提供褐色油，使其溶于EtOAc中。將此溶液以水、3％檸檬酸水溶液、鹽水洗滌，干燥，及濃縮，提供所需的羧酸22.01(1.64g)，為白色固體。
中間體23.01的制備步驟1 向酯23.02(6.0g)與分子篩(5.2g)在無水二氯甲烷(35ml)中的混合物中添加吡咯烷(5.7ml，66.36mmol)。將所形成的褐色漿液于室溫及N2下攪拌24小時，過濾，并以無水CH3CN洗滌。濃縮合并的濾液，得到所需的產(chǎn)物23.03。
步驟2 向得自前一步驟的產(chǎn)物23.03在CH3CN(35ml)中的溶液中添加無水K2CO3、甲代烯丙基氯(2.77g，30.5mmol)、NaI(1.07g，6.7mmol)。將所形成的漿液于環(huán)境溫度及N2下攪拌24小時。添加50ml冰冷卻的水，接著加入2N KHSO4溶液，直到pH值為1。添加EtOAc(100ml)，并將混合物攪拌0.75小時。收集合并的有機層，并用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，及蒸發(fā)，得到所需的產(chǎn)物23.04。
步驟3 使得自前一步驟的產(chǎn)物23.04(2.7g，8.16mmol)溶于二氧六環(huán)(20ml)中，并用新鮮制備的1N LiOH(9ml)處理。將反應(yīng)混合物于環(huán)境溫度及N2下攪拌20小時。使反應(yīng)混合物溶于EtOAc中，并以H2O洗滌。使合并的水相冷卻至0℃，并使用1N HCl酸化至pH 1.65。以EtOAc(2×100ml)萃取混濁混合物。將合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，及濃縮，得到所需的酸；23.05(3.40g)。
步驟4 向NaBH(OAc)3(3.93g，18.5mmol)在CH2Cl2(55ml)中的懸浮液中添加得自前一步驟的產(chǎn)物23.05在無水CH2Cl2(20ml)與乙酸(2ml)中的溶液。將漿液于環(huán)境溫度下攪拌20小時。將冰冷卻的水(100ml)添加至漿液中，并攪拌1/2小時。分離有機層，過濾，干燥，并蒸發(fā)，得到所需的產(chǎn)物23.06。
步驟5 將得自前一步驟的產(chǎn)物23.06(1.9g)在MeOH(40ml)中的溶液，以過量CH2N2/Et2O溶液處理，并攪拌過夜。使反應(yīng)混合物濃縮至干，得到粗殘留物。使殘留物于硅膠上層析，以EtOAc/己烷梯度液洗脫，得到1.07g所需的純產(chǎn)物23.07。
步驟6 將得自前一步驟的產(chǎn)物23.07(1.36g)在無水CH2Cl2(40ml)中的溶液，以BF3.Me2O(0.7ml)處理。將反應(yīng)混合物于環(huán)境溫度下攪拌20小時，并以飽和NaHCO3(30ml)使反應(yīng)猝滅，攪拌1/2小時。分離有機層，并將合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，濃縮，得到粗制殘留物。使殘留物于硅膠上層析，以EtOAc/己烷梯度液洗脫，得到0.88g所需化合物23.08。
步驟7 在室溫下，向得自前一步驟的產(chǎn)物23.08(0.92g)在MeOH(30ml)中的溶液中添加10％Pd/C(0.16g)，并于環(huán)境溫度及1大氣壓力下氫化。將反應(yīng)混合物攪拌4小時，并濃縮至干，得到所需化合物23.01。
P3部分的制備中間體50.01的制備步驟1 向50.02(15g)在MeOH(150ml)中的溶液中添加濃HCl(3-4ml)，并使混合物回流16小時。使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并濃縮。使殘留物溶于乙醚(250ml)中，并以冷飽和碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌。使有機層干燥(Na2SO4)，并濃縮，得到甲酯50.03(12.98g)，其無需進一步純化而往前進行。
步驟2 使得自上文的甲酯50.03溶于二氯甲烷(100ml)中，并在氮氣氛下冷卻至-78℃。用2小時逐滴添加DIBAL(二氯甲烷中的1.0M溶液，200ml)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝亟?jīng)16小時。使反應(yīng)混合物冷卻至0℃，并逐滴添加MeOH(5-8ml)。慢慢添加10％酒石酸鈉鉀溶液(200ml)，并攪拌。以二氯甲烷(100ml)稀釋，并分離有機層(伴隨著一些白色沉淀物)。將有機層以1N HCl(250ml)、鹽水(200ml)洗滌，干燥(Na2SO4)，及濃縮，提供醇50.04(11.00g)，為透明油。
步驟3 使得自上文的醇50.04溶于二氯甲烷(400ml)中，并在氮氣氛下冷卻至0℃。分次添加PCC(22.2g)，并使反應(yīng)混合物慢慢溫?zé)嶂潦覝亟?jīng)16小時。將反應(yīng)混合物以乙醚(500ml)稀釋，并經(jīng)過硅藻土墊過濾。濃縮濾液，并使殘留物溶于乙醚(500ml)中。使其通過硅膠墊，并濃縮濾液，提供醛50.05，其無需進一步純化而往前進行。
步驟4 基本上使用Chakraborty等的方法(Tetrahedron，1995，51(33)，9179-90)，使得自上文的醛50.05轉(zhuǎn)化成所需的物質(zhì)50.01。
具體實施例的制備實施例108 步驟1和2
步驟1于-78℃及氮氣氛下，將KHMDS(200ml，甲苯中的0.5M溶液)逐滴添加至環(huán)己烷羧酸甲酯(11.1g；78mmol)在無水THF(200ml)中的攪拌溶液中。于添加完成時，使反應(yīng)在此溫度下再保持0.5小時，然后添加芐基氯甲基醚(18.6ml；134mmol)。使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝剡^夜，并添加水(100ml)。水溶液處理后提供殘留物，使其經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶10)作為洗脫液，得到所需的不純中間體醚(14.98g)，為無色油。
步驟2使10％Pd/C(0.5g)與前述粗制醚(4.1g)在MeOH(80ml)中的黑色懸浮液，于室溫下暴露于氮氣氛(氣囊)過夜。經(jīng)過硅藻土墊過濾反應(yīng)物，并將固體以甲醇充分洗滌。使合并的濾液于減壓下濃縮，并使粗產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶5)，得到伯醇(108A；0.62g)，無色油。
步驟3 于0℃及氮氣氛下，將甲磺酰氯(0.31ml)和三乙胺(0.75ml)先后加入伯醇(108A；0.62g)的攪拌溶液中。將所形成的混合物于此溫度下攪拌0.5小時。將反應(yīng)混合物萃取于EtOAc中，并以1M HCl水溶液、飽和NaHCO3水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，并濃縮。以黃色油獲得殘留物(甲烷磺酸酯108B；0.74g)，其無需純化而用于后續(xù)步驟。
步驟4 將甲烷硫醇鈉(0.236g；2當(dāng)量)添加至甲烷磺酸酯(108B；0.42g)的DMF(2ml)溶液中，并將混合物加熱至100℃，歷經(jīng)1小時。水溶液處理，并使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶20)洗脫，獲得硫化物(108C；0.089g)。
步驟5和6 步驟5使氫氧化鉀(0.25g)溶于水(1ml)與乙醇(5ml)的混合物中，并添加至甲酯(108C；0.089g)中，將所形成的混合物于氮氣氛下加熱至回流過周末(約72小時)。冷卻后，使反應(yīng)物在EtOAc與稀HCl水溶液之間分配。將有機相分離，用鹽水洗滌，干燥，并濃縮，產(chǎn)生粗制中間體羧酸，無需純化而使用。
步驟6將三乙胺(61μL)和DPPA(95μL)先后加入到得自前一步驟的羧酸的甲苯溶液中，并將反應(yīng)物加熱至100℃過夜。冷卻后，使反應(yīng)混合物在EtOAc和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。將有機相分離，干燥，并濃縮，得到異氰酸酯(108D；50mg)，無需純化而使用。
步驟7和8 步驟7將二氯甲烷(1ml)中的異氰酸酯(108D；50mg)添加至其鹽酸鹽(108E；以對20.06的轉(zhuǎn)變成20.07所述的方式，由20.08制得；100mg)與三乙胺(111μL)在二氯甲烷(2ml)中的混合物中，并將所形成的混合物于室溫下攪拌4小時。使反應(yīng)混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(硫酸鎂)，并濃縮，得到殘留物，將其使用于步驟8而無需純化。
步驟8使前述步驟中的殘留物溶于甲苯(3ml)與二甲亞砜(3ml)的混合物中，并添加EDCI(647mg)，接著是二氯乙酸(140μL)，且將所形成的反應(yīng)混合物于室溫下攪拌4小時。使反應(yīng)混合物于EtOAc和5％亞硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以10％HCl水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(硫酸鎂)，并濃縮，得到殘留物，使其經(jīng)硅膠柱層析純化，使用丙酮∶己烷(40∶60)作為洗脫液，提供所需的酮基-酰胺(108；11.5mg)。MSMH+，592.1.
實施例185
步驟1 使Oxone(5.68g)溶于水(5ml)中，并添加至甲醇(5ml)中的羧酸185A(1.25g)中，同時在冰浴中冷卻。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝剡^夜。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物在二氯甲烷與水之間分配。分離水相，并以二氯甲烷萃取(X2)。使合并的有機相干燥，并濃縮，得到砜(185B；1.10g)，為白色固體，無需純化而用于后續(xù)程序。
步驟2和3 步驟2使氨基甲酸芐酯(11.01；0.16g)溶于TFA(7ml)中，并添加二甲硫(1.78ml)，且使所形成的混合物在室溫下靜置3小時，然后于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。獲得殘留物，將其使用于下文步驟3中。
步驟3將三乙胺(111μL)添加至得自步驟2的殘留物羧酸(1.17；0.180g)與BOP試劑(0.236g)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于乙酸乙酯與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，干燥(硫酸鎂)，并于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(70∶30)作為洗脫液，得到所需的羥基-酰胺(185D；0.165g)，為白色固體。
步驟4 將Periodinane(0.236g)添加至醇(185D；0.152g)在二氯甲烷(5ml)中的攪拌溶液中，并將所形成的白色懸浮液攪拌2小時，然后添加至EtOAc與5％亞硫酸鈉水溶液的混合物中。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(40∶60)作為洗脫液，得到所需的酮基-酰胺(185E；0.147g)，為白色固體。MSMH+，545.5。
步驟5 將HCl在二氧六環(huán)中的溶液(4M；5ml；Aldrich)添加至氨基甲酸酯(185E；0.14g)中，并使其在室溫下靜置3小時。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，提供其鹽酸鹽(185F；0.126g含有少量二氧六環(huán))。
步驟6和7 步驟6將DPPA(19μL)添加至羧酸(185B；20mg)和三乙胺(13μL)在甲苯(1ml)中的混合物中，并將所形成的反應(yīng)混合物加熱至回流1小時。冷卻后，使反應(yīng)物在EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。分離有機相，干燥，并于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。獲得粗制中間體異氰酸酯，將其使用于下文步驟7而無需純化。
步驟7使得自步驟6的產(chǎn)物溶于二氯甲烷(1ml)中，并添加至其鹽酸鹽(185F；20mg)與三乙胺(60μL)在二氯甲烷(1ml)中的混合物中，且將所形成的混合物在室溫下攪拌1小時。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使所形成的殘留物經(jīng)硅膠板層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶1)作為洗脫液，提供酮基-酰胺(185；16.3mg)，為白色固體。MSMH+，662.5。
式132與210化合物直接由式122化合物的制備 使用硫化物122(以類似如108的方式，使用甲酯210A而非108C制成；20mg)、Oxone(27mg；1.5當(dāng)量)、水(1ml)、甲醇(1ml)及先前提出的程序(185A至185B)，獲得粗制反應(yīng)產(chǎn)物，使其經(jīng)硅膠板層析純化，使用EtOAc作為洗脫液。獲得砜(210；MH+＝704.4；5.6mg)，為白色固體，接著是亞砜類的混合物(132；MH+＝688.5；6.3mg)，也為白色固體。
化合物113的制備
步驟1和2 步驟1使用環(huán)己烷羧酸甲酯(5.55g)、KHMDS(100ml，甲苯中的0.5M溶液)、無水THF(100ml)及芐基2-溴基乙醚(10.09g)，以及前述程序(實施例108，步驟1)，于硅膠柱層析(EtOAc∶己烷15∶85)后，獲得所需的中間體芐基醚(6.83g)。
步驟2使用前述芐基醚(5.00g)、10％Pd/C(1.00g)、甲醇(20ml)及前述程序(實施例108；步驟2)，經(jīng)硅膠柱層析(EtOAc∶己烷；1∶10)之后，獲得內(nèi)酯(113B；0.87g)，接著獲得醇(113A；2.01g)。
步驟3 步驟3將硫代酚鈉(Sodium thiophenoxide)(0.68g)添加至內(nèi)酯(113B；0.84g)在乙醇(15ml)中的溶液中，并將所形成的混合物于氮氣氛下加熱至回流過夜。冷卻后，水溶液處理，并使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化(EtOAc-己烷；30∶70)，獲得羧酸(113C；0.32g)，為黃色固體。
使用前文關(guān)于108C轉(zhuǎn)化成108中所述的化學(xué)，以類似方式使113C轉(zhuǎn)化成113。MS，MH+，668.3。
化合物116的制備 步驟1使用醇(113A；1.00g)、甲磺酰氯(1.12g)、三乙胺(0.82g)、二氯甲烷(10ml)及前述程序(108A至108B)，獲得所需的中間體甲烷磺酸酯，并使用于下一步驟而無需純化。
步驟2于室溫下，使用前述甲烷磺酸酯、甲烷硫醇鈉(0.75g)、乙醇(10ml)及前述程序(108B至108C)，經(jīng)硅膠柱層析(EtOAc-己烷；1∶10)后，獲得所需的硫化物(116A；0.78g)。使用前述程序(108C至108D)和(108D至108)，使中間體116A轉(zhuǎn)變成116。MS；MH+，606.1。
化合物198的制備
步驟1和2″ 步驟1和2步驟1使3-芐氧基苯胺(5.00g；Aldrich)溶于濃HCl混合物(10ml)中，并添加冰(10.00g)。添加水(10ml)中的亞硝酸鈉(1.85g)，同時在冰浴中冷卻。于添加完成時，添加O-乙基黃酸鉀，并在此溫度下攪拌，直到停止氮氣釋出停止，然后于40-45℃下加熱1.5小時。冷卻后，水溶液處理，并經(jīng)硅膠柱純化層析(己烷中的2-5％EtOAc)，得到中間體黃酸鹽(3.60g)。
步驟2將氫化鋰鋁(6.4ml，THF中的1M溶液)逐滴添加至前述黃酸鹽(1.49g)在THF(10ml)中的攪拌溶液中，并于室溫下攪拌0.5小時。以過量丙酮使反應(yīng)猝滅，并于EtOAc與1M HCl水溶液之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化(己烷中的1-2％EtOAc)，獲得苯硫酚(198A；0.84g)，白色固體。
步驟3 將硫醇(198B；0.72g)添加至NaH(0.08g，礦油中的60％分散液)在無水DMF中的懸浮液中，同時于氮氣氛下，在冰浴中冷卻。將所形成的混合物攪拌1小時，并添加甲磺酸酯(108B；0.417g)，且使反溫?zé)嶂潦覝剡^夜。水溶液處理，并使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化(己烷中的3％EtOAc)，獲得硫化物(198C；0.313g)。
步驟4-6 使用前一步驟中所產(chǎn)生的硫化物(198C)，使用(108C至108D)與(185A至185D)中提出的程序，制備異氰酸酯(198D)。將異氰酸酯(198D)無需純化而用于后續(xù)程序。
步驟7 將最少量二氯甲烷(約1ml)中的異氰酸酯(198D；0.139g)，添加至鹽酸鹽(108E；0.080g)與三乙胺(0.126ml)的混合物中，并將所形成的混合物于室溫下攪拌4小時。使反應(yīng)混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并濃縮。將粗制反應(yīng)產(chǎn)物(198E)以粗制物使用于下一步驟中。氧化作用步驟8 使得自前一步驟的粗產(chǎn)物(198E)溶于DMSO(3ml)與甲苯(3ml)中，并添加EDCI(0.346g)，接著加入二氯乙酸(0.074ml)，且將所形成的混合物于室溫下攪拌4小時。使反應(yīng)物于EtOAc與5％亞硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，干燥，并濃縮。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用丙酮∶己烷(30∶70)作為洗脫液，得到酮基-酰胺(198；MH+＝792.2；55mg)。
從芐基醚198制備酚199 將10％Pd-C(25mg)和甲酸(0.125ml)先后加入到芐基醚(198；50mg)在乙醇(4ml)中的溶液中，并使所形成的黑色懸浮液回流1小時。冷卻后，經(jīng)過硅藻土墊過濾反應(yīng)物，并以甲醇洗滌固體。使合并的濾液于減壓下濃縮，得到所需的酚(199；MH+＝702.2；23mg)。與式210化合物的替代制備 步驟1 將二甲基甲酰胺(20ml；無水；Aldrich)添加至氫化鈉(0.56g；Aldrich)中，并將叔-丁基硫醇添加至此懸浮液中，同時于氮氣氛下，在冰浴中冷卻。一旦添加完成后，即添加甲烷磺酸酯(108B；按上述由2.00g醇制備；108A)，并將所形成的混合物于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與水之間分配，并分離有機相，干燥(MgSO4)。經(jīng)硅膠柱層析，使用EtOAc-己烷(2∶98)，提供甲酯-硫化物(210A；1.75g)。
將EtOAc添加至水相中，并添加10％HCl水溶液，直到水層pH＝1為止。將有機層分離，以水洗滌，干燥，及在減壓下濃縮，獲得硫化物-羧酸(210B；0.747g)，為白色固體。
步驟2 于甲醇(75ml)中的硫化物(210B；2.287g)中添加Oxone(18.00g；Aldrich)溶液，并將所形成的白色懸浮液于室溫下攪拌過夜。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使白色固體在EtOAc與水之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮，提供砜(210C；2.52g；含有一些溶劑)。
步驟3 將三乙胺(0.173ml)和DPPA(0.268ml)先后加入到羧酸(210E；0.325g)在甲苯(3ml)中的溶液中，并將所形成的混合物加熱至110℃(油浴)1小時。冷卻后，使反應(yīng)混合物在EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮。使殘留物溶于二氯甲烷(1ml)中，并添加至鹽酸鹽(185F；0.300g)與三乙胺(0.044ml)在二氯甲烷(3ml)中的混合物中，且將所形成的反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，干燥，并濃縮，得到粗產(chǎn)物，其無需純化而用于下一步驟。
步驟4 使得自前一步驟的殘留物(210D)溶于二氯甲烷(5ml)中，并添加Dess-Martin Periodinane(0.527g)，且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時。使反應(yīng)物于EtOAc與5％亞硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(70∶30)作為洗脫液，得到所需的酮基-酰胺(210；0.310g)。
式284化合物的制備 步驟1和2 步驟1使用甲苯(10ml)中的羧酸(210C；2.52g)、DPPA(2.07ml)、三乙胺(1.34ml)，以及上文提出的程序，形成粗制異氰酸酯。
步驟2使中間體異氰酸酯溶于二氯甲烷(2ml)中，并添加至鹽酸鹽284A(采用關(guān)于20.06向20.07的轉(zhuǎn)化中所述，由20.04制備；1.66g)與三乙胺(3.4ml)的混合物中，且將混合物在室溫下攪拌過夜。水溶液處理，并使殘留物于硅膠上純化，使用EtOAc-己烷(3∶97)，獲得所需的脲(284B)。
步驟3 使甲酯(284B)溶于二氧六環(huán)(90ml)與水(30ml)的混合物中，并添加氫氧化鋰∶單水合物(0.402g；2當(dāng)量)，且將反應(yīng)物在室溫下攪拌3小時。使反應(yīng)混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮，得到羧酸(284C；2.65g)。試劑步驟4 將BOP試劑(2.54g)和三乙胺(2.4ml)先后加入到羧酸(284C；2.65g)及鹽酸鹽(12.03；0.933g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中，并于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并濃縮。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用二氯甲烷中的2-10％MeOH作為洗脫液，得到所需的酰胺(284D；2.92g)。
步驟5 向羧酰胺(284D；2.92g)在甲醇(30ml)中的溶液中加入DMF-DMA(1.12ml)，并將所形成的混合物于室溫下攪拌3小時，然后回流1.5小時，直到T.L.C.顯示無起始物質(zhì)留置。冷卻后，使反應(yīng)物在乙醚與1NHCl水溶液之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析，獲得甲酯(284E)，將其按下文步驟6所示處理。
步驟6 使甲酯(284E)溶于二氧六環(huán)(30ml)與水(10ml)的混合物中，并添加氫氧化鋰∶單水合物(0.354g)，且將所形成的混合物攪拌3小時。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮，提供羧酸(284F；2.80g)。
步驟7和8 步驟7將烯丙基胺(0.045ml)、BOP試劑(0.266g)及三乙胺(0.25ml)添加至羥基-酸(284F；0.348g)在二氯甲烷(5ml)中的溶液混合物中，并將所形成的混合物于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并濃縮，提供殘留物，將其使用于下文步驟8而無需純化。
步驟8使殘留物溶于二氯甲烷(5ml)中，并添加Dess-Martin Periodinane(0.424g)，且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時。使反應(yīng)物于EtOAc與5％亞硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥，并濃縮。粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，得到所需的酮基-酰胺(284；0.296g)。MH+，732.2.
實施例331的制備.式331化合物的式331D和331E中間體的制備 步驟1.式331B與331C化合物的制備 使N-芐基-4-甲基丁亞胺(butanimine)(按以下所述制備Synthesis，1985，679)與四氫噻吩1，1-二氧化物以實施例336中所述的方式反應(yīng)，但在-78℃下，得到化合物331A，使其以實施例336中所述的方式氫解，但在1大氣壓力下進行。使粗產(chǎn)物于硅膠上層析，以EtOAc至1∶1丙酮-EtOAc的梯度液洗脫，獲得第一種外消旋非對映異構(gòu)物H1-NMR(CDCl3)δ3.2(m，1H)，3.1-2.9(m，3H)，2.3-2.1(m，2H)，2.1-1.9(m，1H)，1.9-1.7(m，2H)，1.02(d，3H)，0.85(d，3H)。
進一步洗脫提供另一種外消旋非對映異構(gòu)物H1-NMR(CDCl3)δ3.2(m，1H)，3.2-2.9(m，4H)，2.3-2.1(m，3H)，2.1-2.0(m，1H)，1.78(六重峰，1H)，0.96(m，6H).
步驟2.式331D和331E化合物的制備 以實施例336中所述的方式，使化合物331B與331C分別與光氣反應(yīng)，得到兩種非對映異構(gòu)的異氰酸酯一種得自較高Rf胺H1-NMR(CDCl3)δ3.79(dd，J1＝9.9Hz，J2＝3.0Hz，1H)，3.25(m，1H)，3.1-3.0(m，2H)，2.25(m，2H)，2.2-2.0(m，1H)，2.0-1.7(m，2H)，1.09(d，J＝6.9Hz，3H)，0.93(d，J＝6.9Hz，3H)。
另一種得自較低Rf胺H1NMR(CDCl3)δ3.92(dd，J1＝6.6Hz，J2＝4.8Hz，1H)，3.3-2.9(m，3H)，2.4(m，1H)，2.3(m，1H)，2.2-2.0(m，3H)，1.03(t，Δv＝6.3，6H)。
實施例336的制備.式336化合物的制備
步驟1.式336A化合物的制備 將20ml 2N LDA在己烷-THF中的溶液添加至60ml THF中，并使溶液冷卻至-30℃。然后，于-30℃與-10℃之間，慢慢添加4.80g四氫噻吩1，1-二氧化物(Aldrich化學(xué)公司)，并于-10℃下再攪拌10分鐘。于-10℃下，立即添加7.5g N-芐基環(huán)己基亞胺(按以下所述制成Synthesis，1998，1609)。于環(huán)境溫度下0.5小時后，以飽和NaHCO3水溶液使混合物猝滅，并用CH2Cl2萃取。使萃液以無水Mg2SO4干燥，過濾，并蒸發(fā)濾液。使殘留物于硅膠上層析，以EtOAc-己烷(3∶7)洗脫，得到1.3克化合物336AH1-NMR(CDCl3)δ7.5-7.2(m，5H)，3.76(ABq，Δv＝230Hz，J＝12，2H)，3.41(m，1H)，3.13(m，1H)，2.94(m，1H)，2.4-1.3(m，14H)。
步驟2.式336B化合物的制備 使1.3克化合物336A、30mlEtOH、1.2ml 4N HCl/二氧六環(huán)溶液及0.35g 10％Pd-C的溶液在3個大氣壓下氫化1.5小時。過濾混合物，并蒸發(fā)濾液。將殘留物以2N NaOH處理，并用CH2Cl2萃取，使萃液干燥并蒸發(fā)，留下0.51g化合物336B，其于靜置時固化H1-NMR(CDCl3)δ3.2-2.9(m，3H)，2.4-1.8(m，6H)，1.7-1.2(m，8H)。
步驟3.式336C化合物的制備 于0℃下，向0.75g光氣在30ml甲苯中的溶液中慢慢添加0.5g化合物336B與0.80ml二異丙基乙胺在10mlCH2Cl2中的溶液。將混合物于室溫下攪拌5小時，濃縮至15ml，過濾，然后以新鮮甲苯稀釋至18ml，產(chǎn)生0.12M化合物336C溶液，將其用于后續(xù)反應(yīng)。
步驟4.式336化合物的制備 以制備實施例108中所述的方式，使化合物336C與化合物20.10反應(yīng)，產(chǎn)生化合物336，為非對映異構(gòu)物的混合物。H1-NMR(DMSO-d6)δ8.40(m)，8.33(m)，8.00(d)，7.75(s)，6.25(m)，6.10(s)，6.01(s)，4.18(m)，3.92(m)，3.83(m)，3.78(m)，3.13(m)，2.90(m)2.47(m)，2.1-0.8(m；MeA1.01；MeB0.82；But0.91)，0.40(m)，0.19(m)。
實施例336C.化合物336C的替代合成 步驟1.式336E化合物的制備 以前述實施例中所述的方式，使2-氯代四氫噻吩(如下所述制成Chem.Pharm.Bull.，1986，34(9)，3644)與α-鋰環(huán)己烷羧酸(lithiocyclohexanecarboxylic acid)反應(yīng)，得到硫化物酯化合物336D，39％產(chǎn)率。以前述實施例中所述的方式，以oxone使化合物336D氧化，得到砜酯化合物336EH1NMR(CDCl3)δ3.73(s，3H)3.3-3.0(m，2H)，3.0-2.9(m，1H)，2.6-2.4(m，1H)，2.4-1.3(m，13H)。
步驟2.式336C化合物的制備 于100℃下，以前述實施例中所述的方式，用水-二氧六環(huán)中的LiOH水解化合物336E，得到砜羧酸化合物336FH1NMR(CDCl3)δ3.4-3.2(m，1H)，3.2-3.1(m，1H)，3.1-2.9(m，1H)，2.3-2.1(m，3H)，2.1-1.8(m，3H)，1.8-1.3(m，7H)。以前述實施例中所述的方式，使化合物336F與二苯基磷?；B氮化物反應(yīng)，得到化合物336C，為無色固體H1NMR(CDCl3)δ3.2(m，1H)，3.1-2.9(m，2H)，2.45(d，1H)，2.4-1.9(m，4H)，1.85-1.5(m，7H)，1.5-1.2(m，2H)。
化合物349的合成 在-78℃(浴液溫度)下，向乙酯(349A；10g；0.052mol)在乙醚(50ml)中的溶液中添加KHMDS(0.5M，在甲苯中；156.087ml；1.5當(dāng)量)。將所形成的溶液攪拌30分鐘，然后添加芐基氯甲基醚(11.89ml；密度1.13；1.65當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物于-78℃至室溫下攪拌24小時。通過加入飽和NH4Cl水溶液使反應(yīng)停止。接著，將其以乙酸乙酯稀釋，并將合并的有機相用鹽水洗滌，以Na2SO4干燥，及在真空中蒸發(fā)至干燥，提供淡褐色油(24.2g)。使其在硅膠上層析(300g)。使管柱以正-己烷中的1％-4％乙酸乙酯洗脫，在一些流分中提供純349B(6.54g)。
將芐基醚(239B；2.8316g；0.0091mol)在CHCl3(49.5ml)中的溶液以甲烷磺酸(22.65ml)處理，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌～70分鐘。將冰添加至反應(yīng)混合物中，并將其以乙酸乙酯稀釋。將有機相以飽和NaHCO3洗滌，以Na2SO4干燥，及在真空中蒸發(fā)至干燥，提供淡黃色油(2.86g)。使其在SiO2(65g)上層析。用正-己烷中的15％-25％乙酸乙酯洗柱，在一些流分中提供純349C(1.5913g)。
使醇(349C；1.14g；0.0051mol)在二氯甲烷(6.4ml)中的攪拌溶液在冰浴中冷卻，并以Et3N(0.7857ml；密度0.726；1.1當(dāng)量)與甲磺酰氯(0.4168ml；密度1.48；1.05當(dāng)量)處理?！?小時后，將反應(yīng)混合物以二氯甲烷稀釋，并用6N HCl和飽和NaHCO3先后洗滌。使有機相以Na2SO4干燥，并在真空中蒸發(fā)至干燥，提供甲磺酸酯349D(1.5447g)，為淡黃色油。
用叔-丁基硫醇(1.16ml；密度0.8；2當(dāng)量)處理NaH(0.4114g；在礦油中的60％分散液；2當(dāng)量)在無水DMF中的經(jīng)攪拌懸浮液，并以冰浴冷卻。將反應(yīng)混合物攪拌30分鐘，然后添加無水DMF(8+2ml)中的甲磺酸鹽(349D；1.5447g；1當(dāng)量)。移除冰浴，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。以6N HCl使反應(yīng)混合物酸化，并以乙酸乙酯萃取。使乙酸乙酯萃液以Na2SO4干燥，并于真空中蒸發(fā)至干燥，提供粗制349D(2.87g)，使其在SiO2(60g)上層析。用3％乙酸乙酯洗柱，在一些流分中提供純349E(1.38g)，為無色油。
用KOH顆粒(2.63g；10當(dāng)量)處理乙酯(349E；1.38g；0.00468mol)在乙醇(16ml)和水(4.13ml)中的溶液。使所形成的溶液回流7小時，然后使其冷卻至室溫過夜。于真空中蒸發(fā)乙醇，并使殘留物在CH2Cl2/水之間分配，以6N HCl酸化至pH 1。分離有機相，并將水相以CH2Cl2萃取三次。使合并的有機相以Na2SO4干燥，并在真空中蒸發(fā)至干燥，提供349F(1.19g)，為灰白色固體，熔點93-95℃。
在0℃下(浴液溫度)下，將已溶于水(31ml)中的Oxone(8.24g；3當(dāng)量)添加至硫化物(349F；119g；1當(dāng)量)在甲醇(31ml)中的攪拌溶液中。將反應(yīng)物于0℃至室溫下攪拌過周末。于真空中蒸發(fā)溶劑，并使殘留物在CH2Cl2/水之間分配。分離有機層，并將水層以CH2Cl2萃取兩次。使合并的有機相以Na2SO4干燥，并于真空中蒸發(fā)至干燥，提供349G(1.29g)，為結(jié)晶性固體，熔點212℃。
向酯(1.03；4.56g；0.0119mol)在二氧六環(huán)(18.23ml)中的已冷卻(冰浴)溶液中加入1.0N LiOH(18.23ml)，并攪拌。將反應(yīng)混合物攪拌2小時。TLC顯示一些起始物質(zhì)仍然殘留，因此添加2+1ml 1.0N LiOH，并攪拌過夜。經(jīng)TLC監(jiān)測反應(yīng)完成。添加6N HCl，以使反應(yīng)混合物酸化至pH 1，并添加乙酸乙酯(150ml)。振蕩后，分離乙酸乙酯相，并用乙酸乙酯萃取水相。將合并的乙酸乙酯相用鹽水洗滌一次，干燥(Na2SO4)，并在真空中蒸發(fā)至干燥，提供1.17，為無定形固體(4.7805g；包含溶劑)。
向酸1.17(0.7079g；0.00192mol)與胺鹽(12.04；0.5231g；1.16當(dāng)量)在CH2Cl2(10ml)中的-20℃溶液中加入HATU(0.77g；1.05當(dāng)量)，接著加入二異丙基乙胺(0.8913g；1.2ml；3.59當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物于-20℃下攪拌～16小時。然后，將其以EtOAc(～150ml)稀釋，并以飽和NaHCO3、10％檸檬酸連續(xù)洗滌，且以Na2SO4干燥。于真空中蒸發(fā)溶劑，提供無定形固體，使其在SiO2(42g)上層析。以正-己烷中的50％-60％EtOAc洗柱，在一些流分中提供純349H(0.7835g)。
將羥基酰胺349H(0.7835g；0.00142mol)在無水二氯甲烷(32ml)中的溶液，以Dess-Martin試劑(1.5134g；2.5當(dāng)量)處理，并攪拌及冷卻(冰浴)。移除冰浴，并將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌2.5小時。添加飽和Na2S2O3(32ml)，以分解過量氧化劑，并持續(xù)攪拌，直到混濁溶液轉(zhuǎn)變成透明兩相系統(tǒng)為止。然后，將反應(yīng)混合物以CH2Cl2(～100ml)稀釋，分離有機相，并以飽和NaHCO3、水洗滌一次，接著干燥。于真空中蒸干，提供349I(0.7466g)，為無定形固體。
將氨基甲酸叔-丁酯349I(0.7466g)用4M HCl/二氧六環(huán)(20ml)處理，并在加蓋塞子的燒瓶中留置45分鐘。于真空中蒸發(fā)大部份二氧六環(huán)，并使殘留物用正-己烷蒸發(fā)兩次；將其余殘留物以乙醚研磨，留下349K(0.6341g)，為自由流動性固體。
向酸349G(0.1g；0.0003351mol)的甲苯溶液(7.5ml)中添加Et3N(0.0467ml；46.7μl；1當(dāng)量)，接著加入二苯基磷?；B氮化物(0.072；72μl；1當(dāng)量)。使反應(yīng)混合物回流1小時。冷卻后，將其用乙酸乙酯(～50ml)處理，將有機相以飽和NaHCO3洗滌，及在真空中濃縮，提供349J(0.1g)。
向胺鹽酸鹽349K(0.1g；0.000207mol)在二氯甲烷(5ml)中的攪拌懸浮液中添加二異丙基乙胺(0.135g；5當(dāng)量)。1分鐘后，添加異氰酸酯349J(0.1g；0.0003385mol)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌2小時，然后將其用EtOAc稀釋，并用1N HCl、飽和NaHCO3洗滌，以Na2SO4干燥，及最后在真空中蒸發(fā)至干燥，提供無定形固體。使其經(jīng)硅膠板制備型TLC，使用正-己烷中的40％丙酮作為洗脫液。將uv正吸收帶用二氯甲烷中的60％丙酮萃取，提供349(0.122g)，為無定形固體。化合物350的合成 向胺鹽酸鹽20.10(0.0966g；0.000223mol)在二氯甲烷(5ml)中的攪拌懸浮液中，添加二異丙基乙胺(0.144g；5當(dāng)量)。1分鐘后，添加異氰酸酯349H(0.1g；0.0003385mol)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌2小時。然后將其以EtOAc(～100ml)稀釋，接著用1N HCl、飽和NaHCO3洗滌，以Na2SO4干燥，及最后在真空中蒸發(fā)至干燥，提供無定形白色固體(0.1731g)。使其在硅膠上經(jīng)預(yù)備型TLC，使用正-己烷中的40％丙酮作為洗脫液。將uv正吸收帶用二氯甲烷中的60％丙酮萃取，提供350(0.0671g)，為無定形固體。
實施例145式145化合物的制備 步驟1 將1-丙醇以金屬鈉(361mg，15.7mmol)處理，并于室溫下攪拌1小時。于鈉完全溶解后，添加芐基硫醇(2.74ml，23.2mmol)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌0.5小時。添加(S)-4-異丙基-唑烷酮(Aldrich，1g，7.74mmol)，并將反應(yīng)混合物于回流下加熱16小時。使反應(yīng)混合物于真空中濃縮，并將粗制混合物以冷水稀釋，且以乙醚(3×150ml)萃取。使合并的有機層干燥，過濾，在真空中濃縮，得到胺145b。用4M HCl使其轉(zhuǎn)化成其鹽酸鹽，并在高真空中干燥，得到145b.HCl(1.9g)。
步驟2 于0℃下，用光氣(15％，在甲苯中，10ml)處理，145b.HCl(1g，4.07mmol)在CH2Cl2(50ml)和飽和NaHCO3(70ml)中的溶液，并在0℃下攪拌3小時。將反應(yīng)混合物倒入分液漏斗中，并分離有機層。將有機層用冷NaHCO3、鹽水洗滌，并干燥(MgSO4)。使其濃縮，并原樣用于下一步驟。
使胺鹽酸鹽(1.04；865mg，2.7mmol)溶于CH2Cl2/DMF1∶1中，并冷卻至0℃。將混合物用(C2H5)3N(682mg，6.75mmol)和按上述制備的異氰酸酯(950mg，4.07mmol)處理，并于室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，并使殘留物溶于EtOAc中。將有機層以HCl水溶液、NaHCO3水溶液、鹽水洗滌。使反應(yīng)混合物干燥，過濾，及在真空中濃縮。殘留物經(jīng)層析純化(SiO2，EtOAc/己烷1∶3)，得到145c(880mg)。
步驟3 將145c(500mg，0.9mmol)在1，2二氯乙烷(10ml)中的溶液用MCPBA(70％，500mg)處理，并于0℃下，以乙醚及Na2S2O3水溶液稀釋。分離有機層，并以飽和NaHCO3水溶液及鹽水充分洗滌。使反應(yīng)混合物干燥(MgSO4)，過濾，在真空中濃縮，經(jīng)層析純化(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到145d(530mg)。MS(ESI)550[(M+1)+，100]，381(95)，353(20)。
步驟4 145d的轉(zhuǎn)化成145與284B轉(zhuǎn)化成284D，及108D轉(zhuǎn)化成108中所述的程序相同。MS(ESI)690[(M+1)+，100)，381(30)。
式347中間體的制備 步驟1 將苯甲醛縮二甲醇(10.0ml，67.2mmol)添加至CBZ-D-丙氨酸(15.0g，67.2mmol)在Et2O(180ml)中的冷卻溶液中，接著加入BF3.Et2O(50.6ml，403.2mmol)，歷經(jīng)15分鐘。將反應(yīng)混合物于-20℃下攪拌4天，并通過加入冰冷飽和NaHCO3(350.0ml)使反應(yīng)猝滅。將有機層以Et2O(500ml)稀釋，分離，以NaHCO3(5％水溶液)、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮。使用Et2O/己烷使粗制物再結(jié)晶，得到347A(13.6g，65％)。
步驟2 將THF(48.0ml)添加至經(jīng)火焰干燥的燒瓶中，并冷卻至-35℃。將KHDMS(PhMe中的0.5M溶液，42.0ml，21mmol)加入其中，接著逐滴添加347A(6.22g，20.0mol)和3-溴代-2-丙烯(2.02ml，20mmol)的混合物，保持內(nèi)部溫度在-30與-35℃之間。將反應(yīng)混合物于-35℃下攪拌2小時，然后使其溫?zé)?.5小時，通過加入冰冷的飽和NaHCO3(400.0ml)使反應(yīng)猝滅。將有機層以Et2O(600ml)稀釋，分離，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮。使粗制物于SiO2上使用CH2Cl2純化，得到347B(14.2g，90％)。
步驟3 向347B(10.7g，29.4mmol)在MeOH(200ml)中的溶液中加入LiOH(4N，15ml)，并在室溫下攪拌30分鐘，以H2O(500ml)稀釋，用EtOAc(4×400ml)萃取，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮。使粗制物于SiO2上使用CH2Cl2純化，得到347C(8.65g，88％)。
步驟4 向347C(8.56g，29.4mmol)在EtOH(100ml)中的冰冷溶液中加入LiBH4(960mg，44.1mmol)，并在室溫下攪拌12小時，于5℃下，將另一份LiBH4(960mg)加入其中，及在室溫下攪拌4小時，以H2O(100ml)與MeOH(100ml)稀釋，蒸發(fā)至干燥，溶于H2O(100ml)中，用EtOAc(500ml)萃取，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮。使粗制物于SiO2上純化，使用CH2Cl2中的EtOAc(1-8％)，得到347D(4.7g，60％)。
步驟5 將t-BuOK(1M，在THF中，3.85ml)添加至347D(4.06g，15.4mmol)在THF(20ml)中的冷卻(-5℃)溶液中，并于該溫度下攪拌2小時。使反應(yīng)混合物濃縮，再溶解于EtOAc(250ml)和NaOH(2N，50ml)中。將有機層以EtOAc(600ml)稀釋，分離，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮。使粗制物于SiO2上純化，使用EtOAc中的10％CH2Cl2，得到347E(1.4g)。
步驟6 使347E(1.37g，8.82mmol)溶于EtOH(25ml)中，并將Pd-C(10重量％，275.0mg)加入其中。將反應(yīng)混合物于氫大氣下攪拌12小時，過濾，濃縮，及在SiO2上純化，使用EtOAc中的10％CH2Cl2，得到347F(1.04g，75％)。
步驟7 使347F(2.58g，16.4mmol)溶于PrOH(40ml)中，并將NaSBu-t(10.2g，82mmol)加入其中。使反應(yīng)混合物回流136小時，冷卻，蒸發(fā)，及再溶解于EtOAc中，以H2O洗滌，有機層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮。使粗制物于SiO2上純化，使用CH2Cl2中的30％丙酮，得到347G(0.6g，19％)和347F(1.1g)。
步驟8 將飽和NaHCO3添加至347G(0.6g，3.0mmol)在CH2Cl2(30ml)中的冰冷溶液內(nèi)。將反應(yīng)混合物激烈攪拌10分鐘，并將COCl2(PhMe中的1.85M溶液，4.51ml)加入其中，及在室溫下持續(xù)攪拌1小時。有機層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，并濃縮至一半體積，得到347H，為CH2Cl2中的溶液。
步驟9 向347H(685mg，3.0mmol)在DMF(10.0ml)中的冷卻溶液(0℃)中添加20.07(1.05g，3.34mmol)，接著加入DIPEA(1.45ml，8.35mmol)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1.2小時，以乙酸乙酯稀釋，以3％檸檬酸、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，及在SiO2上純化，使用丙酮/CH2Cl2(1∶9)，得到347I(1.57g)。
步驟10 向347I(1.5g，3.34mmol)在CH2Cl2(100.0ml)中的冷卻溶液(0℃)中添加m-CPBA(2.51g，10.02mmol)。使反應(yīng)混合物溫?zé)嶂潦覝?，歷經(jīng)12小時，用CH2Cl2(300.0ml)稀釋，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，及在SiO2上純化，使用丙酮/CH2Cl2(1∶9)，得到347J(1.57g)。
步驟11 347J的轉(zhuǎn)化成347類似于284B轉(zhuǎn)化成284D與108D轉(zhuǎn)化成108中所述的程序。MS(LCMS)計算值681.94，實測值(MH+)683.2。
表3列出一些本發(fā)明化合物，及其通過在稍后所述的檢測測定的HCV絲氨酸蛋白酶抑制活性范圍?；钚砸訩i*范圍(毫微摩爾濃度)表示，其為A＝＜75nM；B＝75-250nM；及c＝＞250nM。
表3硫化物化合物










亞砜化合物


砜化合物















































































表3A列出根據(jù)本發(fā)明制備的其它化合物。下述實驗程序描述按照實驗制備表3A中所示的化合物。
實施例792
步驟1 向五亞甲基硫化物(10.09g)在無水苯(120ml)中的溶液中分次添加(經(jīng)40分鐘)N-氯代琥珀酰亞胺(13.02g)，同時保持內(nèi)部溫度低于9℃。將所形成的反應(yīng)混合物在低于15℃下攪拌45分鐘。過濾沉淀物，并使上清液于減壓下濃縮。將殘留物以冷己烷稀釋，過濾，及在減壓下濃縮上清液，提供氯化物，為黃色油(11.88g)。
在-78℃及氮氣氛下，向無水THF(15ml)中的二異丙基胺(12.5ml)中添加n-BuLi(53ml，己烷中的1.6M溶液)，并使所形成的混合物在此溫度下保持15分鐘，然后添加甲基環(huán)己烷羧酸(12.47ml)，且使反應(yīng)物于-78℃下再保持40分鐘。將無水THF中的氯化物(50ml)添加至反應(yīng)混合物中，并將燒瓶從冷卻浴中移出，使其慢慢溫?zé)嶂潦覝?。以含有濃HCl水溶液(2.7ml)的5％KH2PO4水溶液(100ml)使反應(yīng)猝滅。將有機物質(zhì)萃取于Et2O/EtOAc中，干燥(MgSO4)，及在減壓下濃縮，得到殘留物，使其經(jīng)硅膠柱層析純化，使用己烷中的0-2％EtOAc作為洗脫液。獲得雙環(huán)化合物(792A；8.12g)，為黃色油。
步驟2 使硫化物(792A；0.780g)在50％MeOH水溶液(8ml)中的溶液冷卻至0℃，并添加至Oxone(5.97g)在50％MeOH水溶液(8ml)中的冷卻(0℃)的懸浮液中，且使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝剡^夜，然后于二氯甲烷與水之間分配。將水層進一步用二氯甲烷萃取，并使合并的有機相干燥(MgSO4)，及在減壓下濃縮。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用己烷中的(25-35％)EtOAc，得到砜(792B；0.1598g)。使用硫化物(792A；8.12g)、Oxone(62.06g)、甲醇(30ml)、水(30ml)重復(fù)此反應(yīng)，獲得砜(792B；4.73g)。
使外消旋混合物(792B；0.4925g)進一步經(jīng)手性HPLC純化，使用制備型ChiralpakAS柱，使用己烷中的40％i-PrOH(45ml/分鐘；于218nm下監(jiān)測)，獲得(792B-對映體A；0.247g；保留時間37分鐘)，接著獲得(792B-對映體B；0.249g；保留時間63分鐘)。
步驟3和4 步驟3向羧酸(792C；0.1在72g)及其鹽酸鹽(792D)在二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入BOP試劑(0.246g)，接著加入三乙胺(0.232ml)，并將所形成的反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和NaHCO3水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到殘留物，將其使用于步驟4而無需純化。
步驟4向得自步驟3的殘留物中添加二氧六環(huán)中的4M HCl(10ml)，并使溶液在室溫下靜置2小時。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到其鹽酸鹽(792E)，無需純化而使用。
步驟5和6 步驟5向溶于無水DMF(1ml)中的甲酯(792B-對映體A；0.100g)溶液中加入乙烷硫醇鈉(0.122g)，并使反應(yīng)混合物在室溫下攪拌約72小時。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以水洗滌(X4)，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。
步驟6使得自步驟5的殘留物溶于無水甲苯(2ml)中，并添加DPPA(0.083ml)與Et3N(0.054ml)，且將反應(yīng)物在氮氣氛下加熱至120℃1小時。冷卻后，使反應(yīng)物在EtOAc與飽和NaHCO3水溶液之間分配。分離有機相，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，提供異氰酸酯(792F-對映體A)，無需純化而使用。
步驟7和8 步驟7向二氯甲烷(3ml)中的所述鹽酸鹽(792E；0.050g)中加入三乙胺(0.100ml)，接著加入甲苯(1ml)中的異氰酸酯(792F；約0.040g)，并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，干燥(MgSO4)。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，產(chǎn)生殘留物，將其使用于步驟8而無需純化。
步驟8使得自步驟7的殘留物溶于二氯甲烷(3ml)中，并添加Dess-Martinperidinane(0.100g)，且將反應(yīng)物在室溫下攪拌1小時。使反應(yīng)物于EtOAc與10％硫代硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1∶1)作為洗脫液，獲得酮基-酰胺(792；0.0436g)，為白色固體。
實施例795 使用對制備792所述的程序，按步驟5與6中所述，使792B-對映體B轉(zhuǎn)變成其相應(yīng)的異氰酸酯。進一步利用792E與步驟7及8，以及衍生自792B-對映體B的異氰酸酯，制成795。
實施例621
步驟1 向甲醇(20ml)中的紫蘇酸甲酯(Methyl Perillate)(3g)中加入PtO2(0.3g)，并將所形成的懸浮液于氫大氣(氣囊)下放置過夜。經(jīng)過硅藻土墊過濾此懸浮液，并以甲醇充分洗滌固體。使濾液于減壓下濃縮，得到環(huán)己烷(621A；2.93g)，非對映異構(gòu)體的混合物，為無色油。
步驟2與3 步驟2使羧酸酯(621A；3.75g)溶于無水乙醚(50ml)中，并在氮氣氛下冷卻至-78℃。逐滴添加KHMDS(69ml，甲苯中的0.5M溶液)，并將所形成的混合物再攪拌15分鐘，然后添加BOMCl(1.7當(dāng)量)，并將反應(yīng)燒瓶移離冷卻容器，且使其慢慢溫?zé)嶂潦覝?。添加?約10ml)，并使混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(1∶20)作為洗脫液，提供中間體芐基醚(3.01g)，為無色油。
步驟3向得自步驟2的芐基醚(2g)中添加甲醇(10ml)，接著加入10％Pd-C(1g)，并將黑色懸浮液在氫大氣(氣囊)下放置過夜。經(jīng)過硅藻土墊過濾反應(yīng)物，并以甲醇充分洗滌固體。使濾液濃縮，提供所需的醇(621B；1.362g)，為無色油。
步驟4和5 步驟4使醇(621B；0.32g)溶于二氯甲烷(5ml)中，并添加甲磺酰氯(0.166ml)，接著加入三乙胺(0.37ml)，且將所形成的反應(yīng)物攪拌0.5小時，然后于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到殘留物，將其使用于步驟5而無需純化。
步驟5使得自步驟4的殘留物溶于DMF(10ml)中，并添加叔-丁基硫醇鈉，且將所形成的反應(yīng)混合物在室溫及氮氣氛下攪拌過夜。將混合物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以水洗滌(X4)，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(3∶7)作為洗脫液，獲得羧酸(621C；0.214g)。
步驟6 使用硫化物(621C；0.090g)、Oxone(0.61g)、甲醇(2ml)、水(2ml)，及實施例792(步驟2)中提出的程序，獲得砜(621D；0.091g)，為白色固體。如上文(實施例792；步驟6至8)所述，使砜-羧酸轉(zhuǎn)化成化合物621。
實施例749 步驟1 程序在50℃下，向CCl4中的異丁醛(59g，0.69mol)中逐滴添加二氯化二硫(27.6ml，0.345mol，0.5當(dāng)量)。短暫停滯(10分鐘)后，開始釋出HCl氣體。于HCl釋出停止后，將混合物于55℃下攪拌2.5小時，其TLC顯示反應(yīng)幾乎完成。然后冷卻至室溫。使粗制物濃縮至干燥。使用油狀殘留物二硫化物(749A)而無需純化。
步驟2 在0℃下，向THF中的二硫化物(749A；7.5g，36mmol)中極其緩慢地添加LiAlH4(2.76g，72.7mmol，2當(dāng)量)。將混合物于室溫下攪拌3小時，然后逐滴添加飽和Na2SO4，直到出現(xiàn)白灰色固體為止。于室溫下攪拌10分鐘。將其以CH2Cl2稀釋，經(jīng)MgSO4干燥。過濾，并濃縮至干燥。經(jīng)HPFC，用己烷中的2～20％EtOAc純化，得到醇(749B；6.81g)。產(chǎn)率89％。
步驟3 向醇(749B；10g，94.2mmol)中添加3，4-二氫-2H-吡喃(8.8ml，94.2mmol，1當(dāng)量)與ZrO2(2.0g，20％w/w)。將混合物于80℃下攪拌2小時。將反應(yīng)物以CH2Cl2稀釋，并過濾。使濾液濃縮至干燥，并經(jīng)HPFC，用己烷中的2～10％EtOAc純化，獲得14.3g產(chǎn)物(749C)。產(chǎn)率80％。
步驟4 在-20℃下，向CH2Cl2中的醇(108A；3.0g，17.4mmol，1當(dāng)量)中添加吡啶(2.4ml，29.6mmol，1.7當(dāng)量)和三氟甲磺酸酐(3.8ml，22.6mmol，1.3當(dāng)量)。將反應(yīng)物于-20～10℃下攪拌2小時，其MS與TLC顯示反應(yīng)完成。將其用EtOAc稀釋，以飽和NH4Cl及鹽水洗滌。以MgSO4干燥。濃縮至干燥，得到磺酸酯(749D；5.21g)。產(chǎn)率98％。
步驟5 在0℃下，向THF中添加NaH(1.02g，25.6mmol，1.5當(dāng)量)，然后加入(749C；4.88g，25.6mmol，1.5當(dāng)量)。將混合物于0℃下攪拌10分鐘，然后在0℃下添加749D(5.21g，17.1mmol)。將反應(yīng)物于室溫下攪拌1小時，其TLC顯示無起始原料。將其以EtOAc和水稀釋。用EtOAc萃取水層。將合并的有機層以H2O及鹽水洗滌。有機層經(jīng)MgSO4干燥。使其濃縮至干燥。使其經(jīng)HPFC，用己烷中的2～8％EtOAc純化，獲得(749E；5.89g)產(chǎn)物。產(chǎn)率100％。
步驟6 在0℃下，向CH2Cl2中的硫化物(749E；0.17g，0.49mmol)中添加NaHCO3(0.205g，2.45mmol，5當(dāng)量)、MCPBA(0.304g，1.23mmol，2.5當(dāng)量)。將反應(yīng)物于室溫下攪拌2小時，其TLC與MS顯示反應(yīng)完成。以CH2Cl2稀釋。以飽和NaHCO3及鹽水洗滌。以MgSO4干燥。使其經(jīng)HPFC，用己烷中的5～20％EtOAc純化，得到0.14g砜(749F)。產(chǎn)率76％。
可使甲酯(749F)轉(zhuǎn)化成其相應(yīng)的羧酸，接著轉(zhuǎn)化為異氰酸酯(實施例108；步驟5與6)，并轉(zhuǎn)化成749(實施例792；步驟7和8)。
實施例811
步驟1 向MeOH中的749F(70mg，0.18mmol)中加入pTsOH。將反應(yīng)物于室溫下攪拌過夜。MS顯示反應(yīng)幾乎完成。使其濃縮至干燥。用EtOAc稀釋。以飽和NaHCO3、鹽水洗滌。經(jīng)HPFC，用己烷中的10～40％EtOAc純化，獲得52mg醇(811A)，產(chǎn)率99％。
在0℃下，向DMF中的NaH(88mg，2.21mmol，1.3當(dāng)量)中添加醇(811A；0.5g，1.7mmol)和MeI(0.16ml，2.56mmol，1.5當(dāng)量)。將反應(yīng)物于室溫下攪拌2小時，其TLC顯示反應(yīng)未完成。再次添加1當(dāng)量MeI。將反應(yīng)物于室溫下攪拌過夜。將其用EtOAc稀釋。以水、鹽水洗滌。以MgSO4干燥。使其經(jīng)HPFC，用己烷中的2～10～40％EtOAc純化，得到醚(811B；0.283g)，產(chǎn)率54％。
可使甲酯(811B)轉(zhuǎn)化成其相應(yīng)的羧酸，接著為異氰酸酯(實施例108；步驟5與6)，并轉(zhuǎn)化成749(實施例792；步驟7和8)。
實施例853
步驟1 在-20℃下，向CH2Cl2中的醇(811A；56mg，0.19mmol，1當(dāng)量)中添加吡啶(0.026ml，0.32mmol，1.7當(dāng)量)與三氟甲磺酸酐(0.042ml，0.25mmol，1.3當(dāng)量)。將反應(yīng)物于-20～10℃下攪拌2小時，其MS與TLC顯示反應(yīng)完成。將其用EtOAc稀釋，以飽和NH4Cl及鹽水洗滌。以MgSO4干燥。使其濃縮至干燥，獲得75.9mg粗產(chǎn)物(853A)。
步驟2 在-15℃下，向醚中的853A(75.9mg，0.18mmol，1當(dāng)量)中逐滴添加氟化四-正-丁基銨(0.23ml，0.23mmol，1.3當(dāng)量)。將反應(yīng)物于室溫下攪拌過夜。將其以乙醚稀釋，以飽和NH4Cl及鹽水洗滌。以MgSO4干燥。使其以己烷中的2～10％EtOAc純化，得到32mg氟化物(853B)。產(chǎn)率60％。
可使甲酯(853B)轉(zhuǎn)化成其相應(yīng)的羧酸，接著是異氰酸酯(實施例108；步驟5與6)，并轉(zhuǎn)化成749(實施例792；步驟7和8)。
實施例455 步驟1和2 步驟1和2(″一釜法″)將Dess-Martin peridinane(21.35g)添加至醇(455A；10.00g)在二氯甲烷(100ml)中的溶液中，并攪拌45分鐘，然后添加正磷(17.42g)，及攪拌過夜。使反應(yīng)混合物于5％硫代硫酸鈉水溶液與EtOAc之間分配，并分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液，水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下濃縮。將己烷添加至殘留物中，并將所形成的懸浮液激烈攪拌2小時，及過濾。使濾液于減壓下濃縮并經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1∶99)作為洗脫液，得到所需的烯烴(455B；7.33g)，為黃色油。
步驟3 將乙酸(26ml)添加至甲硅烷基醚在THF(6ml)與水(14ml)中的溶液中，并將所形成的混合物于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。分離有機相，以水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1∶5)作為洗脫液，獲得醇(455C；4.46g)，為無色油。
步驟4 在-78℃及氮氣氛下，將DAST(1.32ml)添加至醇(455C；2.00g)在二氯甲烷(50ml)中的攪拌溶液中。添加完成后，移除冷卻浴，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時，然后于EtOAc與水之間分配。分離有機相，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，接著經(jīng)柱層析純化。獲得氟化物(455D；0.758g)。
步驟5 使用n-PrOH(18ml)中的氨基甲酸芐酯(2.06g)、烯烴(455D；0.881g)、NaOH(0.537g)、新鮮制備的tBuOCl(1.54ml)、n-PrOH(16ml)中的(DHQ)2PHAL(0.176g)、鋨酸鉀(0.065g)，及Angewandte Int.Ed.(Engl)，1996，35，2813中所提出的程序，形成粗產(chǎn)物，使其經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc-己烷(1∶5)作為洗脫液，得到所需的羥基酰胺(455E；0.892g)。
步驟6 將二氧六環(huán)中的4M HCl(25ml)(實施例Aldrich)添加至t-Bu酯(455E；0.69g)中，并將所形成的溶液于室溫下靜置2小時。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到羧酸(455F；0.613g)，將其用于后續(xù)反應(yīng)中而無需純化。
步驟7 將BOP試劑(0.254g)和三乙胺(0.240ml)先后加入到羧酸(455F；0.15g)與烯丙基胺(0.043ml)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中，并將所形成的反應(yīng)混合物于室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物于硅膠上經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(7∶3)作為洗脫液，獲得酰胺(455g；0.151g)，為白色固體。
步驟8、9和10 步驟8向氨基甲酸芐酯(455G；0.037g)中添加TFA(2ml)，接著加入二甲硫(0.5ml)，并使所形成的溶液在室溫下靜置3小時，然后除去揮發(fā)性物質(zhì)。將粗制反應(yīng)產(chǎn)物使用于下文步驟9而無需純化。
步驟9向得自步驟8的殘留物中加入二氯甲烷(3ml)、羧酸(455H；0.050g)、BOP試劑(0.047g)及最后加入三乙胺(0.044ml)，并將所形成的混合物在室溫下攪拌過夜。使反應(yīng)物于EtOAc與10％HCl水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到殘留物，將其使用于下文步驟10而無需純化。
步驟10向得自步驟9的殘留物中加入二氯甲烷(3ml)，接著加入Dess-Martin peridinane(0.075g)，并將此懸浮液在室溫下攪拌2小時，然后于EtOAc與5％硫代硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，得到所需的酮基-酰胺(455；0.0467g)，為白色固體。
實施例458 步驟1 向醇(455C；1.66g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入Dess-Martinperidinane(4.22g)，并將所形成的混合物在室溫下攪拌1小時，然后于EtOAc與5％硫代硫酸鈉水溶液之間分配。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、水洗滌，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到醛(458A；0.775g)，經(jīng)純化使用。
步驟2 將DAST(1.11ml)逐滴添加至醛(458A；0.755g)在二氯甲烷(50ml)中的攪拌溶液中，同時于氮氣氛下，在冰浴中冷卻。于添加完成后，將所形成的混合物在室溫下攪拌2小時，然后于EtOAc與水之間分配。分離有機相，干燥(MgSO4)，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，得到所需的二氟化物(458B；0.758g)。
使用458B與實施例455(步驟5至10)中所概述的程序，制成目標(biāo)化合物458。
實施例423 步驟1 向Garner醛(423A；10.7g)在二氯甲烷(110ml)中的溶液中加入(乙氧羰基亞乙基)三苯基正磷(28.75g)，將所形成的溶液在室溫下攪拌過夜。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物純化經(jīng)硅膠柱層析，使用己烷中的4-10％EtOAc，得到所需的烯烴(423B；12.7g)，為無色油。
步驟2 在-78℃及氮氣氛下，向乙酯(423B；12.72g)在二氯甲烷(20ml)中的溶液中添加DIBAL-H(90ml，二氯甲烷中的1M溶液)。于添加完成時，使反應(yīng)物于此溫度下再保持30分鐘，在室溫下1小時，然后添加MeOH(3ml)與飽和酒石酸鉀鈉水溶液(3ml)及EtOAc。分離有機相，以1M HCl水溶液、鹽水洗滌，干燥(MgSO4)。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用己烷中的6-35％EtOAc，獲得醇(9.06g)，為無色油。
步驟3 向醇(423C；8.66g)在無水DMF(30ml)中的溶液中加入NaH(1.38g)，同時在冰浴中冷卻，并使所形成的混合物保持在室溫下45分鐘，然后添加溴化芐(5ml)。在先后添加乙醚和10％HCl水溶液之前，使反應(yīng)物溫?zé)嶂潦覝剡^夜。分離有機相，以飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，干燥(Na2SO4)。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到殘留物，使其經(jīng)硅膠柱層析純化，使用己烷中的8％EtOAc，產(chǎn)生芐基醚(8.10g)，為黃色油。
使用類似上文對22.03轉(zhuǎn)化為22.01所述的程序，使423D轉(zhuǎn)變成423E。
實施例397 步驟A 使芐氧基環(huán)己胺397a(10.6g，Lancaster)和N-甲基嗎啉(8.5ml，d0.920)在200ml無水二氯甲烷中的溶液冷卻至-78℃。于15分鐘內(nèi)，使用加液漏斗，添加100ml無水二氯甲烷中的Boc-酐。于添加完成后，移除冷卻浴，并將混合物再攪拌30分鐘。使反應(yīng)混合物于300ml乙醚與100ml 1N HCl水溶液之間分配。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮，得到產(chǎn)物397b(15.7g；99％)，為白色固體，無需進一步純化而使用。
步驟B 將20％二氫氧化鈀/碳(30mol％；10.8g)添加至芐基醚397b(15.7g)在300ml甲醇中的溶液內(nèi)。使不均勻混合物于40psi下接受氫化作用，直到經(jīng)TLC(乙酸乙酯/己烷；2∶8)不再檢測出起始原料為止。經(jīng)過硅藻土過濾混合物，并使濾液于減壓下濃縮。產(chǎn)物397c未進行進一步純化(11.1g；99％)。
步驟C 于0℃下，將吡啶(25.0ml)添加至環(huán)己醇397c在300ml無水二氯甲烷中的溶液內(nèi)。于15分鐘中加入100ml無水二氯甲烷中的甲磺酰氯(8.0ml)。反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)變成均勻黃色溶液。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌15分鐘，然后移除冷卻浴。將反應(yīng)物于室溫下攪拌約3小時。使混合物于乙醚(500ml)與1N HCl水溶液(100ml)之間分配。將有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)、鹽水(100ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液乙酸乙酯/(己烷-二氯甲烷1∶1)；0∶10至2∶8)，得到產(chǎn)物397d(9.7g；64％)，為白色固體。
步驟D 向250ml燒瓶中加入甲磺酸酯397d(3.0g)和叔-丁基硫醇鈉鹽(3.44g)。以氮吹洗洗燒瓶，并添加100ml無水DMF。使所形成的溶液脫氣(真空/氮吹洗)，并加熱至70℃。反應(yīng)的流量經(jīng)TLC監(jiān)控(乙酸乙酯/己烷；2∶8)。所有起始原料在約3小時內(nèi)消耗。使反應(yīng)混合物溶于300ml乙酸乙酯中，并以水(3×50ml)及鹽水(1×50ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。產(chǎn)物397e未進行進一步純化(2.78g；95％)。
步驟E 將硫化物397e(10.22mmol)在無水二氯甲烷(60ml)中的溶液，以m-CPBA(5.28g；60％)處理。將均勻混合物于45℃下加熱約3小時。TLC分析(乙酸乙酯/己烷；1∶9)顯示所有起始原料已經(jīng)消耗。使混合物在減壓下濃縮，并使殘留物溶于20ml乙醚中，且在0℃下以硫代硫酸鈉水溶液處理。將混合物以乙醚(350ml)稀釋，并以飽和碳酸氫鈉水溶液(5×30ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；3∶97至2∶8)，得到產(chǎn)物397f(2.45g；75％)，為白色固體。
步驟F 使N-Boc保護的胺397f(2.43g)溶于20ml二氧六環(huán)中的4M HCl內(nèi)。于室溫下攪拌混合物，直到當(dāng)經(jīng)TLC分析(乙酸乙酯/己烷；2∶8)測定時，所有起始原料已經(jīng)消耗為止。3小時后，于減壓下除去所有揮發(fā)性物質(zhì)，得到產(chǎn)物397g(1.90g；98％)，為白色固體。
步驟G 將氨基甲酸對-硝基苯酯397h(640mg)在10ml乙腈中的溶液用胺鹽酸鹽397g(350mg)處理。將N-甲基嗎啉(0.37ml，d0.920)添加至不均勻混合物中，并于室溫下攪拌反應(yīng)混合物。7小時后，當(dāng)經(jīng)TLC分析(丙酮/己烷；2∶8)測定時反應(yīng)完成。使反應(yīng)混合物于減壓下濃縮。使殘留物溶于150ml二氯甲烷中，并以1N HCl水溶液(1×30ml)及飽和碳酸氫鈉水溶液(2×30ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使產(chǎn)物于硅膠上純化(梯度液丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物397i(625mg；87％)，為白色固體。
步驟H 將甲酯397i(610mg)在15ml THF/MeOH/水(1∶1∶1)混合物中的溶液用氫氧化鋰單水合物(121mg)處理。將反應(yīng)物于室溫下攪拌，并經(jīng)TLC監(jiān)控(丙酮/己烷；3∶7)。3小時后，于減壓下除去所有揮發(fā)性物質(zhì)。使殘留物于30ml1N HCl水溶液與100ml二氯甲烷之間分配。將水層以二氯甲烷(2×30ml)回提(back extract)。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮，得到產(chǎn)物397j(570mg；96％)，為白色固體。
步驟I 于0℃下攪拌酸397j(120mg)在2ml無水二氯甲烷和2ml無水DMF中的溶液，并以HATU(124mg)處理。添加胺鹽酸鹽397k(63mg)，接著添加N-甲基嗎啉(0.10ml，d0.920)。使反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過夜。于真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于100ml乙酸乙酯中。將有機層以1N HCl水溶液(15ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)及鹽水(15ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮，得到所需的產(chǎn)物397l(150mg；96％)，無需進一步純化而使用。
步驟J 將397l(150mg)在6ml甲苯/DMSO 1∶1混合物中的溶液用EDCI(430mg)和二氯乙酸(0.09ml，d1.563)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌約2小時。將反應(yīng)混合物以二氯甲烷(100ml)稀釋，并以飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)、1N HCl水溶液(15ml)及鹽水(15ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥過濾，并于減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；2∶8至5∶5)，得到產(chǎn)物397(94mg；64％)，為白色固體。對C33H56N5O7S[M+H]+HRMS的計算值666.3900，實測值666.3883。
實施例398 步驟A 于0℃下攪拌酸397j(100mg)在2ml無水二氯甲烷和2ml無水DMF中的溶液，并以HATU(103mg)處理。添加胺鹽酸鹽398a(60mg)，接著添加N-甲基嗎啉(0.09ml，d0.920)。使反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝兀嚢柽^夜。于真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于100ml乙酸乙酯中。將有機層以1N HCl水溶液(15ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)及鹽水(15ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮，得到所需的產(chǎn)物398b(115mg；86％)。
步驟B 將羥基酰胺398b(115mg)在10ml無水二氯甲烷中的溶液，以Dess-Martin peridinane(210mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時。將混合物以1M亞硫酸鈉溶液(10ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)處理，并攪拌15分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；2∶8至5∶5)，得到產(chǎn)物398(60mg；53％)，為白色固體。對C35H58N5O7S[M+H]+HRMS的計算值692.4057，實測值692.4081。
實施例399 步驟A 于0℃下攪拌酸397j(100mg)在2ml無水二氯甲烷與2ml無水DMF中的溶液，并以HATU(106mg)處理。逐滴添加胺鹽399a(0.252mmol)與N-甲基嗎啉(0.09ml，d0.920)在1ml二氯甲烷中的溶液。使反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝?，并攪拌過夜。于真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于100ml乙酸乙酯中。將有機層以1N HCl水溶液(15ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(15ml)及鹽水(15ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮，得到所需的產(chǎn)物399b(85mg；63％)。
步驟B 將羥基酰胺399b(85mg)在10ml無水二氯甲烷中的溶液，以Dess-Martin peridinane(157mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌1小時。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10ml)和飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)處理，并攪拌15分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；2∶8至4∶6)，得到產(chǎn)物399(50mg；60％)，為白色固體。對C33H55N6O7S[M+H]+HRMS的計算值679.3853，實測值679.3834。
實施例473 步驟A 將順式-2，6-二甲基-1-亞甲基環(huán)己烷(3.0g，ChemSamp公司)添加至固態(tài)碳酸氫鈉(6當(dāng)量，12.19g)在150ml二氯甲烷中的攪拌懸浮液中。使混合物冷卻至0℃，并以少量分批加入70％m-CPBA(3當(dāng)量，17.4g)在150ml二氯甲烷中的漿液。添加完成后，移除冷卻浴，并將混合物攪拌約2小時。于0℃下，通過小心添加飽和硫代硫酸鈉水溶液，使過量m-CPBA猝滅。將混合物以飽和碳酸氫鈉溶液(100ml)洗滌。使有機層在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中濃縮(使用冰水浴)。使殘留物溶于乙醚(80ml)與己烷(120ml)中，并以飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌數(shù)次。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮(冰水浴)。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液乙醚/己烷；0∶10至8∶92)，得到產(chǎn)物473b(3.0g；90％)，為無色油。
步驟B 將環(huán)氧化物473b(3g)與氯化銨(5當(dāng)量，5.72g)在80ml甲醇中的不均勻混合物用疊氮化鈉(5當(dāng)量，7.17g)處理，并于65℃下加熱3小時。TLC分析顯示留下一些起始原料，并添加更多氯化銨(1.5當(dāng)量，1.71g)和疊氮化鈉(1.5當(dāng)量，2.15g)。將混合物加熱(65℃)過夜。將反應(yīng)混合物以30ml水稀釋，并以乙醚(3×100ml)萃取。使合并的有機萃液經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液乙醚/己烷；0∶10至2∶8)，得到其相應(yīng)的非對映異構(gòu)產(chǎn)物473b(2.73g；71％)，為無色油。
步驟C
將疊氮基醇473b(1.73g)在50ml乙腈中的溶液用三苯膦(1.1當(dāng)量，2.69g)處理，并回流1小時。使反應(yīng)混合物于減壓下濃縮，并使殘留物在硅膠上層析(梯度液乙醚/己烷；5∶5至9∶1)，得到所需的氮丙啶產(chǎn)物473c(2.0g；98％)。
步驟D 使氮丙啶473c(大約1.5g)在無水二氯甲烷(50ml)中的溶液冷卻至0℃，并以50ml無水二氯甲烷中的二碳酸二-叔-丁酯(1.3當(dāng)量，3.0g)處理。逐滴添加N-甲基嗎啉(2.5當(dāng)量，2.9ml，d0.920)，并將混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。將混合物以乙醚(300ml)稀釋，并以1M HCl水溶液(100ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(80ml)及鹽水(80ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液乙醚/己烷；0∶10至1∶9)，得到產(chǎn)物473d和473e，為透明油(970mg)。
步驟E 向20ml小瓶中加入N-Boc-氮丙啶473e(469mg)在20ml無水DMF和叔-丁基硫醇鈉(2當(dāng)量，438mg)中的溶液。使反應(yīng)物于130℃下，在微波爐中進行30分鐘。將反應(yīng)混合物以100ml乙醚稀釋，并以水(3×30ml)及鹽水(20ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液己烷至乙醚/己烷4∶96)，得到產(chǎn)物473e(140mg)，為白色固體與未反應(yīng)的起始原料(120mg)。
步驟F 使N-Boc保護的胺473f(140mg)溶于10ml二氧六環(huán)中的4M HCl溶液內(nèi)。將所形成的溶液于室溫下攪拌30分鐘，直到當(dāng)經(jīng)TLC分析(乙醚/己烷；5∶95)測定時，所有起始原料已經(jīng)消耗為止。于減壓下除去所有揮發(fā)性物質(zhì)，并將殘留物在高真空下放置3小時，得到產(chǎn)物473g(112mg；98％)，為白色固體。
步驟G 將氨基甲酸對-硝基苯酯473h(1.05當(dāng)量，212mg)在3ml乙腈中的溶液用2ml乙腈中的胺鹽酸鹽473g(110mg)處理。添加N-甲基嗎啉(2.5當(dāng)量，0.11ml，d0.920)，并將所形成的黃色溶液于室溫下攪拌8小時。使反應(yīng)混合物在減壓下濃縮，并使殘留物溶于100ml二氯甲烷中，且以1N HCl水溶液(1×20ml)及飽和碳酸氫鈉水溶液(2×20ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使產(chǎn)物于硅膠上純化(梯度液己烷至丙酮/己烷，2∶8)，得到產(chǎn)物473i(150mg；63％)。
步驟H 將硫化物473i(150mg)在無水二氯甲烷(15ml)中的溶液用60％m-CPBA(3當(dāng)量，134mg)處理。將均勻混合物于45℃下加熱約1.5小時。通過加入硫代硫酸鈉溶液(20ml)使過量m-CPBA猝滅，并持續(xù)攪拌10分鐘。添加飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)，并使產(chǎn)物溶入乙酸乙酯(100ml)中。濃縮有機層，并使殘留物溶于乙酸乙酯(80ml)中。將有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液(3×10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液乙酸乙酯/己烷；1∶3至5∶5)，得到產(chǎn)物473j(120mg；76％)，為無色油。
步驟I 使甲酯473j(110mg)在10ml THF/水/MeOH的1∶1∶1混合物中的溶液冷卻至0℃，并以氫氧化鋰單水合物(2.5當(dāng)量，19mg)處理。30分鐘后移除冷卻浴，并將混合物于室溫下再攪拌2小時，直到當(dāng)經(jīng)TLC分析(乙酸乙酯/己烷；3∶7)測定時，所有起始原料已經(jīng)消耗為止。以20ml1M HCl水溶液(混合物的pH值＝1)處理反應(yīng)混合物，并于減壓下除去有機溶劑。將含水殘留物以二氯甲烷(3×50ml)萃取。使合并的有機萃液經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮，得到產(chǎn)物473k(105mg；98％)，為透明油。
步驟J 于0℃下攪拌酸473k(50mg)在2ml無水二氯甲烷與1ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，44mg)處理。添加胺鹽(1.3當(dāng)量，25mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.036ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(20ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物473m(64mg)而無需進一步純化。
步驟K 將羥基酰胺473m(0.083mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，70mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。將混合物以二氯甲烷(3×30ml)萃取。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物473(40mg；62％，經(jīng)兩個步驟)，為白色固體。對C41H68N5O7S[M+H]+HRMS的計算值774.4839，實測值774.4834.
實施例474 步驟A 于0℃下攪拌酸473k(50mg)在2ml無水二氯甲烷與1ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，44mg)處理。添加胺鹽474a(1.3當(dāng)量，25mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.036ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(20ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物474b(65mg)，無需進一步純化。
步驟B 將羥基酰胺474b(0.083mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，70mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(20ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。將混合物以二氯甲烷(3×30ml)萃取。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物474(40mg；62％，經(jīng)兩個步驟)，為白色固體。對C41H70N5O7S[M+H]+HRMS的計算值776.4995，實測值776.5005.
實施例696 步驟A 使酸696a(3.0g)在140ml無水DMF中的溶液冷卻至0℃，并以碳酸銫(1.1當(dāng)量，5.04g)處理，接著添加溴化芐(1.2當(dāng)量，2.00ml，d1.438)。將反應(yīng)混合物攪拌24小時(溫度0至25℃)。將混合物以乙酸乙酯(350ml)稀釋，并以水(3×50ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液己烷至乙酸乙酯/己烷25∶75)，得到產(chǎn)物696b(3.82g；90％)，為透明油。
步驟B
于氬氣氣氛下，用四氧化鋨(0.1當(dāng)量，318mg)處理N-甲基嗎啉-N-氧化物(1.3當(dāng)量，1.9g)在叔-丁醇(20ml)、THF(7ml)及水(3.5ml)中的溶液。將所形成的淡黃色溶液攪拌5分鐘，接著逐滴添加30ml THF中的芐基酯696b(3.8g)。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌20小時。經(jīng)過短路徑硅膠過濾混合物，并以乙酸乙酯(500ml)洗滌固體。將有機層以鹽水(80ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；2∶8至55∶45)，得到產(chǎn)物696c(3.5g；83％)，為糊劑。
步驟C 使N-Boc胺696c(3.5g)溶于60ml二氧六環(huán)中的4M HCl內(nèi)。將所形成的溶液于室溫下攪拌約2小時。于減壓下除去所有揮發(fā)性物質(zhì)，獲得產(chǎn)物696d(2.8g；98％)，無需進一步純化而使用。
步驟D 將N-Boc-叔-丁基甘氨酸(2.15g)在100ml無水二氯甲烷和20ml無水DMF中的溶液于0℃下攪拌，并以HATU(1.4當(dāng)量，4.96g)處理。添加30ml DMF中的胺鹽696d(1.1當(dāng)量，2.8g)，接著添加N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，4.08ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物于0℃下攪拌過夜。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于300ml乙酸乙酯中。將有機層以水(1×100ml)、1M HCl水溶液(100ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)及鹽水(100ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(乙酸乙酯/己烷；6∶4)，得到產(chǎn)物696e(3.29g；79％)，為無色油。
步驟E 使N-Boc胺696e(1.24g)溶于30ml二氧六環(huán)中的4M HCl內(nèi)。將所形成的溶液于室溫下攪拌約2小時。于減壓下除去所有揮發(fā)性物質(zhì)，得到產(chǎn)物696f(1.06g；98％)，為白色固體。
步驟F 將N-甲基嗎啉(1.3當(dāng)量，0.39ml，d0.920)添加至胺-二醇696f(1.06g)在50ml二氯甲烷中的不均勻混合物中。5分鐘后，添加異氰酸酯溶液(1.05當(dāng)量，9.63ml，甲苯中的0.3M溶液)。也添加DMF(5ml)，并于室溫下攪拌漿液。混合物逐漸轉(zhuǎn)化(于4小時內(nèi))成透明均勻溶液。將混合物以乙酸乙酯(300ml)稀釋，并以1M HCl水溶液洗滌。以100ml乙酸乙酯回提水層。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；3∶7至6∶4)，獲得產(chǎn)物696g(1.6g；98％)，為無色油。
步驟G 將二醇696g(1.5g)溶液以2，2-二甲氧基丙烷(2當(dāng)量，0.6ml，d0.847)和催化量的吡錠對-甲苯磺酸(0.1當(dāng)量，62mg)處理。將混合物于50℃下攪拌過夜。將混合物以200ml乙酸乙酯稀釋，并以50ml飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。以乙酸乙酯(100ml)萃取水層。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；5∶95至35∶65)，得到產(chǎn)物696h(1.33g；83％)，為白色固體。
步驟H 使芐基酯696h(1.33g)溶于70ml乙酸乙酯中，并以20％二氫氧化鈀/碳(0.1mol％；144mg)處理。使不均勻混合物于50psi下氫化3小時。將混合物以200ml二氯甲烷稀釋，并經(jīng)過短路徑硅藻土過濾。于減壓下濃縮濾液，得到產(chǎn)物696i(1.14g；98％)，為白色固體。
步驟I 于0℃下攪拌酸696i(100mg)在3ml無水二氯甲烷和3ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，93mg)處理。添加胺鹽696j(1.2當(dāng)量，47mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.08ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物696k，無需進一步純化。
步驟J 將羥基酰胺696k(0.178mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，150mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；15∶85至1∶1)，得到產(chǎn)物696(120mg；93％)，為白色固體。對C35H60N5O9S[M+H]+HRMS的計算值726.4112，實測值726.4128.
實施例697
步驟A 于0℃下攪拌酸696i(100mg)在3ml無水二氯甲烷和3ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，93mg)處理。添加胺鹽697a(1.2當(dāng)量，50mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.08ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物697b而無需進一步純化。
步驟B 將羥基酰胺697b(0.178mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，150mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。將混合物以二氯甲烷(3×30ml)萃取。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；15∶85至1∶1)，得到產(chǎn)物697(120mg；91％)，為白色固體。對C36H60N5O9S[M+H]+HRMS的計算值738.4112，實測值738.4092.
實施例837 步驟A 于0℃下，將硫雜環(huán)丁烷(thietane)(10g，9.727ml，d1.028，Aldrich)在200ml二氯甲烷中的溶液用間-氯基過氧苯甲酸(2.3當(dāng)量，76g，70％m-CPBA)在二氯甲烷(400ml)中的漿液處理。移除冷卻浴，并將混合物攪拌3小時。經(jīng)過濾移除固體，并于減壓下濃縮濾液。使殘留物溶于乙酸乙酯(400ml)中，并以飽和碳酸氫鈉溶液充分洗滌溶液。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。使殘留物經(jīng)柱層析純化，得到產(chǎn)物837b，為白色固體。
步驟B 于氮氣氛下，將四乙醇鈦(2當(dāng)量，24.2ml，d1.088)添加至環(huán)己酮(1.2當(dāng)量，7.18ml，d0.947)在150ml無水THF中的溶液中。5分鐘后，逐滴添加50ml THF中的叔-丁烷亞磺酰胺(sulfinamide)(7.0g，Aldrich)。將混合物加熱至60℃過夜。將反應(yīng)混合物倒入等體積飽和碳酸氫鈉水溶液中，并迅速攪拌，及立即經(jīng)過濾紙whatman#l過濾。以乙酸乙酯(100ml)洗滌濾餅。分離濾液中的液層，并以乙酸乙酯(100ml)萃取水層。將合并的有機層以飽和碳酸氫鈉水溶液(100ml)洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(乙酸乙酯/己烷；3∶7)，得到產(chǎn)物837d(7.5g；55％)，為無色油。使產(chǎn)物保持在惰性大氣及-20℃下。
步驟C 于干燥大氣下，將正-丁基鋰(1.1當(dāng)量，7.6ml，環(huán)己烷中的1.6M溶液)逐滴添加至砜837b(115當(dāng)量，1.35g)在100ml無水THF中的冷卻(-78℃)的溶液中。將混合物于該溫度下攪拌1小時，然后通過套管，轉(zhuǎn)移至亞磺?；鶃啺?37d(2.23g)在100ml無水THF中的已預(yù)先冷卻(-78℃)的溶液內(nèi)。將所形成的混合物于-78℃下攪拌，并經(jīng)TLC監(jiān)控(丙酮/己烷；3∶7)。所有亞磺?；鶃啺?37d起始原料于2小時內(nèi)消耗。通過加入飽和氯化銨水溶液(5ml)使反應(yīng)猝滅。使混合物達到室溫，并于乙酸乙酯(200ml)與飽和碳酸氫鈉水溶液(80ml)之間分配。將水層以乙酸乙酯(2×60ml)回提。將合并的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液二氯甲烷至丙酮/二氯甲烷；3∶7)，得到其相應(yīng)的非對映異構(gòu)產(chǎn)物837e與837f，為1.4∶1的混合物(1.64g；50％合并產(chǎn)率)。
步驟D 使亞磺酰胺(sulfinamide)837e(910mg)溶于50ml甲醇中，并以20ml二氧六環(huán)中的4M HCl溶液處理。將混合物攪拌約1小時，直到當(dāng)經(jīng)TLC(丙酮/己烷；1∶9)測定時，所有起始原料已經(jīng)消耗為止。使混合物濃縮至干燥。添加二氯甲烷(10ml)，以制備均勻溶液，然后添加乙醚(80ml)，并形成白色沉淀物。經(jīng)過濾回收胺鹽酸鹽產(chǎn)物837g(700mg；98％)，為白色固體。
步驟E 將胺鹽酸鹽837g(2.960mmol)在40ml二氯甲烷中的溶液用20ml飽和碳酸氫鈉溶液處理，并于0℃下激烈攪拌10分鐘。停止攪拌，并分離各層。經(jīng)過針頭，將光氣(10ml，甲苯中的20％溶液)一次性添加至有機層(下層)中。在添加10分鐘后，立即將混合物于0℃下激烈攪拌，及進一步在室溫下攪拌3小時。將混合物以100ml二氯甲烷稀釋，并分離各層。將有機層以50ml冷飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，并經(jīng)硫酸鎂干燥。過濾有機層，并以50ml甲苯稀釋。濃縮所形成的溶液，并保持為甲苯中的0.118M溶液。
步驟F 將胺鹽酸鹽837i(1.5mmol)在30ml二氯甲烷中的溶液用5ml飽和碳酸氫鈉水溶液處理。將混合物攪拌10分鐘，接著添加異氰酸酯837h(1.03當(dāng)量，13.1ml，甲苯中的0.118M溶液)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物以二氯甲烷(200ml)稀釋，并以飽和碳酸氫鈉水溶液(40ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，提供產(chǎn)物837j(740mg；84％)，為白色固體。
步驟G 使芐基酯837j(740mg)溶于20ml甲醇中，并以20％二氫氧化鈀/碳(0.1mol％；90mg)處理。使不均勻混合物于50psi下氫化2小時。TLC(丙酮/己烷；35∶65)顯示所有起始原料已經(jīng)消耗。將混合物以100ml二氯甲烷稀釋，并經(jīng)過短路徑硅藻土過濾。于減壓下濃縮濾液，得到產(chǎn)物837k(620mg；98％)，為白色固體。
步驟H 于0℃下攪拌酸837k(69mg)在2ml無水二氯甲烷和2ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，74mg)處理。添加胺鹽837l(1.2當(dāng)量，39mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.06ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物837m，無需進一步純化。
步驟I 將羥基酰胺837m(0.138mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，117mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；2∶8至1∶1)，得到產(chǎn)物837(66mg；70％)，為白色固體。對C34H56N5O7S[M+H]+HRMS的計算值678.3900，實測值678.3883.
實施例838 步驟A 于0℃下攪拌酸837k(69mg)在2ml無水二氯甲烷和2ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，74mg)處理。添加胺鹽838a(1.2當(dāng)量，39mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.06ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物838b而無需進一步純化。
步驟B 將羥基酰胺838b(0.138mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液以Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，117mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物838(71mg；76％)，為白色固體。對C34H56N5O7S[M+H]+HRMS的計算值678.3900，實測值678.3883.
實施例869
步驟A 于0℃下攪拌酸837k(69mg)在2ml無水二氯甲烷和2ml無水DMF中的溶液，并以HATU(1.4當(dāng)量，74mg)處理。添加胺鹽869a(1.2當(dāng)量，37mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.06ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物869b，無需進一步純化。
步驟B 將羥基酰胺869b(0.138mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液用Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，117mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；18∶85至45∶55)，得到產(chǎn)物869(69mg；75％)，為白色固體。
制備實施例868 步驟A 將酸837k(69mg)在2ml無水二氯甲烷和2ml無水DMF中的溶液于0℃下攪拌，并以HATU(1.4當(dāng)量，74mg)處理。添加胺鹽868a(1.2當(dāng)量，39mg)，接著加入N-甲基嗎啉(4當(dāng)量，0.06ml，d0.920)。將反應(yīng)混合物攪拌過夜(溫度0至25℃)。在真空下移除所有揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物溶于50ml乙酸乙酯中。將有機層以水(10ml)、1M HCl水溶液(10ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌。使有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，及在減壓下濃縮。使用產(chǎn)物868b而無需進一步純化。
步驟B 將羥基酰胺868b(0.138mmol)在10ml無水二氯甲烷中的溶液以Dess-Martin peridinane(2.0當(dāng)量，117mg)處理。將反應(yīng)混合物于室溫下攪拌30分鐘。將混合物以1M硫代硫酸鈉水溶液(10ml)處理，并攪拌5分鐘。也添加飽和碳酸氫鈉水溶液(10ml)，并再持續(xù)攪拌10分鐘。以二氯甲烷(3×30ml)萃取混合物。使合并的有機層經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾，并濃縮。殘留物經(jīng)硅膠層析(梯度液丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到產(chǎn)物868(73mg；78％)，為白色固體。
實施例833 步驟1 在-78℃及N2下，向二乙砜酸(ethylsulfone acid)833a(2.06g，8.79mmol)在無水THF中的溶液中添加LiHMDS溶液(19.3ml，1.0M，在THF中)。將混合物于-78℃下攪拌30分鐘，然后使其伴隨著冷丙酮浴溫?zé)嶂?℃。接著使其再冷卻至-78℃，并于其中添加2-溴代乙基醚(1.8ml，13.2mmol)。于-78℃下攪拌30分鐘后，使混合物溫?zé)嶂潦覝?，并攪?小時。使其再一次再冷卻至-78℃，并于其中添加LiHMDS溶液(10.6ml，10.6mmol)。于-78℃下攪拌30分鐘后，使混合物溫?zé)嶂潦覝兀嚢?小時，然后以1N HCl水溶液使反應(yīng)猝滅，直到pH值約1-2為止。將溶液以CH2Cl2(2×450ml)萃取。使合并的有機溶液干燥(MgSO4)，過濾，并濃縮。使粗產(chǎn)物溶于1N NaOH溶液(300ml)中，并以EtOAc(100ml)萃取。分離各層后，以1N NaOH(2×150ml)洗滌有機溶液。使用6N HCl溶液，使合并的水溶液酸化至pH～1。將其以EtOAc(3×300ml)萃取。將有機溶液合并，干燥(MgSO4)，過濾，并濃縮，得到2.3g產(chǎn)物(833b；7.56mmol，89％)。
步驟2 在室溫及N2下，向甲苯中的酸833b(2.30g，7.56mmol)中添加三乙胺(1.15ml，8.32mmol)與二苯基磷?；B氮化物(1.79ml，8.32mmol)。將所形成的混合物于室溫下攪拌30分鐘，并加熱至回流5.5小時。使其冷卻至室溫后，添加更多甲苯，以制備異氰酸酯833c的0.19M溶液，無需進一步純化而使用。
使用前述程序，使833c轉(zhuǎn)變成833。
表3A















































































































































































































































































































也公開表4和表4A中的下列化合物。表4和表4A中的化合物的制備描述于下文實施例1005 步驟1 在0℃下，向5g 1005-A(可市購得自Aldrich)在100ml EtOAc中的溶液中添加40ml飽和NaHCO3溶液，接著一次性添加6.5mlCbz-Cl。將所形成的混合物攪拌2小時，并分離各層。以50ml EtOAc回提水層。將合并的有機層用鹽水洗滌一次，經(jīng)MgSO4干燥，并濃縮成無色液體，其系于靜置時固化。獲得10.7g 1005-B，為白色固體。MS274[M+Na]+。
步驟2 在0℃下，向10.7g 1005-B在120ml DCM中的溶液中添加7.04ml三乙胺與4.05ml甲磺酰氯。于0℃下將混合物攪拌10分鐘，并在室溫下攪拌1.5小時。將混合物以1M KHSO4溶液、水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。濃縮溶劑，獲得粗產(chǎn)物，使其在硅膠柱上純化，以DCM洗脫。獲得13g 1005-C，為無色濃稠油。MS352[M+Na]+。
步驟3 向8.3g Cs2CO3在100ml無水DMF中的懸浮液中加入3.3ml硫代乙酸。于深褐色漿液中加入12.97g 1005-C在30ml無水DMF中的溶液。將所形成的混合物于室溫下攪拌過夜，以300ml冰水稀釋，并以2×250ml EtOAc萃取。將合并的有機層以水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。蒸發(fā)溶劑，獲得～10g粗產(chǎn)物，使其在硅膠柱上，以己烷中的10％EtOAc純化。獲得4.8g 1005-D，為白色固體。MS310[M+H]+，332[M+Na]+。
步驟4 向4.4g 1005-D在15ml AcOH中的溶液中加入15ml 30％H2O2和30ml AcOH的溶液。將所形成的溶液于室溫下攪拌20小時。添加75mg10％Pd/C，并將混合物攪拌1小時，經(jīng)過硅藻土墊過濾，并以MeOH沖洗。使合并的濾液濃縮，并與3×100ml甲苯共蒸發(fā)，得到固體。添加90ml無水DCM，以溶解固體，并于此溶液中加入15ml甲苯中的20％光氣(Fluka)，接著是1.8ml無水DMF。有氣體釋出，將混合物于室溫下攪拌2小時，并濃縮，得到固體殘留物。于硅膠上純化，以DCM洗脫，獲得3.94g 1005-E，為固體。MS356，358[M+Na]+。
步驟5將900mg1005-E、1.0ml叔-丁基胺及0.4ml NMM在40ml DCM中的混合物于室溫下攪拌0.5小時，以1M KHSO4溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。蒸發(fā)溶劑，獲得445mg粗產(chǎn)物，使其在硅膠上，以DCM與DCM中的5％EtOAc純化。獲得617mg1005-F。MS379[M+Na]+。
步驟6將600mg1005-F、2.64g碳酸銫和0.5ml甲基碘在10ml無水DMF中的混合物于室溫下攪拌過夜，以50ml冰冷水稀釋，并以2×50mlEtOAc萃取。將合并的有機溶液以水洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，經(jīng)MgSO4干燥。于真空下除去溶劑，獲得620mg 1005-G，為白色固體。MS385[M+H]+.
步驟7將1005-G(600mg)與Pd(OH)2(70mg)在MeOH中的溶液，于氫氣氛下放置過夜。過濾固體，并以MeOH充分洗滌。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，得到胺(1005-J；380mg)。MS251[M+H]+。

步驟8向所述鹽酸鹽(Bachem；2.24g)在二氯甲烷(50ml)中的溶液中加入NMM(2.6ml)，接著加入氯甲酸對-硝基苯酯(2.42g)，并將所形成的混合物在室溫下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物以冷1N HCl水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥，及在減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠層析，使用EtOAc∶己烷(1∶10)作為洗脫液，得到氨基甲酸酯(1005-K；2.97g)。
步驟9 使用步驟8中所提出的程序，氨基甲酸酯1005-L由胺-鹽酸鹽1.04制備。
步驟10 將NMM(0.12ml)添加至胺(1005-J；0.20g)與氨基甲酸酯(1005-L；0.375g)在乙腈(15ml)中的混合物中，并將所形成的混合物于室溫及氮氣氛下攪拌過夜。于減壓下除去揮發(fā)性物質(zhì)，并使殘留物在EtOAc與水之間分配。分離有機相，干燥，并濃縮。使粗制反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)硅膠柱層析純化，使用EtOAc∶己烷(2∶3)作為洗脫液，提供所需的脲(1005-M；0.43g)。MS559.28[M+H]+。
步驟11 將水(2ml)中的氫氧化鋰(0.020g)添加至甲酯(1005-M；0.41g)在二氧六環(huán)(15ml)中的溶液中，并將所形成的混合物于室溫下攪拌過夜。添加HCl水溶液(0.01N)，并將有機物質(zhì)萃取于EtOAc中。分離有機相，干燥，并濃縮，得到羧酸(1005-N；0.395g)。MS545.32[M+H]+。
步驟12 于-20℃及氮氣氛下，將Hunig氏堿(0.050ml)添加至羧酸(1005-N；0.030g)及其鹽酸鹽(13.01；0.015g)在二氯甲烷(5ml)中的混合物中。使反應(yīng)物在此溫度下保持20小時。水溶液處理獲得粗制反應(yīng)產(chǎn)物(1005-O)，將其使用于下文步驟12。
步驟13 向二氯甲烷(3ml)中的粗制物(1005-O；上文步驟11)中加入Dess-Martin Periodinane(0.050g)，并將所形成的混合物在室溫下攪拌24小時。水溶液處理，及硅膠板層析，使用二氯甲烷∶甲醇(20∶1)作為洗脫液，獲得所需的α-酮基-酰胺(0.0282g)，為白色固體。Ki*范圍為A＝＜75nM；B＝75-250nM；C＝＞250nM。
表4


表4A列出代表本發(fā)明的另外的其它化合物表4A




本發(fā)明涉及新的HCV蛋白酶抑制劑?？稍谄湟种艸CV NS3/NS4a絲氨酸蛋白酶的能力上，證明該用途。通過下列的體外測定，說明這類證明的一般程序。
HCV蛋白酶抑制活性的測定分光光度計測定可通過依據(jù)R.Zhang等，Analytical Biochemistry，270(1999)268-275描述的程序(其公開內(nèi)容以引用的方式結(jié)合到本文中)，對本發(fā)明的化合物進行HCV絲氨酸蛋白酶的分光光度測定。該測定以適合連續(xù)監(jiān)視HCV NS3蛋白酶活性的色原酯(chromogenic ester)酶解物的蛋白水解作用為基礎(chǔ)。該酶解物衍生自NS5A-NS5B接合序列的P側(cè)(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)，其C-終端羧基基團被用四個不同發(fā)色團的醇(3-或4-硝基酚、7-羥基-4-甲基-香豆素或4-苯基偶氮苯酚)之一酯化。下文解釋了這些新的分光光度測定的酯酶解物的合成、鑒定和應(yīng)用，以便進行HCV NS3蛋白酶抑制劑的高通過量篩選和詳細的動力學(xué)評估。
材料和方法材料從Sigma Chemical Company(St.Louis，Missouri)獲得與測定有關(guān)的緩沖液的化學(xué)試劑。肽合成的試劑則得自AldrichChemicals、Novabiochem(San Diego，California)、Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)。以手工或在自動ABI 431A型合成器(得自AppliedBiosystems)上合成肽。UV/VIS分光計LAMBDA 12型得自PerkinElmer(Norwalk，Connecticut)，而96-孔UV培養(yǎng)板則獲自Corning(Corning，New York)。預(yù)熱塊可得自USA Scientific(Ocala，F(xiàn)lorida)，且96-孔培養(yǎng)板旋轉(zhuǎn)器(vortexer)則得自Labline Instruments(MelrosePark，Illinois)。具有單色儀的Spectramax Plus微量滴定板讀取器獲自Molecular Devices(Sunnyvale，California)。
酶制備通過使用先前發(fā)表的程序(D.L.Sali等，Biochemistry，37(1998)3392-3401)，制備重組的異種二聚體的HCV NS3/NS4a蛋白酶(strain la)。通過Biorad染色法，使用先前通過氨基酸分析定量的重組HCV蛋白酶標(biāo)準(zhǔn)物，確定蛋白濃度。在開始測定的前，使用BioradBio-Spin P-6預(yù)先包裝的管柱，以測定緩沖液(25mM MOPS pH 6.5、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷、5μM EDTA和5μM DTT)交換酶儲備緩沖液(50mM磷酸鈉pH 8.0、300mM NaCl、10％甘油、0.05％月桂基麥芽糖苷和10mM DTT)。
酶解物合成和純化按照R.Zhang等(出處同上)的報告，進行酶解物的合成，并通過使用標(biāo)準(zhǔn)方案(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)，使Fmoc-Nva-OH錨定在2-氯三苯甲基氯樹脂上來啟動。接著使用Fmoc化學(xué)，以手工或在自動ABI 431型肽合成器上組裝肽。通過在二氯甲烷(DCM)中的10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)處理30分鐘，或通過在二氯甲烷(DCM)中的2％三氟乙酸(TFA)處理10分鐘，從樹脂上裂解N-乙?；彝耆Ｗo的肽片段。以共沸方式蒸發(fā)合并的濾液和DCM洗滌液(或以Na2CO3水溶液重復(fù)萃取)，除去在裂解時使用的酸。將DCM相經(jīng)Na2SO4干燥，并蒸發(fā)。
使用標(biāo)準(zhǔn)酸-醇偶聯(lián)程序(K.Holmber等，Acta Chem.Scand.，B33(1979)410-412)，組裝酯酶解物。將肽片段溶解于無水吡啶(30-60mg/mL)中，在其中加入10摩爾當(dāng)量的發(fā)色團和催化量(0.1當(dāng)量)的對-甲苯磺酸(pTSA)。加入二環(huán)己基碳化二亞胺(DCC，3當(dāng)量)，以啟動偶聯(lián)反應(yīng)。通過HPLC監(jiān)測產(chǎn)物形成，并可發(fā)現(xiàn)在室溫下12-72小時后完成反應(yīng)。在真空下蒸發(fā)吡啶溶劑，并通過與甲苯共沸蒸發(fā)進一步除去。用在DCM中的95％TFA處理2小時，將肽酯脫保護，并以無水的二乙醚萃取3次，除去過量的發(fā)色團。在C3或C8管柱上，使用30％至60％乙腈梯度(使用6倍的柱體積)，通過逆相HPLC純化脫保護的酶解物。在HPLC純化后的整體產(chǎn)率可能是大約20-30％?？赏ㄟ^電噴霧電離質(zhì)譜分析，證實分子質(zhì)量。以干粉形式將酶解物在干燥條件下儲存。
酶解物和產(chǎn)物的光譜在pH 6.5測定緩沖液中，獲得酶解物和相應(yīng)的發(fā)色團產(chǎn)物的光譜。在最佳非高峰波長處(對3-Np和HMC為340nm，對PAP為370nm，而對4-Np為400nm)，在1-cm比色杯中，使用多倍稀釋測定消光系數(shù)。將最佳非高峰波長定義為在酶解物與產(chǎn)物之間，產(chǎn)生吸光度的最大分數(shù)差異(產(chǎn)物OD-酶解物OD/酶解物OD)的波長。
蛋白酶測定在30℃下，在96-孔微量滴定板中，使用200μl反應(yīng)混合物進行HCV蛋白酶測定。測定緩沖液條件(25mM MOPS pH6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麥芽糖苷，5μM EDTA和5uM DTT)是最適合NS3/NS4a異二聚體(heterodimer)的(D.L.Sali等，出處同上)。通常，將緩沖液、酶解物和抑制劑的150μl混合物放在孔中(DMSO的終濃度≤4％體積/體積)，并容許在30℃下預(yù)先溫育大約3分鐘。然后使用50μl在測定緩沖液中的預(yù)熱的蛋白酶(12nM，30℃)啟動反應(yīng)(終體積200μl)。在整個測定長度(60分鐘)內(nèi)，使用裝有單色儀的Spectromax Plus微量滴定板讀取器，在合適的波長下(對3-Np和HMC為340nm，對PAP為370nm，而對4-Np為400nm)，監(jiān)測培養(yǎng)板的吸光度變化(可利用使用截止濾紙的培養(yǎng)板讀取器獲得可接受的結(jié)果)。在合適的波長下，對作為無-酶水解作用的對照組的無酶空白組，監(jiān)視在Nva和發(fā)色團之間的酯鍵的氮白水解裂解作用。在30-倍酶解物濃度范圍(～6-200μM)內(nèi)，進行酶解物動力學(xué)參數(shù)的評估。使用線性回歸確定初速，并通過使用非線性回歸分析，使數(shù)據(jù)擬合Michaelis-Menten方程式，獲得動力學(xué)常數(shù)(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)。在假定酶完全是有活性的情況下計算轉(zhuǎn)換數(shù)(Turnovernumber)(kcat)。
評估抑制劑和失活劑在固定濃度的酶和酶解物下，根據(jù)為了競爭性抑制動力學(xué)而重新整理的Michaelis-Menten方程式vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))，通過vo/vi對抑制劑濃度([I]o)作圖，以實驗方式確定競爭抑制劑Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)、Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDVVP(Nva)-OH的抑制常數(shù)(Ki)，其中vo為未被抑制的初速，vi為在抑制劑存在下，在任何給定的抑制劑濃度([I]o)下的初速，及[S]o是所使用的酶解物濃度。使用線性回歸擬合所得數(shù)據(jù)，并使用所得的斜率1/(Ki(1+[S]o/Km)來計算Ki值。下文表5列出一些本發(fā)明化合物所得的Ki*值(以毫微摩爾濃度表示)。數(shù)種其它化合物在前文頁數(shù)的表中指出。
表5
雖然已經(jīng)結(jié)合上文所述的具體實施方案一起說明本發(fā)明，但其許多改變、修飾和其它變化對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言將是顯而易見的。打算使所有的這類改變、修飾和變化落入本發(fā)明的精神及范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有式I中所示的一般結(jié)構(gòu) 其中R1為H、OR8、NR9R10或CHR9R10，其中R8、R9和R10可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基-、烯基-、炔基-、芳基-、雜烷基-、雜芳基-、環(huán)烷基-、雜環(huán)基-、芳烷基-及雜芳烷基；A和M可以是相同或不同的，各自獨立選自R、OR、NHR、NRR′、SR、SO2R及鹵代基；或A和M互相連接以使上文式I中所示的部分 形成3、4、6、7或8-元環(huán)烷基、4至8-元雜環(huán)基、6至10-元芳基或5至10-元雜芳基；E為C(H)或C(R)；L為C(H)、C(R)、CH2C(R)或C(R)CH2；R、R′、R2和R3可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基及雜芳烷基，或者，NRR′中的R和R′互相連接，以使NRR′形成4至8-元雜環(huán)基；且Y選自下列部分 其中G為NH或O；且R15、R16、R17和R18可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基及雜芳基，或者，(i)R15和R16互相連接，以形成4至8-元環(huán)狀結(jié)構(gòu)，且(ii)同樣地，R17和R18獨立地互相連接，以形成3至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)基；其中所述烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基各自可為未取代的，或任選獨立地被一或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；?、芳基磺?；喕酋０被?、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、酮基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基、烷氧羰基氨基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代基、氰基及硝基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NR9R10，且R9為H，R10為H或R14，其中R14為H、烷基、芳基、雜烷基、雜芳基、環(huán)烷基、烷基-芳基、烷基-雜芳基、芳基-烷基、烯基、炔基或雜芳基-烷基。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R14選自
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R2選自下列部分
5.權(quán)利要求1的化合物，其中R3選自 其中R31為OH或O-烷基；且R32為H、C(O)CH3、C(O)OtBu或C(O)N(H)tBu。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R3選自下列部分
7.權(quán)利要求1的化合物，其中Y選自下列部分 其中R15、R16、R17和R18可以是相同或不同的，各自獨立選自H、烷基、雜烷基、烯基、雜烯基、炔基、雜炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳烷基、雜芳基及雜芳烷基，或者，R15與R16互相連接，以形成4至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)結(jié)構(gòu)；R17和R18互相連接，以形成3至8-元環(huán)烷基或雜環(huán)基，其中所述芳基、雜芳基、環(huán)烷基或雜環(huán)基各自可為未取代的，或任選獨立地被一或多個選自以下的部分取代羥基、烷氧基、芳氧基、硫代、烷硫基、芳硫基、氨基、酰氨基、烷氨基、芳氨基、烷基磺?；?、芳基磺酰基、亞磺酰氨基、烷基亞磺酰氨基、芳基亞磺酰氨基、烷基、芳基、雜芳基、羧基、烷氧羰基、羧酰氨基、烷氧羰基氨基、烷氧羰基氧基、烷基脲基、芳基脲基、鹵代基、氰基及硝基。
8.權(quán)利要求7的化合物，Y選自 其中Y31選自 Y32選自 且Y12選自H、CO2H、CO2Me、OMe、F、Cl、Br、NH2、N(H)S(O2)CH3、N(H)C(O)CH3、NO2、S(O2)NH2、CF3、Me、OH、OCF3及C(O)NH2。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中所述部分 選自下列結(jié)構(gòu)
10.權(quán)利要求9的化合物，其中所述部分 選自下列結(jié)構(gòu)
11.權(quán)利要求10的化合物，其中所述部分 選自下列結(jié)構(gòu)
12.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為NHR14，其中R14選自 R2選自下列部分 R3選自下列部分 Y選自 其中Y31選自 Y32選自 且Y12選自H、CO2H、CO2Me、OMe、F、Cl、Br、NH2、N(H)S(O2)CH3、N(H)C(O)CH3、NO2、S(O2)NH2、CF3、Me、OH、OCF3及C(O)NH2；且所述部分
13.一種藥用組合物，它包含作為活性成份的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
14.權(quán)利要求13的藥用組合物，它用于治療與HCV有關(guān)的病癥。
15.權(quán)利要求13的藥用組合物，它另外包含至少一種藥學(xué)上可接受的載體。
16.權(quán)利要求15的藥用組合物，它另外含有至少一種抗病毒劑。
17.權(quán)利要求16的藥用組合物，它還另外含有至少一種干擾素。
18.權(quán)利要求17的藥用組合物，其中所述至少一種抗病毒劑為利巴韋林，而所述至少一種干擾素為α-干擾素或聚乙二醇化的的干擾素。
19.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的方法，所述方法包括給予需要這樣的治療的患者藥用組合物，所述藥用組合物包含治療有效量的至少一種權(quán)利要求1的化合物。
20.權(quán)利要求19的方法，其中所述給予為口服或皮下給予。
21.一種制備用于治療與HCV有關(guān)的病癥的藥用組合物的方法，該方法包括使至少一種權(quán)利要求1的化合物與至少一種藥學(xué)上可接受的載體緊密接觸。
22.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物或酯，所述化合物選自下列結(jié)構(gòu)的化合物
23.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的藥用組合物，所述組合物包含治療上有效量的一或多種權(quán)利要求22的化合物，及藥學(xué)上可接受的載體。
24.權(quán)利要求23的藥用組合物，它另外含有至少一種抗病毒劑。
25.權(quán)利要求24的藥用組合物，它還另外含有至少一種干擾素或PEG-干擾素α共軛物。
26.權(quán)利要求25的藥用組合物，其中所述至少一種抗病毒劑為利巴韋林，而所述至少一種干擾素為α-干擾素或聚乙二醇化的干擾素。
27.一種治療與丙型肝炎病毒有關(guān)的病癥的方法，該方法包括給予有效量的一種或多種權(quán)利要求22的化合物。
28.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)蛋白酶活性的方法，該方法包括使HCV蛋白酶與一種或多種權(quán)利要求22的化合物接觸。
29.一種治療、預(yù)防或改善丙型肝炎的一或多種癥狀的方法，該方法包括給予治療有效量的一種或多種權(quán)利要求22的化合物。
30.權(quán)利要求29的方法，其中所述HCV蛋白酶是NS3/NS4a蛋白酶。
31.權(quán)利要求30的方法，其中所述化合物抑制HCV NS3/NS4a蛋白酶。
32.一種調(diào)節(jié)丙型肝炎病毒(HCV)多肽的加工的方法，該方法包括在其中所述多肽被加工的狀況下，使含有HCV多肽的組合物與一種或多種權(quán)利要求22的化合物接觸。
33.一種治療與HCV有關(guān)的病癥的方法，該方法包括給予需要這樣的治療的患者藥用組合物，所述組合物包含治療有效量的至少一種化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物或酯，所述化合物為選自下列的化合物
34.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
35.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
36.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
37.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
38.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
39.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
40.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
41.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
42.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
43.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
44.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
45.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
46.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
47.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
48.一種顯示HCV蛋白酶抑制活性的化合物，或所述化合物的對映體、立體異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體及外消旋物，或所述化合物的藥學(xué)上可接受鹽或溶劑合物或酯，所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)
49.權(quán)利要求1的化合物，它為純化的形式。
全文摘要
本發(fā)明公開新的化合物，其具有HCV蛋白酶抑制劑活性，以及制備這類化合物的方法。在另一個實施方案中，本發(fā)明公開包含這類化合物的藥用組合物，以及使用它們來治療與HCV蛋白酶有關(guān)的病癥的方法。
文檔編號A61K31/403GK101076516SQ200580012859
公開日2007年11月21日 申請日期2005年2月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月27日
發(fā)明者F·本內(nèi)特, R·G·洛維, 黃育華, S·亨德拉塔, A·K·薩克塞納, S·L·博根, 劉義雄, F·G·恩喬羅格, S·芬卡特拉曼, 陳新海, M·桑尼格拉希, A·阿拉薩彭, V·M·吉里賈法拉布漢, F·維拉茲奎茨 申請人:先靈公司