專(zhuān)利名稱(chēng)：河鲀毒素油相制劑的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種河鲀毒素油相制劑的制備方法。
河鲀毒素(Tetrodotoxin)是從河鲀魚(yú)的內(nèi)臟中提取出的一種活性物質(zhì)，其毒性比氰化納高1250倍?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，河鲀毒素還廣泛存在于蝦虎魚(yú)、蠑螈、章魚(yú)、貝類(lèi)、螺類(lèi)、海星、蟹類(lèi)等海洋生物體內(nèi)。河魨毒素的結(jié)晶是一種氨基氫化喹唑啉類(lèi)型化合物，分子式為C11H17N3O8，分子量為319.27。這種令人生畏的毒素，只需0.3mg-0.5mg就可致人于死地，因?yàn)樗軐?zhuān)一地阻斷神經(jīng)細(xì)胞膜Na+通道，所以，河鲀毒素成為神經(jīng)生物學(xué)和生理學(xué)研究無(wú)可替代的工具藥(S.L.Hu，C.Y.Kao.Toxicon，1985，23723-724.)。
日本對(duì)河鲀毒素的藥用研究已有七十多年的歷史，據(jù)報(bào)道河鲀毒素具有鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)痙、鎮(zhèn)癢、局麻等醫(yī)藥功效(潘心富.1984.藥學(xué)通報(bào)，440-43)。但是，因河鲀毒素的毒性極強(qiáng)，而且河鲀毒素的治療劑量與其中毒量接近，故河鲀毒素制劑至今尚未被列入藥典。
我國(guó)從上世紀(jì)八十年代初，開(kāi)始對(duì)河魨毒素的藥用價(jià)值進(jìn)行研究，研究表明河魨毒素除了具有很好的鎮(zhèn)痛和局麻作用外，還發(fā)現(xiàn)河魨毒素具有非常好的戒毒效果，且本身無(wú)藥物依賴(lài)性(CN1227102A；CN1145225A；CN1353990A；CN1356104A)。
現(xiàn)有的河鲀毒素制劑，一般是將河鲀毒素用酸性水溶解后，再制成注射劑，在醫(yī)學(xué)上主要用于鎮(zhèn)痛或戒毒，但是有一定的副作用，在臨床使用中，發(fā)現(xiàn)部分患者出現(xiàn)不同程度的口、舌、唇、四肢麻木等輕度中毒反應(yīng)(參見(jiàn)滿洲醫(yī)學(xué)雜志，1993，130639；陳冀勝，1986，海洋藥物，231；EP750909)?，F(xiàn)有的河鲀毒素制劑，僅有水溶液制劑，在治療使用方法上，只是進(jìn)行皮下、肌肉、靜脈注射或呼吸道給藥。這種水溶液制劑，在胃酸的作用下，毒素很容易被分解，使河豚毒素的活性顯著降低，按目前現(xiàn)有技術(shù)制備河豚毒素口服制劑，不但療效差，而且成本很高。
本發(fā)明的目的是為了提供一種可以口服使用的河鲀毒素油相制劑的制備方法。該制備方法工藝簡(jiǎn)單，原料來(lái)源方便，生產(chǎn)成本低，容易實(shí)施。用該制備方法和工藝制成的河鲀毒素油相制劑，除具有鎮(zhèn)痛、戒毒的作用外，還具有使用方便、安全、高效、非成癮性的特點(diǎn)。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明主要是通過(guò)以下技術(shù)手段完成的(1)、將河魨毒素溶解于酸性水或酸性醇或其它酸的緩沖溶液中，混合攪拌均勻，制成“A”溶液(“A”溶液的pH值范圍為4-7)；(2)、將“A”溶液加入到親水非離子表面活性劑(或雙親性油酯，或親水、親油非離子表面活性劑)的混合液中，其比例為1∶1至1∶40；兩種溶液經(jīng)充分?jǐn)嚢杈鶆?，混合成為“B”溶液；(3)、將“B”溶液加入到親油非離子表面活性劑中(或親油性乳化劑中，或醫(yī)用油中)，溶液“B”與表面活性劑的比例為1∶5至1∶50，經(jīng)充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?，混合成為“C”溶液。這樣，即制成了本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
(注上述溶液在制備過(guò)程中，可加入適量的抗氧化劑，若抗氧化劑為水溶性的，可在上述“A”溶液中加入；若抗氧化劑為脂溶性的，可在上述“C”溶液中加入。)上述制備方法制成的河鲀毒素油相制劑，其河鲀毒素的有效含量為0.01μg/ml—20μg/ml。
上述溶液所涉及的醫(yī)用油，為中國(guó)藥典規(guī)定的注射油或口服油，包括花生油、麻油、豆油、棉子油、杏仁油、茶油和魚(yú)油。
上述溶液所涉及到的緩沖液(酸溶液)，包括醋酸、苯甲酸、石炭酸、檸檬酸及其醫(yī)學(xué)上可接受的酸的緩沖液。
上述溶液所涉及的表面活性劑，主要為苯甲酸芐酯、油酸乙酯、聚乙二醇(PEG)、甘油油酸酯、十甘油單油酸酯、十甘油單辛酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸酯/癸酸酯、聚甘油-3-油酸酯、六甘油單月桂酸酯、油酸乙脂、吐溫、司盤(pán)等。
上述溶液涉及的抗氧化劑，包括沒(méi)食子酸丙酯、特丁基苯二酚、叔丁基對(duì)羥基茴香醚、VC、VE(其含量為0.001％～0.2％)。
依照本發(fā)明制備方法制成的河鲀毒素油相制劑，可以直接用來(lái)口服，也可以制成液體膠囊、乳劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑或栓劑。
動(dòng)物試驗(yàn)一、用小白鼠熱板法進(jìn)行鎮(zhèn)痛試驗(yàn)熱板恒溫55±1℃，以小白鼠舐后足為反應(yīng)指標(biāo)，取預(yù)選合格的雌性小白鼠40只，隨機(jī)分為4組，每組10只。
第1組河魨毒素油相制劑0.1μg/ml第2組河魨毒素油相制劑0.6μg/ml第3組河魨毒素油相制劑1μg/ml第4組花生油(對(duì)照組)分別給小白鼠腹腔注射0.1ml/10g的制劑，只用一次，藥后不同時(shí)間(40、90分鐘及3、5、10、20小時(shí))測(cè)定痛閥平均值。結(jié)果河魨毒素油劑的鎮(zhèn)痛時(shí)間出現(xiàn)在給藥1.5小時(shí)后，高峰在3-5小時(shí)，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)10小時(shí)，最長(zhǎng)達(dá)到20小時(shí)，與花生油組比較有顯著差異(P＜0.01)，鎮(zhèn)痛作用呈劑量-效應(yīng)關(guān)系。
二、用小白鼠扭體法作鎮(zhèn)痛試驗(yàn)取小白鼠20只(小白鼠體重為22-25g)，隨機(jī)分為二組，每組10只。
第1組河魨毒素油相制劑1μg/ml第2組花生油(對(duì)照組)分別給小白鼠灌胃0.2ml/10g，一天兩次，共用三次，次日給藥后10小時(shí)分別腹腔注射0.6％醋酸溶液0.1ml/10g，并記錄20分鐘內(nèi)小白鼠的扭體次數(shù)。扭體指標(biāo)小白鼠腹部?jī)?nèi)凹，軀干與后腿伸長(zhǎng)，臀部抬起。試驗(yàn)結(jié)果表明，河魨毒素油劑與花生油對(duì)照組有顯著差異(P＜0.01)，這一試驗(yàn)結(jié)果與上述熱板法試驗(yàn)結(jié)果相一致。
臨床試驗(yàn)鎮(zhèn)痛效果收治住院或非住院癌痛患者42例，其中男性25例，女性17例，年齡最小的22歲，最大的76歲。這些自愿受試者，分別患有食道賁門(mén)癌癥12例、肺癌7例、胃癌8例、肝癌5例、淋巴肉瘤4例、腸癌2例、鼻咽癌3例、口腔癌1例，均為中、晚期癌癥患者，疼痛劇烈。其中33例已使用過(guò)嗎啡、杜冷丁進(jìn)行緩解疼痛，24例使用過(guò)鎮(zhèn)痛藥，并產(chǎn)生了耐藥性。經(jīng)使用本發(fā)明方法制成的軟膠囊(每粒膠囊含油相制劑1ml)、口服油相制劑1ml，每日服用3-4次，每次1-2?；?ml-2ml油相制劑，用藥7-50天(最長(zhǎng)8個(gè)月)。經(jīng)治療后，產(chǎn)生顯著效果17例，緩解23例，無(wú)效2例，有效率達(dá)到95％。
臨床試驗(yàn)戒毒效果自愿戒毒者28例，均為海洛因吸毒者，其中男性23例，女性5例，年齡最小的17歲，最大的33歲。吸毒史3個(gè)月到4年不等，癮量多在0.5g-1.0g間。用藥方法是根據(jù)吸毒者癮量的大小、吸毒時(shí)間的長(zhǎng)短及戒斷反應(yīng)的輕重，采取不同方法治療，對(duì)戒毒患者每天早、中、晚各口服河鲀毒素油相制劑膠囊1-2粒(1-2ml油劑)，一般6-7天為一個(gè)療程。戒毒患者在第一次口服本發(fā)明膠囊時(shí)，可輔助使用鎮(zhèn)靜劑(肌肉注射安定、冬眠靈等)，經(jīng)用藥治療6天以后，戒毒患者的情況明顯好轉(zhuǎn)，停藥后不再出現(xiàn)嚴(yán)重的戒斷反應(yīng)。用納洛酮做催癮試驗(yàn)呈陰性，尿嗎啡檢測(cè)為陰性，有效率可達(dá)到96％。
試驗(yàn)證明，依照本發(fā)明制備方法制成的河鲀毒素油相制劑，具有以下幾大特點(diǎn)1、可以阻止河魨毒素與細(xì)胞直接接觸，能較好地抵抗胃酸或酶的降解作用，在使用過(guò)程中，用微量的河魨毒素制劑，即可發(fā)揮很好的鎮(zhèn)痛、戒毒作用，由于給藥劑量遠(yuǎn)離中毒劑量，具有相當(dāng)可靠的安全程度；2、本發(fā)明使用油溶液作為藥物載體，其選擇性高，靶向性強(qiáng)，可減少藥物劑量，降低毒性，使藥物的吸收緩慢而藥效持久，其藥效作用的持續(xù)時(shí)間可達(dá)10-20小時(shí)。
3、本發(fā)明方法制備成的口服制劑，可為患者用藥帶來(lái)極大的方便，并可減輕患者的痛苦。即使患者使用嗎啡或杜冷丁產(chǎn)生耐藥成癮后，用本發(fā)明制劑，仍能起到很好的療效，而且不會(huì)產(chǎn)生耐藥性和成癮性，實(shí)現(xiàn)了低毒、高效、無(wú)成癮性、無(wú)副作用的安全用藥要求。
下面通過(guò)實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施過(guò)程做進(jìn)一步的詳細(xì)描述實(shí)施例一1、取河魨毒素1mg，加入0.1％醋酸溶液5ml，使其混合溶解成“A”溶液；2、取無(wú)水乙醇24ml，將“A”溶液1ml加入混合其中，攪拌制成25ml的“B”溶液；3、取苯甲酸芐脂75ml，將“B”溶液加入混合其中，攪拌制成100ml的“C”溶液；4、在“C”溶液中加入沒(méi)食子酸丙酯2ml，再加入花生油至1000ml，混合攪拌均勻后，即制成本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
實(shí)施例二1、取河魨毒素1mg，加入0.05％醋酸溶液10ml，使其混合溶解成“A”溶液；2、取聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯44ml，將“A”溶液4ml加入混合其中，攪拌制成48ml的“B”溶液；3、取聚甘油-3-油酸酯152ml，將“B”溶液加入混合其中，攪拌均勻后，制成200ml的“C”溶液；4、在“C”溶液中加入維生素E200mg，攪拌混合均勻后，即制成本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
實(shí)施例三1、取河魨毒素1mg，加入0.02％醋酸溶液20ml，使其混合溶解成“A”溶液；2、取聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯20ml，將“A”溶液4ml加入混合其中，攪拌均勻后制成24ml的“B”溶液；3、取甘油-3-油酸酯76ml，將“B”溶液加入其中，混合攪拌均勻，制成100ml的“C”溶液；4、在“C”溶液中加入維生素E1g，再加花生油至1000ml，混合攪拌均勻后，即制成本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
實(shí)施例四1、取河魨毒素(含檸檬酸鹽)1mg，加入98％乙醇10ml和維生素C 2g，使其混合溶解成“A”溶液；2、取油酸乙脂40ml，將“A”溶液加入其中，混合攪拌均勻，制成50ml“B”溶液；3、在“B”溶液中加入1g的維生素E，再加入魚(yú)油至500ml，混合攪拌均勻，即制成本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
實(shí)施例五1、取河魨毒素1mg，加入0.01％醋酸溶液1ml，使其混合溶解成“A”溶液；2、取吐溫-40 6ml，將“A”溶液1ml加入其中，混合攪拌均勻，制成“B”溶液；3、取司盤(pán)-80 13ml，將“B”溶液加入其中，混合攪拌均勻，制成20ml“C”溶液；4、在“C”溶液中加入1g的維生素E，再加入花生油至100ml，混合攪拌均勻，即制成本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
實(shí)施例六1、取河魨毒素1mg，加入0.1％醋酸溶液4ml，使其混合溶解成“A”溶液；2、取六甘油單月桂酸酯26ml，將“A”溶液4ml加入其中，混合攪拌均勻，制成30ml“B”溶液；3、取甘油油酸酯70ml，將上述“B”溶液加入其中，混合攪拌均勻，制成100ml“C”溶液；4、在“C”溶液中加入1g的維生素E，再加入魚(yú)油至500ml，混合攪拌均勻，即制成本發(fā)明所述的河鲀毒素油相制劑。
通過(guò)試驗(yàn)證明，使用本發(fā)明方法制備的河鲀毒素油相制劑，不但可明顯減輕和緩解癌癥、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎以及其他慢性疾病給患者帶來(lái)的痛苦，并且可以戒除人體對(duì)海洛因、阿片、嗎啡、杜冷丁等毒品的依賴(lài)性。
權(quán)利要求
1.河魨毒素油相制劑的制備方法，其特征在于將河魨毒素溶解于酸性水或酸性醇，或酸的緩沖液中，再與一種或多種表面活性劑或雙親性油酯、醫(yī)用油進(jìn)行溶合后，制成油相制劑，該制劑主要用于鎮(zhèn)痛或戒除藥物依賴(lài)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的油相制劑，其特征在于每毫升油相制劑的河魨毒素有效含量為0.01μg/ml-20μg/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的表面活性劑，其特征在于主要包括苯甲酸芐酯、油酸乙酯、聚乙二醇(PEG)、甘油油酸酯、十甘油單油酸酯、十甘油單辛酸酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸酯/癸酸酯、聚甘油-3-油酸酯、吐溫、司盤(pán)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于河魨毒素酸溶液pH值的范圍為3-7；河魨毒素酸溶液與表面活性劑(或雙親性油酯)的比例為1∶1至1∶40。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于將河魨毒素酸溶液加入到親水親油平衡值為9.6＜HLB＜17的親水非離子表面活性劑中，攪拌均勻，再與親水親油平衡值為1＜HLB＜10的親油非離子表面活性劑進(jìn)行混合，加入抗氧化劑后，充分搖拌均勻，制成透明的油相制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于河魨毒素酸溶液，用濃度為90％以上的乙醇進(jìn)行稀釋后，與苯甲酸芐酯混合攪拌均勻，再用醫(yī)用油進(jìn)行稀釋、混合、攪拌均勻。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制劑，其特征在于河魨毒素乙醇溶液與苯甲酸芐酯溶液的比例為1∶1至1∶30。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制劑，其特征在于可將河魨毒素油相制劑制成膠囊、乳劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑、栓劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種河鲀毒素油相制劑的制備方法。其特征是將河魨毒素溶解于酸性水或酸性醇的溶液中，再與一種(或多種)表面活性劑(或雙親性油酯)、醫(yī)用油和抗氧化劑制備成油相制劑，本油相制劑可以制成膠囊、乳劑、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)劑或栓劑等。該制備方法工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低，容易實(shí)施，用該方法和工藝制成的河鲀毒素油相制劑，具有使用方便、安全、高效、非成癮性的特點(diǎn)，是一種優(yōu)良的鎮(zhèn)痛和戒除藥物依賴(lài)的藥劑。
文檔編號(hào)A61K9/00GK1754539SQ20041008055
公開(kāi)日2006年4月5日 申請(qǐng)日期2004年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月28日
發(fā)明者黃致強(qiáng), 黃海燕, 黃海楓 申請(qǐng)人:黃致強(qiáng), 黃海燕, 黃海楓