專利名稱：降低有毒成分含量的咔哇提取物及含其組合物與制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有降低有毒副作用成分含量的咔哇提取物、其制備方法和包含有該提取物組合物，具體為含有該降低了有毒副作用成分含量、甚至去除了有毒副作用成分的咔哇提取物的藥物、食品添加劑和保健食品。
背景技術(shù)：
咔哇(即KAVA)為胡椒科植物卡瓦Piper methysticum的干燥根。在南太平洋島國(guó)具有2000多年的使用歷史，傳統(tǒng)上咔哇的根被用來制備咔哇茶或直接咀嚼，使人產(chǎn)生放松和愉悅的感覺。近代藥理學(xué)研究表明，咔哇中的主要成分咔哇內(nèi)酯類化合物具有良好的抗焦慮、抗抑郁和鎮(zhèn)靜功能并在全世界得到廣泛的應(yīng)用，參見M.H.Pittler，E.Ernst，J.Clin.Psychopharmacol 20，84(2000)。咔哇內(nèi)酯類化合物中已有7個(gè)咔哇吡喃酮經(jīng)鑒定，其中醉椒素(kawain)、二氫醉椒素(dihydrokawain)、麻醉椒素(methysticin)、二氫麻醉椒素(dihydromethysticin)、甲氧基醉椒素(yangonin)、去甲氧基醉椒素(desmethoxyyangonin)被認(rèn)為是抗焦慮、抗抑郁和鎮(zhèn)靜的活性成分。咔哇還含有兩個(gè)黃色色素黃醉椒素A和B(flavokawain A和B)，一般認(rèn)為這兩種成分使長(zhǎng)期食用咔哇者膚色變黃。有藥理實(shí)驗(yàn)證明黃醉椒素A作用于膀胱腫瘤細(xì)胞。
咔哇的傳統(tǒng)制法是用椰子奶或水提取，在使用中未見明顯的毒副作用，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也證明咔哇的水提取物沒有肝臟毒性。但是由于水或椰子奶提取的咔哇提取物中的咔哇內(nèi)酯含量低，目前商業(yè)上所使用的咔哇提取物是以乙醇水溶液、丙酮水溶液或氯仿等溶劑進(jìn)行提取，制備的咔哇提取物一般稱為“標(biāo)準(zhǔn)提取物”。HPLC檢測(cè)表明，按照美國(guó)制備標(biāo)準(zhǔn)提取物的方法提取的咔哇提取物中，黃醉椒素B的含量大于2％。自1999年以后，大量文獻(xiàn)報(bào)道含有該咔哇提取物的藥物或保健食品可能引起嚴(yán)重的肝損傷。參見Center for Food Safetyand Applied Nutrition，Morbidity Mortality Weekly Rep.51，1065(2002)；M.Blumenthal，Herbal.Gram.47，64(1999)；A.Denham，M.A.McIntyre，J.Whitehouse，J.Altern.Complement.Med.8，237(2002)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是降低或去除咔哇提取物中對(duì)肝有毒副作用的成分，提供基本上不含有毒副作用成分或顯著降低有毒副作用成分含量的咔哇提取物，其含有公認(rèn)的六種咔哇內(nèi)酯活性成分去甲氧基醉椒素，甲氧基醉椒素，二氫醉椒素，醉椒素，二氫麻醉椒素和麻醉椒素；其咔哇內(nèi)酯的總含量大于10％，可達(dá)11-90％；本發(fā)明還包括研究純化咔哇提取物的方法，以及含有所述提取物的組合物，如藥物、食品添加劑和保健食品。
為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案。
一種降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物，其中按重量計(jì)黃醉椒素B含量≤1.0％。
所述咔哇提取物，其中按重量計(jì)咔哇內(nèi)酯含量≥10％，黃醉椒素B含量0-1.0％；咔哇提取物中咔哇內(nèi)酯含量可以為11-90％，黃醉椒素B含量可以為0-0.5％。
含咔哇提取物的組合物，其中含有前述的咔哇提取物，還含有常規(guī)藥用、食用或保健品用的載體。
片劑、顆粒劑或緩釋制劑的輔料有崩解劑如羥丙纖維素，羧甲基淀粉鈉，交聯(lián)聚維酮，交聯(lián)羧甲基纖維素鈉；填充劑如乳糖，微晶纖維素，糊精，淀粉，磷酸鈣；粘合劑如預(yù)膠化淀粉，聚維酮，羧甲基纖維素鈉，羥丙甲纖維素；潤(rùn)滑劑如滑石粉，硬脂酸鎂，微粉硅膠，氫化植物油；潤(rùn)濕劑如十二烷基硫酸鈉，吐溫80；骨架材料如羥丙甲纖維素，乙基纖維素等。
液體制劑、混懸液的輔料有增溶劑如吐溫80，普流羅尼F-68，聚氧乙烯氫化蓖麻油等；助懸劑如羧甲基纖維素鈉，聚維酮，羥丙甲基纖維素等；防腐劑如尼泊金甲，乙，丙和丁酯；pH調(diào)節(jié)劑如枸櫞酸及枸櫞酸鹽；磷酸鹽等。
前述咔哇提取物的制備方法，包括如下步驟取咔哇原料，用含水或不含水的低級(jí)醇、含水或不含水的低級(jí)酮、含水或不含水的含4-10個(gè)碳原子的酯類、含水或不含水的氯代低級(jí)烷烴或者這些溶劑的混合物提取，提取液除去溶劑，得粗咔哇提取物；低級(jí)醇可以是甲醇、乙醇，低級(jí)酮可以是丙酮，4-10個(gè)碳原子的酯類可以是乙酸乙酯；用大孔樹脂、聚酰胺、硅膠、氧化鋁、殼聚糖常規(guī)處理粗咔哇提取物；或者，對(duì)堿性水液中的粗咔哇提取物，用沸點(diǎn)為30至100℃的脂族溶劑和/或脂環(huán)族溶劑萃取去除黃醉椒素B后；將水相調(diào)至酸性，用乙酸乙酯和/或氯代低級(jí)烷烴萃取水相，濃縮萃取液至干，得精制咔哇提取物；或者，將用沸點(diǎn)為30至100℃的脂族溶劑和/或脂環(huán)族溶劑提取了黃醉椒素B后的咔哇，再用含水或不含水的低級(jí)醇、含水或不含水的低級(jí)酮、含水或不含水的含4-10個(gè)碳原子的酯類、含水或不含水的氯代低級(jí)烷烴或者這些溶劑的混合物提取，濃縮提取液至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物；或者，將粗咔哇提取物加入適量水，用石油醚、環(huán)己烷和/或己烷萃取水相，將萃取后的水相濃縮至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物；或者，選擇上述方法組合使用。
所述咔哇提取物的制備方法中脂族溶劑和/或脂環(huán)族溶劑是石油醚、環(huán)己烷、正己烷和/或汽油；氯代低級(jí)烷烴是二氯乙烷、三氯甲烷；大孔樹脂為非極性或弱極性大孔樹脂；氧化鋁為酸性或中性氧化鋁；殼聚糖為甲殼素脫乙酰基后的產(chǎn)物；大孔樹脂或聚酰胺層析柱的洗脫液選用含水乙醇、含水甲醇和/或含水丙酮；硅膠柱層析的洗脫液先選石油醚、環(huán)己烷和/或乙酸乙酯，再選異丙醇、乙酸乙酯、氯代低級(jí)烷烴、甲醇或含水甲醇、乙醇或含水乙醇、丙酮或含水丙酮，或者它們的混合物洗脫；堿水液含無機(jī)堿和/或有機(jī)堿與水；酸水液含無機(jī)酸和/或有機(jī)酸與水。其中，大孔樹脂可以選用HP20、AB-8、XAD-2、D-101、HP21、SP825、SP850、SP70、SP700、SP207、H107；無機(jī)堿可以為碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀和/或磷酸氫二鈉，有機(jī)堿可以為檸檬酸鹽、葡甲胺、泛酸鈉、L-半胱氨酸、苯甲酰胺、煙酰胺、硫脲、乙醇胺和/或脲；無機(jī)酸為硫酸和/或鹽酸；有機(jī)酸可以為檸檬酸、醋酸、草酸、馬來酸、琥珀酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸和/或抗壞血酸。
咔哇提取物具體的制備方法是將粗咔哇提取物上硅膠柱，先用石油醚或環(huán)己烷與乙酸乙酯的體積比為10-20∶1的混合溶劑洗脫硅膠柱，再用異丙醇、乙酸乙酯、氯代低級(jí)烷烴、甲醇或含水甲醇、乙醇或含水乙醇、丙酮或含水丙酮，或者它們的混合物洗脫，回收溶劑至干得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
咔哇提取物具體的制備方法還有向粗咔哇提取物的水混懸液中，加入適量甲醇和/或乙醇，形成咔哇提取物溶液后，加入殼聚糖；或者向粗咔哇提取物的水混懸液中加入殼聚糖物溶液；混勻，放置后，離心或過濾去除沉淀物，將清液濃縮干燥，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
咔哇提取物較好的制備方法是向粗咔哇提取物水溶液或水混懸液中加入有機(jī)堿和/或無機(jī)堿，使水溶液或水混懸液呈堿性，混合后，用石油醚、環(huán)己烷和/或己烷萃取去除黃醉椒素B，獲得的水相加入無機(jī)酸和/或有機(jī)酸，使溶液成酸性，混勻后，用乙酸乙酯、氯仿和/或二氯甲烷萃取酸性溶液，回收萃取液至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
咔哇提取物更為理想的制備方法是將咔哇的含水或不含水乙醇、含水或不含水甲醇、含水或不含水丙酮的提取液，除去有機(jī)溶劑得到的溶液或混懸液，或者用少量與水能混溶的溶劑如甲醇、乙醇、丙酮等溶解粗咔哇提取物，然后加入適量水制成咔哇提取物的溶液或混懸液，上大孔樹脂柱，用含水或不含水的乙醇、含水或不含水的甲醇、含水或不含水的丙酮、氯代烷烴和/或甲醇的混和物、乙酸乙酯和/或石油醚的混合物洗脫，洗脫液濃縮至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
我們的非常偶然地發(fā)現(xiàn)，咔哇提取物中的查爾酮類成分，具體地說是黃醉椒素B，表現(xiàn)出強(qiáng)烈的肝臟毒性作用，是咔哇提取物中的主要毒性成分。為此，進(jìn)行了大量實(shí)驗(yàn)研究。
A黃醉椒素B對(duì)正常人肝細(xì)胞株L02的細(xì)胞毒性作用L02細(xì)胞株用含有10％小牛血清的RPM1640培養(yǎng)基培養(yǎng)，以1×105細(xì)胞濃度接入96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔接種100μl，二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí)后，棄去培養(yǎng)液，加入含有不同濃度黃醉椒素B的培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)，以MTT法(參見T.Mossman，J.Immunol.65，55(1983)；A.P.Li et al.，Chem.Biol.Interact.121，117(1999))測(cè)定細(xì)胞存活率。結(jié)果表明黃醉椒素B對(duì)L02細(xì)胞有顯著的細(xì)胞毒性，其IC50為9.2μg/ml。
B黃醉椒素B對(duì)ICR小鼠的肝臟毒性作用選用18-20克雄性ICR小鼠，隨機(jī)分組，每組6只。將動(dòng)物保持在標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)境下，自由進(jìn)食和飲水。黃醉椒素B以0.5％羧甲基纖維素鈉懸浮，實(shí)驗(yàn)組小鼠以25mg/kg的劑量灌胃給藥7天，對(duì)照組平行給以0.5％羧甲基纖維素鈉。7天后小鼠取血，測(cè)定血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性，結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著高于對(duì)照組。
取小鼠肝臟進(jìn)行病理切片，常規(guī)染色，顯微鏡觀擦，結(jié)果顯示，所有對(duì)照組小鼠肝臟細(xì)胞正常，所有實(shí)驗(yàn)組小鼠(黃醉椒素B25mg/kg)肝臟匯管區(qū)浸潤(rùn)，有大量炎癥細(xì)胞，肝細(xì)胞濁腫，空泡化，與文獻(xiàn)報(bào)道服用含有咔哇提取物導(dǎo)致肝損傷的臨床病例肝臟病理切片現(xiàn)象一致(參見J.G.Paul，J.C.Nathan，L.H.Richard，C.Peter，W.A.Peter.Med.J.Aust.178，442(2003))。
本發(fā)明提供的技術(shù)方案降低或去除咔哇提取物中對(duì)肝有毒副作用的成分，提供基本上不含有毒副作用成分或顯著降低有毒副作用成分含量的咔哇提取物，其含有公認(rèn)的六種咔哇內(nèi)酯活性成分去甲氧基醉椒素，甲氧基醉椒素，二氫醉椒素，醉椒素，二氫麻醉椒素和麻醉椒素；其咔哇內(nèi)酯的總含量大于10％，可達(dá)11-90％。本發(fā)明研究的純化咔哇提取物的方法簡(jiǎn)便、實(shí)用。


圖1、咔哇丙酮提取物HPLC圖(箭頭所指色譜峰為黃醉椒素B)
圖2、咔哇丙酮提取物經(jīng)大孔樹脂HP20精制后，含有降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物HPLC圖(箭頭所指色譜峰為黃醉椒素B)具體實(shí)施方式
本發(fā)明使用的咔哇原料為來源于斐濟(jì)群島的咔哇根粉末(100-200目)，購自美國(guó)夏威夷Kava Kauai公司(Kava Kauai，PO Box 1202，Kapaa Kauai Hawaii，96746，USA)。
本發(fā)明中咔哇提取物中咔哇內(nèi)酯的含量測(cè)定方法見文獻(xiàn)H.S.Alexander，M.Imre，Journal of Chromatography A，948，51(2002)實(shí)施例1取咔哇原料，粉碎后，分別用水、60％丙酮(含水60％)、丙酮、95％乙醇提取，除去溶劑后，分別得到咔哇水提取物、咔哇60％丙酮提取物、咔哇丙酮提取物、咔哇95％乙醇提取物，測(cè)定其相應(yīng)的咔哇內(nèi)酯與黃醉椒素B的含量，測(cè)定結(jié)果表明丙酮提取物中黃醉椒素B的含量最高，所以下面的制備方法用丙酮提取物作為粗咔哇提取物的代表。參見下表。
不同溶劑提取的咔哇提取物中咔哇內(nèi)酯的總含量及黃醉椒素B百分含量提取溶劑 干提取物中的干提取物中的黃醉椒素B(％) 咔哇內(nèi)酯(％)水 0.024.6660％丙酮2.60 47.48丙酮3.37 57.0095％乙醇3.23 54.88實(shí)施例2以大孔樹脂層析制備含有降低的黃醉椒素B含量的咔哇提取物取1克咔哇的丙酮提取物(即粗咔哇提取物，下同)，加入1ml乙醇溶解，再加入10ml水制成咔哇提取物懸液，加入柱體積為50毫升的HP20大孔樹脂層析柱，以200毫升35％的乙醇(體積比)溶液洗脫，將洗脫液濃縮至干，HPLC法測(cè)定，提取物中的內(nèi)酯總含量為58.2％，黃醉椒素B含量0.04％。參見圖2。
實(shí)施例3通過硅膠層析制備降低黃醉椒素B的提取物取1克咔哇的丙酮提取物，加入1ml乙酸乙酯溶解，加入適量硅膠拌樣，揮干有機(jī)溶劑，獲得硅膠柱層析樣品。將層析樣品加于柱體積為50毫升的硅膠柱頂端，以石油醚與乙酸乙酯的體積比為10∶1的混合溶劑洗脫硅膠柱。由于黃醉椒素B具有黃顏色并且極性比活性成分咔哇內(nèi)酯小，層析洗脫的第一個(gè)黃顏色的色帶即為黃醉椒素B。在層析洗脫第一個(gè)黃顏色的色帶黃醉椒素B后，以TLC檢測(cè)后面的洗脫液中無黃醉椒素B，以甲醇洗脫層析柱上的其它成分，將甲醇洗脫液濃縮至干，獲得降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物。HPLC測(cè)定，提取物中的內(nèi)酯總含量為61.2％，不含有黃醉椒素B成分。
實(shí)施例4通過酸性、中性氧化鋁柱層析制備降低黃醉椒素B的提取物取1克咔哇的丙酮提取物，加入1ml氯仿溶解，分別加入柱體積為30毫升的酸性、中性氧化鋁干柱頂端。酸性、中性氧化鋁層析柱分別以200毫升的氯仿∶甲醇體積比為2∶1混合溶劑洗脫，TLC輔助檢測(cè)。洗脫液濃縮至干，獲得降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物。HPLC法測(cè)定，提取物中咔哇內(nèi)酯的總含量為38.2％，黃醉椒素B含量為0.3％。
實(shí)施例5通過殼聚糖處理獲得降低黃醉椒素B的咔哇提取物取1克咔哇的丙酮提取物，以50毫升40％的乙醇溶解，向此溶液中加入殼聚糖使殼聚糖的在總體積中的濃度為1％，充分?jǐn)嚢枞芙?，在室溫下靜置60分鐘，離心去除沉淀物，離心所得清液濃縮至干，獲得降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物。HPLC法測(cè)定，提取物中咔哇內(nèi)酯的總含量為46％，黃醉椒素B含量為0.1％。
實(shí)施例6通過酸堿處理的降低黃醉椒素B的提取物的制備方法取1克咔哇的丙酮提取物，加入1ml乙醇溶解，加入50毫升水制成咔哇提取物的混懸液，向咔哇提取物懸液中加入碳酸鈉，攪拌溶解，使咔哇提取物懸液的pH值為9，充分混勻，30分鐘后用50毫升環(huán)己烷萃取三次。獲得的水相以鹽酸調(diào)節(jié)酸堿性，使溶液的pH值為2，充分混勻，靜置2小時(shí)后用50毫升乙酸乙酯萃取三次，合并萃取的乙酸乙酯并回收溶劑至干，獲得降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物。HPLC法測(cè)定，提取物中咔哇內(nèi)酯的總含量為41％，黃醉椒素B含量為0.05％。
實(shí)施例7通過環(huán)己烷萃取處理獲得降低黃醉椒素B含量的提取物取3克經(jīng)粉碎的咔哇根，加入30毫升60％的丙酮溶液，浸泡30分鐘，然后再超聲提取60分鐘，離心去除藥渣，去除藥渣的上清液減壓回收去除丙酮，剩下的咔哇提取液以45毫升的環(huán)己烷萃取三次(每次15毫升)，將經(jīng)過環(huán)己烷萃取后的水相部分濃縮至干，獲得降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物。HPLC法測(cè)定，提取物中咔哇內(nèi)酯的總含量為32.5％，黃醉椒素B含量為0.2％。
實(shí)施例8以大孔樹脂AB-8處理制備含有降低的黃醉椒素B含量的咔哇提取物取1克咔哇的丙酮提取物，加入1ml乙醇溶解，再加入4ml水制成咔哇提取物懸液，加入柱體積為30毫升的AB-8大孔樹脂層析柱，先用50毫升的水洗脫，然后用150毫升體積比為80％的乙醇溶液洗脫，將乙醇洗脫液濃縮至干，HPLC法測(cè)定，提取物中的內(nèi)酯總含量為58.5％，黃醉椒素B含量0.05％。
權(quán)利要求
1.一種降低黃醉椒素B含量的咔哇提取物，其中按重量計(jì)黃醉椒素B含量≤1.0％。
2.權(quán)利要求1的咔哇提取物，其中按重量計(jì)咔哇內(nèi)酯含量≥10％，黃醉椒素B含量0-1.0％；較好的咔哇提取物中按重量計(jì)咔哇內(nèi)酯含量為11-90％，黃醉椒素B含量0-0.5％。
3.含咔哇提取物的組合物，其中含有權(quán)利要求1或2的咔哇提取物，還含有常規(guī)藥用、食用或保健品用的載體。
4.權(quán)利要求1-2咔哇提取物的制備方法，包括如下步驟取咔哇原料，用含水或不含水的低級(jí)醇、含水或不含水的低級(jí)酮、含水或不含水的含4-10個(gè)碳原子的酯類、含水或不含水的氯代低級(jí)烷烴或者這些溶劑的混合物提取，提取液除去溶劑，得粗咔哇提取物；用大孔樹脂、聚酰胺、硅膠、氧化鋁、殼聚糖常規(guī)處理粗咔哇提取物；或者，對(duì)堿性水液中的粗咔哇提取物，用沸點(diǎn)為30至100℃的脂族溶劑和/或脂環(huán)族溶劑萃取去除黃醉椒素B后；將水相調(diào)至酸性，用乙酸乙酯和/或氯代低級(jí)烷烴萃取水相，濃縮萃取液至干，得精制咔哇提取物；或者，將用沸點(diǎn)為30至100℃的脂族溶劑和/或脂環(huán)族溶劑提取了黃醉椒素B后的咔哇，再用含水或不含水的低級(jí)醇、含水或不含水的低級(jí)酮、含水或不含水的含4-10個(gè)碳原子的酯類、含水或不含水的氯代低級(jí)烷烴或者這些溶劑的混合物提取，濃縮提取液至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物；或者，將粗咔哇提取物加入適量水，用石油醚、環(huán)己烷和/或己烷萃取水相，將萃取后的水相濃縮至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物；或者，選擇上述方法組合使用。
5.權(quán)利要求4咔哇提取物的制備方法，其特征在于低級(jí)醇是甲醇、乙醇；低級(jí)酮是丙酮；4-10個(gè)碳原子的酯類是乙酸乙酯；脂族溶劑和/或脂環(huán)族溶劑是石油醚、環(huán)己烷、正己烷和/或汽油；氯代低級(jí)烷烴是二氯乙烷、三氯甲烷；大孔樹脂為非極性或弱極性大孔樹脂；氧化鋁為酸性或中性氧化鋁；殼聚糖為甲殼素脫乙?；蟮漠a(chǎn)物；大孔樹脂或聚酰胺層析柱的洗脫液選用含水乙醇、含水甲醇和/或含水丙酮；硅膠柱層析的洗脫液先選用石油醚、環(huán)己烷和/或乙酸乙酯，再用異丙醇、乙酸乙酯、氯代低級(jí)烷烴、甲醇或含水甲醇、乙醇或含水乙醇、丙酮或含水丙酮，或者它們的混合物洗脫；堿水液含無機(jī)堿和/或有機(jī)堿與水；酸水液含無機(jī)酸和/或有機(jī)酸與水。
6.權(quán)利要求5咔哇提取物的制備方法，其特征在于大孔樹脂選用HP20、AB-8、XAD-2、D-101、HP21、SP825、SP850、SP70、SP700、SP207、H107；無機(jī)堿為碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀和/或磷酸氫二鈉，有機(jī)堿為檸檬酸鹽、葡甲胺、泛酸鈉、L-半胱氨酸、苯甲酰胺、煙酰胺、硫脲、乙醇胺和/或脲；無機(jī)酸為硫酸和/或鹽酸；有機(jī)酸為檸檬酸、醋酸、草酸、馬來酸、琥珀酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸和/或抗壞血酸。
7.權(quán)利要求4咔哇提取物的制備方法，包括如下步驟將粗咔哇提取物上硅膠柱，先用石油醚或環(huán)己烷與乙酸乙酯的體積比為10-20∶1的混合溶劑洗脫硅膠柱，再用異丙醇、乙酸乙酯、氯代低級(jí)烷烴、甲醇或含水甲醇、乙醇或含水乙醇、丙酮或含水丙酮，或者它們的混合物洗脫，回收溶劑至干得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
8.權(quán)利要求4咔哇提取物的制備方法，包括如下步驟向粗咔哇提取物的水混懸液中，加入適量甲醇和/或乙醇，形成咔哇提取物溶液后，加入殼聚糖；或者向粗咔哇提取物的水混懸液中加入殼聚糖物溶液；混勻，放置后，離心或過濾去除沉淀物，將清液濃縮干燥，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
9.權(quán)利要求4咔哇提取物的制備方法，包括如下步驟向粗咔哇提取物水溶液或水混懸液中加入有機(jī)堿和/或無機(jī)堿，使水溶液或水混懸液呈堿性，混合后，用石油醚、環(huán)己烷和/或己烷萃取去除黃醉椒素B，獲得的水相加入無機(jī)酸和/或有機(jī)酸，使溶液成酸性，混勻后，用乙酸乙酯、氯仿和/或二氯甲烷萃取酸性溶液，回收萃取液至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
10.權(quán)利要求4咔哇提取物的制備方法，包括如下步驟將咔哇的含水或不含水乙醇、含水或不含水甲醇、含水或不含水丙酮的提取液，除去有機(jī)溶劑得到的溶液或混懸液，或者用少量與水能混溶的溶劑如甲醇、乙醇、丙酮等溶解粗咔哇提取物，然后加入適量水制成咔哇提取物的溶液或混懸液，上大孔樹脂柱，用含水或不含水的乙醇、含水或不含水的甲醇、含水或不含水的丙酮、氯代烷烴和/或甲醇的混和物、乙酸乙酯和/或石油醚的混合物洗脫，洗脫液濃縮至干，得降低黃醉椒素B含量的精制咔哇提取物。
全文摘要
降低有肝損傷作用的黃醉椒素B含量的咔哇提取物以及包含有該提取物的藥物、食品添加劑和保健食品；其制備方法中用大孔樹脂、聚酰胺、硅膠、氧化鋁、殼聚糖及其衍生物處理粗咔哇提取物；或者，在堿水液中，用低極性有機(jī)溶劑去除黃醉椒素B，再以酸調(diào)節(jié)水液至酸性后，用有機(jī)溶劑萃?。凰镁七峭厶崛∥镏械狞S醉椒素B含量≤1.0％。
文檔編號(hào)A61K36/185GK1557388SQ20041001389
公開日2004年12月29日 申請(qǐng)日期2004年1月13日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月13日
發(fā)明者余伯陽, 劉吉華, 邱聲祥, 李星 申請(qǐng)人:中國(guó)藥科大學(xué)