一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法，屬于植物降糖成分提取技術(shù)領(lǐng) 域。
【背景技術(shù)】
[0002] 科羅索酸又名2 a _羥基熊果酸，是一種五環(huán)三萜類酸，來源于大花紫薇的提取 物。Garcia (1940)用大花紫薇干葉喂養(yǎng)普通家兔，發(fā)現(xiàn)家兔的血糖下降，并與1956年又 采用大花紫薇葉提取物進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其具有降低糖尿病病人血糖的效果。Murakami (1993)等從大花紫薇的葉中分離出2種三萜酸(科羅索酸和山楂酸)，發(fā)現(xiàn)科羅索酸具有降 血糖的效果。Hamamoto (1999)等發(fā)現(xiàn)小鼠和兔子服用科羅索酸后有明顯的降血糖作用， 與使用胰島素的效果相同。Toshihiro Miura (2004)認(rèn)為科羅索酸可以通過肌肉中的葡萄 糖轉(zhuǎn)運(yùn)體（GLUT4)促使葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)至細(xì)胞內(nèi)，從而降低血糖，起到了胰島素類似物的作用， 所以被稱為"植物界的胰島素"。任新鳳（2011)指出科羅索酸能使H印G2細(xì)胞對(duì)葡萄糖利 用率明顯上升，驗(yàn)證了前人的觀點(diǎn)?？屏_索酸主要存在于大葉紫薇和枇杷葉中，其他植物中 也有過報(bào)道，但含量都不高。科羅索酸在植物體內(nèi)可游離存在，也可以皂甙的形式存在，并 常常與其同分異構(gòu)體山楂酸（2 a -羥基齊墩果酸）共同存在，結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)相似，分離較 難。2014年首次對(duì)沙棘中的五環(huán)三萜類酸物質(zhì)進(jìn)行了測(cè)定，由于該類物質(zhì)成分復(fù)雜，有些類 似物的成分不易分離，故含量以科羅索酸的量為標(biāo)準(zhǔn)，沙棘中為〇. 05%，含量較低，到目前為 止尚未見對(duì)其進(jìn)行濃縮的報(bào)道。
[0003] 沙棘為果、葉兩用植物，目前沙棘葉已被當(dāng)成茶葉進(jìn)行飲用，有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。 現(xiàn)有技術(shù)對(duì)植物科羅索酸的提取和濃縮有多種方法，但用于沙棘植物效果均不理想。按照 現(xiàn)有方法對(duì)沙棘葉進(jìn)行提純濃縮，得到的濃縮產(chǎn)物中，科羅索酸的含量達(dá)不到0. 3%。這種程 度的浸提物降糖效果很不理想。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，所要解決的技術(shù)問題是提供一種簡(jiǎn)單的從沙棘葉中 提取濃縮降糖成分的方法。
[0005] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案按照如下方法： 1、經(jīng)殺青和干燥(溫度不宜過高，以不高于60°C為宜，盡量保存活性物質(zhì)的有效性）后 的沙棘葉粉碎成20目-60目的粗粉，放入10-20倍的自來水煮沸即可，冷卻到室溫，備用。
[0006] 2、保溫浸泡 可以選用三種方法中的任一種，其他條件相同的情況下，三種方法得到的浸膏科羅索 酸的含量依次提尚； 方法一：加入1%-5%的釀酒大曲他可以加入啤酒酵母粉)，26°C _36°C，保溫3-5天，使 多糖類物質(zhì)，蛋白質(zhì)和脂類等生物大分子物質(zhì)分解，增加水浸出物的含量。如果溫度低于 26°C (室溫必須要高于18°C )，可增加保溫時(shí)間2-3天；如果室溫高于36°C，3天即可； 方法二：加入混合酶制劑(纖維素酶：淀粉酶：果膠酶=I :1 :1) 0. 5%，28°C -38°c保溫 12-24h，使植物組織通透性增大，增加科羅索酸從細(xì)胞中的溶出率； 方法三：加入0. 5%-1%的食用醋室溫放置24h。
[0007] 3、干燥：將浸泡后的沙棘葉過濾，棄濾液，干燥(溫度最高60°C)，得沙棘葉粉備 用。
[0008] 4、提取 方法一：用重量比大于沙棘葉粉5倍以上(加入乙醇的量越大提取率越高)85%_100%的 乙醇，在80°C -90°C提取，回流2次，過濾，減壓回收乙醇得浸膏； 方法二：用1%的NaOH將甲醇配制成80%-90%的甲醇提取液（NaOH濃度越高科羅索酸的 溶解度就越高)，用重量比大于沙棘葉粉5倍以上的甲醇提取液室溫提取，回流2次，過濾， 減壓回收甲醇得浸膏。
[0009] 與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明具有以下有益效果：按照本申請(qǐng)的方法對(duì)沙棘葉中科羅索 酸進(jìn)行濃縮，能夠使其含量達(dá)到1%以上，通過大鼠試驗(yàn)有較強(qiáng)的降糖效果，且降糖效果優(yōu) 于科羅索酸純品，不僅為沙棘葉的開發(fā)起到較大的推動(dòng)作用，也為糖尿病的治療找到了一 種新的治療藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0010] 以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0011] 實(shí)施例1 一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法，按照以下步驟： 一、 前處理 將沙棘葉經(jīng)殺青、干燥后，粉碎成粗粉，加入粗粉質(zhì)量15倍的水煮沸，冷卻至室溫，得 到沙棘葉預(yù)煮液； 二、 保溫浸泡 按預(yù)煮液的質(zhì)量加入3wt%大曲，混勻，在26-30°C條件下保溫3天； 三、 干燥 將保溫浸泡后的預(yù)煮液過濾，濾渣干燥得到沙棘葉粉，備用； 四、 提取 按質(zhì)量比乙醇提取液：沙棘葉粉=5 :1取用提取液對(duì)沙棘葉粉進(jìn)行回流提取，溫度 80-90°C，回流2次；回流提取后減壓回收提取液，得到膏狀沙棘葉提取物； 所述乙醇提取液的體積濃度為95%。
[0012] 實(shí)施例2 一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法，按照以下步驟： 一、 前處理 將沙棘葉經(jīng)殺青、干燥后，粉碎成粗粉，加入粗粉質(zhì)量10倍的水煮沸，冷卻至室溫，得 到沙棘葉預(yù)煮液； 二、 保溫浸泡 按預(yù)煮液的質(zhì)量加入2wt%大曲，混勻，在30-35°C條件下保溫5天； 三、 干燥 將保溫浸泡后的預(yù)煮液過濾，濾渣干燥得到沙棘葉粉，備用； 四、提取 按質(zhì)量比乙醇提取液：沙棘葉粉=5 :1取用提取液對(duì)沙棘葉粉進(jìn)行回流提取，溫度 80-90°C，回流3次；回流提取后減壓回收提取液，得到膏狀沙棘葉提取物； 所述乙醇提取液的體積濃度為90%。
[0013] 實(shí)施例3 一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法，按照以下步驟： 一、 前處理 將沙棘葉經(jīng)殺青、干燥后，粉碎成粗粉，加入粗粉質(zhì)量20倍的水煮沸，冷卻至室溫，得 到沙棘葉預(yù)煮液； 二、 保溫浸泡 按預(yù)煮液的質(zhì)量加入5wt%大曲，混勻，在32-36°C條件下保溫5天； 三、干燥 將保溫浸泡后的預(yù)煮液過濾，濾渣干燥得到沙棘葉粉，備用； 四、 提取 按質(zhì)量比甲醇提取液：沙棘葉粉=5 :1取用甲醇提取液對(duì)沙棘葉粉進(jìn)行回流提取，回流 2次；回流提取后減壓回收甲醇，得到膏狀沙棘葉提取物； 所述甲醇提取液為用質(zhì)量濃度1%的NaOH溶液和甲醇配成的體積濃度85%的甲醇溶 液。
[0014] 實(shí)施例4 一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法，按照以下步驟： 一、 前處理 將沙棘葉經(jīng)殺青、干燥后，粉碎成粗粉，加入粗粉質(zhì)量15倍的水煮沸，冷卻至室溫，得 到沙棘葉預(yù)煮液； 二、 保溫浸泡 按預(yù)煮液的質(zhì)量加入lwt%大曲，混勻，在32-36°C條件下保溫5天； 三、干燥 將保溫浸泡后的預(yù)煮液過濾，濾渣干燥得到沙棘葉粉，備用； 四、 提取 按質(zhì)量比甲醇提取液：沙棘葉粉=5 :1取用甲醇提取液對(duì)沙棘葉粉進(jìn)行回流提取，回流 2次；回流提取后減壓回收甲醇，得到膏狀沙棘葉提取物； 所述甲醇提取液為用質(zhì)量濃度1%的NaOH溶液和甲醇配成的體積濃度80%的甲醇溶 液。
[0015] 實(shí)施例5 一種從沙棘葉中提取降糖成分的簡(jiǎn)便方法，按照以下步驟： 一、 前處理 將沙棘葉經(jīng)殺青、干燥后，粉碎成粗粉，加入粗粉質(zhì)量