一種馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊及制備和在增強免疫力中應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物技術(shù)制備軟膠囊的技術(shù)領(lǐng)域。具體的說，本發(fā)明涉及一種馬齒莧 籽油復(fù)合軟膠囊及制備和在增強免疫力中應(yīng)用的技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 馬齒莧（/brte/aca o/eracea Z.)又名長壽菜、安樂草，屬馬齒莧科一年生肉質(zhì)草 本植物。馬齒莧是國家衛(wèi)生部認(rèn)定的藥食同源的野生植物之一。馬齒莧及其籽中含有豐富 的多不飽和脂肪酸。目前關(guān)于馬齒莧黃酮、生物堿、多糖等的研宄較多，但是對馬齒莧籽油 的研宄鮮見報道，使得絕大多數(shù)馬齒莧籽尚未開發(fā)利用，造成資源浪費。馬齒莧籽油是一種 天然的保健植物油，富含亞麻酸和亞油酸，馬齒莧全草醇提物中含有黃酮類、生物堿等活性 成分，目前未見將馬齒莧籽油和馬齒莧全草醇提物配伍開發(fā)相應(yīng)的具有增強免疫力中應(yīng)用 的產(chǎn)品和技術(shù)報道。
[0003] 隨著軟膠囊技術(shù)的不斷發(fā)展，出現(xiàn)了復(fù)合軟膠囊的研宄，即將兩種或幾種有效成 分用囊殼進(jìn)行包裹配伍，以期達(dá)到增效效果，活性成分之間的配伍具有協(xié)同效應(yīng)，二者或者 多者配伍后可以顯著增加產(chǎn)品某一方面或幾方面的功效，可達(dá)到增效而又能降低成本的多 方面目標(biāo)，當(dāng)前國內(nèi)外未見將馬齒莧籽油與馬齒莧全草醇提物進(jìn)行配伍制備馬齒莧籽油復(fù) 合軟膠囊及相關(guān)應(yīng)用報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對現(xiàn)有技術(shù)中未見有關(guān)將馬齒莧籽油與馬齒莧全草醇提物進(jìn)行配伍制備馬齒 莧籽油復(fù)合軟膠囊及相關(guān)應(yīng)用報道的技術(shù)現(xiàn)狀，本發(fā)明旨在提供一種馬齒莧籽油復(fù)合軟膠 囊及制備和在增強免疫力中應(yīng)用，首次將馬齒莧籽油與馬齒莧全草醇提物進(jìn)行配伍制備馬 齒莧籽油復(fù)合軟膠囊和配伍前后樣品的體內(nèi)外抗氧化活性和抑菌活性，對馬齒莧籽油和馬 齒莧全草醇提物的配伍效果進(jìn)行了試驗評價，以期達(dá)到既不失其生物效價，使其功效增強， 亦具有降低產(chǎn)品成本等多方面的經(jīng)濟效益和目的，并獲得馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊在增強免 疫力中應(yīng)用具有良好的顯著的技術(shù)效果。
[0005] 本發(fā)明提供的技術(shù)方案： 本發(fā)明提供了一種馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊及制備和在增強免疫力中應(yīng)用技術(shù)方案，通 過研宄了馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物最佳配方和配伍前后樣品的體內(nèi)外抗氧化活性、抑 菌活性及增強免疫力活性，對馬齒莧籽油和馬齒莧全草醇提物的配伍效果進(jìn)行評價；采用 綜合評分法，通過單因素和正交試驗，確定馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物最佳配方；采用體 外抗氧化實驗并結(jié)合體內(nèi)抗氧化實驗，抑菌試驗及增強免疫力實驗，考察了配伍前后樣品 的生物活性。確定馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物組分配方為：馬齒莧全草醇提物和馬齒莧 籽油混合物的添加量為90%-93%，蜂蠟添加量為4. 5%-6. 5%，大豆卵磷脂添加量為2%-4%，其 中，馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油混合物中馬齒莧全草醇提物與馬齒莧籽油按照重量份 比為1 :2。本發(fā)明制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物清除? OH自由基、DPPH ?自由基的 能力和總抗氧化能力均強于馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油，可顯著增加血清及肝臟中的 SOD、T-AOC活性，降低MDA含量，效果強于馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油；在同一藥物濃 度下，馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的抑制作用均強于 馬齒莧籽油和馬齒莧全草醇提物，以上均說明配伍產(chǎn)生了增效作用，使制品的生物活性更 好。通過免疫力實驗結(jié)果表明，本發(fā)明制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊對小鼠非特異性和特 異性免疫功能均具有增強作用，表明制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊在增強免疫力中應(yīng)用具 有良好的作用，顯示出現(xiàn)實的應(yīng)用價值。
[0006] 本發(fā)明具體提供一種馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊，具體通過如下工藝制備獲得，％按照 重量百分比計，具體制備方法步驟如下： (1)馬齒莧籽油通過超臨界CO2提取或者常見提取方法制備獲得。
[0007] (2)馬齒莧全草醇提物制備：將馬齒莧全草經(jīng)粉碎過40目至80目篩，用10倍量 60%-80%的乙醇進(jìn)行回流提取2-3次，每次lh，合并幾次的提取液，低溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮， 至乙醇味消失，冷凍干燥，制備獲得馬齒莧全草醇提物。
[0008] (3)混懸液制備：將步驟（1)制備的馬齒莧籽油與蜂蠟按照重量份比為1 :2配比 混勻，加熱至約65±5°C以使蜂蠟完全熔融，然后攪拌冷卻至35°C以下，加入大豆卵磷脂， 攪拌均勻，最后加入上述步驟（2)制備的馬齒莧全草醇提物，攪拌均勻。
[0009] (4)壁材膠液制備：壁材膠液中明膠、甘油和水按照重量比1:0. 4:1配比，準(zhǔn)確 量取水和甘油，混合均勻，升溫至70-80°C時，加入明膠，在減壓真空的狀態(tài)下保溫并攪拌 30-40min，進(jìn)行減壓脫氣，直至膠液透明且無氣泡，然后用80目尼龍網(wǎng)過濾，將膠液置于保 溫桶內(nèi)60°C左右保溫，待用。
[0010] (5)將上述步驟（3)、（4)制備的物料填入軟膠囊壓制設(shè)備，壓制軟膠囊，然后進(jìn)行 定型、干燥、拾丸、包裝制備獲得馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊成品。
[0011] 本發(fā)明中，采用的馬齒莧籽油通過超臨界提取工藝優(yōu)先采用超臨界〇)2法提取馬 齒莧籽油，最佳工藝條件為：萃取壓力35MPa，萃取溫度45°C，CO 2流量6L/min，一次性投料 量50g，萃取時間2h，分離溫度為120°C，在此最優(yōu)條件下馬齒莧籽油提取率可達(dá)17. 88%。
[0012] 本發(fā)明中，采用的馬齒莧全草醇提物制備工藝優(yōu)先采用，將馬齒莧全草經(jīng)粉碎過 60目篩，用10倍量80%乙醇進(jìn)行回流提取2次，每次lh，合并2次的提取液，低溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 進(jìn)行濃縮，至乙醇味消失，冷凍干燥，得到馬齒莧全草醇提物。
[0013] 同時，本發(fā)明提供一種馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物，％按照重量百分比計，所 述的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物組分含有：馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油混合物為 90%-93%，蜂蠟為4. 5%-6. 5%，大豆卵磷脂為2%-4%，其中，馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油 混合物中馬齒莧全草醇提物與馬齒莧籽油按照重量份比1 :2配比。
[0014] 進(jìn)一步，本發(fā)明提供一種馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物，％按照重量百分比計，所 述的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物組分最佳含有：馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油混合物 為91%，蜂蠟為6%，大豆卵磷脂為3%，其中，馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油混合物中馬齒 莧全草醇提物與馬齒莧籽油按照重量份比1 :2配比。
[0015] 本發(fā)明提供利用上述制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊在增強免疫力中應(yīng)用。
[0016] 通過實施本發(fā)明具體的
【發(fā)明內(nèi)容】
可以達(dá)到以下有益效果： (1)本發(fā)明制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物配伍為：馬齒莧全草醇提物和馬齒莧 籽油混合物為90%-93%，蜂蠟為4. 5%-6. 5%，大豆卵磷脂為2%-4%，其中，馬齒莧全草醇提物 和馬齒莧籽油混合物中馬齒莧全草醇提物與馬齒莧籽油按照重量份比1 :2配比。其中馬 齒莧全草醇提物與馬齒莧籽油的配比對內(nèi)容物穩(wěn)定性的影響顯著，在最優(yōu)配伍下，馬齒莧 籽油復(fù)合軟膠囊混懸液的沉降比為〇. 98±0. 02,流動性較好，清除^OH自由基的IC50值為 1. 05 + 0. 21 mg/mL〇
[0017] (2)本發(fā)明制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊質(zhì)量指標(biāo)的測定結(jié)果表明，馬齒莧籽油 復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物中總黃酮含量為3. 34mg/g ;馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物中總生物堿 含量為16. 52mg/g。馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊中含有亞麻酸、亞油酸、棕櫚酸、硬脂酸等脂肪 酸，不飽和脂肪酸占脂肪酸總量的86. 12%左右，其中亞麻酸含量高達(dá)49. 53%，其次為亞油 酸35. 41%，與馬齒莧籽油脂肪酸組成基本一致，具有很高的營養(yǎng)價值。馬齒莧籽油復(fù)合軟膠 囊的裝量差異、崩解時間和微生物限度均在《中國藥典》（2010年版)規(guī)定的限度和范圍內(nèi)。
[0018] (3)通過系列試驗表明，本發(fā)明制備的馬齒莧籽油復(fù)合軟膠囊內(nèi)容物清除? OH自 由基、DPPH ?自由基的能力和總抗氧化能力均強于馬齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油；馬齒 莧籽油復(fù)合軟膠囊可顯著增加血清及肝臟中的S0D、T-A0C活性，降低MDA含量，效果強于馬 齒莧全草醇提物和馬齒莧籽油