專利名稱：高濃度胸腺肽溶液的制備方法及大規(guī)格胸腺肽制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及胸腺肽的制備方法，更具體地說，涉及高濃度胸腺肽溶液的制備方法。
本發(fā)明還涉及通過本發(fā)明方法制備的大規(guī)格胸腺肽制劑。
背景技術(shù)：
胸腺肽為免疫調(diào)節(jié)藥。具有調(diào)節(jié)和增強人體細胞免疫功能的作用，能促使T-淋巴細胞成熟。主要用于治療各種原發(fā)性或繼發(fā)性T細胞缺陷病，某些自身免疫性疾病，各種細胞免疫功能低下的疾病及腫瘤的輔助治療.包括1.各型重癥肝炎、慢性活動性肝炎、慢性遷延性肝炎及肝硬化等；2.帶狀皰疹、生殖器皰疹、尖銳濕疣等；3.支氣管炎、支氣管哮喘、肺結(jié)核預(yù)防上呼吸道感染等；4.各種惡性腫瘤前期及化療，放療合用并用；5.紅斑狼瘡、風濕性及類風濕性疾病、強直性脊柱炎、格林巴利綜合癥等；6.再生障礙性貧血、白血病、血小板減少癥等；7.病毒性角膜炎、病毒性結(jié)膜炎、過敏性鼻炎等；8.老年性早衰、婦女更年期綜合癥等；9.多發(fā)性癤腫及面部皮膚痤瘡等，銀屑病、扁平苔蘚、鱗狀細胞癌及上皮角化癥等；10.兒童先天性免疫缺陷癥等。使用方法為，皮下或肌肉注射1次10～20mg，一日1次。靜脈滴注一次20～200mg，溶于500ml 0.9％氯化鈉注射液或5％葡萄糖注射液，一日1次。
胸腺肽制劑由于療效確切，副作用小，使用劑量有增高趨勢。目前臨床上用于治療惡性腫瘤、重癥肝炎、艾滋病等疾病的劑量可達到200mg，在非典型肺炎的救治方案中，胸腺肽的使用劑量達到過300mg，一日1次，因而大劑量使用胸腺肽制劑已得到臨床驗證。另一方面，因一般提取工藝得到的胸腺肽溶液含量較低(小于10mg/ml)，只能制備5mg、10mg和20mg的低規(guī)格制劑，難以在小容量下制備50mg和100mg的大規(guī)格制劑；而低規(guī)格的制劑對于大劑量使用來說有很多缺點，例如一次使用多支，要一支支地打開、溶解，不僅操作費時，而且容易造成污染；另一方面，藥品包裝材料的增加不僅造成資源的浪費，而且給環(huán)保帶來負擔。
提高胸腺肽溶液含量的最有效方法是濃縮。常用的濃縮方法有減壓蒸餾法、噴霧干燥法、反滲透法、冷凍干燥法和冷凍濃縮法等。經(jīng)研究和對比，減壓蒸餾法和噴霧干燥法需經(jīng)高溫過程，易造成胸腺肽生物活性的損失；反滲透法要經(jīng)高壓過程，也會影響胸腺肽的生物活性；冷凍干燥法難以滿足大規(guī)模生產(chǎn)；唯獨冷凍濃縮法可避免上述不利條件，適合于對低含量胸腺肽溶液進行濃縮。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種高濃度胸腺肽溶液的制備方法，該方法不僅可制得胸腺肽含量大于50mg/ml的胸腺肽溶液，而且可使產(chǎn)品生物活性成分不受破壞，在低溫狀態(tài)下微生物不易繁殖，保證了產(chǎn)品的衛(wèi)生學要求。
本發(fā)明的另一個目的在于提供一種大規(guī)格的胸腺肽制劑，包括溶液形式的制劑和凍干制劑，其中溶液中胸腺肽含量可達到50mg/ml以上，凍干制劑中單位制劑的胸腺肽含量為50～100mg。
本發(fā)明公開一種高濃度胸腺肽溶液的制備方法，包括以下步驟(1)胸腺肽溶液的提取取新鮮或速凍保存的胸腺，除去雜質(zhì)并洗凈；將處理好的胸腺加水制備成勻漿液；將勻漿液反復(fù)凍融；加熱凍融液除去不穩(wěn)定的雜蛋白，再經(jīng)離心、過濾取上清液；上清液經(jīng)超濾截留分子量10000道爾頓以下的組分得到低濃度的胸腺肽溶液；(2)低濃度胸腺肽溶液的濃縮將步驟(1)中得到的低濃度胸腺肽溶液采用物理濃縮技術(shù)制備得到高濃度胸腺肽溶液。
所述的胸腺包括小牛胸腺或豬胸腺。
步驟(1)中得到的低濃度胸腺肽溶液中胸腺肽的含量為5～10mg/ml，步驟(2)中得到的高濃度胸腺肽溶液中胸腺肽的含量為50～60mg/ml。
步驟(1)中將勻漿液反復(fù)凍融，是將勻漿液在-25～-35℃溫度下迅速冷凍至深層，然后在20～30℃的水浴中融化，并反復(fù)數(shù)次。
步驟(2)中采用的物理濃縮技術(shù)包括漸進冷凍濃縮法和懸浮結(jié)晶冷凍濃縮法，本發(fā)明中優(yōu)選采用懸浮結(jié)晶冷凍濃縮法。
所述的懸浮結(jié)晶冷凍濃縮法在-5～5℃的溫度和常壓下進行，其原理如圖1所示。圖1中，橫坐標表示溶液的濃度，縱坐標表示溶液的溫度。曲線DABE是溶液的冰點線，D為純水的冰點，E為低共熔點。從冰點曲線可見，在一定濃度范圍內(nèi)的溶液冰點隨著濃度的增加而下降。某一起始濃度為X1的稀溶液，從溫度A1點進行降溫，當溫度降至冰點線A點時，如果溶液中無“冰種”，則溶液并不會結(jié)冰。但是當溫度繼續(xù)下降至C點成為過冷溶液時，過冷溶液極不穩(wěn)定，一旦受到外界干擾(如震動)，溶液中就會產(chǎn)生冰晶，并成長變大成冰粒。此時，隨著冰晶和冰粒的產(chǎn)生，溶液的濃度增高為X2，把溶液中的冰粒過濾出來，即可達到濃縮目的。冷凍濃縮的溶液必須較稀，其濃度須小于低共熔點濃度。
本發(fā)明還公開一種由權(quán)利要求1所述制備方法制得的高濃度胸腺肽溶液，其特征在于，其中胸腺肽的含量為50～60mg/ml。
本發(fā)明還公開一種由本發(fā)明所述制備方法制得的或本發(fā)明所述的高濃度胸腺肽溶液為原料藥制得的大規(guī)格制劑，其包含治療有效量的所述高濃度胸腺肽溶液和藥學上可接受的載體和/或溶劑。
將本發(fā)明制得的高濃度胸腺肽溶液加上藥學上可接受的賦形劑可制成大規(guī)格的胸腺肽凍干粉針劑，其單位制劑中的胸腺肽達到50～100mg，這里的單位制劑一般指一個制劑包裝，例如一個抗生素瓶。凍干制劑可供肌肉注射、靜脈注射及靜脈滴注的注射用制劑。
使用的賦形劑包括甘露醇或右旋糖酐，其用量為3％～10％重量。
本發(fā)明的方法簡便，可濃縮低含量的胸腺肽溶液，制得含量大于50mg/ml的大規(guī)格胸腺肽制劑。由于該方法在低溫下操作，充分保持了產(chǎn)品的生物活性，而且可抑制微生物繁殖，制備得到的胸腺肽溶液和制劑符合國家藥品標準的要求，滿足了臨床的需要。
圖1為懸浮結(jié)晶冷凍濃縮法的原理圖；圖2為胸腺肽溶液制備工藝流程圖；圖3為懸浮結(jié)晶冷凍濃縮設(shè)備示意圖；圖4為注射用胸腺肽制劑工藝流程圖；圖5為胸腺肽溶液組分高效液相色譜圖。
具體實施例方式
實施例1～3為小牛胸腺肽溶液的制備方法，圖2為胸腺肽溶液制備工藝流程圖。
實施例1取速凍保存的小牛胸腺100Kg置專用水槽內(nèi)融化，摘除脂肪和外膜，得凈重85Kg。摘好的胸腺先用飲用水清洗3次，再用注射用水清洗3次。用絞肉機絞碎后，加入冷注射用水85L，用膠體磨勻漿2min。勻漿液置-30℃冷凍48小時，取出后20℃水浴融化，迅速加熱至90℃保持3分鐘，速冷至室溫。3000rpm離心20分鐘，取上清液過濾，濾液再用截留分子量10000道爾頓的超濾器超濾，無菌收集透過液，即為胸腺肽溶液。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為5.9mg/ml，胸腺肽α1占1.6％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例2取速凍保存的小牛胸腺100Kg置專用水槽內(nèi)融化，摘除脂肪和外膜，得凈重80Kg。摘好的胸腺先用飲用水清洗3次，再用注射用水清洗3次。用絞肉機絞碎后，加入冷注射用水60L，用膠體磨勻漿2min。勻漿液置-30℃冷凍24小時，次日取出25℃水浴融化，反復(fù)3次，第三次融化后迅速加熱至80℃保持10分鐘，再速冷至室溫。3000rpm離心20分鐘，取上清液過濾，濾液再用截留分子量10000道爾頓的超濾器超濾，無菌收集透過液，即為胸腺肽溶液。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為7.7mg/ml，胸腺肽α1占2.1％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例3取速凍保存的小牛胸腺100Kg置專用水槽內(nèi)融化，摘除脂肪和外膜，得凈重83Kg。摘好的胸腺先用飲用水清洗3次，再用注射用水清洗3次。用絞肉機絞碎后，加入冷注射用水40L，用膠體磨勻漿2min。勻漿液置-30℃冷凍24小時，次日取出30℃水浴融化，反復(fù)5次，第五次融化后迅速加熱至85℃保持5分鐘，再速冷至室溫。3000rpm離心20分鐘，取上清液過濾，濾液再用截留分子量10000道爾頓的超濾器超濾，無菌收集透過液，即為胸腺肽溶液。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為9.6mg/ml，胸腺肽α1占2.6％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例4～6為小豬胸腺肽溶液的制備方法。
實施例4取速凍保存的小豬胸腺100Kg置專用水槽內(nèi)融化，摘除脂肪和外膜，得凈重88Kg。摘好的胸腺先用飲用水清洗3次，再用注射用水清洗3次。用絞肉機絞碎后，加入冷注射用水88L，用膠體磨勻漿2min。勻漿液置-30℃冷凍48小時，取出后20℃水浴融化，迅速加熱至80℃保持10分鐘，速冷至室溫。3000rpm離心20分鐘，取上清液過濾，濾液再用截留分子量10000道爾頓的超濾器超濾，無菌收集透過液，即為胸腺肽溶液。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為6.1mg/ml，胸腺肽α1占1.6％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例5取速凍保存的小豬胸腺100Kg置專用水槽內(nèi)融化，摘除脂肪和外膜，得凈重85Kg。摘好的胸腺先用飲用水清洗3次，再用注射用水清洗3次。用絞肉機絞碎后，加入冷注射用水60L，用膠體磨勻漿2min。勻漿液置-30℃冷凍24小時，次日取出25℃水浴融化，反復(fù)3次，第三次融化后迅速加熱至85℃保持5分鐘，再速冷至室溫。3000rpm離心20分鐘，取上清液過濾，濾液再用截留分子量10000道爾頓的超濾器超濾，無菌收集透過液，即為胸腺肽溶液。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為7.9mg/ml，胸腺肽α1占2.2％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例6取速凍保存的小豬胸腺100Kg置專用水槽內(nèi)融化，摘除脂肪和外膜，得凈重90Kg。摘好的胸腺先用飲用水清洗3次，再用注射用水清洗3次。用絞肉機絞碎后，加入冷注射用水45L，用膠體磨勻漿2min。勻漿液置-30℃冷凍24小時，次日取出25℃水浴融化，反復(fù)5次，第五次融化后迅速加熱至90℃保持3分鐘，再速冷至室溫。3000rpm離心20分鐘，取上清液過濾，濾液再用截留分子量10000道爾頓的超濾器超濾，無菌收集透過液，即為胸腺肽溶液。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為9.8mg/ml，胸腺肽α1占2.7％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例7～12為高濃度胸腺肽溶液的制備方法。
實施例7圖3為懸浮結(jié)晶冷凍濃縮設(shè)備示意圖。
取實施例1得到的小牛胸腺肽溶液100L，以0.5L/min流速通過刮板式熱交換器，胸腺肽溶液被降溫至-1℃～1℃，使其生成部分微細的冰晶，送入再結(jié)晶罐。由于奧斯特瓦爾德效應(yīng)，小冰晶融化，大冰晶成長，此步驟約需2小時。含有冰晶的胸腺肽溶液通過洗凈塔除去冰晶，同時用部分冰融解液沖洗冰晶以便回收冰晶表面附著的濃縮液，沖洗液回流至進料端再進行濃縮。收集濃縮液于潔凈容器，得到高濃度胸腺肽溶液10.5L。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為51.3mg/ml，胸腺肽α1占1.6％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例8取實施例2得到的小牛胸腺肽溶液100L，以0.5L/min流速通過刮板式熱交換器，胸腺肽溶液被降溫至-2℃～2℃，使其生成部分微細的冰晶送入再結(jié)晶罐。由于奧斯特瓦爾德效應(yīng)，小冰晶融化，大冰晶成長，此步驟約需3小時。含有冰晶的胸腺肽溶液通過洗凈塔除去冰晶，同時用部分冰融解液沖洗冰晶以便回收冰晶表面附著的濃縮液，沖洗液回流至進料端再進行濃縮。收集濃縮液于潔凈容器，得到高濃度胸腺肽溶液12.8L。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為52.7mg/ml，胸腺肽α1占2.1％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例9取實施例3得到的小牛胸腺肽溶液100L，以0.5L/min流速通過刮板式熱交換器，胸腺肽溶液被降溫至-4℃～4℃，使其生成部分微細的冰晶送入再結(jié)晶罐。由于奧斯特瓦爾德效應(yīng)，小冰晶融化，大冰晶成長，此步驟約需4小時。含有冰晶的胸腺肽溶液通過洗凈塔除去冰晶，同時用部分冰融解液沖洗冰晶以便回收冰晶表面附著的濃縮液，沖洗液回流至進料端再進行濃縮。收集濃縮液于潔凈容器，得到高濃度胸腺肽溶液16.1L。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為53.0mg/ml，胸腺肽α1占2.6％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例10取實施例4得到的小豬胸腺肽溶液100L，以0.5L/min流速通過刮板式熱交換器，胸腺肽溶液被降溫至-1℃～1℃，使其生成部分微細的冰晶送入再結(jié)晶罐。由于奧斯特瓦爾德效應(yīng)，小冰晶融化，大冰晶成長，此步驟約需3小時。含有冰晶的胸腺肽溶液通過洗凈塔除去冰晶，同時用部分冰融解液沖洗冰晶以便回收冰晶表面附著的濃縮液，沖洗液回流至進料端再進行濃縮。收集濃縮液于潔凈容器，得到高濃度胸腺肽溶液10.2L。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為54.5mg/ml，胸腺肽α1占1.7％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例11取實施例5得到的小豬胸腺肽溶液100L，以0.5L/min流速通過刮板式熱交換器，胸腺肽溶液被降溫至-2℃～2℃，使其生成部分微細的冰晶送入再結(jié)晶罐。由于奧斯特瓦爾德效應(yīng)，小冰晶融化，大冰晶成長，此步驟約需4小時。含有冰晶的胸腺肽溶液通過洗凈塔除去冰晶，同時用部分冰融解液沖洗冰晶以便回收冰晶表面附著的濃縮液，沖洗液回流至進料端再進行濃縮。收集濃縮液于潔凈容器，得到高濃度胸腺肽溶液13.2L。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為55.6mg/ml，胸腺肽α1占2.2％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例12取實施例6得到的小牛胸腺肽溶液100L，以0.5L/min流速通過刮板式熱交換器，胸腺肽溶液被降溫至-4℃～4℃，使其生成部分微細的冰晶送入再結(jié)晶罐。由于奧斯特瓦爾德效應(yīng)，小冰晶融化，大冰晶成長，此步驟約需4小時。含有冰晶的胸腺肽溶液通過洗凈塔除去冰晶，同時用部分冰融解液沖洗冰晶以便回收冰晶表面附著的濃縮液，沖洗液回流至進料端再進行濃縮。收集濃縮液于潔凈容器，得到高濃度胸腺肽溶液15.7L。
按胸腺肽溶液國家藥品標準WS1-XG-042-2000-2003檢測，含量為57.3mg/ml，胸腺肽α1占2.6％(標準要求不得低于1.0％)，分子量大于10000道爾頓的高分子量物質(zhì)未檢出(標準規(guī)定不得過5.0％)，性狀、鑒別、pH和蛋白質(zhì)檢查、活性均符合規(guī)定。
實施例13～24為高含量注射用胸腺肽制劑的制備方法，圖4為注射用胸腺肽制劑工藝流程圖。
實施例13～15以高濃度小牛胸腺肽溶液為原料藥制備規(guī)格為50mg的注射用胸腺肽制劑首先，分別取實施例7～9得到的高濃度小牛胸腺肽溶液12～15L，用10000道爾頓的超濾器進行除熱原處理，收集超濾液于無菌無熱原容器，經(jīng)中間體測定，含量為52.0mg/ml；然后，在局部百級潔凈區(qū)內(nèi)，按工藝處方準確量取上述中間體9.7L于配液容器，加無菌無熱原的右旋糖酐溶液作為賦形劑，再加注射用水至20.0L，充分混勻，除菌過濾，將濾液分裝入5ml管制抗生素瓶中，每支裝量2.0ml，碼入冷凍干燥機內(nèi)隔板上；接著，進行凍干，凍干品再經(jīng)軋蓋得成品；最后，再經(jīng)檢漏、燈檢及成品檢驗合格后，進行包裝，入成品庫存放。
實施例16～18以高濃度小豬胸腺肽溶液為原料藥制備規(guī)格為50mg的注射用胸腺肽制劑首先，取實施例10～12得到的高濃度小豬胸腺肽溶液11～14L，用10000道爾頓的超濾器進行除熱原處理，收集超濾液于無菌無熱原容器，經(jīng)中間體測定，含量為55.2mg/ml；然后，在局部百級潔凈區(qū)內(nèi)，按工藝處方準確量取上述中間體9.1L于配液容器，加無菌無熱原的右旋糖酐溶液作為賦形劑，再加注射用水至20.0L，充分混勻，除菌過濾，將濾液分裝入5ml管制抗生素瓶中，每支裝量2.0ml，碼入冷凍干燥機內(nèi)隔板上；接著，進行凍干，凍干品再經(jīng)軋蓋得成品；最后，再經(jīng)檢漏、燈檢及成品檢驗合格后，進行包裝，入成品庫存放。
實施例19～21以高濃度小牛胸腺肽溶液為原料藥制備規(guī)格為100mg的注射用胸腺肽制劑首先，取實施例7～9得到的高濃度小牛胸腺肽溶液22～25L，用10000道爾頓的超濾器進行除熱原處理，收集超濾液于無菌無熱原容器，經(jīng)中間體測定，含量為52mg/ml；然后，在局部百級潔凈區(qū)內(nèi)，按工藝處方準確量取上述中間體19.3L于配液容器，加無菌無熱原的甘露醇溶液作為賦形劑，再加注射用水至25.0L，充分混勻，除菌過濾，將濾液分裝入5ml管制抗生素瓶中，每支裝量2.5ml，碼入冷凍干燥機內(nèi)隔板上；接著，進行凍干，凍干品再經(jīng)軋蓋得成品；最后，再經(jīng)檢漏、燈檢及成品檢驗合格后，進行包裝，入成品庫存放。
實施例22～24以高濃度小豬胸腺肽溶液為原料藥制備規(guī)格為100mg的注射用胸腺肽制劑首先，取實施例10～12得到的高濃度小豬胸腺肽溶液21～24L，用10000道爾頓的超濾器進行除熱原處理，收集超濾液于無菌無熱原容器，經(jīng)中間體測定，含量為55.2mg/ml；然后，在局部百級潔凈區(qū)內(nèi)，按工藝處方準確量取上述中間體18.2L于配液容器，加無菌無熱原的甘露醇溶液作為賦形劑，再加注射用水至25.0L，充分混勻，除菌過濾，將濾液分裝入5ml管制抗生素瓶中，每支裝量2.5ml，碼入冷凍干燥機內(nèi)隔板上；接著，進行凍干，凍干品再經(jīng)軋蓋得成品；最后，再經(jīng)檢漏、燈檢及成品檢驗合格后，進行包裝，入成品庫存放。
權(quán)利要求
1.一種高濃度胸腺肽溶液的制備方法，其特征在于，包括以下步驟1)從胸腺材料中制備分子量10000道爾頓以下的、胸腺肽含量為5～10mg/ml的低濃度胸腺肽溶液；2)低濃度胸腺肽溶液的濃縮將步驟1)中得到的低濃度胸腺肽溶液采用物理濃縮技術(shù)制備得到胸腺肽含量為50～60mg/ml的高濃度胸腺肽溶液。
2.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述的胸腺包括小牛胸腺或豬胸腺。
3.如權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)包括1a)取新鮮或速凍保存的胸腺，除去雜質(zhì)并洗凈；將處理好的胸腺加水制備成勻漿液；將勻漿液-25～-35℃溫度下迅速冷凍至深層，然后在20～30℃的水浴中融化，反復(fù)凍融；1b)加熱凍融液除去不穩(wěn)定的雜蛋白，再經(jīng)離心、過濾取上清液；上清液經(jīng)超濾截留分子量10000道爾頓以下的組分得到低濃度的胸腺肽溶液。
4.如權(quán)利要求1或3所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)包括2a)將步驟1)中獲得的低濃度胸腺肽溶液降溫至-5～5℃，使所述降溫后的溶液生成冰晶；2b)上述步驟持續(xù)2～4小時，使冰晶成長為大冰晶；2c)除去冰晶，回收溶液，獲得高濃度的胸腺肽溶液。
5.一種高濃度胸腺肽制劑，其特征在于，其含有由權(quán)利要求1方法制得的胸腺肽，其中所述胸腺肽的含量為50～60mg/ml。
6.權(quán)利要求5所述的高濃度胸腺肽制劑，其特征在于，其進一步包含藥學上可接受的載體和/或溶劑。
7.一種大規(guī)格胸腺肽凍干制劑，其特征在于，其含有由權(quán)利要求1方法制得的胸腺肽，單位制劑中胸腺肽含量為50mg～100mg。
8.權(quán)利要求7所述的大規(guī)格胸腺肽凍干制劑，其特征在于其進一步包含藥學上可接受的賦形劑。
9.權(quán)利要求8所述的大規(guī)格胸腺肽凍干制劑，其特征在于所述的賦形劑為甘露醇或右旋糖酐，其用量為3％～10％重量。
10.權(quán)利要求7所述的大規(guī)格胸腺肽凍干制劑，其特征在于所述單位制劑為每個制劑包裝。
全文摘要
本發(fā)明公開一種高濃度胸腺肽溶液及其制備方法和以其為原料藥制備的大規(guī)格制劑。本發(fā)明通過采用物理冷凍技術(shù)將低濃度胸腺肽溶液濃縮，從而得到高濃度胸腺肽溶液。該方法的特點是低溫操作，不僅可保持產(chǎn)品生物活性成分不受破壞；而且在低溫狀態(tài)下微生物不易繁殖，保證了產(chǎn)品的衛(wèi)生學要求；濃縮后的胸腺肽溶液中胸腺肽的含量可達到50mg/ml以上。并以所述的高濃度胸腺肽溶液為原料藥制備得到50mg和100mg大規(guī)格的注射用胸腺肽制劑。
文檔編號A61K38/17GK1712064SQ200410009248
公開日2005年12月28日 申請日期2004年6月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年6月23日
發(fā)明者馬骉, 王天燕 申請人:北京賽生藥業(yè)有限公司