專利名稱：類固醇類的孕烯醇酮及其同分異構(gòu)體在制備治療高血壓藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種孕烯醇酮(英文為Pregnanolone)及其同分異構(gòu)體的用途，特別是涉及一種類固醇類的孕烯醇酮(Pregnanolone)及其同分異構(gòu)體在制備治療高血壓藥物中的應(yīng)用，屬于制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心理-精神應(yīng)激性高血壓與中樞神經(jīng)系統(tǒng)有密切關(guān)系，國內(nèi)外的研究已經(jīng)證明有多種物質(zhì)參與應(yīng)激性高血壓的形成，包括兒茶酚胺類激素、腎上腺皮質(zhì)激素、血管緊張素II、胰高血糖素等，尤其血管緊張素II在應(yīng)激性高血壓發(fā)病中的作用倍受重視。目前，臨床上應(yīng)用的抗高血壓藥主要是通過利尿、舒張血管對癥治療途徑而達到降血壓作用。在國外，血管緊張素II受體拮抗劑作為一種新型降壓藥物，被越來越多地應(yīng)用于高血壓的治療。90年代，我國開始從國外引進抗高血壓新藥盧沙坦，其機制是通過拮抗血管緊張素II引起的應(yīng)激反應(yīng)而起到降血壓作用，但由于它的藥價昂貴，在國內(nèi)限制了它的應(yīng)用，因此目前對高血壓的治療主要采用對癥療法，很難從根本上徹底控制高血壓的發(fā)生。類固醇類的孕烯醇酮(Pregnanolone)及其同分異構(gòu)體做為控制高血壓藥物在國內(nèi)外文獻上并未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種類固醇類的孕烯醇酮及其同分異構(gòu)體的新用途，即在制藥中的新應(yīng)用。
實際上本發(fā)明涉及類固醇類的孕烯醇酮(Pregnanolone)作為制備治療和預(yù)防高血壓藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明還涉及類固醇類的孕烯醇酮(Pregnanolone)的同分異構(gòu)體作為制備治療和預(yù)防高血壓藥物中的應(yīng)用。
為了更好地理解本發(fā)明的實質(zhì)，下面用類固醇類的孕烯醇酮(Pregnanolone)及其同分異構(gòu)體的藥理試驗結(jié)果來說明其在制藥領(lǐng)域中的新用途。成分5β-Pregnan-3α-OL-20-ONE(Pregnanole)。分子式C21H34O2，分子量318.5。其結(jié)構(gòu)式為 其包括的同分異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)式為
3α，5β-PGN 5β，3β-PGN 3β，5α-PGN 3α，5α-PGNPGN的合成應(yīng)用Progosterone為原料，通過選擇性加氫獲得關(guān)鍵中間體I，然后用立體選擇性還原法合成終產(chǎn)物PGN。
一、PGN及同分異構(gòu)體對高血壓大鼠心血管活動的影響1、模型的建立Wistar雄性大鼠72只，體重250-280g，每天給予電擊足底結(jié)合噪聲刺激，每天2次，每次2-2.5小時。將動物放在電擊籠中給予隨機性足底刺激，強度為2-4mA，持續(xù)時間為50ms，同時給予噪聲80-100ds，時程50ms的刺激，連續(xù)刺激15d后血壓均達20kpa以上。
2、動物分組(1)高血壓大鼠模型分PGN劑量反應(yīng)曲線組(n＝30)、PGN組(n＝14)、Bic組(n＝11)、PGN+Bic組(n＝11)、鹽水對照組(n＝6)；(2)正常大鼠組PGN組(n＝12)、Bic組(n＝8)、PGN+Bic組(n＝11)、鹽水對照組(n＝6)；其中n為只數(shù)。
3、給藥方式將大鼠麻醉后暴露顱骨，于前囟后1mm，中線旁1.5mm處鉆孔，垂直插入套管，深3.5-4.0mm，將導(dǎo)管固定在顱骨上，經(jīng)套管向側(cè)腦室注入生理鹽水或溶入其中的藥物，其溶液pH值為7.2-7.4，注射容量均為0.7μl，1-2min恒速注畢，每只大鼠注射1次或2次藥物，中間間隔至少2小時。
4、實驗結(jié)果(1)將6只高血壓大鼠注射不同劑量PGN9×10-7、9×10-6、9×10-5、9×10-4、9×10-3mol.L-1，血壓依次降低為(1.2±0.1)、(3.0±0.4)、(4.7±1.3)、(1.8±0.3)、(0.5±0.1)kPa(n＝6)。比較PGN對正常大鼠和應(yīng)激性高血壓大鼠血壓的影響，14只高血壓大鼠，注射9×10-4mol.L-1PGN，血壓由給藥前(20.2±2.0)kPa降低為(16.7±1.3)kPa，差值為(-4.7±1.6)kPa(P＜0.001)。12只正常血壓大鼠，注射相同劑量PGN后，血壓由給藥前(12.3±1.6)kPa，降低為(9.6±1.3)kPa，差值為(-2.9±0.1)kPa。高血壓大鼠和正常大鼠血壓降低差值比較有顯著性差異。如圖1所示。
(2)大鼠icv Bic后引起的心血管效應(yīng)11只高血壓大鼠icv8.2×10-5mol.L-1Bic0.7μl，注藥后5秒血壓迅速升高，10秒時達峰值，由注藥前的(20.2±1.6)kPa，升至(23.2±1.2)kPa，差值為(2.8±0.8)，然后逐漸下降，55秒后恢復(fù)到接近注藥前水平。而8只正常大鼠icv等量Bic，5秒后血壓迅速升高，12秒左右達峰值，由注藥前(11.1±1.5)kPa，升至(12.9±1.3)kPa，差值為(1.8±0.6)kPa。高血壓大鼠與正常大鼠血壓升高差值比較有顯著性。如圖1所示。
(3)Icv Bic對PGN降壓效應(yīng)的影響11只大鼠側(cè)腦室預(yù)先注入Bic(8.2×10-5mol.L-1/0.7μl)，后5秒再注入PGN(9.4×10-5mol.L-1Bic0.7μl)，血壓在各時間點的變化與11只高血壓大鼠單純注入Bic相比雖有所下降，但與注入PGN前相比差異無顯著性(P＞0.05)，與14只單純注入PGN組相比有極顯著性差異(P＜0.001)。7只大鼠側(cè)腦室預(yù)先注入Bic后5秒再注入PGN，血壓在各時間點的變化與8正常大鼠單純注入Bic相比雖有所降低，但與注入PGN前相比，差異無顯著性(P＞0.05)，與單純注射PGN的12只正常大鼠及注射Bic和PGN的11只高血壓大鼠相比有顯著性(P＜0.001)。如圖1所示。
二、PGN及同分異構(gòu)體在大鼠應(yīng)激性高血壓形成中的作用1、動物分組Wistar雄性大鼠38只，體重250-280g，隨機分為正常組、應(yīng)激1h組、應(yīng)激1h+PGN組、應(yīng)激15d組、應(yīng)激15d+PGN組。7應(yīng)激1h組給予1h電擊足底結(jié)合噪聲應(yīng)激刺激1h，刺激時動物放在特制的電擊籠中，給予計算機控制的隨機性足底電刺激，強度為2-4ma，持續(xù)時間為50ms，同時給予噪聲80-100ds，時程50ms的刺激，在刺激前進行腹腔注射生理鹽水2ml；應(yīng)激1h+PGN組在給予上述應(yīng)激刺激前，腹腔注射PGN0.24mg/kg；應(yīng)激15d組大鼠每天給予應(yīng)激刺激2次，每次2h，連續(xù)15d，應(yīng)激刺激期間，經(jīng)腹腔注射生理鹽水2ml.d；應(yīng)激15d+PGN組的大鼠在給予應(yīng)激刺激期間，經(jīng)腹腔注射PGN0.24mg/kg.d。對照組動物不給予任何刺激。
2、大鼠尾動脈收縮壓測定在動物處于清醒狀態(tài)下，用尾套法測大鼠尾動脈的收縮壓，每天測一次，每次測三次后取平均值。
3、實驗結(jié)果應(yīng)激15d+PGN組大鼠尾動脈收縮壓較正常對照組大鼠有顯著升高(P＜0.05)，但又顯著低于應(yīng)激15d組(P＜0.001)，應(yīng)激1h組及應(yīng)激1h+PGN組大鼠尾動脈收縮壓無明顯變化。同時，檢測各組大鼠血中血管緊張素II(AII)含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)應(yīng)激1h+PGN組和15d+PGN組血中AII水平較對照組有顯著升高(P＜0.001)，但又顯著低于單純應(yīng)激1h組和應(yīng)激15d組(P＜0.05)；應(yīng)激15d組血中AII含量較應(yīng)激1h組升高(P＜0.05)；正常對照組、應(yīng)激15d組、應(yīng)激15d+PGN組大鼠腦內(nèi)僅見少數(shù)Fos蛋白樣免疫反應(yīng)(FLI)神經(jīng)原。與對照組相比，應(yīng)激1h組大鼠腦內(nèi)可見外側(cè)韁核(LHb)、內(nèi)側(cè)韁核(MHb)、室旁核試驗(PVN)、杏仁中央核(CeA)和下丘腦外側(cè)區(qū)(LH)等部位FLI神經(jīng)原顯著增加，而腹腔注射PGN后再應(yīng)激1h，可抑制上述效應(yīng)，即可降低應(yīng)激大鼠血中血管緊張素II的含量，血管緊張素II是一種應(yīng)激性遞質(zhì)，表明PGN可通過抗應(yīng)激，降低血管緊張素II的濃度達到降血壓作用。
以上結(jié)果，可以得出本發(fā)明的積極效果在于本發(fā)明對已知的孕烯醇酮Pregnanolone及其同分異構(gòu)體發(fā)掘了新的醫(yī)療用途；其安全無毒，藥理作用強，有很好的藥用前景；具有價格便宜、毒性小。制備工藝簡單，并可做成口服劑型、注射劑型、片劑等，使用方便，其中注射劑要肌肉注射和穴位注射。


圖1為本發(fā)明的反應(yīng)曲線圖。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的描述實施例1將高血壓大鼠麻醉后暴露顱骨，于前囟后1mm，中線旁1.5mm處鉆孔，垂直插入套管，深3.5-4.0mm，將導(dǎo)管固定在顱骨上，經(jīng)套管向側(cè)腦室注入生理鹽水或溶入其中的藥物，其溶液pH值為7.2，注射容量均為0.7μl，1-2min恒速注畢，每只大鼠注射1次或2次藥物，中間間隔至少2小時。注射9×10-4mol.L-1PGN，血壓由給藥前(20.2±2.0)kPa降低為(16.7±1.3)kPa，差值為(-4.7±1.6)kPa(P＜0.001)。
實施例2用上述方法給高血壓大鼠注射劑量為PGN9×10-7mol.L-1，血壓降低(1.2±0.1)kPa。
實施例3用上述方法給高血壓大鼠注射劑量為PGN9×10-6mol.L-1，血壓降低(3.0±0.4)kPa。
實施例4用上述方法給高血壓大鼠注射劑量為PGN9×10-5mol.L-1，血壓降低(4.7±1.3)kPa。
實施例5用上述方法給高血壓大鼠注射劑量為PGN9×10-3mol.L-1，血壓降低(1.8±0.3)kPa。
權(quán)利要求
1.類固醇類的孕烯醇酮在制備治療高血壓藥物中的應(yīng)用
2.類固醇類的孕烯醇酮的同分異構(gòu)體作為制備治療和預(yù)防高血壓藥物中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的類固醇類的孕烯醇酮的同分異構(gòu)體作為制備治療和預(yù)防高血壓藥物包括口服劑型、注射劑型、片劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種類固醇類的孕烯醇酮(Pregnanolone)及其同分異構(gòu)體在制備治療高血壓藥物中的應(yīng)用，屬于制藥領(lǐng)域。其安全無毒，藥理作用強，有很好的藥用前景；具有價格便宜、毒性小。制備工藝簡單，并可做成口服劑型、注射劑型、片劑等，使用方便，其中注射劑要肌肉注射和穴位注射。
文檔編號A61K31/57GK1539423SQ20031010996
公開日2004年10月27日 申請日期2003年11月3日 優(yōu)先權(quán)日2003年11月3日
發(fā)明者趙華, 趙 華 申請人:趙華, 趙 華