專利名稱：制備結(jié)晶納米顆粒分散體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制備結(jié)晶納米顆粒分散體、特別是結(jié)晶納米顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，更特別是制備含有基本水不溶性藥學(xué)活性化合物的結(jié)晶納米顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法。
固體物質(zhì)在液體介質(zhì)中的分散體用于許多應(yīng)用，包括涂料、油墨、殺蟲劑和其它農(nóng)用化學(xué)品的分散體，殺菌劑的分散體和藥學(xué)活性化合物的分散體。
在藥物領(lǐng)域中，許多藥學(xué)活性化合物具有非常低的水溶性，這可導(dǎo)致在給病人施用這些化合物時(shí)的低生物利用率。一般，這些化合物的生物利用率通過降低化合物的粒度、特別是降低到亞微細(xì)粒尺寸來改進(jìn)，因?yàn)檫@提高了溶解速率和進(jìn)而提高了化合物的吸收。
藥學(xué)活性化合物的水懸浮液形式、特別是具有亞微細(xì)粒尺寸的懸浮液形式的配料使得化合物能靜脈內(nèi)給藥，從而提供另一種與口服給藥相比提高生物利用率的給藥途徑。
結(jié)晶納米顆粒(納米晶體)通過直接沉淀形成的懸浮液配料在本領(lǐng)域是公知有問題的。達(dá)到小粒度所必需的快速沉淀通常在開始導(dǎo)致無定形物質(zhì)的懸浮液。盡管無定形顆粒通常將隨著時(shí)間而結(jié)晶，但是緩慢的晶體增長傾向于導(dǎo)致形成粒度大于1微米的大晶體。通過直接沉淀來沉淀結(jié)晶物質(zhì)的嘗試通常難以控制和導(dǎo)致大晶體(大于1微米)的形成和增長。
US 4,826,689描述了一種制備固體的無定形顆粒的方法，其中將含水沉淀液體在溫度和注入速率的受控條件下加入固體在有機(jī)液體中的溶液，從而控制粒度。US 4,997,454描述了制備無定形顆粒的相似方法，其中沉淀液體是不含水的。US 5,118,528也描述了一種制備使用溶劑/反溶劑沉淀法制備顆粒的膠態(tài)分散體的方法。
US 5,780,062描述了一種制備穩(wěn)定小顆粒的方法，其中物質(zhì)在有機(jī)溶劑中的溶液沉淀入含有聚合物/兩親性配合物的水溶液中。
通常，物質(zhì)的無定形溶解性顯著高于該物質(zhì)的晶體溶解性。因此，與晶體顆粒相比，無定形顆粒易于在顆粒增長機(jī)理例如Ostawld熟化驅(qū)動(dòng)的溶解性作用下具有較高的顆粒增長速率。所以，結(jié)晶懸浮液傾向于比無定形顆粒穩(wěn)定顯著更長的時(shí)間，因?yàn)镺stawld熟化在結(jié)晶顆粒中以較慢速率出現(xiàn)。無定形顆粒分散體也易于重結(jié)晶，因?yàn)樾纬筛€(wěn)定的結(jié)晶，導(dǎo)致大晶體的不受控制的生長。
WO98/23350和WO99/59709描述了其中有機(jī)化合物的熔體分散在液體中形成乳液的方法。該乳液然后進(jìn)行超聲處理，得到晶體分散體。使用該方法制備的顆粒具有大約2-10微米的粒度。
直接通過沉淀獲得的結(jié)晶分散體在本領(lǐng)域公知受到溶液攪拌的影響。各種攪拌方法在本領(lǐng)域是公知的(參見例如WO 01/92293)，例如機(jī)械混合、振動(dòng)、微波處理和聲處理。
WO96/32095描述了一種通過將物質(zhì)在溶劑中的溶液以液滴形式或作為射流引入攪拌的反溶劑中來直接形成晶體的方法。使用許多技術(shù)實(shí)現(xiàn)攪拌，包括超聲攪拌。所得的晶體通常具有1-6微米的質(zhì)量平均直徑。
US 5,314,506描述了一種結(jié)晶方法，其中含有物質(zhì)的溶液射流與含有物質(zhì)的反溶劑的第二射流碰撞。與常規(guī)慢結(jié)晶方法相比，通過碰撞射流產(chǎn)生的快速混合導(dǎo)致所形成的晶體減少。公開的最小晶體是約3微米，最大晶體為3-20微米。
WO00/44468描述了對US 5,314,506所述設(shè)備的改進(jìn)，其中超聲能量施加到兩個(gè)射流的碰撞點(diǎn)，從而進(jìn)一步改進(jìn)局部混合，據(jù)說直接形成直徑小于1微米的小晶體。通常，所述晶體顆粒具有0.5微米的平均粒度。
WO00/38811描述了一種設(shè)備和方法，其中適合于加入的結(jié)晶顆粒是通過使用反溶劑在流動(dòng)池混合室中在溶劑和反溶劑體系的混合點(diǎn)處的超聲輻照存在下將物質(zhì)從溶液中沉淀來制備的。該方法導(dǎo)致平均粒度通常為4-10微米的顆粒的直接結(jié)晶。WO02/00199和WO03/035035描述了對WO00/38811所述方法的改進(jìn)，降低了晶體聚集和能更有效地分離出所形成的晶體。
在獲得結(jié)晶納米顆粒的Kasai等(Jpn.J.Appl.Phys.，31，L1132(1992))的新方法中，沉淀的顆粒通過將有機(jī)化合物的乙醇溶液(通常50ul，濃度30mM)滴加入10ml劇烈攪拌的水中，得到約0.15mM的總濃度。攪拌然后再繼續(xù)幾分鐘，獲得的粒度是約300nm。它們發(fā)現(xiàn)粒度可以通過在仍較低的濃度下沉淀來降低。通過Kasai等的相同方法(Bull Chem Soc Jpn，71，2597(1998))形成了濃度為2.5-20uM的苝的納米晶體的水懸浮液。但是，這種低濃度通常需要樣品在使用之前被濃縮，例如進(jìn)行超濾。此外，如果有機(jī)化合物的總初始濃度增加，則由這種方法獲得的顆粒的尺寸大于1微米(參見例如F.Ruch，E.Matjevic，Journal of Colloid and Interface Science，229，207(2000))。
EP 275 607描述了其中將超聲能量施加到晶體在液相中的懸浮液的方法，超聲波用于使預(yù)先形成的晶體成為碎片。通常，所得晶體的體積平均直徑是10-40微米。
另一種直接沉淀的方法是在懸浮之前降低物質(zhì)的粒度，例如研磨，如US 5,145,684所述，但是這是不利的，因?yàn)殡y以達(dá)到充分均勻的晶體尺寸。特別重要的是在藥學(xué)活性化合物的的分散體中粒度盡可能地均勻，因?yàn)榱６鹊牟町愐子谟绊懮锢寐?，進(jìn)而影響這些化合物的功效。此外，如果該分散體要用于靜脈內(nèi)給藥，則分散體中的大顆粒會使得該分散體不適合該目的，可能導(dǎo)致不利的或危險(xiǎn)的副作用。
所以，需要一種能形成納米晶體、特別是小于500nm、更特別是小于400nm、尤其小于280nm和更尤其小于250nm的具有窄粒度分布的納米晶體的方法。
我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，納米顆粒在含水介質(zhì)中的分散體可以使用直接沉淀方法制備，其中結(jié)晶通過施加超聲波來誘導(dǎo)。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供一種制備納米結(jié)晶顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，包括將以下組分快速混合a)在水混溶性有機(jī)溶劑中含有基本水不溶性物質(zhì)的第一溶液；b)含有水和任選穩(wěn)定劑的水相，和然后將所得混合物進(jìn)行聲處理足夠的時(shí)間，形成基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶固體顆粒；和任選地除去水混溶性有機(jī)溶劑。
更具體地說，提供一種制備納米結(jié)晶顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，包括將以下組分組合(優(yōu)選在快速混合條件下)a)在水混溶性有機(jī)溶劑中含有基本水不溶性物質(zhì)的第一溶液；b)含有水和任選穩(wěn)定劑的水相，形成無定形顆粒的分散體；和c)將所得無定形顆粒的分散體進(jìn)行聲處理足夠的時(shí)間，形成基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶固體顆粒；和任選地除去水混溶性有機(jī)溶劑。
在本說明書中，結(jié)晶納米顆?；蚣{米晶體或納米結(jié)晶顆粒表示粒度小于1微米的結(jié)晶顆粒。
在分散體中的晶體優(yōu)選具有小于1μm的平均粒度，更優(yōu)選小于500nm。特別優(yōu)選的是，在分散體中的晶體具有10-500nm的平均粒度，更特別為10-280nm，特別是30-280nm，尤其是50-250nm，更尤其是100-200nm。這里使用的術(shù)語“平均粒度”表示使用常規(guī)技術(shù)檢測的顆粒的平均流體動(dòng)力學(xué)直徑(例如在分散體中存在的結(jié)晶或無定形顆粒)，例如通過動(dòng)態(tài)光散射用Beckman Coulter N4+設(shè)備進(jìn)行。動(dòng)態(tài)光散射測定了擴(kuò)散系數(shù)D，從該系數(shù)可以用Stoke-Einstein公式計(jì)算流體動(dòng)力學(xué)直徑D＝kT/(3πηdH)，其中k是Boltzmann常數(shù)，T表示溫度，η表示溶劑粘度，dH表示流體動(dòng)力學(xué)直徑(例如“Introductionto Colloid and Surface Chemistry”，D.J.Shaw，Butterworths，1980所述)。晶體還可以適宜地用低溫透射電子顯微鏡法(CryoTransmission Electron Microscopy)檢測其尺寸和形狀，例如ZeissEM 902(參見例如H.Mohwald，Y.Talmon，Current Opinion inColloid and Interface Science，2，129(1997))。合適的顯微鏡條件在下面的實(shí)施例部分描述。
根據(jù)本發(fā)明制備的納米結(jié)晶顆粒顯示出窄粒度分布，這一般表示99％(基于體積)的顆粒在平均流體動(dòng)力學(xué)直徑的±150nm范圍內(nèi)。粒度分布可以通過使用例如CONTIN指數(shù)和假設(shè)的顆粒反射指數(shù)1.59來推導(dǎo)。
根據(jù)本發(fā)明制備的納米結(jié)晶顆粒基本不含非結(jié)晶物質(zhì)，這表示納米結(jié)晶顆粒是至少70％、80％、85％、90％、95％、99％和特別是100％結(jié)晶的。結(jié)晶度可以使用合適的公知技術(shù)檢測，例如X-射線晶體學(xué)和/或差示掃描量熱法(DSC)和/或Raman光譜。
在第一溶液中的基本水不溶性物質(zhì)優(yōu)選是基本水不溶性的有機(jī)物質(zhì)?；静蝗鼙硎驹撐镔|(zhì)在水中在25℃的溶解度小于0.5mg/ml，優(yōu)選小于0.1mg/ml，特別是小于0.05mg/ml。
物質(zhì)在水中的溶解度可以使用常規(guī)技術(shù)檢測。例如，物質(zhì)的飽和溶液通過在25℃向水中加入過量的該物質(zhì)并使該溶液平衡48小時(shí)來制備。通過離心或過濾除去過量的固體，物質(zhì)在水中的濃度通過合適的分析技術(shù)例如HPLC檢測。
根據(jù)本發(fā)明的方法可以用于制備寬范圍的基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒的分散體。合適的物質(zhì)是公知能在至少一種溶劑-非溶劑體系中結(jié)晶的那些。合適的物質(zhì)包括、但不限于顏料、殺蟲劑、除草劑、殺菌劑、工業(yè)殺生物劑、化妝品和藥學(xué)活性化合物。
本發(fā)明的另一方面包括由本發(fā)明方法生產(chǎn)的物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，基本水不溶性物是基本水不溶性藥學(xué)活性化合物。許多藥學(xué)活性化合物適用于本發(fā)明，包括但不限于基本水不溶性的抗癌劑，甾族化合物，優(yōu)選糖皮質(zhì)激素(特別是抗炎糖皮質(zhì)激素，例如布地奈德)，抗高血壓劑(例如非洛地平或呱唑嗪)，β-阻斷劑(例如心得靜或普奈洛爾)，ACE抑制劑，血管緊張素II受體拮抗劑，促血清脂質(zhì)減少劑(hypolipidaemic agent)，抗凝結(jié)劑，抗血栓劑，抗真菌劑(例如灰黃霉素)，抗病毒劑，抗生物劑，抗菌劑(例如環(huán)丙沙星)，精神抑制劑，抗抑郁劑，鎮(zhèn)靜劑，麻醉劑，抗炎劑(例如酮洛芬)，抗組胺藥，荷爾蒙(例如睪丸素)，免疫修飾劑，或避孕藥。基本水不溶性藥學(xué)活性化合物的具體例子包括抗癌劑，例如比卡胺，血管緊張素II受體拮抗劑，例如candersartan cilexitil，抗高血壓劑，例如非洛地平，和用于治療肥胖、心理和神經(jīng)疾病的CB1調(diào)節(jié)劑(稱為拮抗劑或反抗劑)，例如在EP 656354、WO 00/46209、WO01/70700、PCT申請PCT/GB02/05736和PCT/GB02/05742中公開的那些。
水混溶性有機(jī)溶劑在第一相中的水混溶性有機(jī)溶劑優(yōu)選能與水按照所有比例混溶。水混溶性有機(jī)溶劑應(yīng)該還是基本水不溶性物質(zhì)的溶劑。選擇水混溶性有機(jī)溶劑，使得基本水不溶性物質(zhì)在水混溶性有機(jī)溶劑中具有足夠的溶解度，能在第一溶液與水相組合時(shí)形成基本水不溶性物質(zhì)的沉淀。適宜的是，基本水不溶性物質(zhì)在水混溶性有機(jī)溶劑中的溶解度是10mg/l或更大。
通常優(yōu)選的是，基本水不溶性物質(zhì)在水混溶性有機(jī)溶劑中的濃度盡可能高，以協(xié)助有效的沉淀和降低所需要的有機(jī)溶劑的量?；舅蝗苄晕镔|(zhì)在水混溶性有機(jī)溶劑中的濃度上限由該物質(zhì)在該溶劑中的溶解度決定。但是，我們發(fā)現(xiàn)在本發(fā)明中可以使用寬范圍的濃度。通常，基本水不溶性物質(zhì)在水混溶性有機(jī)溶劑中的濃度為1重量％或更大是合適的。
基本水不溶性物質(zhì)應(yīng)該完全溶解在水混溶性有機(jī)溶劑中?；舅蝗苄晕镔|(zhì)的顆粒的存在會導(dǎo)致對分散體中的粒度分布的控制差。
如果需要，基本水不溶性物質(zhì)在水混溶性有機(jī)溶劑中的溶解度可以通過將基本水不溶性物質(zhì)和水混溶性有機(jī)溶劑的混合物加熱得到溶液來提高。該溶液然后保持在高溫下直到其與本發(fā)明中的水相組合。
應(yīng)該理解的是，水混溶性有機(jī)溶劑的選擇將取決于基本水不溶性物質(zhì)的性質(zhì)。當(dāng)基本水不溶性物質(zhì)是有機(jī)化合物時(shí)，水混溶性有機(jī)溶劑應(yīng)該具有足夠低的介電常數(shù)從而能溶解基本水不溶性物質(zhì)。合適的用于溶解基本水不溶性物質(zhì)的水混溶性有機(jī)溶劑包括水混溶性的醇，例如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、叔丁醇、乙二醇或丙二醇；二甲基亞砜；二甲基甲酰胺；N-甲基吡咯烷酮；水混溶性醚，例如四氫呋喃；水混溶性腈，例如乙腈；水混溶性酮，例如丙酮和甲乙酮；二甲基乙酰胺或上述兩種或多種水混溶性有機(jī)溶劑的混合物。
沉淀在本發(fā)明方法中，第一溶液和水相可以通過以下方式組合例如將第一溶液加入水相中，或?qū)⑺嗉尤氲谝蝗芤褐?，或?qū)⒌谝蝗芤汉退嘣谀艽龠M(jìn)形成無定形顆粒的分散體的條件下基本上同時(shí)組合。方便的是，第一溶液和水相可以通過在快速混合下將第一溶液加入水相中來組合。
優(yōu)選的是，第一溶液和水相在組合期間快速混合以促進(jìn)高度的擾動(dòng)和形成無定形顆粒的均勻分散體。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，第一溶液和水相的快速混合方便地通過在組合期間進(jìn)行聲處理來進(jìn)行。或者可以使用本領(lǐng)域公知的其它攪拌技術(shù)，前提是攪拌速率足夠高以得到無定形顆粒，優(yōu)選具有小于1微米的粒度。可以用于快速混合第一溶液和水相的合適的方法例如包括在混合期間使用常規(guī)攪拌技術(shù)進(jìn)行快速攪拌以促進(jìn)組合期間的擾動(dòng)?；蛘?，第一溶液和水相可以通過射流混合來組合，例如使用US 5,314,506或WO00/44468所述的設(shè)備，前提是控制沉淀?xiàng)l件以得到無定形顆粒的初始分散體。沉淀還可以使用間歇方法進(jìn)行，其中第一液體的批料與固定體積的水相在合適的混合容器中混合?；蛘撸M合可以在連續(xù)或半連續(xù)的基礎(chǔ)上操作，使用例如流動(dòng)池作為將第一溶液的料流與水相料流混合的裝置。所得的無定形顆粒的分散體然后可以在下游容器中收集，用于隨后的聲處理和轉(zhuǎn)化成納米結(jié)晶顆粒的分散體。
如上所述，應(yīng)該控制沉淀?xiàng)l件以在第一溶液和水相組合時(shí)提供無定形顆粒的分散體。“無定形顆粒的分散體”表示無定形顆粒在液體介質(zhì)中的分散體，它在第一溶液和水相組合時(shí)基本不含結(jié)晶顆粒。本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在進(jìn)行聲處理之前即使少量結(jié)晶物質(zhì)在無定形分散體中的存在也會促進(jìn)形成所需要的納米結(jié)晶顆粒的均勻分散體。適宜的是，無定形顆粒的懸浮液應(yīng)該含有小于0.01重量％、特別小于0.001重量％、更特別小于0.0001重量％的結(jié)晶顆粒以避免在該工藝隨后步驟中不利地形成大晶體。例如，初始的無定形顆粒分散體可以含有0.00001-0.0001重量％的結(jié)晶物質(zhì)，盡管如上所述優(yōu)選的是不存在可檢測到的結(jié)晶物質(zhì)。初始無定形分散體的所需的“純度”(即非結(jié)晶度)將通過工藝中隨后的聲處理步驟來表現(xiàn)出來。如果存在結(jié)晶物質(zhì)，則聲處理將導(dǎo)致大顆粒(大于1微米)的不利生長而不是所需的納米結(jié)晶顆粒。
用于形成無定形顆粒分散體的沉淀?xiàng)l件將在一定程度上取決于例如具體的物質(zhì)、所用的溶劑、具體的沉淀設(shè)備和攪拌方法/第一溶液和水相的組合方法。在本發(fā)明中所用的快速沉淀?xiàng)l件促進(jìn)了動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定的無定形顆粒的形成。所需的條件可以使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)確定，以優(yōu)化用于形成無定形顆粒的沉淀?xiàng)l件。
發(fā)明人發(fā)現(xiàn)當(dāng)將第一溶液加入水相或相反時(shí)，基本水不溶性物質(zhì)在組合溶液中的最終濃度在無定形顆粒的形成中有影響。通常，基本水不溶性物質(zhì)在組合溶液和水相中的濃度為約10mM或更小將使得結(jié)晶物質(zhì)的形成最小化(應(yīng)該理解的是，這里使用的摩爾濃度表示每升的摩爾濃度)?；舅蝗苄晕镔|(zhì)的更高濃度將導(dǎo)致在沉淀期間在分散體中形成結(jié)晶物質(zhì)。
因此，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，基本水不溶性物質(zhì)的濃度是0.2-10mM，特別是0.5-5mM，更特別是0.5-3mM，尤其是約1mM，其中濃度表示組合的第一溶液和水相中的基本水不溶性物質(zhì)濃度(和其中濃度表示在組合液體中存在的物質(zhì)總量，包括懸浮的無定形顆粒和任何會溶解在組合液體介質(zhì)中的物質(zhì))。
在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，第一溶液和水相快速組合。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)快速組合能促進(jìn)形成小的無定形顆粒(通常是納米粒度)。所以，在其中例如將第一溶液加入攪拌的水相中的實(shí)施方案中，優(yōu)選的是將第一溶液作為單一物質(zhì)進(jìn)料加入水相中，而不是緩慢注入水相中。在小規(guī)模上，這可以通過簡單地將所有第一溶液直接倒入攪拌的水相中來實(shí)現(xiàn)。在較大規(guī)模上，快速添加可以通過將第一溶液以高傳質(zhì)速率泵送入水相來實(shí)現(xiàn)。優(yōu)選的是，第一溶液和水相的組合在小于1分鐘內(nèi)進(jìn)行，更優(yōu)選小于30秒，和特別小于10秒，更特別小于5秒，例如1-10秒，使得該組合基本上是瞬時(shí)的。
通過初始沉淀形成的無定形顆粒的粒度不是必須小于1微米。但是，優(yōu)選的是無定形顆粒的粒度與所需的納米結(jié)晶顆粒的粒度相似。因此，優(yōu)選的是，第一溶液和水相的組合形成具有小于1微米、更優(yōu)選小于500nm平均粒度的無定形顆粒的均勻分散體。特別優(yōu)選的是無定形顆粒具有10-500nm的平均粒度，特別是10-280nm，更特別是30-280nm，特別是50-250nm，尤其是100-200nm。
在沉淀期間的溫度不是關(guān)鍵的，可以方便地在約環(huán)境溫度(例如15-25℃)下進(jìn)行，但是如果需要可以使用更高或更低的溫度。但是，在本發(fā)明的實(shí)施方案中，有利的是冷卻水相以提高無定形和結(jié)晶溶解度之間的比率，從而提高過飽和和成核速率以獲得更小的顆粒，這在下面的聲處理中討論。
因此，在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，第一液體與水相在高度擾動(dòng)(turbulence)的條件下組合(例如通過快速攪拌、聲處理和/或組合快速攪拌和聲處理)，其中組合快速進(jìn)行(優(yōu)選小于30秒，更優(yōu)選小于10秒，例如1-10秒)，和其中基本水不溶性物質(zhì)在組合的第一液體與水相中的最終濃度是10mM或更低(優(yōu)選小于5mM和特別是約1mM的最終濃度)。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)這些條件能促進(jìn)形成平均粒度小于1微米的無定形顆粒的均勻分散體。
一些顆粒將在水相中不需要穩(wěn)定劑的情況下沉淀和形成無定形顆粒的均勻分散體。但是，我們發(fā)現(xiàn)無定形顆粒通常在沉淀時(shí)或在隨后的聲處理期間聚集，除非在水相中存在穩(wěn)定劑。
適用于防止分散體中的顆粒聚集的穩(wěn)定劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。合適的穩(wěn)定劑包括分散劑以及陰離子性、陽離子性或非離子性的表面活性劑。合適的分散劑包括聚合的分散劑，例如聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇或纖維素衍生物，特別是水溶性或水分散性纖維素衍生物，例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、乙基羥乙基纖維素或羧甲基纖維素。優(yōu)選的聚合的分散劑是聚乙烯吡咯烷酮(PVP)?？梢允褂脤挿秶腜VP聚合物，例如分子量為10,000-100,000道爾頓的PVP，例如分子量為50,000-60,000。合適的陰離子表面活性劑包括烷基或芳基硫酸鹽，例如十二烷基硫酸鈉。其它合適的離子性表面活性劑包括例如烷基和芳基羧酸鹽，例如肉豆蔻酸鈉或鉀，或月桂酸鈉；二烷基磺基琥珀酸鹽，特別是二(4-12C)烷基磺基琥珀酸鹽，例如二辛基磺基琥珀酸鈉、鈣或鉀(例如Docusate鈉或Aerosol OT)或二戊基磺基琥珀酸鈉(Aerosol AY)；或膽汁酸鹽，例如脫氧膽酸、牛璜膽酸或甘氨膽酸的鹽，例如膽酸的鈉鹽，例如牛璜膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、或甘氨膽酸鈉；合適的陽離子表面活性劑包括季銨化合物和脂肪胺。特別的陽離子表面活性劑包括烷基銨化合物(例如(8-22C)烷基銨，特別是(8-20C)烷基銨化合物，例如鹵化物)，包括例如月桂基氯化銨；烷基三甲基銨化合物(例如(8-22C)烷基三甲基銨，特別是(8-20C)烷基三甲基銨化合物，如鹵化物)，例如十六烷基三甲基溴化銨(Cetramide)，三甲基十四烷基溴化銨(Myristramide)或月桂基三甲基溴化銨(Lauramide)；亞芐基烷基鹵化鎓(例如(8-20C)烷基芐基二甲基鹵化銨，特別是(8-18C)烷基芐基二甲基鹵化銨以及它們的混合物)，例如芐基烷基氯化鎓；或烷基吡啶鎓化合物，例如(8-20C)烷基吡啶鎓化合物，例如十六烷基氯化吡啶鎓或十六烷基溴化吡啶鎓。
合適的非離子表面活性劑包括山梨醇的單酯，可以含有或不含聚氧乙烯殘基(例如Tween表面活性劑，例如Tween20，Tween40，Tween60和Tween80)，由脂肪醇和聚氧乙二醇(polyoxyethylene glycols)形成的醚，聚氧乙烯/聚丙二醇，乙氧基化蓖麻油(例如CremophorEL)，乙氧基化氫化蓖麻油，乙氧基化12OH-硬脂酸(例如SolutolHS15)。其它合適的非離子表面活性劑包括例如環(huán)氧乙烷/環(huán)氧丙烷共聚物，特別是嵌段共聚物(poloxomers)例如Pluronic，Tetronic或Lutrol表面活性劑，例如Lutrol F68或Lutrol F127；或聚乙氧基化山梨醇脂肪酸酯，例如Polysorbate 80。其它合適的表面活性劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，因此可以進(jìn)行選擇。其它適用于本發(fā)明的表面活性劑包括例如在美國專利6,383,471表1中列出的表面活性劑。
水相可以含有一種單一穩(wěn)定劑或兩種或多種穩(wěn)定劑的混合物。在優(yōu)選實(shí)施方案中，水相含有聚合的分散劑和兩親表面活性劑，其可以是非離子性、陰離子性或陽離子性的。特別是，聚合的分散劑和陰離子表面活性劑的組合，例如聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸鈉。
當(dāng)基本水不溶性物質(zhì)是藥學(xué)活性化合物時(shí)，優(yōu)選穩(wěn)定劑是藥學(xué)可接受的物質(zhì)。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，該穩(wěn)定劑可以在與水相組合之前加入第一溶液中。合適的穩(wěn)定劑如上所述。
任選地，其它穩(wěn)定劑可以在無定形顆粒沉淀入水相中之后加入分散體中，以提供對分散體中的顆粒聚集的額外抑制作用。在需要時(shí)進(jìn)行聲處理之后，穩(wěn)定劑可以加入無定形顆粒的最后分散體中，例如用于抑制納米晶體的聚集。
通常，希望將穩(wěn)定劑的存在量最小化，特別是當(dāng)基本水不溶性物質(zhì)是藥學(xué)活性化合物時(shí)，盡可能使與穩(wěn)定劑有關(guān)的副作用最小化和/或?qū)⑴c藥學(xué)活性化合物之間的可能損害該化合物功效的相互作用最小化。因此，通常優(yōu)選的是穩(wěn)定劑的量應(yīng)該是對于穩(wěn)定無定形顆粒和/或納米結(jié)晶顆粒的最終分散體所需要的最小量。通常，水相含有0.001-2重量％，特別是0.01-1重量％，優(yōu)選0.05-0.5重量％和特別是0.1-0.2重量％的穩(wěn)定劑。當(dāng)使用表面活性劑時(shí)，優(yōu)選的是表面活性劑的濃度低于臨界膠束濃度以避免納米晶體在液體介質(zhì)中的增溶作用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，水相含有聚合的分散劑和兩親表面活性劑，例如聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸鈉。兩親表面活性劑的濃度高于與聚合的分散劑的臨界締合濃度，但是低于臨界膠束濃度。這使得聚合物-兩親表面活性劑形成聚集體，如US5,780,062所述。因此，在該實(shí)施方案中，US5,780,062所述的方法可以使用，前提是沉淀?xiàng)l件得到控制以得到本發(fā)明所需的無定形顆粒的初始分散體。表面活性劑在聚合物-表面活性劑體系中的臨界締合濃度可以使用公知的方法檢測(例如E.D.Goddard，Colloids and Surfaces，19，255(1986)所述)。例如當(dāng)表面活性劑是十二烷基硫酸鈉(SDS)和聚合物是PVP時(shí)，SDS的臨界締合濃度是3mM。因此，在該實(shí)施方案中，SDS濃度應(yīng)該在臨界締合濃度(3mM)和臨界膠束濃度(約8mM)之間。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，水相含有聚合的分散劑和兩親表面活性劑，例如聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸鈉。在該實(shí)施方案中，表面活性劑的濃度低于與聚合的分散劑和陰離子表面活性劑的臨界締合濃度。因此，在水相含有聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸鈉的情況下，SDS的濃度低于3mM，例如是0.1-2.8mM，特別是約0.25mM。我們發(fā)現(xiàn)該實(shí)施方案提供了無定形顆粒的特別穩(wěn)定的分散體，同時(shí)僅僅使用少量的穩(wěn)定劑。
如上所述，在本發(fā)明方法中第一溶液和水相的組合導(dǎo)致基本水不溶性物質(zhì)的顆粒非?？焖?、基本瞬時(shí)地沉淀，得到具有窄粒度分布的所需尺寸的顆粒。對該懸浮液的較長聲處理導(dǎo)致形成具有相似的窄粒度分布的所需尺寸的納米晶體。
不希望限制于任何理論，認(rèn)為在第一溶液與水相的組合后無定形顆粒的初始懸浮液的形成促進(jìn)了在隨后聲處理中形成均勻的納米結(jié)晶顆粒分散體。通常，物質(zhì)的無定形溶解度高于晶體溶解度，例如在非洛地平的情況下，晶體溶解度是2μM，而無定形溶解度是約24μM。認(rèn)為在聲處理期間無定形顆粒的存在提供了物質(zhì)在溶液中用于結(jié)晶步驟的儲庫，從而保持恒定高水平的相對于晶體溶解度的過飽和的恒定水平，因?yàn)檩^高的無定形溶解度。由無定形顆粒分散體的存在提供的恒定高水平的過飽和在對無定形顆粒的分散體施加超聲波時(shí)提供了形成大量初級核的有利條件。認(rèn)為在聲處理期間保持高水平和較恒定狀態(tài)的過飽和促進(jìn)了連續(xù)的初級成核，所以促進(jìn)了大量小結(jié)晶納米顆粒的生長。認(rèn)為由聲處理和在結(jié)晶期間引起的高度成核促進(jìn)了具有均勻粒度的結(jié)晶顆粒的形成，這是因?yàn)檩^恒定水平的過飽和。在聲處理過程中，認(rèn)為無定形物質(zhì)逐漸被消耗，溶解入液體介質(zhì)中，作為結(jié)晶納米顆粒再沉淀。
在常規(guī)的直接得到晶體分散體的沉淀方法中，結(jié)晶顆粒的初始形成通常導(dǎo)致過飽和程度降低和促進(jìn)初始形成的晶體的快速生長，從而有利于形成較大的晶體(通常是微米級尺寸的)。相似地，如果無定形顆粒的初始分散體也含有結(jié)晶物質(zhì)，則存在的晶體將通常導(dǎo)致聲處理期間大晶體的快速生長，而不是根據(jù)本發(fā)明的所需納米結(jié)晶顆粒。
聲處理聲處理指將超聲波施加到從第一溶液和水相組合獲得的混合物上。
根據(jù)本發(fā)明方法，第一溶液和水相在快速混合下的組合獲得了基本水不溶性化合物的無定形顆粒的初始沉淀，其中(在優(yōu)選實(shí)施方案中)無定形顆粒的粒度小于1微米。
在完成組合之后，對該混合物進(jìn)行聲處理直到出現(xiàn)無定形沉淀的結(jié)晶。所以，在組合之后對該混合物進(jìn)行聲處理的足夠時(shí)間是足以將無定形顆?；就耆D(zhuǎn)化成結(jié)晶顆粒所需的時(shí)間(例如70％、80％、90％、95％或95％的無定形顆粒轉(zhuǎn)化成結(jié)晶納米顆粒)。合適的充足時(shí)間例如是至少10分鐘，特別是至少20分鐘，例如10-200分鐘，優(yōu)選20-200分鐘，更優(yōu)選10-120分鐘，和特別是20-100分鐘。應(yīng)該理解的是所需的時(shí)間將取決于許多因素，例如難溶于水的化合物的性質(zhì)、超聲頻率、所用溶液的體積和聲波設(shè)備的能量輸出。
超聲頻率應(yīng)該選擇以促進(jìn)無定形顆粒的懸浮液的結(jié)晶。通常，約16kHz或更高的頻率是合適的，例如20-100kHz，更特別是20-50kHz。所需的能量將取決于要施加超聲波的懸浮液的體積。通常，約5W或更高的功率是合適的，例如5-5000W，特別是200-4000W。超聲能量的強(qiáng)度可以在寬范圍內(nèi)調(diào)節(jié)。
可以使用公知的方法施加超聲波。例如，超聲波可以直接通過例如置于液體介質(zhì)中的超聲探針或角來施加。或者，超聲波可以通過超聲浴施加或者通過連接設(shè)備與裝有無定形顆粒的容器連接，例如經(jīng)由伸入裝有該懸浮液的容器中的填充液體的探針從聲波轉(zhuǎn)換器輸入懸浮液中。
合適的聲波設(shè)備是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，可以相應(yīng)地選擇。方便的是，在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模上，可以使用超聲頻率為35kHz和功率輸出為285W的聲波設(shè)備，例如Elma Transsonic Bath T460/H。在非實(shí)驗(yàn)室規(guī)模上，可以使用超聲反應(yīng)器例如來自AEA Technology，例如在GB2,276,567中所述。
在聲處理期間的溫度不是關(guān)鍵的，通常低于50℃的溫度是合適的。但是，我們發(fā)現(xiàn)低溫通常有利于形成更小的結(jié)晶顆粒。因此，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，在無定形分散體的聲處理期間的溫度小于50℃，特別是小于45℃，例如0-45℃，優(yōu)選1-35℃，特別是5-10℃。不希望限制于任何理論，認(rèn)為較低的溫度導(dǎo)致在聲處理期間的高水平的過飽和和提高了在聲處理期間的初級成核程度，從而得到較大數(shù)目的較小結(jié)晶顆粒。
任選地，水混溶性有機(jī)溶劑可以從結(jié)晶后的分散體中除去。合適的除去水混溶有機(jī)溶劑的方法是公知的，包括蒸發(fā)，例如通過將該分散體在真空下加熱，反滲透，滲析，超濾或者交叉流過濾。
如果需要，分散體可以在結(jié)晶之后通過從分散體除去過量的水來濃縮，例如通過蒸發(fā)進(jìn)行。
任選地，其它組分可以加入本發(fā)明使用的液體介質(zhì)中，以改進(jìn)所需的性能，例如加入第一溶液、水相、無定形顆粒的分散體中，或加入納米結(jié)晶顆粒的分散體中。這些組分的例子包括粘度改進(jìn)劑、緩沖劑、遮味劑、抗氧化劑、防腐劑、pH調(diào)節(jié)劑或著色劑。額外的組分可以在顆粒的沉淀之前或更優(yōu)選在此之后加入。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，提供一種制備基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，包括將以下組分快速混合a)在水混溶性有機(jī)溶劑中含有基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的第一溶液；b)含有水和任選穩(wěn)定劑的水相，和然后將所得混合物進(jìn)行聲處理足夠的時(shí)間，形成基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的納米結(jié)晶固體顆粒；和任選地除去水混溶性有機(jī)溶劑。
特別是，該實(shí)施方案提供一種制備基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，包括將以下組分組合(優(yōu)選在快速混合條件下)a)在水混溶性有機(jī)溶劑中含有基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的第一溶液；b)含有水和任選穩(wěn)定劑的水相，形成無定形顆粒的分散體；和c)將所得無定形顆粒的分散體進(jìn)行聲處理足夠的時(shí)間，形成基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒；和任選地除去水混溶性有機(jī)溶劑。
本發(fā)明的該實(shí)施方案提供基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的固體納米結(jié)晶晶體在含水介質(zhì)中的分散體。對于該實(shí)施方案適合的工藝條件如上所述。
如果需要，根據(jù)本發(fā)明制備的分散體中存在的納米結(jié)晶顆?？梢栽诮Y(jié)晶之后從含水介質(zhì)中分離出來(或除去水混溶性有機(jī)溶劑)。納米結(jié)晶顆?？梢允褂贸Ｒ?guī)技術(shù)分離，例如通過離心、反滲透、膜過濾、冷凍干燥或噴霧干燥。當(dāng)顆粒含有基本水不溶性藥學(xué)活性化合物時(shí)分離納米結(jié)晶顆粒是有用的，因?yàn)檫@洗滌了晶體并將其再次懸浮在無菌的含水介質(zhì)中，得到適合于向溫血哺乳動(dòng)物(特別是人)給藥的懸浮液，例如通過口服或胃腸(例如靜脈)給藥?？梢詢?yōu)選的是不分離晶體，但是使用所形成的懸浮液，例如因?yàn)樘囟ㄎ镔|(zhì)晶體的分離會導(dǎo)致形成緊密結(jié)合的聚集體。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，該方法在無菌條件下進(jìn)行，從而得到無菌的分散體，它可以直接向上述溫血哺乳動(dòng)物給藥，不需要額外的提純或消毒步驟。或者，該分散體可以在結(jié)晶和任選除去水混溶性有機(jī)溶劑之后進(jìn)行消毒過濾，得到無菌的懸浮液。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供一種含有連續(xù)水相的水分散體，在水相中分散了通過本發(fā)明方法獲得的基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒。
優(yōu)選的是，基本水不溶性物質(zhì)是上述基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)。
優(yōu)選的是，在分散體中納米結(jié)晶顆粒的濃度大于0.25mM，例如是0.25-10mM，特別是0.5-5mM?；舅蝗苄晕镔|(zhì)的納米結(jié)晶顆粒具有上述定義的粒度。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供一種通過本發(fā)明方法獲得的基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒。優(yōu)選的是，基本水不溶性物質(zhì)是上述基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)?；舅蝗苄晕镔|(zhì)的納米結(jié)晶顆粒具有上述定義的粒度。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供一種藥物組合物，包含基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒和藥物可接受的稀釋劑或載體。
當(dāng)該物質(zhì)是基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)時(shí)，根據(jù)本發(fā)明的分散體可以向溫血哺乳動(dòng)物(特別是人)給藥，例如通過口服或胃腸(例如靜脈)給藥。在另一個(gè)實(shí)施方案中，分散體可以在濕造粒工藝中用作造粒液體，制備含有基本水不溶性藥學(xué)活性物質(zhì)和一種或多種賦形劑的顆粒。所得的顆?？梢匀缓笾苯邮褂?，例如通過填充入膠囊，提供含單位劑量的顆粒。或者，這些顆?？梢匀芜x地與其它賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑等組合，并壓制成適合口服給藥的片劑。如果需要，片劑可以被涂覆，以提供對片劑釋放性能的控制或防止其降解，例如在暴露于光的情況下。適用于片劑配方的濕造粒技術(shù)和賦形劑是本領(lǐng)域公知的。
使用本發(fā)明制備的藥學(xué)活性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒還可以被用于其它藥物配方中，包括但不限于干混的組合物，例如膠囊，和直接壓片配方；和受控的或緩釋的配方，其中這些顆粒在合適的基體內(nèi)分散，例如在水可溶脹性或水可磨蝕性基體中或可生物降解的聚合物基體中。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供通過本發(fā)明方法獲得的基本水不溶性物質(zhì)的結(jié)晶顆粒用作藥物。
根據(jù)本發(fā)明的方法可以用于促進(jìn)某些使用常規(guī)結(jié)晶方法難以結(jié)晶的物質(zhì)的結(jié)晶。公知的是，一些物質(zhì)難以從溶液中結(jié)晶，通常需要許多實(shí)驗(yàn)誤差獲得提供結(jié)晶形式的該物質(zhì)的方法。在本發(fā)明中通過存在無定形分散體提供的恒定過飽和的獨(dú)特條件可以提供使用已知常規(guī)結(jié)晶方法不能結(jié)晶的物質(zhì)的納米晶體。根據(jù)本發(fā)明制得的納米晶體然后用作種晶促進(jìn)在更常規(guī)結(jié)晶方法中的結(jié)晶作用。例如，結(jié)晶藥物化合物的制備通常是有利的，因?yàn)檫@使得這些化合物能以高純度形式制備。結(jié)晶形式也可以提供諸如穩(wěn)定性的益處和物質(zhì)處理優(yōu)點(diǎn)的其它優(yōu)點(diǎn)。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供通過本發(fā)明方法獲得的基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒用作結(jié)晶工藝中的種晶的用途。合適的可以使用種晶的結(jié)晶工藝是本領(lǐng)域公知的，包括例如通過緩慢冷卻、蒸發(fā)或添加反溶劑誘導(dǎo)過飽和的體系。
工藝在以下實(shí)施例中，使用Elma Transsonic Bath T460/H進(jìn)行聲處理，體積是2.75升，功率消耗是285W，超聲頻率是35kHz。
在實(shí)施例部分顯示的圖象和顆粒的結(jié)晶或無定形狀態(tài)的分析用低溫-TEM(cyro-Transmission Electron Microscopy)獲得，使用在25℃在CEVS(受控環(huán)境玻璃化體系)中的未稀釋的納米顆粒懸浮液。樣品作為薄膜涂到被多孔聚合物膜涂覆的金屬板上，在液體乙烷中在-170℃進(jìn)行玻璃化，并在Zeiss EM 902(加速器電壓80Kv)中氮的沸點(diǎn)下研究。
所述的平均顆粒流體動(dòng)力學(xué)直徑是使用N4 Plus Beckman Coulter和Brookhaven Fiber-Optic Quasi-Elastic Light Scattering(FOQELS)儀器從動(dòng)態(tài)光散射法獲得的強(qiáng)度重量數(shù)。
實(shí)施例下面通過非限制性實(shí)施例描述本發(fā)明。
在實(shí)施例中，使用的聚乙烯吡咯烷酮是PVP K30(來自BASF)，其重均分子量是57000。在所有實(shí)施例中，十二烷基硫酸鈉與作為穩(wěn)定劑的PVP一起使用。SDS濃度是在水相中的0.25mM。
實(shí)施例1-非洛地平制備在二甲基乙酰胺中的100mM非洛地平溶液。在聲處理下將0.010ml的該溶液快速加入含0.2％w/w聚乙烯吡咯烷酮和0.25mM十二烷基硫酸鈉的0.990ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行30分鐘。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為165nm(在2小時(shí)內(nèi)沒有觀察到粒度變化)的晶體。顆粒的低溫-TEM圖象顯示在

圖1a中。
對比例1重復(fù)實(shí)施例1的方法，但是在混合兩種溶液之后直接中斷聲處理。該方法獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為約170nm的無定形顆粒。由于Ostwald熟化1小時(shí)，粒度從170nm增加到250nm，和在2小時(shí)之后，該粒度是370nm。在混合之后約20分鐘提取的顆粒的低溫-TEM圖象顯示在圖1b中。
實(shí)施例2-Candesartan cilexitil制備在二甲基乙酰胺中的100mM Candesartan cilexitil溶液。在聲處理下將0.010ml的該溶液快速加入含0.2％w/w聚乙烯吡咯烷酮和0.25mM十二烷基硫酸鈉的0.990ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行75分鐘。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為170nm的晶體。
對比例2重復(fù)實(shí)施例2的方法，但是在混合兩種溶液之后直接中斷聲處理。獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為70nm的無定形顆粒。
實(shí)施例3-N’-[(1E)-(1-芐基-1H-吲哚-3-基)亞甲基]苯并酰肼制備在二甲基乙酰胺中的100mM N’-[(1E)-(1-芐基-1H-吲哚-3-基)亞甲基]苯并酰肼溶液(從Interchim，法國獲得)。在聲處理下將0.010ml的該溶液快速加入含0.2％w/w聚乙烯吡咯烷酮和0.25mM十二烷基硫酸鈉的0.990ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行80分鐘。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為160nm的晶體。
對比例3重復(fù)實(shí)施例3的方法，但是在混合兩種溶液之后直接中斷聲處理。獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為90nm的無定形顆粒。沒有觀察到結(jié)晶物質(zhì)。
實(shí)施例4-比卡胺(bicalutamide)制備在二甲基亞砜中的100mM比卡胺溶液。在聲處理下將0.020ml的該溶液快速加入含0.01％w/w聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和0.25mM十二烷基硫酸鈉的1.980ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行45分鐘。在聲處理之后，加入含1％w/wPVP的475ul溶液以使PVP的濃度升高到0.2％w/w。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為190nm的晶體，該粒度保持恒定至少1小時(shí)。
對比例4重復(fù)實(shí)施例4的方法，但是在混合兩種溶液之后直接中斷超聲處理。PVP的濃度然后在聲處理之后直接升高到0.2％w/w。獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為約190nm的無定形納米顆粒。在1小時(shí)內(nèi)觀察到粒度從190nm增加到300nm(可能由于Ostwald熟化)。
實(shí)施例55-(4-氯苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲基-N-哌啶-1-基-1H-吡唑-3-甲酰胺制備在二甲基乙酰胺中的100mM 5-(4-氯苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲基-N-哌啶-1-基-1H-吡唑-3-甲酰胺溶液(描述在EP 656 354中)。在聲處理下將0.010ml的該溶液快速加入含0.2％w/w聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和0.25mM十二烷基硫酸鈉(SDS)的0.990ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行75分鐘。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為275nm的晶體。該粒度保持恒定至少2.5小時(shí)。
對比例5重復(fù)實(shí)施例5的方法，但是在混合兩種溶液之后直接中斷聲處理。獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為約220nm的無定形顆粒?？赡苡捎贠stwald熟化，粒度在2.5小時(shí)內(nèi)從220nm增加到340nm。
實(shí)施例65-(4-溴苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-乙基-N-哌啶-1-基-1H-吡唑-3-甲酰胺制備在二甲基乙酰胺中的100mM 5-(4-溴苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-乙基-N-哌啶-1-基-1H-吡唑-3-甲酰胺溶液(描述在WO00/46209中)。在聲處理下將0.010ml的該溶液快速加入含0.2％w/w聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和0.25mM十二烷基硫酸鈉的0.990ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行35分鐘。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為190nm的晶體。該粒度保持恒定至少1.5小時(shí)。
對比例6在另一個(gè)實(shí)施方案中，在混合兩種溶液之后直接中斷聲處理。獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為約280nm的無定形顆粒?？赡苡捎贠stwald熟化，粒度在1.5小時(shí)內(nèi)從280nm增加到480nm。
實(shí)施例75，6-二(4-氯苯基)-N-哌啶-1-基-吡嗪-2-甲酰胺制備在二甲基乙酰胺中的100mM 5，6-二(4-氯苯基)-N-哌啶-1-基-吡嗪-2-甲酰胺溶液(描述在PCT GB02/05736中)。在聲處理下將0.010ml的該溶液快速加入含0.2％w/w聚乙烯吡咯烷酮和0.25mM十二烷基硫酸鈉的0.990ml水溶液中。聲處理繼續(xù)進(jìn)行60分鐘。所得的顆粒是平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為170nm的晶體。該結(jié)晶納米顆粒的粒度保持恒定至少1.5小時(shí)。
對比例7重復(fù)實(shí)施例7的方法，但是在混合兩種溶液之后直接中斷聲處理。獲得平均流體動(dòng)力學(xué)直徑為約210nm的無定形納米顆粒?？赡苡捎贠stwald熟化，粒度在1.5小時(shí)內(nèi)從210nm增加到260nm。
附圖簡述圖1a顯示了使用本發(fā)明方法獲得的非洛地平納米晶體的低溫-TEM圖象。
圖1b顯示了根據(jù)對比例1獲得的非洛地平無定形顆粒的低溫-TEM圖象。
權(quán)利要求
1.一種制備納米結(jié)晶顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，包括將以下組分組合a)在水混溶性有機(jī)溶劑中含有基本水不溶性物質(zhì)的第一溶液；與b)含有水和任選穩(wěn)定劑的水相，形成無定形顆粒的分散體；和c)將所得無定形顆粒的分散體進(jìn)行聲處理足夠的時(shí)間，形成基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶顆粒；和任選地除去水混溶性有機(jī)溶劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中納米結(jié)晶顆粒的平均粒度是50-250nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中基本水不溶性物質(zhì)是基本水不溶性藥學(xué)活性化合物。
4.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中基本水不溶性物質(zhì)在組合的溶液和水相中的濃度在工藝步驟(b)之后是10mM或更小。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其中基本水不溶性物質(zhì)在組合的溶液和水相中的濃度在工藝步驟(b)之后是0.5-3mM。
6.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中水相含有穩(wěn)定劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中穩(wěn)定劑包含聚合物分散劑和兩親表面活性劑。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中穩(wěn)定劑包含聚合物分散劑和陰離子表面活性劑。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中聚合物分散劑是聚乙烯吡咯烷酮，陰離子表面活性劑是十二烷基硫酸鈉。
10.根據(jù)權(quán)利要求7-9任一項(xiàng)的方法，其中兩親表面活性劑的濃度低于兩親聚合物的臨界締合濃度。
11.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中第一溶液和水相的組合在快速混合下進(jìn)行。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中快速混合包括在組合期間進(jìn)行聲處理。
13.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中第一溶液和水相的組合在小于30秒內(nèi)進(jìn)行。
14.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中將第一溶液加入水相中。
15.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中在第一溶液和水相組合之后形成的無定形顆粒分散體進(jìn)行聲處理至少10分鐘，優(yōu)選20-100分鐘。
16.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中聲處理在低于50℃的溫度下進(jìn)行。
17.根據(jù)上述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，還包括從含水介質(zhì)中分離納米結(jié)晶顆粒。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種制備納米結(jié)晶顆粒在含水介質(zhì)中的分散體的方法，包括將以下組分組合(i)在水混溶性有機(jī)溶劑中含有基本水不溶性物質(zhì)的第一溶液；(ii)含有水和任選穩(wěn)定劑的水相，形成無定形顆粒的分散體；和(iii)將所得無定形顆粒的分散體進(jìn)行聲處理足夠的時(shí)間，形成基本水不溶性物質(zhì)的納米結(jié)晶固體顆粒。該方法提供平均流體動(dòng)力學(xué)直徑小于1微米、優(yōu)選小于300nm的納米晶體，特別用于制備藥物的納米結(jié)晶分散體。
文檔編號A61K9/51GK1668280SQ03817081
公開日2005年9月14日 申請日期2003年7月14日 優(yōu)先權(quán)日2002年7月18日
發(fā)明者T·U·斯坎策, P·L·林德福爾斯, S·福爾森 申請人:阿斯特拉曾尼卡有限公司