專利名稱：：預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物和方法。更具體地說，本發(fā)明涉及一種藥物組合物和一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的方法，包括作為活性組分的2，3-二氫苯并呋喃衍生物或2，3-二氫苯并噻吩衍生物，以及2，3-二氫苯并呋喃衍生物或2，3-二氫苯并噻吩衍生物在制備這樣的藥物組合物中的用途。
背景技術(shù)：
：近年來，由環(huán)境的污染物比如汽車排出的廢氣，工業(yè)煙道氣和香煙煙霧誘導(dǎo)的呼吸系統(tǒng)疾病比如慢性阻塞性肺病和哮喘逐年流行。以煙霧為代表的包含在環(huán)境污染物中的化學(xué)物質(zhì)，通過在呼吸過程中與氣道接觸而損害氣道，被認(rèn)為是與這些疾病的發(fā)生/發(fā)展密切相關(guān)的。通過大量包含在香煙煙霧中的氧化劑比如活性氧或過氧化物等等引起的氧化緊張是細(xì)胞損傷的重要因素之一。(RahmanI，MacNeeW，Roleofoxidants/antioxidantsinsmoking-inducedlungdiseases.FreeRadicalBiolMed21669-681，1966；GilmourMI，DanielsM，McCrillisRC，WinsettD，SelgradeMK，Airpollutant-enhancedrespiratorydiseaseinexperimentalanimals.EnvironHealthPerspect109(suppl4)619-622，2001)。實(shí)驗(yàn)還表明香煙煙霧不僅誘導(dǎo)細(xì)胞損傷而且加速細(xì)胞因子比如IL-8，G-CSF和MCP-1的產(chǎn)生(MasubuchiT，KoyamaS，SatoE，TakamizawaA，KuboK，SekiguchiM，NagaiS，IzumiT，Smokeextractstimulateslungepithelialcellstoreleaseneutrophilandmonocytechemotacticactivity.AmJPathol1531903，1998；MioT，RombergerDJ，ThompsonAB，RobbinsRA，HeiresA，RennardSI，Cigarettesmokeinducesinterleukin-8releasefromhumanbronchialepithelialcells.AmJRespirCritCareMed1551770，1997)而加重炎癥反應(yīng)。還有報(bào)道說香煙煙霧可誘導(dǎo)LDL的氧化作用(VruwinkKG，GershwinME，SachetP，HalpernG，DavisPA，JInvestAllergolClinImmunol6294，1996；YamaguchiY，MatsunoS，KagotaS，HaginakaJ，KunitomoM，Oxidantsincigarettesmokeextractmodifylow-densitylipoproteinintheplasmaandfacilitateatherogenesisintheaortaofWatanabeheritablehyperlipidemicrabbits.Atherosclerosis156109，2001)?？寡趸瘎┍热缇S生素E預(yù)計(jì)可有效治療或預(yù)防這些疾病，因?yàn)檫@些炎癥反應(yīng)被認(rèn)為是對(duì)氧化緊張的應(yīng)答(MacNeeW，Oxidativestressandlunginflammationinairwaysdisease.EuJPharmacol429195，2001；CentanniS，SantusP，MarcoFD，F(xiàn)umagalliF，ZariniS，SalaA，Thepotentialroleoftocopherolinasthmaandallergies.BioDrugs1581，2001)。事實(shí)上，據(jù)報(bào)道維生素E可抑制由肺泡上皮細(xì)胞中的氧化緊張引起的細(xì)胞損傷，以及可抑制炎癥性細(xì)胞因子比如IL-8的產(chǎn)生(WuD，KogaT，MartinKR，MeydaniM，Atherosclerosis147297，1999)。然而，據(jù)報(bào)道維生素E對(duì)于慢性阻塞性肺病是臨床上無效的(RautalahtiM，VirtamoJ，HaukkaJ，HeinonenOP，SundvallJ，AlbanesD，HuttunenJK，Theeffectofalpha-tocopherolandbeta-carotenesupplementationonCOPDsymptoms.AmJRespirCritCareMed1561447，1997)。這或許因?yàn)榫S生素E是起抗氧化劑的作用，但有時(shí)在某些狀況中還起到氧化促進(jìn)劑的作用。這可通過以下報(bào)道得到支持，據(jù)報(bào)道盡管在其中氧化緊張似乎起重要作用的動(dòng)脈硬化病變中發(fā)生了氧化作用，但所給予的大量維生素E仍以未消耗狀態(tài)殘存下來(SuarnaC，DeanRT，MayJ，StockerR，Humanatheroscleroticplaquecontainsbothoxidizedlipidsandrelativelylargeamountsofa-tocopherolandascorbate.ArteriosclerThrombVascBiol151616，1995)。而且，為產(chǎn)生細(xì)胞損傷抑制效果需要將維生素E長時(shí)間預(yù)處理(例如，在WuD，KogaT，MartinKR，MeydaniM，Atherosclerosis147297，1999中要進(jìn)行20小時(shí)的預(yù)處理)。這樣，在達(dá)到維生素E所作用的病變之前維生素E可能被生物學(xué)氧化緊張或新陳代謝影響，從而不能達(dá)到足夠的改善呼吸系統(tǒng)疾病的病征的效果。用這種方法，維生素E作為預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥劑不是十分有效的，因此，需要開發(fā)預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的替代藥劑。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種藥物組合物和一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的方法。作為解決上述問題的廣泛研究的結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)了一種式(1)代表的化合物具有對(duì)于呼吸系統(tǒng)疾病極好地預(yù)防或治療效果。因此，本發(fā)明提供一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物，包括作為活性組分的式(1)代表的化合物其中X代表氧原子或硫原子；R1代表氫原子或酰基或芳基烷氧羰基基團(tuán)；R2，R3和R4是相同或不同的，并且各自代表氫原子或低級(jí)烷基；和R5和R6是相同或不同的，并且各自代表氫原子，羧基或任選被取代的烷基；或R5和R6可以合起來形成環(huán)烷基或飽和雜環(huán)基團(tuán)；或它們的藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還提供一種治療或預(yù)防呼吸系統(tǒng)疾病的方法，包括給予需要這樣的預(yù)防或治療的患者預(yù)防或治療有效量的由式(1)代表的化合物。本發(fā)明還提供由式(1)代表的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物中的用途。圖1是顯示在人A549細(xì)胞中本發(fā)明的化合物對(duì)由氧化的LDL誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的圖表。圖2是顯示在人A549細(xì)胞中本發(fā)明的化合物對(duì)由過氧化氫叔丁基(T-BuOOH)誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的圖表。發(fā)明的詳細(xì)說明本發(fā)明由式(1)代表的化合物是已知的。JP6-206842A/1994和WO94/08930描述了這些化合物具有抗氧化作用。JP10-72458A/1998和WO97/49388描述了這些化合物體外抑制集聚細(xì)胞中由氧化的LDL引起的損傷。然而，人們不知道本發(fā)明的式(1)化合物可有效用于預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病。用于本發(fā)明的式(1)代表的化合物可以通過描述于下面任一項(xiàng)的方法來合成JP6-206842A/1994和相應(yīng)的US5,574,178或EP0665208B；JP7-330759A/1995和相應(yīng)的US5,789,436或EP0791589A；JP10-72458A/1998和相應(yīng)的US6,133,279或EP0950405A；或JP11-35568A/1999和相應(yīng)的EP0995437A。在本發(fā)明的式(1)中，X優(yōu)選代表氧原子。由R1代表的?；鶊F(tuán)的例子包括含有1-10個(gè)碳原子的脂肪族?；鶊F(tuán)和含有7-10個(gè)碳原子的芳香?；鶊F(tuán)。優(yōu)選的脂肪族?；鶊F(tuán)的例子包括甲?；?，乙?；?，丙?；图乎；鶊F(tuán)，而芳香酰基基團(tuán)的具體的例子包括苯甲?；鶊F(tuán)。優(yōu)選脂肪族?；鶊F(tuán)，其中更優(yōu)選含有1-6個(gè)碳原子的脂肪族酰基基團(tuán)，且尤其優(yōu)選乙?；Ｓ蒖1代表的芳基烷氧羰基基團(tuán)的例子包括含有7-12個(gè)碳原子的芳基烷氧羰基。優(yōu)選的實(shí)例包括芐氧羰基和萘基甲氧羰基基團(tuán)。優(yōu)選，R1是氫原子或?；鶊F(tuán)，更優(yōu)選氫原子和乙酰基，尤其是氫原子。由R2和R3代表的低級(jí)烷基優(yōu)選含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，更優(yōu)選含有3-4個(gè)碳原子的支鏈烷基，尤其是叔丁基。R4優(yōu)選代表氫原子或含有1-4個(gè)碳原子的烷基，更優(yōu)選氫原子或含有3-4個(gè)碳原子的支鏈烷基基團(tuán)，尤其是氫原子。由R5和R6代表的烷基的例子優(yōu)選包括含有1-10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。具體的例子包括甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，s-丁基，正戊基，異戊基，仲戊基，叔戊基，新戊基，正己基，異己基，乙基丁基，正庚基，異庚基，乙基戊基，正辛基，乙基己基，丙基戊基，壬基和癸基基團(tuán)。由R5和R6代表的更優(yōu)選的烷基是含有3-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。由R5和R6形成的環(huán)烷基基團(tuán)的例子包括含有3-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基基團(tuán)。具體的實(shí)例包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)辛基基團(tuán)，更優(yōu)選含有5-8個(gè)碳原子的環(huán)烷基基團(tuán)，尤其是含有4-7個(gè)碳原子的環(huán)烷基基團(tuán)。由R5和R6形成的飽和雜環(huán)基團(tuán)的例子優(yōu)選包括含有1-3個(gè)氧或硫原子的飽和5-12-元雜環(huán)基團(tuán)。具體實(shí)例包括四氫呋喃，四氫噻吩和四氫吡喃基基團(tuán)。更優(yōu)選含有一個(gè)氧原子或硫原子的飽和5-6-元雜環(huán)基團(tuán)，且尤其優(yōu)選含有一個(gè)氧或硫原子的飽和6-元雜環(huán)基團(tuán)。由R5和R6代表的任選被取代的烷基的取代基的例子包括，例如，鹵素，低級(jí)烷基，低級(jí)鏈烯基，低級(jí)炔基，羥基，氨基，單-或二-烷基氨基，羧基，酰基，氰基，烷氧基，芳氧基，硝基，鹵代烷基，芳基和雜芳基基團(tuán)，優(yōu)選芳基，氨基和一或二-烷基氨基基團(tuán)，更優(yōu)選芳基和氨基。這里低級(jí)烷基是指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基基團(tuán)。對(duì)于R5和R6尤其優(yōu)選的基團(tuán)是含有4-7個(gè)碳原子的直鏈烷基，特別是正丁基，正戊基，正己基或正庚基。當(dāng)式(1)的化合物在R5或R6中具有能夠與酸或堿形成加成鹽的基團(tuán)時(shí)，可以形成式(1)代表的本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽。用于形成酸加成鹽的酸的例子包括，例如，無機(jī)酸比如鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸和磷酸；和有機(jī)酸比如乙酸，乳酸，草酸，乙醇酸，酒石酸，蘋果酸和檸檬酸。用于形成堿加成鹽的堿的例子包括堿比如甲胺，乙胺，乙醇胺，吡啶，哌啶，嗎啉和三乙胺。本發(fā)明由式(1)代表的化合物的優(yōu)選的具體例子如下5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并呋喃；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2，2-二乙基-2，3-二氫苯并呋喃；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2，2-二甲基-7-丙基-2，3-二氫苯并呋喃；5-乙酰氧基-2，2-二-異戊基-4，6-二-叔丁基-2，3-二氫苯并呋喃；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2-(5-羥基-4-甲基-3(E)-戊烯基)-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2-羥甲基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二乙基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-正丙基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-異丙基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-正丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-正戊基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；2，2-二-異戊基-4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-正己基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-正庚基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二-正辛基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-辛基-2，3-二氫苯并呋喃；2，4，6-三叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2，2-二芐基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-2-氯甲基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；5-羥基-4，6-二-叔丁基-2，2-二甲基-7-丙基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-(5-羥基-4-甲基-3(E)-戊烯基)-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-羥甲基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；2-氨甲基-4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃-2-羧酸；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1′-環(huán)庚烷；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1′-環(huán)辛烷；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-4′-四氫吡喃；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1′-環(huán)戊烷；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1′-環(huán)己烷；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-4′-四氫硫吡喃；5-羥基-2，2，4，6-四甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，7-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并呋喃；4，6-二甲基-2，2-二-正戊基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；6-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1′-環(huán)庚烷；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并噻吩；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2-碘甲基-2-甲基-2，3-二氫苯并噻吩；5-乙酰氧基-4，6-二-叔丁基-2-(N，N-二甲基氨基甲基)-2-甲基-2，3-二氫苯并噻吩；5-乙酰氧基-2-乙酰氧基甲基-4，6-二-叔丁基-2-甲基-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-(N，N-二甲基氨基甲基)-2-甲基-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-羥甲基-2-甲基-2，3-二氫苯并噻吩4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2-(4，8-二甲基壬3(E)，7-二烯基)-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2-(4，8-二甲基壬基)-2，3-二氫苯并噻吩；4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并噻吩-2-螺-1′-環(huán)己烷；和4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并噻吩-2-螺-4′-四氫吡喃。本發(fā)明式(1)代表的化合物可有效用于預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病，因?yàn)樗@示對(duì)于構(gòu)成氣道和直接與呼吸氣體接觸的支氣管上皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞極好的損傷抑制效果。呼吸系統(tǒng)疾病包括，例如，呼吸道疾病。呼吸道疾病包括，例如，支氣管性哮喘，肺氣腫，慢性阻塞性肺氣腫，小葉中心性肺氣腫，panacinar肺氣腫，急性支氣管炎，慢性支氣管炎，慢性阻塞性支氣管炎，反應(yīng)性呼吸道疾病，囊性纖維化，支氣管擴(kuò)張，獲得性支氣管擴(kuò)張，Kartagener′s綜合癥，肺無氣，急性肺無氣，慢性肺無氣，肺炎，特發(fā)性血小板減少性紫癜，軍團(tuán)桿菌病，鸚鵡病，纖維形成性肺塵埃沉著病，由有機(jī)灰塵引起的疾病，由刺激性氣體和化學(xué)物質(zhì)引起的疾病，肺超敏反應(yīng)，慢性阻塞性肺病和自發(fā)病侵入性肺障礙，這些疾病中更適宜通過本發(fā)明的藥物組合物治療的是肺氣腫，慢性支氣管炎，慢性阻塞性肺病，哮喘，肺炎和支氣管炎，更優(yōu)選慢性阻塞性肺病和哮喘。本發(fā)明的藥物組合物可以通過將作為活性組分的式(1)代表的化合物與生理學(xué)可接受的固體或液體載體(取決于給藥途徑)混合配制成各種劑型。適宜的劑型包括，例如，用于局部、口服、頰、鼻內(nèi)、腸胃外(例如，靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)或皮下)或直腸給藥的制劑或用于吸入或吹入法的制劑，具體地為片劑、藥丸、膠囊、粒劑、溶液、糖漿、懸浮液、乳液、針劑和氣霧劑。由本發(fā)明的式(1)代表的化合物的劑量可根據(jù)患者的年齡、病癥的嚴(yán)重程度、給藥途徑等等適當(dāng)?shù)卮_定，例如在0.1-1000毫克范圍內(nèi)，優(yōu)選10-500毫克每天每成年人。該劑量可以一次或分成若干部分給藥。下面的實(shí)施例進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明，但應(yīng)該理解本發(fā)明不局限于這些實(shí)施例。實(shí)施例在下面的試驗(yàn)中使用下面的化合物?；衔?4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；化合物24，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并呋喃；化合物34，6-二-叔丁基-2，2-二-正戊基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；化合物44，6-二-叔丁基-2，2-二芐基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；化合物52-氨基甲基-4，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃；化合物64，6-二-叔丁基-5-羥基-2-甲基-2，3-二氫苯并呋喃-2-羧酸；化合物74，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1’-環(huán)庚烷；化合物84，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-4’-四氫吡喃；化合物94，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1’-環(huán)戊烷；化合物104，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1’-環(huán)己烷；化合物114，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-4’-四氫硫吡喃；化合物124，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并噻吩；化合物134，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并噻吩-2-螺-1’-環(huán)己烷；化合物144，6-二-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并噻吩-2-螺-4’-四氫吡喃；化合物155-羥基-2，2，4，6-四甲基-2，3-二氫苯并呋喃化合物164，7-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二甲基-2，3-二氫苯并呋喃；化合物174，6-二甲基-2，2-二正戊基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃；和化合物186-叔丁基-5-羥基-2，3-二氫苯并呋喃-2-螺-1’-環(huán)庚烷。這些試驗(yàn)化合物的結(jié)構(gòu)見表1。表1試驗(yàn)化合物的結(jié)構(gòu)試驗(yàn)實(shí)施例1在人A549細(xì)胞中對(duì)由氧化的低密度脂蛋白(氧化的LDL)誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用(1)氧化的LDL是通過將1毫克/毫升兔LDL在含有10μmol/LCuSO4的PBS(-)中在37℃下維持24小時(shí)來制備。用于此試驗(yàn)中的人類A549細(xì)胞是現(xiàn)有的，登錄號(hào)為ATCC-CCL-185，具有II型肺泡上皮細(xì)胞的性質(zhì)(LieberM，SmithB，SzakalA，Nelson-ReesW，TodaroG.，Acontinuoustumor-celllinefromahumanlungcarcinomawithpropertiesoftypeIIalveolarepithelialcells.IntJCancer1976Jan15；17(1)62-70)。將這些細(xì)胞分散在含有10％FBS的F12K介質(zhì)中，并以2.5×104細(xì)胞/500μl/孔涂覆在24-孔平皿中。將細(xì)胞在37℃培養(yǎng)18小時(shí)，而后將介質(zhì)用含有2％FBS的F12K介質(zhì)替代。在這時(shí)候，加入2.5μl每種試驗(yàn)化合物在乙醇中的溶液或懸浮液，試驗(yàn)化合物濃度為每孔中3μmol/L和30μmol/L。在37℃培養(yǎng)6小時(shí)后，每孔加入50μl氧化的LDL的懸浮液，氧化的LDL濃度為每個(gè)孔100微克/毫升。在37℃培養(yǎng)24小時(shí)后，從每個(gè)孔收集200μl的上清液，由細(xì)胞泄漏的乳酸脫氫酶(LDH)的量通過SFBC方法確定。用和上述試驗(yàn)同樣的方法進(jìn)行進(jìn)一步的試驗(yàn)，不同處在于每個(gè)試驗(yàn)化合物是在進(jìn)行介質(zhì)替換后培養(yǎng)6小時(shí)后加入到細(xì)胞培養(yǎng)物中的，并在氧化的LDL之前緊接著向其中加入，而不是當(dāng)將介質(zhì)用含有2％FBS分F12K介質(zhì)替換時(shí)加入的。上清液中的較高的LDH水平表示由氧化的LDL誘導(dǎo)的更大的細(xì)胞損傷。單獨(dú)地，用和上述試驗(yàn)同樣的方法用一個(gè)孔進(jìn)行一個(gè)實(shí)驗(yàn)，只不過沒有向孔中加入試驗(yàn)化合物。將在此孔中LDH的水平定義為0％細(xì)胞保護(hù)。另外，用另一個(gè)孔在沒有加入試驗(yàn)化合物或氧化的LDL但加入生理鹽水的情況下進(jìn)行另外的實(shí)驗(yàn)。將在此孔中LDH的水平定義為100％細(xì)胞保護(hù)。用這些LDH水平來計(jì)算用于上述試驗(yàn)中的每個(gè)試驗(yàn)化合物的細(xì)胞保護(hù)。結(jié)果見表2。表2在A549細(xì)胞中本發(fā)明的化合物對(duì)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用每個(gè)值是指平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差。由表2可見，本發(fā)明的化合物可在人類A549細(xì)胞中抑制細(xì)胞損傷。試驗(yàn)實(shí)施例2在人A549細(xì)胞中對(duì)由氧化的低密度脂蛋白(氧化的LDL)誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用(2)按照類似于試驗(yàn)實(shí)施例1的方式進(jìn)行此試驗(yàn)實(shí)施例，除了使用化合物3，普羅布考和α-生育酚作為試驗(yàn)化合物。對(duì)普羅布考和α-生育酚進(jìn)行測(cè)定以與本發(fā)明的化合物進(jìn)行比較。在此試驗(yàn)中，試驗(yàn)化合物是在介質(zhì)替換后培養(yǎng)6小時(shí)被加入到細(xì)胞培養(yǎng)物中，和在加入氧化的LDL之前立刻加入的。結(jié)果見圖1。由圖1可見，在使用化合物3的情況下，當(dāng)化合物3的濃度超過約10μmol/L時(shí)％細(xì)胞保護(hù)開始迅速地增加，而在使用普羅布考或α-生育酚的情況下，％細(xì)胞保護(hù)不增加或僅僅慢慢地增加。試驗(yàn)實(shí)施例3在正常人支氣管/氣管上皮細(xì)胞中對(duì)由氧化的LDL誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用按類似于試驗(yàn)實(shí)施例1的方式進(jìn)行此試驗(yàn)實(shí)施例，除了用正常人支氣管/氣管上皮細(xì)胞替代人A549細(xì)胞(NHBEw/RABioWhittakerCO.)，細(xì)胞培養(yǎng)物介質(zhì)由含有10％FBS的F12K介質(zhì)變?yōu)锽EGM(R)介質(zhì)，并且不作介質(zhì)的替換。結(jié)果見表3。表3在正常人支氣管/氣管上皮細(xì)胞中本發(fā)明的化合物對(duì)細(xì)胞損傷的保護(hù)作用每個(gè)值是指平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差。由表3可見，本發(fā)明的化合物可在人類支氣管/氣管上皮細(xì)胞中抑制細(xì)胞損傷。試驗(yàn)實(shí)施例4在人A549細(xì)胞中對(duì)由過氧化氫叔丁基誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷的保護(hù)作用按類似于試驗(yàn)實(shí)施例1的方式進(jìn)行此試驗(yàn)實(shí)施例，除了僅僅使用化合物3作為試驗(yàn)化合物、而且以每個(gè)孔200μmol/毫升加入過氧化氫叔丁基(t-BuOOH)的生理鹽水溶液，代替以每個(gè)孔100微克/毫升加入氧化LDL的懸浮液。結(jié)果見圖2。由圖2可見，化合物3可抑制通過過氧化物，過氧化氫叔丁基誘導(dǎo)的在人類的A549細(xì)胞中的細(xì)胞損傷。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明的由式(1)代表的化合物具有對(duì)呼吸細(xì)胞的保護(hù)作用，可有效用于預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病。權(quán)利要求1.一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物，包括作為活性組分的式(1)代表的化合物其中X代表氧原子或硫原子；R1代表氫原子或?；蚍蓟檠豸驶鶊F(tuán)；R2，R3和R4是相同或不同的，并且各自代表氫原子或低級(jí)烷基；和R5和R6是相同或不同的，并且各自代表氫原子，羧基或任選被取代的烷基；或R5和R6可以合起來形成環(huán)烷基或飽和雜環(huán)基團(tuán)；或它們的藥學(xué)上可接受的鹽。2.權(quán)利要求1的組合物，其中X代表氧原子。3.權(quán)利要求1的組合物，其中R1代表氫原子。4.權(quán)利要求1的組合物，其中R2和R3各自代表低級(jí)烷基。5.權(quán)利要求4的組合物，其中低級(jí)烷基是叔丁基。6.權(quán)利要求1的組合物，其中R4代表氫原子。7.權(quán)利要求1的組合物，其中R5和R6各自代表烷基。8.權(quán)利要求7的組合物，其中烷基是正丁基，正戊基，正己基或正庚基基團(tuán)。9.權(quán)利要求1的組合物，其中式(1)代表的化合物是4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正丁基-2，3-二氫苯并呋喃，4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并呋喃，4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正己基-2，3-二氫苯并呋喃或4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正庚基-2，3-二氫苯并呋喃。10.權(quán)利要求9的組合物，其中式(1)代表的化合物是4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并呋喃。11.權(quán)利要求1的組合物，其中呼吸系統(tǒng)疾病是一種呼吸道疾病。12.權(quán)利要求11的組合物，其中呼吸道疾病選自支氣管性哮喘，肺氣腫，慢性阻塞性肺氣腫，小葉中心性肺氣腫，panacinar肺氣腫，急性支氣管炎，慢性支氣管炎，慢性阻塞性支氣管炎，反應(yīng)性呼吸道疾病，囊性纖維化，支氣管擴(kuò)張，獲得性支氣管擴(kuò)張，Kartagener′s綜合癥，肺無氣，急性肺無氣，慢性肺無氣，肺炎，特發(fā)性血小板減少性紫癜，軍團(tuán)桿菌病，鸚鵡病，纖維形成性肺塵埃沉著病，由有機(jī)灰塵引起的疾病，由刺激性氣體和化學(xué)物質(zhì)引起的疾病，肺超敏反應(yīng)，慢性阻塞性肺病和自發(fā)病侵入性肺障礙。13.權(quán)利要求12的組合物，其中呼吸道疾病是肺氣腫。14.權(quán)利要求12的組合物，其中呼吸道疾病是急性支氣管炎，慢性支氣管炎，或慢性阻塞性支氣管炎。15.權(quán)利要求14的組合物，其中呼吸道疾病是慢性支氣管炎。16.權(quán)利要求12的組合物，其中呼吸道疾病是慢性阻塞性肺病。17.權(quán)利要求12的組合物，其中呼吸道疾病是支氣管哮喘。18.權(quán)利要求12的組合物，其中呼吸道疾病是肺炎。19.一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的方法，包括給予需要這樣的預(yù)防或治療的患者預(yù)防或治療有效量的由式(1)代表的化合物其中X代表氧原子或硫原子；R1代表氫原子或?；蚍蓟檠豸驶鶊F(tuán)；R2，R3和R4是相同或不同的，并且各自代表氫原子或低級(jí)烷基；和R5和R6是相同或不同的，并且各自代表氫原子，羧基或任選被取代的烷基；或R5和R6可以合起來形成環(huán)烷基或飽和雜環(huán)基團(tuán)；或它們的藥學(xué)上可接受的鹽。20.權(quán)利要求19的方法，包括對(duì)肺或消化道給予式(1)代表的化合物。21.權(quán)利要求19的方法，其中X代表氧原子。22.權(quán)利要求19的方法，其中R1代表氫原子。23.權(quán)利要求19的方法，其中R2和R3各自代表低級(jí)烷基。24.權(quán)利要求23的方法，其中低級(jí)烷基是叔丁基。25.權(quán)利要求19的方法，其中R4代表氫原子。26.權(quán)利要求19的方法，其中R5和R6各自代表烷基。27.權(quán)利要求26的方法，其中烷基是正丁基，正戊基，正己基或正庚基基團(tuán)。28.權(quán)利要求19的方法，其中式(1)代表的化合物是4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2二-正丁基-2，3-二氫苯并呋喃，4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并呋喃，4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正己基-2，3-二氫苯并呋喃或4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正庚基-2，3-二氫苯并呋喃。29.權(quán)利要求28的方法，其中式(1)代表的化合物是4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并呋喃。30.權(quán)利要求19的方法，其中呼吸系統(tǒng)疾病是一種呼吸道疾病。31.權(quán)利要求30的方法，其中呼吸道疾病選自支氣管性哮喘，肺氣腫，慢性阻塞性肺氣腫，小葉中心性肺氣腫，panacinar肺氣腫，急性支氣管炎，慢性支氣管炎，慢性阻塞性支氣管炎，反應(yīng)性呼吸道疾病，囊性纖維化，支氣管擴(kuò)張，獲得性支氣管擴(kuò)張，Kartagener′s綜合癥，肺無氣，急性肺無氣，慢性肺無氣，肺炎，特發(fā)性血小板減少性紫癜，軍團(tuán)桿菌病，鸚鵡病，纖維形成性肺塵埃沉著病，由有機(jī)灰塵引起的疾病，由刺激性氣體和化學(xué)物質(zhì)引起的疾病，肺超敏反應(yīng)，慢性阻塞性肺病和自發(fā)病侵入性肺障礙。32.權(quán)利要求31的方法，其中呼吸道疾病是肺氣腫。33.權(quán)利要求31的方法，其中呼吸道疾病是急性支氣管炎，慢性支氣管炎，或慢性阻塞性支氣管炎。34.權(quán)利要求33的方法，其中呼吸道疾病是慢性支氣管炎。35.權(quán)利要求31的方法，其中呼吸道疾病是慢性阻塞性肺病。36.權(quán)利要求31的方法，其中呼吸道疾病是支氣管哮喘。37.權(quán)利要求31的方法，其中呼吸道疾病是肺炎。38.式(1)代表的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽在制備預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的藥物組合物中的用途其中X代表氧原子或硫原子；R1代表氫原子或?；蚍蓟檠豸驶鶊F(tuán)；R2，R3和R4是相同或不同的，并且各自代表氫原子或低級(jí)烷基；和R5和R6是相同或不同的，并且各自代表氫原子，羧基或任選被取代的烷基；或R5和R6可以合起來形成環(huán)烷基或飽和雜環(huán)基團(tuán)；39.權(quán)利要求38的用途，其中X代表氧原子。40.權(quán)利要求38的用途，其中R1代表氫原子。41.權(quán)利要求38的用途，其中R2和R3各自代表低級(jí)烷基。42.權(quán)利要求41的用途，其中低級(jí)烷基是叔丁基。43.權(quán)利要求38的用途，其中R4代表氫原子。44.權(quán)利要求38的用途，其中R5和R6各自代表烷基。45.權(quán)利要求44的用途，其中烷基是正丁基，正戊基，正己基或正庚基基團(tuán)。46.權(quán)利要求38的用途，其中式(1)代表的化合物是4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2二-正丁基-2，3-二氫苯并呋喃，4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并呋喃，4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正己基-2，3-二氫苯并呋喃或4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正庚基-2，3-二氫苯并呋喃。47.權(quán)利要求46的用途，其中式(1)代表的化合物是4，6-二-叔丁基-5-羥基-2，2-二-正戊基-2，3-二氫苯并呋喃。48.權(quán)利要求38的用途，其中呼吸系統(tǒng)疾病是一種呼吸道疾病。49.權(quán)利要求48的用途，其中呼吸道疾病選自支氣管性哮喘，肺氣腫，慢性阻塞性肺氣腫，小葉中心性肺氣腫，panacinar肺氣腫，急性支氣管炎，慢性支氣管炎，慢性阻塞性支氣管炎，反應(yīng)性呼吸道疾病，囊性纖維化，支氣管擴(kuò)張，獲得性支氣管擴(kuò)張，Kartagener′s綜合癥，肺無氣，急性肺無氣，慢性肺無氣，肺炎，特發(fā)性血小板減少性紫癜，軍團(tuán)桿菌病，鸚鵡病，纖維形成性肺塵埃沉著病，由有機(jī)灰塵引起的疾病，由刺激性氣體和化學(xué)物質(zhì)引起的疾病，肺超敏反應(yīng)，慢性阻塞性肺病和自發(fā)病侵入性肺障礙。50.權(quán)利要求49的用途，其中呼吸道疾病是肺氣腫。51.權(quán)利要求49的用途，其中呼吸道疾病是急性支氣管炎，慢性支氣管炎，或慢性阻塞性支氣管炎。52.權(quán)利要求51的用途，其中呼吸道疾病是慢性支氣管炎。53.權(quán)利要求49的用途，其中呼吸道疾病是慢性阻塞性肺病。54.權(quán)利要求49的用途，其中呼吸道疾病是支氣管哮喘。55.權(quán)利要求49的用途，其中呼吸系統(tǒng)疾病是肺炎。全文摘要本發(fā)明的目的是提供一種藥物組合物和一種預(yù)防或治療呼吸系統(tǒng)疾病的方法。藥物組合物包括作為活性成分的式(1)代表的化合物或它們的藥學(xué)上可接受的鹽。文檔編號(hào)A61P7/00GK1646118SQ0380750公開日2005年7月27日申請(qǐng)日期2003年3月28日優(yōu)先權(quán)日2002年3月29日發(fā)明者J·埃弗西米歐,小森利彥,酒井三木夫,進(jìn)士修,高島佳昭,川邊良樹申請(qǐng)人:中外制藥株式會(huì)社