專利名稱：人胰高血糖素樣多肽－1模擬物和它們?cè)谥委熖悄虿『拖嚓P(guān)狀況中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供新穎的人胰高血糖素樣多肽-1(glucagon-like peptide-1，GLP-1)的肽模擬物(peptide mimics)，其模擬了天然肽的生物活性，與GLP-1天然序列相比，對(duì)蛋白水解切割表現(xiàn)出更高的穩(wěn)定性，并因此有效地改善糖尿病狀況。
背景技術(shù)：
胰高血糖素樣多肽-1(GLP-1)是一種重要的腸道激素，在葡萄糖代謝和胃腸的分泌和代謝中起著調(diào)節(jié)的功能。人GLP-1是一個(gè)有30個(gè)氨基酸殘基的多肽，它源于前胰高血糖素原，其合成發(fā)生在，例如，遠(yuǎn)端回腸的L細(xì)胞、胰腺和腦中。由前胰高血糖素原產(chǎn)生GLP-1(7-36)酰胺和GLP-2的過(guò)程主要發(fā)生在L細(xì)胞中。一般在對(duì)食物攝入的應(yīng)答中分泌GLP-1，特別是糖和脂刺激GLP-1分泌。GLP-1已經(jīng)被確認(rèn)為是胰島素分泌作用的很強(qiáng)的和有效的刺激物。GLP-1降低胰高血糖素的濃度，減緩胃的排空，刺激胰島素的生物合成和增加胰島素的靈敏性(Nauck，1997，Horm.Metab.Res.471253-1258)。當(dāng)葡萄糖耐受性受到損害時(shí)，GLP-1也提高B細(xì)胞對(duì)葡萄糖的感受和反應(yīng)能力(Byrne，Eur.J.Clin.Invest.，2872-78，1998)。人的GLP-1的促胰島素作用增加了葡萄糖的代謝速率，部分是因?yàn)樘岣吡艘葝u素的水平，部分是因?yàn)樵黾恿艘葝u素的靈敏性(D’Alessio，Eur.J.Clin.Invest.，2872-78，1994)。以上所述的GLP-1的藥理性質(zhì)使之成為一種很理想的治療II型糖尿病的治療藥劑。另外，最近的研究表明在普通個(gè)體中，輸注些許超生理量的GLP-1會(huì)增強(qiáng)飽腹感，并且降低食物攝入量(Flint，A.，Raben，A.，Astrup，A.和Holst，J.J.，J.Clin.invest，101515-520，1998；Guswiller，J.P.，Goke，B.，Drewe，J.，Hildebrand，P.，Ketterer，S.，Handschin，D.，Winterhaider，R.，Conen，D和beglinger，C.Gut 4481-86，1999；)。已經(jīng)報(bào)道在肥胖患者中也有對(duì)食物攝入和飽腹感的這種影響(Naslund，E.，Barkeling，B.，King，N.，Gutniak，M.，Blundell，J.E.，Holst，J.J.，Rossner，S.，和Hellstrom，P.M.，Int.J.Obes.Relat.Metab.Disord.，23304-311，1999)。在以上引用的研究中，也認(rèn)為GLP-1對(duì)胃排空有顯著作用。胃排空導(dǎo)致膳食后葡萄糖偏移。已經(jīng)表明GLP-1除了刺激胰島素分泌外，還刺激轉(zhuǎn)錄因子IDX-1的表達(dá)，同時(shí)刺激B細(xì)胞再生，因此可以是一個(gè)有效的糖尿病治療和/或預(yù)防藥劑(Stoffers，D.A.，Kieffer，T.J.Hussain，M.A.，Drucker，D.J.，Bonner-weir，S.，Habener，J.F.和Egan，J.M.Diabetes，40741-748，2000)。也已經(jīng)表明GLP-1可以抑制胃酸分泌(Wettergren，A.，Scholdager，B.，Mortensen，P.E.，Myhre，J.，Christiansen，J.，Holst，J.J.，Dig.Dis.Sci.，38665-673，1993)，這可以防止胃潰瘍。
GLP-1是一種腸促胰島素激素，例如，一種增加膳食誘導(dǎo)的胰島素分泌的腸激素(Holst，J.J.，Curr.Med.Chem.，61005-1017，1999)。它是編碼胰高血糖素原的胰高血糖素基因的產(chǎn)物。此基因不僅僅在胰腺的A細(xì)胞中表達(dá)，而且在腸粘膜的內(nèi)分泌L細(xì)胞中表達(dá)。胰高血糖素原是一種含160個(gè)氨基酸的肽(蛋白質(zhì))。胰高血糖素原的進(jìn)一步加工導(dǎo)致產(chǎn)生a)胰高血糖素，b)N-端，推測(cè)為無(wú)活性的片斷，和c)大的C-端片斷，一般認(rèn)為是“主要的胰高血糖素原片斷”。此片斷被認(rèn)為是生物學(xué)上無(wú)活性的。盡管此片斷在胰腺和腸道L細(xì)胞中存在，但是僅僅在腸道中觀察到“主要的胰高血糖素原片斷”斷裂導(dǎo)致生成兩種高度同源的肽，一般認(rèn)為是GLP-1和GLP-2。這兩種肽有重要的生物活性。這樣，存在于L細(xì)胞的GLP-1的氨基酸序列與胰高血糖素原的78-107部分相同。
本發(fā)明提供新穎的GLP-1肽模擬物，它模擬天然肽的生物活性，并因此對(duì)糖尿病狀況的改善有效。
目前，使用GLP-1型分子進(jìn)行治療出現(xiàn)了一個(gè)重要問(wèn)題，因?yàn)檫@些肽的血清半衰期相當(dāng)短。例如，GLP-1(7-37)血清半衰期僅僅3到5分鐘。因此，生物活性的GLP-1模擬物存在一個(gè)關(guān)鍵需求即有長(zhǎng)期的藥效學(xué)特征。
發(fā)明概述
根據(jù)本發(fā)明，提供具有式I結(jié)構(gòu)的合成的被分離的多肽，
A-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Y-Z-B
I
其中，
Xaa1-9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基；
Y和Z是氨基酸殘基；
其中，Y的α-碳原子上的取代物(substitutions)中的一個(gè)和Z的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)都可以各自獨(dú)立地被選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基、芳基烷基和雜芳基烷基、雜環(huán)烷基的初級(jí)取代基(primary substituent)取代，所述的初級(jí)取代基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基的次級(jí)取代基(secondary substituent)選擇性地取代；所說(shuō)的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；Ⅴ；?、羧基烷基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基酰基、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；⒘蛩峄?、磺胺基、烷基磺?；?、芳基磺?；蛄姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代；其中，初級(jí)取代基或次級(jí)取代基可以通過(guò)共價(jià)鍵選擇性地被橋連，從而形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
其中，Z的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
A和B選擇性地存在；
其中當(dāng)A存在時(shí)，A是氫、一個(gè)氨基酸或含有大約1到大約15個(gè)氨基酸殘基的肽、R基團(tuán)、R-C(O)(酰胺)基團(tuán)、氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2或R4R5N-SO2；
其中R選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧烷基；
其中R4和R5各自獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧基烷基；
其中Xaa1的α-氨基被氫或烷基取代，所說(shuō)的烷基可以選擇性地與A成環(huán)；
其中當(dāng)B存在時(shí)，B是OR1、NR1R2或一個(gè)氨基酸或含有1到15個(gè)氨基酸殘基的肽，優(yōu)選的從1到10，更優(yōu)選的從1到5，在其C-末端是羧酰胺、被取代的羧酰胺、酯、游離的羧酸、或氨基醇；
其中R1和R2獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基或雜芳氧烷基；
Y和Z的α-碳原子上優(yōu)選的取代物是選自雜芳基芳基甲基、芳基雜芳基甲基或形成二苯基丙氨酸殘基(Bip或bip)的二苯基甲基，其中的任何一個(gè)也可以選擇性地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；?、酰基、羧基烷基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；?、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；?、硫酸基、磺胺基、烷基磺?；?、芳基磺?；土姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代。
進(jìn)一步的實(shí)施方式包括分離的多肽，其中Y的α-碳上的另一個(gè)取代物被氫、甲基或乙基取代；其中Z的α-碳上的另一個(gè)取代物被氫、甲基或乙基取代。
進(jìn)一步具體例子包括如以上描述的分離的多肽，其中
Xaa1是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自雜環(huán)烷基、雜芳基、雜芳基烷基和芳基烷基的初級(jí)取代基，所述的初級(jí)取代基選擇性地被選自雜芳基或雜環(huán)基的次級(jí)取代基取代；其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa2是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或環(huán)烷基，該烷基可以選擇性地與Xaa2的氮形成一個(gè)環(huán)；并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa3是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、磺?；榛?、雜烷基和巰基烷基；而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa4是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳不被取代，或者其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自氨基烷基、羧基烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基；
Xaa5是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或羥基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa6是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳基烷基和雜芳基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa7是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是羥基烷基；
Xaa8是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、羥基烷基、雜芳基烷基和羧酰胺烷基，并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、羧基芳基、磺?；榛?、羧酰胺烷基和雜芳基烷基；并且
其中，A是氫、一個(gè)氨基酸或含有大約1到大約5個(gè)氨基酸殘基的肽，R基團(tuán)，R-C(O)酰胺基團(tuán)，氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)，脲基R4R5N-C(O)，磺胺基R-SO2，或R4R5N-SO2；
優(yōu)選的是分離的肽，其中
Xaa1是選自L-組氨酸、D-組氨酸、L-N-甲基組氨酸、D-N-甲基組氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸和D-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa2是選自L-丙氨酸、D-丙氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、D-絲氨酸、D-天冬酰胺、L-N-甲基-丙氨酸、D-N-甲基-丙氨酸、L-4-硫代脯氨酸、L-脯氨酸(t-4-OH)、L-2-Pip、L-2-Azt、α-氨基異丁酸(Aib)、S-或R-Iva和Acc3的氨基酸殘基；
Xaa3是選自L-谷氨酸、L-N-甲基-谷氨酸、L-天冬氨酸、D-天冬氨酸、L-組氨酸、L-Gla、L-Adp、L-半胱氨酸和L-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa4是選自甘氨酸、L-組氨酸、L-賴氨酸和L-天冬氨酸的氨基酸殘基；
Xaa5是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-正亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-Nva和L-Aoc的氨基酸殘基；
Xaa6是選自L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-酪氨酸(Bzl)、酪氨酸(3-NO2)、L-正亮氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸(五氟)、D-苯丙氨酸(五氟)、苯丙氨酸(2-氟)、苯丙氨酸(3-氟)、苯丙氨酸(4-氟)、苯丙氨酸(2，3-二氟)、苯丙氨酸(3，4-二氟)、苯丙氨酸(3，5-二氟)、L-苯丙氨酸(2，6-二氟)、苯丙氨酸(3，4，5-三氟)、苯丙氨酸(2-碘)、苯丙氨酸(2-OH)、苯丙氨酸(2-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氰基)、苯丙氨酸(2-氯)、苯丙氨酸(2-NH2)、苯丙氨酸(3-NH2)、苯丙氨酸(4-NH2)、苯丙氨酸(4-NO2)、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(4-烯丙基)、苯丙氨酸(正丁基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己氧基)、苯丙氨酸(4-苯氧基)、2-萘基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸、L-2-Thi、L-α-甲基-苯丙氨酸、D-α-甲基-苯丙氨酸、L-α-乙基-苯丙氨酸、D-α-乙基-苯丙氨酸、L-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)和D-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)的氨基酸殘基；
Xaa7是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-絲氨酸和L-高絲氨酸(hSer)的氨基酸殘基；
Xaa8是選自L-絲氨酸、L-高絲氨酸、L-組氨酸、L-天冬酰胺和L-α-甲基-絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa9是選自L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-Gla、L-Adp、L-天冬酰胺和L-組氨酸的氨基酸殘基；
另外的實(shí)施方案包括那些實(shí)施方案，其中
Y選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2’-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-乙基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基)、L-Bip(2-正丙基，4-甲氧基)、L-Bip(2-正丙基，2’-甲基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(2，3-二甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4-二乙基)、L-Bip(2-甲基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-乙基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3-二甲氧基)、L-Bip(2，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-乙基、4，5-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-CH2OH、4-甲氧基)、L-Bip(2-Ac)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(4-NH-Ac)、L-Bip(2，3-二氯)、L-Bip(2，4-二氯)、L-Bip(2，5-二氯)、L-Bip(3，4-二氯)、L-Bip(4-氟)、L-Bip(3，4-二氟)、L-Bip(2，5-二氟)、L-Bip(3-正丙基)、L-Bip(4-正丙基)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(3-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(4-叔丁基)、L-Bip(3-苯基)、L-Bip(2-氯)、L-Bip(3-氯)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(3-氟)、L-Bip(2-CF3)、L-Bip(3-CF3)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(3-NO2)、L-Bip(3-OCF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(3-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-羥基)、L-Bip(3-羥基)、L-Bip(4-羥基)、L-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸[4-(1-炔丙基)]、L-苯丙氨酸[4-(1-丙烯基)]、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(2-苯并(b)呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-二苯并呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-吩噻(phenoxathiin))-苯丙氨酸、4-(2-苯并(b)噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-喹啉)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、4-(4-(3，5-二甲基異噁唑))-苯丙氨酸、4-(2，4-二甲氧基嘧啶)-苯丙氨酸、高苯丙氨酸(homoPhe)、酪氨酸(Bzl)、苯丙氨酸(3，4-二氯)、苯丙氨酸(4-碘)、2-萘基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip和D-α-甲基-Bip；
Z選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2′-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基，2′-甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2-甲基，2′-甲基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3，4，5，-四甲基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(2-苯基)、L-Bip(4-苯基)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-CH2-COOH)、D-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(2′-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸(3-苯基)、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(3-吡啶基)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、2-萘基-丙氨酸、2-芴基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip、D-α-甲基-Bip、L-苯丙氨酸(4-NO2)和L-苯丙氨酸(4-碘)；
A選自H、乙酰基、β-丙氨酸、Ahx、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、Nva、天冬酰胺、精氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸、酪氨酸、己內(nèi)酰胺、L-Bip、L-絲氨酸(Bzl)、3-吡啶基丙氨酸、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(五氟)、4-甲基苯甲基、4-氟苯甲基、正丙基、正己基、環(huán)己基甲基、6-羥戊基、2-噻吩基甲基、3-噻吩基甲基、五氟苯甲基、2-萘基甲基、4-二苯基甲基、9-蒽基甲基、苯甲基、(S)-(2-氨基-3-苯基)丙基、甲基、2-氨基乙基和(S)-2-氨基丙基；和
B選自O(shè)H、NH2、色氨酸-NH2、2-萘基丙氨酸-NH2、苯丙氨酸(五氟)-NH2、絲氨酸(Bzl)-NH2、苯丙氨酸(4-NO2)-NH2、3-吡啶基丙氨酸-NH2、Nva-NH2、賴氨酸-NH2、天冬氨酸-NH2、絲氨酸-NH2、組氨酸-NH2、酪氨酸-NH2、苯丙氨酸-NH2、L-Bip-NH2、D-絲氨酸-NH2、甘氨酸-OH、β-丙氨酸-OH、γ-氨基丁酸-OH(GABA-OH)和APA-OH。
當(dāng)A不存在時(shí)，Xaa1是R基、R-C(O)(酰胺)基、氨基甲酸酯基RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2、或R4R5N-SO2；
其中
R選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基、雜芳氧烷基和雜芳基烷氧基烷基；并且其中
R4和R5每一個(gè)都獨(dú)立的選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧基烷基、雜芳基烷基和雜芳氧基烷基。
當(dāng)B不存在時(shí)，Z是OR1、NR2R2或氨基醇；其中
R1和R2都獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧基烷基、雜芳基烷基或雜芳氧基烷基。
優(yōu)選的是分離的多肽，其中Xaa1(在可適用的地方)，Xaa2和Xaa3是N-H或N-烷基化的，優(yōu)選N-甲基化的氨基酸殘基。
優(yōu)選的，分離的多肽是10mer(10聚體)到15mer(15聚體)，該多肽結(jié)合并且活化GLP-1受體。
本發(fā)明也提供制備多肽的方法，該多肽模擬了多肽受體激動(dòng)劑(polypeptide receptor agonist)活性。
根據(jù)本發(fā)明，在此描述的合成的分離的肽具有模擬GLP多肽的生物活性的能力，優(yōu)選模擬GLP-1。這些合成的GLP-1肽模擬物表現(xiàn)出理想的體內(nèi)性質(zhì)，因此使其成為口服或不經(jīng)腸道施用的理想的治療候選藥。
本發(fā)明也提供式1的分離的多肽，其中該多肽是胰高血糖素樣多肽的衍生物。優(yōu)選的是胰高血糖素樣肽-1的衍生物。
本發(fā)明提供式1的化合物，采用這種化合物的藥物組合物，使用這些化合物的方法。特別地，本發(fā)明提供一種藥物組合物，包括治療有效量的式I化合物，其可以是單獨(dú)的或者與藥學(xué)上可接受的載體組合。
進(jìn)一步提供治療或延緩糖尿病，特別是II型糖尿病，包括糖尿病并發(fā)癥，包括視網(wǎng)膜病、神經(jīng)障礙、腎病和傷口愈合延緩，和相關(guān)疾病例如胰島素抵抗(受損的葡萄糖內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定)，高血糖癥，高胰島素血癥，血中脂肪酸或甘油水平提高，肥胖癥，高脂血癥，包括高甘油三酯血癥，X綜合征，動(dòng)脈粥樣硬化，高血壓的發(fā)展或發(fā)生的方法，和提供高密度脂蛋白的水平的方法，其中治療有效量的式I化合物被施用于哺乳動(dòng)物，例如，人，需要治療的患者。
發(fā)明的化合物可以單獨(dú)使用，與本發(fā)明的別的化合物聯(lián)合使用，或與在此描述的治療領(lǐng)域內(nèi)的一種或多種別的活性藥劑聯(lián)合使用。另外，提供治療糖尿病和以上和以下定義的相關(guān)疾病的方法，其中，式I的化合物和至少一種別的類型的治療藥劑，例如抗糖尿病藥劑，將血脂藥劑或抗肥胖藥劑的組合以治療有效量施用于需要治療的人類患者。
附圖簡(jiǎn)述


圖1顯示scGTT中靜脈內(nèi)輸注化合物A和GLP-1對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
圖2顯示scGTT中靜脈內(nèi)輸注化合物B和GLP-1對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
圖3顯示scGTT中皮下注射化合物A和GLP-1對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
圖4顯示scGTT中皮下注射化合物B和GLP-1對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
圖5顯示ipGTT模型中皮下注射化合物C對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
圖6顯示ipGTT模型中皮下注射化合物D對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
圖7顯示ipGTT模型中皮下注射化合物GLP-1對(duì)鼠中血漿葡萄糖的影響。
發(fā)明詳述
以下定義適用于在此說(shuō)明書(shū)中遍布使用的術(shù)語(yǔ)，除非在特定例子中有別的限制。
除非有別的說(shuō)明，否則在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“氨基醇”包括其羧基被替代(還原)為甲基醇的天然的或非天然的氨基酸例如纈氨醇，甘氨醇，丙氨醇，芳基丙氨醇，雜芳基丙氨醇。
除非有別的說(shuō)明，否則在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“烷基”包括直鏈和支鏈的烴，在一般的鏈中，含1到40個(gè)碳，優(yōu)選的1到20個(gè)碳，更優(yōu)選的1到8個(gè)碳，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，叔丁基，異丁基，戊基，己基，異己基，庚基，4，4-二甲基戊基，辛基，2，2，4-三甲基戊基，壬基，癸基，十一基，十二基，它們的各種支鏈異構(gòu)體，等等。進(jìn)一步，如在此定義的烷基，可以選擇性的在任何可取代的碳原子上用一個(gè)或多個(gè)功能基團(tuán)，例如，但不局限于，烷基，芳基，烯基，炔基，羥基，芳基烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，烷氧基，芳基烷氧基，雜芳氧基，雜芳基烷氧基，烷醇基，鹵素，氫氧根，硫醇，硝基，氰基，羧基，羰基(＝O)，羧酰胺，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，酰胺，烷基氨基，芳基胺，雜芳基胺，疊氮基，胍基，脒基，膦基，次膦基，磺基，磺胺，鹵芳基，CF2，OCF2，OCF3，芳氧基，雜芳基，環(huán)烷基烷氧基烷基，環(huán)雜烷基，等等，連接到鏈上進(jìn)行取代，形成烷基例如三氟甲基，3-羥己基，2-羧丙基，2-氟乙基，羧甲基，氰丁基等等。
除非有別的說(shuō)明，否則在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”包括直鏈和支鏈的烴，在一般的鏈中，含2到40個(gè)碳并具有一個(gè)或多個(gè)雙鍵，優(yōu)選的含2到20個(gè)碳并具有一個(gè)到三個(gè)雙鍵，更優(yōu)選的含2到8個(gè)碳并具有一個(gè)到兩個(gè)雙鍵，這樣的任何碳都可以選擇性的如以上描述的“烷基”那樣被取代。
除非有別的說(shuō)明，否則在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“炔基”包括直鏈和支鏈的烴，在一般的鏈中，含2到40個(gè)碳并具有一個(gè)或多個(gè)三鍵，優(yōu)選的含2到20個(gè)碳并具有一個(gè)到三個(gè)三鍵，更優(yōu)選的含2到8個(gè)碳并具有一個(gè)到兩個(gè)三鍵，這樣的任何碳都可以選擇性的如以上描述的“烷基”那樣被取代。
除非有別的說(shuō)明，否則在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”包括飽和的或部分不飽和(含1或2個(gè)雙鍵)的含1到3個(gè)環(huán)的環(huán)烴基團(tuán)，它是帶側(cè)鏈的或稠合的，環(huán)烴包括單環(huán)烷基，雙環(huán)烷基，三環(huán)烷基，形成的環(huán)總共含有3到20個(gè)碳，形成的每個(gè)環(huán)優(yōu)選的含有4到7個(gè)碳；環(huán)烷基可以稠合到如描述的芳基的芳香環(huán)上，環(huán)烷基包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)辛基，環(huán)癸基，環(huán)十二基，環(huán)己烯基，
任何這些基團(tuán)都可以選擇性的在可取代的碳原子上用一個(gè)或多個(gè)選自氫，鹵素，鹵代烷基，烷基，鹵代烷基，烷氧基，鹵代烷氧基，鏈烯基，三氟甲基，三氟甲氧基，炔基，環(huán)烷基烷基，芴基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，芳基，雜芳基，芳基烷基，芳氧基，芳氧基烷基，芳基烷氧基，芳基硫醇，芳基偶氮，雜芳基烷基，雜芳基鏈烯基，雜芳基雜芳基，雜芳氧基，羥基，硝基，氧，氰基，羧基，羰基(＝O)，羧酰胺，氨基，取代的氨基，其中氨基包括1或2個(gè)取代基(取代基為烷基，芳基或任何別的在定義中提及的芳基化合物)，酰胺，疊氮基，胍基，脒基，膦基，次膦基，磺基，磺胺，硫醇基，烷基硫醇，芳基硫醇，雜芳基硫醇，芳基硫代烷基，烷氧基芳基硫醇，烷基羰基，芳基羰基，烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，烷氧基羰基，氨基羰基，烷基羰基氧，芳基羰基氧，烷基羰基氨基，芳基羰基氨基，芳基亞硫?；蓟鶃喠蝓；榛?，芳基磺?；被蚍蓟前肤驶?，或任何如以上列出的烷基取代基取代。
在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“芳基”是指在環(huán)部分含有6到10個(gè)碳(例如苯基和萘基)的單環(huán)和雙環(huán)的芳香基團(tuán)，可以選擇性的包括一到三個(gè)額外的稠合到“芳基”的環(huán)(例如芳基，環(huán)烷基，雜芳基和雜環(huán)烷基的環(huán))，并且可以選擇性的在可取代的碳原子上用一個(gè)或多個(gè)選自氫，烷基，鹵素，鹵代烷基，烷氧基，鹵代烷氧基，烯基，三氟甲基，三氟甲氧基，炔基，環(huán)烷基烷基，芴基，雜環(huán)烷基，雜環(huán)烷基烷基，芳基，雜芳基，芳基烷基，芳氧基，芳氧基烷基，芳基烷氧基，芳基硫醇，芳基偶氮，雜芳基烷基，雜芳基烯基，雜芳氧基，雜芳基烷氧基，雜芳基烷氧基烷基，羥基，硝基，氧，氰基，氨基，取代的氨基，其中氨基包括1或2個(gè)取代基(取代基為烷基，環(huán)烷基，雜環(huán)烷基，雜芳基，或芳基，或任何別的在以上定義中提及的芳基化合物)，硫醇，烷基硫醇，芳基硫醇，雜芳基硫醇，芳基硫代烷基，烷氧基芳基硫醇，烷基羰基，芳基羰基，烷基氨基羰基，環(huán)烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，雜芳基氨基羰基，雜芳基烷基氨基羰基，烷氧基羰基，氨基羰基，烷基羰基氧基，芳基羰基氧基，烷基羰基氨基，芳基羰基氨基，芳基亞硫?；蓟鶃喠蝓；榛蓟酋０被?，或芳基磺胺羰基，或任何如以上列出的烷基取代基取代。
在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“芳基烷基”是指如以上定義的有一個(gè)芳基取代基的烷基基團(tuán)，例如，苯甲基，苯乙基，萘基丙基，其中所說(shuō)的芳基和/或烷基可以選擇性的如以上定義被取代。
在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“烷氧基”，“芳氧基”，“雜芳氧基”，“芳基烷氧基”或“雜芳基烷氧基”包括如以上定義的通過(guò)氧原子連接的烷基或芳基基團(tuán)。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)并”，“雜環(huán)”“雜環(huán)基”或“雜環(huán)的”表示未取代的或取代的穩(wěn)定的4，5，6或7元的單環(huán)系統(tǒng)，環(huán)系統(tǒng)可以是飽和的或不飽和的，并含有碳原子和1到4個(gè)選自氮，硫，氧和/或SO或SO2基團(tuán)的雜原子，其中氮和硫雜原子可以選擇性的被氧化，并且氮雜原子可以選擇性的被季堿化。雜環(huán)可以連接于任何雜原子或碳原子，導(dǎo)致形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。這樣的雜環(huán)基團(tuán)的例子包括，但不局限于，四氫呋喃基，四氫噻吩基，吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，氧代吡咯烷基，氧代哌嗪基，氧代哌啶基和噁二唑基。一個(gè)雜環(huán)并基團(tuán)可以選擇性的用一個(gè)或多個(gè)功能基團(tuán)，例如那些描述為“烷基”或“芳基”的基團(tuán)取代。
在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)烷基”是指如以上定義的有雜環(huán)烷基取代基的烷基基團(tuán)，其中所說(shuō)的“雜環(huán)”和/或烷基可以選擇性的如以上定義地被取代。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指5，6或7元的芳香雜環(huán)，含有一個(gè)或多個(gè)選自氮，硫，氧和/或SO或SO2基團(tuán)的雜原子。這樣的環(huán)可以稠合到別的芳基或雜芳基環(huán)，并且包括可能的N-氧化物；這樣的雜芳基基團(tuán)的例子包括，但不局限于，呋喃，吡咯，噻吩，吡啶，異噁唑，噁唑，咪唑等等。雜芳基基團(tuán)可以選擇性的用一個(gè)或多個(gè)一般連接于這些鏈的功能基團(tuán)，例如那些描述為“烷基”或“芳基”的基團(tuán)取代。
在此單獨(dú)使用的或是作為別的基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語(yǔ)“雜芳基烷基”是指如以上定義的有雜芳基取代基的烷基基團(tuán)，其中所說(shuō)的“雜芳基”和/或烷基可以選擇性的如以上定義地被取代。
術(shù)語(yǔ)“糖尿病和相關(guān)疾病或相關(guān)狀況”是指II型糖尿病，I型糖尿病，葡萄糖耐量障礙，肥胖癥，高血糖癥，X綜合征，新陳代謝不良綜合征，糖尿病并發(fā)癥，和高胰島素血癥。
在此使用的術(shù)語(yǔ)“脂調(diào)節(jié)”或“降脂”藥劑是指降低LDL(低密度脂蛋白)和/或提高HDL(高密度脂蛋白)和/或降低甘油三酯和/或降低總膽固醇的藥劑和/或別的治療脂障礙的已知機(jī)制。
施用本發(fā)明的治療藥劑包括施用治療有效量的本發(fā)明藥劑。在此使用的術(shù)語(yǔ)“治療有效量”是指通過(guò)施用發(fā)明的組合物對(duì)可治療狀況進(jìn)行治療或預(yù)防的治療藥劑的量。此量是足以表現(xiàn)出可察覺(jué)的治療或預(yù)防或改善作用的量。作用可以包括，例如，治療或預(yù)防在此列出的狀況。對(duì)于一個(gè)個(gè)體，精確的有效量將依賴于個(gè)體的大小和健康，本性和被治療的狀況的范圍，治療醫(yī)師的推薦，和選擇施用的療法和療法的組合。因此，提前規(guī)定精確的有效量是無(wú)用的。
在此描述的肽和其類似物可以通過(guò)使用例如在G.Barany和R.B.Merrifield，“The PeptidesAnalysis，Synthesis，Biology”；Volume 2-“Special Methods in Peptide Synthesis，Part A”，pp.3-284，E.Gross和J.Meienhofer，Eds.，Academic Press，New York，1980；和在J.M.Stewart和J.D.Young，“Solid-Phase Peptide Synthesis”，2nd Ed.，Pierce ChemicalCo.，Rockford，IL.1984.中描述的各種固相技術(shù)進(jìn)行化學(xué)合成生產(chǎn)。在本發(fā)明中優(yōu)選使用的策略是基于暫時(shí)保護(hù)α-氨基基團(tuán)的Fmoc(9-芴基甲基甲氧羰基)基團(tuán)和暫時(shí)保護(hù)氨基酸側(cè)鏈的叔丁基相結(jié)合(見(jiàn)例如，E.Atherton和R.C.Sheppard，“The Fluorenylmethoxycarbonyl AminoProtecting Group”，在“The PeptidesAnalysis，Synthesis，Biology”；Volume 9-“Special Methods in Peptide Synthesis，Part C”，pp.1-38，S.Undenfriend和J.Meienhofer，Eds.，Academic Press，San Diego，1987.)。
肽可以采取逐步方式在不溶的聚合物載體(也指“樹(shù)脂”)上從肽的C-末端開(kāi)始進(jìn)行合成。合成是通過(guò)形成酰胺或酯鍵，把肽的C-末端氨基酸附加到樹(shù)脂上而開(kāi)始的。這使得最終得到的肽可以分別作為C-末端酰胺或羧酸釋放下來(lái)。做為選擇，如果存在C-末端氨基醇，C-末端殘基可以如在此描述的連接到2-甲氧基-4-烷氧基苯甲基醇樹(shù)脂(SASRINTM，Bachem Bioscience，Inc.，King of Prussia，PA)上，肽序列裝配完成后，得到的肽醇使用THF中的LiBH4處理釋放下來(lái)(見(jiàn)J.M.Stewart和J.D.Young，supra，p.92)。
C-末端氨基酸和所有在合成中使用的別的氨基酸要求有被不同地保護(hù)的α-氨基和側(cè)鏈功能基團(tuán)(假如有的話)，這樣α-氨基保護(hù)基團(tuán)可以在合成過(guò)程中選擇性的除去。通過(guò)活化氨基酸的羧基形成活性酯，并與附加到樹(shù)脂上的N-末端氨基酸的未被阻滯的氨基進(jìn)行反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)氨基酸的偶聯(lián)。氨基去保護(hù)，偶聯(lián)重復(fù)進(jìn)行，直到整個(gè)肽序列組裝完成。然后肽從樹(shù)脂上釋放下來(lái)，同時(shí)側(cè)鏈功能基團(tuán)被去保護(hù)，一般存在合適的消除劑以限制側(cè)鏈反應(yīng)。得到的肽最終通過(guò)反相HPLC(高效液相色譜)純化。
作為最終肽的前體被要求的肽基-樹(shù)脂的合成使用的是可商業(yè)獲得的交聯(lián)聚苯乙烯聚合物樹(shù)脂(Novabiochem，San Diega，CA)。本發(fā)明中優(yōu)選使用的是4-(2’，4’-二甲氧苯基-Fmoc-氨甲基)-苯氧乙酰基-p-甲基二苯甲基胺樹(shù)脂(Rink amide MBHA resin)或p-苯甲基氧苯甲基醇樹(shù)脂(HMP樹(shù)脂)，其中C-端氨基酸可以已經(jīng)連接上或者不連接。假如C-端氨基酸沒(méi)有連接，那么C-端氨基酸的連接可以分別通過(guò)DMAP-催化的C-端氨基酸與O-?；愲宓孽セ蛘逤-端氨基酸與DIC或DIC/HOAT反應(yīng)形成Fmoc保護(hù)的氨基酸的HOAT活性酯達(dá)到。隨后的氨基酸偶聯(lián)可以分別使用由DIC/HOBT或DIC/HOAT產(chǎn)生的HOBT或HOAT活性酯來(lái)完成。
在此描述的11mer的肽類似物的合成可以使用肽合成儀，例如高級(jí)Chemtech多肽合成儀(Advanced Chemtech Multiple PeptideSynthesizer)(MPS396)或應(yīng)用生物系統(tǒng)公司多肽合成儀(ABI 433A)。假如使用MPS396，可以同時(shí)合成多達(dá)96條多肽。假如使用ABI 433A合成儀，可以順序地合成單條肽。在兩種情況下逐步固相肽合成都可以利用在此描述的Fmoc/叔丁基保護(hù)策略。在位置11和位置10的非天然的非商業(yè)的氨基酸使用兩種方法中的一種結(jié)合到肽中。在第一種方法中，Boc或Fmoc保護(hù)的非天然氨基酸可以利用合適的有機(jī)合成方法在溶液中制備。然后得到的衍生物在肽的逐步合成中使用。做為選擇，所要求的非天然的氨基酸利用合成有機(jī)化學(xué)方法直接在樹(shù)脂上形成。當(dāng)非天然的非商業(yè)的氨基酸需要結(jié)合到位置Xaa6或所需要的任何別的Xaa位置時(shí)，所需要的Fmoc保護(hù)的非天然氨基酸在溶液中合成。然后這樣的衍生物可以在逐步固相肽合成中使用。
在本發(fā)明中使用的優(yōu)選的Fmoc氨基酸衍生物如下所示。
在固相合成中使用的被正交保護(hù)(orthogonally protected)的氨基酸
Fmoc-精氨酸(PMC) Fmoc-精氨酸(Pbf) [Pbf＝五甲基二氫苯并呋喃]
Fmoc-天冬酰胺(Trt) Fmoc-天冬氨酸(But) Fmoc-半胱氨酸(Trt)
Fmoc-谷氨酰胺(Trt) Fmoc-谷氨酸(But) Fmoc-組氨酸(Trt)
Fmoc-賴氨酸(Boc) Fmoc-絲氨酸(But) Fmoc-蘇氨酸(But)
Fmoc-酪氨酸(But)Fmoc-色氨酸(Boc)
在固相合成中使用的被保護(hù)的氨基酸
Fmoc-丙氨酸 Fmoc-甘氨酸Fmoc-亮氨酸Fmoc-異亮氨酸
Fmoc-正亮氨酸 Fmoc-苯丙氨酸 Fmoc-谷氨酰胺Fmoc-天冬酰胺
Fmoc-脯氨酸Fmoc-甘氨酸 Fmoc-二苯基丙氨酸
各個(gè)肽的肽基-樹(shù)脂前體物可以用文獻(xiàn)中描述的任何標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行裂割和去保護(hù)。(見(jiàn)，例如，D.S.King等，Int.J.Peptide Protein Res.36，1990，255-266)。本發(fā)明中使用的優(yōu)選的方法是在水存在時(shí)使用TFA，并且TIS作為清除劑。典型地，肽基-樹(shù)脂在TFA/水/TIS(94∶3∶3，體積∶體積∶體積；1毫升/100毫克的肽基-樹(shù)脂)中室溫?cái)嚢?.5-2小時(shí)。所用的樹(shù)脂被過(guò)濾出，TFA溶液濃縮，或減壓干燥。得到的粗肽或者被沉淀，用乙醚洗滌，或者直接再溶于DMSO或50％的含水乙酸通過(guò)制備型HPLC純化。
使用制備型HPLC，例如Waters Model 4000或Shimadzu ModelLC-SA液相色譜儀可以獲得要求純度的肽。粗肽溶液注射入YMC S5ODS(20×100毫米)柱，用水中的線性梯度的MeCN洗脫，兩者都用0.1％TFA作為緩沖液，使用14-20毫升/分鐘的流速，洗脫物通過(guò)220nm紫外吸收進(jìn)行監(jiān)控。純肽的結(jié)構(gòu)通過(guò)電子-噴射質(zhì)譜分析進(jìn)行確定。
以下縮寫(xiě)在實(shí)施例中及其它地方采用
Ph＝苯基
Bn＝苯甲基
i-Bu＝異丁基
Me＝甲基
Et＝乙基
Pr＝正丙基
Bu＝正丁基
TMS＝三甲基甲硅烷基
TIS＝三異丙基硅烷
Et2O＝乙醚
HOAc或AcOH＝乙酸
MeCN＝乙腈
DMF＝N，N-二甲基甲酰胺
EtOAc＝乙酸乙酯
THF＝四氫呋喃
TFA＝三氟乙酸
Et2NH＝二乙胺
NMM＝N-甲基嗎啉
NMP＝N-甲基吡咯烷酮
DCM＝二氯甲烷
n-BuLi＝正丁基鋰
Pd/C＝碳上的鈀
PtO2＝氧化鉑
TEA＝三乙胺
min＝分鐘
h或hr＝小時(shí)
L＝升
mL＝毫升
μL＝微升
g＝克
mg＝毫克
mol＝摩爾
mmol＝毫摩爾
meq＝毫克當(dāng)量
rt＝室溫
sat或sat’d＝飽和的
aq.＝含水的
mp＝熔點(diǎn)
Bip＝二苯基丙氨酸
LiBH4＝硼氫化鋰
PyBOP試劑＝苯并三唑-1-基氧-三吡咯烷并膦六氟磷酸鹽
DMAP＝4-(二甲基氨基)吡啶
EDAC＝3-乙基-3’-(二甲氨基)丙基-碳二亞胺鹽酸(或1-[(3-(二甲基)氨基)丙基]-3-乙基碳二亞胺鹽酸
FMOC＝芴甲氧羰基
Boc或BOC＝叔丁氧羰基
Cbz＝苯甲氧羰基
HOBT或HOBT·H2O＝1-羥基苯并三唑水合物
HOAT＝1-羥基-7-氮雜苯并三唑
TLC＝薄層層析
HPLC＝高效液相色譜
LC/MS＝高效液相色譜/質(zhì)譜
MS或Mass Sec＝質(zhì)譜
NMR＝核磁共振
肽化學(xué)領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員注意到氨基酸殘基有D和L異構(gòu)體，本發(fā)明認(rèn)為氨基酸殘基異構(gòu)體的任一種或者混合物包括在在此描述的肽合成之內(nèi)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供制備如式
的多肽的方法，此肽模擬具有信號(hào)(message)序列和地址(address)序列的多肽受體激動(dòng)劑的活性。在該實(shí)施方案中，多肽的地址序列使該多肽具有結(jié)合到受體上的能力，當(dāng)多肽結(jié)合到受體上，信號(hào)序列能夠誘導(dǎo)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。制造該多肽的方法包括用Y和Z取代一種多肽受體激動(dòng)劑的信號(hào)序列，在此Y和Z是氨基酸殘基；
其中Y和Z的α-碳原子上的取代中的一個(gè)可以獨(dú)立地被選自氫，烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷基烷基，雜環(huán)烷基，芳基烷基和雜芳基烷基取代，所說(shuō)的初級(jí)取代基選擇性地被選自環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基或雜芳基的次級(jí)取代基取代；所說(shuō)的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被一個(gè)或多個(gè)氫，烷基，環(huán)烷基，芳基烷基，芳基，雜環(huán)基，雜芳基，烯基，炔基，鹵素，羥基，巰基，硝基，氰基，氨基，酰氨基，疊氮基，胍基，脒基，羧基，羧酰胺基，羧酰胺烷基，甲酰基，?；?，羰基烷基，烷氧基，芳氧基，芳基烷氧基，雜芳氧基，雜環(huán)氧基，酰氧基，巰基，巰基烷基，巰基芳基，巰基?；?，鹵素，氰基，硝基，疊氮基，氨基，胍基烷基，胍基?；蛩峄?，磺胺基，烷基磺酰基，芳基磺?；蜢⒒〈?；其中，初級(jí)或次級(jí)取代基可以選擇性的通過(guò)共價(jià)鍵形成橋而彼此形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳原子上的別的取代可以被氫，烷基，氨基烷基，羥基烷基或羧基烷基取代；
其中，Z的α-碳原子上的別的取代可以被氫，烷基，氨基烷基，羥基烷基或羧基烷基取代；
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供制備模擬內(nèi)源多肽受體激動(dòng)劑活性的多肽的方法。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該多肽受體激動(dòng)劑是GLP-1。
在另一方面，制備多肽的方法進(jìn)一步包括用能誘導(dǎo)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的差異信號(hào)序列替代該多肽的信號(hào)序列。差異信號(hào)序列可以通過(guò)替代或修飾多肽受體激動(dòng)劑信號(hào)序列中的一個(gè)或多個(gè)的氨基酸殘基而得到。
實(shí)施例1
GLP-1的11mer多肽模擬物的同步固相肽合成
在持續(xù)的肽鏈延伸前，采用自動(dòng)同步合成方案，在MPS-396肽合成儀上，使用以下的手動(dòng)程序以分批模式制備10和11位置上含有非天然的非商業(yè)獲得的氨基酸殘基的二肽基樹(shù)脂。在手動(dòng)偶聯(lián)中使用的Nα-Fmoc-保護(hù)的二苯基丙氨酸衍生物的合成在實(shí)施例8-10中描述。
足以合成幾種11mer(11聚體)類似物的一些4-(2’，4’-二甲氧苯基-Fmoc-氨甲基)-苯氧基乙?；?p-甲基二苯甲基胺樹(shù)脂(Rink amideMBHA樹(shù)脂；上樣0.5毫摩爾/克)用DMF(4×10毫升/克，5分鐘)洗滌膨脹。然后用含有20％哌啶的DMF(10毫升/克)處理兩次，分別為3和18分鐘，把Fmoc基團(tuán)除去。樹(shù)脂用DMF(4×10毫升/克)和NMP(4×10毫升/克)洗滌。加入Fmoc-L-二苯基丙氨酸-OH(2.0當(dāng)量)或其類似物的0.5M溶液，和NMP中的HOAt(2.0當(dāng)量)到樹(shù)脂中，然后加入1.0M的DIC(2.05當(dāng)量)的NMP溶液。然后樹(shù)脂振蕩或渦旋16-24小時(shí)。偶聯(lián)的完成使用定性的茚三酮檢測(cè)加以監(jiān)控。樹(shù)脂排出，用NMP(3×10毫升/克)和DMF(3×10毫升/克)洗滌，用DMF(8毫升/克)中的20％乙酸酐處理2次，分別為5和20分鐘。DMF洗滌(4×10毫升/克)后，然后如以上描述的操作進(jìn)行第二次手動(dòng)偶聯(lián)循環(huán)，開(kāi)始是用DMF中20％的哌啶除去Fmoc基團(tuán)，然后在偶聯(lián)步驟中使用或者相同或者不同的Fmoc-保護(hù)的二苯基丙氨酸類似物。此合成方案產(chǎn)生要求的Fmoc保護(hù)的二肽基-Rink amide MBHA樹(shù)脂。
通過(guò)在實(shí)施例5-7中描述的另一種程序，使用固相Suzuki縮合反應(yīng)也可以得到相似的二肽基樹(shù)脂。
然后，合成一套設(shè)計(jì)好的類似物所要求的這樣的二肽基-樹(shù)脂在自動(dòng)MPS合成中使用，自動(dòng)MPS合成采用以下方式，每輪可以合成高達(dá)96個(gè)肽。二肽基-樹(shù)脂作為二氯甲烷/DMF(60∶40)中的懸浮液上樣于Advanced Chemtech MPS 396合成儀的96孔反應(yīng)器中，每個(gè)反應(yīng)器孔中樹(shù)脂的體積對(duì)應(yīng)于從0.01到0.025毫摩爾(20-50毫克)。反應(yīng)器置于儀器上，被排流(drained)。然后孔用DMF(0.5-1.0毫升，3×2分鐘)洗滌，并且經(jīng)過(guò)所要求的自動(dòng)偶聯(lián)循環(huán)數(shù)，把按照預(yù)先程序設(shè)置的序列合成表確定的各個(gè)肽序列裝配起來(lái)。用于典型的0.01毫摩爾/孔同步合成96種化合物的詳細(xì)的逐步合成方案在下面描述。此方案適合于每輪同時(shí)合成12到96種類似物的陣列。一般的合成方案在方案1中描述。
方案1 GLP-1模擬肽類似物的同步合成
Fmoc-Rink樹(shù)脂
|i)哌啶/DMF(除去Fmoc)
|ii)Fmoc-氨基酸/DIC/HOAt/NMP
|iii)重復(fù)以上步驟，按需要改變Fmoc-氨基酸
|iv)哌啶/DMF(除去Fmoc)
|v)TFA/H2O/三異丙基硅烷(94∶3∶3)
|vi)真空離心/凍干
|vii)制備型HPLC
↓
A-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Y-Z-B-NH2
開(kāi)始合成前，按要求制備以下的試劑溶液，置于儀器上DMF中1.5M(15％)的哌啶；NMP中0.5M的DIEA；NMP中0.36M的DIC；DMF中1M(10％)乙酸酐。制備所需要的Fmoc-保護(hù)的氨基酸，使之成為0.36M HOAt/NMP中的0.36M的溶液，并且置于32位氨基酸管架中的合適位置。
以上制備的Fmoc-保護(hù)的二肽基-樹(shù)脂通過(guò)用DMF中1.5M(15％)哌啶(0.6毫升；1×3分鐘；1×18分鐘)處理進(jìn)行去保護(hù)。然后樹(shù)脂用DMF(4×0.5毫升)，DMF/EtOH(80∶20)(1×0.5毫升)和NMP(3×0.5毫升)洗滌。
下一個(gè)氨基酸殘基，一般是Fmoc-天冬氨酸(OtBu)-OH或別的有適當(dāng)?shù)恼槐Ｗo(hù)的Fmoc-氨基酸，假如需要的話，其偶聯(lián)是通過(guò)自動(dòng)加入含有合適的Fmoc-氨基酸(0.072毫摩爾，7.2當(dāng)量)和HOAt(7.2當(dāng)量)的0.36M的NMP溶液(0.2毫升)到所有96孔中進(jìn)行。然后往所有96孔中加入0.36M的DIC(0.072毫摩爾，7.2當(dāng)量)的NMP溶液(0.2毫升)。偶聯(lián)可以持續(xù)2小時(shí)。反應(yīng)器通過(guò)氮?dú)鈮?3-5psi)排流和用NMP(1×0.5毫升)對(duì)孔進(jìn)行洗滌后，偶聯(lián)如以上所述的重復(fù)。完成該偶聯(lián)循環(huán)后，孔用含有1M乙酸酐的DMF(1×0.5毫升，30分鐘)處理，最后用DMF(3×0.5毫升)洗滌。
下一步偶聯(lián)循環(huán)開(kāi)始是如以上描述的去除Fmoc基團(tuán)，然后進(jìn)行Fmoc-絲氨酸(tBu)-OH的偶聯(lián)，或者按照該位置的序列替換的要求進(jìn)行不同的Fmoc-氨基酸的偶聯(lián)。偶聯(lián)進(jìn)行的方式與對(duì)Fmoc-天冬氨酸(OtBu)-OH描述的方式相同。下一步偶聯(lián)步驟以相同方式進(jìn)行，把Fmoc-色氨酸(tBu)-OH或者任何別的選定的Fmoc-氨基酸整合進(jìn)入要求的序列位置。
下一個(gè)Fmoc-氨基酸(例如Fmoc-苯丙氨酸-OH)如以上描述的進(jìn)行偶聯(lián)。在這一步驟，對(duì)于要求整合進(jìn)一個(gè)新的非商業(yè)獲得的芳香或非芳香氨基酸類似物的序列，偶聯(lián)可以修改如下以通常方式進(jìn)行Fmoc去保護(hù)后，手工加入含有0.36M的Fmoc-氨基酸(5當(dāng)量)和HOAt(5當(dāng)量)的NMP溶液(0.139毫升)。然后使用儀器加入0.36M的DIC的NMP(0.139毫升)溶液，偶聯(lián)持續(xù)進(jìn)行16-24小時(shí)。在此情況下偶聯(lián)不重復(fù)。通常的偶聯(lián)后洗滌后，肽基-樹(shù)脂如描述的被乙酸酐保護(hù)。
下一步偶聯(lián)涉及或者Fmoc-色氨酸(tBu)-OH或者在此位置的序列替代所要求的替代類似物。偶聯(lián)如所描述的Fmoc-天冬氨酸(OtBu)-OH和它的類似物的最初的MPS偶聯(lián)一樣進(jìn)行。為了完成要求的96種11mer的肽類似物的序列裝配，這一相同的偶聯(lián)方案再重復(fù)四次。對(duì)于在某個(gè)序列位置所需要的商業(yè)和非商業(yè)獲得的非天然的氨基酸的偶聯(lián)，使用與以上描述的位置6(Xaa6)的新氨基酸相似的單次偶聯(lián)方案。
最后，如以上描述，用含有20％哌啶的DMF除去Fmoc基團(tuán)，肽基-樹(shù)脂用DMF(4×0.5毫升)和DCM(4×0.5毫升)洗滌。然后通過(guò)采用恒壓的氮?dú)?5psi)，將肽基-樹(shù)脂在反應(yīng)器塊(block)上干燥10-15min。
切割/去保護(hù)
要求的肽通過(guò)使用如下的TFA切割混合物進(jìn)行處理，從它們各自的肽基-樹(shù)脂上切割/去保護(hù)。往反應(yīng)器塊的每個(gè)孔中加入TFA/水/三異丙基硅烷(94∶3∶3)(1.0毫升)溶液，然后渦旋振蕩2小時(shí)。使用正壓收集孔中的TFA溶液，使之進(jìn)入預(yù)先稱重的小管(vials)中，小管(vials)處于反應(yīng)器底部的匹配的96管塊(block)中?？字械臉?shù)脂用額外的0.5毫升TFA混合物潤(rùn)洗兩次，得到的潤(rùn)洗液與小管中的溶液混合。這些溶液在SpeedVacTM(Savant)中干燥，得到粗肽，典型的產(chǎn)率＞100％(20-40毫克)。為了用制備型HPLC進(jìn)行如下的純化，粗肽或者用乙醚洗滌，更經(jīng)常地，或者直接再溶于2毫升DMSO或50％含水乙酸中。
粗肽的制備型HPLC純化
制備型HPLC在或者Waters Model 4000或者Shimadzu ModelLC-SA液相色譜上進(jìn)行。粗肽的每種溶液注射進(jìn)入YMC S5 ODS(20×100毫米)柱，用水中MeCN線性梯度洗脫，兩者都用0.1％TFA作為緩沖液。使用的典型梯度是15分鐘內(nèi)，0.1％TFA/水中的0.1％TFA/MeCN從20％升到70％，流速為14毫升/分鐘，流出物用220nm處紫外檢測(cè)。典型地，10-11分鐘后，要求的產(chǎn)物從雜質(zhì)中洗脫分離，通常用分級(jí)收集器收集得到一份10-15毫升的級(jí)份。HPLC級(jí)分經(jīng)冷凍干燥，獲得無(wú)定形白色粉末的所要求的肽。
純化的多肽的HPLC分析
經(jīng)以上描述的制備型HPLC純化后，各種肽通過(guò)ShimadzuLC-10AD或LC-10AT分析型HPLC系統(tǒng)上的分析型反相HPLC(RP-HPLC)進(jìn)行分析，分析型HPLC系統(tǒng)包括SCL-10A系統(tǒng)控制器，SIL-10A自動(dòng)注射器，SPD10AV或SPD-M6A紫外/可見(jiàn)光譜檢測(cè)器，或SPD-M10A二極管陣列檢測(cè)器。使用YMC ODS S3(4.6×50毫米)柱，使用以下梯度中的一種進(jìn)行洗脫8分鐘內(nèi)，A中的B由10％升到70％，2.5毫升/分鐘(方法A)；8分鐘內(nèi)，A中的B由5％升到80％，2.5毫升/分鐘(方法B)；8分鐘內(nèi)，A中的B由5％升到70％，2.5毫升/分鐘(方法C)；8分鐘內(nèi)，A中的B由25％升到75％，2.5毫升/分鐘(方法D)；8分鐘內(nèi)，A中的B由20％升到75％，2.5毫升/分鐘(方法E)；8分鐘內(nèi)，A中的B由15％升到70％，2.5毫升/分鐘(方法F)；8分鐘內(nèi)，A中的B由10％升到90％，2.5毫升/分鐘(方法G)；8分鐘內(nèi)，A中的B由20％升到65％，2.5毫升/分鐘(方法H)；8分鐘內(nèi)，A中的B由5％升到90％，2.0毫升/分鐘(方法I)；8分鐘內(nèi)，A中的B由5％升到90％，2.5毫升/分鐘(方法J)；8分鐘內(nèi)，A中的B由20％升到80％，2.5毫升/分鐘(方法K)；8分鐘內(nèi)A中的B由10％升到100％，2.5毫升/分鐘(方法L)；8分鐘內(nèi)A中的B由10％升到75％，2.5毫升/分鐘(方法M)；流動(dòng)相A0.1％TFA/水；流動(dòng)相B0.1％TFA/乙腈。典型的純化率＞90％。
質(zhì)譜表征
每種肽都可以通過(guò)電子噴射質(zhì)譜(ES-MS)在流體注射模式或者LC/MS模式中進(jìn)行表征。在陽(yáng)離子和陰離子電子噴射模式中，所有分析中都使用Finnigan SSQ7000單一四極質(zhì)譜計(jì)(ThermoFinnigan，SanJose，CA)。掃描時(shí)間1.0秒，掃描范圍300到2200amu，獲得全掃描數(shù)據(jù)。四極以單位分辨率運(yùn)作。對(duì)于流體注射分析，質(zhì)譜計(jì)與Waters 616HPLC泵(Waters Corp.，Milford，MA)連接，并且裝配有HTS PAL自動(dòng)采樣器(CTC Analytics，Zwingen，Switzerland)。樣品被注射進(jìn)入含有0.1％氫氧化銨的50∶50的水∶乙腈的流動(dòng)相。分析的流速是0.42毫升/分鐘，注射體積是6微升。LC/MS分析使用ThermoSeparationsConstametric 3500液相色譜儀(ThermoSeparation Products，San Jose，CA)和HTS PAL自動(dòng)采樣器。采用Luna C18，5微米柱，2×30毫米(Phenomenex，Torrance，CA)實(shí)現(xiàn)色譜分離。分析流速是1.0毫升/分鐘，柱洗脫物被分離，進(jìn)行電子噴射界面的流速是400微升/分鐘。線性梯度為4分鐘內(nèi)A中的B從0％到100％，流動(dòng)相A是含有10毫摩爾/升乙酸銨的98∶2的水∶乙腈，流動(dòng)相B是含有10毫摩爾/升乙酸銨的10∶90的水∶乙腈。在220nm處對(duì)紫外響應(yīng)進(jìn)行監(jiān)控。樣品溶解于200微升的50∶50的H2O∶MeCN(0.05％TFA)。注射體積是5微升。
在所有情況下，實(shí)驗(yàn)測(cè)量的分子量是在計(jì)算的單同位素分子量的0.5道爾頓范圍內(nèi)。
實(shí)施例2
N-?；蚇-烷基化的11mer肽類似物的合成
(A)通過(guò)還原烷基化作用合成N-烷基化的11mer肽類似物的一般程序
N-烷基化的11mer肽類似物的合成從通過(guò)在此描述的一般方法制備的被保護(hù)的中間體11mer肽-樹(shù)脂(1)(0.025毫摩爾)開(kāi)始。使用那種方法中描述的程序除去Fmoc基團(tuán)，產(chǎn)生被保護(hù)的樹(shù)脂中間體2。樹(shù)脂中間體2在DMF中膨脹，用1％AcOH/DMF洗滌3次，然后用2-20當(dāng)量的醛或N-Boc-保護(hù)的氨基醛(見(jiàn)以下合成)處理，溶于1％AcOH/DMF(或CH2Cl2)(1M)，和與醛的量相等的過(guò)量的Na(AcO)3BH。過(guò)夜反應(yīng)后，樹(shù)脂被排流，用DMF洗滌3次，DCM洗滌3次，干燥。還原性烷基化的肽(4)用TFA/三異丙基硅烷/水(90∶5∶5，體積∶體積∶體積；1-2毫升)處理2小時(shí)進(jìn)行切割和去保護(hù)。樹(shù)脂過(guò)濾，用1毫升切割溶液潤(rùn)洗，潤(rùn)洗液與濾液混合，在SpeedVacTM(Savant)中干燥，得到粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)物用在此列出的多肽合成的一般方法中描述的制備型HPLC純化。所要求的產(chǎn)物的純度和同一性通過(guò)分析型HPLC和電子噴射質(zhì)譜進(jìn)行確定。
方案2 殘基#1被取代的/衍生的11mer肽類似物的合成
使用如下的Castro’s程序(Fehrentz，J.A.，和Castro，B.，Synthesis，1983，676-678)合成N-Boc-保護(hù)的氨基醛。Boc-保護(hù)的氨基酸(2.0毫摩爾)溶于5毫升DCM中，加入BOP試劑(1.1當(dāng)量)和DIEA(1.15當(dāng)量)。5分鐘后，加入5毫升DCM中的N，O-二甲基羥胺(1.2當(dāng)量)和DIEA(1.3當(dāng)量)的溶液。反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，用DCM(30毫升)稀釋，用2N HCl(3×)，飽和NaHCO3(3×)和鹽水(1×)洗滌，有機(jī)提取物用MgSO4干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)干燥，得到Weinreb酰胺。Weinreb酰胺然后溶于乙醚或THF(10毫升/毫摩爾)中，與THF(2毫升/毫摩爾的異羥肟酸)中1M LiAlH4溶液反應(yīng)30分鐘。反應(yīng)混合物用5毫升0.35M的KHSO4抑制，用乙醚(20毫升)稀釋。含水相分離，用乙醚(3×20毫升)提取，混合的乙醚提取物用2N HCl(2×)，飽和NaHCO3(2×)和鹽水(1×)洗滌，MgSO4干燥，過(guò)濾，蒸發(fā)干燥，得到Boc-保護(hù)的醛，產(chǎn)率20-30％。醛用1H-NMR和電子噴射質(zhì)譜進(jìn)行表征，醛在還原性烷基化步驟中使用，無(wú)需進(jìn)一步純化。
(B)合成N-酰基化的11mer肽類似物的一般程序
類似地，N-?；?1mer肽類似物的合成可以從在此描述制備的被保護(hù)的11mer肽-樹(shù)脂中間體(1)(0.025毫摩爾)開(kāi)始。使用在此描述的程序除去Fmoc基團(tuán)，然后使用在此描述的一般方法中描述的偶聯(lián)方案，將得到的樹(shù)脂中間體2與有關(guān)的Fmoc-保護(hù)的氨基酸或羧酸偶聯(lián)。在合適的酸酐可以利用的情況下，使用NMP中10當(dāng)量的酸酐進(jìn)行N-酰基化。得到的12mer類似物(3)通過(guò)在此描述的一般方法被切割/去保護(hù)，并使用制備HPLC純化。
(C)合成11mer肽類似物的N-氨基甲酸衍生物的一般程序
11mer肽類似物的N-氨基甲酸衍生物的合成可以從如在此描述的制備的被保護(hù)的11mer肽-樹(shù)脂中間體(1)(0.025毫摩爾)開(kāi)始。使用在此描述的程序除去Fmoc基團(tuán)，得到的樹(shù)脂中間體2可以在合適的堿，例如叔胺存在時(shí)與相應(yīng)的氯甲酸酯反應(yīng)，或與碳酸氫鹽反應(yīng)或與活化的碳酸鹽，例如p-硝基苯基碳酸鹽或苯基碳酸鹽反應(yīng)。類似的，10mer肽類似物的N-氨基甲酸衍生物可以從被保護(hù)的10mer肽基-樹(shù)脂中間體開(kāi)始制備，F(xiàn)moc基團(tuán)被除去，得到的肽-樹(shù)脂中間體與相應(yīng)的氯甲酸酯，碳酸氫鹽，或活化的碳酸鹽反應(yīng)。
(D)合成11mer肽類似物的N-脲基衍生物的一般程序
11mer肽類似物的N-脲基衍生物的合成可以從如在此描述的制備的被保護(hù)的11mer肽-樹(shù)脂中間體(1)(0.025毫摩爾)開(kāi)始。使用在此描述的程序除去Fmoc基團(tuán)，得到的樹(shù)脂中間體2可以與相應(yīng)的異氰酸鹽反應(yīng)，異氰酸鹽的制備例如K.Burgess等.，J.Am.Chem.Soc.1997，119，1556-1564中所描述的。作為選擇，樹(shù)脂中間體2可以與相應(yīng)的氨基甲酰氯反應(yīng)。類似的，10mer肽類似物的N-脲基衍生物可以從被保護(hù)的10mer肽基-樹(shù)脂中間體開(kāi)始制備，F(xiàn)moc被除去，得到的肽基-樹(shù)脂中間體與相應(yīng)的異氰酸鹽或氨基甲酰氯反應(yīng)。
(E)合成11mer肽類似物的N-磺酰胺衍生物的一般程序
11mer肽類似物的N-磺酰胺衍生物的合成可以從如在此描述的制備的被保護(hù)的11mer的肽-樹(shù)脂中間體(1)(0.025毫摩爾)開(kāi)始。使用在此描述的程序除去Fmoc基團(tuán)，得到的樹(shù)脂中間體2可以與相應(yīng)的磺酰氯反應(yīng)，類似的，10mer肽類似物的N-磺酰胺可以從被保護(hù)的10mer肽-樹(shù)脂中間體開(kāi)始制備，F(xiàn)moc被除去，得到的肽基-樹(shù)脂中間體與相應(yīng)的磺酰氯反應(yīng)。
(F)合成11-mer肽類似物的N-磺酰脲衍生物的一般程序
11mer肽類似物的N-磺酰脲衍生物的合成可以從如在此描述的制備的被保護(hù)的11mer肽-樹(shù)脂中間體(1)(0.025毫摩爾)開(kāi)始。使用在此描述的程序除去Fmoc基團(tuán)，得到的樹(shù)脂中間體2可以與相應(yīng)的氨磺酰氯R4R5N-SO2-Cl反應(yīng)，產(chǎn)生磺酰脲中間體(見(jiàn)，例如，P.Davern等，J.Chem.Soc.，Perkin Trans.2，1994(2)，381-387)。類似的，10mer肽類似物的N-磺酰脲衍生物可以從被保護(hù)的10mer肽-樹(shù)脂中間體開(kāi)始制備，F(xiàn)moc被除去，得到的肽基-樹(shù)脂中間體與相應(yīng)的氨磺酰氯R4R5N-SO2-Cl反應(yīng)。
實(shí)施例3
10mer肽類似物的N-芳基烷基酰胺的合成
10mer肽類似物的N-芳基烷基酰胺的合成從相關(guān)的芳基烷基胺與烷氧基苯甲醛樹(shù)脂的還原性烷基化反應(yīng)開(kāi)始，如以下實(shí)施例中描述。2-(3，5-二甲氧基-4-甲酰苯氧基)乙氧基甲基聚苯乙烯樹(shù)脂(Novabiochem，1.12毫摩爾/克，0.025毫摩爾，27.3毫克)用含有1％乙酸的DCM(5×3毫升)洗滌。把含有2-(2-五氟苯基)乙胺(0.125毫摩爾，26.4毫克)的DCM(3毫升)加到樹(shù)脂中。5分鐘后，加入固體的NaBH(OAc)3(0.125毫摩爾，26.5毫克)，反應(yīng)物渦旋16小時(shí)。樹(shù)脂用DMF(5×3毫升)和DCM(5×3毫升)潤(rùn)洗。把含有Fmoc-[Bip(2-Et)]-OH(0.05毫摩爾，25.3毫克)和HOAt(0.05毫摩爾，6.81毫克)的NMP溶液(0.5毫升)加入到樹(shù)脂中，然后加入DIC(0.05毫摩爾，7.82微升)。反應(yīng)物渦旋16小時(shí)。樹(shù)脂用NMP(5×3毫升)潤(rùn)洗。然后所要求的10mer的N-芳基烷基酰胺類似物的余下序列如實(shí)施例1中描述的裝配。
實(shí)施例4
使用Applied Biosystems Model 433A肽合成儀進(jìn)行11mer肽類似物的固相合成
以下是使用升級(jí)的Applied Biosystems Model 433A肽合成儀進(jìn)行典型的11mer肽類似物的固相合成的一般描述。合成儀的升級(jí)硬件和軟件可以進(jìn)行Fmoc去保護(hù)步驟的傳導(dǎo)性監(jiān)測(cè)與偶聯(lián)的反饋控制。方案允許合成規(guī)模從0.05到1.0毫摩爾。
兩個(gè)非天然的C-端氨基酸殘基的整合在前面連同11mer類似物的同步合成一起描述過(guò)。在此ABI合成中使用這樣的Fmoc-保護(hù)的二肽基樹(shù)脂。Fmoc保護(hù)的二肽基-樹(shù)脂(0.1毫摩爾)置于儀器上合適大小的容器中，用NMP洗滌6次，使用22％哌啶/NMP處理兩次(2和8分鐘)進(jìn)行去保護(hù)。進(jìn)行一個(gè)或二個(gè)額外的被監(jiān)控的去保護(hù)步驟，直到監(jiān)控選項(xiàng)的情況得到滿足(最后兩個(gè)以傳導(dǎo)性為基礎(chǔ)的去保護(hù)鋒之間區(qū)別＜10％)。總的去保護(hù)時(shí)間是10-12分鐘。去保護(hù)的二肽基-樹(shù)脂用NMP洗滌6次，然后偶聯(lián)下一個(gè)氨基酸。該程序用下一步驟中使用的實(shí)施例說(shuō)明。因此，使用以下方法進(jìn)行下一步的Fmoc-天冬氨酸(OtBu)-OH偶聯(lián)Fmoc-天冬氨酸(OtBu)-OH(1毫摩爾，10當(dāng)量)溶于2毫升NMP中，隨后加入含有0.45M HBTU/HOBt和2M DIEA/NMP(1毫升)的DMF(2.2毫升)使之活化。然后活化了的Fmoc-保護(hù)的氨基酸溶液轉(zhuǎn)移到反應(yīng)容器中，偶聯(lián)可以進(jìn)行30到60分鐘，這取決于來(lái)自去保護(hù)步驟的反饋。然后如以上所描述的，為了完成所要求的序列的裝配，樹(shù)脂用NMP洗滌6次，并經(jīng)過(guò)8次額外的去保護(hù)/偶聯(lián)循環(huán)。隨后使用的Fmoc-氨基酸是Fmoc-絲氨酸(tBu)-OH，F(xiàn)moc-蘇氨酸(tBu)-OH，F(xiàn)moc-苯丙氨酸-OH，F(xiàn)moc-蘇氨酸(tBu)-OH，F(xiàn)moc-甘氨酸-OH，F(xiàn)moc-谷氨酸(OtBu)-OH，F(xiàn)moc-丙氨酸-OH和Fmoc-組氨酸(Trt)-OH。最后，如以上所描述的，F(xiàn)moc基團(tuán)用NMP中22％的吡啶去除，肽基-樹(shù)脂用NMP和DCM洗滌6次，真空干燥。
作為選擇，使用修改的偶聯(lián)方案，其中通過(guò)隨后加入NMP(2毫升)中的0.5M HOAt和1M DIC/NMP(1毫升)，將Fmoc-保護(hù)的氨基酸(1毫摩爾)活化，然后轉(zhuǎn)移到反應(yīng)容器中，偶聯(lián)1-2小時(shí)。
切割/去保護(hù)
通過(guò)用TFA/水/三異丙基硅烷(94∶3∶3)(2.5毫升)的溶液處理2小時(shí)將所要求的肽從它的各自的肽-樹(shù)脂(0.141克)上斷裂/去保護(hù)。樹(shù)脂過(guò)濾，用TFA切割溶液(0.5毫升)潤(rùn)洗，混合的TFA濾液真空干燥。得到的固體磨碎，用乙醚洗滌，最后干燥，得到35.6毫克(58％)的白色的粗肽產(chǎn)物。粗肽產(chǎn)物通過(guò)在此描述的制備型HPLC純化，使用的梯度是15分鐘內(nèi)0.1％TFA水中的0.1％TFA/MeCN從20％升到75％。含有純產(chǎn)物的組分被凍干，得到7.2毫克(20％回收率)的純產(chǎn)物。
實(shí)施例5
在位置10和位置11處的二苯基丙氨酸類似物的合成
對(duì)于那些在位置10和位置11處的氨基酸殘基是用被取代的苯基丙氨酸類似物，即二苯基丙氨酸類似物(Bip-類似物)，表示的類似物，用兩種方法中的一種將它們整合進(jìn)入肽鏈。
方法A固相Suzuki縮合
在方法A中，以適合進(jìn)行以后的固相多肽合成以得到目的肽的方法進(jìn)行固相Suzuki縮合，來(lái)制備所要求的修飾的苯基丙氨酸殘基。當(dāng)目的肽中位置11處的氨基酸為修飾的苯基丙氨酸殘基時(shí)，其制備如方案3所示。除去Bocα-胺保護(hù)基團(tuán)后，使用如前節(jié)中描述的多肽合成繼續(xù)進(jìn)行鏈延伸，獲得要求的11mer的肽或它的衍生物。當(dāng)目的肽中位置10處是修飾的苯基丙氨酸殘基時(shí)，使用如方案4中所示的合適的二肽基-樹(shù)脂制備所要求的氨基酸。然后得到的含有所要求的修飾的苯基丙氨酸衍生物的二肽基樹(shù)脂用于進(jìn)行目的11mer肽或它的衍生物的合成。當(dāng)位置11和位置10都要求新的二苯基丙氨酸殘基時(shí)，兩個(gè)連續(xù)的固相Suzuki反應(yīng)如方案5所示的進(jìn)行。
制備在位置11處含有二苯基丙氨酸殘基的樹(shù)脂的一般程序(Suzuki偶聯(lián))。
方案3
程序A
聚苯乙烯(1％DVB交聯(lián)的)樹(shù)脂(50毫克，0.025毫摩爾)用Nα-Boc-4-碘代苯基丙氨酸殘基或者直接通過(guò)Knorr連接(Boc-氨基酸-樹(shù)脂)或者通過(guò)氨基酸-Knorr連接(Boc-二肽-樹(shù)脂)衍生，衍生的聚苯乙烯樹(shù)脂在3×100毫米的有螺旋瓶蓋的玻璃培養(yǎng)管中稱量。將芳基-硼酸(0.5毫摩爾)溶到0.75毫升含有體積比為25％的二異丙基乙胺的N-甲基吡咯烷酮中，將它們加到樹(shù)脂中，然后加入0.05毫升含1.0毫克四(三苯基膦基)鈀(0)催化劑(ca.3.5摩爾％)的N-甲基吡咯烷酮溶液。得到的混合物用氮?dú)飧采w，反應(yīng)容器被緊密罩上，85-90℃保持17-20小時(shí)，周期性的搖動(dòng)。在Boc基團(tuán)切割之前，樹(shù)脂用5×1毫升的N-甲基吡咯烷酮和5×1毫升的二氯甲烷洗滌(見(jiàn)以下的一般程序)。
程序B
除了采用不同的催化劑外，反應(yīng)按照一般程序A進(jìn)行。溶解9.0毫克乙酸鈀(II)和56毫克2-(二環(huán)己基膦基)二苯基于2.0毫升N-甲基吡咯烷酮中，制備催化劑溶液。對(duì)于0.025毫摩爾規(guī)模的反應(yīng)，采用0.038毫升(ca.3摩爾％)催化劑溶液。
切割Boc基團(tuán)的程序
方法A如一般程序A或B中描述制備的Boc-保護(hù)的樹(shù)脂用含三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸，2，6-二甲基吡啶和二氯甲烷(體積比1∶1∶3)的0.5毫升試劑溶液處理。3次這樣的試劑搖動(dòng)處理，每次1小時(shí)，然后用4×1毫升的二氯甲烷，3×1毫升的N，N-二甲基甲酰胺，3×1毫升的N，N-二甲基甲酰胺中20％甲醇，和4×1毫升的二氯甲烷洗滌，然后轉(zhuǎn)移到自動(dòng)肽合成儀。
方法B如一般程序A或B中描述制備的Boc-保護(hù)的樹(shù)脂用1.0毫升的無(wú)水1，4-二噁烷中的1N HCl室溫?fù)u動(dòng)處理1小時(shí)。樹(shù)脂用4×1毫升的二氯甲烷，3×1毫升的二氯甲烷中的5％二異丙基乙胺(體積∶體積)，3×1毫升的二氯甲烷，和5×1毫升的N-甲基吡咯烷酮洗滌，得到用于下一酰化作用(偶聯(lián)反應(yīng))步驟的自由的氨基酸-樹(shù)脂。
實(shí)施例6
制備在位置10處含有修飾的二苯基丙氨酸的樹(shù)脂的一般程序
利用以上描述的(A或B)Suzuki偶聯(lián)的一般程序獲得要求的在位置10處含有修飾的苯基的二肽基樹(shù)脂，開(kāi)始是如方案4所示的氨基酸(在位置11)結(jié)合樹(shù)脂。
方案4
實(shí)施例7
制備在位置10和位置11含有修飾的二苯基丙氨酸的樹(shù)脂的一般程序
利用為位置11處修飾的類似物(方案1)描述的程序和Suzuki偶聯(lián)程序，進(jìn)行兩次連續(xù)反應(yīng)產(chǎn)生在位置10和位置11處含有修飾的苯基丙氨酸殘基的二肽基樹(shù)脂，如方案5中圖解說(shuō)明。
方案5
方法B在溶液中用Suzuki縮合反應(yīng)合成Fmoc-二苯基丙氨酸衍生物
使用這種方法，以合成Fmoc-2-甲基-二苯基丙氨酸作為例證，制備幾種N-α-Fmoc保護(hù)的二苯基丙胺衍生物。如在此描述的，它們被用于11mer和別的肽類似物的固相合成。
實(shí)施例8
合成Fmoc-2-甲基-二苯基丙氨酸
以下方案6描述Fmoc-2-甲基-二苯基丙氨酸的合成
方案6
Boc-L-酪氨酸-O-trifiate114毫升無(wú)水二氯甲烷中的37克(126毫摩爾)Boc-酪氨酸-甲酯和25.4毫升(314毫摩爾，2.5當(dāng)量)吡啶的溶液在N2下保持在-15℃，往此溶液中緩慢加入25.4毫升(151毫摩爾，1.2當(dāng)量)triflic anhydride。溶液在-15℃攪拌15分鐘。HPLC分析表明反應(yīng)完全。反應(yīng)通過(guò)加入150毫升水抑制。各層被分離，有機(jī)層用2×150毫升0.5M NaOH，2×150毫升15％檸檬酸溶液洗滌。有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過(guò)濾，濃縮，真空干燥，得到紅色油狀的粗產(chǎn)物(粗產(chǎn)率在90％到定量之間變化)。
Boc-(2-甲基)二苯基丙氨酸甲酯以上紅色油狀物溶于70毫升甲苯中，加到80℃預(yù)熱的已除氣的含有19.0克o-甲苯基硼酸(140毫摩爾，1.2當(dāng)量)，24.1克碳酸鉀(175毫摩爾，1.5當(dāng)量)和4.6克四(三苯基膦基)鈀(0)(4.0摩爾，0.034當(dāng)量)的580毫升甲苯(140毫摩爾，1.2當(dāng)量)的懸浮液中?；旌衔镌贜2下80℃加熱3小時(shí)，冷卻到室溫，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。反應(yīng)混合物用2×150毫升0.5％NaOH，2×150毫升15％檸檬酸溶液洗滌，硫酸鎂干燥，濃縮。獲得的粗混合物用硅膠層析純化，使用乙酸乙酯/庚烷(1∶9)作為洗脫液，[粗混合物在硅膠上預(yù)吸收(2克硅膠/克粗混合物)，柱上使用的是1∶35的混合物硅膠]，產(chǎn)率在50到80％之間變化。
Boc-(2-甲基)二苯基丙氨酸往室溫保持的147毫升甲醇和442毫升四氫呋喃中的44.5克(120毫摩爾)Boc-(2-甲基)二苯基丙氨酸甲酯的溶液中加入147.4毫升1N NaOH(147毫摩爾，1.2當(dāng)量)。1小時(shí)后，HPLC分析表明反應(yīng)完全。反應(yīng)混合物濃縮，在500毫升水和30毫升乙醚之間分配。移去輕的溶液。含水層用160毫升1N HCl溶液酸化，然后用2×250毫升乙酸乙酯提取?；旌陷p的溶液，硫酸鎂干燥。過(guò)濾后，濃縮，干燥，得到41.5克產(chǎn)物。
Fmoc-(2-甲基)二苯基丙氨酸室溫保持的含有41.5克(117毫摩爾)Boc-(2-甲基)二苯基丙氨酸的1升二氯甲烷溶液在氣體HCl中起泡。大約5分鐘過(guò)程中，白色固體開(kāi)始沉淀。2小時(shí)后進(jìn)行HPLC，表明反應(yīng)完全?；旌衔餄饪s。殘余物再溶于600毫升四氫呋喃和150毫升水中，緩慢加入固體的NaHCO3，直到混合物的pH為堿性(白色固體沉淀出來(lái))，然后加入38.9克(115毫摩爾，1當(dāng)量)Fmoc-Osu。然后混合物室溫?cái)嚢琛?小時(shí)內(nèi)獲得均質(zhì)的雙相溶液。在N2下室溫?cái)嚢璩掷m(xù)過(guò)夜。各層被分離。四氫呋喃層用58毫升2N HCl酸化，然后用400毫升乙酸乙酯稀釋。各層被分離，有機(jī)層用2×100毫升水洗滌，硫酸鎂干燥，濃縮。粗產(chǎn)物用硅膠柱層析純化，使用二氯甲烷作為洗脫液，直到大多數(shù)雜質(zhì)被除去。溶劑換成含有1％乙酸的庚烷中的25％乙酸乙酯，[層析柱用大約23克硅膠/克粗產(chǎn)物]。3步的產(chǎn)率是＞90％。
實(shí)施例9
各種Fmoc-二苯基丙氨酸衍生物的一般合成
使用以上描述的程序進(jìn)行幾種Fmoc-二苯基丙氨酸衍生物的合成，開(kāi)始是使用商業(yè)上可獲得的苯酚衍生物(例如，Boc-酪氨酸甲酯)制備triflate，使用合適的硼酸制備二苯基丙氨酸類似物。當(dāng)所需要的硼酸不能從商業(yè)來(lái)源獲得時(shí)，中間體的合成如以下實(shí)施例中例證的進(jìn)行。
2-乙苯基硼酸將含有25克(135毫摩爾)1-溴-2-乙基苯的280毫升無(wú)水四氫呋喃溶液放在烘干的3頸燒瓶中，置于-78℃，緩慢加入(保持低于-68℃的溫度)2.5N的正丁基鋰(169毫摩爾，1.25當(dāng)量)的67.5毫升甲烷溶液。反應(yīng)物再攪拌1小時(shí)，然后加入69ml(405毫摩爾，3當(dāng)量)三乙基硼酸，保持溫度低于-68℃。反應(yīng)物再攪拌40分鐘，然后去掉干冰浴，反應(yīng)物加溫到室溫，然后倒到300毫升冰冷飽和的氯化銨溶液中。加入200毫升冰冷的乙酸乙酯，混合物再攪拌30分鐘。各層被分離。有機(jī)層用水，鹽水洗滌。然后硫酸鎂干燥，濃縮，得到19克(92％產(chǎn)率)產(chǎn)物。硼酸無(wú)需純化在下一步使用。
實(shí)施例10
在內(nèi)部苯環(huán)中具有取代物的Fmoc-保護(hù)的二苯基丙氨酸類似物的合成
苯環(huán)直接與氨基酸部分的β-碳(內(nèi)部環(huán))連接，這樣的內(nèi)部苯環(huán)有取代物的Fmoc-保護(hù)的二苯基丙氨酸類似物的合成如以下方案7中描述的進(jìn)行。
方案7
作為一般方法，開(kāi)始是使用鋅介導(dǎo)的縮合反應(yīng)，通過(guò)Boc-β-碘丙氨酸與所要求的4-碘代苯酚衍生物反應(yīng)，制備合適的被保護(hù)的酪氨酸衍生物。此反應(yīng)得到的產(chǎn)物經(jīng)過(guò)在此描述的Suzuki縮合反應(yīng)，得到所要求的在與氨基酸部分的β-碳(內(nèi)部環(huán))直接相連的苯環(huán)中有取代基的Fmoc-保護(hù)的二苯基丙氨酸類似物。具體實(shí)施例Fmoc-2’-甲基-2-甲基-二苯基丙氨酸的合成在以下給出。
Boc-2’-甲基-酪氨酸苯甲醚甲酯2.2克(33毫摩爾)烘箱干燥的鋅粉N2下置于烘箱干燥的燒瓶中。加入5.2毫升無(wú)水的四氫呋喃，和140微升(1.6毫摩爾)1，2-二溴乙烷，混合物用熱風(fēng)機(jī)短時(shí)加溫，直到溶劑開(kāi)始沸騰，然后劇烈攪拌幾分鐘。此程序重復(fù)幾次，然后反應(yīng)混合物冷卻到35℃。加入40微升(0.32毫摩爾)氯三甲基硅烷，混合物35℃劇烈攪拌30分鐘。緩慢加入3毫升1∶1四氫呋喃∶二甲基乙酰胺中的1.04克(3.17毫摩爾)Boc-碘丙氨酸，反應(yīng)混合物35℃攪拌30分鐘，緩慢加入3毫升含有819毫克(2.5毫摩爾)4-碘-2-甲基-1-苯甲氧基苯的1∶1的四氫呋喃∶二甲基乙酰胺，然后加入338毫克(1.11毫摩爾)三-o-甲苯基膦，和288毫克(0.31毫摩爾)Pd2(dba)3。反應(yīng)混合物被除氣，然后60℃攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻到室溫，用乙酸乙酯稀釋，通過(guò)硅藻土過(guò)濾。濾液用2×25毫升1N HCl洗滌，硫酸鎂干燥，過(guò)濾，濃縮。產(chǎn)物通過(guò)硅膠柱層析純化(72％產(chǎn)率)。
Boc-2’-甲基-酪氨酸甲酯含有7.5克(18.7毫摩爾)以上化合物(Boc-2’-甲基-酪氨酸苯甲醚甲酯)的30毫升四氫呋喃懸浮液和碳上2.25克10％Degussa型10％的鈀在氫氣中室溫和大氣壓下攪拌2天。反應(yīng)混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾，濃縮。產(chǎn)物通過(guò)硅膠層析純化(74％產(chǎn)率)。
Fmoc-2’-甲基-2-甲基-二苯基丙氨酸使用在此描述的Suzuki縮合程序制備此化合物，使用Boc-2’-甲基-酪氨酸甲酯作為起始材料。以上Suzuki縮合反應(yīng)得到的產(chǎn)物，使用在此描述的條件，除去Boc基團(tuán)和用Fmoc基團(tuán)再保護(hù)后，得到所要求的化合物。
實(shí)施例11
利用在此描述的合成方法，制備以下的GLP-1模擬肽
表1化合物# Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 YZ 1 HAEGTFTSD BipPhe(4-NO2) 2 HAEGTFTSD Bip2-Nal 3 HAEGTFTSD BipBip 4 HAEGTFTSD BipPhe(五氟) 5 HAEGTFTSD BipPhe(4-甲基) 6 HAEGTFTSD 2-NalBip 7 HAEGTFTSD BipF 8 HAEGTFTSD BipY 9 HAEGTFTSD 2-NalPhe(五氟) 10 HAEGTFTSD BipPhe(4-碘) 11 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(4-氧甲基) 12 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(3，4-亞甲基二氧基) 13 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)4-(1-萘基)-Phe 14 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(4-甲基) 15 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(3-甲基) 16 HAEGTFTSD Bip(2，4-二氧甲基Bip(2-甲基) 17 HAEGTFTSD Bip(2-甲基，4-氧甲基)Bip(2-甲基) 18 HADGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)19 HAE GNle FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)20 HAE GTPhe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)21 HAH GTPhe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)22 HAD GNle FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)23 HAE GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)24 HAE GNle FTHD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)25 Hala D GNle FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)26 Hala D GTPhe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)27 HAH GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)28 HAH GTPhe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)29 HAD GTPhe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)30 HAD GNle FTHD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)31 Hala D GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)32 HAE GTFTSD Bip(2-乙基)Bip33 HAE GNle Phe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)34 HAE GTFTSD Bip(2-氧乙基)Bip(2-甲基)35 HAE GTFTSD Bip(2-丙基)Bip(2-甲基)36 HAE GTFTSD Bip(2-丙基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)37 HAE GTFTSD Bip(2-三氟甲基)Bip38 HAE GTFTSD Bip(2-氯)Bip39 HAE GTFTSD Bip(2-氟)Bip40 HAE GTFTSD Bip(4-三氟甲基)Bip41 HAE GTFTSD 4-(1-萘基)-PheBip42 HAE GTFTSD 4-(3-噻吩)-PheBip43 HAEGTFTSD 4-(3-喹啉)-PheBip44 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Phe(五氟)45 HAEGTFTSD Bip(2-氧甲基)Phe(五氟)46 HAEGTFTSD Bip(2-三氟甲基)Phe(五氟)47 HAEGTFTSD Bip(2-三氟甲基)Phe(五氟)48 HAEGTFTSD Bip(2-氯)Phe(五氟)49 HAEGTFTSD Bip(2-氟)Phe(五氟)50 HAEGTFTSD Bip(4-氧甲基)Phe(五氟)51 HAEGTFTSD Bip(3，4-亞甲基二氧 基)Phe(五氟)52 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)2-Nal53 HAEGTFTSD Bip(2-氧甲基)2-Nal54 HAEGTFTSD Bip(2-三氟甲基)2-Nal55 HAEGTFTSD Bip(2-氯)2-Nal56 HAEGTFTSD Bip(2-氟)2-Nal57 HAEGTFTSD Bip(4-甲基)2-Nal58 HAEGTFTSD Bip(4-氧甲基)2-Nal59 HAEGTFTSD Bip(3，4-亞甲基二氧 基)2-Nal60 HAEGTFTSD 4-(1-萘基)-Phe2-Nal61 HAEGTFTSD 4-(3-噻吩)-Phe2-Nal62 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Phe(4-甲基)63 HAEGTFTSD Bip(2-三氟甲基)Phe(4-甲基)64 HAEGTFTSD Bip(2-氯)Phe(4-甲基)65 HAEGTFTSD Bip(2-氟)Phe(4-甲基)66 HAEGTFTSD Bip(4-氯)Phe(4-甲基)67 HAEGTFTSD Bip(4-甲基)Phe(4-甲基)68 HAEGTFTSD Bip(4-氟)Phe(4-甲基)69 HAEGTFTSD Bip(4-氧甲基)Phe(4-甲基)70 HAEGTFTSD Bip(3，4-亞甲基二氧)Phe(4-甲基)71 HAEGTFTSD 4-(1-萘基)-PhePhe(4-甲基)72 HAEGTFTSD Bip(3-苯基)Phe(4-甲基)73 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2-氟)74 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(4-苯基)75 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(3-氧甲基)76 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)4-(3-吡啶基)-Phe77 HAEGTFTSD Phe(五氟)Bip(4-氧甲基)78 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(3-乙酰氨基)79 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(4-異丙基)80 HAEGTFTSD Bip4-(1-萘基)-Phe81 HAEGTFTSD Bip4-(3-吡啶基)-Phe82 HAEGTFTSD Phe(五氟)Bip(2-甲基)83 HAEGTFTSD 2-NalBip(2-甲基)84 HAEGTFTSD Phe(4-碘)Bip(2-甲基)85 HAEGTFTSD Phe(3，4-二-氯)Bip(2-甲基)86 HAEGTFTSD Tyr(Bzl)Bip(2-甲基)87 HAEGTFTSD HomoPheBip(2-甲基)88 HAEGTFTSD Bip(2，4-二-氧甲基)Bip89 HAEGTFTSD 4-(4-(3，5-二甲基異 噁唑))-PheBip 90 HAE GTFTSD Bip(2-甲基，4-氧甲基)Bip 91 HAE GTFTSD Bip(2，6-二甲基)Bip 92 HAE GTFTSD Bip(2，4-二甲基)Bip 93 HAE GTFTSD Bip(2，3-二甲基)Bip 94 HAE GTFTSD Bip(4-三氟甲氧基)Bip 95 HAE GTFTSD Bip(4-乙基)Bip 96 HAE GTFTSD 4-(2-萘基)-PheBip 97 HAE GTFTSD 4-(4-二苯并呋 喃)-PheBip 98 HAE GTFTSD Bip(2，6-二-氧甲基)Bip(2-甲基) 99 HAE GTFTSD 4-(2，4-二甲氧嘧 啶)-PheBip(2-甲基) 100 HAE GTFTSD Bip(2，4，6-三甲基)Bip(2-甲基) 101 HAE GTFTSD 4-(4-(3，5-二甲基異噁 唑))-PheBip(2-甲基) 102 HAE GTFTSD Bip(2，4-二氯)Bip(2-甲基) 103 HAE GTFTSD Bip(2，6-二甲基)Bip(2-甲基) 104 HAE GTFTSD Bip(2，4-二甲基)Bip(2-甲基) 105 HAE GTFTSD Bip(2，3-二甲基)Bip(2-甲基) 106 HAE GTFTSD Bip(4-乙基)Bip(2-甲基) 107 HAE GTFTSD Bip(4-硫甲基)Bip(2-甲基) 108 HAE GTFTSD Bip(4-氧乙基)Bip(2-甲基) 109 HAE GTFTSD 4-(2-萘基)-PheBip(2-甲基) 110 HAE GTFTSD 4-(2-苯并(b)噻 吩)-PheBip(2-甲基) 111 HAE GTFTSD 4-(2-苯并(b)呋Bip(2-甲基) 喃)-Phe112 HAEGTFTSD 4-(4-二苯并呋 喃)-PheBip(2-甲基)113 HAEGTFTSD 4-(4-酚黃素)-PheBip(2-甲基)114 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(4-乙基)115 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(4-硫甲基)116 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2，4-二甲基)117 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基，4-氧甲基)118 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2，3-二甲基)119 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)4-(2-萘基)-Phe120 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2-氧乙基)121 HAEGTFTSD Bip(2-甲基)Bip(2-乙基，4-氧甲基)122 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(3-乙基)123 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(3-丙基)124 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(3-苯基)125 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(3-氧乙基)126 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(4-乙基)127 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(4-硫甲基)128 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(4-OCF3)129 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(4-氧乙基)130 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基，4-氧甲基)131 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(2，6-二甲基)132 HAEGTFTSD Bip(2-乙基)Bip(2，4，6-三甲基) 133 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(2-苯基) 134 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(2-異丙基) 135 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) 4-(2-萘基)-Phe 136 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(2，5-二-氧甲基) 137 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(2-氧乙基) 138 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(3，4-二-氧甲基) 139 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(2-乙基，4-氧甲 基) 140 Hala E GNle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 141 HAH GTF THD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 142 HAH GTF TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 143 HAE GTF TSD Bip Phe(4-三氟甲基) 144 HAib E GNle Phe(五氟) TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 145 HAib D GTF TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 146 HAib D GNle F THD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 147 HAib H GTPhe(五氟) THD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 148 HAib D GNle F TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 149 HAib H GTF THD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 150 Hala asp GNle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 151 HAD GNle F THD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 152 Hala D GNle Phe(五氟) THD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 153 HAD GT(L)-Phe(2，4-二氟) TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 154 HAib asp GNle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 155 HAD GT(D)-Phe(2，4-二氟) TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基)156 HAibD GNle FTHD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)157 HAibD GNle FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)158 HAibD GT FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)159 HAibD GT Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)160 HAibE GNle FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)161 HAibE GNle Phe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)162 HAibE GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)163 HAibE GT Phe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)164 HAibE GT Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)165 HAibH GT FTHD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)166 HAibH GT FTSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)167 HAibH GT Phe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)168 his AibD GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)169 HalaD GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)170 HAibD GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)171 HAibD GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-乙基)172 HAibD GNle Phe(五氟)TSD Phe(五氟)Bip(2-甲基)173 HalaD GT Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)174 HAibE GT Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)175 HA D GT (L)-Phe(2， 5-二-F)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)176 HA Dpr GT Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)177 HAibDpr GT Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)178 HalaDpr GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基，2’-甲基)Bip(2-甲基)179 HA Dpr GT Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基，2’-甲基)Bip(2-甲基)180 HA Dpr GT FTSD Bip(2-乙基，2’-甲基)Bip(2-甲基) 181 Hlva E GTF TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 182 HAE Ghomo F Leu TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 183 HAE GThomoLeu TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基) 184 HAE GTF TSD 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala Bip(2-甲基) 185 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) 2-(9，10-二氫菲 基)-A1a 186 HAE GTF TSD Bip(2-乙基) 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 187 HAE GTF TSD 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 188 HAE GTF TSD 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 189 HAE GTF TSD 2-芴基Ala 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 190 HAE GTF TSD 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 2-芴基Ala 191 HAE GTF TSD 2-(9，10-二氫菲 基)-Ala 2-芴基Ala 192 HAE GTF TSD Bip(2-乙基，2’-乙基) Bip 193 HAE GTF TSD Bip(2-乙基，2’-乙基) Bip(2-甲基) 194 Hala D GNle Phe(五氟) TSD Bip(2-乙基，4-氧甲基) Bip(2-甲基) 195 HAE GTF TSD Bip(2-丙基，2’-甲基) Bip 196 HAD GTL-α-甲基-Phe TSD Bip Bip(2-乙基) 197 HAD GTL-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-乙基)-Phe198 HA D GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-甲基)Bip(2-乙基)199 HalaE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)200 HA D GTL-α-甲基-Phe TSD BipBip201 Halaasp GNle L-α-甲基-Phe TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)202 HalaD GNle L-α-甲基-Phe TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)203 HAibD GNle L-α-甲基-Phe TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)204 HAibD GNle L-α-甲基-Phe thr SD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)205 HAibD GNle L-α-甲基-Phe Tser D Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)206 HAibD GNle L-α-甲基-Phe TSD Bip(2-甲基)Bip207 HG E GTF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)208 HA E GTF TSD Bip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(2，4-二-甲基)209 HA E GTF TSD Bip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(4-氧甲基)210 HA E GTF TSD Bip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(3-甲基)211 HA E GTF TSD Bip(2-CH2OH，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)212 HA E GTF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-丙基，2’-甲基)213 HA E GTF TSD Bip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(2，3，4，5-四甲基)214 HAE GTFTSD Bip(2-乙基)Bip(2，2’-二甲基)215 HAD GTPhe(2-氧甲基)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)216 HAD GTPhe(2-羥基)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)217 HAD GTPhe(2-碘)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)218 HAD GTPhe(3-氧甲基)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)219 HAD GTTyr(3-碘)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)220 HAD GTTyr(3-NO2)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)221 HAD GT(L)-Phe(2，3-二氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)222 HAD GTTyr(2，6-二甲基)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)223 HAD GT2-噻吩基丙氨酸TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)224 HAD GT(D)-Phe(2，3-二氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)225 HAE GTFTSD Bip(2-乙基，2’-甲基)Bip(2-乙基)226 Hala D GNle FTSD Bip(2-乙基，2’-甲基)Bip(2-甲基)227 HAcc3 D GNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)228 HAcc3 D GNle FTHD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)229 HAcc3 D GTPhe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)230 HAcc3 D GNle Phe(五氟)THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)231 HAD GTPhe(2-三氟甲基)TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)232 HAD G TPhe(2，4- 二氯) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)233 H2-Abu E G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)234 his Aasp G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)235 HAE G Nle Phe(五氟) THD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)236 HAib D G TPhe(五氟) TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)237 HAib E G Nle Phe(五氟) THD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)238 HAE G TPhe(2-甲 基) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)239 HAE G TF TSD Bip(2-乙基)Bip(2-乙基)240 HAE G TF TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基))Bip241 HAE G TPhe(2氯) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)242 HAE G TF TSD Bip(2-乙基，2’-甲基)Bip(2，2’-二甲基)243 HAγ-羧基 -Glu G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)244 HAC G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)245 Hala E G Nle L-α-甲基 -Phe TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)246 HL-硫 E 代Pro G TF TSD BipBip247 HAE G TF TSD BipBip(2，2’-二甲基)248 HAE G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(2，2’-二甲基)249 HAE G TF TSD Bip(2’-甲基)Bip(2-甲基)250 HAE G TF TSD BipBip(2’-甲基)251 HAE G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(2’-甲基)252 HAE GTF TSD Bip(2’-甲基)Bip253 HAib E GNle Phe(五氟) TSD bip(2’-甲基)Bip(2-甲基)254 HAE GTF TSD Bip(2’-甲基)Bip(2，2’-二甲基)255 HAE GTF TSD Bip(2’-甲基)Bip(2’-甲基)256 HAE GTF TSD Bip(2，2’-二甲基)Bip257 HAE GTF TSD Bip(2，2’-二甲基)Bip(2-甲基)258 HAE GTF TSD Bip(2，2’-二甲基)Bip(2-乙基)259 HAE GTF TSD Bip(2，2’-二甲基)Bip(2，2’-二甲基)260 HAE GTF TSD Bip(2-甲基)Phe(4-正丁基)261 HAE GTF TSD Bip(2-甲基)Phe(3-苯基)262 HAE GTF TSD Bip(2-甲基)Phe(4-環(huán)己基)263 HAE GTF TSD Bip(2-甲基)Phe(4-苯氧基)264 HAE GTF TSD Phe(4-正丁基)Bip(2-甲基)265 HAE GTF TSD Phe(4-環(huán)己基)Bip(2-甲基)266 HAE GTF TSD Phe(4-苯氧基)Bip(2-甲基)267 HAD GTPhe(3-氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)268 HAD GTPhe(4-氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)269 HAD GTPhe(3，4-二氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)270 HAD GTPhe(3，5-二氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)271 HAD GTPhe(3，4，5-三氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)272 HalaD GNle F THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)273 HalaD GTPhe(五氟) THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)274 HalaE GNle Phe(五氟) THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)275 HAH GNle Phe(五氟) THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)276 HAD GNle Phe(五氟) TSD Bip(2，4-二氧甲基)Bip(2-甲基)277 HAE GTF TSD Bip(2-甲基，4-氧甲 基)Bip(3，4-亞甲基二氧基)278 HAE GTF TSD Bip(2-乙基)Bip(3，4-亞甲基二氧基)279 HAD GTF TSD Bip(2，4-二-氧甲基)4-(1-萘基)-Phe280 HAE GTF TSD Bip(2-甲基，4-氧甲 基)4-(1-萘基)-Phe281 HAD GTF TSD Bip(2，4-二-氧甲基)Bip(4-氧甲基)282 HAE GTF TSD Bip(2-甲基，4-氧甲 基)Bip(4-氧甲基)283 HAE GTF TSD Bip(2，4-二-氧甲基)Bip(4-甲基)284 HAE GTF TSD Bip(2-甲基，4-氧甲 基)Bip(4-甲基)285 HAD GTF TSD Bip(2，4-二-氧甲基)Bip(2，4-二-氧甲基)286 HAE GTF TSD Bip(2-甲基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基，4-氧甲基)287 HAD GTF TSD Bip(2，4-二-氧甲基)Bip(2，4-二-氧甲基)288 HAE GTF TSD Bip(2，4-二-氧甲基)Bip(3-甲基)289 HAE GTF TSD Bip(2-甲基，4-氧甲 基)Bip(3-甲基)290 HA4-噻唑 基Ala GTF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)291 Hala D GNle Phe(五氟) THD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)292 HAE GTF TSD Bip(2-乙基，4，5-亞Bip(2-甲基) 甲基二氧基)293 H N-甲 E基-AlaGNle Phe(五氟)THD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)294 H N-甲 D基-AlaGNle Phe(五氟)TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基)295 H N-甲 D基-AlaGTPhe(五氟)TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基)296 H N-甲 E基-AlaGNle Phe(五氟)THD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基)297 H N-甲 E基-AlaGTPhe(五氟)TSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基)298 H sarcos EylGTFTSD Bip(2-甲基) Bip(2-甲基)299 H A EGTFTSD Bip(3-CH2NH2) Bip(2-甲基)300 H A EGTFTSD Bip(2-CH2NH2) Bip(2-甲基)301 H A EGTFTSD Bip(4-CH2NH2) Bip(2-甲基)302 H A EGTFTSD Bip(3-CH2-COOH) Bip(2-甲基)303 H A EGTFTSD Bip(2-甲基) Bip(2’-CH2-COOH)304 H A EGTFTSD Bip(2-甲基) (D，L)-Bip(2-CH2-CO OH)305 H A EGTFTSD Bip(2-甲基) Bip(4-CH2-COOH)306 H A EGTFTSD Bip(2-甲基) Bip(3-CH2-COOH)307 HA E G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(3-CH2NH2)308 HA E G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(4-CH2NH2)309 HA E G TF TSD Bip(2-甲基)Bip(2-CH2NH2)310 HA E G TF TSD Phe[4-(1-炔丙基)]Bip(2-甲基)311 HA E G TF TSD Phe[4-(1-丙烯基)]Bip(2-甲基)312 HA asp G TL-α-甲基 -Phe TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)313 HA D G thr L-α-甲基 -Phe TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)314 HA D G TL-α-甲基 -Phe TSasp Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)315 HA D G TL-α-甲基 -Phe TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)316 Halaasp G TL-α-甲基 -Phe TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)317 HAibD G TL-α-甲基 -Phe Thr SD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)318 HAibD G TL-α-甲基 -Phe TSasp Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)319 HalaD G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)320 HalaD G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)321 HalaD G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)322 HalaD G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-乙基)323 HAibD G Nle Phe(五氟) TSD bip(2-甲基)Bip(2-甲基)324 HAibD G Nle Phe(五氟) TSD bip(2-乙基)Bip(2-甲基)325 HAibD G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)326 HAibD G Nle Phe(五氟) TSD Bip(2-甲基)Bip(2-乙基)327 HAE GTF T SD Bip(2-甲基)(D，L)-α-甲基-Bip328 HAE GTF T SD Bip(D，L)-α-甲基-Bip329 HAD G同分 L-α-甲基 異構(gòu) -Phe 的Thr T SD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)330 HAD GTL-α-甲基-Phe 同分異 SD 構(gòu)的 -Thr Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)331 HAD GTL-α-甲基-Phe T hSer D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)332 HAD GTL-α-甲基-Phe T TD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)333 HAD GTL-α-甲基-Phe T SE Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)334 HAE GNle F T SD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)335 HAasp GTL-α-甲基-Phe T SD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)336 HAib D Gthr L-α-甲基-Phe T SD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)337 HAib D GTL-α-甲基-Phe thrSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)338 HAib D GTL-α-甲基-Phe T Sasp Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)339 HAD GTL-α-甲基-Phe T SD Bip(2-乙基) -NH-[2-(五-氟-苯基) 乙基)340 HAD GNle L-α-甲基 T SD Bip(2-乙基)-Phe -NH-[2-(五-氟-苯基) 乙基] 34l H AibE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) -NH-[2-(五-氟-苯基) 乙基] 342 H Aib D GNle L-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) -NH-[2-(五-氟-苯基) 乙基] 343 H Aib asp GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 344 H ala E GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 345 H ala E GTL-Phe(2，6-二氟) TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 346 H N-甲 E 基 -Ala GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 347 H A N-甲基-Glu GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 348 H A E N- TL-α-甲基 甲-Phe 基 Gly TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 349 H A D GNle (D，L)-α-甲基-Phe(五氟) TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基) Bip(2-甲基)350 HalaD GNle (D，L)-α- 甲基 -Phe(五 氟)TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)351 HAibD GNle (D，L)-α- 甲基 -Phe(五 氟)TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)352 HalaE GTD-Phe(2，6 -二氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)353 HAibD GTD-Phe(2，6 -二氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)354 HA E GT(D，L)-α- 甲基 -Phe(五 氟)TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)355 HA D GT(D，L)-α- 甲基 -Phe(五 氟)TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)356 HalaE GT(D，L)-α- 甲基 -Phe(五 氟)TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 基)Bip(2-甲基)357 HA D GTL-α-甲基 -PheTSD Bip(2-乙基)bip(2-乙基)358 HAibD GTL-α-甲基TSD Bip(2-乙基)bip(2-甲基)-Phe 359 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-OH)Bip(2-甲基) 360 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(4-OH)Bip(2-甲基) 361 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2-氧乙基)Bip(2-甲基) 362 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-氧乙基)Bip(2-甲基) 363 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-OCF3)Bip(2-甲基) 364 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-NO2)Bip(2-甲基) 365 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-CF3)Bip(2-甲基) 366 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-氟)Bip(2-甲基) 367 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-氯)Bip(2-甲基) 368 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-Ph)Bip(2-甲基) 369 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-乙基)Bip(2-甲基) 370 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-異丙基)Bip(2-甲基) 371 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(4-異丙基)Bip(2-甲基) 372 HAE GTL-α-甲基 TSD Bip(4-丙基)Bip(2-甲基)-Phe 373 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-丙基) Bip(2-甲基) 374 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2，5-二氯) Bip(2-甲基) 375 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2，5-二氟) Bip(2-甲基) 376 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3，4-二氟) Bip(2-甲基) 377 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3，4-二氯) Bip(2-甲基) 378 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(2，3-二氯) Bip(2-甲基) 379 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(3-NHAc) Bip(2-甲基) 380 HAE GTL-α-甲基-Phe TSD Bip(4-NHAc) Bip(2-甲基) 381 HAE GAoc L-α-甲基-Phe TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 382 HAD GNle F TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 383 Hala E GTL-Phe(2-氟) TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 384 HAib D GNle (D，L)-α-乙基-Phe TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 385 HAib D GTL-α-甲基-Phe T(D，L)- D α-甲基 -Ser Bip(2-乙基) Bip(2-甲基) 386 HAD GTL-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-氧甲 Bip(2-甲基) -Phe(2，6- 二氟)基)387 HA E GT L-α-甲基 -PheTSDBip(4-叔丁基)Bip(2-甲基)388 HalaE GNleL-α-甲基 -Phe(2，6- 二氟)TSDBip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(2-甲基)389 HalaD GNleL-α-甲基 -Phe(2，6- 二氟)TSDBip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(2-甲基)390 HAibE GNleL-α-甲基 -Phe(2，6- 二氟)TSDBip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(2-甲基)391 HAibD GNleL-α-甲基 -Phe(2，6- 二氟)TSDBip(2-乙基，4-氧甲基)Bip(2-甲基)392 HA D GNleL-α-甲基 -Phe(2，6- 二氟)TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)393 HA D GT F TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
氨基酸縮寫(xiě)和結(jié)構(gòu)
A＝L-丙氨酸；ala＝D-丙氨酸
Aib＝α-氨基異丁酸
Bip＝L-二苯基丙氨酸；bip＝D-二苯基丙氨酸
C＝L-半胱氨酸
D＝L-天冬氨酸；asp＝D-天冬氨酸
E＝L-谷氨酸
G＝甘氨酸
H＝L-組氨酸；his＝D-組氨酸
K＝L-賴氨酸
Nle＝L-正亮氨酸；nle＝D-正亮氨酸
F＝L-苯丙氨酸
S＝L-絲氨酸；Ser＝D-絲氨酸
T＝L-蘇氨酸；thr＝D-蘇氨酸
Y＝L-酪氨酸
W＝L-色氨酸
α-甲基-苯基丙氨酸
苯基丙氨酸 二苯基丙氨酸
(α-甲基-Phe)環(huán)碳
環(huán)碳的編號(hào) 環(huán)碳的編號(hào)
的編號(hào)
Bip(3，4-亞甲基二氧基) Bip(2-乙基，4，5-亞甲基二氧基)4-(2-萘基)-Phe4-(1-萘基)-Phe4-(4-(3，5-二甲基異噁唑))-Phe
4-(2-苯并(b)噻吩)-Phe 4-(2，4-二甲氧嘧啶)-Phe 4-(3-噻吩)-Phe 4-(3-吡啶基)-PheBip(3-乙酰胺基)2-(9，10-二氫菲基)-Ala
2-芴基Ala 4-(3-喹啉)-Phe 4-(2-苯并(b)呋喃)-Phe 4-(4-二苯并呋喃)-Phe 4-(4-phenoxathiin)-Phe
Aib IvaL-α-甲基-脯氨酸 Acc3 L-4-硫代脯氨酸 N-甲基-丙氨酸 Sarcosyl 2-Abu Dprγ-羧基-谷氨酸
高亮氨酸 苯丙氨酸[4-(1-丙烯基)] 苯丙氨酸[4-(1-炔丙基)]4-噻唑基丙氨酸 2-噻吩基-丙氨酸酪氨酸(2，6-二甲基) 酪氨酸(3-碘)
酪氨酸(3-硝基) Tyr(Bzl) 高苯丙氨酸 Des-NH2-HisNva高絲氨酸 Adp 同分異構(gòu)-ThrAoc
Bip(2-乙基)-NH-[2-(五氟苯基)乙基]
表II化合物# AXaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Y Z 1 乙?；鵋 A EG TF T S D Bip Bip 2 β-AlaH A EG TF T S D Bip Bip 3 AhxH A EG TF T S D Bip Bip 4 DH A EG TF T S D Bip Bip 5 EH A EG TF T S D Bip Bip 6 FH A EG TF T S D Bip Bip 7 GH A EG TF T S D Bip Bip 8 KH A EG TF T S D Bip Bip 9 NvaH A EG TF T S D Bip Bip 10 NH A EG TF T S D Bip Bip 11 RH A EG TF T S D Bip Bip 12 SH A EG TF T S D Bip Bip 13 TH A EG TF T S D Bip Bip 14 VH A EG TF T S D Bip Bip 15 WH A EG TF T S D Bip Bip 16 YH A EG TF T S D Bip Bip 17 己內(nèi)酰胺H A EG TF T S D Bip Bip 18 BipH A EG TF T S D Bip Bip 19 Ser(Bzl)H A EG TF T S D Bip Bip 20 3-吡啶基丙氨酸H A EG TF T S D Bip Bip 21 Phe(4-甲基)H A EG TF T S D Bip Bip
22Phe(五氟)HAEGTFTSD Bip Bip
β-丙氨酸Ahx Nva己內(nèi)酰胺 3-吡啶基丙氨酸
表III
化合物# R-CH2- Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 YZ 1 4-甲基苯甲基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me) 2 4-氟苯甲基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me) 3 丙基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me) 4 己基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me) 5 環(huán)己基甲基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me) 6 6-羥戊基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me) 7 2-噻吩基甲基 HAEG T FT SD Bip(2-Me)Bip(2-Me)
83-噻吩基甲基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)9五氟苯甲基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)102-萘基甲基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)114-二苯基甲基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)129-蒽基甲基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)13苯甲基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)14(S)-(2-氨基-3-苯基)丙基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)15甲基H AEGTFTSD BipBip16苯甲基H AEGTFTSD BipBip172-氨乙基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)18(S)-2-氨丙基H AEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)
*表中所有化合物都作為C端羧酰胺制備。
4-甲基苯甲基 4-氟苯甲基 丙基 己基環(huán)己基甲基 6-羥基戊基 2-噻吩基甲基 3-噻吩基甲基 五氟苯甲基
2-萘基甲基 4-二苯基甲基 9-蒽基甲基 苯甲基 (S)-(2-氨基-3-苯基)丙基 2-氨乙基 (S)-2-氨丙基
表IV化合物# Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Y Z B 1 HAE G T F TSD Bip 2-Nal W 2 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) 2-Nal 3 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) Phe(五氟) 4 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) Ser(Bzl) 5 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) Phe(4-NO2) 6 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) 3-吡啶基丙 氨酸 7 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) Nva 8 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) K 9 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) D 10 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) S 11 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) H 12 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) Y 13 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) W 14 HAE G T F TSD Bip Phe(五氟) F 15 HAE G T F TSD 2-Nal Phe(五氟) W 16 HAE G T F TSD Bip Bip Bip 17 HAE G T F TSD Bip Bip Nva 18 HAE G T F TSD Bip(2-Me) Bip(2-Me) Ser 19 HAE G T F TSD Bip(2-Me) Bip(2-Me) Gly-OH 20 HAE G T F TSD Bip(2-Me) Bip(2-Me) β-Ala-OH
21HAEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)GABA-OH 22HAEGTFTSD Bip(2-Me)Bip(2-Me)APA-OH
*除了化合物19-22作為羧酸制備外，表中所有化合物都作為C端羧酰胺制備。
2-Nal Ser(Bzl) GABA APA
實(shí)施例12
對(duì)應(yīng)于GLP-1的“信號(hào)(message)”序列的肽的合成和檢測(cè)和“地址(address)”二苯基丙氨酸二肽單位連接在其C端的同樣的肽
的合成和檢測(cè)
GLP-1的N端1-9序列，His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-NH2，在本發(fā)明中被稱為GLP-1的“信號(hào)”序列。對(duì)應(yīng)于這段信號(hào)序列的多肽和含有GLP-1的信號(hào)序列和C-端二苯基丙氨酸二肽單位的GLP-1的11mer肽類似物His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Bip-Bip-NH2通過(guò)使用在此描述的方法制備，并用實(shí)施例13中描述的以細(xì)胞為基礎(chǔ)的環(huán)腺苷酸(cAMP)分析進(jìn)行檢測(cè)。GLP-1的11mer肽類似物以劑量響應(yīng)方式刺激cAMP的產(chǎn)生，對(duì)應(yīng)的EC50值為1.1微摩爾，如實(shí)施例13中確定的。在同樣的分析中，對(duì)應(yīng)于GLP-1的“信號(hào)”序列的多肽的EC50值大于1微摩爾。在分析中作為陽(yáng)性對(duì)照的GLP-1的EC50值小于0.100納摩爾。
實(shí)施例13
環(huán)腺苷酸的測(cè)定
GLP-1受體是G-蛋白偶聯(lián)的受體。GLP-1(7-36)-酰胺具有生物活性，它結(jié)合到GLP-1受體上，通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶的活化，并提高細(xì)胞內(nèi)cAMP水平。為了監(jiān)測(cè)多肽化合物在刺激GLP-1受體中的激動(dòng)作用(agonism)，通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞cAMP水平監(jiān)測(cè)腺嘌呤環(huán)化酶的活性。全長(zhǎng)的人胰高血糖素樣多肽1受體在CHO-K1細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)。篩選表達(dá)GLP-1R最好的克隆，選擇了GLP1R-19。細(xì)胞培養(yǎng)于Ham′s F12營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基(Gibco #11765-054)中，培養(yǎng)基中含有10％FBS，1×L-谷氨酰胺，1×青霉素/鏈霉素和0.4毫克/毫升G418。在96孔組織培養(yǎng)微量滴定板的每個(gè)孔中種入CHO-GLP-1R-19細(xì)胞(100微升培養(yǎng)基中2500個(gè)細(xì)胞)，37℃5％CO2中溫育72小時(shí)。在測(cè)定當(dāng)天，用100微升PBS洗滌細(xì)胞一次。往每孔細(xì)胞中加入10微升化合物和90微升反應(yīng)培養(yǎng)基(低葡萄糖的無(wú)酚紅的DEME培養(yǎng)基)(Gibco#11054-020)，0.1％BSA(Sigma#A7284)，0.3毫摩爾IBMX(3-異丁基-1甲基黃嘌呤，Sigma #I5879)，37℃孵育1小時(shí)。最初用1μM和10μM的化合物篩選其對(duì)cAMP的刺激作用。表現(xiàn)出最大GLP-1(100nM)活性的50％的化合物的劑量依賴是以半對(duì)數(shù)濃度測(cè)定，測(cè)定重復(fù)二次。溫育后，除去培養(yǎng)基，細(xì)胞用100微升PBS洗滌一次。每孔加入環(huán)腺苷酸SPA試劑盒(Amersham Pharmacia Biotech，RPA 559；試劑根據(jù)試劑盒說(shuō)明配制)的50微升裂解試劑-1。板在室溫震蕩15分鐘。將20微升裂解物轉(zhuǎn)入到96孔OptiPlate(Packard# 6005190)的每個(gè)孔中，加入試劑盒中的60微升SPA免疫試劑。室溫孵育15到18小時(shí)后，板用TopCount NXT(Packard)進(jìn)行計(jì)數(shù)，每孔每次計(jì)數(shù)2min。
在每個(gè)96孔板中，用GLP-1(對(duì)照)和5種化合物(一式二份)在七個(gè)半劑量處進(jìn)行檢測(cè)。10nM GLP-1置于10個(gè)另外的孔中作為確定最大活性的參考標(biāo)準(zhǔn)。得到的數(shù)據(jù)在裝有Excel的數(shù)據(jù)庫(kù)中處理。從環(huán)腺苷酸標(biāo)準(zhǔn)曲線中確定釋放的環(huán)腺苷酸的量，計(jì)算出％最大活性，并對(duì)化合物濃度的對(duì)數(shù)作圖。數(shù)據(jù)通過(guò)非線性回歸方法(S型劑量)分析，確定化合物的EC50。
實(shí)施例14
體內(nèi)研究
在大鼠模型中，四種代表性的11mer多肽，化合物A、化合物B、化合物C和化合物D的體內(nèi)降低葡萄糖的性質(zhì)描述如下?；衔顰和化合物B的持續(xù)靜脈內(nèi)輸注大大減弱了皮下葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)(scGTT)中的餐后葡萄糖偏移曲線(見(jiàn)圖1和圖2)。另外，在此模型中，通過(guò)皮下注射這兩種11mer多肽也產(chǎn)生了明顯的葡萄糖降低效應(yīng)(見(jiàn)圖3和圖4)。隨著類似物的持續(xù)靜脈內(nèi)輸注和皮下彈丸注射，觀測(cè)到它們的葡萄糖降低效應(yīng)有明顯的劑量反應(yīng)關(guān)系。當(dāng)化合物通過(guò)持續(xù)輸注施用時(shí)，分別在12和120皮摩爾/千克/分鐘觀測(cè)到化合物A和化合物B的明顯的葡萄糖降低效應(yīng)。對(duì)于皮下施用，化合物A和化合物B的最大有效劑量分別是2和20納摩爾/千克。
對(duì)于化合物C和D，在大鼠腹腔葡萄糖耐受實(shí)驗(yàn)(ipGTT)模型中，使用皮下注射的研究表明對(duì)于兩種化合物，明顯的葡萄糖偏移衰減可以以劑量相關(guān)的方式完成(見(jiàn)圖5和圖6)。圖7表明在此模型中天然GLP-1的作用。
效用和聯(lián)合
A效用
本發(fā)明提供了新穎的GLP多肽模擬物，優(yōu)選模擬GLP-1。這樣本發(fā)明的化合物對(duì)GLP-1受體有激動(dòng)劑活性。進(jìn)一步，本發(fā)明的GLP肽模擬物與GLP-1天然序列相比，對(duì)蛋白水解表現(xiàn)出更好的穩(wěn)定性。
相應(yīng)地，本發(fā)明的化合物可以施用于哺乳動(dòng)物，優(yōu)選的是人，治療多種狀況和病癥，包括，但不局限于，治療或延遲糖尿病(優(yōu)選的是II型糖尿病，葡萄糖耐量障礙，胰島素抵抗和糖尿病并發(fā)癥，例如腎病，視網(wǎng)膜病變，神經(jīng)障礙和白內(nèi)障)，高血糖癥，高胰島素血癥，高膽固醇血癥，血中的游離脂肪酸或甘油水平提高，高脂血癥，高甘油三酯血癥，肥胖癥，創(chuàng)傷治愈，組織缺血，動(dòng)脈粥樣硬化，高血壓，AIDS，腸道疾病(例如壞死性腸炎，微絨毛包涵病或腹部疾病)，炎性腸綜合征，化療導(dǎo)致的腸粘膜萎縮或損傷，神經(jīng)性厭食，骨質(zhì)疏松，代謝不良綜合征，和炎癥性腸疾病(如局限性腸炎，潰瘍性結(jié)腸炎)的發(fā)展和發(fā)生。本發(fā)明的化合物也可以用于提高血中的高密度脂蛋白(HDL)水平。
另外，在Johannsson J.Clin.Endocrinol.Metab.，82，727-34(1997)中詳細(xì)描述的作為“X綜合征”或代謝綜合征被提及的狀況、疾病和病癥可以采用發(fā)明的化合物治療。
B聯(lián)合(combinations)
本發(fā)明包括在其范圍內(nèi)的藥物組合物，其作為一種活性成分包含治療有效量的結(jié)構(gòu)式I的至少一種化合物，其可以是單獨(dú)的或是與藥物載體或稀釋劑相結(jié)合。任選地，本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)使用，與本發(fā)明的別的化合物聯(lián)合使用，或與一種或多種別的治療試劑，例如，抗糖尿病試劑或別的藥物活性材料聯(lián)合使用。
本發(fā)明的化合物可以與別的GLP-1多肽模擬物或與別的在治療上述疾病中使用的合適的治療藥劑結(jié)合使用，這些治療藥劑包括抗糖尿病藥劑；抗胰高血糖病藥劑；降血脂/脂減少藥劑；抗肥胖癥藥劑(包括食欲抑制劑/調(diào)節(jié)劑)和抗高血壓藥劑。另外，本發(fā)明的化合物可以與一種或多種以下治療藥劑結(jié)合使用不育藥劑，治療多囊腫卵巢綜合征的藥劑，治療生長(zhǎng)障礙的藥劑，治療虛弱的藥劑，治療關(guān)節(jié)炎的藥劑，預(yù)防移植中異體移植排斥的藥劑，治療自身免疫病的藥劑，抗AIDS的藥劑，抗骨質(zhì)疏松的藥劑，治療免疫調(diào)節(jié)病的藥劑，抗血栓形成的藥劑，治療心血管疾病的藥劑，抗生素，抗精神錯(cuò)亂劑，治療慢性炎癥性腸疾病或綜合征的藥劑和/或治療神經(jīng)性厭食的藥劑。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的合適的抗糖尿病試劑的例子包括雙縮胍(例如，二甲雙胍或苯乙雙胍)，葡萄糖苷酶抑制劑(例如，阿卡波糖或米格列醇)，胰島素(包括胰島素促分泌劑或胰島素致敏劑)，美格列奈(meglitinide)(例如，瑞格列奈(repaglinide))，磺酰脲類(例如，格列美脲(glimepiride)，格列本脲(glyburide)，格列齊特(glyclazide)，氯磺丙脲(chlorpropamide)和格列吡嗪(glipizide))，雙縮胍/格列本脲組合劑(例如，Glucovance)，噻唑烷二酮(例如，曲格列酮(troglitazone)，羅格列酮(rosiglitazone)和匹格列酮(pioglitazone))，PPAR-α激動(dòng)劑，PPAR-γ激動(dòng)劑，PPAR-α/γ雙激動(dòng)劑，糖原磷酸化酶抑制劑，脂肪酸結(jié)合蛋白(aP2)抑制劑，DPP-IV抑制劑和SGLT2抑制劑。
別的合適的噻唑烷二酮包括Mitsubishi的MCC-555(在美國(guó)專利號(hào)5,594,016中公開(kāi))，Glaxo-WelCome的GL-262570，englitazone(CP-68722，Pfizer)或darglitazone(CP-86325，Pfizer，艾格列酮(isaglitazone))(MIT/J&J)，JTT-501(JPNT/P&U)，L-895645(Merck)，R-119702(Sankyo/WL)，NN-2344(Dr.Reddy/NN)，或YM-440(Yamanouchi)。
合適的PPARα/γ雙激動(dòng)劑包括AR-HO39242(Astra/Zeneca)，GW-409544(Glaxo-Wellcome)，KRP297(Kyorin Merck)，和那些由Murakami等在“A Novel Insulin Sensitizer Acts As a Coligand forPeroxisome Proliferation-Activated Receptor Alpha(PPAR alpha)andPPAR gamma.Effect on PPAR alpha Activation on Abnormal LipidMetabolism in Liver of Zucker Fatty Rats”Diabetes 47，1841-1847(1998)中公開(kāi)的和2000年9月18日歸檔的美國(guó)申請(qǐng)系列號(hào)09/644,598中公開(kāi)的激動(dòng)劑，其所公開(kāi)的內(nèi)容在此引入作為參考，使用在此提出的劑量，那些被指定為優(yōu)選的化合物在此優(yōu)選使用。
合適的aP2抑制劑包括那些在1999年9月7日歸檔的美國(guó)申請(qǐng)系列號(hào)09/391,053和2000年3月6日歸檔的美國(guó)申請(qǐng)系列號(hào)09/519,079中公開(kāi)的藥劑，使用在此提出的劑量。
可以與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的合適的DPP4抑制劑包括那些在WO99/38501，WO99/46272，WO99/67279(PROBIODRUG)，WO99/67278(PROBIODRUG)，WO99/61431(PROBIODRUG)中公開(kāi)的抑制劑，由Hughes等在Biochemistry，38(36)，11597-11603，1999中公開(kāi)的NVP-DPP728A(1-[[[2-[(5-氰基吡啶-2-基)氨基]乙基]氨基]乙?；鵠-2-氰基-(S)-吡咯烷)(Novartis)，TSL-225(色氨酰-1，2，3，4-四氫異喹啉-3-羧酸(由Yamada等在Bioorg.& Med.Chem.Lett.8(1998)1537-1540中公開(kāi))，由Ashworth等在Bioorg.& Med.Chem.Lett.，Vol.6，No.22，pp1163-1166和2745-2748(1996)中公開(kāi)的2-cyanopyrrolidides和4-cyanopyrrolidides，采用以上參考中提出的劑量。
合適的美格列奈包括那格列奈(nateglinide)(Novartis)或KAD1229(PF/Kissei)。
別的可以與本發(fā)明的GLP-1模擬物聯(lián)合使用的合適的胰高血糖素樣多肽-1(GLP-1)化合物的例子包括GLP-1(1-36)酰胺，GLP-1(7-36)酰胺，GLP-1(7-37)(如在授予Habener的美國(guó)專利號(hào)5,614,492中公開(kāi)的)，還有AC2993(Amylin)，LY-315902(Lilly)和NN-2211(NovoNordisk)。
合適的可以與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的降血脂/脂減少藥劑的例子包括一種或多種微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白(MTP)抑制劑，3-羥基-3甲基戊二酰輔酶A(HMG CoA)還原酶抑制劑，角鯊烯合成酶抑制劑，纖維酸(fibric acid)衍生物，膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶(ACAT)抑制劑，脂加氧酶抑制劑，膽固醇吸收抑制劑，回腸Na+/膽汁酸共轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑，低密度脂蛋白受體活性的向上調(diào)節(jié)劑，膽汁酸螯合劑，膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白抑制劑(例如，CP-529414(Pfizer))和/或煙酸和它們的衍生物。
以上描述的可以采用的MTP抑制劑包括那些在美國(guó)專利號(hào)5,595,872，美國(guó)專利號(hào)5,739,135，美國(guó)專利號(hào)5,712,279，美國(guó)專利號(hào)5,760,246，美國(guó)專利號(hào)5,827,875，美國(guó)專利號(hào)5,885,983和美國(guó)專利號(hào)5,962,440中公開(kāi)的MTP抑制劑。
可以與式I的一種或多種化合物聯(lián)合使用的HMG CoA還原酶抑制劑包括美國(guó)專利號(hào)3,983，140所公開(kāi)的美伐他丁和相關(guān)化合物，美國(guó)專利號(hào)4,231,938所公開(kāi)的洛伐他丁(mevinolin)和相關(guān)化合物，美國(guó)專利號(hào)4,346,227所公開(kāi)的普伐他汀(pravastatin)和相關(guān)化合物，美國(guó)專利號(hào)4,448,784和4,450,171所公開(kāi)的斯伐他汀(simvastatin)和相關(guān)化合物。別的在此采用的HMG CoA還原酶抑制劑包括，但不局限于，美國(guó)專利號(hào)5,354,772所公開(kāi)的氟伐他汀(fluvastatin)，美國(guó)專利號(hào)5,006,530和5,177,080所公開(kāi)的西伐他汀(cerivastatin)，美國(guó)專利號(hào)4,681,893，5,273,995，5,385,929和5,686,104所公開(kāi)的阿伐他汀和美國(guó)專利號(hào)5,011,930所公開(kāi)的atavastatin(Nissan/Sankyo’s尼伐他汀(nisvastatin)(NK-104))，美國(guó)專利號(hào)5,260,440所公開(kāi)的韋撒他汀(visastatin)(Shionogi-Astra/Zeneca(ZD-4522))，和美國(guó)專利號(hào)5,753,675所公開(kāi)的相關(guān)他汀(statin)化合物，美國(guó)專利號(hào)4,613,610所公開(kāi)的甲羥戊酸內(nèi)酯衍生物的吡唑類似物，PCT申請(qǐng)WO86/03488所公開(kāi)的甲羥戊酸內(nèi)酯衍生物的茚類似物，美國(guó)專利號(hào)4,647,576所公開(kāi)的6-[2-(取代的-吡咯-1-基)-烷基]吡喃-2-酮和它的衍生物，PCT申請(qǐng)WO 86/07054所公開(kāi)的甲羥戊酸內(nèi)酯的咪唑類似物，Searle′s SC-45355(一種3-取代的戊二酸衍生物)二氯乙酸，法國(guó)專利號(hào)2,596,393所公開(kāi)的3-羧基-2-羥基-丙烷-膦酸衍生物，歐洲專利申請(qǐng)?zhí)?221025所公開(kāi)的2，3-二取代的吡咯，呋喃和噻吩衍生物，美國(guó)專利號(hào)4,686,237所公開(kāi)的甲羥戊酸內(nèi)酯的萘基類似物，美國(guó)專利號(hào)4,499,289所公開(kāi)的八氫萘，歐洲專利申請(qǐng)?zhí)?142146 A2所公開(kāi)的洛伐他丁(lovastatin)的酮類似物，美國(guó)專利號(hào)5,506,219和5,691,322所公開(kāi)的喹啉和吡啶衍生物。
優(yōu)選的降血脂藥劑是普伐他汀，洛伐他丁，斯伐他汀，阿伐他汀，氟伐他汀，西伐他汀和ZD-4522。
另外，在抑制HMG CoA還原酶中使用的磷酸化合物，例如那些在GB 2205837中公開(kāi)的化合物，適用于與本發(fā)明的化合物結(jié)合使用。
合適在此使用的角鯊烯合成酶抑制劑包括，但不局限于，美國(guó)專利號(hào)5,712,396中公開(kāi)的α-膦?；?磺酸，那些由Biller等在J.Med.Chem.，1988，Vol.31，No.10，pp 1869-1871中公開(kāi)的抑制劑，包括類異戊二烯(氧膦基-甲基)膦酸酯，以及別的已知的角鯊烯合成酶抑制劑，例如，美國(guó)專利4,871,721和4,924,024中和Biller，S.A，Neuenschwander，K.，Ponpipom，M.M.，和Poulter，C.D.在Current Pharmaceutical.Design，2，1-40(1996)中公開(kāi)的抑制劑。
另外，適合在此使用的別的角鯊烯合成酶抑制劑包括P.Ortiz deMontellano等在J.Med.Chem.，1977，20，243-249中公開(kāi)的類萜焦磷酸鹽，Corey和Volante在J.Am.Chem.Soc.，1976，98，1291-1293中公開(kāi)的法呢基二磷酸鹽類似物A和前角鯊烯焦磷酸鹽(PSQ-PP)類似物，McClard，R-W.等在J.A.C.S.，1987，109，5544中報(bào)道的氧膦基磷酸鹽和由Capson，T.L.的博士論文，June，1987，Dept.Med.Chem.U of Utah，Abstract，Table of Contents，pp16，17，40-43，48-51，Summary報(bào)道的環(huán)丙烷。
與式I的一種或多種化合物聯(lián)合使用的纖維酸衍生物包括美國(guó)專利號(hào)3,674,836中公開(kāi)的非諾貝特(fenofibrate)，吉非諾齊(gemfibrozil)，氯貝特(clofibrate)，苯扎貝特(bezafibrate)，環(huán)丙貝特(ciprofibrate)，克利貝特(clinofibrate)及類似物，丙丁酚和相關(guān)化合物，優(yōu)選的是丙丁酚和吉非貝齊，膽汁酸螯合劑，例如消膽胺，考來(lái)替潑和DEAE-Sephadex(Secholex，Policexide)，以及l(fā)ipostabil(Rhone-Poulenc)，Eisai E-5050(一種N-取代的乙醇胺衍生物)，imanixil(HOE-402)，tetrahydrolipstatin(THL)，istigmastanylphos-phorylcholine(SPC，Roche)，氨基環(huán)糊精(TanabeSeiyoku)，Ajinomoto AJ-814(甘菊環(huán)衍生物)，亞油甲芐胺(Sumitomo)，Sandoz 58-035，美國(guó)氨基氰CL-277,082和CL-283,546(二取代的脲衍生物)，煙酸，阿西莫司，阿昔呋喃，新霉素，p-氨基水揚(yáng)酸，阿司匹林，聚(二烯丙基甲胺)衍生物，這些在美國(guó)專利號(hào)4,759,923中公開(kāi)，美國(guó)專利號(hào)4,027,009中公開(kāi)的季銨聚(二烯丙基甲胺氯)和ionenes，和別的已知的降低血清膽固醇的試劑。
與式I的一種或多種化合物聯(lián)合使用的ACAT抑制劑包括在Drugsof the Future 24，9-15(1999)，(阿伐麥布(Avasimibe))；“The ACATinhibitor，C1-1011 is effective in the prevention and regression of aorticfatty streak area in hamsters”，Nicolosi等，Atherosclerosis(Shannon，Irel).(1998)，137(1)，77-85；“The pharmaceutical profile of FCE 27677a novelACAT inhibitor with potent hypolipidemic activity mediated by selectivesuppression of hepatic secretion of ApoB 100-containing lipoprotein”，Ghiselli，Giancarlo，Cardiovasc.Drug Rev(1998)，16(1)，16-30；“RP73163a bioavailable alkylsulfinyl-diphenylinidazole ACAT inhibitor”，Smith，C.，等，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1996)，6(1)，47-50；“ACATinhibitorsphysiologic mechanism for hypolipidemic andanti-atherosclerotic activities.in experimental animals”，Krause等，編者Ruffolo，Robert R.，Jr.；Hollinger，Mannfred A.，InflammationMediatorsPathway(1995)，173-98，出版商CRC，Boca Raton，F(xiàn)la.；“ACATinhibitorspotential anti-atherosclerotic agents”，Sliskovic等，Curr.Med.Chem.(1994)，1(3)，204-25；“Inhibitors of acyl-CoAcholesterol O-acyltransferase(ACAT)as hypocholesterolemic agents.6.The firstwater-soluble ACAT inhibitor with lipid-regulating activity.Inhibitors ofacyl-CoAcholesterol acyltransferase(ACAT).7.Development of a seriesof substituted N-phenyl-N’-[(1-phenylcyclopentyl)methyl]ureas withenhanced hypocholesterolemic activity”，Stout等，ChemtractsOrg.Chem.(1995)，8(6)，359-62，或TS-962(Talsho Pharmaceutical Co.Ltd)。
降血脂藥劑可以是LD2受體活性的向上調(diào)節(jié)劑，例如MD-700(Taisho Pharmaceutical co.Ltd)和LY295427(Eli Lilly)。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的合適的膽固醇吸收抑制劑的例子包括SCH48461(Schering-Plough)，以及那些在Atherosclerosis 115，45-63(1995)和J.Med.Chem.41，973(1998)中公開(kāi)的抑制劑。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的合適的回腸Na+/膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑的例子包括在Drugs of the Future，24，425-430(1999)中公開(kāi)的化合物。
與式I的一種或多種化合物聯(lián)合使用的脂加氧酶抑制劑的例子包括15-脂加氧酶(15-LO)抑制劑，例如WO 97/12615中公開(kāi)的苯并咪唑衍生物，WO97/12613中公開(kāi)的15-LO抑制劑，WO96/38144中公開(kāi)的異噻唑酮，Sendobry等在“Attenuation of diet-induced atherosclerosisin rabbits with a highly selective 15-lipoxygenase inhibitor lackingsignificant antioxidant properties”，Brit.J.Pharmacology(1997)120，1199-1206，和Cornicelli等在“15-Lipoxygenase and its InhibitionANovel Therapeutic Target for Vascular Disease”，Current PharmaceuticalDesign，1999，5，11-20中公開(kāi)的15-LO抑制劑。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的合適的抗高血壓藥劑的例子包括β-腎上腺素能神經(jīng)阻斷劑，鈣通道阻斷劑(L-型和T型；例如硫氮卓酮，異搏定，利心平，氨氯地平和mybefradil)，利尿劑(例如，氯噻嗪，氫氯噻嗪，氟甲噻嗪，氫氟噻嗪，芐氟噻嗪，甲氯噻嗪，三氯噻嗪，多噻嗪，芐噻嗪，利尿酸t(yī)ricrynafen，氯噻酮(chlorthalidone)，呋塞米(furosemide)，musolimine，布美他尼(bumetanide)，triamtrenene，氨氯吡咪，螺內(nèi)酯)，腎素抑制劑，ACE抑制劑(例如，開(kāi)搏通，佐芬普利，福辛普利，依托普利，ceranopril，西拉普利，地拉普利，噴托普利，喹那普利，雷米普利，利生普利)，AT-1受體拮抗劑(例如，洛沙坦，依貝沙坦，纈沙坦)，ET受體拮抗劑(例如，sitaxsentan，atrsentan和美國(guó)專利號(hào)5,612,359和6,043,265中公開(kāi)的化合物)，雙ET/AII拮抗劑(例如，WO00/01389中公開(kāi)的化合物)，中性肽鏈內(nèi)切酶(NEP)抑制劑，vasopepsidase抑制劑(雙NEP-ACE抑制劑)(例如，omapatrilat和gemopatrilat)，和硝酸鹽。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合使用的合適的抗肥胖藥劑的例子包括NPY受體拮抗劑，MCH拮抗劑，GHSR拮抗劑，CRH拮抗劑，β3腎上腺素能的激動(dòng)劑，脂肪酶抑制劑，5-羥色胺(多巴胺)重?cái)z取抑制劑，甲狀腺受體β藥物和/或食欲抑制藥劑。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合選擇性地使用的β3腎上腺素能激動(dòng)劑的例子包括AJ9677(Takeda/Dainippon)，L750355(Merck)，或CP331648(Pfizer，)或別的已知的在美國(guó)專利號(hào)5,541,204，5,770,615，5,491,134，5,776,983和5,488,064中公開(kāi)的β3激動(dòng)劑，AJ9677，L750,355和CP331648是優(yōu)選的。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合選擇性地使用的脂肪酶抑制劑例子包括奧利斯特(orlistat)或ATL-962(Alizyine)，奧利斯特是優(yōu)選的。
與式1的化合物聯(lián)合選擇性地使用的5-羥色胺(和多巴胺)重?cái)z取抑制劑的例子可以是西布曲明，托吡酯(Johnson & Johnson)或阿索開(kāi)(axokine)(Regeneron)，西布曲明(sibutramine)和托吡酯(topiramate)是優(yōu)選的。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合選擇性地使用的甲狀腺受體β化合物的例子包括甲狀腺受體配體，例如在WO97/21993(U.Cal SF)，WO99/00353(KaroBio)和GB98/284425(KaroBzo)中公開(kāi)的化合物，KaroBio申請(qǐng)的化合物是優(yōu)選的。
與本發(fā)明的化合物聯(lián)合選擇性地使用的食欲抑制藥劑的例子包括右旋苯丙(dexamphetamine)，芬特明(phentermine)，苯丙醇胺(phenylpropanolamine)或馬吲哚(mazindol)，右旋苯丙是優(yōu)選的。
合適的抗精神錯(cuò)亂藥劑的例子包括氯氮平，氟哌啶醇，奧蘭氮平(Zyprexa)，Prozac和阿立派唑(Abilify)。
以上提及的專利和專利申請(qǐng)?jiān)诖艘胱鳛閰⒖肌?br> 以上別的治療試劑在與本發(fā)明的化合物結(jié)合使用時(shí)，其用量可以是，例如，在Physician′s Desk Reference中指示的用量，在以上專利中提出的用量，或由本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員決定。
劑量和配方
一種合適的GLP-1多肽模擬物可以作為單獨(dú)使用的化合物或以藥物配方形式與可接受的載體混合被施用給患者，以治療糖尿病和別的相關(guān)疾病。糖尿病治療領(lǐng)域的熟練技術(shù)人員可以容易地確定劑量和向需要這樣治療的哺乳動(dòng)物包括人施用化合物的途徑。施用途徑可以包括，但不局限于口服，口內(nèi)給藥，直腸給藥，透皮給藥，口腔給藥，鼻內(nèi)給藥，肺給藥，皮下給藥，肌肉給藥，真皮內(nèi)給藥，舌下給藥，結(jié)腸內(nèi)給藥，眼內(nèi)給藥，靜脈內(nèi)給藥，腸道給藥。以可接受的藥學(xué)實(shí)踐為基礎(chǔ)，根據(jù)施用的途徑配制化合物(Fingl等，The PharmacologicalBasis of Therapeutics，Ch.1，p.l，1975；Remington′s PharmaceuticalSciences，18tn ed.，Mack Publishing CO，Easton，PA，1990)。
本發(fā)明的藥學(xué)可接受的GLP-1多肽模擬物組合物可以以多種劑型施用，例如片劑，膠囊(其中每一種都包括持續(xù)釋放或定時(shí)釋放配方)，丸劑，粉末，顆粒，酏劑，原位凝膠，小球，結(jié)晶體，脂質(zhì)體，微-乳劑，酊劑，懸浮液，糖漿，噴霧劑和乳劑。本發(fā)明的組合物也可以以口服，靜脈內(nèi)(彈丸或輸液)，腹腔內(nèi)，皮下，透皮或肌內(nèi)的形式施用，藥學(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員對(duì)所有使用的劑型都是知道的。組合物可以單獨(dú)施用，但一般與在選定的施用途徑和標(biāo)準(zhǔn)藥學(xué)實(shí)踐的基礎(chǔ)上選定的藥學(xué)載體一起施用。
當(dāng)然，本發(fā)明組合物的給藥方案，將取決于已知的因素，例如特定試劑的藥效動(dòng)力學(xué)特征和施用模式和途徑；接受者的種類，年齡，性別，健康，醫(yī)藥狀態(tài)和重量；癥狀的特征和范圍；同時(shí)治療的種類；治療頻率；施用途徑；患者的腎和肝功能，和要求的效果。醫(yī)師或獸醫(yī)可以決定和給出所用藥的有效量，以預(yù)防、阻遏或停止疾病狀態(tài)的發(fā)展。
經(jīng)由一般的指導(dǎo)，當(dāng)使用活性成分要得到指定的效果時(shí)，活性成分的每日口服劑量，將從大約0.001到1000毫克/千克體重，優(yōu)選的從大約0.01到100毫克/千克體重每天，最優(yōu)選的從大約0.6到20毫克/千克/天。對(duì)于靜脈內(nèi)給藥，當(dāng)恒速輸液時(shí)，使用活性成分要得到指定的效果，活性成分的每日劑量將從0.001納克到100.0納克每分鐘/每千克體重，這樣的恒速靜脈內(nèi)輸液可以優(yōu)選的以0.01納克到50納克每分鐘每千克體重的速率施用，最優(yōu)選的以0.1納克到10.0毫克每分鐘每千克體重的速率施用。本發(fā)明的組合物可以以單一每日劑量施用，或總劑量可以分為每日兩次，三次或四次施用。本發(fā)明的成分也可以通過(guò)貯存配方施用，這將允許藥物在幾天/幾星期/幾月的時(shí)期內(nèi)按要求持續(xù)釋放。
本發(fā)明的組合物可以通過(guò)局部使用合適的鼻內(nèi)載體以鼻內(nèi)形式施用，或使用透皮皮貼以經(jīng)皮途徑施用。當(dāng)以經(jīng)皮傳送系統(tǒng)的形式施用時(shí)，在整個(gè)給藥方案中，劑量施用將是持續(xù)的，而不是間斷的。
組合物一般與合適的藥物稀釋劑、賦形劑或載體(在此選擇性地指藥物載體)的混合施用，這些藥物稀釋劑、賦形劑或載體要根據(jù)預(yù)定的施用形式和傳統(tǒng)的藥學(xué)實(shí)踐來(lái)合適地選擇。施用形式有口服片劑，膠囊，酏劑，噴霧劑，用或不用提味劑和糖漿。
例如，對(duì)于片劑或膠囊形式的口服施用，活性藥物組分可以與口服、無(wú)毒、藥學(xué)可接受的惰性載體，例如，但不局限于，乳糖，淀粉，蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂，磷酸氫鈣，硫酸鈣，甘露醇和山梨醇結(jié)合施用。對(duì)于液體形式的口服施用，口服藥物組分可以與任何口服、無(wú)毒、藥學(xué)可接受的惰性載體，例如，但不局限于，乙醇，甘油和水結(jié)合施用。而且，如果要求或必要的話，也可以將合適的粘合劑、滑潤(rùn)劑、分解劑和著色劑整合入混合物中。合適的粘合劑包括，但不局限于，淀粉，明膠，天然糖，例如，但不限于葡萄糖或β-乳糖，谷物甜料，天然的和合成的膠，例如阿拉伯膠，黃蓍膠，或藻酸鈉，羧甲纖維素，聚乙二醇和蠟類。在這些劑型中使用的滑潤(rùn)劑包括油酸鈉，硬脂酸鈉，硬脂酸鎂，苯甲酸鈉，乙酸鈉和氯化鈉。分解劑包括，但不局限于，淀粉，甲基纖維素，瓊脂，皂土和黃原膠。
本發(fā)明的組合物也可以以混合的微膠?；蛑|(zhì)體傳送系統(tǒng)的形式施用，例如，小的單層囊泡，大的單層囊泡，和多層囊泡。脂質(zhì)體可以由一些磷脂形成，例如膽固醇，硬脂酰胺，或磷脂酰膽堿。可以加入滲透性增強(qiáng)劑以增強(qiáng)藥物的吸收。
因?yàn)橐阎绑w藥物會(huì)提高藥物的多種理想的性質(zhì)(例如，溶解度，生物利用度，制備等)，本發(fā)明的化合物可以以前體藥物的形式釋放。因此，本發(fā)明意圖覆蓋目前所要求保護(hù)的化合物的前體藥物，釋放前體藥物的方法，和含有前體藥物的組合物。
本發(fā)明的組合物也可以與作為可靶向的藥物載體的可溶聚合物偶聯(lián)。這樣的聚合物包括聚乙烯吡咯烷酮，吡喃共聚物，多羥基丙基-異丁烯酰胺-酚，多羥基乙基天冬酰胺酚，或棕櫚酰殘基取代的聚乙烯氧化物-聚賴氨酸。而且，本發(fā)明的組合物可以與一類生物降解聚合物結(jié)合，例如，聚乳酸，聚乙醇酸，聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物，聚ε己內(nèi)酯，多羥基丁酸，聚原酯，聚縮醛，聚二氫吡喃，聚氰基?；锖退z的交聯(lián)的或兩親性的嵌段共聚物，以達(dá)到藥物的控制釋放。
適于施用的劑型(藥學(xué)組合物)可以每劑量單位含有大約0.1毫克到大約500毫克的活性成分。在這些藥物組合物中，活性成分一般是組合物總重量的0.5-95％。
明膠膠囊可以含有活性成分和粉末載體，例如乳糖，淀粉，纖維素衍生物，硬脂酸鎂和硬脂酸?？梢允褂妙愃频南♂寗┲瞥蓧嚎s片。片劑和膠囊都可以做成持續(xù)釋放的產(chǎn)品，以提供在幾小時(shí)的時(shí)間內(nèi)持續(xù)釋放的藥物。壓縮片可以用糖衣包被或膜包被，以掩蓋任何不好的味道，并且把片劑與空氣隔絕，或?yàn)榱嗽谖改c道中選擇性的分解，用腸衣包被。
口服施用的液體劑型可以含有著色劑和調(diào)味劑，以增加患者的接受度。
一般的，水，合適的油，鹽水，含水的右旋糖(葡萄糖)和相關(guān)的糖溶液和甘醇例如丙二醇或聚乙二醇都是注射液的合適的載體。腸胃外施用的溶液優(yōu)選含有活性成分的水溶性鹽，合適的穩(wěn)定劑，假如需要的話，還有緩沖物質(zhì)。抗氧化劑例如亞硫酸氫鈉，亞硫酸鈉，或抗壞血酸，或者單獨(dú)使用或者結(jié)合使用，都是合適的穩(wěn)定劑。也使用檸檬酸和它的鹽和EDTA鈉。另外，注射液可以含有防腐劑，例如氯芐烷銨，羥苯甲酸甲酯或羥苯甲酸丙酯和三氯叔丁醇。
合適的藥學(xué)載體在此領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)參考文本RemingtonThe Scienceand Practice of Pharmacy，Nineteenth Edition，Mack Publishing Cornpany，1995中描述。
用于本發(fā)明化合物的施用的典型的藥物劑型可以舉例說(shuō)明如下
膠囊
大量的單位膠囊可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)的兩片硬明膠膠囊用100毫克粉末的活性成分，150毫克的乳糖，50毫克纖維素，6毫克硬脂酸鎂充填制備。
軟明膠膠囊
可以用可消化的油例如豆油，棉籽油或橄欖油制備活性成分的混合物，并且用正排量泵將其注射入明膠形成含有100毫克活性成分的柔軟的明膠膠囊。膠囊應(yīng)洗滌和干燥。
片劑
片劑采用傳統(tǒng)程序制備，劑量單位是，例如100毫克活性成分，0.2毫克膠體二氧化硅，5毫克硬脂酸鎂，275毫克微晶的纖維素，11毫克淀粉，98.8毫克乳糖?？梢詰?yīng)用適當(dāng)?shù)陌辉黾舆m口性或延緩吸收。
可注射劑
適于通過(guò)注射施用的不經(jīng)腸道的組合物可以通過(guò)在，例如，10％體積丙二醇和水中對(duì)1.5％重量的活性成分進(jìn)行攪拌來(lái)制備。溶液可以用氯化鈉制成等滲溶液，滅菌。
懸浮液
含水懸浮液可以制備以用于口服和/或不經(jīng)腸道施用，例如每5毫升含有100毫克細(xì)碎地分離的活性成分，20毫克羧甲基纖維素鈉，5毫克苯甲酸鈉，1.0克山梨糖醇，U.S.P.，和0.025毫升香草精或別的可口的調(diào)味劑。
生物可降解微粒
可以制備適于注射施用的持續(xù)釋放的不經(jīng)腸道的組合物，制備方法例如，通過(guò)溶解合適的生物可降解聚合物于溶劑中，往聚合物溶液中加入將結(jié)合的活性藥劑，從基質(zhì)中除去溶劑，由此形成有活性藥劑分布其中的聚合物基質(zhì)。
明顯地，根據(jù)以上教導(dǎo)可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行許多修改和變化。所以，可以理解為在所附的權(quán)利要求范圍內(nèi)，本發(fā)明可以以這里特定地描述的方式以外的方式實(shí)施。
本發(fā)明并不局限在所描述的特定實(shí)施方案的范圍內(nèi)，這些實(shí)施方案是作為本發(fā)明的個(gè)別方面的單個(gè)說(shuō)明給出。除了在此展現(xiàn)和描述的方法和組分，功能上相當(dāng)?shù)姆椒ê统煞謱?duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，能夠從先前的描述和附隨的附圖中明顯地得到。認(rèn)為這些修飾在所附的權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.具有式I序列的被分離的多肽，
A-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Y-Z-B
I
其中，
Xaa1-9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基；
Y和Z是氨基酸殘基；
其中，Y的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)和Z的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)可以各自獨(dú)立地被選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基、芳基烷基和雜芳基烷基、雜環(huán)烷基的初級(jí)取代基取代，所述的初級(jí)取代基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基的次級(jí)取代基選擇性地取代；所述的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；?、?；?、羧基烷基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；Ⅺu素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；⒘蛩峄?、磺胺基、烷基磺?；?、芳基磺?；蛄姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代；其中，初級(jí)取代基或次級(jí)取代基可以通過(guò)共價(jià)鍵選擇性地被橋連，從而形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
其中，Z的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
A和B選擇性地存在；
其中當(dāng)A存在時(shí)，A是氫、一個(gè)氨基酸或含有大約1到大約15個(gè)氨基酸殘基的肽、R基團(tuán)、R-C(O)(酰胺)基團(tuán)、氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2或R4R5N-SO2；
其中R選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧烷基；
其中R4和R5各自獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧基烷基；
其中Xaa1的α-氨基被氫或烷基取代，所述的烷基可以選擇性地與A成環(huán)；
其中當(dāng)B存在時(shí)，B是OR1、NR1R2或一個(gè)氨基酸或含有1到15個(gè)氨基酸殘基的肽，在該肽的C-末端是羧酰胺、被取代的羧酰胺、酯、游離的羧酸、或氨基醇；
其中R1和R2獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基或雜芳氧烷基。
2.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中Y和Z的α-碳原子上的取代物是選自雜芳基芳基甲基、芳基雜芳基甲基或形成二苯基丙氨酸殘基的二苯基甲基，其中的任何一個(gè)也可以選擇性地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；Ⅴ；Ⅳ然榛?、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基酰基、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；?、硫酸基、磺胺基、烷基磺酰基、芳基磺酰基和磷酸基中的一個(gè)或者多個(gè)取代。
3.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中B是一個(gè)氨基酸或含有1到大約10個(gè)氨基酸殘基的多肽。
4.權(quán)利要求3所述的被分離的多肽，其中B是一個(gè)氨基酸或含有1到大約5個(gè)氨基酸殘基的多肽。
5.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中Xaa1、Xaa2和Xaa3是N-H的或N-烷基化的氨基酸殘基。
6.權(quán)利要求5所述的被分離的多肽，其中Xaa1、Xaa2和Xaa3是N-H的或N-甲基化的氨基酸殘基。
7.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中Y的α-碳上的另一個(gè)取代物被氫、甲基或乙基取代；其中Z的α-碳上的另一個(gè)取代物被氫、甲基或乙基取代。
8.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中
Xaa1是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自雜環(huán)烷基、雜芳基、雜芳基烷基和芳基烷基的初級(jí)取代基，所述的初級(jí)取代基選擇性地被選自雜芳基或雜環(huán)基的次級(jí)取代基取代；其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa2是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或環(huán)烷基，該烷基可以選擇性地與Xaa2的氮形成一個(gè)環(huán)；并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa3是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、磺?；榛?、雜烷基和巰基烷基；而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa4是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳不被取代，或者其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自氨基烷基、羧基烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基；
Xaa5是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或羥基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa6是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳基烷基和雜芳基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa7是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是羥基烷基；
Xaa8是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、羥基烷基、雜芳基烷基和羧酰胺烷基，并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、羧基芳基、磺?；榛?、羧酰胺烷基和雜芳基烷基；并且
其中，A是氫、一個(gè)氨基酸或含有大約1到大約5個(gè)氨基酸殘基的肽、R基團(tuán)、R-C(O)酰胺基團(tuán)、氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2或R4R5N-SO2。
9.權(quán)利要求8所述的被分離的多肽，其中
Xaa1是選自L-組氨酸、D-組氨酸、L-N-甲基組氨酸、D-N-甲基組氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸和D-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa2是選自L-丙氨酸、D-丙氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、D-絲氨酸、D-天冬酰胺、L-N-甲基-丙氨酸、D-N-甲基-丙氨酸、L-4-硫代脯氨酸、L-脯氨酸(t-4-OH)、L-2-Pip、L-2-Azt、α-氨基異丁酸、S-或R-Iva和Acc3的氨基酸殘基；
Xaa3是選自L-谷氨酸、L-N-甲基-谷氨酸、L-天冬氨酸、D-天冬氨酸、L-組氨酸、L-Gla、L-Adp、L-半胱氨酸和L-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa4是選自甘氨酸、L-組氨酸、L-賴氨酸和L-天冬氨酸的氨基酸殘基；
Xaa5是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-正亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-Nva和L-Aoc的氨基酸殘基；
Xaa6是選自L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-酪氨酸(Bzl)、酪氨酸(3-NO2)、L-正亮氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸(五氟)、D-苯丙氨酸(五氟)、苯丙氨酸(2-氟)、苯丙氨酸(3-氟)、苯丙氨酸(4-氟)、苯丙氨酸(2，3-二氟)、苯丙氨酸(3，4-二氟)、苯丙氨酸(3，5-二氟)、L-苯丙氨酸(2，6-二氟)、苯丙氨酸(3，4，5-三氟)、苯丙氨酸(2-碘)、苯丙氨酸(2-OH)、苯丙氨酸(2-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氰基)、苯丙氨酸(2-氯)、苯丙氨酸(2-NH2)、苯丙氨酸(3-NH2)、苯丙氨酸(4-NH2)、苯丙氨酸(4-NO2)、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(4-烯丙基)、苯丙氨酸(正丁基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己氧基)、苯丙氨酸(4-苯氧基)、2-萘基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸、L-2-Thi、L-α-甲基-苯丙氨酸、D-α-甲基-苯丙氨酸、L-α-乙基-苯丙氨酸、D-α-乙基-苯丙氨酸、L-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)和D-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)的氨基酸殘基；
Xaa7是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-絲氨酸和L-高絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa8是選自L-絲氨酸、L-高絲氨酸、L-組氨酸、L-天冬酰胺和L-α-甲基-絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa9是選自L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-Gla、L-Adp、L-天冬酰胺和L-組氨酸的氨基酸殘基。
10.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中
Y選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2’-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-乙基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基)、L-Bip(2-正丙基，4-甲氧基)、L-Bip(2-正丙基，2’-甲基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(2，3-二甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4-二乙基)、L-Bip(2-甲基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-乙基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3-二甲氧基)、L-Bip(2，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-乙基、4，5-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-CH2OH、4-甲氧基)、L-Bip(2-Ac)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(4-NH-Ac)、L-Bip(2，3-二氯)、L-Bip(2，4-二氯)、L-Bip(2，5-二氯)、L-Bip(3，4-二氯)、L-Bip(4-氟)、L-Bip(3，4-二氟)、L-Bip(2，5-二氟)、L-Bip(3-正丙基)、L-Bip(4-正丙基)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(3-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(4-叔丁基)、L-Bip(3-苯基)、L-Bip(2-氯)、L-Bip(3-氯)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(3-氟)、L-Bip(2-CF3)、L-Bip(3-CF3)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(3-NO2)、L-Bip(3-OCF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(3-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-羥基)、L-Bip(3-羥基)、L-Bip(4-羥基)、L-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸[4-(1-炔丙基)]、L-苯丙氨酸[4-(1-丙烯基)]、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(2-苯并(b)呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-二苯并呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-吩噻)-苯丙氨酸、4-(2-苯并(b)噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-喹啉)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、4-(4-(3，5-二甲基異噁唑))-苯丙氨酸、4-(2，4-二甲氧基嘧啶)-苯丙氨酸、高苯丙氨酸、酪氨酸(Bzl)、苯丙氨酸(3，4-二氯)、苯丙氨酸(4-碘)、2-萘基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip和D-α-甲基-Bip；
Z選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2′-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基，2′-甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2-甲基，2′-甲基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3，4，5，-四甲基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(2-苯基)、L-Bip(4-苯基)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-CH2-COOH)、D-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(2′-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸(3-苯基)、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(3-吡啶基)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、2-萘基-丙氨酸、2-芴基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip、D-α-甲基-Bip、L-苯丙氨酸(4-NO2)和L-苯丙氨酸(4-碘)；
A選自H、乙酰基、β-丙氨酸、Ahx、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、Nva、天冬酰胺、精氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸、酪氨酸、己內(nèi)酰胺、L-Bip、L-絲氨酸(Bzl)、3-吡啶基丙氨酸、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(五氟)、4-甲基苯甲基、4-氟苯甲基、正丙基、正己基、環(huán)己基甲基、6-羥戊基、2-噻吩基甲基、3-噻吩基甲基、五氟苯甲基、2-萘基甲基、4-二苯基甲基、9-蒽基甲基、苯甲基、(S)-(2-氨基-3-苯基)丙基、甲基、2-氨基乙基和(S)-2-氨基丙基；和
B選自O(shè)H、NH2、色氨酸-NH2、2-萘基丙氨酸-NH2、苯丙氨酸(五氟)-NH2、絲氨酸(Bzl)-NH2、苯丙氨酸(4-NO2)-NH2、3-吡啶基丙氨酸-NH2、Nva-NH2、賴氨酸-NH2、天冬氨酸-NH2、絲氨酸-NH2、組氨酸-NH2、酪氨酸-NH2、苯丙氨酸-NH2、L-Bip-NH2、D-絲氨酸-NH2、甘氨酸-OH、β-丙氨酸-OH、γ-氨基丁酸-OH和APA-OH。
11.權(quán)利要求1所述的被分離的多肽，其中該多肽是10-mer到15-mer，并且該多肽結(jié)合并活化胰高血糖素樣多肽-1受體。
12.具有式I序列的被分離的多肽，
A-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Y-Z-B
I
其中，
Xaa1-9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基；
Y和Z是氨基酸殘基；
其中，Y的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)和Z的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)可以各自獨(dú)立地被選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基、芳基烷基和雜芳基烷基的初級(jí)取代基取代，所述的初級(jí)取代基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基的次級(jí)取代基選擇性地取代；所述的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；?、?；Ⅳ然榛?、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基酰基、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；?、硫酸基、磺胺基、烷基磺酰基、芳基磺?；蛄姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代；其中，初級(jí)取代基或次級(jí)取代基可以通過(guò)共價(jià)鍵選擇性地被橋連，從而形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
其中，Z的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
A和B選擇性地存在；
其中A不存在時(shí)，Xaa1是R基團(tuán)、R-C(O)(酰胺)基團(tuán)、氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2或R4R5N-SO2；
其中R選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基、雜芳氧烷基和雜芳基烷氧基；
其中R4和R5各自獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧基烷基；
其中當(dāng)B存在時(shí)，B是OR1、NR1R2或一個(gè)氨基酸或含有1到15個(gè)氨基酸殘基的肽，在該肽的C-末端是羧酰胺、被取代的羧酰胺、酯、游離的羧酸、或氨基醇；
其中R1和R2獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基或雜芳氧烷基。
13.權(quán)利要求5所述的被分離的多肽，其中Y和Z的α-碳原子上的取代物是選自雜芳基芳基甲基、芳基雜芳基甲基或形成二苯基丙氨酸殘基的二苯基甲基，其中的任何一個(gè)也可以選擇性地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；?、酰基、羧基烷基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；?、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；?、硫酸基、磺胺基、烷基磺?；?、芳基磺酰基和磷酸基中的一個(gè)或者多個(gè)取代。
14.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中B是一個(gè)氨基酸或含有1到大約10個(gè)氨基酸殘基的多肽；
15.權(quán)利要求14所述的被分離的多肽，其中B是一個(gè)氨基酸或含有1到大約5個(gè)氨基酸殘基的多肽。
16.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中Xaa2和Xaa3是N-H的或N-烷基化的氨基酸殘基。
17.權(quán)利要求16所述的被分離的多肽，其中Xaa2和Xaa3是N-H的或N-甲基化的氨基酸殘基。
18.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中Y的α-碳上的另一個(gè)取代物被氫、甲基或乙基取代；并且其中Z的α-碳上的另一個(gè)取代物被氫、甲基或乙基取代。
19.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中R、R4和R5是雜芳基烷基或雜環(huán)烷基，或者R、R4和R5是環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)、芳基、芳基烷基或者用雜芳基或雜環(huán)取代的芳氧基烷基。
20.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中
Xaa2是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或環(huán)烷基，該烷基可以選擇性地與Xaa2的氮形成一個(gè)環(huán)；并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa3是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、磺?；榛㈦s烷基和巰基烷基；而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa4是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳不被取代，或者其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自氨基烷基、羧基烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基；
Xaa5是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或羥基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa6是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳基烷基和雜芳基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa7是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是羥基烷基；
Xaa8是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、羥基烷基、雜芳基烷基和羧酰胺烷基，并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、羧基芳基、磺?；榛Ⅳ弱０吠榛碗s芳基烷基。
21.權(quán)利要求20所述的被分離的多肽，其中
Xaa2是選自L-丙氨酸、D-丙氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、D-絲氨酸、D-天冬酰胺、L-N-甲基-丙氨酸、D-N-甲基-丙氨酸、L-4-硫代脯氨酸、L-脯氨酸(t-4-OH)、L-2-Pip、L-2-Azt、α-氨基異丁酸、S-或R-Iva和Acc3的氨基酸殘基；
Xaa3是選自L-谷氨酸、L-N-甲基-谷氨酸、L-天冬氨酸、D-天冬氨酸、L-組氨酸、L-Gla、L-Adp、L-半胱氨酸和L-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa4是選自甘氨酸、L-組氨酸、L-賴氨酸和L-天冬氨酸的氨基酸殘基；
Xaa5是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-正亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-Nva和L-Aoc的氨基酸殘基；
Xaa6是選自L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-酪氨酸(Bzl)、酪氨酸(3-NO2)、L-正亮氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸(五氟)、D-苯丙氨酸(五氟)、苯丙氨酸(2-氟)、苯丙氨酸(3-氟)、苯丙氨酸(4-氟)、苯丙氨酸(2，3-二氟)、苯丙氨酸(3，4-二氟)、苯丙氨酸(3，5-二氟)、L-苯丙氨酸(2，6-二氟)、苯丙氨酸(3，4，5-三氟)、苯丙氨酸(2-碘)、苯丙氨酸(2-OH)、苯丙氨酸(2-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氰基)、苯丙氨酸(2-氯)、苯丙氨酸(2-NH2)、苯丙氨酸(3-NH2)、苯丙氨酸(4-NH2)、苯丙氨酸(4-NO2)、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(4-烯丙基)、苯丙氨酸(正丁基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己氧基)、苯丙氨酸(4-苯氧基)、2-萘基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸、L-2-Thi、L-α-甲基-苯丙氨酸、D-α-甲基-苯丙氨酸、L-α-乙基-苯丙氨酸、D-α-乙基-苯丙氨酸、L-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)和D-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)的氨基酸殘基；
Xaa7是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-絲氨酸和L-高絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa8是選自L-絲氨酸、L-高絲氨酸、L-組氨酸、L-天冬酰胺和L-α-甲基-絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa9是選自L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-Gla、L-Adp、L-天冬酰胺和L-組氨酸的氨基酸殘基。
22.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中
Y選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2’-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-乙基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基)、L-Bip(2-正丙基，4-甲氧基)、L-Bip(2-正丙基，2’-甲基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(2，3-二甲基)、L-Bip(2，4’-二甲基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4-二乙基)、L-Bip(2-甲基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-乙基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3-二甲氧基)、L-Bip(2，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-乙基、4，5-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-CH2OH、4-甲氧基)、L-Bip(2-Ac)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(4-NH-Ac)、L-Bip(2，3-二氯)、L-Bip(2，4-二氯)、L-Bip(2，5-二氯)、L-Bip(3，4-二氯)、L-Bip(4-氟)、L-Bip(3，4-二氟)、L-Bip(2，5-二氟)、L-Bip(3-正丙基)、L-Bip(4-正丙基)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(3-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(4-叔丁基)、L-Bip(3-苯基)、L-Bip(2-氯)、L-Bip(3-氯)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(3-氟)、L-Bip(2-CF3)、L-Bip(3-CF3)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(3-NO2)、L-Bip(3-OCF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(3-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-羥基)、L-Bip(3-羥基)、L-Bip(4-羥基)、L-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸[4-(1-炔丙基)]、L-苯丙氨酸[4-(1-丙烯基)]、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(2-苯并(b)呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-二苯并呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-吩噻)-苯丙氨酸、4-(2-苯并(b)噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-喹啉)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、4-(4-(3，5-二甲基異噁唑))-苯丙氨酸、4-(2，4-二甲氧基嘧啶)-苯丙氨酸、高苯丙氨酸、酪氨酸(Bzl)、苯丙氨酸(3，4-二氯)、苯丙氨酸(4-碘)、2-萘基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip和D-α-甲基-Bip；
Z選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2′-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基，2′-甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2-甲基，2′-甲基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3，4，5，-四甲基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(2-苯基)、L-Bip(4-苯基)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-CH2-COOH)、D-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(2′-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸(3-苯基)、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(3-吡啶基)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、2-萘基-丙氨酸、2-芴基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip、D-α-甲基-Bip、L-苯丙氨酸(4-NO2)和L-苯丙氨酸(4-碘)；和
B選自O(shè)H、NH2、色氨酸-NH2、2-萘基丙氨酸-NH2、苯丙氨酸(五氟)-NH2、絲氨酸(Bzl)-NH2、苯丙氨酸(4-NO2)-NH2、3-吡啶基丙氨酸-NH2、Nva-NH2、賴氨酸-NH2、天冬氨酸-NH2、絲氨酸-NH2、組氨酸-NH2、酪氨酸-NH2、苯丙氨酸-NH2、L-Bip-NH2、D-絲氨酸-NH2、甘氨酸-OH、β-丙氨酸-OH、γ-氨基丁酸-OH和APA-OH。
23.權(quán)利要求12所述的被分離的多肽，其中該多肽是10-mer到15-mer，并且該多肽結(jié)合并活化胰高血糖素樣多肽-1受體。
24.具有式I序列的被分離的多肽，
A-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Y-Z-B
I
其中，
Xaa1-9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基；
Y是一個(gè)氨基酸殘基；
其中，Y的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)可以獨(dú)立地被選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基、芳基烷基和雜芳基烷基的初級(jí)取代基取代，所述的初級(jí)取代基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基的次級(jí)取代基選擇性地取代；所述的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲酰基、?；Ⅳ然榛?、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基酰基、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；⒘蛩峄⒒前坊?、烷基磺?；?、芳基磺?；蛄姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代；其中，初級(jí)取代基或次級(jí)取代基可以通過(guò)共價(jià)鍵選擇性地被橋連，從而形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
A和B選擇性地存在；
其中當(dāng)A存在時(shí)，A是氫、一個(gè)氨基酸或含有大約1到大約15個(gè)氨基酸殘基的肽、R基團(tuán)、R-C(O)(酰胺)基團(tuán)、氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2或R4R5N-SO2；
其中R選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧烷基；
其中R4和R5各自獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧基烷基；
其中Xaa1的α-氨基被氫或烷基取代，所說(shuō)的烷基可以選擇性地與A成環(huán)；
其中當(dāng)B不存在時(shí)，Z是OR1、NR1R2或氨基醇；
其中R1和R2獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基或雜芳氧烷基。
25.權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中Y的α-碳原子上的取代物是選自雜芳基芳基甲基、芳基雜芳基甲基或形成二苯基丙氨酸殘基的二苯基甲基，其中的任何一個(gè)也可以選擇性地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲酰基、?；Ⅳ然榛?、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；Ⅺu素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；?、硫酸基、磺胺基、烷基磺酰基、芳基磺?；土姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代。
26.權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中B是一個(gè)氨基酸或含有1到大約10個(gè)氨基酸殘基的肽。
27.權(quán)利要求26所述的被分離的多肽，其中B是一個(gè)氨基酸或含有1到大約5個(gè)氨基酸殘基的肽。
28.權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中Xaa1、Xaa2和Xaa3是N-H的或N-烷基化的氨基酸殘基。
29.權(quán)利要求28所述的被分離的多肽，其中Xaa1、Xaa2和Xaa3是N-H的或N-甲基化的氨基酸殘基。
30.權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中Y的α-碳上的另一個(gè)取代基被氫、甲基或乙基取代。
31.權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中
Xaa1是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自雜環(huán)烷基、雜芳基、雜芳基烷基和芳基烷基的初級(jí)取代基，所述的初級(jí)取代基選擇性地被選自雜芳基或雜環(huán)基的次級(jí)取代基取代；其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa2是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或環(huán)烷基，該烷基可以選擇性地與Xaa2的氮形成一個(gè)環(huán)；并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa3是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、磺?；榛㈦s烷基和巰基烷基；而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa4是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳不被取代，或者其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自氨基烷基、羧基烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基；
Xaa5是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或羥基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa6是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳基烷基和雜芳基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa7是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是羥基烷基；
Xaa8是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、羥基烷基、雜芳基烷基和羧酰胺烷基，并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、羧基芳基、磺?；榛?、羧酰胺烷基和雜芳基烷基；并且
其中，A是氫、一個(gè)氨基酸或含有大約1到大約5個(gè)氨基酸殘基的肽，R基團(tuán)，R-C(O)酰胺基團(tuán)，氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)，脲基R4R5N-C(O)，磺胺基R-SO2，或R4R5N-SO2。
32.權(quán)利要求31所述的被分離的多肽，其中
Xaa1是選自L-組氨酸、D-組氨酸、L-N-甲基組氨酸、D-N-甲基組氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸和D-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa2是選自L-丙氨酸、D-丙氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、D-絲氨酸、D-天冬酰胺、L-N-甲基-丙氨酸、D-N-甲基-丙氨酸、L-4-硫代脯氨酸、L-脯氨酸(t-4-OH)、L-2-Pip、L-2-Azt、α-氨基異丁酸、S-或R-Iva和Acc3的氨基酸殘基；
Xaa3是選自L-谷氨酸、L-N-甲基-谷氨酸、L-天冬氨酸、D-天冬氨酸、L-組氨酸、L-Gla、L-Adp、L-半胱氨酸和L-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa4是選自甘氨酸、L-組氨酸、L-賴氨酸和L-天冬氨酸的氨基酸殘基；
Xaa5是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-正亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-Nva和L-Aoc的氨基酸殘基；
Xaa6是選自L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-酪氨酸(Bzl)、酪氨酸(3-NO2)、L-正亮氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸(五氟)、D-苯丙氨酸(五氟)、苯丙氨酸(2-氟)、苯丙氨酸(3-氟)、苯丙氨酸(4-氟)、苯丙氨酸(2，3-二氟)、苯丙氨酸(3，4-二氟)、苯丙氨酸(3，5-二氟)、L-苯丙氨酸(2，6-二氟)、苯丙氨酸(3，4，5-三氟)、苯丙氨酸(2-碘)、苯丙氨酸(2-OH)、苯丙氨酸(2-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氰基)、苯丙氨酸(2-氯)、苯丙氨酸(2-NH2)、苯丙氨酸(3-NH2)、苯丙氨酸(4-NH2)、苯丙氨酸(4-NO2)、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(4-烯丙基)、苯丙氨酸(正丁基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己氧基)、苯丙氨酸(4-苯氧基)、2-萘基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸、L-2-Thi、L-α-甲基-苯丙氨酸、D-α-甲基-苯丙氨酸、L-α-乙基-苯丙氨酸、D-α-乙基-苯丙氨酸、L-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)和D-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)的氨基酸殘基；
Xaa7是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-絲氨酸和L-高絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa8是選自L-絲氨酸、L-高絲氨酸、L-組氨酸、L-天冬酰胺和L-α-甲基-絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa9是選自L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-Gla、L-Adp、L-天冬酰胺和L-組氨酸的氨基酸殘基。
33.權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中
Y選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2’-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-乙基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基)、L-Bip(2-正丙基，4-甲氧基)、L-Bip(2-正丙基，2’-甲基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(2，3-二甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4-二乙基)、L-Bip(2-甲基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-乙基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3-二甲氧基)、L-Bip(2，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-乙基、4，5-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-CH2OH、4-甲氧基)、L-Bip(2-Ac)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(4-NH-Ac)、L-Bip(2，3-二氯)、L-Bip(2，4-二氯)、L-Bip(2，5-二氯)、L-Bip(3，4-二氯)、L-Bip(4-氟)、L-Bip(3，4-二氟)、L-Bip(2，5-二氟)、L-Bip(3-正丙基)、L-Bip(4-正丙基)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(3-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(4-叔丁基)、L-Bip(3-苯基)、L-Bip(2-氯)、L-Bip(3-氯)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(3-氟)、L-Bip(2-CF3)、L-Bip(3-CF3)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(3-NO2)、L-Bip(3-OCF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(3-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-羥基)、L-Bip(3-羥基)、L-Bip(4-羥基)、L-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸[4-(1-炔丙基)]、L-苯丙氨酸[4-(1-丙烯基)]、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(2-苯并(b)呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-二苯并呋喃)-苯丙氨酸、 4-(4-吩噻)-苯丙氨酸、4-(2-苯并(b)噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-喹啉)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、4-(4-(3，5-二甲基異噁唑))-苯丙氨酸、4-(2，4-二甲氧基嘧啶)-苯丙氨酸、高苯丙氨酸、酪氨酸(Bzl)、苯丙氨酸(3，4-二氯)、苯丙氨酸(4-碘)、2-萘基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip和D-α-甲基-Bip；和
A選自H、乙?；?、β-丙氨酸、Ahx、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、Nva、天冬酰胺、精氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、纈氨酸、色氨酸、酪氨酸、己內(nèi)酰胺、L-Bip、L-絲氨酸(Bzl)、3-吡啶基丙氨酸、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(五氟)、4-甲基苯甲基、4-氟苯甲基、正丙基、正己基、環(huán)己基甲基、6-羥戊基、2-噻吩基甲基、3-噻吩基甲基、五氟苯甲基、2-萘基甲基、4-二苯基甲基、9-蒽基甲基、苯甲基、(S)-(2-氨基-3-苯基)丙基、甲基、2-氨基乙基和(S)-2-氨基丙基。
34.本發(fā)明也提供權(quán)利要求24所述的被分離的多肽，其中該多肽是10-mer到15-mer，而且該多肽結(jié)合并活化胰高血糖素樣多肽-1受體。
35.具有式I序列的被分離的多肽，
A-Xaa1-Xaa2-Xaa3-Xaa4-Xaa5-Xaa6-Xaa7-Xaa8-Xaa9-Y-Z-B
I
其中，
Xaa1-9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基；
Y是一個(gè)氨基酸殘基；
其中，Y的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)可以獨(dú)立地被選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基、芳基烷基和雜芳基烷基、雜環(huán)烷基的初級(jí)取代基取代，所述的初級(jí)取代基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基的次級(jí)取代基選擇性地取代；所述的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；?、?；?、羧基烷基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；Ⅺu素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基酰基、硫酸基、磺胺基、烷基磺酰基、芳基磺酰基或磷酸基中的一個(gè)或者多個(gè)取代；其中，初級(jí)取代基或次級(jí)取代基可以通過(guò)共價(jià)鍵選擇性地被橋連，從而形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
A和B選擇性地存在；
其中當(dāng)A不存在時(shí)，Xaa1是一個(gè)R基團(tuán)、R-C(O)(酰胺)基團(tuán)、氨基甲酸酯基團(tuán)RO-C(O)、脲基R4R5N-C(O)、磺胺基R-SO2或R4R5N-SO2；
其中R選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基、雜芳氧烷基和雜芳基烷氧基烷基；
其中R4和R5各自獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基和雜芳氧基烷基；
其中當(dāng)B不存在時(shí)，Z是OR1、NR1R2或一個(gè)氨基醇；并且
其中R1和R2獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳氧烷基、雜芳基烷基或雜芳氧烷基。
36.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中Y的α-碳原子上的取代物是選自雜芳基芳基甲基、芳基雜芳基甲基或形成二苯基丙氨酸殘基的二苯基甲基，其中的任何一個(gè)也可以選擇性地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲?；?、?；Ⅳ然榛?、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；?、鹵素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基?；⒘蛩峄?、磺胺基、烷基磺?；⒎蓟酋；土姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代。
37.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中Xaa2和Xaa3是N-H的或N-烷基化的氨基酸殘基。
38.權(quán)利要求37所述的被分離的多肽，其中Xaa2和Xaa3是N-H的或N-甲基化的氨基酸殘基。
39.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中Y的α-碳上的另一個(gè)取代物被甲基或乙基取代。
40.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中R、R4和R5是雜芳基烷基或雜環(huán)烷基，或者R、R4和R5是環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)、芳基、芳基烷基或用雜芳基或雜環(huán)基取代的芳氧基烷基。
41.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中
Xaa2是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或環(huán)烷基，該烷基可以選擇性地與Xaa2的氮形成一個(gè)環(huán)；并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa3是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、磺?；榛?、雜烷基和巰基烷基；而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa4是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳不被取代，或者其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自氨基烷基、羧基烷基、雜芳基烷基和雜環(huán)烷基；
Xaa5是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是烷基或羥基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa6是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)基烷基、芳基烷基和雜芳基烷基，而且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；
Xaa7是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是羥基烷基；
Xaa8是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自烷基、羥基烷基、雜芳基烷基和羧酰胺烷基，并且其中α-碳上的另一個(gè)取代物是氫或烷基；和
Xaa9是天然的或非天然出現(xiàn)的氨基酸殘基，其中α-碳上的取代物中的一個(gè)是選自羧基烷基、雙-羧基烷基、羧基芳基、磺酰基烷基、羧酰胺烷基和雜芳基烷基。
42.權(quán)利要求41所述的被分離的多肽，其中
Xaa2是選自L-丙氨酸、D-丙氨酸、L-脯氨酸、甘氨酸、D-絲氨酸、D-天冬酰胺、L-N-甲基-丙氨酸、D-N-甲基-丙氨酸、L-4-硫代脯氨酸、L-脯氨酸(t-4-OH)、L-2-Pip、L-2-Azt、α-氨基異丁酸、S-或R-Iva和Acc3的氨基酸殘基；
Xaa3是選自L-谷氨酸、L-N-甲基-谷氨酸、L-天冬氨酸、D-天冬氨酸、L-組氨酸、L-Gla、L-Adp、L-半胱氨酸和L-4-噻唑基丙氨酸的氨基酸殘基；
Xaa4是選自甘氨酸、L-組氨酸、L-賴氨酸和L-天冬氨酸的氨基酸殘基；
Xaa5是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-正亮氨酸、L-甲硫氨酸、L-Nva和L-Aoc的氨基酸殘基；
Xaa6是選自L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、L-酪氨酸(Bzl)、酪氨酸(3-NO2)、L-正亮氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸(五氟)、D-苯丙氨酸(五氟)、苯丙氨酸(2-氟)、苯丙氨酸(3-氟)、苯丙氨酸(4-氟)、苯丙氨酸(2，3-二氟)、苯丙氨酸(3，4-二氟)、苯丙氨酸(3，5-二氟)、L-苯丙氨酸(2，6-二氟)、苯丙氨酸(3，4，5-三氟)、苯丙氨酸(2-碘)、苯丙氨酸(2-OH)、苯丙氨酸(2-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氧甲基)、苯丙氨酸(3-氰基)、苯丙氨酸(2-氯)、苯丙氨酸(2-NH2)、苯丙氨酸(3-NH2)、苯丙氨酸(4-NH2)、苯丙氨酸(4-NO2)、苯丙氨酸(4-甲基)、苯丙氨酸(4-烯丙基)、苯丙氨酸(正丁基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己基)、苯丙氨酸(4-環(huán)己氧基)、苯丙氨酸(4-苯氧基)、2-萘基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸、L-4-噻唑基丙氨酸、L-2-Thi、L-α-甲基-苯丙氨酸、D-α-甲基-苯丙氨酸、L-α-乙基-苯丙氨酸、D-α-乙基-苯丙氨酸、L-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2-氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，3-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、D-α-甲基-苯丙氨酸(2，6-二氟)、L-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)和D-α-甲基-苯丙氨酸(五氟)的氨基酸殘基；
Xaa7是選自L-蘇氨酸、D-蘇氨酸、L-絲氨酸和L-高絲氨酸的氨基酸殘基；
Xaa8是選自L-絲氨酸、L-高絲氨酸、L-組氨酸、L-天冬酰胺和L-α-甲基-絲氨酸的氨基酸殘基；和
Xaa9是選自L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-Gla、L-Adp、L-天冬酰胺和L-組氨酸的氨基酸殘基。
43.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中
Y選自L-Bip、D-Bip、L-Bip(2-甲基)、D-Bip(2-甲基)、L-Bip(2’-甲基)、L-Bip(2-乙基)、D-Bip(2-乙基)、L-Bip(3-乙基)、L-Bip(4-乙基)、L-Bip(2-正丙基)、L-Bip(2-正丙基，4-甲氧基)、L-Bip(2-正丙基，2’-甲基)、L-Bip(3-甲基)、L-Bip(4-甲基)、L-Bip(2，3-二甲基)、L-Bip(2，4-二甲基)、L-Bip(2，6-二甲基)、L-Bip(2，4-二乙基)、L-Bip(2-甲基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-甲基)、L-Bip(2-乙基，2’-乙基)、L-Bip(2-甲基，4-甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、D-Bip(2-乙基，4-甲氧基)、L-Bip(3-甲氧基)、L-Bip(4-甲氧基)、L-Bip(2，4，6-三甲基)、L-Bip(2，3-二甲氧基)、L-Bip(2，4-二甲氧基)、L-Bip(2，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-二甲氧基)、L-Bip(2-乙基，4，5-二甲氧基)、L-Bip(3，4-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-乙基、4，5-亞甲基-二氧)、L-Bip(2-CH2OH、4-甲氧基)、L-Bip(2-Ac)、L-Bip(3-NH-Ac)、L-Bip(4-NH-Ac)、L-Bip(2，3-二氯)、L-Bip(2，4-二氯)、L-Bip(2，5-二氯)、L-Bip(3，4-二氯)、L-Bip(4-氟)、L-Bip(3，4-二氟)、L-Bip(2，5-二氟)、L-Bip(3-正丙基)、L-Bip(4-正丙基)、L-Bip(2-異丙基)、L-Bip(3-異丙基)、L-Bip(4-異丙基)、L-Bip(4-叔丁基)、L-Bip(3-苯基)、L-Bip(2-氯)、L-Bip(3-氯)、L-Bip(2-氟)、L-Bip(3-氟)、L-Bip(2-CF3)、L-Bip(3-CF3)、L-Bip(4-CF3)、L-Bip(3-NO2)、L-Bip(3-OCF3)、L-Bip(4-OCF3)、L-Bip(2-氧乙基)、L-Bip(3-氧乙基)、L-Bip(4-氧乙基)、L-Bip(4-SMe)、L-Bip(2-羥基)、L-Bip(3-羥基)、L-Bip(4-羥基)、L-Bip(2-CH2-COOH)、L-Bip(3-CH2-COOH)、L-Bip(4-CH2-COOH)、L-Bip(2-CH2-NH2)、L-Bip(3-CH2-NH2)、L-Bip(4-CH2-NH2)、L-Bip(2-CH2-OH)、L-Bip(3-CH2-OH)、L-Bip(4-CH2-OH)、L-苯丙氨酸[4-(1-炔丙基)]、L-苯丙氨酸[4-(1-丙烯基)]、L-苯丙氨酸[4-正丁基]、L-苯丙氨酸[4-環(huán)己基]、苯丙氨酸(4-苯基氧)、L-苯丙氨酸(五氟)、L-2-(9，10-二氫菲基)-丙氨酸、4-(2-苯并(b)呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-二苯并呋喃)-苯丙氨酸、4-(4-吩噻)-苯丙氨酸、4-(2-苯并(b)噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-噻吩)-苯丙氨酸、4-(3-喹啉)-苯丙氨酸、4-(2-萘基)-苯丙氨酸、4-(1-萘基)-苯丙氨酸、4-(4-(3，5-二甲基異噁唑))-苯丙氨酸、4-(2，4-二甲氧基嘧啶)-苯丙氨酸、高苯丙氨酸、酪氨酸(Bzl)、苯丙氨酸(3，4-二氯)、苯丙氨酸(4-碘)、2-萘基-丙氨酸、L-α-甲基-Bip和D-α-甲基-Bip。
44.權(quán)利要求35所述的被分離的多肽，其中該多肽是10-mer到15-mer，而且該多肽結(jié)合并活化胰高血糖素樣多肽-1受體。
45.一種制備可以被BG-蛋白偶聯(lián)受體家族識(shí)別的多肽的方法，其中該多肽模擬一種多肽受體激動(dòng)劑的活性，所述的該多肽有結(jié)構(gòu)式
該方法包括用Y和Z取代多肽受體激動(dòng)劑的地址序列，
其中Y和Z是氨基酸殘基；
其中，Y的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)和Z的α-碳原子上的取代物中的一個(gè)可以各自獨(dú)立地被選自氫、烷基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、雜環(huán)烷基、芳基烷基和雜芳基烷基、雜環(huán)基的初級(jí)取代基取代，所述的初級(jí)取代基被選自環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基的次級(jí)取代基選擇性地取代；所述的任何初級(jí)或次級(jí)取代基可以進(jìn)一步地被氫、烷基、環(huán)烷基、芳基烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、烯烴基、炔基、鹵素、羥基、巰基、硝基、氰基、氨基、酰氨基、疊氮基、胍基、脒基、羧基、羧酰胺基、羧酰胺烷基、甲酰基、?；?、羧基烷基、烷氧基、芳氧基、芳基烷氧基、雜芳氧基、雜環(huán)氧基、酰氧基、巰基、巰基烷基、巰基芳基、巰基?；Ⅺu素、氰基、硝基、疊氮基、氨基、胍基烷基、胍基酰基、硫酸基、磺胺基、烷基磺?；⒎蓟酋；蛄姿峄械囊粋€(gè)或者多個(gè)取代；其中，初級(jí)取代基或次級(jí)取代基可以通過(guò)共價(jià)鍵選擇性地被橋連，從而形成一個(gè)或多個(gè)稠環(huán)的或雜環(huán)的系統(tǒng)；
其中，Y的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；
其中，Z的α-碳上的另一個(gè)取代物可以被氫、烷基、氨基烷基、羥基烷基或羧基烷基取代；和
其中，Xaa1-Xaan是可以誘導(dǎo)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的信號(hào)序列。
46.權(quán)利要求45所述的方法，其中該多肽模擬一種內(nèi)源性多肽受體激動(dòng)劑的活性。
47.權(quán)利要求45所述的方法，其中的多肽受體激動(dòng)劑是胰高血糖素樣多肽-1。
48.權(quán)利要求45所述的方法，進(jìn)一步包括用可以誘導(dǎo)受體介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的各種信號(hào)序列取代多肽受體激動(dòng)劑的信號(hào)序列。
49.根據(jù)權(quán)利要求1，5，9或13所述的被分離的多肽，其中該被分離的多肽從以下選擇
化Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6Xaa7 Xaa8 Xaa9 Y Z-NH2
合
物
#
1 H A E G T FT S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
2 H A D G T Phe(五氟)T S DBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
3 H A D G NlePhe(五氟)T S DBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
4 H A E G T Phe(五氟)T S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
5 H A D G NlePhe(五氟)T S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
6 H A D G T Phe(五氟)T S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
7 H alaD G NlePhe(五氟)T S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
8 H alaD G NleFT S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
9 H A E G T FT S DBip(2-乙基，2’- Bip(2-甲基)
甲基)
10H A E G T FT S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
11H A E G T FT S DBip(2-乙基)Bip(2，4-二甲基)
12H A E G T FT S DBip(2-乙基)Bip(2，3-二甲基)
13H A E G T Phe(五氟)T H DBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
14H AibD G NlePhe(五氟)T S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
15H A E G NlePhe(五氟)T S DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
16HA DGNlePhe(五氟) THDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
17HAibDGNlePhe(五氟) TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
18HA DGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
19HA EGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
20HA DGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
21HalaDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
22HalaEGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
23HalaEGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
24HAibDGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
25HAibDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
26HAibEGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
27HA EGT F TSDBip(2-乙 Bip(2-甲基)
基，4，5-二甲氧
基)
28HA EGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
29HA DGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
30HA DGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
31HalaDGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
32HalaDGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
33HalaDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
34HAibDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
35HAibEGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
36 HAibEG T L-α-甲基-PheTS DBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
37 HA DG Nle Phe(五氟)TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
38 HA DG T Phe(五氟)TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
39 HAibDG Nle Phe(五氟)TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
40 HA DG T L-α-甲基-PheTS DBip(2-甲基)Bip
41 HA DG T L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip
42 HA EG T L-α-甲基-PheTS DBip(2-甲基)Bip(2-甲基)
43 HA EG Nle L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
44 HAibEG Nle L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
45 HA DG T L-α-甲基-PheTS DBipBip(2-甲基)
46 HA EG T FTS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基，4-甲
甲氧基)氧基)
47 HA EG T FTS DBip(2-乙基，4- Bip(2，3-二甲基)
甲氧基)
48 HA EG T FTS DBip(2-乙基，4- Bip(2，4，5-三甲
甲氧基)基)
49 HA EG T FTS DBip(2-乙基，4- Bip(3，4-亞甲基
甲氧基)二氧)
50 HA EG T FTS DBip(2-乙基，4- Bip(4-甲基)
甲氧基)
51 H A EG Nle Phe(五氟)T S D Bip(2-乙基，2’- Bip(2-甲基)
甲基)
52 H A DG Nle Phe(五氟)T S D Bip(2-乙基，2’- Bip(2-甲基)
甲基)
53 H A DG TPhe(五氟)T S D Bip(2-乙基，2’- Bip(2-甲基)
甲基)
54 H ala DG Nle Phe(五氟)T S D Bip(2-乙基，2’- Bip(2-甲基)
甲基)
55 H ala EG Nle Phe(五氟)T H D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
56 H A EG TFT S D Bip(2-乙基，2’- Bip
甲基)
57 H L-α-甲 EG TFT S D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
基-Pro
58 H L-α-甲 EG TL-α-甲基-PheT S D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
基-Pro
59 H L-α-甲 DG TL-α-甲基-PheT S D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
基-Pro
60 H A EG TL-α-甲基-PheT S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
61 H A EG Nle L-α-甲基-PheT S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
62H A D G Nle L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
63H alaE G Nle L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
64H AibD G T L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
65H A E G T L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基)Bip(3，4-亞甲基
二氧)
66H A D G T Phe(2-氟) T S D Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)
67H A D G Nle Phe(五氟) T H D Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)
68H A D G T Phe(五氟) T S D Bip(2，4-二甲氧Bip(2-甲基)
基)
69H alaD G T L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
70H alaD G T L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
71H A E G T L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基)Bip(4-硫甲基)
72H A D G T L-α-甲基-Phe T S D Bip(2-乙基)Bip(3-甲基)
73H A D G T (L)-α-甲基 T S D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
74H A E G T (L)-α-甲基 T S D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
75 H AD G Nle(L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
76 H ala E G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
77 H ala D G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
78 H ala D G Nle(L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
79 H Aib E G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
80 H Aib D G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
81 H Aib D G Nle(L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)
82 H AE G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
83 H AD G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
84 H ala E G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
85 H ala D G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
86 H Aib E G T (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
87HAibDGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
88HA EGT (D)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
89HA DGT (D)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
90HalaEGT (D)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
91HalaDGT (D)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
92HAibEGT (D)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
93HAibDGT (D)-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
94HalaDGNle F TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
95HAibDGNle F TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
96HA EGT F TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
97HA DGT Phe(五氟) TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
98 HalaDGNleF TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
99 HalaEGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
100HalaDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
101HAibEGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
102HAibEGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
103HAibDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲氧基)
104HA EGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
105HA DGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
106HA DGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
107HalaDGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
108HalaDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
109HAibDGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
110HAibDGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2，4-二乙 Bip(2-甲基)
基)
111HA DGT (L)-α-乙基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
112HalaDGT (L)-α-乙基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
113HAibDGT (L)-α-乙基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
114HA EGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
115HA DGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
116HA DGNle(L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
117HalaEGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
118HalaDGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
119HalaDGNle(L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
120HAibEGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
121H AibDGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
122H AibDGNle(L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
123H A EGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)甲氧基)
124H A DGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)甲氧基)
125H alaEGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)甲氧基)
126H alaDGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)甲氧基)
127H AibEGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)甲氧基)
128H AibDGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)甲氧基)
129H A DGNle(D，L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
130H AlaDGNle(D，L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
131H AibDGNle(D，L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)
132des- AibEGT (L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 -Phe
-His
133 H ADGS L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
134 H ADGhSerL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
135 H ADGNva L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
136 H ADGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
137 H ADGT L-α-甲基-Phe HSe SDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
138 H ADGT L-α-甲基-Phe TNDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
139 H ADGT L-α-甲基-Phe THDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
140 H ADGT L-α-甲基-Phe TSGla Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
141 H ADGT L-α-甲基-Phe TSAdp Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
142 des- ADGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
NH2
-His
143 des- Aib DGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
NH2
-His
144 des- ala DGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
NH2
-His
145 H GDGNle L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
146 H GEGNle L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
147 H AEGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基)Bip(4-乙基)
148 HA DGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(4-乙基)
149 HA EGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(2，4-二甲基)
150 HA DGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(2，4-二甲基)
151 HA EGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基，4-甲
氧基)
152 HA DGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基，4-甲
氧基)
153 HA EGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(4-甲基)
154 HA DGT L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙基)Bip(4-甲基)
155 HAib DGNle L-α-甲基-PheTS Dbip(2-乙基)Bip(2-甲基)
156 Hala DGNle L-α-甲基-PheTS DBip(2-乙
基)-NH-[2-(五
氟-苯基)乙基]
157 HA EGT (D，L)-Phe(2，6 TS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
-二氟)
158 HA DGT L-Phe(2，6-二TS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
氟)
159 HA EGNle (D，L)-Phe(2，6 TS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
-二氟)
160 HA DGNle (D，L)-Phe(2，6 TS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
-二氟)
161 Hala DGT L-Phe(2，6-二TS DBip(2-乙基)Bip(2-甲基)
氟)
162 Hala EG Nle (D，L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
163 Hala DG Nle (D，L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
164 HAib EG TL-Phe(2，6-二TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
氟)
165 HAib DG TL-Phe(2，6-二TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
氟)
166 HAib EG Nle (D，L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
167 HAib DG Nle (D，L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
168 HA DG T(D，L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
169 HAib EG T(D，L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
170 HAib EG T(D)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 甲氧基)
171 HAib DG T(D)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-Bip(2-乙基)
-Phe(五氟) 甲氧基)
172 HA EG TL-α-甲基-PheTS D Bip(2-Ac) Bip(2-甲基)
173 HA EG TL-α-甲基-PheTS D Bip(2，5-二甲氧 Bip(2-甲基)
基)
174 H A EG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2，5-二甲Bip(2-甲基)
基)
175 H A EG T L-α-甲基-Phe TS DBip(3，4-二甲氧 Bip(2-甲基)
基)
176 H A EG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2，6-二氯) Bip(2-甲基)
177 H Aib DG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
178 H (L)-α- EG Nle L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基
-Pro
179 H (L)-α- DG Nle L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基
-Pro
180 des- (L)-α- EG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 甲基
-His -Pro
181 H A DG (D，L)-α- F TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基-Nle
182 H A DG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) (D，L)-α-甲基
-Bip
183 H ala DG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) (D，L)-α-甲基
-Bip
184 H Aib DG T L-α-甲基-Phe TS DBip(2-乙基) (D，L)-α-甲基
-Bip
185 H A EG T L-Phe(2-氟)TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
186 HADGT L-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
187 HAEGNleL-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
188 HADGNleL-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
189 Hala DGT L-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
190 Hala EGNleL-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
191 Hala DGNleL-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
192 HAib EGT L-Phe(2-氟)TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
193 HADGT L-Phe(2，6-二 TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
氟) 甲氧基)
194 Hala DGNleL-Phe(2，6-二 TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
氟) 甲氧基)
195 HAib EGNleL-Phe(2，6-二 TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
氟) 甲氧基)
196 HAib DGNleL-Phe(2，6-二 TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
氟) 甲氧基)
197 H(L)-α- EGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲基甲氧基)
-Pro
198 H(L)-α- DGT L-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲基甲氧基)
-Pro
199 H(L)-α- EGNleL-α-甲基-Phe TSDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲基甲氧基)
-Pro
200 H (L)-α- DGNleL-α-甲基-Phe T S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
甲基甲氧基)
-Pro
201 des- (L)-α- DGNleL-α-甲基-Phe T S DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 甲基
-His -Pro
202 H Aib DGNleD-Phe(2，6-二 T S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
氟) 甲氧基)
203 des- (L)-α- EGNleL-α-甲基-Phe T S DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 甲基
-His -Pro
204 H AEGT L-α-甲基 T S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
205 H ADG T L-α-甲基 T S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
206 H ADG T L-α-甲基 T S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
207 H ala EG T L-α-甲基 T S DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
208 HalaDG T (D，L)-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
209 HAibEG T L-α-甲基 TS DBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
210 HAibDG T L-α-甲基 T SDBip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
211 HA EG T L-α-甲基 T SDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
212 HA DG T L-α-甲基 T SDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
213 HalaEG T (L)-α-甲基T SDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
214 HalaDG T (D，L)-α-甲基 T SDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
215 HAibEG T L-α-甲基 T SDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
216 H AibDGT(D，L)-α-甲基TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
217 H AibEGNle (D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
218 H AibDGNle (D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲氧基)
氟)
219 H A DGNle (D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
220 H alaEGT(D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
221 H alaDGNle (D，L)-α-甲基TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
222 H AibEGT(D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
223 H AibDGNle(D)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
224 H A EGNle(L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
225 H ala EGNle(L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
226 H Aib EGNle(L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4- Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)甲氧基)
50.根據(jù)權(quán)利要求1，5，9或13所述的被分離的多肽，其中該被分離的多肽從以下選擇
化 Xaa1Xaa2Xaa3 Xaa4Xaa5Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Y Z-NH2
合
物
#
1 HADGT Phe(五氟)TSD Bip(2-乙基)Bip(2-甲基)
2 HAEGNle L-α-甲基TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)
-Phe
3 HADGNle L-α-甲基TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)
-Phe
4 HAib DGT L-α-甲基TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)
-Phe
5 HAib DGNle L-α-甲基TSD Bip(2-甲基)Bip(2-甲基)
-Phe
6 HA EG T L-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
7 HA DG T L-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe)
8 HalaDG NleL-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
9 HAibDG NleL-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
10 HAibEG T L-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
11 HA DG T Phe(五氟)TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
氧基)
12 HA EG NleL-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
13 HAibDG T L-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
14 HA DG T Phe(五氟)TS D Bip(2-乙基，2’-Bip(2-甲基)
甲基)
15 HL-α- EG T L-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基 -Phe
-Pro
16 HL-α- DG T L-α-甲基TH D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基 -Phe
-Pro
17H A D GNva L-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
18H A D GT L-α-甲基 SS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
19des- A D GT L-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 -Phe
-His
20des- Aib D GT L-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 -Phe
-His
21des- ala D GT L-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 -Phe
-His
22H G D GNle L-α-甲基 TS DBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
23H A E GNle L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe 氧基)
24H A D GNle L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe 氧基)
25H ala E GNle L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe 氧基)
26H Aib D GT L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe 氧基)
27 HAEGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(4-乙基)
-Phe
28 HADGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(4-乙基)
-Phe
29 HAEGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(2，4-二甲
-Phe基)
30 HADGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(2，4-二甲
-Phe基)
31 HAEGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基，4-
-Phe甲氧基)
32 HADGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(2-甲基，4-
-Phe甲氧基)
33 HAEGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(4-甲基)
-Phe
34 HADGT L-α-甲基TS D Bip(2-乙基)Bip(4-甲基)
-Phe
35 Hala DGT L-α-甲基TS D BIP(2-乙基，4- BIP(2-甲基)
-Phe 甲氧基)
36 Hala DGT L-α-甲基TS D BIP(2-乙基，4- BIP(2-甲基)
-Phe 甲氧基)
37 HAEGT L-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(4-硫甲
-Phe基)
38 HADGT L-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(3-甲基)
-Phe
39 HA DG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
40 HA EG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
41 HA DG Nle (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
42 Hala EG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
43 Hala DG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
44 Hala DG Nle (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
45 HAib EG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
46 HAib DG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
47 HAib DG Nle (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
48 HA EG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
49 HA DG T (L)-α-甲基TS D BIP(2-乙基)BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
50HalaEGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
51HalaDGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
52HalaDGNle(D，L)-α-甲 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
基-Phe(五
氟)
53HAibEGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
54HAibDGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
55HAibDGNle(D，L)-α-甲 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
基-Phe(五
氟)
56HA DGT (D)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
57HAibEGT (D)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
58HAibDGT (D)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
59HalaDGNleF TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
氧基)
60HAibDGNleF TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
氧基)
61 HalaEGT L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
62 HalaDGNle L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
63 HAibEGT L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
64 HAibEGNle L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
65 HAibDGNle L-α-甲基 TS DBIP(2-乙基，4-甲 BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
66 HA EGT L-α-甲基 TS DBIP(2，4-二乙基) BIP(2-甲基)
-Phe
67 HA DGT L-α-甲基 TS DBIP(2，4-二乙基) BIP(2-甲基)
-Phe
68 HA DGNle L-α-甲基 TS DBIP(2，4-二乙基) BIP(2-甲基)
-Phe
69 HalaDGT L-α-甲基 TS DBIP(2，4-二乙基) BIP(2-甲基)
-Phe
70 HalaDGNle L-α-甲基 TS DBIP(2，4-二-乙BIP(2-甲基)
-Phe基)
71 HAibDGT L-α-甲基 TS DBIP(2，4-二乙基) BIP(2-甲基)
-Phe
72 HAib DGNle L-α-甲基 T SD Bip(2，4-二乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
73 HA DGT (L)-Phe(2，6T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
74 Hala DGNle (D，L)-Phe(2T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
，6-二氟)
75 HAib EGT (L)-Phe(2，6T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
76 HAib DGT (L)-Phe(2，6T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
77 HAib EGNle (D，L)-Phe(2T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
，6-二氟)
78 HAib DGNle (D，L)-Phe(2T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
，6-二氟)
79 HA DGT (L)-α-甲基 T SD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
80 Hala DGT (L)-α-甲基 T SD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
81 HAib DGT (L)-α-甲基 T SD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
82 HA EGT L-α-甲基 T SD Bip(3，4-二甲氧 Bip(2-甲基)
-Phe 基)
83 HAib EGT (D)-Phe(2，6T SD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-二氟)
84HL-α-EGNle(L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基 -Phe
-Pro
85HL-α-DGNle(L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基 -Phe
-Pro
86HAib DGT (L)-α-甲基TS D Bip(2-乙基) (D，L)-α-甲基
-Phe -Bip
87Hala DGNlePhe(2-氟) TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
88HADGT (L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-二氟)氧基)
89Hala DGNle(L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-二氟)氧基)
90HAib EGNle(L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-二氟)氧基)
91HAib DGNle(L)-Phe(2，6 TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-二氟)氧基)
92HL-α-EGT L-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
甲基 -Phe 氧基)
-Pro
93HL-α-DGT L-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
甲基 -Phe 氧基)
-Pro
94H L-α- EGNle L-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
甲基 -Phe 氧基)
-Pro
95H L-α- DGNle L-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
甲基 -Phe 氧基)
-Pro
96des-L-α- DGNle L-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2甲基 -Phe
-His-Pro
97des-L-α- EGNle L-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2甲基 -Phe
-His-Pro
98H ala EGNle (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
99H Aib EGNle (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
100 H A EGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
101 H A DGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
102 H ala EGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
103HalaDGT (D，L)-α-甲 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
基-Phe(2，6- 氧基)
二氟)
104HAibEGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
105HAibDGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-氧Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 甲基)
氟)
106HA EGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
107HA DGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
108HalaEGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
109HalaDGT (D，L)-α-甲 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
基-Phe(2，6-
二氟)
110HAibEGT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
111HAibDGT (D，L)-α-甲 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
基-Phe(2，6-
二氟)
112HAibEGNle(D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
113HAibDGNle(D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
114HA DGNle(D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
115HalaEGT (D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
116HalaDGNle(D，L)-α-甲 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
基-Phe(2，6-
二氟)
117HAibEGT (D)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
118H AibDGNle(D)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
119des- AibEGT L-α-甲基 TS D Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
NH2 -Phe
-His
122H AibDGNle(L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
123H AibEGT (L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
124H alaDGNle(L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
125H alaEGT (L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
126H A DGNle(L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
127H A EGT (L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
128H AibDGT (L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 氧基)
129H AibEGT (L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 氧基)
130H alaDGT (L)-α-甲基 TS D Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 氧基)
131HalaE GT (L)-α-甲基TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 氧基)
132HA D GT (L)-α-甲基TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 氧基)
133HA E GT L-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(五氟) 氧基)
51.根據(jù)權(quán)利要求1，5，9或13所述的被分離的多肽，其中該被分離的多肽從以下選擇
化 Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6Xaa7Xaa8 Xaa9Y Z-NH2
合
物
#
1 Hala DGNleL-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe
2 HL-α-EGT L-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基 -Phe
-Pro
3 HL-α-DGT L-α-甲基TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
甲基 -Phe
-Pro
4 HAib DGT L-α-甲基TSDBIP(2-乙基，4-甲 BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
5Hala DGT L-α-甲基 TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
-Phe 氧基)
6HA DGT L-α-甲基 TSDBIP(2-乙基) BIP(3-甲基)
-Phe
7HA DGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
8HA EGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
9HA DGNle(L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
10 Hala EGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
11 Hala DGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
12 Hala DGNle(L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
13 HAib EGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
14 HAib DGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
15 HAib DGNle(L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(2-氟)
16 HA EGT (L)-α-甲基TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
17HA DGT (L)-α-甲基 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
18HalaEGT (L)-α-甲基 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
19HalaDGT (L)-α-甲基 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
20HAlaDGNle(D，L)-α-甲TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
基-Phe(五
氟)
21HAibEGT (L)-α-甲基 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
22HAibDGT (L)-α-甲基 TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
-Phe(五氟)
23HAibDGNle(D，L)-α-甲TSDBIP(2-乙基) BIP(2-甲基)
基-Phe(五
氟)
24HAibDGNleF TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
氧基)
25HAlaEGT L-α-甲基 TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
-Phe 氧基)
26HalaDGNleL-α-甲基 TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
-Phe 氧基)
27 H AibEGT L-α-甲基TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
28 H AibEGNle L-α-甲基TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
-Phe氧基)
29 H AibDGNle L-α-甲基TSDBIP(2-乙基，4-甲BIP(2-甲基)
-Phe氧基))
30 H A DGT L-α-甲基TSDBIP(2，4-二乙基)BIP(2-甲基)
-Phe
31 H A DGNle L-α-甲基TSDBIP(2，4-二乙基)BIP(2-甲基)
-Phe
32 H alaDGT L-α-甲基TSDBIP(2，4-二乙基)BIP(2-甲基)
-Phe
33 H AibDGT L-α-甲基TSDBIP(2，4-二乙基)BIP(2-甲基)
-Phe
34 H AibDGNle L-α-甲基TSDBIP(2，4-二乙基)BIP(2-甲基)
-Phe
35 H AibDGNle (D，L)-Phe( TSDBip(2-乙基) Bip(2-甲基)
2，6-二氟)
36 H A EGT L-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
37 H A DGT (L)-α-甲基 TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟) 氧基)
38 H A DGNle (L)-α-甲基 TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
39HalaEGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
40HalaDGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
41HalaDGNle(L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
42HAibEGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
43HAibDGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe 氧基)
44HAlaDGNle(L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2-氟)氧基)
45HAibEGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)氧基)
46HAibDGT (L)-α-甲基TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(五氟)氧基)
47HA DGT (L)-Phe(2，6 TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-二氟)氧基)
48HL-α- EGT L-α-甲基 TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
甲基-Phe 氧基)
-Pro
49HL-α- EGNleL-α-甲基 TSDBip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
甲基 -Phe 氧基)
-Pro
50 H L-α- D GNle L-α-甲基TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
甲基 -Phe 氧基)
-Pro
51 H A E GT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
52 H AibE GT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
53 H AibD GT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基，4-甲Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二 氧基)
氟)
54 H A E GT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
55 H A D GT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
56 H AibE GT (L)-α-甲基 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
57 H AibD GT(D，L)-α-甲 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
基-Phe(2，6-
二氟)
58 H AibE GNle (D)-α-甲基TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二氧基)
氟)
59 H AibD GNle (D)-α-甲基TSD Bip(2-乙基，4-甲 Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二氧基)
氟)
60 H alaD GNle (D，L)-α-甲 TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
基-Phe(2，6-
二氟)
61 H AibD GNle (D)-α-甲基TSD Bip(2-乙基) Bip(2-甲基)
-Phe(2，6-二
氟)
52.一種藥物組合物，包括在權(quán)利要求1，12，24或35中限定的化合物，和其藥學(xué)上可接受的載體。
53.一種藥物聯(lián)合物，包括在權(quán)利要求1，12，24或35中限定的化合物和選自抗糖尿病藥劑、抗肥胖癥藥劑、抗高血壓藥劑、抗動(dòng)脈粥樣硬化藥劑和降脂藥劑的至少一種治療藥劑。
54.權(quán)利要求53中限定的聯(lián)合物，其中的抗糖尿病藥劑是選自雙縮胍、磺酰脲、葡萄糖苷酶抑制劑、PPARγ激動(dòng)劑、PPARα/γ雙激動(dòng)劑、aP2抑制劑、DP4抑制劑、胰島素致敏劑、胰高血糖素樣多肽-1(GLP-1)、胰島素和美格列奈的至少一種藥劑。
55.權(quán)利要求54中限定的聯(lián)合物，其中的抗糖尿病藥劑是選自二甲雙胍、格列本脲、格列美脲、glipyride、格列吡嗪、氯磺丙脲、格列齊特、阿卡波糖、米格列醇、匹格列酮、曲格列酮、羅格列酮、胰島素、G1-262570、艾格列酮、JTT-501、NN-2344、L895645、YM-440、R-119702、AJ9677、瑞格列奈、那格列奈、KAD1129、AR-HO39242、GW-409544、KRP297、AC2993、LY315902和NVP-DPP-728A的至少一種藥劑。
56.權(quán)利要求54中限定的聯(lián)合物，其中的抗肥胖藥劑是選自β3腎上腺素能激動(dòng)劑、脂肪酶抑制劑、5-羥色胺(和多巴胺)重?cái)z取抑制劑、甲狀腺受體β化合物和食欲抑制藥劑的至少一種藥劑。
57.權(quán)利要求56中限定的聯(lián)合物，其中的抗肥胖藥劑是選自?shī)W利斯特、ATL-962、AJ9677、L750355、CP331648、西布曲明、托吡酯、阿索開(kāi)、右旋苯丙、芬特明、苯丙醇胺和馬吲哚的至少一種試劑。
58.權(quán)利要求54中限定的聯(lián)合物，其中的降脂藥劑是選自微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白抑制劑、膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白、3-羥基-3甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、纖維酸衍生物、低密度脂蛋白受體活性向上調(diào)節(jié)劑、脂加氧酶抑制劑或膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的至少一種藥劑。
59.權(quán)利要求58中限定的聯(lián)合物，其中的降脂藥劑是選自普伐他汀、洛伐他汀、斯伐他汀、阿伐他汀、西伐他汀、氟伐他汀、尼伐他汀、韋撒他汀、非諾貝特、吉非諾齊、氯貝特、阿伐麥布、TS-962、MD-700、CP-529414和/或LY295427的至少一種藥劑。
60.一種治療或延緩糖尿病、糖尿病引起的視網(wǎng)膜病變、糖尿病引起的神經(jīng)障礙、糖尿病引起的腎病、傷口愈合、胰島素抵抗、高血糖癥、高胰島素血癥、X綜合征、糖尿病并發(fā)癥、血中游離的脂肪酸或甘油水平提高、高脂血癥、肥胖癥、高甘油三酯血癥、動(dòng)脈粥樣硬化或高血壓的發(fā)展或發(fā)生的方法，該方法包括對(duì)需要治療的哺乳動(dòng)物種類施用治療有效量的如權(quán)利要求1，12，24或35中所限定的化合物。
61.權(quán)利要求60中所述的方法，進(jìn)一步包括同時(shí)或先后施用至少一種治療有效量的選自抗糖尿病藥劑、抗肥胖癥藥劑、抗高血壓藥劑、抗動(dòng)脈粥樣硬化藥劑和降脂藥劑的額外的治療劑。
全文摘要
本發(fā)明提供新穎的人胰高血糖素樣多肽－1(GLP－1)的肽模擬物，其模擬天然的GLP－1肽的生物活性，并因此用于治療或預(yù)防與GLP活性相關(guān)的疾病或障礙。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供新穎的化學(xué)修飾的肽，其不僅刺激II型糖尿病中的胰島素分泌，而且產(chǎn)生別的有益的促胰島素效應(yīng)。這些合成的肽GLP－1模擬物對(duì)蛋白水解切割表現(xiàn)出更好的穩(wěn)定性，這使它們成為口服或不經(jīng)腸道施用的理想的治療候選藥。
文檔編號(hào)A61P17/02GK1630709SQ02820558
公開(kāi)日2005年6月22日 申請(qǐng)日期2002年10月18日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月18日
發(fā)明者S·I·納塔拉詹, M·M·巴斯托斯, M·S·貝爾納托維奇, C·馬佩利, V·李, W·R·尢因 申請(qǐng)人:百時(shí)美施貴寶公司