專利名稱：石杉堿甲及其衍生物或其鹽的注射用緩釋微球及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及石杉堿甲及其衍生物或其鹽的注射用緩釋微球及其制備方法。
石杉堿甲(Huperzine A)，化學名為(5R，9R，11E)-5-氨基-11-亞乙基-5，6，9，10-四氫-7-甲基-5，9-亞甲環(huán)芳辛并-2(1H)-吡啶酮，是從中草藥千層塔[Huperzia serrata(Thunb)Thev]中提取得到的酚性部分中獲得的生物堿，是一種高效、低毒和可逆性的乙酰膽堿酯酶抑制劑(AChEI)。1993年美國FDA批準其作為類膽堿能劑。據(jù)報導(dǎo)，它可以用來治療老年性癡呆病?？蒲腥藛T并對其結(jié)構(gòu)進行改造，發(fā)現(xiàn)它的一些衍生物也具有相似的功效。在本發(fā)明中它們分別是如下結(jié)構(gòu) 其中，結(jié)構(gòu)式(I)即為石杉堿甲，經(jīng)過檢索發(fā)現(xiàn)石杉堿甲的制劑有片劑、膠囊劑、透皮吸收劑、注射劑、透皮控釋帖片等，但至今沒有發(fā)現(xiàn)它的緩釋微球。現(xiàn)有的石杉堿甲劑型，不管是口服制劑、注射劑還是透皮吸收劑，因為石杉堿甲其生物半衰期較短，故其在血液中的生物利用度偏低且副作用較大。副作用主要表現(xiàn)為頭昏、惡心、多汗、便秘、口干、靜坐不能、焦慮。嘔吐。肌肉震顫、心率變化、瞳孔變化等。當劑量超過有效劑量時，副作用隨劑量增大而增多。因此，迫切需要開發(fā)一種新型制劑，從而降低石杉堿甲毒副作用，提高其生物利用度，同時減少給藥次數(shù)，方便患者用藥。
本發(fā)明的目的就是提供一種如通式(1)所表述的石杉堿甲及其衍生物或其鹽的注射用緩釋微球，這種新劑型能夠延長藥物作用時間、減少用藥次數(shù)、提高石杉堿甲及其衍生物的生物利用度，降低該藥物的毒副作用。
本發(fā)明的另一個目的是提供上述石杉堿甲及其衍生物注射用緩釋微球的制備方法。
本發(fā)明所述的石杉堿甲及其衍生物的緩釋微球直徑為1-250μm，是由微球總重量0.2-50％(w/w)的石杉堿甲及其衍生物和微球總重量50-99.8％(w/w)的分子量在5000-1000000道爾頓的可生物降解的高分子藥用輔料組成。其中所述的可生物降解的高分子藥用輔料選自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羥基丁酸酯、聚乳酸-聚羥乙酸、聚乳酸-乙醇酸、聚鄰酯、聚內(nèi)酯、聚酐、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物、聚乙醇酸、聚丙烯葡聚糖、羥基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥乙酸-聚乙二醇其中的一種；優(yōu)選聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乳酸-聚羥乙酸、聚乳酸-乙醇酸、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物，最佳為聚丙交酯-乙交酯，分子量為12000-15000道爾頓；丙交酯-乙交酯的聚合比例為40∶60-60∶40。
另外本發(fā)明所述的石杉堿甲或其衍生物也包括它們的鹽，如鹽酸鹽、醋酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、檸檬酸鹽、硫酸鹽等。
本發(fā)明所述的微球可以采用微球的常規(guī)制備方法制得，如采用乳化分散法、噴霧干燥法和溶劑揮發(fā)法，優(yōu)選噴霧干燥法。當用乳化分散法制備本發(fā)明的微球時，用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把石杉堿甲或其衍生物和可生物降解的藥用輔料溶解配制成有機相，其中藥用輔料在有機溶劑中的重量體積百分數(shù)為1-30％，有機相采用的乳化劑為HLB＝4.5～6.0的非離子型乳化劑，用量為有機相的0.01-12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉水溶液配制連續(xù)水相，其中它們在水相中的重量百分數(shù)為0.01-10.0％，水相中的乳化劑為HLB＝14.0-15.5的非離子型乳化劑，用量為水相的0.01-12％；有機相與水相的體積比為1∶4-100；將有機相通過細管慢慢注入到連續(xù)相中，充分乳化后，過篩分離所形成的微球，干燥即得。當采用溶劑揮發(fā)法時，是在分散相通過細管慢慢注入到連續(xù)相中充分乳化后，減壓揮發(fā)溶劑，離心分離得到所形成的微球，干燥即得。
當采用噴霧干燥法制備石杉堿甲或其衍生物的緩釋微球時，是用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把石杉堿甲或其衍生物和可生物降解的藥用輔料充分溶解配制成有機溶液；過濾，噴霧干燥制成微球。
本發(fā)明所述的石杉堿甲或其衍生物的微球是將制好的微球無菌粉末先在無菌的0.9％的生理鹽水溶劑中混懸，均勻后肌注來給藥的。以石杉堿甲A劑量為400μg/kg給兔子肌肉注射，28天內(nèi)，血藥濃度至少為0.3ng/ml，最大量不超過20ng/ml。以石杉堿甲A劑量為200μg/kg給狗作肌肉注射，42天內(nèi)，血藥濃度至少為0.3ng/ml，最大量不超過20ng/ml。
以下將通過實施例來進一步說明本發(fā)明所述的石杉堿甲及其衍生物的微球的制備方法和緩釋效果。
實施例1將100mg石杉堿甲A、200mg聚丙交酯-乙交酯溶于3ml二氯甲烷中，用針筒在激烈攪拌下將其滴至裝有300ml內(nèi)含3.5Ghlb＝14乳化劑的10％PVA的三頸瓶中，充分乳化1小時后，在30℃0.03MPa的壓力下，揮發(fā)溶劑1.5小時，離心分離，用蒸餾水洗反應(yīng)物三次，在30℃真空烘箱內(nèi)烘干，用環(huán)氧乙烷在30℃滅菌48小時，確保殘留環(huán)氧乙烷含量在5ppm以下，灌裝。
實施例2稱取石杉堿甲A100mg，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50)，2.0g于小燒杯中，加二氯甲烷31.5ml，電磁攪拌至充分溶解，用微孔濾膜過濾，采用噴霧干燥法制備微球，測得粒徑5-80μm，滅菌，分裝，進行動物體內(nèi)釋放試驗，試驗對象為家兔，劑量為400μg/kg，微球混懸于生理鹽水中，肌注給藥，在1到28日內(nèi)，取血，HPLC-MS檢測，血濃為1-5ng/ml。
實施例3稱取石杉堿甲100mg，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝60∶40)，4.0g于小燒杯中，加二氯甲烷41ml，電磁攪拌至充分溶解，采用噴霧干燥法制備微球，測得粒徑1-50μm，平均粒徑13.26μm，滅菌，分裝，對狗進行體內(nèi)釋放試驗，石杉堿甲A劑量為200μg/kg，微球混懸于生理鹽水中，肌注給藥，在1到42日內(nèi)，取血，HPLC-MS檢測，血濃為0.5-5ng/ml。
實施例4將石杉堿甲100mg，聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50)1.0g共置于小燒杯中，加冰醋酸22ml，電磁攪拌至充分溶解，采用噴霧干燥法制備微球，測得粒徑1-100μm，滅菌，分裝，體外模擬釋放試驗20天。
實施例5將石杉堿甲500mg及1000mg的聚丙交酯-乙交酯(丙交酯∶乙交酯＝50∶50)溶于10ml二氯甲烷并冷卻至15℃，另以400ml內(nèi)含0.01mol/L三羥甲基氨基甲烷和0.01％聚乙烯醇的水溶液(pH＝8.0)作為連續(xù)水相，將分散相通過細管慢慢注入到連續(xù)相中，在15攝氏度用乳化器乳化15分鐘，然后加1600ml，15℃的蒸餾水，用磁力攪拌器攪拌20分鐘，再在抽真空狀態(tài)下攪拌15分鐘，過篩，低壓凍干即得1-10微米的微球。
實施例5稱取石杉堿甲100mg，聚乳酸-聚羥乙酸，4.0g于小燒杯中，加二氯甲烷41ml，電磁攪拌至充分溶解，采用噴霧干燥法制備微球，測得粒徑1-50μm，平均粒徑13.26μm，滅菌，分裝，實施例6將石杉堿甲100mg，聚乳酸1.0g共置于小燒杯中，加冰醋酸22ml，電磁攪拌至充分溶解，采用噴霧干燥法制備微球，測得粒徑1-100μm，滅菌，分裝。
實施例7將100mg石杉堿甲A、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯200mg溶于3ml二氯甲烷中，用針筒在激烈攪拌下將其滴至裝有300ml內(nèi)含3.5Ghlb＝14乳化劑的10％PVA的三頸瓶中，充分乳化1小時后，在30℃0.03MPa的壓力下，揮發(fā)溶劑1.5小時，離心分離，用蒸餾水洗反應(yīng)物三次，在30℃真空烘箱內(nèi)烘干，用環(huán)氧乙烷在30℃滅菌48小時，確保殘留環(huán)氧乙烷含量在5ppm以下，灌裝。
實驗例1 石杉堿甲微球的體外釋放試驗。
實驗樣品根據(jù)本發(fā)明實施例2、3、4所述的方法制備的微球。
實驗試劑一定PH值的緩沖溶液(4.0、5.5)。
實驗儀器恒溫振蕩器、離心機。
實驗條件溫度37±1℃，轉(zhuǎn)速30rp/分鐘。
實驗方法精密稱取實驗樣品約10mg置于容積為15ml的具蓋塑料離心管中，加5ml釋放介質(zhì)(PH＝4和5.5磷酸緩沖溶液)置于恒溫振蕩器中，保持一定的溫度和轉(zhuǎn)速按時取樣。
取樣方法3600轉(zhuǎn)條件下離心50min，精取3ml溶液，再補加3ml的釋放介質(zhì)，取出液用HPLC檢測。
取樣時間點(天)0、1、2、4、6、8、10、12、14、16、18、20。
其中、按實施例2、3、4所述的方法制備的微球在不同PH值的條件下體外釋放效果圖分別見附

圖1、2、3試驗結(jié)果石杉堿甲控釋微球體外釋放試驗結(jié)果表試驗結(jié)果石杉堿甲控釋微球體外釋放試驗結(jié)果表
權(quán)利要求
1.一種如通式(1)的石杉堿甲及其衍生物或其鹽的緩釋微球，其特征在于它由微球重量的0.2-50％的石杉堿甲及其衍生物或其鹽和微球重量的50-99.8％的分子量范圍在5,000-1,000,000之間的可生物降解的藥用高分子輔料組成，其中和其成鹽的酸為鹽酸、醋酸、磷酸、硫酸、乳酸、檸檬酸。
2.按照權(quán)利要求1所述的緩釋微球，其中所述的石杉堿甲及其衍生物或其鹽為式(I)、式(II)、式(III)、式(IV)、式(V)化合物或其鹽，其中與其成鹽的酸為鹽酸、醋酸、磷酸、硫酸、乳酸、檸檬酸。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的緩釋微球，其中所述的藥用高分子輔料選自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羥基丁酸酯、聚乳酸-聚羥乙酸、聚乳酸-乙醇酸、聚鄰酯、聚內(nèi)酯、聚酐、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物、聚乙醇酸、聚丙烯葡聚糖、羥基乙酸、聚乳酸-聚乙二醇、聚羥乙酸-聚乙二醇其中的一種或其中的兩種或兩種以上混合。
4.按照權(quán)利要求3所述的緩釋微球，其中所述的藥用高分子輔料選自于聚丙交酯-乙交酯、聚乳酸、聚乳酸-聚羥乙酸、聚乳酸-乙醇酸、聚羥基丁酸酯-羥基戊酸酯共聚物其中的一種或其中的兩種或兩種以上的混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的緩釋微球，其中藥用高分子輔料為聚丙交酯-乙交酯。
6.按照權(quán)利要求5所述的緩釋微球，其中所述聚丙交酯-乙交酯其分子量在12000-15000道爾頓之間。
7.按照權(quán)利要求5或6所述的緩釋微球，其中聚丙交酯-乙交酯中丙交酯和乙交酯聚合比例在40∶60-60∶40之間。
8.一種石杉堿甲或其衍生物的緩釋微球的制備方法，它是采用乳化分散法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把石杉堿甲和可生物降解的藥用輔料溶解，其中藥用輔料在有機溶劑中的重量體積百分數(shù)為1-30％，有機相采用的乳化劑為HLB＝4.5～6.0的非離子型乳化劑，用量為有機相的0.01-12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉水溶液，配制連續(xù)水相，其中它們在水相中的重量百分數(shù)為0.01-10.0，水相中的乳化劑為HLB＝14.0-15.5的非離子型乳化劑，用量為水相的0.01-12％；將分散相通過細管慢慢注入到連續(xù)相中，乳化，然后過篩，干燥即得。
9.一種石杉堿甲或其衍生物的緩釋微球的制備方法，它是采用溶劑揮發(fā)法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸把石杉堿甲和可生物降解的藥用輔料溶解，其中藥用輔料在有機溶劑中的重量體積百分數(shù)為1-30％，有機相采用的乳化劑為HLB＝4.5～6.0的非離子型乳化劑，用量為有機相的0.01-12％；另外用聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、羧甲基纖維素鈉水溶液，配制連續(xù)水相，其中它們在水相中的重量百分數(shù)為0.01-10.0，水相中的乳化劑為HLB＝14.0-15.5的非離子型乳化劑，用量為水相的0.01-12％；將分散相通過細管慢慢注入到連續(xù)相中，充分乳化，然后減壓揮發(fā)溶劑，離心分離，干燥即得。
10.一種石杉堿甲或其衍生物的緩釋微球的制備方法，它是采用噴霧干燥法制成，其特征在于用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、冰醋酸以及由它們所組成的混合酸溶解0.2-50％石杉堿甲及其衍生物和50-99.8％的分子量在5000-1000000道爾頓的可生物降解的高分子藥用輔料，攪拌充分溶解后，過濾，采用噴霧干燥法制得微球。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種石杉堿甲及其衍生物或其鹽的新劑型注射用緩釋微球，它是由微球重量的0.2－50％的石杉堿甲或其衍生物和微球重量的50－99.8％的可生物降解的分子量為5,000－1,000,000道爾頓的藥用高分子輔料組成。它可以采用乳化分散法、溶劑揮發(fā)法和噴霧干燥法制備。該緩釋微球能夠延長藥物作用時間、減少用藥次數(shù)、提高石杉堿甲及其衍生物的生物利用度，降低該藥物的毒副作用。
文檔編號A61K9/19GK1393220SQ0111995
公開日2003年1月29日 申請日期2001年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2001年7月3日
發(fā)明者劉萬卉, 宋吉倫, 劉珂 申請人:山東綠葉制藥股份有限公司