專利名稱：c－JUN N－末端激酶(JNK)和其它蛋白激酶的抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蛋白激酶，尤其是屬于促分裂原活化蛋白(MAP)激酶家族的c-Jun N-末端激酶(JNK)的抑制劑。有多種編碼JNK的不同基因和同種型。JNK調(diào)控對環(huán)境壓力和促炎細(xì)胞因子起反應(yīng)的細(xì)胞因子，并且據(jù)表明在多種不同疾病的介導(dǎo)中起作用。本發(fā)明還涉及制備這些抑制劑的方法。本發(fā)明還提供了包含本發(fā)明抑制劑的藥物組合物，和使用這些組合物來治療和預(yù)防不同疾病的方法。
背景技術(shù)：
哺乳動物細(xì)胞通過激活信號傳導(dǎo)級聯(lián)而對細(xì)胞外刺激起反應(yīng)，信號傳導(dǎo)級聯(lián)是由促分裂原活化蛋白(MAP)激酶家族介導(dǎo)的，MAP激酶包括細(xì)胞外信號調(diào)控激酶(ERKs)、p38 MAP激酶和c-Jun N-末端激酶(JNKs)。MAP激酶(MAPKs)是由多種不同的信號，包括生長因子、細(xì)胞因子、UV輻射、和應(yīng)激誘導(dǎo)劑激活的。MAPKs是絲氨酸/蘇氨酸激酶，并且其激活是通過在激活回路中在Thr-X-Tyr片斷上的蘇氨酸和酪氨酸的雙重磷酸化而實(shí)現(xiàn)的。MAPKs磷酸化多種不同底物，包括轉(zhuǎn)錄因子，而轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控特定基因組表達(dá)，并由此介導(dǎo)對刺激的特定反應(yīng)。
一類值得特別關(guān)注的激酶是c-Jun NH2-末端蛋白激酶，其還稱為JNKs。已經(jīng)鑒定了三種不同的基因JNK1、JNK2、JNK3，并且在哺乳動物細(xì)胞中至少存在10種不同的JNKs剪切同種型[Gupta等人，EMBO J.，152760-70(1996)]。JNK成員是通過促炎細(xì)胞因子例如腫瘤壞死因子-α(TNFa)和白介素-1β(IL-1β)，以及通過環(huán)境應(yīng)力包括茴香霉素、UV輻射、缺氧、和滲透壓休克激活的[Minden等人，Biochemica etBiophysica Acta，1333F85-F104(1997)]。
JNKs的下游底物包括轉(zhuǎn)錄因子c-Jun、ATF-2、Elk1、p53和細(xì)胞死亡結(jié)構(gòu)域蛋白(DENN)[Zhang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，952586-91(1998)]。各種JNK同種型以不同親和力結(jié)合這些底物，這意味著在體內(nèi)是通過不同JNKs的底物特異性來調(diào)控信號傳導(dǎo)路徑(Gupta等人，上文)。
據(jù)表明，JNKs與其它MAPKs在介導(dǎo)對癌癥、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、免疫缺陷病癥、自身免疫性疾病、細(xì)胞死亡、變態(tài)反應(yīng)、骨質(zhì)疏松以及心臟病的細(xì)胞反應(yīng)方面起作用。涉及JNK路徑激活的治療目標(biāo)包括慢性骨髓性白血病(CML)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、骨關(guān)節(jié)炎、局部缺血、癌癥和神經(jīng)變性疾病。
有幾篇報道詳細(xì)描述了與肝病或肝缺血發(fā)作有關(guān)的JNK激活的重要性[Nat.Genet.21326-9(1999)；FEBS Lett.420201-4(1997)；J.Clin.Invest.1021942-50(1998)；Hepatology 281022-30(1998)]。因此，JNK抑制劑可用于治療多種不同的肝臟疾病。
據(jù)報道，JNK在心血管疾病例如心肌梗塞或充血性心力衰竭中起作用，因為據(jù)顯示JNK介導(dǎo)對不同類型心臟應(yīng)力的肥大反應(yīng)[Circ.Res.83167-78(1998)；Circulation 971731-7(1998)；J.Biol.Chem.27228050-6(1997)；Circ.Res.79162-73(1996)；Circ.Res.78947-53(1996)；J.Clin.Invest.97508-14(1996)]。
據(jù)證實(shí)JNK級聯(lián)還在T-細(xì)胞激活，包括IL-2啟動子激活中起作用。因此，JNK抑制劑可具有用于改變病理性免疫反應(yīng)的治療價值[J.Immunol.1623176-87(1999)；Eur.J.Immunol.283867-77(1998)；J.Exp.Med.186941-53(1997)；Eur.J.Immunol.26989-94(1996)]。
已確認(rèn)了JNK激活在各種癌癥中的作用，這意味著JNK抑制劑可用于治療癌癥。例如，組成性激活的JNK與HTLV-1介導(dǎo)的腫瘤發(fā)生有關(guān)[Oncogene 1313542(1996)]。JNK可能在卡波濟(jì)氏肉瘤(KS)中起作用，因為據(jù)認(rèn)為bFGF和OSM對KS細(xì)胞的增殖作用是通過其激活JNK信號傳導(dǎo)路徑而介導(dǎo)的[J.Clin.Invest.991798-804(1997)]。涉及KS增殖的其它細(xì)胞因子例如血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、IL-6和TNFα的增殖作用也可能是JNK介導(dǎo)的。此外，在p210 BCR-ABL轉(zhuǎn)化細(xì)胞中，c-jun基因的調(diào)控與與JNK活性一致，這表明JNK抑制劑可用于治療慢性骨髓性白血病(CML)[Blood 922450-60(1998)]。
JNK1和JNK2在多種不同組織中廣泛表達(dá)。與其相反，JNK3在腦中選擇性地表達(dá)，在心臟和睪丸中有較小程度的表達(dá)[Gupta等人，上文；Mohit等人，Neuron 1467-78(1995)；Martin等人，Brain Res.Mol.Brain Res.3547-57(1996)]。JNK3與海人草酸誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞凋亡有關(guān)，這表明JNK在谷氨酸神經(jīng)毒害的發(fā)病機(jī)理中起作用。在成人腦中，JNK3表達(dá)局限于海馬CA1、CA4和下腳區(qū)域以及新皮質(zhì)第3和5層中的錐體細(xì)胞[Mohit等人，上文]。急性缺氧的患者的CA1神經(jīng)元表現(xiàn)出強(qiáng)的核JNK3-免疫反應(yīng)性，而得自正常患者腦組織的海馬神經(jīng)元表現(xiàn)出最小的、擴(kuò)散性細(xì)胞質(zhì)染色[Zhang等人，上文]。因此，JNK3可能涉及海馬中CA1神經(jīng)元的缺氧和缺血損傷。
此外，在免疫化學(xué)上JNK3與阿爾茨海默氏病中的易受損害神經(jīng)元一起定位[Mohit等人，上文]。JNK3基因的破壞會引起小鼠對興奮毒性谷氨酸受體激動劑海人草酸的抗性，包括對癲癇活動、AP-1轉(zhuǎn)錄活性以及海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡的作用，這表明JNK3信號傳導(dǎo)路徑在谷氨酸神經(jīng)毒害發(fā)病機(jī)理中起著非常重要的作用(Yang等人，Nature，389865-870(1997))。
基于這些發(fā)現(xiàn)，JNK信號傳導(dǎo)，尤其是JNK3信號傳導(dǎo)涉及與細(xì)胞凋亡有關(guān)的神經(jīng)變性疾病，例如阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、ALS(肌萎縮性側(cè)索硬化)、癲癇和癲癇發(fā)作、亨廷頓氏舞蹈病、創(chuàng)傷性腦損傷、以及缺血和出血性中風(fēng)。
在醫(yī)藥學(xué)上非常需要開發(fā)出可用于治療與JNK激活有關(guān)的各種病癥，尤其是因為對于大多數(shù)這些疾病來說，目前可采用的治療選擇較不充分。
最近，我們在于1998年5月4日提交的美國專利申請60/084056中描述了可結(jié)晶的JNK蛋白與-磷酸腺苷復(fù)合物，包括含有JNK3的復(fù)合物。該信息對于鑒定和涉及不同JNK的潛在抑制劑非常有用，這樣的抑制劑具有上述治療用途。
為了開發(fā)出能抑制MAPKs的藥物例如p38抑制劑，人們已經(jīng)作了大量工作。參見例如WO 98/27098和WO 95/31451。然而，就我們的知識而言，沒有任何MAPK抑制劑能特異性地作用于JNKs而不作用于其它相關(guān)MAPKs。
因此，仍然非常需要開發(fā)出可用于治療與JNK激活有關(guān)的各種病癥的JNKs有效抑制劑，包括JNK3抑制劑。
發(fā)明概述現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明化合物及其藥物組合物能有效地用作c-JunN-末端激酶(JNK)的抑制劑。這些化合物具有通式I 其中R1是H、CONH2、T(n)-R、或T(n)-Ar2，n可以是0或1，且G、XYZ、和Q如下所述。優(yōu)選的化合物是其中包含XYZ的環(huán)是噁唑的那些。優(yōu)選的G基團(tuán)是任選取代的苯基，并且優(yōu)選的Q是嘧啶、吡啶或吡唑環(huán)。
這些化合物及其藥物組合物可用于治療或預(yù)防多種不同病癥，例如心臟病、免疫缺陷病癥、炎性疾病、變應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病、骨破壞疾病例如骨質(zhì)疏松、增殖性疾病、感染疾病和病毒疾病。這些組合物還可用于阻止細(xì)胞死亡和增生的方法，并因此可用于治療或預(yù)防中風(fēng)中的再灌注/缺血、心臟病發(fā)作、和器官缺氧。本發(fā)明組合物還可用于預(yù)防凝血酶引起的血小板聚集。本發(fā)明組合物尤其可用于治療疾病例如慢性骨髓性白血病(CML)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、哮喘、骨關(guān)節(jié)炎、缺血、癌癥、肝臟疾病例如肝缺血、心臟病例如心肌梗塞和充血性心力衰竭、涉及T細(xì)胞激活的免疫病癥、和神經(jīng)變性疾病。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了可用作JNK抑制劑的新的化合物、及其可藥用衍生物。這些化合物具有通式I 其中X-Y-Z選自 R1是H、CONH2、T(n)-R、或T(n)-Ar2；R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)；n是0或1；T是C(＝O)、CO2、CONH、S(O)2、S(O)2NH、COCH2或CH2；R2分別獨(dú)立地選自氫、-R、-CH2OR、-CH2OH、-CH＝O、-CH2SR、-CH2S(O)2R、-CH2(C＝O)R、-CH2CO2R、-CH2CO2H、-CH2CN、-CH2NHR、-CH2N(R)2、-CH＝N-OR、-CH＝NNHR、-CH＝NN(R)2、-CH＝NNHCOR、-CH＝NNHCO2R、-CH＝NNHSO2R、-芳基、-取代的芳基、-CH2(芳基)、-CH2(取代的芳基)、-CH2NH2、-CH2NHCOR、-CH2NHCONHR、-CH2NHCON(R)2、-CH2NRCOR、-CH2NHCO2R、-CH2CONHR、-CH2CON(R)2、-CH2SO2NH2、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-(雜環(huán)基)、或-(取代的雜環(huán)基)；R3分別獨(dú)立地選自氫、R、COR、CO2R或S(O)2R；G是R或Ar1；Ar1是芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜環(huán)基、或取代的雜環(huán)基，其中Ar1可任選與含有0-3個雜原子的部分不飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合；Q-NH是 其中Q-NH上的H可任選被R3替代；A是N或CR3；U是CR3、O、S、或NR3；Ar2是芳基、取代的芳基、雜環(huán)基或取代的雜環(huán)基，其中Ar2可任選與含有0-3個雜原子的部分不飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合；并且Ar2、包括如果存在時稠合環(huán)中的每個可取代的碳原子可任選獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、或NHS(O)2R，其中稠合環(huán)中的每個飽和碳可任選獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代＝O、＝S、＝NNHR、＝NNR2、＝N-OR、＝NNHCOR、＝NNHCO2R、＝NNHSO2R、或＝NR；其中Ar2中每個可取代的氮原子可任選被R、COR、S(O)2R或CO2R取代。
除非另有說明，否則在本文中使用的術(shù)語具有下列定義。本文所用術(shù)語“脂族基團(tuán)”是指直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-C12烴、優(yōu)選具有1-6個碳原子的烴，所述烴是全飽和或者含有一個或多個不飽和單位。例如，合適的烴基包括取代或未取代的直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基、烯基、炔基及其組合體例如(環(huán)烷基)烷基、(環(huán)烯基)烷基、或(環(huán)烷基)烯基。單獨(dú)使用或者作為較大基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“烷基”和“烷氧基”是指含有1-12個碳原子的直鏈和支鏈。單獨(dú)使用或者作為較大基團(tuán)一部分使用的術(shù)語“烯基”和“炔基”包括含有2-12個碳原子的直鏈和支鏈。術(shù)語“鹵代烷基”、“鹵代烯基”或“鹵代烷氧基”是指被一個或多個鹵素原子取代的烷基、烯基或烷氧基。術(shù)語“鹵素”是指F、Cl、Br、或I。術(shù)語“雜原子”是指N、O或S，并包括氧化形式的任何氮和硫，以及季銨化形式的任何堿性氮。
單獨(dú)使用或者作為較大基團(tuán)例如“芳烷基”一部分使用的術(shù)語“芳基”是指5-14元芳環(huán)基團(tuán)，例如苯基、芐基、1-萘基、2-萘基、1-蒽基和2-蒽基，以及雜環(huán)芳基或雜芳基例如2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、3-異噁唑基、4-異噁唑基、5-異噁唑基、2-噁二唑基、5-噁二唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、3-噠嗪基、3-噠嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、5-四唑基、2-三唑基、5-三唑基、2-噻吩基、或3-噻吩基。
芳基還包括其中碳芳環(huán)或雜芳基環(huán)與一個或多個其它環(huán)稠合的稠合多環(huán)芳環(huán)系。其實(shí)例包括四氫萘基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并二氮雜基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、異喹啉基、異吲哚基、吖啶基、苯并異噁唑基等。還包括在本文所用術(shù)語“芳基”范圍內(nèi)的是其中一個或多個碳芳環(huán)和/或雜芳基環(huán)與環(huán)烷基或非芳族雜環(huán)基稠合的基團(tuán)，例如二氫化茚基或四氫苯并吡喃基。
術(shù)語“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”是指在環(huán)中包含一個或多個雜原子例如氮、氧或硫的非芳族環(huán)。該環(huán)可以是5元、6元、7元或8元環(huán)和/或與另一個環(huán)例如環(huán)烷基或芳環(huán)稠合。其實(shí)例包括3-1H-苯并咪唑-2-酮、3-1-烷基苯并咪唑-2-酮、2-四氫呋喃基、3-四氫呋喃基、2-四氫吡喃基、3-四氫吡喃基、4-四氫吡喃基、2-四氫噻吩基、3-四氫噻吩基、2-嗎啉基、3-嗎啉基、4-嗎啉基、2-硫代嗎啉基、3-硫代嗎啉基、4-硫代嗎啉基、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-哌嗪基、2-哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、4-噻唑烷基、二氮雜環(huán)戊酮(diazolonyl)、N-取代的二氮雜環(huán)戊酮、1-苯并吡咯酮基、苯并四氫吡喃、苯并三唑-1-基、苯并吡咯烷、苯并哌啶、苯并氧雜環(huán)戊烷、苯并硫雜環(huán)戊烷、和苯并四氫硫代吡喃。
本發(fā)明化合物可包含與含有0-3個雜原子的部分飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合的環(huán)。這樣的稠合環(huán)可以是芳族或非芳族單環(huán)，其實(shí)例包括如上所述的芳基和雜環(huán)基環(huán)。
芳基(碳芳環(huán)和雜芳環(huán))或芳烷基例如芐基或苯乙基可包含一個或多個取代基。在芳基的不飽和碳原子上的適當(dāng)取代基的實(shí)例包括鹵素、-R、-OR、-OH、-SH、-SR、保護(hù)的OH(例如酰氧基)、苯基(Ph)、取代的Ph、-OPh、取代的-OPh、-NO2、-CN、-NH2、-NHR、-N(R)2、-NHCOR、-NHCONHR、-NHCON(R)2、-NRCOR、-NHCO2R、-CO2R、-CO2H、-COR、-CONHR、-CON(R)2、-S(O)2R、-SONH2、-S(O)R、-SO2NHR、或-NHS(O)2R，其中R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)。
脂族基團(tuán)或非芳族雜環(huán)可包含一個或多個取代基。在脂族基團(tuán)或非芳族雜環(huán)的飽和碳上的適當(dāng)取代基的實(shí)例包括上述列舉的關(guān)于不飽和碳、例如芳環(huán)中不飽和碳的取代基，以及下述取代基＝O、＝S、＝NNHR、＝NNR2、＝N-OR、＝NNHCOR、＝NNHCO2R、＝NNHSO2R、或＝NR。
在芳族或非芳族雜環(huán)上的可取代的氮原子可任選被取代。在氮原子上的合適的取代基包括R、COR、S(O)2R、和CO2R，其中R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)。
通過將本文所述化合物的羧酸或酯部分進(jìn)行電子等排或生物電子等排置換而產(chǎn)生的化合物也在本發(fā)明范圍內(nèi)。通過交換原子或原子團(tuán)來產(chǎn)生具有與母羧酸或酯相類似的生物性質(zhì)的新化合物而產(chǎn)生的電子等排物是本領(lǐng)域已知的。生物電子等排置換可以基于物理化學(xué)或拓?fù)鋵W(xué)基礎(chǔ)。羧酸的電子等排的實(shí)例是CONHSO2(烷基)例如CONHSO2Me。
對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的是，一些本發(fā)明化合物可以以互變異構(gòu)形式或水合形式存在，所有這些形式的化合物都在本發(fā)明范圍內(nèi)。除非另有說明，否則本文所描述的結(jié)構(gòu)還包括所有立體化學(xué)形式的結(jié)構(gòu)；即相對于每個不對稱中心的R和S構(gòu)型。因此，本發(fā)明化合物的單一立體化學(xué)異構(gòu)體以及對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)體混合物包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。除非另有說明，否則本文所描述的結(jié)構(gòu)還包括其差異僅在于存在一個或多個富含同位素的原子的化合物。例如，具有本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)，但是氫被氘或氚替代，或者碳被富含13C-或14C-的碳替代的化合物包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。這樣的化合物可用于例如生物測定中的分析工具或探針。
一個本發(fā)明實(shí)施方案涉及涉及定義如下的式I化合物其中含有XYZ的環(huán)是異噁唑，這樣的化合物由式IA代表
其中R2優(yōu)選為烷基例如甲基，或CH2(雜環(huán)基)例如CH2(N-嗎啉基)；G優(yōu)選為Ar1；且R1優(yōu)選為T(n)-AR2或T(n)-R，其中n最優(yōu)選為0。最優(yōu)選的是其中G、R1、和R2如上所述，且Q-NH是氨基吡啶或氨基嘧啶，且NH在環(huán)的2位
或者Q-NH是氨基吡唑
下表1列出了IA化合物的代表性實(shí)例，其中Q是嘧啶、吡啶或吡唑，且R1是AR2，這樣的化合物由式IIA代表。
表1式IIA化合物的實(shí)例
(其中Ar2是R1)
<p>R治療(參考)在空腹情況下，給予一片單一口服劑量的Remeron(含有30毫克的米氮平)，然后給予200毫升無碳酸水。
治療的持續(xù)時間兩個單一劑量給藥，間隔至少為期兩周的清除期。
藥代動力學(xué)給藥前，給予米氮平15，30，45，60和90分鐘以及2，2.5，3，4，6，8，12，16，24，36，48，72和96小時后取血樣用于米氮平的濃度測定。從個體的血漿濃度-時間曲線得到下列參數(shù)Cmax，tmax，AUC0-tlast，t1/2，λz和AUC0-∞。由主要參數(shù)通過方差分析計算得到在90％置信區(qū)間(乘法模型)內(nèi)的″測試/參考″的真實(shí)比率的Cmax，AUC0-tlast和AUC0-∞參數(shù)點(diǎn)估計值。如果90％置信區(qū)間完全在接受范圍(0.80-1.25)內(nèi)，可以將參數(shù)視為生物等效的。對于tmax，采用了一種等級上的ANOVA方法進(jìn)行了典型的假設(shè)實(shí)驗。
結(jié)果見表1。
結(jié)論對于最大濃度、從零時至最終可測量濃度的時間處的曲線下面積以及從零時至無限量處的曲線下面積來說，參考配方和測試配方是生物等效的。
實(shí)施例3抗抑郁作用的起效，以及體重、性功能和有關(guān)米氮平的其他效應(yīng)的測試，可作為將按照本發(fā)明的劑量單位給予主要抑郁發(fā)作期(依據(jù)DSM-IV標(biāo)準(zhǔn))的人類對象的給藥結(jié)果。在治療的第一和第二周內(nèi)評估測試對象以檢查抗抑郁活性。進(jìn)一步的評價將兩周進(jìn)行一次。表1生物等效性測試結(jié)果
其中R1不是苯基的式IIA化合物的實(shí)例如下表2所示。表2.式IIA化合物的實(shí)例(R1不是苯基) IIA(R1不是苯基)
其中Ar1是未取代的苯基或者被一個或多個鹵素、烷基或烷氧基取代的苯基的IIA化合物是優(yōu)選的。定義如下的IIA化合物是更優(yōu)選的其中Ar1如上所述，Ar2是可任選被一個或多個鹵素、烷基、烷氧基、鹵代烷基、羧基、烷氧基羰基、氰基、或CONH2取代的萘基或苯基，或者是二氫茚酮(例如在化合物IIAA-11中)。定義如下的IIA化合物也是優(yōu)選的R1是任選取代的烷基或任選取代的環(huán)烷基，更優(yōu)選烷氧基烷基、烷氧基羰基烷基、羥基烷基、吡啶基烷基、烷氧基環(huán)烷基、烷氧基羰基環(huán)烷基、或羥基環(huán)烷基。這些優(yōu)選的化合物的實(shí)例包括IIAA-24、IIAA-33～I(xiàn)IAA-36、IIAA-38和IIAA-40。
一個本發(fā)明實(shí)施方案涉及式IA化合物，其中Q是嘧啶環(huán)，且R1是T-Ar2，其中T選自CO、CO2、CONH、S(O)2、S(O)2NH、COCH2和CH2。當(dāng)R1是T-AR2時，優(yōu)選的化合物是其中T是C(＝O)的那些。下表3列出了IIIA化合物的代表性實(shí)例
表3.IIIA化合物的實(shí)例
其中Ar1是未取代的苯基或者被一個或多個獨(dú)立地選自鹵素的取代基取代的苯基的IIIA化合物是優(yōu)選的。定義如下的IIIA化合物是更優(yōu)選的其中Ar1如上所述，且Ar2是噻吩基，未取代的苯基，或者被一個或多個獨(dú)立地選自鹵素、烷基、烷氧基、CO2H或CO2R的取代基取代的苯基。
其中R1是T-Ar1的其它化合物的實(shí)例如下所示，其中A是N或CH，且T是其中一個下述基團(tuán)CH2(實(shí)例是IVA-1)、S(O)2(VA-1)、CONH(VIA-1)、COCH2(VIIA-1)、CO2(VIIIA-1)、和S(O)2NH(IXA-1)。在這些實(shí)施方案的其它實(shí)例中，苯基環(huán)可任選如上所述被取代。 本發(fā)明另一個實(shí)施方案涉及定義如下的式IA化合物，其中R1是T-R，R是C3-C6環(huán)烷基環(huán)或可任選被鹵素取代的C1-C6直鏈或支鏈烷基或烯基，且T如上所述。當(dāng)R1是T-R時，優(yōu)選的化合物是其中T為C(＝O)的那些，由式XA代表。下表4表示的是XA化合物的代表性實(shí)例。 表4.XA化合物的實(shí)例(R2是CH3)
對于式I，優(yōu)選的R2包括-CH2OR、-CH2OH、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-CH2N(R)2、和R例如甲基。其中R2不是甲基的化合物的代表性實(shí)例(式IXA)如下表5所示。
IXA(R2不是CH3)表5．化合物IXA的實(shí)例
式I的含XYZ的環(huán)可以是如上所示的異噁唑環(huán)，或者其可以是同分異構(gòu)的異噁唑或“相反的”異噁唑(IB)。在該實(shí)施方案中，Q優(yōu)選為嘧啶或吡啶環(huán)，其中A是N或CH，或者Q是吡唑環(huán)，且R2是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)。 IB化合物的實(shí)例如下表6所示。
表6 在本發(fā)明的另一個實(shí)施方案中，含有XYZ的環(huán)是式IC吡唑環(huán) 對于IC化合物，G優(yōu)選為任選取代的芳基。式IC化合物的具體實(shí)例如下表7所示。 表7.IC化合物的實(shí)例
本發(fā)明的其它實(shí)施方案涉及其中含有XYZ的環(huán)是呋喃(ID)或三唑(IE)的化合物。這些實(shí)施方案的實(shí)例如下所示，其中R1是苯基，R2是氫，且A是N或CH。 ID-1(R2＝H) IE-1(R3＝H)ID-2(R2＝CH3) IE-1(R3＝CH3)對于式IB-IE化合物，Ar1和Ar2苯基環(huán)可如上文關(guān)于式IA異噁唑所示任選被取代。
本發(fā)明化合物一般可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的制備類似化合物的方法，例如下述一般反應(yīng)方案和制備實(shí)施例所舉例說明的方法制得。反應(yīng)方案I (a)NCS，cat.py，CHCl3；(b)(CH3CO)2CH2，Et3N，EtOH；(c)DMA-DMF，回流；(d)胍鹽酸鹽，NaOMe，MeOH，回流；(e)PhBr，Pd2dba3，BINAP，NaOtBu，甲苯；(f)RCOCl，py，苯，回流反應(yīng)方案I表示的是制備其中Q是嘧啶環(huán)的異噁唑的方法?？墒褂肗-氯琥珀酰亞胺和催化量的吡啶將苯甲醛肟1轉(zhuǎn)化成α-氯苯甲醛肟2。將2與2，4-戊二酮縮合，獲得了異噁唑3，可用二甲基甲酰胺縮二甲醇處理異噁唑3，以獲得烯胺4。進(jìn)行水后處理，不用純化，可用胍鹽酸鹽將4環(huán)合，以獲得氨基嘧啶5。依據(jù)步驟(e)，在三(二亞芐基丙酮)二鈀存在下，使用適當(dāng)芳基溴可由5獲得式IIA化合物?；蛘撸罁?jù)步驟(f)，可在吡啶/苯溶劑中用適當(dāng)酰氯處理，以獲得式IVA化合物。如果酰氯是Ar2COCl，可以以類似方式獲得式IIIA化合物。反應(yīng)方案II 試劑(a)i.LDA，ii.2-芐氧基-N-甲氧基-N-甲基乙酰胺，-78℃-室溫；(b)Et3N，EtOH，室溫-回流；(c)過硫酸氫鉀；(d)碘三甲基硅烷；(e)PPh3，CBr4；(f)嗎啉，Et3N；(g)4-氨基環(huán)己醇，DMSO，80℃；(h)NaOEt，EtOH；(i)環(huán)己基胺，DMSO，80℃；(j)3∶1三氟乙酸/H2O；100℃。
上述反應(yīng)方案II表示的是制備其中Q是嘧啶環(huán)，且R2被不同基團(tuán)修飾的本發(fā)明異噁唑的方法。反應(yīng)方案III 試劑(a)i.LDA，ii.N-甲氧基-N-甲基乙酰胺，-78℃-室溫；(b)Et3N，EtOH，室溫-回流；(c)N-溴琥珀酰亞胺，AIBN，CCl4，回流；(d)嗎啉，K2CO3，DMF；(e)NaOMe，MeOH；(f)苯胺，Pd2(dba)3，BINAP，NaOtBu，甲苯，80℃；(g)環(huán)己基胺，Pd2(dba)3，BINAP，NaOtBu，甲苯，80℃.
上述反應(yīng)方案III表示的是制備其中Q是吡啶，且R2被不同基團(tuán)修飾的本發(fā)明異噁唑的方法。在反應(yīng)方案II和III中，首先形成異噁唑環(huán)，然后在嘧啶或吡啶環(huán)的2-位上進(jìn)行適當(dāng)?shù)腘HR1取代。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說顯而易見的是，可在形成異噁唑環(huán)之前在嘧啶或吡啶環(huán)的2-位上進(jìn)行適當(dāng)?shù)腘HR1取代。因此，可通過使用具有式XII的中間體進(jìn)行步驟(b)來獲得本發(fā)明異噁唑 其中A是N或CH；R1和R2如上所述；且PG是氫或氮保護(hù)基。氮保護(hù)基是眾所周知的，并包括諸如芐基或CO2R的基團(tuán)，其中R優(yōu)選為烷基、烯丙基或芐基。反應(yīng)方案IV 試劑(a)Et3N，EtOH；(b)DIBAL，甲苯，0℃；(c)CH3MgBr，THF；(d)(COCl)2，DMSO，Et3N，CH2Cl2；(e)DMF-DMA，甲苯，回流；(f)i.硫脲，MeONa，MeOH，ii.吡啶，氯仿，CH3I；(g)m-CPBA，CH2Cl2；(h)R1NH2，DMSO上述反應(yīng)方案IV表示的是制備其中Q是嘧啶環(huán)的本發(fā)明相反異噁唑的合成途徑。反應(yīng)方案V 試劑(a)i.LDA，ii.N-甲氧基-N甲基苯甲酰胺；(b)Cl-C(＝N-OH)CO2Et，EtOH，Et3N，80℃；(c)氫化二異丁基鋁，CH2Cl2，室溫；(d)PPh3，CBr4，CH2Cl2；(e)哌啶，K2CO3，DMF；(f)BINAP，Pd2(dba)3，NaOtBu，環(huán)己基胺，甲苯，80℃。
上述反應(yīng)方案V表示的是制備其中Q是吡啶環(huán)的本發(fā)明相反異噁唑的合成途徑。反應(yīng)方案VI 試劑a)NH2OH/HCl，H2O/EtOH；Na2CO3；(b)NCS，cat.吡啶，CHCl3；(c)CH3COCH2CO2CH3，Et3N，EtOH；(d)i.NaOH，MeOH，H2O；然后，ii.SOCl2，加熱；(e)HO2CCH2CN，n-BuLi，-78-0℃；(f)H2NNH2，EtOH；(g)R-X，二氧六環(huán)。
上述反應(yīng)方案VI表示的是制備其中Q是吡唑環(huán)的本發(fā)明化合物的一般合成方法。 試劑(a)LDA，THF；(b)4-F-C6H4CO2Et；(c)DMF-DMA，甲苯，回流；(d)H2NNH2.H2O，EtOH，回流；(e)R1NH2，封管，140℃。
上述反應(yīng)方案VII表示的是制備其中XYZ環(huán)是吡唑環(huán)的本發(fā)明化合物的一般合成方法。
據(jù)信可用于制備本發(fā)明激酶抑制劑的一些中間體是新的。因此，本發(fā)明一個實(shí)施方案涉及上述化合物XII和式XIII所代表的化合物 其中X-Y是提供異噁唑或相反異噁唑環(huán)的N-O或O-N；A是N或CH；G是R、芳基或取代的芳基；R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)；R2選自氫、-R、-CH2OR、-CH2OH、-CH＝O、-CH2SR、-CH2S(O)2R、-CH2(C＝O)R、-CH2CO2R、-CH2CO2H、-CH2CN、-CH2NHR、-CH2N(R)2、-CH＝N-OR、-CH＝NNHR、-CH＝NN(R)2、-CH＝NNHCOR、-CH＝NNHCO2R、-CH＝NNHSO2R、-芳基、-取代的芳基、-CH2(芳基)、-CH2(取代的芳基)、-CH2NH2、-CH2NHCOR、-CH2NHCONHR、-CH2NHCON(R)2、-CH2NRCOR、-CH2NHCO2R、-CH2CONHR、-CH2CON(R)2、-CH2SO2NH2、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-(雜環(huán)基)、或-(取代的雜環(huán)基)；且R1選自鹵素、NH2、SR、或SO2R。
可在體外、體內(nèi)、或細(xì)胞系中測定本發(fā)明JNK抑制劑的活性。體外測定包括確定抑制該激酶活性或激活的JNK的ATP酶活性的測定。例如參見下述測試實(shí)施例。另外的體外測定可定量測定本發(fā)明抑制劑結(jié)合JNK的能力，并且可如下所述來測定將抑制劑放射標(biāo)記，然后結(jié)合，分離出抑制劑/JNK復(fù)合物，并測定結(jié)合的放射標(biāo)記物的量；或者通過競爭性實(shí)驗來測定，其中是將本發(fā)明新抑制劑與結(jié)合到已知放射配體上的JNK一起培養(yǎng)。根據(jù)要抑制的JNK類型或同種型，可使用任何類型或同種型的JNK。
可將本發(fā)明JNK抑制劑或其可藥用鹽配制成用于施用給動物或人的藥物組合物。包含其量能有效地治療或預(yù)防JNK介導(dǎo)的病癥的JNK抑制劑和可藥用載體的這些藥物組合物是本發(fā)明另一實(shí)施方案。
術(shù)語“JNK介導(dǎo)的病癥”是指已知JNK在其中起作用的任何疾病或其它有害病癥。這樣的病癥包括但不限于炎性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、癌癥、感染性疾病、神經(jīng)變性疾病、變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)中的再灌注/缺血、心臟病發(fā)作、血管生成性疾病、器官缺氧、血管增生、心臟肥大、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、和與前列腺素內(nèi)過氧化酶合酶-2有關(guān)的病癥。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的炎性疾病包括但不限于急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、變態(tài)反應(yīng)、和成人呼吸窘迫綜合征。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的自身免疫性疾病包括但不限于腎小球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、格雷夫斯氏病、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性中性白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、特應(yīng)性皮炎、慢性活動性肝炎、重癥肌無力、多發(fā)性硬化、炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、局限性回腸炎、牛皮癬、或移植物對宿主疾病。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的破壞性骨疾病包括但不限于骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、和多發(fā)性骨髓性骨疾病。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的增殖性疾病包括但不限于急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、轉(zhuǎn)移性黑素瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、多發(fā)性骨髓瘤和HTLV-1介導(dǎo)的腫瘤發(fā)生。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的血管生成疾病包括實(shí)體瘤、眼睛新血管生成、嬰兒血管瘤?？捎帽景l(fā)明化合物治療或預(yù)防的感染性疾病包括但不限于膿毒病、膿毒性休克和志賀氏菌病。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的病毒性疾病包括但不限于急性肝炎感染(包括甲肝、乙肝和丙肝)、HIV感染和CMV視網(wǎng)膜炎。
可用本發(fā)明化合物治療或預(yù)防的神經(jīng)變性疾病包括但不限于阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)、癲癇、癲癇發(fā)作、亨廷頓氏舞蹈病、創(chuàng)傷性腦損傷、缺血和出血性中風(fēng)、腦缺血，或創(chuàng)傷性損傷引起的神經(jīng)變性疾病，包括細(xì)胞凋亡導(dǎo)致的神經(jīng)變性疾病，急性缺氧癥、局部缺血或谷氨酸神經(jīng)毒害。
“JNK引起的病癥”還包括中風(fēng)中的缺血/再灌注、心臟病發(fā)作、心肌缺血、器官缺氧、血管增生、心臟肥大、肝缺血、肝臟疾病、充血性心力衰竭、病理性免疫反應(yīng)例如由T細(xì)胞引起的免疫反應(yīng)、和凝血酶引起的血小板聚集。
此外，本發(fā)明JNK抑制劑還能抑制誘導(dǎo)性促炎性蛋白的表達(dá)。因此，可用本發(fā)明化合物治療的其它“JNK引起的病癥”包括水腫，痛覺缺失，發(fā)熱，和疼痛例如神經(jīng)肌肉疼痛、頭痛、癌癥疼痛、牙疼、和關(guān)節(jié)炎疼痛。
本發(fā)明化合物還可用作Src-類激酶、尤其是Src和Lck的抑制劑。關(guān)于這些激酶的一般評論，參見Thomas和Brugge，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.(1997)13，513；Lawrence和Niu，Pharmacol.Ther.(1998)77，81；Tatosyan和Mizenina，Biochemistry(Moscow)(2000)65，49。因此，這些化合物可用于治療已知由一種或多種Src-類激酶引起的疾病或病癥。這樣的疾病或病癥包括高鈣血、再狹窄、血鈣過多、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、骨轉(zhuǎn)移的癥狀治療、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、多發(fā)性硬化、牛皮癬、狼瘡、移植物對宿主疾病、T細(xì)胞介導(dǎo)的高敏感性疾病、Hashimoto氏甲狀腺炎、急性熱病性多神經(jīng)炎、慢性堵塞性肺病、接觸性皮炎、癌癥、佩吉特氏病、哮喘、缺血或再灌注損傷、變應(yīng)性疾病、特應(yīng)性皮炎、和變應(yīng)性鼻炎。受Src活動影響的疾病特別包括高鈣血、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、癌癥、骨轉(zhuǎn)移的癥狀治療和佩吉特氏病。受Lck活動影響的疾病特別包括自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、和白血病。其中Ar2是芳基的式II-A和I-B化合物可尤其用于治療與Src類激酶，特別是Src或Lck有關(guān)的疾病。
除了本發(fā)明化合物以外，在組合物中也可以使用本發(fā)明化合物的可藥用衍生物或前藥來治療或預(yù)防上述病癥。
“可藥用衍生物或前藥”是指具有下述特征的本發(fā)明化合物的任何可藥用鹽、酯、酯的鹽或其它衍生物當(dāng)施用給接受者時，其能直接或間接提供本發(fā)明化合物或其具有抑制活性的代謝物或殘余物。特別合適的衍生物或前藥是這樣的當(dāng)施用給哺乳動物時，其能提高本發(fā)明化合物的生物利用度(例如通過使口服施用的化合物更易于吸收到血液中)，或者促進(jìn)母化合物遞送到生物隔室(例如腦或淋巴系統(tǒng))中(相對于母化合物)。
本發(fā)明化合物的可藥用前藥包括但不限于，酯、氨基酸酯、磷酸酯、金屬鹽和磺酸酯。
本發(fā)明化合物的可藥用鹽包括由可藥用無機(jī)或有機(jī)酸和堿制得的那些。合適的酸加成鹽的實(shí)例包括乙酸鹽、己二酸鹽、藻酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。其它酸例如草酸，雖然自身不是可藥用的，但是可用于制備在本發(fā)明化合物及其可藥用酸加成鹽的制備過程中用作中間體的鹽。
由適當(dāng)堿制得的鹽包括堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)、堿土金屬鹽(例如鎂鹽)、銨鹽和N+(C1-4烷基)4鹽。本發(fā)明還涉及將本發(fā)明化合物的任何含氮堿性基團(tuán)季銨化。水或油溶性或可分散的產(chǎn)品可通過這樣的季銨化獲得。
可在這些藥物組合物中使用的可藥用載體包括但不限于離子交換劑，礬土，硬脂酸鋁，卵磷脂，血清蛋白例如人血清白蛋白，緩沖物質(zhì)例如磷酸鹽，甘氨酸，山梨酸，山梨酸鉀，飽和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，鹽或電解質(zhì)例如魚精蛋白硫酸鹽、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽，膠態(tài)二氧化硅，三硅酸鎂，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素基物質(zhì)，聚乙二醇，羧甲基纖維素鈉，聚丙烯酸鹽(酯)，蠟，聚乙烯聚氧化丙烯嵌段共聚物，聚乙二醇和羊毛脂。
本發(fā)明組合物可口服給藥、非胃腸道給藥、通過吸入噴霧劑給藥、局部給藥、直腸給藥、鼻給藥、頰給藥、陰道給藥或經(jīng)由植入的貯藥庫給藥。本文所用術(shù)語“非胃腸道給藥”包括皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、肝內(nèi)、傷口內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。本發(fā)明組合物優(yōu)選口服、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥。
無菌注射形式的本發(fā)明組合物可以是水或油懸浮液?？梢罁?jù)本領(lǐng)域已知的技術(shù)使用合適的分散劑或潤濕劑和懸浮劑來配制這些懸浮液。無菌注射制劑還可以是在無毒非胃腸道可接受稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液或懸浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。在可接受的載體和溶劑當(dāng)中，可使用水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，通常是使用無菌不揮發(fā)油來作為溶劑或懸浮劑。對于此，可使用任何溫和的不揮發(fā)油，包括合成的甘油一酯或甘油二酯。脂肪酸，例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備注射劑，例如天然可藥用油如橄欖油或蓖麻油，尤其是其聚氧乙基化變型。這些油溶液或懸浮液還可以含有長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素，或者通常用于配制可藥用劑型包括乳液和懸浮液的類似分散劑。為了進(jìn)行配制，還可以使用其它常用于制備可藥用固體、液體、或其它劑型的表面活性劑例如吐溫、司盤和其它乳化劑或生物利用度促進(jìn)劑。
本發(fā)明組合物可在任何口服劑型中口服施用，這樣的口服劑型包括但不限于膠囊、片劑、水懸浮液或溶液。對于口服片劑，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉。通常還加入潤滑劑例如硬脂酸鎂。對于以膠囊形式口服施用，適用的稀釋劑包括乳糖和干燥玉米淀粉。當(dāng)需要水懸浮液來口服使用時，可將活性組分與乳化劑和懸浮劑混合。如果需要的話，還可以加入一些甜味劑、矯味劑或著色劑。
或者，本發(fā)明藥物組合物可以以直腸給藥用栓劑施用。這樣的栓劑可通過將活性劑與具有下述性質(zhì)的適當(dāng)非刺激性賦形劑混合來制得其在室溫為固體，但是在直腸溫度為液體，因此其在直腸中熔化以釋放藥物。這樣的材料包括椰子油、蜂蠟和聚乙二醇。
本發(fā)明藥物組合物還可以局部施用，尤其是當(dāng)治療目標(biāo)包括易于通過局部施用來實(shí)現(xiàn)治療的區(qū)域或器官時更是如此，包括眼睛、皮膚、或下部腸道的疾病。對于每一這些區(qū)域或器官，合適的局部施用制劑易于制得。
局部施用到下部腸道可通過使用直腸栓劑(見上文)或合適的灌腸劑來實(shí)現(xiàn)。還可以使用局部透皮貼劑。
為了局部施用，可在含有懸浮或溶解在一種或多種載體中的活性組分的適當(dāng)軟膏中配制藥物組合物。用于局部施用本發(fā)明化合物的載體包括但不限于礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水?；蛘?，可在含有懸浮或溶解在一種或多種可藥用載體中的活性組分的適當(dāng)洗劑或霜劑中配制藥物組合物。合適的載體包括但不限于礦物油、脫水山梨醇一硬脂酸酯、吐溫60、鯨蠟基酯蠟、鯨蠟醇、2-辛基十二烷醇、芐基醇和水。
對于眼用，可在等滲、pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中配制成微?；瘧腋∫海騼?yōu)選在等滲、pH調(diào)節(jié)的無菌鹽水中配制成溶液，所述制劑中加入或不加入防腐劑例如苯扎氯銨?；蛘?，對于眼用，可在膏劑例如凡士林中配制藥物組合物。
本發(fā)明藥物組合物還可以通過鼻氣霧劑或吸入來施用。這樣的組合物是依據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的技術(shù)，使用芐基醇或其它合適的防腐劑、用于提高生物利用度的吸收促進(jìn)劑、碳氟化合物、和/或其它常用的穩(wěn)定劑或分散劑而制得的，并且可制成在鹽水中的溶液。
可以與載體混合以制得單位劑型的JNK抑制劑的量將取決于所治療的宿主、特定的給藥方式。優(yōu)選這樣配制組合物，即可以給接受這些組合物的患者施用約0.01-100mg/kg體重/天抑制劑的劑量。
應(yīng)當(dāng)理解，對于任何特定患者，具體劑量和治療方案將取決于多種因素，包括所用的特定化合物的活性、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、排泄速度、藥物合并用藥、和臨床醫(yī)師的判斷以及所治療的特定疾病的嚴(yán)重程度。抑制劑的量還取決于組合物中的特定化合物。
依據(jù)另一個實(shí)施方案，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防JNK介導(dǎo)的病癥的方法，包括患者施用其中上述藥物組合物的步驟。本文所用術(shù)語“患者”是指動物、優(yōu)選人。
所述方法優(yōu)選用于治療或預(yù)防炎性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、感染性疾病、變性性疾病、神經(jīng)變性疾病、變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)中的再灌注/缺血、心臟病發(fā)作、血管生成性疾病、器官缺氧、血管增生、心臟肥大、和凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、或任何上述特定疾病或病癥。
根據(jù)欲治療或預(yù)防的特定JNK介導(dǎo)的病癥，可以聯(lián)合施用通常用于治療或預(yù)防所述病癥的其它藥物和本發(fā)明抑制劑。例如，可以將化療劑或其它抗增殖劑與本發(fā)明INK抑制劑聯(lián)合施用來治療增殖性疾病。
所述其它治療劑可以與含有本發(fā)明JNK抑制劑的組合物分別施用，或者作為多劑量給藥方案的一部分來施用。或者，所述其它治療劑可以是與本發(fā)明JNK抑制劑在單一組合物中混合的單一劑型的一部分。
提供下述實(shí)施例來更充分地理解本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例僅是為了舉例說明，而不應(yīng)理解為以任何方式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1苯甲醛肟.
向溶于乙醇(50mL)的苯甲醛(10.0g，94mmol)中加入溶于水(50mL)中的羥胺鹽酸鹽(6.5g，94mmol)，然后加入碳酸鈉水溶液(50mL)。將該反應(yīng)溶液攪拌2小時。倒入鹽水中，并用乙醚萃取2次。用硫酸鎂將合并的萃取液干燥。蒸發(fā)，獲得了苯甲醛肟(11.0g，收率為96.5％)，為無色油狀物。1H NMR(CDCl3)δ7.40-7.50(m，3H)，7.60-7.70(m，2H)，8.22(s，1H)，9.1(bs，1H)。
實(shí)施例2α-氯苯甲醛肟(苯甲酰氯肟)。
在室溫，向溶于氯仿的苯甲醛肟(12.2g，0.1mol)中加入催化量的吡啶，然后加入N-氯琥珀酰亞胺(13.35g，0.1mol)。將該反應(yīng)混合物攪拌1.5小時，然后加入飽和氯化鈉水溶液。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)層(2次)，并用硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑，獲得了13.85gα-氯苯甲醛肟。收率為87％。
實(shí)施例31-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-乙酮(化合物3)。
在室溫向戊-2，4-二酮(13.23g，0.132mol)和三乙胺(13.35g，0.132mol)在乙醇內(nèi)的溶液中加入α-氯苯甲醛肟(13.70g，0.088mol)。將該反應(yīng)混合物在室溫攪拌過夜。向該反應(yīng)中加入乙酸乙酯和飽和氯化鈉水溶液。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相(2次)，用硫酸鎂干燥，減壓除去有機(jī)溶劑，獲得了17.7g本標(biāo)題化合物。收率為100％。
實(shí)施例44-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-嘧啶-2-基胺(化合物5)。
將上述化合物3(17.7g，0.088mol)與二甲基甲酰胺縮二甲醇(DMFDMA)(160g，0.132mol)回流過夜。向該反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和飽和氯化鈉水溶液。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相(2次)，并干燥(MgSO4)。減壓除去有機(jī)溶劑，并將粗產(chǎn)物溶解在200mL甲醇中。向該溶液中加入在100mL甲醇中的胍鹽酸鹽(10.5g，0.110mol)，然后加入在100mL甲醇中的甲醇鈉(6.17g，0.114mol)。將該反應(yīng)混合物回流過夜，然后冷卻至室溫。將反應(yīng)溶劑濃縮至總共大約100mL體積，并過濾出沉淀產(chǎn)物。濾餅獲得了本標(biāo)題化合物(9.3g)。兩個步驟的總收率為46％。
實(shí)施例5[4-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-嘧啶-2-基]-苯基-胺(化合物IIA)。
向50mg(0.2mmol)4-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-嘧啶-2-基胺在1mL甲苯內(nèi)的溶液中依次加入63μL(0.6mmol)溴苯、10mg三(二亞芐基丙酮)二鈀、10mg BINAP和39mg(0.4mmol)叔丁醇鈉。將該混合物加熱回流16小時，用乙酸乙酯稀釋，過濾，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)并真空濃縮。通過硅膠柱色譜純化殘余物，用乙酸乙酯-己烷1∶3洗脫，獲得了24mg(36％)本標(biāo)題化合物，為黃色油狀物。
實(shí)施例65-甲基-3-苯基-異噁唑-4-甲酸甲酯。
在5℃，將新制備的苯甲酰氯肟的乙醇溶液(14.0g，90mmol)(100mL)滴加到乙酰乙酸甲酯(11.18g，96mmol)和三乙胺(13mL，103mmol)在乙醇(50ml)內(nèi)的溶液中。在室溫攪拌12小時后，用二氯甲烷將該溶液稀釋，用1N HCl、飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，獲得了琥珀色油狀物。通過快速色譜(硅膠)純化，用10％乙酸乙酯在己烷中的混合物洗脫，獲得了本標(biāo)題化合物(7.56g，39％收率)，為白色固體MS m/z MH+218(100)；1H NMR(CDCl3)δ2.78(s，3H)，3.81(s，3H)，7.45-7.55(m，3H)，7.65-7.69(m，2H)。
實(shí)施例75-甲基-3-苯基-異噁唑-4-甲酸。
向在甲醇(12mL)內(nèi)的5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-甲酸甲酯(0.853g，3.69mmol)中加入2N NaOH(8mL)，將該反應(yīng)溶液在室溫攪拌60小時。用水將該溶液稀釋，并用乙酸乙酯萃取2次。用鹽水洗滌合并的萃取液，用硫酸鎂干燥，并濃縮。重結(jié)晶(己烷/乙酸乙酯)，獲得了白色固體(0.540g，收率為72％)。
實(shí)施例85-甲基-3-苯基-異噁唑-4-甲酰氯。
在70℃，將5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-甲酸(0.54g，2.56mmol)用SOCl2(2mL)處理1小時。真空濃縮，獲得了黃色油狀物，不用純化直接使用。
實(shí)施例93-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-3-氧代-丙腈。
在-78℃下，向含有-個1，1’-聯(lián)吡啶晶體的氰基乙酸(0.43g，5.12mmol)的THF溶液中加入正丁基鋰(6.4mL，10.24mmol)。將溫度溫?zé)嶂?℃，獲得了粉紅色溶液。冷卻至-78℃以后，滴加在THF(5mL)中的5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-甲酰氯(0.567g，2.56mmol)。將該混合物在-78℃攪拌1小時，再在室溫攪拌1小時。用1N HCl(13mL)中止該反應(yīng)，并用二氯甲烷萃取2次。將合并的萃取液用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，獲得了本標(biāo)題化合物(0.391g，收率為67％)。
實(shí)施例10N-[5-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-2H-吡唑-3-基]-苯甲酰胺。
將在乙醇(3mL)中的3-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-3-氧代-丙腈(0.391g，1.73mmol)用肼(0.168mL，3.46mmol)處理，并加熱至回流。真空蒸發(fā)，獲得了5-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-2H-吡唑-3-基胺，不用純化直接使用。向在二氧六環(huán)內(nèi)的所得胺(0.039g，0.16mmol)中加入三乙胺，然后加入芐基氯(0.019mL，0.16mmol)。將該溶液在10℃攪拌1小時，并在室溫攪拌2小時。用水將該溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取，用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，并真空濃縮。通過HPLC純化，獲得了1.4mg本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例111-芐氧基-3-(2-甲基硫烷基嘧啶-4-基)-丙-2-酮(化合物7)。
在-78℃，用10分鐘向4-甲基-2-甲基硫烷基嘧啶(9.60g，68.5mmol)在THF(150mL)內(nèi)的攪拌溶液中滴加LDA(2.0M THF/己烷，41.1mL，82.2mmol)。將該溶液在-78℃攪拌15分鐘，溫?zé)嶂?℃，保持10分鐘，再冷卻至-78℃，保持15分鐘。然后用45分鐘滴加3-芐氧基-N甲基-N-甲氧基乙酰胺(17.2g，82.2mmol)在THF(30mL)中的溶液。在-78℃保持15分鐘后，將該溶液溫?zé)嶂?℃，并保持30分鐘。用HCl(1M，85mL)中止該反應(yīng)，并攪拌1小時。將該溶液倒入飽和碳酸氫鈉(300mL)中，用乙醚萃取(3×200mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，20％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(13.75g，47.7mmol，收率為69％)。
實(shí)施例124-[5-芐氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-2-甲基硫烷基-嘧啶(化合物8)。
用30分鐘向上述化合物7(13.75g，47.7mmol)和Et3N(14.6mL，105mmol)在EtOH(200mL)內(nèi)的攪拌溶液中加入4-氟苯甲酰氯肟(56mmol)在EtOH中的溶液(50mL)。將該溶液在25℃攪拌15分鐘。然后加熱回流90分鐘。將該溶液冷卻至25℃。再加入Et3N(7.3mL，52mmol)，然后用1小時滴加4-氟苯甲酰氯肟(38.5mmol)在EtOH中的溶液(50mL)。將該溶液回流1小時，這時TLC表明所有異噁唑原料都已消耗完。將溶液冷卻至25℃并濃縮。將粗產(chǎn)物置于二氯甲烷(50mL)中，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)中，用二氯甲烷萃取(3×150mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，20％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(14.2g，34.8mmol，60％)，其純度(＞85％)足以進(jìn)行隨后的反應(yīng)。
實(shí)施例134-[5-芐氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-2-甲磺酰基-嘧啶(化合物9)。
在25℃，用10分鐘向上述化合物8(2.00g，4.91mmol)在MeOH(50mL)內(nèi)的攪拌溶液中滴加過硫酸氫鉀(7.07g，11.5mmol)在H2O(50mL)中的溶液。20小時后，將該溶液倒入H2O(75mL)中，用二氯甲烷萃取(3×75mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，45％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(1.60g，3.64mmol，74％)。
實(shí)施例14[3-(4-氟-苯基)-4-(2-甲磺?；?嘧啶-4-基)-異噁唑-5-基]-甲醇(化合物10)。
在0℃，攪拌下向上述化合物9(750mg，1.70mmol)在CHCl3(8.5mL)的溶液中加入三甲基甲硅烷基碘(0.73mL，5.1mmol)。將該反應(yīng)在0℃攪拌30分鐘。然后再加入三甲基甲硅烷基碘(0.48mL，3.4mmol)。40分鐘后，將該溶液溫?zé)嶂?5℃，并繼續(xù)攪拌22小時。用H2O-MeOH(2mL)中止反應(yīng)，并攪拌1小時。將該溶液倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)中，用EtOAc萃取(3×30mL)，并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，80％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(530mg，1.52mmol，89％)。
實(shí)施例154-[5-(溴甲基)-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-2-甲磺酰基-嘧啶(化合物11)。
在25℃，向上述化合物10(250mg，0.716mmol)和CBr4(473mg，1.43mmol)在二氯甲烷(14mL)內(nèi)的攪拌下的溶液中加入PPh3(244mg，0.93mmol)。10分鐘后，再加入PPh3(50mg，0.19mmol)以使反應(yīng)進(jìn)行完全。15分鐘后，將該溶液濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，50％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(265mg，0.643mmol，90％)。
實(shí)施例164-[3-(4-氟-苯基)-4-(2-甲磺酰基-嘧啶-4-基)-異噁唑-5-基甲基]-嗎啉(化合物12)。
在25℃，向上述化合物11(41mg，0.099mmol)和Et3N(20μL，0.15mmol)在CH3CN(0.5mL)內(nèi)的溶液中加入嗎啉(9.6μL，0.11mmol)。15分鐘后，將該溶液濃縮。通過制備薄層色譜(SiO2，EtOAc)純化，獲得了本標(biāo)題化合物(29mg，0.069mmol，70％)。
實(shí)施例174-{4-[3-(4-氟-苯基)-5-(嗎啉-4-基甲基)異噁唑-4-基]嘧啶-2-基氨基}環(huán)己醇(化合物XIA-42)。
將化合物13(29mg，0.069mmol)和反式-4-氨基環(huán)己醇(24mg，0.21mmol)在DMSO(0.21mL)中的攪拌溶液在80℃加熱4小時。將該溶液倒入半飽和碳酸氫鈉水溶液(5mL)中，用EtOAc萃取(5×5mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，10％MeOH-CH2Cl2)，將獲得的產(chǎn)物通過離子交換色譜(SCX樹脂，洗脫劑0.25M NH3在50％MeOH-CH2Cl2中的溶液)，獲得了本標(biāo)題化合物(27mg，0.057mmol，83％)。
實(shí)施例184-[5-乙氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-2-甲基硫烷基-嘧啶(化合物13)。
在25℃，向上述化合物8(103mg，0.27mmol)在EtOH(2.0mL)內(nèi)的攪拌溶液中加入NaOEt(21％w/v EtOH，0.40mL，1.23mmol)。2小時后，用飽和氯化銨水溶液(3mL)中止反應(yīng)、CH2Cl2(3×5mL)干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，25％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(58mg，0.17mmol，62％)。
實(shí)施例194-[5-乙氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-2-甲磺?；?嘧啶(化合物14)。
該化合物是這樣制得的按照類似于在實(shí)施例13中描述的方法，但是使用化合物13(58mg，0.17mmol)作為原料，獲得了本標(biāo)題化合物(64mg，0.17mmol，100％)，不用純化或鑒定直接用于隨后的反應(yīng)。
實(shí)施例20環(huán)己基-{4-[5-乙氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-嘧啶-2-基}胺(化合物XIA43)該化合物是這樣制得的按照類似于實(shí)施例17中描述的方法，使用化合物14(64mg，0.17mmol)和環(huán)己基胺(58μL，0.51mmol)作為原料，獲得了本標(biāo)題化合物，為粗產(chǎn)物。HPLC純化(C-18，梯度洗脫，10-90％H2O-CH3CN)后，萃取到EtOAc中，用HCl-Et2O(1M，1mL)將該粗產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成鹽酸鹽。真空除去溶劑，獲得了本標(biāo)題化合物，為鹽酸鹽(55mg，0.13mmol，從化合物13開始兩步的收率為76％)。
實(shí)施例21環(huán)己基-{4-[5-芐氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-嘧啶-2-基}胺(化合物XIA-44)該化合物是這樣制得的按照類似于實(shí)施例17中描述的方法，使用上述化合物9(500mg，1.14mmol)和環(huán)己基胺(340μL，3.42mmol)作為原料。通過快速色譜純化(SiO2，30％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(488mg，1.06mmol，93％)。
實(shí)施例22[4-(2-環(huán)己基氨基-嘧啶-4-基)-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-5-基]甲醇(化合物XIA-45)
將化合物XIA-44(461mg，1.01mmol)在TFA-H2O(3∶1，8mL)內(nèi)的攪拌溶液在80℃加熱2小時。將該溶液濃縮，把粗的混合物置于二氯甲烷(25mL)中，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)中，用二氯甲烷萃取(3×25mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。TLC(50％EtOAc-己烷)表明消耗了約50％化合物XIA-44原料。將該粗的混合物溶解在TFA-H2O(3∶1，8mL)中，將所得溶液在100℃加熱22小時。將該溶液濃縮，把粗的混合物置于二氯甲烷(25mL)中，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)中，用二氯甲烷萃取(3℃25mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，40％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(313mg，0.85mmol，84％)。
實(shí)施例231-(2-溴-吡啶-4-基)-丙-2-酮(化合物16)。
在-78℃，用10分鐘向2-溴-4-甲基吡啶(化合物15)(20.20g，117.4mmol)在THF(250mL)內(nèi)的攪拌溶液中滴加LDA(2.0M THF/己烷，70.5mL，141mmol)。將該溶液在-78℃攪拌35分鐘。然后用10分鐘滴加N-甲氧基-N-甲基乙酰胺(14.5g，141mmol)在THF(30mL)中的溶液。在-78℃反應(yīng)15分鐘后，將該溶液溫?zé)嶂?℃，并攪拌1小時。將該溶液倒入H2O(250mL)中，用乙醚(3×250mL)萃取，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過快速色譜純化(SiO2，20％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(16.75g，78.2mmol，67％)。
實(shí)施例242-溴-4-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-吡啶(化合物17a)。
用90分鐘向化合物16(1.71g，8.0mmol)和Et3N(2.23mL，16mmol)在EtOH(16mL)內(nèi)的攪拌溶液中加入苯甲酰氯肟(1.62g，10.4mmol)在EtOH(16mL)中的溶液。將該溶液在25℃攪拌90分鐘。然后將該溶液加熱回流24小時。將該溶液冷卻至25℃，并濃縮。將粗產(chǎn)物置于二氯甲烷(50mL)中，倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)中，用二氯甲烷萃取(3×50mL)，干燥(Na2SO4)，并過濾。通過快速色譜純化(SiO2，20％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(1.32g，4.19mmol，52％)。2-溴-4-[3-(4-氟-苯基)-5-甲基-異噁唑-4-基]-吡啶(化合物17b)導(dǎo)按照類似方法用4-氟苯甲酰氯肟制得的。
實(shí)施例252-溴-4-(5-溴甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-吡啶(化合物18a)。
將上述化合物17a(404mg，1.28mmol)、N-溴琥珀酰亞胺(239mg，1.35mmol)和AIBN(11mg，0.064mmol)在CCl4(3mL)中的攪拌溶液加熱至回流，并在300W燈下放置18小時。用二氯甲烷(15mL)將該溶液稀釋，用水(3×10mL)萃取、鹽水(40mL)洗滌，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮，通過快速色譜純化(SiO2，20％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(287mg，0.728mmol，57％)。2-溴-4-[5-溴甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基]-吡啶(化合物18b)是按照類似方法用化合物17b作為原料制得的。
實(shí)施例262-溴-4-(5-甲氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基)-吡啶(化合物19b)。
向上述化合物18b(200mg，0.485mmol)中加入NaOMe(0.5M MeOH溶液，2.0mL，1.0mmol)。將該溶液在25℃攪拌90分鐘。然后將該溶液倒入鹽水中，用EtOAc萃取(4×15mL)，干燥(MgSO4)，經(jīng)由硅藻土塞過濾。將溶劑蒸發(fā)，獲得了本標(biāo)題化合物(175mg，0.482mmol，99％)。
實(shí)施例274-(4-(2-溴-吡啶-4-基)-3-苯基-異噁唑-5-基甲基)-嗎啉(化合物20a)。
將上述化合物18a(484mg，1.22mmol)、嗎啉(0.45mL，5.1mmol)和碳酸鉀(340mg，2.45mmol)在無水DMF(2mL)中的攪拌溶液在40℃溫?zé)?8小時。將該溶液倒入鹽水(10ml)中，用二氯甲烷(3×15mL)萃取，干燥(MgSO4)，并過濾。通過快速色譜純化(SiO2，50％EtOAc-己烷)，獲得了本標(biāo)題化合物(461mg，1.15mmol，94％)。
實(shí)施例28[4-(5-甲基-3-苯基-異噁唑-4-基)-吡啶-2-基]苯基-胺(化合物IIA-52)。
在25℃，向化合物17a(20mg，0.063mmol)、苯胺(7.0μL，0.076mmol)和BINAP(5.6mg，0.009mmol)在甲苯(0.6mL)內(nèi)的攪拌溶液中加入Pd2(dba)3(2.7mg，0.003mmol)，然后加入NaOtBu(9.1mg，0.095mmol)。將該溶液在80℃加熱2小時。將該溶液冷卻，過濾并濃縮。通過制備薄層色譜純化(SiO2，5％EtOAc/CH2Cl2)，獲得了本標(biāo)題化合物(12.6mg，0.0385mmol，61％)。
實(shí)施例29環(huán)己基-[4-(5-甲氧基甲基-3-(4-氟-苯基)-異噁唑-4-基)-吡啶-2-基]-胺(化合物XIA29)。
在25℃，向上述化合物19b(20mg，0.050mmol)、環(huán)己基胺(11μL，0.13mmol)、和BINAP(4.7mg，0.0075mmol)在甲苯(0.4mL)內(nèi)的攪拌溶液中加入Pd2(dba)3(2.3mg，0.0025mmol)，然后加入NaOtBu(12mg，0.13mmol)。將該溶液在80℃加熱15小時。將該溶液冷卻，倒入H2O(5mL)中，用EtOAc萃取(4×5mL)，干燥(MgSO4)，過濾并濃縮。通過HPLC純化(梯度洗脫，90-10％H2O-CH3CN)，獲得了本標(biāo)題化合物(9.1mg，0.022mmol，44％)。
實(shí)施例303-甲基-5-苯基-異噁唑-4-甲腈(化合物24)。
向苯甲酰基乙腈的乙醇溶液中加入1.5當(dāng)量三乙胺，然后加入1.5當(dāng)量乙酰氯肟，將該反應(yīng)混合物在室溫攪拌4小時。向該反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和鹽水。用硫酸鎂將有機(jī)相干燥，減壓除去溶劑。色譜純化后，以72％的收率獲得了本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例313-甲基-5-苯基-異噁唑-4-甲醛(化合物25)。
在0℃，向上述化合物24的甲苯溶液中加入1.2當(dāng)量DIBAL-H/HAX。將該反應(yīng)在0℃攪拌3小時，溫?zé)嶂潦覝?，并在室溫攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物緩慢地轉(zhuǎn)移到1N HCl中，然后用乙酸乙酯萃取。用硫酸鎂將有機(jī)相干燥，并減壓濃縮。通過色譜法純化粗產(chǎn)物，以57％的收率獲得了本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例321-(3-甲基-5-苯基-異噁唑-4-基)-乙醇(化合物26)。
在室溫，向上述化合物25的THF溶液中緩慢地加入1.4當(dāng)量溴化甲基鎂。將該反應(yīng)混合物在室溫攪拌1小時。向該反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和1N HCl。用鹽水洗滌有機(jī)相，并用硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑，以96％的收率獲得了粗產(chǎn)物，不用純化直接用于下一步驟。
實(shí)施例331-(3-甲基-5-苯基-異噁唑-4-基)-乙酮(化合物27)。
在-78℃，向草酰氯的二氯甲烷溶液中加入DMSO，將該混合物在-78℃攪拌15分鐘，然后加入上述化合物26的二氯甲烷溶液。將該反應(yīng)混合物在-78℃攪拌30分鐘，加入三乙胺，然后將該反應(yīng)混合物逐漸溫?zé)嶂潦覝亍Ｏ蛟摲磻?yīng)混合物中加入乙酸乙酯和鹽水。用硫酸鎂將有機(jī)相干燥，減壓除去溶劑。以94％的收率獲得了粗產(chǎn)物，不用純化直接用于下一步驟。
實(shí)施例343-二甲基氨基-1-(3-甲基-5-苯基-異噁唑-4-基)-丙烯酮(化合物28)。
將上述化合物27與過量DMF-DMA的甲苯溶液回流20小時。向該反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和鹽水，用硫酸鎂將有機(jī)相干燥，減壓除去溶劑。所得粗產(chǎn)物不用純化直接用于下一步驟。
實(shí)施例354-(3-甲基-5-苯基-異噁唑-4-基)-2-甲基硫烷基-嘧啶(化合物29)。
將上述化合物28、2當(dāng)量硫脲和1.5當(dāng)量甲醇鈉的甲醇溶液回流2天。向該反應(yīng)混合物中加入乙酸乙酯和1N HCl，用鹽水洗滌有機(jī)相，用硫酸鎂干燥，并減壓除去溶劑。將粗產(chǎn)物溶解在氯仿中，向其中加入1.5當(dāng)量碘甲烷和1.5當(dāng)量吡啶。將該反應(yīng)混合物在室溫攪拌2小時。向該反應(yīng)混合物中加入二氯甲烷和1N HCl，用鹽水洗滌有機(jī)相，并用硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑，通過色譜法純化粗產(chǎn)物，獲得了本標(biāo)題化合物。收率為32％。
實(shí)施例364-(3-甲基-5-苯基-異噁唑-4-基)-2-甲磺酰基-嘧啶(化合物30)。
向上述化合物29的二氯甲烷溶液中加入2當(dāng)量m-CPBA，并將該反應(yīng)在室溫攪拌過夜。用1N NaOH將該反應(yīng)混合物洗滌2次，用鹽水洗滌2次，并用硫酸鎂干燥。減壓除去溶劑，通過色譜法純化粗產(chǎn)物，以79％的收率獲得了本標(biāo)題化合物。
實(shí)施例37化合物IB。
將上述化合物30和3當(dāng)量所需胺的DMSO溶液在80℃加熱4小時。分析HPLC表明反應(yīng)完全后，通過反相HPLC純化粗產(chǎn)物，獲得了所需的化合物IB。收率一般在80％以上。
下述實(shí)施例描述的是，如何將本發(fā)明化合物作為蛋白激酶抑制劑、尤其是c-Jun-N-末端激酶抑制劑來進(jìn)行測試。
實(shí)施例38JNK3蛋白的克隆、表達(dá)和純化用公開的JNK3α1 cDNA作為查詢關(guān)鍵詞，對EST數(shù)據(jù)庫進(jìn)行BLAST檢索以確定含有人JNK3α1完整編碼序列的EST克隆(#632588)。使用采用pfu聚合酶(Strategene)的聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)將限制位點(diǎn)引入到cDNA中，以在NcoI和BamHI位點(diǎn)克隆至pET-15B表達(dá)載體。在大腸桿菌中表達(dá)蛋白。由于表達(dá)的全長蛋白(Met 1-Gln 422)的溶解性不佳，制備在40位Ser殘基(Ser 40)開始的N-末端截短蛋白。該截短相當(dāng)于JNK1和JNK2蛋白的Ser 2，并且之前是甲硫氨酸(起始)和甘氨酸殘基。加入甘氨酸殘基以引入用于克隆到表達(dá)載體內(nèi)的NcoI位點(diǎn)。此外，通過PCR進(jìn)行系統(tǒng)C-末端截短以確定生成衍射質(zhì)量晶體的構(gòu)建物。一個這樣的構(gòu)建物編碼JNK3α1的氨基酸殘基Ser40-Glu402，并且在Met和Gly后面。
該構(gòu)建物是使用下述脫氧寡核苷酸作為引物通過PCR制得的5’GCTCTAGAGCTCCATGGGCAGCAAAAGCAAAGTTGACAA 3’(具有下劃線表示的起始密碼子的正向引物)(SEQ ID NO1)和5’TAGCGGATCCTCATTCTGAATTCATTACTTCCTTGTA 3’(具有下劃線表示的終止密碼子的反向引物)(SEQ ID NO2)并通過DNA測序來證實(shí)。
對照實(shí)驗表明，在體外當(dāng)用上游激酶MKK7激活時，截短的JNK3蛋白具有對髓鞘堿性蛋白的等價激酶活性。
用JNK3表達(dá)構(gòu)建物轉(zhuǎn)化大腸桿菌菌株BL21(DE3)(Novagen)，并在補(bǔ)充有100μg/ml羧芐青霉素的LB中在搖瓶內(nèi)于30℃生長，直至細(xì)胞處于對數(shù)期(OD600～0.8)。加入終濃度為0.8mM的異丙基硫代-β-D-半乳糖苷酶(IPTG)，2小時后，通過離心收集細(xì)胞。
將含有JNK3的大腸桿菌細(xì)胞糊狀物重懸在10體積/g裂解緩沖液(50mM HEPES，pH7.2，含有10％甘油(v/v)，100mM NaCl，2mM DTT，0.1mM PMSF，2μg/ml胃蛋白酶抑制劑，1μg/ml E-64和1μg/ml亮抑蛋白酶肽)中。使用微流化床將細(xì)胞在冰上裂解，并以100,000×g于4℃離心30分鐘。將該100,000×g上清液用緩沖液A(20mM HEPES，pH7.0，10％甘油(v/v)，2mM DTT)進(jìn)行1∶5稀釋，并通過SP-Sepharose(Pharmacia)陽離子交換色譜(柱尺寸2.6×20cm)于4℃純化。用體積是柱5倍的緩沖液A洗滌樹脂，然后用體積是柱5倍的含有50mM NaCl的緩沖液A洗脫。用體積是柱7.5倍的線性梯度的50-300mM NaCl將結(jié)合的JNK3洗脫下來。用150-200mM NaCl洗脫JNK3。
實(shí)施例39激活JNK3在50mM HEPES緩沖液中將5mg JNK3稀釋至0.5mg/ml，其中該緩沖液pH為7.5，并含有100mM NaCl，5mM DTT，20mM MgCl2和1mM ATP。加入下述摩爾比的GST-MKK7(DD)1∶2.5 GST-MKK7JNK3。在25℃培養(yǎng)30分鐘后，通過在Centriprep-30(Amicon，Beverly，MA)中超濾將該反應(yīng)混合物濃縮5倍，稀釋至10ml，并加入1mM ATP。該操作重復(fù)3次以除去ADP和補(bǔ)充ATP。ATP的終濃度為5mM，將該混合物在4℃孵育過夜。
通過透析或超濾將JNK3/GST-MKK7(DD)反應(yīng)混合物交換到50mMHEPES緩沖液(pH7.5，含有5mM DTT和5％甘油(w/v))中。將該反應(yīng)混合物調(diào)節(jié)至1.1M磷酸鉀，pH7.5，并使用Rainin Hydropore柱通過疏水相互作用色譜(在25℃)純化。在這些條件下，GST-MKK7和未激活的JNK3不結(jié)合，這樣當(dāng)以1ml/分鐘的速度展開1.1-0.05M磷酸鉀梯度時，雙重磷酸化的JNK3與單磷酸化的JKN被分離開。將激活的JNK3(即雙重磷酸化的JNK3)以0.25-1mg/ml于-70℃貯存。
實(shí)施例40
JNK抑制測定通過分光光度偶聯(lián)酶分析來測定化合物對JNK3的抑制作用。在該測定中，將固定濃度的激活的JNK3(10nM)與溶解在DMSO中的不同濃度的抑制劑在緩沖液(含有0.1M HEPES緩沖劑，pH7.5，含有10mM MgCl2，2.5mM磷酸烯醇丙酮酸，200μM NADH，150ug/mL丙酮酸激酶，50μg/mL乳酸脫氫酶，和200μM EGF受體肽)中于30℃孵育10分鐘。EGF受體肽的序列為KRELVEPLTPSGEAPNQALLR，并且是JNK3催化的激酶反應(yīng)中的磷酰基受體。通過加入10μM ATP來起始反應(yīng)，把測定板插到保持在30℃的分光光度計分析板隔室中。監(jiān)測作為時間函數(shù)的在340nm的吸收度下降。將作為抑制劑濃度函數(shù)的下降速度數(shù)據(jù)擬合成競爭性抑制動力學(xué)模型來確定Ki。
對于所選的本發(fā)明化合物，在JNK抑制測定中的活性如表8所示。Ki低于0.1微摩爾(μM)的化合物估為“A”，Ki為0.1-1μM的化合物估為“B”，Ki大于1μM的化合物估為“C”。表8JNK3抑制測定中的活性。
實(shí)施例41Src抑制測定測定作為在桿狀病毒細(xì)胞中表達(dá)和純化的全長重組人Src激酶(得自Upstate Biotechnology，cat.no.14-117)的抑制劑的化合物。通過測定從ATP摻入到組合物的隨機(jī)聚Glu-Tyr聚合物底物的酪氨酸中的33P來監(jiān)測Src激酶活性，Glu∶Tyr＝4∶1(Sigma，cat.no.P-0275)。測定組分的終濃度如下0.05M HEPES，pH7.6，10mM MgCl2，2mM DTT，0.25mg/ml BSA，10μMATP(1-2μCi33P-ATP/反應(yīng))，5mg/ml聚Glu-Tyr，和1-2個單位重組人Src激酶。在一般測定中，將除ATP之外的所有反應(yīng)組分預(yù)混合，并以等分試樣加到測定板的孔中。向孔中加入溶解在DMSO中的抑制劑，使最終的DMSO濃度為2.5％。將測定板在30℃孵育10分鐘，然后起始與33P-ATP的反應(yīng)。反應(yīng)20分鐘后，用150μl含有20mM Na3PO4的10％三氯乙酸(TCA)中止反應(yīng)。將反應(yīng)中止的樣本轉(zhuǎn)移到安裝在濾板真空歧管上的96-孔濾板(Whatman，UNI-Filter GF/FGlass Fiber Filter，cat no.7700-3310)中。用含有20mM Na3PO4的10％TCA將濾板洗滌4次，然后用甲醇洗滌4次。向每個孔中加入200μl閃爍液體。將濾板密封，并用TopCount閃爍計數(shù)器測定在濾器上的放射性的量。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在該Src測定中，活性最強(qiáng)的化合物是其中G是任選取代的芳基，且R1是Ar2的式I化合物。
實(shí)施例42Lck抑制測定測定作為從牛胸腺純化的lck激酶(得自Upstate Biotechnology，cat.no.14-106)的抑制劑的化合物。通過測定從ATP摻入到組合物的隨機(jī)聚Glu-Tyr聚合物底物的酪氨酸中的33P來監(jiān)測Src激酶活性，Glu∶Tyr＝4∶1(Sigma，cat.no.P-0275)。測定組分的終濃度如下0.05M HEPES，pH7.6，10mM MgCl2，2mM DTT，0.25mg/ml BSA，10μM ATP(1-2μCi33P-ATP/反應(yīng))，5mg/ml聚Glu-Tyr，和1-2個重組人lck激酶單位。在一般測定中，將除ATP之外的所有反應(yīng)組分預(yù)混合，并以等分試樣加到測定板的孔中。向孔中加入溶解在DMSO中的抑制劑，使最終的DMSO濃度為2.5％。將測定板在30℃培養(yǎng)10分鐘，然后起始與33P-ATP的反應(yīng)。反應(yīng)20分鐘后，用150μl含有20mM Na3PO4的10％三氯乙酸(TCA)中止反應(yīng)。將反應(yīng)中止的樣本轉(zhuǎn)移到安裝在濾板真空歧管上的96-孔濾板(Whatman，UNI-Filter GF/F Glass Fiber Filter，cat no.7700-3310)中。用含有20mM Na3PO4的10％TCA將濾板洗滌4次，然后用甲醇洗滌4次。向每個孔中加入200μl閃爍液體。將濾板密封，并用TopCount閃爍計數(shù)器測定在濾器上的放射性的量。
結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在該lck測定中，活性最強(qiáng)的化合物是其中G是任選取代的芳基，且R1是Ar2的式I化合物。
雖然已經(jīng)描述了多個本發(fā)明實(shí)施方案，但是很明顯，可以改變我們的基本實(shí)施例來提供使用本發(fā)明化合物和方法的其它實(shí)施方案。因此，應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明范圍由權(quán)利要求書限定，而不是由舉例說明的具體實(shí)施方案限定。
權(quán)利要求
1.式I化合物 其中X-Y-Z選自 R1是H、CONH2、T(n)-R、或T(n)-Ar2；R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)；n是0或1；T是C(＝O)、CO2、CONH、S(O)2、S(O)2NH、COCH2或CH2；各個R2分別獨(dú)立地選自氫、-R、-CH2OR、-CH2OH、-CH＝O、-CH2SR、-CH2S(O)2R、-CH2(C＝O)R、-CH2CO2R、-CH2CO2H、-CH2CN、-CH2NHR、-CH2N(R)2、-CH＝N-OR、-CH＝NNHR、-CH＝NN(R)2、-CH＝NNHCOR、-CH＝NNHCO2R、-CH＝NNHSO2R、-芳基、-取代的芳基、-CH2(芳基)、-CH2(取代的芳基)、-CH2NH2、-CH2NHCOR、-CH2NHCONHR、-CH2NHCON(R)2、-CH2NRCOR、-CH2NHCO2R、-CH2CONHR、-CH2CON(R)2、-CH2SO2NH2、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-(雜環(huán)基)、或-(取代的雜環(huán)基)；各個R3分別獨(dú)立地選自氫、R、COR、CO2R或S(O)2R；G是R或Ar1；Ar1是芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜環(huán)基、或取代的雜環(huán)基，其中Ar1可任選與含有0-3個雜原子的部分不飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合；Q-NH是 其中Q-NH上的H可任選被R3替代；A是N或CR3；U是CR3、O、S、或NR3；Ar2是芳基、取代的芳基、雜環(huán)基或取代的雜環(huán)基，其中Ar2可任選與含有0-3個雜原子的部分不飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合；其中Ar2、包括如果存在時稠合環(huán)中的每個可取代的碳原子可任選獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、或NHS(O)2R，其中稠合環(huán)中的每個飽和碳可再任選獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代＝O、＝S、＝NNHR、＝NNR2、＝N-OR、＝NNHCOR、＝NNHCO2R、＝NNHSO2R、或＝NR；其中Ar2中每個可取代的氮原子可任選被R、COR、S(O)2R或CO2R取代；條件是當(dāng)G是苯基，X-Y-Z是N-O-CR2，A是N，且R2是甲基時，R1不是氫或COCH3。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中G是Ar1。
3.具有下式的權(quán)利要求2的化合物
4.權(quán)利要求3的化合物，其中Q-NH選自
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R1是烷氧基烷基、烷氧基羰基烷基、羥基烷基、吡啶基烷基、烷氧基環(huán)烷基、環(huán)烷基、烷氧基羰基環(huán)烷基、羥基環(huán)烷基、Ar2或T-Ar2，其中T是C(＝O)。
6.權(quán)利要求5的化合物，其中R1環(huán)己基、環(huán)己醇-4-基、環(huán)己酮-4-基、2-丙-1-醇、2-甲氧基-1-甲基乙基、3-丁酰烷基酯、2-吡啶基-2-乙基，或任選取代的苯基、萘基、吡啶基、喹啉基、噻吩基或二氫茚基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R2是任選取代的烷基。
8.選自表1-7所列出的化合物的化合物。
9.具有下式的化合物 其中A是N或CH；PG是氫或氮保護(hù)基；R1是H、T(n)-R、或T(n)-Ar2；R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)；n是0或1；T是C(＝O)、CO2、CONH、S(O)2、S(O)2NH、COCH2或CH2；且各個R2分別獨(dú)立地選自氫、-R、-CH2OR、-CH2OH、-CH＝O、-CH2SR、-CH2S(O)2R、-CH2(C＝O)R、-CH2CO2R、-CH2CO2H、-CH2CN、-CH2NHR、-CH2N(R)2、-CH＝N-OR、-CH＝NNHR、-CH＝NN(R)2、-CH＝NNHCOR、-CH＝NNHCO2R、-CH＝NNHSO2R、-芳基、-取代的芳基、-CH2(芳基)、-CH2(取代的芳基)、-CH2NH2、-CH2NHCOR、-CH2NHCONHR、-CH2NHCON(R)2、-CH2NRCOR、-CH2NHCO2R、-CH2CONHR、-CH2CON(R)2、-CH2SO2NH2、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-(雜環(huán)基)、或-(取代的雜環(huán)基)。
10.下式所示化合物 其中X-Y是提供異噁唑或相反異噁唑環(huán)的N-O或O-N；A是N或CH；G是R、芳基或取代的芳基；R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)；R2選自氫、-R、-CH2OR、-CH2OH、-CH＝O、-CH2SR、-CH2S(O)2R、-CH2(C＝O)R、-CH2CO2R、-CH2CO2H、-CH2CN、-CH2NHR、-CH2N(R)2、-CH＝N-OR、-CH＝NNHR、-CH＝NN(R)2、-CH＝NNHCOR、-CH＝NNHCO2R、-CH＝NNHSO2R、-芳基、-取代的芳基、-CH2(芳基)、-CH2(取代的芳基)、-CH2NH2、-CH2NHCOR、-CH2NHCONHR、-CH2NHCON(R)2、-CH2NRCOR、-CH2NHCO2R、-CH2CONHR、-CH2CON(R)2、-CH2SO2NH2、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-(雜環(huán)基)、或-(取代的雜環(huán)基)；且R1選自鹵素、NH2、SR、或SO2R；條件是當(dāng)A是CH時，R1不是Br或Cl。
11.藥物組合物，含有能有效地抑制JNK的量的權(quán)利要求1-8任一項的化合物和可藥用載體。
12.在哺乳動物中治療能通過用蛋白激酶抑制劑治療來減輕的疾病或病癥的方法，包括給需要治療的哺乳動物施用治療有效量的式I化合物 其中X-Y-Z選自 R1是H、CONH2、T(n)-R、或T(n)-Ar2；R是脂族基團(tuán)或取代的脂族基團(tuán)；n是0或1；T是C(＝O)、CO2、CONH、S(O)2、S(O)2NH、COCH2或CH2；各個R2分別獨(dú)立地選自氫、-R、-CH2OR、-CH2OH、-CH＝O、-CH2SR、-CH2S(O)2R、-CH2(C＝O)R、-CH2CO2R、-CH2CO2H、-CH2CN、-CH2NHR、-CH2N(R)2、-CH＝N-OR、-CH＝NNHR、-CH＝NN(R)2、-CH＝NNHCOR、-CH＝NNHCO2R、-CH＝NNHSO2R、-芳基、-取代的芳基、-CH2(芳基)、-CH2(取代的芳基)、-CH2NH2、-CH2NHCOR、-CH2NHCONHR、-CH2NHCON(R)2、-CH2NRCOR、-CH2NHCO2R、-CH2CONHR、-CH2CON(R)2、-CH2SO2NH2、-CH2(雜環(huán)基)、-CH2(取代的雜環(huán)基)、-(雜環(huán)基)、或-(取代的雜環(huán)基)；各個R3分別獨(dú)立地選自氫、R、COR、CO2R或S(O)2R；G是R或Ar1；Ar1是芳基、取代的芳基、芳烷基、取代的芳烷基、雜環(huán)基、或取代的雜環(huán)基，其中Ar1可任選與含有0-3個雜原子的部分不飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合；Q-NH是 其中Q-NH上的H可任選被R3替代；A是N或CR3；U是CR3、O、S、或NR3；Ar2是芳基、取代的芳基、雜環(huán)基或取代的雜環(huán)基，其中Ar2可任選與含有0-3個雜原子的部分不飽和或全不飽和5-7元環(huán)稠合；其中Ar2、包括如果存在時的稠合環(huán)上的每個可取代的碳原子可任選獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代鹵素、R、OR、SR、OH、NO2、CN、NH2、NHR、N(R)2、NHCOR、NHCONHR、NHCON(R)2、NRCOR、NHCO2R、CO2R、CO2H、COR、CONHR、CON(R)2、S(O)2R、SONH2、S(O)R、SO2NHR、或NHS(O)2R，其中稠合環(huán)中的每個飽和碳可再任選獨(dú)立地被下列基團(tuán)取代＝O、＝S、＝NNHR、＝NNR2、＝N-OR、＝NNHCOR、＝NNHCO2R、＝NNHSO2R、或＝NR；其中Ar2中每個可取代的氮原子可任選被R、COR、S(O)2R或CO2R取代。
13.權(quán)利要求12的方法，其中所述疾病可通過用JNK抑制劑治療來減輕。
14.權(quán)利要求12的方法，其中所述疾病選自炎性疾病、自身免疫性疾病、破壞性骨疾病、增殖性疾病、感染性疾病、神經(jīng)變性疾病、變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)中的再灌注/缺血、心臟病發(fā)作、血管生成性疾病、器官缺氧、血管增生、心臟肥大、凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集、或與促炎細(xì)胞因子有關(guān)的病癥。
15.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防選自下列的炎性疾病急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、變態(tài)反應(yīng)、和成人呼吸窘迫綜合征。
16.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防選自下列的自身免疫性疾病腎小球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、硬皮病、慢性甲狀腺炎、格雷夫斯氏病、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性貧血、自身免疫性中性白細(xì)胞減少癥、血小板減少癥、特應(yīng)性皮炎、慢性活動性肝炎、重癥肌無力、多發(fā)性硬化、炎性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、局限性回腸炎、牛皮癬、或移植物對宿主疾病。
17.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防選自下列的破壞性骨疾病骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、或多發(fā)性骨髓瘤性骨疾病。
18.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防選自下列的增殖性疾病急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、轉(zhuǎn)移性黑素瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、或多發(fā)性骨髓瘤。
19.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防選自下列的神經(jīng)變性疾病阿爾茨海默氏病、帕金森氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化、亨廷頓氏舞蹈病、腦缺血或創(chuàng)傷性損傷引起的神經(jīng)變性疾病、谷氨酸神經(jīng)毒害或缺氧癥。
20.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防中風(fēng)中的缺血/再灌注或心肌缺血、腎缺血、心臟病發(fā)作、器官缺氧或凝血酶引起的血小板聚集。
21.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防與T細(xì)胞激活有關(guān)的病癥或病理性免疫反應(yīng)。
22.權(quán)利要求12的方法，其中所述方法是用于治療或預(yù)防選自實(shí)體瘤、眼睛新血管生成、或嬰兒血管瘤的血管生成性疾病。
23.權(quán)利要求12的方法，其中所述疾病或病癥可通過用Src類激酶抑制劑治療來減輕。
24.權(quán)利要求23的方法，其中所述疾病或病癥選自高鈣血、再狹窄、血鈣過多、骨質(zhì)疏松、骨關(guān)節(jié)炎、骨轉(zhuǎn)移的癥狀治療、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、多發(fā)性硬化、牛皮癬、狼瘡、移植物對宿主疾病、T細(xì)胞介導(dǎo)的過敏性疾病、Hashimoto氏甲狀腺炎、急性熱病性多神經(jīng)炎、慢性堵塞性肺病、接觸性皮炎、癌癥、佩吉特氏病、哮喘、缺血或再灌注損傷、變應(yīng)性疾病、特應(yīng)性皮炎、或變應(yīng)性鼻炎。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(I)化合物,其中R
文檔編號A61P13/12GK1378541SQ00814178
公開日2002年11月6日 申請日期2000年8月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年8月13日
發(fā)明者J·格林, G·比米斯, A-L·格里洛特, M·勒德鮑爾, F·薩里圖羅, E·哈林頓, H·高, C·貝克, J·曹, M·黑爾 申請人:沃泰克斯藥物股份有限公司