筒定容至1000ml，趁熱分裝在三角瓶中，在121°C溫度下l.lkg/cm2壓力中保持20min滅菌。滅菌結(jié)束后冷卻至50°C左右，在超凈工作臺(tái)上將10wt%茶汁的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基倒入事先已經(jīng)滅菌并干燥的培養(yǎng)皿中，待冷卻即為制得的1wt %茶汁PDA瓊脂固體培養(yǎng)基平板；
[0048](2)黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備:接種已經(jīng)分離純化的黑茶金花菌于TOA液體培養(yǎng)基中，28 °C培養(yǎng)至OD值為0.7，用0.2μΜ過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾滅菌，即得發(fā)酵液；
[0049](3)黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基的制備:按照常規(guī)方法配制PDA固體培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50°C左右，按照培養(yǎng)基量和金花菌發(fā)酵液體積比10:1添加制備好的發(fā)酵液，趁熱倒PDA瓊脂固體培養(yǎng)基平板；
[0050](4)黑茶散茶金花菌的培養(yǎng)、純化:取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋的各
0.5ml涂布于改良PDA平板超凈臺(tái)上吹干，28°C培養(yǎng)2-3天，挑取金黃色優(yōu)勢(shì)菌落，畫(huà)線接種至同樣的改良的TOA平板上，同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)直到純化;判斷方法:當(dāng)黑茶散茶金花菌落呈現(xiàn)金黃色，菌落形態(tài)相同、大小一致，無(wú)其它雜菌生長(zhǎng)即表示黑茶散茶金花菌已經(jīng)純化分離；
[0051 ] (5)黑茶散茶金花菌的保存:用改良PDA斜面管保存于4°C冰箱中或用改良PDA液體培養(yǎng)基制成孢子懸液加體積濃度為50 %滅菌甘油于-70 0C冰箱保存；
[0052](6)黑茶散茶金花菌干粉的制備，具體步驟為:
[0053]61)渥堆:將干燥的黑毛茶原料用噴霧器噴灑少量水，水分控制在15wt%，溫度控制在24°C，空氣相對(duì)濕度至少80%，渥堆14h;
[0054]62)蒸茶:用105Γ的蒸汽蒸4min;
[0055]63)噴灑黑茶散茶金花菌:將一定量保存好的黑茶散茶金花菌噴灑在經(jīng)蒸汽處理后的茶葉上，添加量為0.25ml/100g ；
[0056]64)烘茶:將黑茶散茶金花菌噴灑過(guò)的黑毛茶用保鮮袋密封，再用112°C蒸汽進(jìn)行蒸汽殺菌15min;
[0057]65)茶葉發(fā)花:蒸汽殺菌后的茶葉含水量控制在23wt%范圍內(nèi)，溫度控制在33°C，空氣相對(duì)濕度控制在81%;
[0058]66)高溫鹽水固定金花:將保鮮膜撕掉，向發(fā)花后茶葉均勻噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的食鹽水，放入滅菌器中150°C高壓蒸汽1min;
[0059]67)干燥:干燥溫度控制在41 °C，先低后高，干燥至含水率14wt %以內(nèi)；
[0060]68)黑茶散茶金花菌干粉的制備:在超凈工作間，將干燥好的含金花菌的黑毛茶脫落金花菌，機(jī)械粉碎，然后過(guò)200目篩，65 °C干燥，即得；
[0061 ] (7)黑茶散茶金花菌膠囊的制備，具體步驟為:
[0062]71)將藥物充填于空心膠囊中，其中空心膠囊由市場(chǎng)購(gòu)得，選可塑性強(qiáng)，透明度好，并含有改性淀粉25-75wt %、卡拉膠10-30wt %、增塑劑(山梨醇)10_25wt %、水40_50wt %、增稠劑(海藻膠和羥丙甲纖維素)2_12wt% ;
[0063]72)將10mg黑茶散茶金花菌干粉加輔料以17的％改性淀粉為稀釋劑，以2.0wt%滑石粉為助流劑等制成均勻的粉末或顆粒；
[0064]73)取空心膠囊，單獨(dú)填充。
[0065]上述黑茶散茶金花菌膠囊含黑茶散茶金花菌干粉的劑量為:每粒10mg和150mg兩種規(guī)格。
[0066]本發(fā)明通過(guò)對(duì)黑茶散茶進(jìn)行系統(tǒng)的處理，大量繁殖黑茶散茶金花菌有益菌，使其成為繁殖過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)菌，得到干粉后，制成膠囊，該膠囊質(zhì)量穩(wěn)定，具有提高人體免疫力、降糖、降血脂和抗腫瘤等多方面人體排毒功效。
[0067]對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實(shí)施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。因此，無(wú)論從哪一點(diǎn)來(lái)看，均應(yīng)將實(shí)施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說(shuō)明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。
[0068]此外，應(yīng)當(dāng)理解，雖然本說(shuō)明書(shū)按照實(shí)施方式加以描述，但并非每個(gè)實(shí)施方式僅包含一個(gè)獨(dú)立的技術(shù)方案，說(shuō)明書(shū)的這種敘述方式僅僅是為清楚起見(jiàn)，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)將說(shuō)明書(shū)作為一個(gè)整體，各實(shí)施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當(dāng)組合，形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實(shí)施方式。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)黑茶散茶的處理； (2)黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備； (3)黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基的制備； (4)黑茶散茶金花菌的培養(yǎng)、純化； (5)黑茶散茶金花菌的保存； (6)黑茶散茶金花菌干粉的制備； (7)黑茶散茶金花菌膠囊的制備。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶的處理，步驟為:用小型粉碎機(jī)粉碎黑茶散茶，過(guò)200目篩，65°C干燥，2h后稱取2g黑茶散茶樣品，定容20ml，分別用10倍、100倍、1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋為20ml，取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋的黑茶散茶樣品改良PDA平板。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備，步驟為:接種實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)分離純化的黑茶金花菌于PDA液體培養(yǎng)基中，28°C培養(yǎng)至OD值為0.6-0.8，用0.2μΜ過(guò)濾膜進(jìn)行過(guò)濾滅菌，即為制備好的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基的制備，步驟為:該黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基是改良的PDA固體培養(yǎng)基，其改良的方法為按照常規(guī)方法配制PDA固體培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50 V左右，按照培養(yǎng)基量和黑茶散茶金花菌發(fā)酵液體積比10:1添加制備好的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液，趁熱倒平板。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌的培養(yǎng)、純化，步驟為:取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋的黑茶散茶樣品各0.5ml涂布于黑茶散茶樣品改良TOA平板超凈臺(tái)上吹干，28°C培養(yǎng)2-3天，挑取金黃色優(yōu)勢(shì)菌落，畫(huà)線接種至同樣的黑茶散茶樣品改良的TOA平板上，同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)直到純化;純化的判斷方法為:當(dāng)黑茶散茶金花菌落呈現(xiàn)金黃色，菌落形態(tài)相同、大小一致，無(wú)其它雜菌生長(zhǎng)即表示黑茶散茶金花菌已經(jīng)純化分離。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌的保存，步驟為:用改良PDA斜面管保存于4°C冰箱中或用改良PDA液體培養(yǎng)基制成孢子懸液加體積濃度為50 %的滅菌甘油于-70 0C冰箱保存。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌干粉的制備，步驟為: 61)渥堆:用噴霧器在干燥的黑毛茶原料上噴灑少量水，水分控制在14-16wt%，溫度控制在22-25°C，空氣相對(duì)濕度至少80%，渥堆10-15h; 62)蒸茶:用100-106°C的蒸汽蒸4min; 63)噴灑黑茶散茶金花菌:將一定量保存好的黑茶散茶金花菌噴灑在經(jīng)蒸汽處理后的茶葉上，添加量為0.25ml/100g; 64)烘茶:將黑茶散茶金花菌噴灑過(guò)的黑毛茶用保鮮袋密封，再用100-115°C的蒸汽進(jìn)行蒸汽殺菌15min; 65)茶葉發(fā)花:蒸汽殺菌后的茶葉含水量控制在20-24wt%范圍內(nèi)，溫度控制在30-35°C，空氣相對(duì)濕度控制在70-85% ； 66)高溫鹽水固定金花:將保鮮膜撕掉，向發(fā)花后茶葉均勻噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的食鹽水，放入滅菌器中150 °C高壓蒸汽1min; 67)干燥:干燥溫度控制在38-42°C，先低后高，干燥至含水率14wt%以內(nèi)； 68)黑茶散茶金花菌干粉的制備:在超凈工作間，將干燥好的含金花菌的黑毛茶脫落金花菌，機(jī)械粉碎，然后過(guò)200目篩，65 °C干燥，即得。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備，步驟為: 71)備好空心膠囊； 72)將50-150mg的黑茶散茶金花菌干粉加輔料，制成均勻的粉末或顆粒； 73)取空心膠囊，單獨(dú)填充。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述黑茶散茶金花菌膠囊含黑茶散茶金花菌干粉的劑量為:每粒10mg和150mg兩種規(guī)格。10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，其特征在于，所述輔料包括改性淀粉和滑石粉。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，包括以下步驟：(1)黑茶散茶的處理；(2)黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備；(3)黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基的制備；(4)黑茶散茶金花菌的培養(yǎng)、純化；(5)黑茶散茶金花菌的保存；(6)黑茶散茶金花菌干粉的制備；(7)黑茶散茶金花菌膠囊的制備。本發(fā)明通過(guò)對(duì)黑茶散茶進(jìn)行系統(tǒng)的處理，大量繁殖黑茶散茶金花菌有益菌，使其成為繁殖過(guò)程中的優(yōu)勢(shì)菌，得到干粉后，制成膠囊，該膠囊質(zhì)量穩(wěn)定，具有提高人體免疫力、降糖、降血脂和抗腫瘤等多方面人體排毒功效。
【IPC分類】A23L33/00, A23L5/00, A23L31/00
【公開(kāi)號(hào)】CN105559054
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510940359
【發(fā)明人】李定國(guó), 楊小平, 劉石泉, 吳麗麗
【申請(qǐng)人】永嘉名頂農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)有限公司
【公開(kāi)日】2016年5月11日
【申請(qǐng)日】2015年12月15日