黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體是一種黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]以前黑茶主要做成茯磚茶，該茶的優(yōu)點是別于儲存，但缺點是食用不方便，因為一般需要用刀等尖銳器具切割?，F(xiàn)在黑茶散茶因食用更為方便而引起人們廣泛關(guān)注，已有成熟的產(chǎn)品上市，將成為以后黑茶市場的主流。黑茶散茶的關(guān)鍵工藝也在于發(fā)花，通過接種，在適當?shù)臏囟群蜐穸鹊臈l件下使黑茶散茶金花菌生長繁殖，從而使該茶葉具備獨特的品質(zhì)風味。黑茶具有公認的提高人體免疫力、降糖、降血脂和抗腫瘤等多方面有益健康的作用，還有助于人體排毒。
[0003]金花菌是黑茶中的有益真菌，是黑茶表現(xiàn)上述生物活性的主要因素。因此，利用黑茶散茶中的金花菌，制成有保健功能的膠囊，能提高金花菌的使用效率，方便食用，也為黑茶散茶的升級提供更大的空間。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，通過對黑茶散茶進行系統(tǒng)的處理，使其成為繁殖過程中的優(yōu)勢菌，得到干粉后，制成質(zhì)量穩(wěn)定的膠囊，該膠囊具有提高人體免疫力、降糖、降血脂和抗腫瘤等多方面人體排毒功效。
[0005]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:
[0006]黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，具體步驟為:
[0007](I)黑茶散茶的處理；
[0008](2)黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備；
[0009](3)黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基的制備；
[0010](4)黑茶散茶金花菌的培養(yǎng)、純化；
[0011](5)黑茶散茶金花菌的保存；
[0012](6)黑茶散茶金花菌干粉的制備；
[0013](7)黑茶散茶金花菌膠囊的制備。
[0014]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶的處理，步驟為:用小型植物粉碎機粉碎黑茶散茶，過200目篩，65 °C干燥，2h后稱取2g黑茶散茶樣品，定容20ml，分別用10倍、100倍、1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋為20ml，取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋的黑茶散茶樣品改良PDA平板。
[0015]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備，步驟為:接種實驗室已經(jīng)分離純化的黑茶金花菌于PDA液體培養(yǎng)基中，28 °C培養(yǎng)至OD值為0.6-0.8，用0.2μΜ過濾膜進行過濾滅菌，即為制備好的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液。
[0016]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基的制備，步驟為:該黑茶散茶金花菌培養(yǎng)基是改良的PDA固體培養(yǎng)基，改良的方法為按照常規(guī)方法配制TOA固體培養(yǎng)基，滅菌后冷卻至50°C左右，按照培養(yǎng)基量和黑茶散茶金花菌發(fā)酵液體積比10:1添加制備好的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液，趁熱倒平板。
[0017]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌的培養(yǎng)、純化，步驟為:取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋的黑茶散茶樣品各0.5ml涂布于黑茶散茶樣品改良PDA平板超凈臺上吹干，28°C培養(yǎng)2-3天，挑取金黃色優(yōu)勢菌落，畫線接種至同樣的黑茶散茶樣品改良的PDA平板上，同樣條件繼續(xù)培養(yǎng)直到純化;判斷方法:當黑茶散茶金花菌落呈現(xiàn)金黃色，菌落形態(tài)相同、大小一致，無其它雜菌生長即表示黑茶散茶金花菌已經(jīng)純化分離。
[0018]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌的保存，步驟為:用改良PDA斜面管保存于4 0C冰箱中或用改良PDA液體培養(yǎng)基制成孢子懸液加體積濃度為50 %滅菌甘油于-70°C冰箱保存。
[0019]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌干粉的制備，步驟為:
[0020]61)渥堆:用噴霧器在干燥的黑毛茶原料上噴灑少量水，水分控制在14_16wt%，溫度控制在22-25°C，空氣相對濕度至少80%，渥堆10-15h;
[0021]62)蒸茶:用 100-106°C 的蒸汽蒸 4min;
[0022]63)噴灑黑茶散茶金花菌:將一定量保存好的黑茶散茶金花菌噴灑在經(jīng)蒸汽處理后的茶葉上，添加量為0.25ml/100g ；
[0023]64)烘茶:將黑茶散茶金花菌噴灑過的黑毛茶用保鮮袋密封，再用100_115°C的蒸汽進行蒸汽殺菌15min ；
[0024]65)茶葉發(fā)花:蒸汽殺菌后的茶葉含水量控制在20_24wt%范圍內(nèi)，溫度控制在30-35°C，空氣相對濕度控制在70-85% ；
[0025]66)高溫鹽水固定金花:將保鮮膜撕掉，向發(fā)花后茶葉均勻噴灑質(zhì)量分數(shù)為1%的食鹽水，放入滅菌器中150°C高壓蒸汽1min;
[0026]67)干燥:干燥溫度控制在38_42°C，先低后高，干燥至含水率14wt%以內(nèi)；
[0027]68)黑茶散茶金花菌干粉的制備:在超凈工作間，將干燥好的含金花菌的黑毛茶脫落金花菌，機械粉碎，然后過200目篩，65 °C干燥，即得。
[0028]作為本發(fā)明進一步的方案:所述的黑茶散茶金花菌膠囊的制備，硬膠囊劑是采用以下述制劑技術(shù)制備:將藥物充填于空心膠囊中，步驟為:
[0029]71)空心膠囊由市場購得，選可塑性強，透明度好，并含有改性淀粉25_75wt%、卡拉膠10-30wt %、增塑劑(山梨醇)10-25wt %、水40-50wt %、增稠劑(海藻膠和羥丙甲纖維素)2-12wt% ；
[0030]72)將50-150mg的黑茶散茶金花菌干粉加輔料，輔料以15_20wt %改性淀粉為稀釋劑，以0.1-3#%滑石粉為助流劑等制成均勻的粉末或顆粒；
[0031]73)取空心膠囊，單獨填充。
[0032]作為本發(fā)明進一步的方案:上述黑茶散茶金花菌膠囊含黑茶散茶金花菌干粉的劑量為:每粒I OOmg和150mg兩種規(guī)格。
[0033]上述技術(shù)方案中，所述的F1DA指Potato Dextrose Agar的簡稱，中文含義為:馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。
[0034]PDA平板指培養(yǎng)基滅菌后冷卻至50 °C左右，在超凈工作臺上將培養(yǎng)基倒入事先已經(jīng)滅菌并干燥的培養(yǎng)皿中，待冷卻即為制得的PDA培養(yǎng)基平板。
[0035]改良PDA固體培養(yǎng)基:將馬鈴薯洗凈去皮，稱取200g，切成小塊放入燒杯中，加適當?shù)恼麴s水，煮沸Ih，稍冷后用雙層紗布過濾，在濾液中加10ml制備好的茶汁，然后加入15g瓊脂，加熱融化，最后加入蔗糖20g，混勻，用量筒定容至1000ml，趁熱分裝在三角瓶中，在121°C溫度下l.lkg/cm2壓力中保持20min滅菌。滅菌結(jié)束后冷卻至50°C左右，在超凈工作臺上將10wt%茶汁的PDA瓊脂固體培養(yǎng)基倒入事先已經(jīng)滅菌并干燥的培養(yǎng)皿中，待冷卻即為制得的1wt %茶汁PDA瓊脂固體培養(yǎng)基平板。
[0036]改良PDA固體培養(yǎng)基在黑茶散茶金花菌的分離:10wt%茶汁TOA瓊脂固體培養(yǎng)基按照上述方法制備，滅菌結(jié)束后冷卻至50°C左右，按照培養(yǎng)基量和黑茶散茶金花菌發(fā)酵液體積比10:1添加制備好的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液。趁熱到平板，即為黑茶散茶金花菌平板，SP為PDA固體培養(yǎng)基平板。
[0037]畫線接種:用滅菌的接種針在超凈臺中將已經(jīng)生長好的菌落挑取，在新的固體培養(yǎng)基平皿畫線分離相應的微生物。
[0038]金花菌落:金花菌在10wt%PDA培養(yǎng)基平板上生長到一定時候形成的一個菌落集合體，菌落是指聚集在一起的微生物團。
[0039]茶汁的制備方法:按照Ig:30ml散茶樣本與蒸餾水的比例稱取20g散茶，加入600ml蒸餾水，100°C水浴2h，待稍冷卻后用量筒定容至600ml即為制備好的茶汁。
[0040]黑茶散茶金花菌發(fā)酵液的制備:接種實驗室已經(jīng)分離純化的黑茶散茶金花菌于添加1wt %茶汁的PDA液體培養(yǎng)基中，28 °C培養(yǎng)至OD值0.6-0.8，用0.2uM過濾膜進行過濾滅菌，即為制備好的黑茶散茶金花菌發(fā)酵液，OD值即為吸光值。
[0041]本研究能得到干燥好的含金花菌的黑毛茶脫落金花菌，產(chǎn)量為每I公斤毛茶得到至少5g的金花菌干粉。
[0042]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過對黑茶散茶進行系統(tǒng)的處理，大量繁殖黑茶散茶金花菌有益菌，使其成為繁殖過程中的優(yōu)勢菌，得到干粉后，制成膠囊，該膠囊質(zhì)量穩(wěn)定，具有提高人體免疫力、降糖、降血脂和抗腫瘤等多方面人體排毒功效。
【具體實施方式】
[0043]下面將結(jié)合本發(fā)明實施例，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
[0044]實施例1
[0045]本發(fā)明實施例中，黑茶散茶金花菌膠囊的制備方法，具體步驟為:
[0046](I)黑茶散茶的處理:將黑茶散茶用小型植物粉碎機粉碎，過200目篩，65°C干燥，2h后稱取2g樣品，定容20ml，10倍、100倍、1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋為20ml，取1000倍、10000倍、10000倍梯度稀釋的改良PDA平板；
[0047]其中改良PDA固體培養(yǎng)基的制備，步驟為:將馬鈴薯洗凈去皮，稱取200g，切成小塊放入燒杯中，加適當?shù)恼麴s水，煮沸Ih，稍冷后用雙層紗布過濾，在濾液中加10ml制備好的茶汁，然后加入15g瓊脂，加熱融化，最后加入蔗糖20g，混勻，用量