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微藻生物質(zhì)的食品組合物的制作方法_2

文檔序號(hào):8449915閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
巴氏滅菌在高溫(但低于沸點(diǎn))下短時(shí)間進(jìn)行。如本文中所述,巴氏滅菌不僅可以減少食 物制品中的不良微生物的數(shù)目,而且還能夠滅活食物制品中存在的某些酶。
[0069] "多糖"和"聚糖"指的是由糖苷鍵將單糖連接在一起制成的任何碳水化合物。纖 維素是構(gòu)成某些植物細(xì)胞壁的多糖的例子。
[0070] "進(jìn)出口"指的是生物反應(yīng)器中允許物質(zhì)(如氣體、液體和細(xì)胞)流入或流出的開(kāi) 口;進(jìn)出口通常與管道連接。
[0071] "主要是包封的"指的是所提到組分(例如藻油)的50%以上、通常為75%以上到 90%被封隔在所提到的包裝物(可以包括例如微藻細(xì)胞)中。
[0072] "主要是完整的細(xì)胞"和"主要是完整的生物質(zhì)"指的是包含50%以上、通常是 75%、90%和98%以上的完整細(xì)胞的細(xì)胞群。"完整的"在這里指的是包圍細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)組 分的細(xì)胞膜和/或細(xì)胞壁的物理連續(xù)性沒(méi)有以任何方式被破壞,以至于達(dá)到細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi) 組分將釋放到超過(guò)培養(yǎng)物中的細(xì)胞膜的滲透率的程度。
[0073] "主要是溶解的"指的是這樣的細(xì)胞群,其中50%以上、通常75%以上到90%的細(xì) 胞已經(jīng)被破壞,使得細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)組分不再完全地被包圍在細(xì)胞膜以?xún)?nèi)。
[0074] "增殖"指的是生長(zhǎng)和繁殖兩者的組合。
[0075] "繁殖"指的是細(xì)胞數(shù)目通過(guò)有絲分裂或其它細(xì)胞分裂的增加。
[0076] "近似分析"指的是分析食品原料的脂肪、氮/蛋白質(zhì)、粗纖維(纖維素和木質(zhì)素為 主要組分)、水分和灰分??梢酝ㄟ^(guò)從1〇〇中減去近似分析的已知值總數(shù)來(lái)計(jì)算(碳水化合 物之差)可溶性碳水化合物(全部的膳食纖維和游離糖)。
[0077] "聲處理"指的是通過(guò)聲波能量破壞生物材料(如細(xì)胞)。
[0078] "糠醛的品種"指的是2-呋喃甲醛及其保持同樣的基本結(jié)構(gòu)特征的衍生物。
[0079] "秸桿"指的是農(nóng)作物在已經(jīng)收獲糧食之后剩下的干的莖和葉。
[0080] "適合人食用"指的是組合物可作為飲食攝入供人食用而沒(méi)有不健康的影響,并且 可以因在胃腸道中吸收消化的物質(zhì)而提供重要的熱量攝入。
[0081] "非熟食品"指的是沒(méi)有經(jīng)受加熱的組合物,但可能包含一種或多種先前經(jīng)受過(guò)加 熱的組分。
[0082] 關(guān)于體積比的〃 V/V〃或〃 v/v 〃指的是組合物中的一種物質(zhì)的體積與組合物的體積 之比。例如,提到包含5% v/v微藻油的組合物指的是組合物體積的5%由微藻油組成(例 如,體積為IOOmm3的這種組合物含5mm 3的微藻油),組合物的剩余體積(例如,本例中為 95mm3)由其它成分組成。
[0083] 關(guān)于重量比的〃W/W〃或〃w/w〃指的是組合物中的一種物質(zhì)的重量與組合物的重量 之比。例如,提到包含5%w/w微藻生物質(zhì)的組合物指的是組合物重量的5%由微藻生物質(zhì) 組成(例如,重量為IOOmg的這種組合物含5mg微藻生物質(zhì)),組合物的剩余重量(例如,本 例中為95mg)由其它成分組成。II.制備微藻生物質(zhì)的方法
[0084] 本發(fā)明提供適合人食用的藻類(lèi)生物質(zhì)、將這種藻類(lèi)生物質(zhì)與可食用成分結(jié)合的方 法和含有這種藻類(lèi)生物質(zhì)的食品組合物,所述藻類(lèi)生物質(zhì)富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),包括脂質(zhì)和/或 蛋白質(zhì)組分。本發(fā)明部分地源于這樣的發(fā)現(xiàn),即可以把藻類(lèi)生物質(zhì)制成具有高含油量和/ 或具有優(yōu)異的功能,并且將所得到的生物質(zhì)摻入食物制品里面,其中生物質(zhì)的油和/或蛋 白質(zhì)含量可以完全或部分地替代常規(guī)食物制品中存在的油類(lèi)和/或脂肪和/或蛋白質(zhì)。藻 油可主要地包含單飽和油,與往往見(jiàn)于常規(guī)食物制品中的飽和、氫化(反式脂肪)和多不飽 和的脂肪相比,其對(duì)健康是有益的。藻油還可用作不含反式脂肪的健康穩(wěn)定烹飪用油。其 余的藻類(lèi)生物質(zhì)可以將油包封,至少直到食物制品熟了為止,由此延長(zhǎng)油的保質(zhì)期。在細(xì)胞 保持完整的非熟食品中,生物質(zhì)以及見(jiàn)于油中的天然抗氧化劑還可以保護(hù)油不被氧化,否 則就會(huì)產(chǎn)生不愉快的氣味、味道和質(zhì)感。生物質(zhì)還提供除了油和/或蛋白質(zhì)以外的若干有 益的微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如藻源膳食纖維(可溶性和不溶性碳水化合物)、磷脂、糖蛋白、植物甾 醇、生育酚、生育三烯酚和硒。
[0085] 本段首先評(píng)述適合用于本發(fā)明方法的微藻類(lèi)型(A部分)、產(chǎn)生色素形成缺乏或大 幅度減少的微藻株的方法(B部分),然后是用于繁殖生物質(zhì)的培養(yǎng)條件(C部分),然后是 用于制備進(jìn)一步加工用的生物質(zhì)的濃縮步驟(D部分),以根據(jù)本發(fā)明方法制成的生物質(zhì)的 化學(xué)組成描述來(lái)結(jié)束(E部分)。
[0086] A.用在本發(fā)明方法中的微藻
[0087] 根據(jù)本發(fā)明的方法可以使用多種能產(chǎn)生合適的油和/或脂質(zhì)和/或蛋白質(zhì)的微藻 品種,但能天然地產(chǎn)生出高含量的合適的油和/或脂質(zhì)和/或蛋白質(zhì)的微藻是優(yōu)選的。影 響選擇用于本發(fā)明的微藻的考慮因素除了產(chǎn)生用于生產(chǎn)食物制品的合適油類(lèi)、脂質(zhì)或蛋白 質(zhì)外,還包括:(1)以細(xì)胞重量的百分比表示的高脂質(zhì)(或蛋白質(zhì))含量;(2)易于生長(zhǎng);(3) 易于繁殖;(4)易于進(jìn)行生物質(zhì)加工;(5)甘油脂譜;和(6)沒(méi)有藻毒素(下面的實(shí)例5顯 示干微藻生物質(zhì)及萃取自生物質(zhì)的油或脂質(zhì)沒(méi)有藻毒素)。
[0088] 在一些實(shí)施例中,在食品加工(例如,烹飪)期間必須破壞微藻的細(xì)胞壁,用以釋 放活性組分或用于消化,并且在這些實(shí)施例中,具有容易在動(dòng)物(例如人或其它單胃動(dòng)物) 的胃腸道中消化的細(xì)胞壁的微藻株是優(yōu)選的。特別是如果藻類(lèi)生物質(zhì)要用于生食物制品。 對(duì)于在細(xì)胞壁中具有高纖維素/半纖維素含量的微藻株來(lái)說(shuō),可消化性一般來(lái)說(shuō)是降低 的??梢圆捎脴?biāo)準(zhǔn)的胃蛋白酶可消化性試驗(yàn)評(píng)價(jià)可消化性。
[0089] 在具體的實(shí)施例中,微藻包含按干重計(jì)為至少10%或更多油的細(xì)胞。在其它實(shí)施 例中,微藻含按干重計(jì)至少25-35 %或更多的油。一般來(lái)說(shuō),在這些實(shí)施例中,微藻中的油含 量越多,生物質(zhì)就越有營(yíng)養(yǎng),因此可以培養(yǎng)成按干重計(jì)含至少40 %、至少50 %、75 %或更多 油的微藻是特別優(yōu)選的。用于本發(fā)明方法中的優(yōu)選微藻可異養(yǎng)生長(zhǎng)(在沒(méi)有光的情況下依 靠糖)或者是專(zhuān)性異養(yǎng)生物。在食品和/或營(yíng)養(yǎng)食品中,并非所有類(lèi)型的脂質(zhì)都是可取的, 因?yàn)樗鼈兛赡苡胁涣嫉奈兜阑螂y聞的氣味,以及表現(xiàn)出穩(wěn)定性差,或者提供的口感差,并且 這些考慮因素也會(huì)影響用于本發(fā)明方法中的微藻的選擇。
[0090] 小球藻屬中的微藻通常適用于本發(fā)明的方法。小球藻是單細(xì)胞綠藻屬的,屬于綠 藻門(mén)。小球藻細(xì)胞的形狀通常是球形,直徑約2到10 y m,并且沒(méi)有鞭毛。一些品種的小球藻 天然為異養(yǎng)的。在優(yōu)選的實(shí)施例中,用于本發(fā)明方法中的微藻是原殼小球藻、橢圓小球藻、 極微小球藻、Chlorella zofinienesi、ChloreIla luteoviridis、凱斯勒小球藻、ChlorelIa sorokiniana、Chlorella fusca var. vacuolata 小球藻屬、Chlorella cf. minutissima 或 浮水小球藻。小球藻(特別是原殼小球藻)是用于本發(fā)明方法中的優(yōu)選微生物,因?yàn)槠渚?有高脂質(zhì)成分。用于本發(fā)明方法中的特別優(yōu)選的原殼小球藻品種包括下面實(shí)例中例示的那 些。
[0091] 適合用于本發(fā)明方法中的其它小球藻品種包括選自以下的品種:anitrata、 Antarctica、aureoviridis、假絲酵母、capsulate、desiccate、ellipsoidea(包括CCAP 211/42株)、emersonii、fusca(包括變種vacuolata)、glucotropha、infusionum(包括 變種actophila和變種auxenophila)、kessleri(包括任何UTEX株397、2229、398)、匍 扇藻(包括346 37.88株)、111丨6〇¥;[1'1(118(包括346 2203株以及變種31^60¥;[1'1(118和 lutescens)、miniata,cf. minutissima、minutissima(包括UTEX株2341)、mutabilis、 nocturna、ovalis、parva、photophila、pringsheimii、protothecoides(包括任何UTEX 株1806、411、264、256、255、250、249、31、29、25 或 CCAP 211/8D 或 CCAP 211/17和變種 acidicola)、regularis(包括變種minima和umbricata)、reisiglii(包括CCP 11/8 株)、saccharophila、(包括CCAP 211/31、CCAP 211/32株和變種ellipsoidea)、salina、 simplex、sorokiniana(包括SAG 211. 40B株)、sp.(包括UTEX株2068和CCAP 211/92)、 sphaerica、stigmatophora、trebouxioides、vanniellii、vulgaris(包括CCAP 211/11K、 CCAP 2Il/80株以及f. tertia和變種autotrophica、viridis、vulgaris、vulgaris f. tertia> vulgaris f. viridis)、xanthella和zofingiensis。
[0092] 用于本發(fā)明的小球藻的品種(以及其它微藻屬的品種)可以通過(guò)將它們的基因 組的某些目標(biāo)區(qū)與本文中確定的品種的相同區(qū)進(jìn)行比較而確定;優(yōu)選的品種是與本文中 確定的品種具有一致性或表現(xiàn)出很高水平的同源性的品種。例如,可以通過(guò)這樣的方式實(shí) 現(xiàn)具體的小球藻品種或株的確認(rèn),用引物對(duì)細(xì)胞核和/或葉綠體DNA進(jìn)行擴(kuò)增和定序,采 用的方法利用基因組的適當(dāng)區(qū),例如采用Wu等在"Identification of Chlorella spp. isolates using ribosomal DNA sequences,'(Bot. Bull. Acad. Sin. 42:115-121 (2001)) 中所述的方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以采用已經(jīng)確立好的系統(tǒng)發(fā)生分析方法,如核糖體內(nèi)轉(zhuǎn) 錄間隔子(ITSl和ITS2 rDNA)、23S RNA、18S rRNA及其它保守的基因組區(qū)的擴(kuò)增和定序, 不僅能確定小球藻的品種,還能確定適合用于本文公開(kāi)的方法的其它產(chǎn)生油和脂質(zhì)的微藻 的品種。關(guān)于藻類(lèi)的確定和分類(lèi)方法的例子,參見(jiàn)Genetics, 170(4) :1601-10(2005)和 RNA,11(4) :361-4(2005)。
[0093] 因此,基因組DNA比較可用來(lái)確定適用于本發(fā)明的微藻品種。保守基因組DNA(例 如但不限于編碼23S rRNA的DNA)的區(qū)可由微藻品種進(jìn)行擴(kuò)增,所述微藻品種例如可以在 分類(lèi)學(xué)上與用在本發(fā)明中的優(yōu)選微藻相關(guān),并與那些優(yōu)選品種的相應(yīng)區(qū)進(jìn)行比較。選擇表 現(xiàn)出高水平相似性的品種用于本發(fā)明的方法中。在下面給出小球藻屬內(nèi)的品種之間的這種 DNA序列比較的示例性例子。在一些情況下,優(yōu)選用于本發(fā)明的微藻具有的編碼23S rRNA 的基因組DNA序列與SEQ ID NO 1-23和26-27中所列出的序列中的至少之一有至少65%的 核苷酸一致性。在其它情況下,優(yōu)選用于本發(fā)明的微藻具有的編碼23S rRNA的基因組DNA 序列與SEQ ID NO 1-23和26-27中所列出的序列中的至少一個(gè)或多個(gè)有至少75%、85%、 90 %、95 %、96 %、97 %、98 %、99 %或更多的核苷酸一致性。在與其它成分結(jié)合以配制食品 組合物之前,食品組合物和/或藻類(lèi)生物質(zhì)的基因分型也是用來(lái)確定藻類(lèi)生物質(zhì)是否來(lái)自 單個(gè)以上微藻株的可靠方法。
[0094] 關(guān)于確定核苷酸或氨基酸一致性百分比的序列比較,通常以一個(gè)序列作為參考 序列,將測(cè)試序列與之進(jìn)行比較。在應(yīng)用序列比較算法時(shí),把測(cè)試序列和參考序列輸入計(jì) 算機(jī)當(dāng)中,必要時(shí)指定子序列坐標(biāo),并指定序列算法程序參數(shù)。然后序列比較算法根據(jù) 指定的程序參數(shù)計(jì)算測(cè)試序列相對(duì)于參考序列的序列一致性百分比。用于比較的最優(yōu) 序列比對(duì)可以通過(guò)例如下面的方式進(jìn)行:Smith和水man的局部同源性算法(Adv. Appl. Math. 2:482 (1981)) ;Needleman 和 Wunsch 的同源比對(duì)算法(J. Mol. Biol. 48:443 (1970)); Pearson 和 Lipman 的搜索相似性方法(Proc. Nat' I. Acad. Sci. USA 85:2444(1988));這 些算法的計(jì)算機(jī)化執(zhí)行(威斯康星州遺傳學(xué)軟件包中的GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA, Genetics Computer Group, 575 Science Dr.,Madison, WI);或目視檢查(一般參見(jiàn) Ausubel等,見(jiàn)上)。適于確定序列一致性和序列相似性百分比的另一例算法是BLAST算法, 其描述在A(yíng)ltschul等的J. Mol. Biol. 215:403-410(1990)中。用于執(zhí)行BLAST分析的軟件 可通過(guò)National Center for Biotechnology Information (網(wǎng)址www. ncbi. nlm. nih. gov) 公開(kāi)獲得。
[0095] 除了小球藻之外,其它微藻屬也可用在本發(fā)明的方法中。在優(yōu)選的實(shí)施例中, 微藻的品種選自 Parachlorella kessleri、Parachlorella beijerinckii、Neochloris oleabundans、Bracteacoccus, 包括 B. grandis、B.cinnabarinas 和 B.aerius、 Bracteococcus sp?或Scenedesmus rebescens。微藻品種的其它非限制性例子包括以 下品種和屬中的品種:Achnanthes orientalis ;Agmenellum ;Amphiprora hyaline ;雙 眉藻,包括 A. coffeiformis,包括 A. c. linea、A. c. punctata、A. c. taylori、A. c. tenuis、 A. c. delicatissima> A. c. delicatissima capitata ;魚(yú)月星藻;纖維藻,包括 A. falcatus ; Boekelovia hooglandii ;Borodinella ;布朗葡萄藻,包括 B. sudeticus ;Bracteoccocus, 包括 B. aerius、B. grandis、B. cinnabarinas、B. minor 和 B. medionucleatus ;鞭藻;角毛 藻,包括 C. gracilis、C. muelleri 和 C. muelleri subsalsum ;綠球藻,包括 C. infusionum ; 綠梭藻;藍(lán)隱藻;金球藻;球鈣板藻;寇氏隱甲藻;隱藻;小環(huán)藻,包括C. cryptica和 C. meneghiniana ;杜氏藻,包括 D. bardawil、D. bioculata、D. granulate、D. maritime、 D. minuta、D. parva、D. peircei、D. primolecta、D. salina、D. terricola、D. tertiolecta 和D. viridis ;獨(dú)球藻,包括E. viridis ;Ellipsoidon ;眼蟲(chóng)藻;披刺藻;脆桿藻,包括 F. crotonensis ;粘球藻;麗絲藻;膜胞藻;等鞭金藻,包括I. aff. galbana和I. galbana ; 鱗孔藻;微芒藻(包括UTEX LB 2614);單針藻,包括M. minutum ;單針藻;微球藻;擬微綠 球藻,包括 N. salina ;舟形藻,包括 N. acceptata、N. biskanterae、N. pseudotenelloides、 N. pelliculosa和N. saprophila ;Neochloris oleabundans ;腎鞭藻;腎月藻;普通菱形藻; 菱形藻,包括 N. alexandrina、N. communis、N. dissipata、N. frustulum、N. hantzschiana、 N. inconspicua、N. intermedia、N. microcephala、N. pusilla、N. pusilla elliptica、 N. pusiIla monoensis 和 N. quadrangular ;掠鞭藻;卵囊藻,包括 0? parva 和 0? pusiIla ; 顫藻,包括 〇? Iimnetica 和 0? subbrevis ;Parachlorella,包括 P. bei jerinckii (包括 SAG 2046 株)和 P. kessleri (包括任何 SAG 株 11. 80、14. 82、21. 11H9) ;Pascheria,包括 P. acidophila ;巴夫藻;噬菌體;席藻;扁藻;顆石藻,包括P. carterae和P. dentate ;無(wú) 綠藻,包括 P. stagnora(包括 UTEX 327)、P. portoricensis 和 P. moriformis (包括 UTEX 株 1441、1435、1436、1437、1439) ;Pseudochlorella aquatica ;塔胞藻;桑甚藻;混池紅球 菌;Sarcinoid chrysophyte ;柵列藻,包括 S.armatus 和 S.rubescens ;裂殖壺菌;水綿;純 頂螺旋藻;裂絲藻;聚球藻;四角藻;四片藻,包括T. suecica ;威氏海鏈藻;和Viridiella fridericiana。
[0096] B.產(chǎn)牛色素形成缺乏或大幅度減小的微藻株的方法
[0097] 微藻(如小球藻)能夠光合生長(zhǎng)或者異養(yǎng)生長(zhǎng)。當(dāng)在碳源為固定碳源且沒(méi)有光的 異養(yǎng)條件下生長(zhǎng)時(shí),通常為綠色的微藻具有黃顏色,綠色素形成缺乏或大幅度減少。綠色素 形成減少(或缺乏)的微藻可有利地作為食品成分。綠色素形成減少(或缺乏)的微藻的 一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是,微藻的葉綠素味道減少。綠色素形成減少(或缺乏)的微藻的另一優(yōu)點(diǎn)是, 作為食品成分向食品原料中添加的微藻不會(huì)產(chǎn)生綠顏色,而綠顏色不會(huì)對(duì)消費(fèi)者產(chǎn)生吸引 力。在異養(yǎng)條件下生長(zhǎng)的微藻的綠色素形成的減少是暫時(shí)的。當(dāng)換回到光養(yǎng)生長(zhǎng)時(shí),能夠 光養(yǎng)和異養(yǎng)生長(zhǎng)的微藻將恢復(fù)綠色素形成。此外,即使綠色素減少,異養(yǎng)生長(zhǎng)的微藻也是黃 顏色的,這對(duì)于消費(fèi)者期望食品原料為白顏色或淺顏色的一些食品應(yīng)用來(lái)說(shuō)可能是不合適 的。因此,有利的是產(chǎn)生能夠異養(yǎng)生長(zhǎng)(因此綠色素形成減少或缺乏)并且黃色素形成也 減少(因此對(duì)于食品應(yīng)用來(lái)說(shuō)是中性色)的微藻株。
[0098] 產(chǎn)生色素形成缺乏或大幅度減少的微藻株的一種方法是通過(guò)誘變,然后篩選所 需的表型。幾種誘變方法是已知的,并且是在本領(lǐng)域中實(shí)施的。例如,Urano等(Urano 等,J Bioscience Bioengineering(2000)v.90(5):pp. 567-569)描述了利用 UV 照射產(chǎn) 生的捕圓小球藻的黃色和白色突變體。Kamiya(Kamiya,Plant Cell Physiol. (1989) v. 30(4) :513-521)描述了普通小球藻(Chlorella vulgaris), Ilh(M125)的無(wú)色株。
[0099] 除了通過(guò)UV照射誘變外,為了產(chǎn)生色素形成減少(或缺乏)的微藻,也可以采用 化學(xué)誘變。已證實(shí)諸如甲烷磺酸乙酯(EMS)或N-甲基-N'-硝基-N-硝基胍(NTG)之類(lèi)的 化學(xué)誘變劑對(duì)包括酵母、真菌、分枝桿菌和微藻在內(nèi)的多種微生物是有效的化學(xué)誘變劑。也 可以進(jìn)行多輪誘變,其中使微藻接觸誘變劑(UV或化學(xué)誘變劑或兼而有之),然后篩選所需 的色素形成減少的表型。然后在平板上劃線(xiàn)培養(yǎng)出具有所需表型的集落并再分離,以確保 從一代到下一代的突變是穩(wěn)定的,并且集落是純的而不是混合群體。
[0100] 在具體的實(shí)例中,結(jié)合UV誘變與化學(xué)誘變,使用原殼小球藻產(chǎn)生色素形成缺乏或 減少的株。用NTG使原殼小球藻經(jīng)受一輪化學(xué)誘變并篩選顏色突變體的集落。然后使沒(méi) 有表現(xiàn)出顏色突變的集落經(jīng)受一輪UV照射,并再次篩選顏色突變體。在一個(gè)實(shí)施例中,分 離出色素形成缺乏的原殼小球藻株,其為原殼小球藻33-55,根據(jù)布達(dá)佩斯條約于2009年 10月13日保藏在美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209),專(zhuān)利保藏編號(hào)PTA-10397。在另一實(shí)施例中,分離出色素形成減少的原殼小球 藻株,其為原殼小球藻25-32,根據(jù)布達(dá)佩斯條約于2009年10月13日保藏在美國(guó)典型培 養(yǎng)物保藏中心(10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110-2209),專(zhuān)利保藏編號(hào) PTA-10396。
[0101 ] C.微藻.的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件
[0102] 根據(jù)本發(fā)明的方法在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)微藻以繁殖生物質(zhì)。在本發(fā)明的方法中, 在沒(méi)有光的情況下在含固定碳和/或固定氮源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)微藻品種。這種生長(zhǎng)被稱(chēng)為 異養(yǎng)生長(zhǎng)。例如對(duì)于一些微藻品種來(lái)說(shuō),在氮有限的條件下長(zhǎng)時(shí)間(如10至15天或更長(zhǎng)) 地異養(yǎng)生長(zhǎng)導(dǎo)致在細(xì)胞中積累高含量的脂質(zhì)。
[0103] 微藻培養(yǎng)基通常含有的組分例如有固定碳源(下文討論)、固定氮源(如蛋白
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