專(zhuān)利名稱(chēng)：:制備蛋白質(zhì)類(lèi)植物增味劑的方法制備蛋白質(zhì)類(lèi)植物增味劑的方法發(fā)明背景富含蛋白質(zhì)的植物材料，如油籽餅，谷類(lèi)谷蛋白和大豆，被廣泛用作制備脫水或液體湯、醬汁(sauce)和調(diào)味品的增味劑。這些用途需要水解蛋白質(zhì)類(lèi)材料(proteinaceousmaterial)，籍此將植物蛋白降解為可吸收的氨基酸和短肽。一般使用化學(xué)方法進(jìn)行水解。例如，可以用濃鹽酸水解蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料(proteinaceousvegetablematerial),然后用氫氧化鈉中和得到的水解物。通過(guò)過(guò)濾除去不溶餾分后，將水解物進(jìn)行脫色、濃縮和/或干燥，得到可用作調(diào)味料或食品添加劑的材料。盡管在工業(yè)操作中易于實(shí)施，這種化學(xué)水解工藝具有特定的局限。酸性水解導(dǎo)致一些必需氨基酸的部分或全部分解。此外，酸性水解過(guò)程中會(huì)生成如氯乙醇的氯化的副產(chǎn)物，引起可能的健康顧慮。一個(gè)另外的問(wèn)題是，使用氫氧化鈉中和酸性混合物導(dǎo)致終產(chǎn)品中的高鹽含量，這會(huì)使其不適用于制備尋求低鹽攝入量飲食的個(gè)體的食品。為了避免與蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料化學(xué)水解相關(guān)的問(wèn)題，對(duì)使用酶法進(jìn)行水解的興趣增加了。為從植物材料中釋放出盡可能多的氨基酸，使用內(nèi)切蛋白酶和外切蛋白酶的復(fù)雜混合物(國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)W094/25580)或者內(nèi)切蛋白酶和廣譜外切蛋白酶的組合(國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)W098/27827)進(jìn)行酶水解工藝。然而，酶水解并非沒(méi)有缺點(diǎn)。例如，酶反應(yīng)一般效率低，由于它們會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)類(lèi)材料的部分消化，和游離谷氨酸鹽或MSG(谷氨酸一鈉)的低產(chǎn)量，后者是一種在水解物的感知風(fēng)味中關(guān)鍵的氨基酸。而且，作為酶反應(yīng)產(chǎn)生的部分消化的結(jié)果，可能會(huì)形成會(huì)使水解產(chǎn)物產(chǎn)生不愉快味道的較大的肽。蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料酶水解的低效率基本上是由于植物材料中高含量的纖維和復(fù)雜碳水化合物引起的。碳水化合物，例如纖維素或葡聚糖，在植物材料內(nèi)形成剛性并且穩(wěn)定的網(wǎng)絡(luò)，大大地減少了植物蛋白暴露于蛋白酶或肽酶。因此，為了提高植物來(lái)源的材料的酶水解，必要的是使用纖維水解酶破壞碳水化合物的網(wǎng)絡(luò)，以提高水解過(guò)程中植物蛋白暴露于蛋白酶和肽酶。在提高酶水解過(guò)程效率的嘗試中，過(guò)去是在水解混合物中加入如酵母、細(xì)菌和真菌的微生物。在這種改進(jìn)的酶解工藝中，反應(yīng)混合物中微生物的細(xì)胞壁被破壞，使得胞內(nèi)谷氨酰胺酶和肽酶釋放進(jìn)入介質(zhì)中。釋放的酶隨后幫助蛋白質(zhì)類(lèi)材料的水解，提高了整個(gè)水解工藝的速率。已通過(guò)用揮發(fā)性有機(jī)溶劑(如丙酮和乙醇)，或季銨鹽或表面活性劑(參見(jiàn)，例如美國(guó)專(zhuān)利號(hào)2，536，171)處理微生物得到酵母細(xì)胞壁的破碎。然而，這種方法需要使用大量的酵母(酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例為1.1I)，這反而會(huì)影響得到的水解物的風(fēng)味。而且，在破裂步驟中使用的化學(xué)物質(zhì)可能會(huì)進(jìn)入到最終產(chǎn)品中，潛在地?fù)p害其純度和質(zhì)量。在一個(gè)可選方法中，纖維水解酶，例如半纖維素酶，被用于水解酵母的細(xì)胞壁并且使得細(xì)胞內(nèi)的酵母酶釋放到反應(yīng)混合物中。不幸的是，這種方法只能賦予最終水解物中谷氨酸鹽(glutamate)的普通產(chǎn)量(O.2%-2.I%w/wMSG)。參見(jiàn),例如，美國(guó)專(zhuān)利號(hào)6，569，476。[0009]由于酶水解通常需要長(zhǎng)的接觸時(shí)間，存在蛋白質(zhì)類(lèi)材料被細(xì)菌污染腐敗的可能。防止細(xì)菌污染腐敗或形成的一個(gè)常見(jiàn)策略是使用防腐劑，如苯(甲)酸鈉或氯化鈉，預(yù)處理反應(yīng)混合物。然而，這些防腐劑不僅影響最終產(chǎn)品的風(fēng)味，它們還大大的增加其鈉含量。而且，在水解過(guò)程中使用防腐劑還可能不被關(guān)注“純天然”產(chǎn)品的消費(fèi)者接受?？蛇x的，可以通過(guò)在水解之前對(duì)蛋白質(zhì)類(lèi)材料高壓殺菌來(lái)避免腐敗。然而，這將導(dǎo)致如維生素B、c和E的營(yíng)養(yǎng)成分的熱破壞，并且還可能使得到的材料產(chǎn)生不受歡迎的味道。因此對(duì)高效地酶水解蛋白質(zhì)類(lèi)植物蛋白的方法存在需求。這種方法應(yīng)能制備具有高谷氨酸鹽和可溶性肽含量以及良好風(fēng)味特征的水解物。還存在確定一種把水解過(guò)程中的腐敗和/或細(xì)菌污染減少到最小的蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料加工方法的需求。本發(fā)明專(zhuān)注于所有這些需求。附圖簡(jiǎn)要說(shuō)明為說(shuō)明本發(fā)明，按照本發(fā)明的某些實(shí)施方式，在附圖中進(jìn)行了描述。然而，本發(fā)明并不局限于實(shí)施方式中描述的明確安排和手段。圖I是說(shuō)明了根據(jù)本發(fā)明生產(chǎn)蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料增味劑產(chǎn)品的方法的流程圖。定義本申請(qǐng)使用的定義用于說(shuō)明目的，并不限制本發(fā)明在實(shí)踐中所用的范圍。除非另有說(shuō)明，此處使用的所有科技術(shù)語(yǔ)一般具有于本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所通常理解的相同含義。通常，化學(xué)、分析化學(xué)，和食品化學(xué)中所用術(shù)語(yǔ)和實(shí)驗(yàn)步驟是那些在本領(lǐng)域中公知和常用的。此處使用的冠詞“一個(gè)(a)”和“一個(gè)(an)”是指冠詞語(yǔ)法客體上的一個(gè)或多于一個(gè)(即至少一個(gè))。例如，“一種元素”(“anelement”)是指一種元素或多于一種元素。此處使用的術(shù)語(yǔ)“植物”是指源自植物界的活的有機(jī)體的植物基材料。術(shù)語(yǔ)“植物”包括葉、種子、根、塊莖(tuber)、球莖(bulb)、花、果實(shí)、莖(stem)、嫩芽(shoot)、果仁，和它們的任意組合。此處使用的術(shù)語(yǔ)“蛋白水解活性”是指導(dǎo)致肽鍵水解的酶解活性。此處使用的術(shù)語(yǔ)“纖維水解活性”是指破壞如但并不局限于纖維素和葡聚糖的纖維材料的酶解活性。發(fā)明詳述一方面，本發(fā)明是基于可以單獨(dú)使用商業(yè)酶或優(yōu)選使用商業(yè)酶與新鮮面包酵母(freshbaker’syeast)的組合來(lái)制備水解植物蛋白(HVP)的意外發(fā)現(xiàn)。當(dāng)使用商業(yè)酶與新鮮面包酵母的組合時(shí)，酵母-蛋白比的范圍為約O.075I至約O.75I。相對(duì)于只使用商業(yè)可獲得的蛋白酶和肽酶，其中得到的MSG最大值為約5%的方法，這種比例提供了短時(shí)間內(nèi)的具有高達(dá)10%的谷氨酸一鈉(MSG)的高HVP產(chǎn)量。與在水解反應(yīng)中使用I.I:I的酵母-蛋白比，并且因使用大量的酵母而生產(chǎn)出具有特殊的酵母味道和相對(duì)低MSG含量(O.2%-2.1%w/w)的終產(chǎn)品的已知酶解方法相比，這種新方法表現(xiàn)出意想不到的進(jìn)步。另一方面，本發(fā)明包括在制備HVP中使用的蛋白質(zhì)類(lèi)材料可以使用兩步法被水解溶解和巴氏滅菌的意外發(fā)現(xiàn)。根據(jù)這一方法，提供包含植物材料的第一含水系統(tǒng)。用至少一種第一蛋白酶處理該第一含水系統(tǒng)，在溫度約60°C-約75°C下保持約3小時(shí)-約6小時(shí)以得到第二含水系統(tǒng)。隨后優(yōu)選使用新鮮面包酵母或至少一種第二蛋白酶處理該第二含水系統(tǒng)，并在溫度約50°C-約60°C下保持約48小時(shí)-約96小時(shí)。得到的材料具有少量或無(wú)細(xì)菌污染并且可用于根據(jù)本發(fā)明制備水解的植物蛋白。水解的植物蛋白的制備一方面，本發(fā)明包含一種使用單獨(dú)的商業(yè)酶或優(yōu)選使用商業(yè)酶與新鮮面包酵母的組合物從蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料制備水解植物蛋白的方法。本發(fā)明的方法可用的蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料可以是一種植物蛋白質(zhì)類(lèi)材料包括，但并不局限于，大豆，小麥胚芽，玉米谷蛋白，大米谷蛋白，小麥谷蛋白，土豆，苜蓿，燕麥及其類(lèi)似物，或可以是由含蛋白材料和碳水化合物制備的發(fā)酵蛋白曲(koji)。所述碳水化合物可以是，例如小麥粉，烤麥(roastedwheat)或麥麩。種子(例如向日葵、南瓜、倭瓜(squash)、罌粟、芝麻、亞麻、鼠尾草、芹菜、油菜籽、棉籽和香菜)，豆科種子(例如豌豆、花生、豆、大豆和小扁豆)，堅(jiān)果(例如胡桃、椰子、松子、腰果、山核桃、栗子、杏仁、巴西堅(jiān)果和榛子)，和谷物(小麥、玉米、燕麥、黑麥、大米和大麥)是本發(fā)明的方法可用的其他蛋白質(zhì)植物原料。根據(jù)本發(fā)明的方法，所述蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料被剪切和溶解或懸浮于含水溶劑中以生成含水系統(tǒng)。優(yōu)選，所述含水系統(tǒng)中的任何不溶性材料隨后通過(guò)過(guò)濾、離心或傾析(decantation)去除。在一個(gè)實(shí)施方式中，隨后使用新鮮面包酵母和至少一種纖維水解酶處理所述含水系統(tǒng)。所述新鮮面包酵母加入到含水系統(tǒng)中，并且隨后向該含水系統(tǒng)中加入至少一種纖維水解酶?；蛘撸紫认蛟摵到y(tǒng)中加入至少一種纖維水解酶，隨后向該含水系統(tǒng)中加入新鮮面包酵母。優(yōu)選新鮮面包酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例范圍為約O.075I至約O.751，由于其意想不到地使得水解的植物蛋白具有用1.1I的酵母-蛋白質(zhì)類(lèi)材料比例所得到的(如之前在美國(guó)專(zhuān)利號(hào)2，536，171中所報(bào)道的)5-50倍的MSG量。在一個(gè)實(shí)施方式中，新鮮面包酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例范圍為約O.075I至約O.75I。在另一個(gè)實(shí)施方式中，新鮮面包酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例范圍為約O.08I至約O.5I。在又一個(gè)實(shí)施方式中，新鮮面包酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例范圍為約O.II至約O.25I。在仍然是另一實(shí)施方式中，新鮮面包酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例為約O.II。在一個(gè)更進(jìn)一步的實(shí)施方式中，新鮮面包酵母與蛋白質(zhì)類(lèi)材料的比例為約O.25I。優(yōu)選具有約66-70%的水分含量的新鮮商業(yè)面包酵母(釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。例如,可以使用壓縮菲氏酵母,拉曼酵母和紅星酵母。不希望被理論限制，所述至少一種纖維水解酶加入到反應(yīng)混合物中被認(rèn)為用以水解酵母的細(xì)胞壁并使得胞內(nèi)酵母肽酶和谷氨酰胺酶釋放到水解物中以增強(qiáng)蛋白質(zhì)類(lèi)材料的溶解。加入的纖維水解酶是一種能夠水解植物原料中存在的碳水化合物和纖維的酶。一方面，這種酶可以為糖酶。此處使用的術(shù)語(yǔ)“糖酶”(“carbohygrase”)是指能夠至少催化水解含碳水化合物的目標(biāo)底物的任意酶?！八狻笔侵该复俳到夂妓衔锏哪繕?biāo)底物，包括復(fù)雜碳水化合物如纖維素、半纖維素、果膠、半纖維素木聚糖鏈，和/或如戊糖和己糖的糖類(lèi)組分中的其他五碳糖聚合物。纖維素酶是一種本發(fā)明的方法可用的糖酶。更優(yōu)選，包括作為水性酶組分的一部分時(shí)，纖維素酶應(yīng)該基本上不含任何微生物。纖維素酶可以源自許多不同的來(lái)源，例如真菌源、植物源、細(xì)菌源、動(dòng)物源，或其任意組合。除纖維素酶外，其它糖酶，如半纖維素酶，α-半乳糖苷酶，蔗糖酶(invertase)，甘露聚糖酶，β-gluconase,β-葡聚糖酶,阿拉伯聚糖酶，多聚半乳糖醒酸酶，阿魏酸酯酶，木聚糖酶，半乳糖苷酶，呋喃果糖苷酶，α-淀粉酶，β-淀粉酶，果膠酶，果膠解聚酶，果膠甲基酯酶，果膠裂解酶，葡糖糖化酶，寡-I，6-葡萄糖苷酶，乳糖酶，β-D-葡萄糖苷酶，或任意這些的任意組合，是根據(jù)本發(fā)明的方法適于單獨(dú)或與纖維素酶結(jié)合使用的其他非詳盡糖酶的例子。優(yōu)選，水性糖酶組分·包括纖維素酶和半纖維素酶，α-半乳糖苷酶，甘露聚糖酶，β-gluconase,β_葡聚糖酶，阿拉伯聚糖酶，多聚半乳糖醒酸酶,木聚糖酶，β_半乳糖苷酶，呋喃果糖苷酶，α-淀粉酶，β-淀粉酶，果膠酶，轉(zhuǎn)化酶，果膠解聚酶，果膠甲基酯酶，果膠裂解酶，葡糖糖化酶，寡-1，6-葡萄糖苷酶，乳糖酶或βD-葡萄糖苷酶(beta-d-glucosidase)的任意組合。在一個(gè)實(shí)施方式中，纖維素酶和半纖維素酶的混合物被用于本發(fā)明的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，纖維素酶，半纖維素酶和果膠酶的混合物被用于本發(fā)明的方法。可用于本發(fā)明的一些纖維素酶和糖酶的非詳盡例子包括淀粉糖化酶80(Diastase80)(羅門(mén)哈斯公司)，Depol40L(BiocatalystPteLtd.),Celluclast(NovoNordisk),纖維素酶AP和/或纖維素酶T(AmanoEnzymes美國(guó)，芝加哥，III.)；Enzeco纖維素酶CEP和/或Enzeco纖維素酶CE-2(酶發(fā)展公司(EDC)，紐約，N.Y.);纖維素酶4000或CrystalzymeCran(ValleyResearchInc.,SouthBend,Ind.)；ViscozymeL,或Cellubrix,Peelzyme,Gamanasel.OL(Novozymes,Franklinton,NC.)；Multifect纖維素酶(Danisco,Calif.);或Rapidasetropicalcloud,CytolasePC15,CytolaseCL(GistBrocades,N.J.)。合適果膠酶的一些非詳盡例子包括果膠酶500，000AJDU/GM或果膠酶3,500END0-PG/GM(Bio-cat)，果膠酶p-II(AmanoEnzymes美國(guó))；或Multifect果膠酶FE(Danisco)。本發(fā)明適合的淀粉酶包括Enzecofungal淀粉酶(EDC),淀粉酶DS,淀粉酶SAmano,淀粉酶THSAmano,和淀粉酶AYAmano(AmanoEnzymes美國(guó))。合適的α-半乳糖苷酶包括a-D-半乳糖苷酶或a-D-半乳糖苷酶DS(AmanoEnzymes美國(guó))，Enzeco濃縮ct-半乳糖昔酶(EDC);和ValidaseAGS(ValleyResearch,Inc.)0能夠用于本發(fā)明的合適的半纖維素酶包括Enzeco半纖維素20M(EDC);半纖維素酶Amano90(AmanoEnzymes美國(guó))；和MultifectXL(Danisco)0根據(jù)本發(fā)明使用酶時(shí)，所述酶可以以任意形式使用，例如顆粒狀、濃縮物、固態(tài)、糊狀、液態(tài)、如噴霧狀、蒸汽態(tài)或上述的作為水性酶組合物的一部分。加入的酶組分中的酶濃度一般可以為約O.0001wt%至約99wt%，以酶組分的總重計(jì)。加入的酶組分可選擇性的包括蔗糖，果糖，灰(ash)，醇，和能共存的、不會(huì)阻礙酶的生化催化速率的任意其它組分。水解反應(yīng)在設(shè)定的溫度下維持設(shè)定的時(shí)間以充分地將蛋白質(zhì)類(lèi)材料水解到所需程度。本領(lǐng)技術(shù)人員可以采用已知的方法測(cè)定水解程度，如層析法。在加工中可以對(duì)反應(yīng)混合物的味道進(jìn)行取樣，以確保產(chǎn)品的質(zhì)量沒(méi)有被水解不足或過(guò)度而破壞。溶解和殺菌另一方面，本發(fā)明包括一種蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料溶解和巴氏滅菌的兩步法。在一個(gè)非限制性實(shí)施方式中，得到的溶解的和滅菌的蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料可用于制備水解的植物蛋白(hydrolyzedvegetableprotein,HVP)。在該方法的第一溶解步驟中，用至少一種第一熱穩(wěn)定蛋白酶處理蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料，并且在約60°C(140°F)至約75°C(167°F)的溫度范圍內(nèi)保持約3小時(shí)-約6小時(shí)。在一個(gè)非限制性實(shí)施方式中，該步驟中蛋白質(zhì)類(lèi)材料至少部分液化。在該方法的第二步驟中，所述材料在約50°C(122°F)至約60°C(140°F)的溫度范圍下保持約48小時(shí)至約96小時(shí)。任選地，所述材料在進(jìn)一步用新鮮面包酵母或至少一種第二熱穩(wěn)定蛋白酶處理。在一個(gè)非限制性實(shí)施方式中，該步驟中蛋白質(zhì)類(lèi)材料進(jìn)一步水解。得到的水解材料具有良好的感官特性并且在本發(fā)明方法的條件下，細(xì)菌污染很小或不存在。上述使用的蛋白酶可以是酒曲發(fā)酵過(guò)程中生產(chǎn)的酶，用于接種蛋白材料的乳酸菌所產(chǎn)生的蛋白水解酶，工業(yè)純的蛋白水解酶(technicalproteolyticenzymes),或其混合物。工業(yè)純的酶可以是，例如蛋白酶(包括內(nèi)切蛋白酶，外肽酶，羧肽酶，氨肽酶以及內(nèi)切和外切蛋白酶)，肽酶或谷氨酰胺酶(例如Flavorzvme,Alcalase,Dextrozyme,和AMG,均由NovoNordiskFermentAG,Dittigen,芬蘭提供)。術(shù)語(yǔ)“工業(yè)純的酶”是指這些酶已經(jīng)被分離和純化以去除干擾活性的事實(shí)。合適的內(nèi)切蛋白酶可以從動(dòng)物、植物和微生物材料中得到。它們包括重組酶，g卩，由基因工程技術(shù)得到的酶。優(yōu)選的具有用于切割相鄰特定氨基酸偏好的選擇性?xún)?nèi)切蛋白酶包括胰蛋白酶(EC3.4.21.4)，彈性蛋白酶(EC3.4.21.36)，凝乳蛋白酶(EC3.4.21.I)，嗜熱蛋白酶(EC3.4.24.27)，脯氨酰寡肽酶(EC3.4.21.26)，谷氨酰內(nèi)肽酶(EC3.4.21.19)，微生物膠原酶(EC3.4.24.3)，肽酰-Asp金屬肽酶(EC3.4.24.33)，甘氨酰內(nèi)肽酶(EC3.4.22.25)，saccharolysin(EC3.4.24.37)，中性蛋白酶(EC3.4.24.28)，streptogrisinB(EC3.4.21.81)，谷氨酰內(nèi)肽酶11(EC3.4.21.82)，工程化脯氨酸特異性肽酰-脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶和具有類(lèi)凝乳酶(rennet-like)特異性的酶，例如微生物凝乳酶，例如，毛霉胃蛋白酶(Mucorpepsin)(EC3.4.23.23)0優(yōu)選的不具有強(qiáng)切割相鄰特定氨基酸偏好，但切割幾乎相鄰所選氨基酸組的非選擇性?xún)?nèi)切蛋白酶包括例如枯草桿菌蛋白酶(EC3.4.21.14)和木瓜蛋白酶(EC3.4.22.2)。合適的外肽酶(或外切蛋白酶，該術(shù)語(yǔ)可以替換)可以包括羧肽酶和/或氨肽酶。這些外切酶可以從動(dòng)物、植物或微生物材料中獲得。它們包括重組酶，例如，通過(guò)基因工程技術(shù)得到的酶。優(yōu)選的具有切割相鄰特定氨基酸偏好的限制性羧肽酶包括羧肽酶B(EC3.4.17.2)，源自黑曲霉(A.niger)的CPD-1(p印G)和CPD-II(p印F)(Degan等，應(yīng)用環(huán)境微生物學(xué)，58(7)=2144-52,1992)ο優(yōu)選的不具有強(qiáng)切割相鄰特定氨基酸偏好，但切割幾乎相鄰任意氨基酸殘基的非選擇性羧肽酶包括源自微紫青霉菌(P.janthinellum)的CPD-Si和源自釀酒酵母(S.cerevisae)的CPD-Y(Degan等，應(yīng)用環(huán)境微生物學(xué)，58(7):2144-52，1992)。優(yōu)選的具有切割相鄰特定氨基酸偏好的選擇性氨肽酶包括prolyliminopeptidase(EC3.4.11.5),源自蛋白水解氣單胞菌(Aeromonasproteolytica)的細(xì)菌亮氨酰氨肽酶(EC3.4.11.10)或源自曲霉種的亮氨酰氨肽酶，和甲硫胺酰氨肽酶(EC3.4.11.18)和如在EP773990中描述的苯丙氨酸特異性氨肽酶。優(yōu)選的不具有強(qiáng)切割相鄰特定氨基酸偏好，但切割相鄰幾乎任意氨基酸殘基的非選擇性氨肽酶包括嗜熱氨肽酶(EC3.4.11.12)。優(yōu)選內(nèi)切和外切蛋白酶的組合包括(a)streptogrisinB或胰蛋白酶或木瓜蛋白酶與CPD11(釋放精氨酸和賴(lài)氨酸)；(b)彈性蛋白酶或嗜熱蛋白酶或中性蛋白酶與CPDI(釋放酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸)；(c)嗜熱蛋白酶或中性蛋白酶與源自曲霉的細(xì)菌亮氨酰氨肽酶或亮氨酰氨肽酶(釋放亮氨酸、He、苯丙氨酸和纈氨酸)；(d)中性蛋白酶或谷草桿菌蛋白酶與CPDI(釋放苯丙氨酸和丙氨酸)；(e)彈性蛋白酶與CPDI(釋放丙氨酸)；(f)類(lèi)凝乳酶蛋白酶和或源自曲霉的亮氨酰氨肽酶或甲硫胺酰氨肽酶(釋放甲硫氨酸)；和(g)工程化脯氨酸特異性肽酰-脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶(cyproase)與脯氨酰氨肽酶(釋放脯氨酸)；(h)脯氨酸特異性?xún)?nèi)切蛋白酶與麥芽蛋白酶或CPD-Y(釋放脯氨酸)；和(i)谷氨酸內(nèi)肽酶與CPD-I(釋放谷氨酸)。本領(lǐng)域技術(shù)人員只需通過(guò)常規(guī)實(shí)驗(yàn)就將識(shí)別并能夠確認(rèn)此處描述的特定程序、實(shí)施方式、權(quán)利要求和實(shí)施例的大量等價(jià)體。這種等效體也被認(rèn)為在本發(fā)明的范圍之內(nèi)并被所附權(quán)利要求所覆蓋。例如，應(yīng)理解的是，本領(lǐng)域公知的可選擇物和使用不超過(guò)常規(guī)實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)條件的改進(jìn)，包括但并不局限于反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)規(guī)模/體積，和實(shí)驗(yàn)試劑，如溶劑、催化齊U、壓力、大氣條件，例如，氮?dú)?，和還原/氧化劑，都應(yīng)當(dāng)被認(rèn)為包含在本申請(qǐng)的范圍之內(nèi)。應(yīng)當(dāng)理解這里提供的各種數(shù)值和范圍，包括這些數(shù)值和范圍中的全部值和范圍，都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。而且，落在這些范圍之內(nèi)的所有值，以及范圍的上下端點(diǎn)值都落在本申請(qǐng)之內(nèi)。下述實(shí)施例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的各個(gè)方面。實(shí)施例下文將參考以下說(shuō)明本發(fā)明各個(gè)方面的實(shí)施例來(lái)描述本發(fā)明。實(shí)施例僅僅用于說(shuō)明目的，本發(fā)明不應(yīng)解釋為被這些實(shí)施例所限制，而是應(yīng)該解釋為包含作為此處提供教導(dǎo)的任意和所有顯而易見(jiàn)的變化。Mfi除非另有指示，這里描述的試劑和材料購(gòu)于商業(yè)源并且不需要進(jìn)一步提純就能使用。制備水解植物蛋白的示例工藝實(shí)施例I:圖I為根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方式可制備蛋白質(zhì)植物增味劑(flavorenhancer)的代表性方法的流程圖。因此，參照該圖，植物蛋白材料如小麥蛋白10在高剪切液化器12中剪切。剪切的材料隨后轉(zhuǎn)移至配料罐14中。水16和如Alcalse的內(nèi)切蛋白酶18都被加入配料罐中，在約70°C(158°F)下保持約3小時(shí)以殺滅所有存在的細(xì)菌并溶解該小麥谷蛋白和提高最終產(chǎn)品的產(chǎn)量。加熱至約90°C(194°F)可以用于減少加熱時(shí)間至短如1/2小時(shí)。分批處理的材料隨后最好通過(guò)熱交換器20以提高該混合物的溫度至約100°C(212°F)，保持10分鐘，隨后當(dāng)轉(zhuǎn)移入水解箱22時(shí)，冷卻至約55°C(131°F)。如Flavorzyme的外切蛋白酶22以及面包酵母26和如Viscozyme的糖酶28被加入至水解箱中。該材料在此水解箱中55°C(131°F)下加熱62小時(shí)。我們認(rèn)為Viscozyme水解酵母細(xì)胞壁，導(dǎo)致胞內(nèi)酵母肽酶和谷氨酰胺酶被釋放到水解物中以增強(qiáng)所期望的水解。當(dāng)水解步驟完成后，該材料最好在約20分鐘的時(shí)間段通過(guò)一個(gè)熱交換器28以提高其溫度至約9011C(194°F),于是其進(jìn)入保持箱(holdingtank)30。在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，保持箱內(nèi)的材料轉(zhuǎn)移至常規(guī)過(guò)濾/澄清裝置34。得到的過(guò)濾液36轉(zhuǎn)移至常規(guī)蒸發(fā)裝置38中去除在過(guò)濾液中殘留的部分水。該材料隨后在常規(guī)噴霧干燥裝置40中進(jìn)行噴霧干燥以制備最終干燥蛋白質(zhì)類(lèi)植物蛋白增強(qiáng)/產(chǎn)品42。實(shí)施例2=制備水解植物蛋白過(guò)程中酵母-蛋白比例的影響通過(guò)系統(tǒng)地變化初始反應(yīng)混合物中的酵母-蛋白比例，以及使用不同的材料(小麥谷蛋白或大豆蛋白)作為蛋白質(zhì)來(lái)源，來(lái)研究酵母-蛋白比例對(duì)從蛋白質(zhì)類(lèi)材料發(fā)酵中得到的水解植物蛋白(HVP)的產(chǎn)量和質(zhì)量的影響。這些研究的結(jié)果總結(jié)在下表I中，包括每個(gè)反應(yīng)觀(guān)察到的MSG和HVP的產(chǎn)量，以及終產(chǎn)品的香味的描述。權(quán)利要求1.ー種從蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料生產(chǎn)水解的植物蛋白的方法，包括以下步驟(a)提供含有所述植物材料的第一含水系統(tǒng)；(b)使用新鮮面包酵母和至少ー種纖維水解酶處理所述第一含水系統(tǒng)生成第二含水系統(tǒng)，其中所述酵母與植物材料的比例范圍為約O.075I-約O.75I;和(c)將第二含水溶液在設(shè)定的溫度下保持給定的時(shí)間段，由此水解所述植物材料。2.權(quán)利要求I的方法，其中所述植物材料包含大豆、小麥胚芽、玉米谷蛋白、大米谷蛋白或小麥谷蛋白。3.權(quán)利要求I的方法，其中所述至少一種纖維水解酶為糖酶。4.權(quán)利要求3的方法，其中所述糖酶選自纖維素酶、半纖維素酶、α-半乳糖苷酶、蔗糖酶、甘露聚糖酶、β-gluconase、β-葡聚糖酶、阿拉伯聚糖酶、多聚半乳糖醒酸酶、阿魏酸酯酶、木聚糖酶、β-半乳糖苷酶、β-呋喃果糖苷酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、果膠酶、果膠解聚酶、果膠甲基酯酶、果膠裂解酶、葡糖糖化酶、寡-1，6-葡萄糖苷酶、乳糖酶、β-D-葡萄糖苷酶及其組合。5.權(quán)利要求I的方法，其中所述酵母與植物材料的比例范圍為約O.08I-約O.5I。6.權(quán)利要求5的方法，其中所述酵母與植物材料的比例范圍為約O.II-約O.25I。7.權(quán)利要求6的方法，其中所述酵母與植物材料的比例范圍為約O.II。8.權(quán)利要求6的方法，其中所述酵母與植物材料的比例范圍為約O.25I。9.ー種從蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料生產(chǎn)水解的植物蛋白的方法，包括以下步驟(a)提供含有所述植物材料的第一含水系統(tǒng)；(b)使用至少ー種纖維水解酶處理所述第一含水系統(tǒng)生成第二含水系統(tǒng)；和(C)將第二含水溶液在設(shè)定的溫度下保持給定的時(shí)間段，由此水解所述植物材料。10.權(quán)利要求9的方法，其中所述植物材料包含大豆、小麥胚芽、玉米谷蛋白、大米谷蛋白或小麥谷蛋白。11.權(quán)利要求9的方法，其中所述至少一種纖維水解酶為糖酶。12.權(quán)利要求11的方法，其中所述糖酶選自纖維素酶、半纖維素酶、α-半乳糖苷酶、蔗糖酶、甘露聚糖酶、β-gluconase、β-葡聚糖酶、阿拉伯聚糖酶、多聚半乳糖醒酸酶、阿魏酸酯酶、木聚糖酶、β-半乳糖苷酶、β-呋喃果糖苷酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶、果膠酶、果膠解聚酶、果膠甲基酯酶、果膠裂解酶、葡糖糖化酶、寡-1，6-葡萄糖苷酶、乳糖酶、β-D-葡萄糖苷酶及其組合。13.ー種溶解和巴氏殺菌蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料的方法，包括以下步驟(a)提供含有所述植物材料的第一含水系統(tǒng)；(b)使用至少ー種第一蛋白酶處理所述第一含水系統(tǒng)并將所述第一含水系統(tǒng)在溫度范圍為約60°C-約75°C保持約3小時(shí)-約6小時(shí)的時(shí)間段，以生成第二含水系統(tǒng)；(C)任選地使用新鮮面包酵母和至少ー種第二蛋白酶處理所述第二含水系統(tǒng)；和(d)將第二含水系統(tǒng)在溫度范圍為約50°C-約60°C下保持約48小時(shí)-約96小時(shí)的時(shí)間段。14.權(quán)利要求13的方法，其中所述至少ー種第一蛋白酶和所述至少ー種第二蛋白酶獨(dú)立地選自在酒曲發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的酶、由乳酸菌產(chǎn)生的蛋白水解酶、エ業(yè)純的蛋白水解酶及其組合。15.權(quán)利要求14的方法，其中所述エ業(yè)純的蛋白水解酶選自蛋白酶、肽酶和谷氨酰胺酶。16.權(quán)利要求14的方法，其中在將所述第一含水系統(tǒng)在溫度范圍為約60°C-約75°C保持約3小時(shí)-約6小時(shí)的時(shí)間段以生成第二含水系統(tǒng)后，將所述第二含水系統(tǒng)的溫度升高至約IOO0C017.權(quán)利要求14的方法，其中在將所述第二含水系統(tǒng)在溫度范圍為約50°C-約60°C保持約48小時(shí)-約96小時(shí)的時(shí)間段后，將所述第二含水系統(tǒng)的溫度升高至約90°C。專(zhuān)利摘要本發(fā)明包括一種使用商業(yè)酶和還最適的新鮮面包酵母作為蛋白酶和肽酶來(lái)源，從蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料生產(chǎn)水解的植物蛋白的方法。本發(fā)明還包括一種溶解和巴氏殺菌蛋白質(zhì)類(lèi)植物材料的方法。文檔編號(hào)A23L1/23GKCN102845710SQ201210215841公開(kāi)日2013年1月2日申請(qǐng)日期2012年5月12日發(fā)明者T·程,D·迪斯德梅迪納申請(qǐng)人:格里菲思實(shí)驗(yàn)室國(guó)際有限公司導(dǎo)出引文BiBTeX,EndNote,RefMan