本發(fā)明涉及養(yǎng)生保健品及茶產(chǎn)品領(lǐng)域，且特別涉及一種石斛紅曲及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
自由基是具有高度化學(xué)活性的物質(zhì)，是生命活動(dòng)中多種生化反應(yīng)的中間產(chǎn)物，人的生命活動(dòng)離不開自由基，但體內(nèi)自由基過多或清除過慢，自由基則會攻擊并損壞大分子，對細(xì)胞膜、核酸及機(jī)體蛋白質(zhì)等造成損傷，是引起機(jī)體衰老的根本原因，也是誘發(fā)惡性腫瘤等許多疾病的重要起因。
因此，及時(shí)清除體內(nèi)過多的自由成為了目前研究的重點(diǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的第一目的在于提供一種石斛紅曲，該石斛紅曲具有良好的清除自由基的作用，能夠抗氧化，延緩衰老。
本發(fā)明的第二目的在于提供一種石斛紅曲的制作方法，該制備方法設(shè)計(jì)科學(xué)，能夠制備得到抗氧化性能良好的石斛紅曲。
本發(fā)明的第三目的在于提供一種石斛紅曲茶，該石斛紅茶易于攜帶，飲用方便，適用于各種場合進(jìn)行抗氧化保健。
本發(fā)明的第四目的在于提供一種石斛紅曲姜茶，該石斛紅曲姜茶具有良好的抗氧化和驅(qū)寒的功效。
本發(fā)明的第五目的在于提供一種石斛紅曲膠囊，該膠囊食用方便，易于攜帶，能夠起到清除自由基的作用。
本發(fā)明的第六目的在于提供一種石斛紅曲咀嚼片或含片，該咀嚼片或含片食用方便，易于攜帶，能夠起到清除自由基的作用。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的。
一種石斛紅曲的制備方法，其包括：將紅曲霉接種于石斛培養(yǎng)基，進(jìn)行第一發(fā)酵得到發(fā)酵種子液；將發(fā)酵種子液接種于石斛發(fā)酵基質(zhì)，進(jìn)行第二發(fā)酵，得到石斛紅曲。
一種石斛紅曲，石斛紅曲采用上述的石斛紅曲的制備方法制得。
一種石斛紅曲茶，將石斛紅曲與茶葉按照4:1-1.5的質(zhì)量比混合制得。
一種石斛紅曲姜茶，將石斛紅曲與茶葉、姜粉和黑糖按照4：0.5-1:0.1-0.2:0.2-0.5的質(zhì)量比混合制得。
一種石斛紅曲膠囊，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎后制成。
一種石斛紅曲咀嚼片或含片，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎后壓片制得。
本發(fā)明實(shí)施例的有益效果是：
本發(fā)明提供了一種石斛紅曲，該石斛紅曲結(jié)合了中草藥源性和微生物源性抗氧化的物質(zhì)的特點(diǎn)，能夠利用微生物轉(zhuǎn)化中藥活性成分。微生物在生長過程中可以分泌幾十種胞外酶于培養(yǎng)基中，其生命活動(dòng)所產(chǎn)生的胞內(nèi)酶更是成百上千，這些豐富而強(qiáng)大的酶系統(tǒng)就可能成為中藥發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。
本發(fā)明提供了一種石斛紅曲的制備方法，包括將紅曲霉接種于石斛培養(yǎng)基，進(jìn)行第一發(fā)酵得到發(fā)酵種子液；將發(fā)酵種子液接種于石斛發(fā)酵基質(zhì)，進(jìn)行第二發(fā)酵，得到石斛紅曲。分兩次發(fā)酵，能夠使得石斛中大量的以聚合物形式存在的多糖物質(zhì)得到充分的降解，在保持石斛原有功效的同時(shí)，還具有紅曲發(fā)酵產(chǎn)物特有的保健功能及天然色澤。
本發(fā)明提供了一種石斛紅曲茶，由上述石斛紅曲與茶葉按照4:1-1.5的質(zhì)量比混合制得，該石斛紅曲茶具有石斛紅曲的保健功效，又方便飲用和攜帶，尤其是在該配比范圍內(nèi)制得的石斛紅曲茶的保健效果更好。
本發(fā)明提供了一種石斛紅曲姜茶，將石斛紅曲與茶葉、姜粉和黑糖按照4：0.5-1:0.1-0.2:0.2-0.5的質(zhì)量比混合制得。該石斛紅曲姜茶同時(shí)具有抗氧化和驅(qū)寒的功效，又方便飲用和攜帶，尤其是在該配比范圍內(nèi)制得的石斛紅曲姜茶，能夠充分利用石斛紅曲、茶葉、姜粉和黑糖的各自的優(yōu)勢，協(xié)同協(xié)作，起到良好的保健功效。
本發(fā)明提供了一種石斛紅曲膠囊，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎后制成。該膠囊具有石斛紅曲的保健功效，且食用方便，易于攜帶，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎有利于石斛紅曲中的藥效更好地被人體吸收。
本發(fā)明提供了一種石斛紅曲咀嚼片或含片，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎后壓片制得。該膠囊具有石斛紅曲的保健功效，且食用方便，易于攜帶，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎有利于石斛紅曲中的藥效更好地被人體吸收，壓制成片劑在無需其他添加物的同時(shí)最大程度地保留了石斛紅曲的功效。
具體實(shí)施方式
為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
下面對本發(fā)明實(shí)施例的一種石斛紅曲及其制備方法與應(yīng)用進(jìn)行具體說明。
本發(fā)明實(shí)施例提供的一種石斛紅曲由以下制備方法制備得到：紅曲霉接種于石斛培養(yǎng)基，進(jìn)行第一發(fā)酵得到發(fā)酵種子液。
其中，石斛作為傳統(tǒng)珍稀的名貴中藥，石斛在臨床上廣泛用于慢性萎縮性胃炎及高血糖、抗腫瘤、抗衰老、機(jī)體免疫力低下等多種疾病，而這些疾病的產(chǎn)生在很大程度上都與體內(nèi)活性氧的代謝失調(diào)有關(guān)；紅曲酶具有很高的藥用價(jià)值，具有豐富的酶系統(tǒng)，能夠轉(zhuǎn)化和修飾中草藥的活性成分，是雙向發(fā)酵體系用菌種的良好選擇；且紅曲霉的次級代謝產(chǎn)物中富含酚類、色素、黃酮等具有抗氧化作用的物質(zhì)，因此，紅曲霉可以為人體提供抗氧化物質(zhì)，減少氧損傷。
需要說明的是，在本實(shí)施例中，紅曲霉為紅曲霉懸液，紅曲霉懸液中紅曲霉菌體濃度優(yōu)選為3-7×106cfu/ml，將該濃度的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，更有利于石斛培養(yǎng)基中的活性物質(zhì)的轉(zhuǎn)化。
在本實(shí)施例中，每升石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿4-6g；石斛汁8-12ml；蛋白胨4-7g；酵母膏2-4g，葡萄糖15-20g；石斛培養(yǎng)基中各組分的配比有利于其相互之間配合，協(xié)同增效，以達(dá)到更好的效果。
紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的7-10％。在該配比范圍內(nèi)，紅曲霉能夠充分轉(zhuǎn)化石斛培養(yǎng)基中的活性物質(zhì)，使制備得到的發(fā)酵種子液能夠?yàn)槎伟l(fā)酵的接種做好充分的準(zhǔn)備。
在本實(shí)施例中，第一發(fā)酵是指將紅曲霉接種于石斛培養(yǎng)基后，在溫度為27-33℃條件下220-250rpm振蕩培養(yǎng)40-52h。低溫有利于能源的節(jié)省，且不破壞紅曲霉和石斛培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)；在220-250rpm振蕩培養(yǎng)40-52h，有利于紅曲霉與石斛培養(yǎng)基充分接觸和反應(yīng)。
將發(fā)酵種子液接種于石斛發(fā)酵基質(zhì)，進(jìn)行第二發(fā)酵，得到石斛紅曲。
其中，石斛發(fā)酵基質(zhì)由第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:0.6-1的質(zhì)量比混合后滅菌得到。第一發(fā)酵基質(zhì)在本實(shí)施例中，優(yōu)選地由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.3-0.5:0.5-1:1.5-2的質(zhì)量比混合得到；第一發(fā)酵基質(zhì)中各組分的配比有利于其相互之間配合，協(xié)同增效，以達(dá)到更好的效果。在給定的第一發(fā)酵基質(zhì)與水的配比范圍內(nèi)進(jìn)行發(fā)酵，更有利于第一發(fā)酵基質(zhì)與發(fā)酵種子液的反應(yīng)。
第二發(fā)酵使指將發(fā)酵種子液按照料液比8-12％的量接種于石斛發(fā)酵基質(zhì)，發(fā)酵種子液與石斛發(fā)酵基質(zhì)在該配比范圍能夠充分接觸發(fā)生反應(yīng)，從而制備得到抗氧化性能優(yōu)良的石斛紅曲。
需要說明的是，第二次發(fā)酵是在在27-33℃條件下進(jìn)行，該溫度條件有利于發(fā)酵種子液與石斛發(fā)酵基質(zhì)的充分反應(yīng)，且不破壞發(fā)酵種子液與石斛發(fā)酵基質(zhì)中的營養(yǎng)物質(zhì)。
本發(fā)明實(shí)施例還提供了一種石斛紅曲茶，由上述石斛紅曲與茶葉按照4:1-1.5的質(zhì)量比混合制得，該石斛紅曲茶具有石斛紅曲的保健功效，又方便飲用和攜帶，尤其是在該配比范圍內(nèi)制得的石斛紅曲茶的保健效果更好。
本發(fā)明還提供了一種石斛紅曲姜茶，將石斛紅曲與茶葉、姜粉和黑糖按照4：0.5-1：0.1-0.2：0.2-0.5的質(zhì)量比混合制得。該石斛紅曲姜茶同時(shí)具有抗氧化和驅(qū)寒的功效，又方便飲用和攜帶，尤其是在該配比范圍內(nèi)制得的石斛紅曲姜茶，能夠充分利用石斛紅曲、茶葉、姜粉和黑糖的各自的優(yōu)勢，協(xié)同協(xié)作，起到良好的保健功效。
本發(fā)明還提供了一種石斛紅曲膠囊，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎后制成。該膠囊具有石斛紅曲的保健功效，且食用方便，易于攜帶，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎有利于石斛紅曲中的藥效更好地被人體吸收。
本發(fā)明還提供了一種石斛紅曲咀嚼片或含片，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎后壓片制得。該膠囊具有石斛紅曲的保健功效，且食用方便，易于攜帶，將石斛紅曲進(jìn)行超微粉碎有利于石斛紅曲中的藥效更好地被人體吸收，壓制成片劑在無需其他添加物的同時(shí)最大程度地保留了石斛紅曲的功效。
以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的特征和性能作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。
實(shí)施例1
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿4g；石斛汁8ml；蛋白胨4g；酵母膏2g，葡萄糖15g；再將濃度為3×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的7％；然后，在溫度為33℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于250rpm振蕩培養(yǎng)51h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.3：0.5：1.5的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.6的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在33℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例2
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿6g；石斛汁8ml；蛋白胨4g；酵母膏2g，葡萄糖15g；再將濃度為5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為32℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于240rpm振蕩培養(yǎng)52h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.5:0.5:1.5的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:0.7的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在32℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例3
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為7×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的9％；然后，在溫度為31℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于230rpm振蕩培養(yǎng)48h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.5：1.0：2.0的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在31℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例4
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為6×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的10％；然后，在溫度為30℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于220rpm振蕩培養(yǎng)47h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：0.5：2.0的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:0.9的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在28℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例5
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為4×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為29℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于225rpm振蕩培養(yǎng)46h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.3:0.6:1.5的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:1的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在29℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例6
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為6×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為28℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于235rpm振蕩培養(yǎng)45h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.5：0.7：1.8的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.7的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在30℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例7
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為6.5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的9％；然后，在溫度為27℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于245rpm振蕩培養(yǎng)44h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：0.8：1.8的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.9的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在27℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例8
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為5.5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的10％；然后，在溫度為29℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于233rpm振蕩培養(yǎng)43h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：1.0：1.8的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:1的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在27.5℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例9
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為4.5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的7％；然后，在溫度為31℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于247rpm振蕩培養(yǎng)42h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：0.7：1.9的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的8％，且在28.5℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例10
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為3.5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為30℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于234rpm振蕩培養(yǎng)41h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.5：0.8：1.7的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的12％，且在29.5℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例11
本實(shí)施例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為4.5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為31℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于230rpm振蕩培養(yǎng)40h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.3：0.7：2.0的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的11％，且在30.5℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
實(shí)施例12
本實(shí)施例提供一種石斛紅曲茶，該石斛紅曲茶由實(shí)施例7制得的石斛紅曲與茶葉按照4：1的質(zhì)量比混合制得。
實(shí)施例13
本實(shí)施例提供一種石斛紅曲茶，該石斛紅曲茶由實(shí)施例7制得的石斛紅曲與茶葉按照4：1.5的質(zhì)量比混合制得。
實(shí)施例14
本實(shí)施例提供一種石斛紅曲姜茶，該石斛紅曲茶由實(shí)施例8制得的石斛紅曲與茶葉、姜粉、黑糖按照4：0.5：0.1：0.2的質(zhì)量比混合制得。
實(shí)施例15
本實(shí)施例提供一種石斛紅曲姜茶，該石斛紅曲茶由實(shí)施例8制得的石斛紅曲與茶葉、姜粉、黑糖按照4：1：0.2：0.5的質(zhì)量比混合制得。
實(shí)施例16
本實(shí)施例提供一種石斛紅曲膠囊，該石斛紅曲茶由實(shí)施例8制得的石斛紅曲經(jīng)超微粉碎，粒度達(dá)到微米和納米級，然后裝膠囊，制得石斛紅曲膠囊。
實(shí)施例17
本實(shí)施例提供一種石斛紅曲膠囊，該石斛紅曲茶由實(shí)施例8制得的石斛紅曲經(jīng)超微粉碎，粒度達(dá)到微米和納米級，壓片，制得石斛紅曲咀嚼片或含片。
對比例1
本對比例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿2g；石斛汁20ml；蛋白胨10g；酵母膏5g，葡萄糖30g；再將濃度為2×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為33℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于200rpm振蕩培養(yǎng)35h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.2：0.4：2.2的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：1.2的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的11％，且在20℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
對比例2
本對比例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為8×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的20％；然后，在溫度為25℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于200rpm振蕩培養(yǎng)55h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：0.8：1.8的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的11％，且在25℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
對比例3
本對比例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為2.2×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為25℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于200rpm振蕩培養(yǎng)35h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.2：1.2：1的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的11％，且在25℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
對比例4
本對比例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為9×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為25℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于200rpm振蕩培養(yǎng)35h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：0.8：1.8的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：1.2的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的11％，且在25℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
對比例5
本對比例提供了一種石斛紅曲，按照以下制備方法制備得到：
首先，準(zhǔn)備石斛培養(yǎng)基包括：玉米漿5g；石斛汁10ml；蛋白胨5g；酵母膏3g，葡萄糖18g；再將濃度為2.5×106cfu/ml的紅曲霉懸液接種到石斛培養(yǎng)基中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的8％；然后，在溫度為235℃條件下將接種有紅曲霉懸液的石斛培養(yǎng)基于200rpm振蕩培養(yǎng)35h；接著，準(zhǔn)備第一發(fā)酵基質(zhì)；第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4：0.8：1.8的質(zhì)量比混合得到，將第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1：0.8的質(zhì)量比混合后滅菌得到石斛發(fā)酵基質(zhì)，再將發(fā)酵種子液接種到石斛發(fā)酵基質(zhì)中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的15％，且在25℃條件下進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到石斛紅曲。
試驗(yàn)例1
抗氧化活性測定
(1)abts自由基清除實(shí)驗(yàn)
分別取等量的實(shí)施例1-11和對比例1-5提供的石斛紅曲，以及等量的與實(shí)施例1-11處理過程相同的未經(jīng)添加紅曲霉的石斛，設(shè)定為實(shí)驗(yàn)組1-17；
將2.5ml的abts(7mmol/l)和44μl的k2s2o8(140mmol/l)溶液充分混合，在室溫、避光條件下靜置過夜(12h-16h)，得到abts+儲備液。將abts+儲備液用pbs緩沖液(20mmol/l，ph值為7.4)稀釋，用紫外分光光度計(jì)測量，使其在波長734nm處的吸光度值為0.700+0.002，得到abts+工作液。分別取實(shí)驗(yàn)組1-17的30μl的石斛紅曲與3.0mlabts+工作液混合，充分反應(yīng)6min，常溫條件下在波長734nm處測定吸光度值。計(jì)算公式為：清除率＝(a空白-a對照例)/a空白×100％。
式中：a空白為3.0mlabts+工作液加30μl甲醇，測得的吸光度值：a對照例為30μlvc溶液與3.0mlabts+工作液反應(yīng)6min后，測得的吸光度值；檢測樣品時(shí)，將a對照例換成a樣品即可。得到的結(jié)果如表1所示。
(2)dpph自由基清除實(shí)驗(yàn)
取1mldpph(0.1mmol/l，乙醇為溶劑)，0.95mltris-hcl和緩沖液(0.05mol/l，ph值為7.4)，1ml乙醇和分別取實(shí)驗(yàn)組1-17的50μl的石斛紅曲混合30min后波長517nm處常溫條件下測定吸光度值，吸光度值越小，其對自由基的清除能力越強(qiáng)。計(jì)算公式為：清除率(％)＝(a空白-a對照例)/a空白×100％。
式中，a空白指以50μl甲醛代替樣品測得的吸光度值；a對照例為指50μlvc與dpph反應(yīng)2min后測得的吸光度值；檢測樣品時(shí)，將a對照例換成a樣品即可。得到的結(jié)果如表1所示。
(3)抗脂質(zhì)過氧化抑制實(shí)驗(yàn)
使用10％雞蛋黃勻漿液(體積分?jǐn)?shù))作為反應(yīng)的脂質(zhì)媒介，分別取實(shí)驗(yàn)組1-17的石斛紅曲0.1ml同0.5ml雞蛋黃勻漿液、0.4ml純水及50μl硫酸亞鐵溶液(feso4·7h2o,70mmol/l)混合，于37℃下孵育30min，迅速加入1.5ml乙酸溶液(20％，體積分?jǐn)?shù)，ph值為3.5)及1.5ml硫代巴比妥酸溶液(0.8％，質(zhì)量濃度，用1.1％十二烷基硫酸鈉溶液配制)，高速混勻后于95℃下水浴60min。待反應(yīng)物冷卻至室溫后，再加入5ml正丁醇，充分搖勻，混合物在5000r/min下離心15min，取上清夜測定其在532nm處的吸光度。計(jì)算公式為：脂質(zhì)過氧化抑制率(％)＝(1-實(shí)驗(yàn)組吸光度/空白組吸光度)×100％。得到的結(jié)果如表1所示。
表1實(shí)驗(yàn)組1-17的抗氧化活性測定結(jié)果
由表1可知，實(shí)驗(yàn)組1-16的abts自由基清除率、dpph自由基清除率以及抗脂質(zhì)過氧化抑制率均高于實(shí)驗(yàn)組17，該結(jié)果表明，采用本發(fā)明實(shí)施例提供的石斛紅曲的制備方法制備得到的石斛紅曲，由于在石斛中添加有紅曲霉，紅曲霉將石斛的活性成分進(jìn)行了轉(zhuǎn)化利用，abts自由基清除率、dpph自由基清除率以及抗脂質(zhì)過氧化抑制率均得到顯著提升，達(dá)到了預(yù)料不到的抗氧化的效果。
實(shí)驗(yàn)組1-11組的abts自由基清除率、dpph自由基清除率以及抗脂質(zhì)過氧化抑制率均高于實(shí)驗(yàn)組12-16。
其中，實(shí)驗(yàn)組12制得的石斛紅曲中，玉米漿2g；石斛汁20ml；蛋白胨10g；酵母膏2g，葡萄糖30g，該配比未在本發(fā)明實(shí)施例提供的玉米漿4-6g，石斛汁8-12ml，蛋白胨4-7g，酵母膏2-4g，葡萄糖15-20g的范圍內(nèi)；
實(shí)驗(yàn)組13制得的石斛紅曲中，紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的20％，該配比未在本發(fā)明實(shí)施例提供的紅曲霉懸液的接種量為石斛培養(yǎng)基總體積的7-10％的范圍內(nèi)；
實(shí)驗(yàn)組14制得的石斛紅曲中，第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.4:0.8:1.8的質(zhì)量比混合得到，該配比未在本發(fā)明實(shí)施例提供的第一發(fā)酵基質(zhì)由石斛粉、薏仁米粉和大米粉按照0.3-0.5:0.5-1:1.5-2的質(zhì)量比混合得到，的范圍內(nèi)；
實(shí)驗(yàn)組15制得的石斛紅曲中，第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照1:0.8的質(zhì)量比混合，該配比未在本發(fā)明實(shí)施例提供的石斛發(fā)酵基質(zhì)由第一發(fā)酵基質(zhì)與水按照的1:0.6-1的質(zhì)量比混合的范圍內(nèi)；
實(shí)驗(yàn)組16制得的石斛紅曲中，發(fā)酵種子液的接種量為石斛發(fā)酵基質(zhì)總體積的11％，該配比未在本發(fā)明實(shí)施例提供的發(fā)酵種子液按照料液比8-12％的量接種于石斛發(fā)酵基質(zhì)的范圍內(nèi)；
由此可見，在本發(fā)明實(shí)施例提供的該些范圍內(nèi)制備得到的石斛紅曲的清除自由基的抗氧化活性能力更強(qiáng)。
綜上所述，根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例提供的石斛紅曲的制備方法制備得到的石斛紅曲具有以下優(yōu)點(diǎn)：(1)保護(hù)中藥活性成分免遭破壞，使藥物的有效組分、活性物質(zhì)最大限度地得以提取、利用；(2)提高中藥藥性，降低藥物的毒副作用；(3)所優(yōu)選的有益菌種本身能補(bǔ)充或增強(qiáng)原有藥物的功能；(4)產(chǎn)生新的活性物質(zhì)；(5)位中藥活性成分結(jié)構(gòu)修飾提供新途徑；(6)節(jié)省藥材資源，保護(hù)環(huán)境；(7)是實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化、具有高科技水平的又一新技術(shù)，生產(chǎn)工藝可控，所得產(chǎn)物精確，制劑方便，便于與國際接軌；此外，本發(fā)明提供的石斛紅曲應(yīng)用廣泛，可制備成石斛紅曲茶、石斛紅曲姜茶、石斛紅曲膠囊以及石斛紅曲咀嚼片或含片等多種形式，便于攜帶和食用。
以上所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例。本發(fā)明的實(shí)施例的詳細(xì)描述并非旨在限制要求保護(hù)的本發(fā)明的范圍，而是僅僅表示本發(fā)明的選定實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。