用于降低血壓的組合物及紅曲菌ntu 568的引物組的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種用于降低血壓的組合物，尤指一種以Monascuspurpureus(紅曲 菌）NTU568制備用于降低血壓的組合物及引物組。
【背景技術(shù)】
[0002] 血壓指的是血液在血管內(nèi)流動時對血管壁所形成的壓力，因此，當(dāng)心臟送出的血 液量增多或是血液循環(huán)的阻力增加時，即會造成血壓的升高。血液循環(huán)的阻力增加的主要 原因在于血管壁上形成有斑塊（plaque)，如脂肪或膽固醇；此外，過度緊張的精神狀態(tài)亦 會導(dǎo)致血壓升高，其中，精神緊張會刺激大腦皮質(zhì)并同時促進(jìn)交感神經(jīng)的活化，而活化的交 感神經(jīng)亦會使得心跳加速以及心臟收縮力增加，導(dǎo)致心臟送出的血量增多，進(jìn)而引起血壓 的升商。
[0003] 高血壓成為現(xiàn)代人常見的慢性疾病之一，其診斷標(biāo)準(zhǔn)為收縮血壓大于140mmHg或 舒張血壓大于90mmHg，且其引起的病征為頭暈、頭痛、心悸、呼吸困難…等。人體若長期處 于高血壓的情況下，將會引起許多的并發(fā)癥，例如：中風(fēng)、冠狀動脈心臟病、腎功能失調(diào)等。 目前用于治療高血壓的藥物主要可分為利尿劑、交感神經(jīng)阻斷劑、血管收縮素受體阻斷劑、 以及血管收縮素轉(zhuǎn)化酵素抑制劑，其中，醫(yī)療報告分別指出上述各種高血壓治療藥物的缺 占.
[0004] 1.利尿劑透過抑制鈉離子再吸收的方式達(dá)到防止人體水分滯留，進(jìn)而完成降低血 壓的目的；然而，由于利尿劑抑制鈉離子再吸收的同時也抑制了鉀離子的吸收，使得長期服 用利尿劑的高血壓患者會并發(fā)低鉀血癥。
[0005] 2.交感神經(jīng)阻斷劑則是透過阻斷交感神經(jīng)的受體，而減低交感神經(jīng)的受體接收活 化交感神經(jīng)的分子的機(jī)率，達(dá)到降低心跳次數(shù)與血壓的目的；然而，長期服用交感神經(jīng)阻斷 劑的高血壓患者會并發(fā)心跳過慢、姿態(tài)性低血壓及陽痿等副作用。
[0006] 3.血管收縮素受體阻斷劑與血管收縮素轉(zhuǎn)化酵素抑制劑都是用于防止活化腎酵 素-血管收縮素統(tǒng)（Renin-angiotensinsystem,RAS)過度活化，達(dá)到降低血壓的目的；然 而，長期使用這兩種藥物會引發(fā)腎衰竭。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 在下文中給出關(guān)于本發(fā)明的簡要概述，以便提供關(guān)于本發(fā)明的某些方面的基本理 解。應(yīng)當(dāng)理解，這個概述并不是關(guān)于本發(fā)明的窮舉性概述。它并不是意圖確定本發(fā)明的關(guān) 鍵或重要部分，也不是意圖限定本發(fā)明的范圍。其目的僅僅是以簡化的形式給出某些概念， 以此作為稍后論述的更詳細(xì)描述的前序。
[0008] 本發(fā)明的主要目的，在在提供一種用于降低血壓的組合物，該組合物通過將一 Monascuspurpureus(紅曲菌）NTU568接菌至一山藥基質(zhì)，并經(jīng)過培養(yǎng)與干燥工藝而制得 的一粉末狀紅曲山藥；此粉末狀紅曲山藥具有良好的降血壓功效。
[0009] 因此，為了達(dá)成上述本發(fā)明的主要目的，本案的發(fā)明人提出一種用于降低血壓的 組合物，其通過將一Monascuspurpureus(紅曲菌）NTU568接菌至一山藥基質(zhì)，并經(jīng)過培 養(yǎng)與干燥工藝而制得的一紅曲山藥，其中，一成人使用者食用劑量范圍介于2. 2克與11克 之間的該紅曲山藥之后，能夠在8小時內(nèi)顯著性地降低其收縮壓與舒張壓。
[0010] 該成人使用者的每日飲食總量中含有〇. 2-0. 25%的該紅曲山藥，可長期性地有效 降低其血壓。
[0011] 該紅曲山藥含有范圍介于3mg/g-6. 82mg/g之間的紅曲黃色素。
[0012] 該紅曲菌NTU568,在公元2013年11月18日寄存在德國微生物保藏中心，且其 寄存編號為DSM28072;并且，該紅曲菌NTU568具有SEQIDNO: 1、SEQIDNO: 2或SEQID NO:3的一的核苷酸序列。
[0013] 該核苷酸序列可通過逢機(jī)增殖多型性DNARandomAmplificationofPolymorphic DNA,RAPD以及聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PolymeraseChainReaction,PCR的技術(shù)進(jìn)而增幅多條引物 增幅而得。
[0014] 該多條引物包括具有SEQIDNO:4與SEQIDNO:5的核苷酸片段。
[0015] 該多條引物還包括具有SEQIDNO:6與SEQIDNO:7的核苷酸片段。
[0016] 本發(fā)明的另一目的，在在提供一種Monascuspurpureus(紅曲菌）NTU568的 核苷酸序列的引物組，使得使得相關(guān)技術(shù)人員可透過DNA分子識別標(biāo)記以快速地鑒定 M.purpureusNTU568,而不需要培養(yǎng)分離菌株或者培養(yǎng)活菌。
[0017] 因此，為了達(dá)成上述本發(fā)明的另一目的，本案的發(fā)明人提出一種Monascus purpureus(紅曲菌）NTU568的核苷酸序列的引物組，該引物組包括：
[0018] (I)PKSaF:GACTGCGGTCATCCGGCCC(SEQIDN0:4)；
[0019] (2)PKSaR：GCGTGTCCCCGGAGCTACA(SEQIDNO:5)；
[0020] (3)PKS8F:GCGAGCCAACCGTCTGGACC(SEQIDNO:6)；
[0021] (4)PKS8R：GCGTGTCCCCGGAGCTACA(SEQIDNO:7)；
[0022] (5)PKSyF:GCGAGCCAACCGTCTGGACC(SEQIDN0:8);以及
[0023](6)PKSyR:CGAGACGACCACCGTTGCCC(SEQIDNO:9)〇
[0024] 進(jìn)一步地，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的技術(shù)將該PKSaF或者PKSaR引物增幅制成具 有SEQIDNO: 1的該紅曲菌NTU568的核苷酸序列。
[0025] 進(jìn)一步地，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的技術(shù)將該PKSSF或者PKSSR引物增幅制成具 有SEQIDNO: 2的該紅曲菌NTU568的核苷酸序列。
[0026] 進(jìn)一步地，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的技術(shù)將該PKSYF或者PKSYR引物增幅制成具 有SEQIDNO: 3的該紅曲菌NTU568的核苷酸序列。
[0027] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
[0028] 本發(fā)明的紅曲山藥具有良好的降血壓功效，并可預(yù)防血管壁的病變，可應(yīng)用在臨 床治療與保健食品。此外，本發(fā)明提供了M.purpureusNTU568的核苷酸序列及其引物組， 使得相關(guān)技術(shù)人員可透過DNA分子識別標(biāo)記以快速地鑒定M.purpureusNTU568,而不需 要培養(yǎng)分離菌株或者培養(yǎng)活菌。
【附圖說明】
[0029] 為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對實施例或現(xiàn) 有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本 發(fā)明的一些實施例，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下，還可 以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
[0030] 圖1為以Monascuspurpureus(紅曲菌）NTU568制備用于降低血壓的組合物的 方法流程圖；
[0031] 圖2為PKSa基因序列的保守性區(qū)域的分析結(jié)果圖；
[0032] 圖3為PKSS基因序列的保守性區(qū)域的分析結(jié)果圖；
[0033] 圖4為PKSY基因序列的保守性區(qū)域的分析結(jié)果圖；
[0034] 圖5A與圖5B分別為短期療程的各小組大鼠的血壓量測的統(tǒng)計表圖；
[0035] 圖6A與圖6B分別為長期療程的各小組大鼠的血壓量測的統(tǒng)計表圖；
[0036] 圖7A與圖7B分別為短期療程的各小組大鼠的血壓量測的統(tǒng)計表圖；
[0037] 圖8A與圖8B分別為長期療程的各小組大鼠的血壓量測的統(tǒng)計表圖；以及
[0038] 圖9為各組別大鼠的動脈組織切片圖。
【具體實施方式】
[0039] 為了能夠更清楚地描述本發(fā)明所提出的一種以Monascuspurpureus(紅曲菌） NTU568制備用于降低血壓的組合物的方法，下面將結(jié)合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明 實施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。
[0040]紅曲菌NTU568(MonascuspurpureusNTU568)，由國立臺灣大學(xué)生化科技潘 子明教授及其研發(fā)團(tuán)隊所研發(fā)的一個優(yōu)良的本土紅曲菌，于2013年11月18日寄存在 DSMZ(DeutscheSammlungvonMikroorganismenundZellkulturen)德國微生物保藏中 心，保藏地址：德國38124布倫瑞克市茵和芬史塔街7B號，保藏編號為DSM28072。此NTU568 紅曲菌具有快速增長、淀粉水解能力強、以及