背景技術(shù)：

本公開整體涉及健康與營養(yǎng)。更具體地，本公開涉及使用脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸促進(jìn)腸粘膜愈合的方法和組合物。

所述粘膜是胃腸道的最內(nèi)層，并且包圍通過胃腸道的內(nèi)腔。胃腸粘膜由以下形成：最內(nèi)層即上皮；圍繞所述皮的平滑肌薄層，即肌層粘膜；以及上皮和肌層粘膜之間的結(jié)締組織層，即固有層(laminapropria)。

包括潰瘍性結(jié)腸炎和克隆氏病的炎性腸病(ibd)的特征不僅在于粘膜炎癥，而且還在于嚴(yán)重的腸屏障功能損害。最近的臨床研究將具有特色的“粘膜愈合”作為ibd患者長期緩解和cd患者低風(fēng)險手術(shù)治療的最顯著預(yù)后因素。

臨床粘膜愈合被定義為在內(nèi)窺鏡和顯微鏡水平下上皮層的完全修復(fù)。盡管現(xiàn)在認(rèn)識到上皮內(nèi)膜和屏障修復(fù)對于實現(xiàn)有效ibd治療是重要的，但是沒有有效的治療方法來促進(jìn)ibd患者的粘膜愈合。此外，就這一點而言，粘膜愈合降低了患有炎性腸病的患者的復(fù)發(fā)風(fēng)險，但是該過程中飲食補(bǔ)充劑的作用未被充分研究。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本公開提供了用于促進(jìn)腸粘膜愈合的方法，該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體如具有炎性腸病的個體施用脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在具有特定氨基酸(即脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸)的大鼠模型中補(bǔ)充飲食，令人驚奇地修復(fù)了腸上皮細(xì)胞，并且促進(jìn)了結(jié)腸上皮的保護(hù)，這兩者均是促進(jìn)粘膜愈合的關(guān)鍵步驟。具體地，通過以約4倍于健康大鼠理論蘇氨酸需求的劑量施用蘇氨酸，以約3倍于健康大鼠基礎(chǔ)攝入量的劑量施用絲氨酸，并且以約4倍于健康大鼠的限定的基礎(chǔ)攝入量的劑量施用脯氨酸，實現(xiàn)這些驚人的有益治療效果。

因此，在一般的實施方案中，提供了促進(jìn)腸粘膜愈合的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。

在一個實施方案中，所述組合物以提供約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天的劑量的量被施用。

在一個實施方案中，所述組合物以提供每天約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg體重的劑量的量被施用。

在一個實施方案中，所述組合物以提供約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天的劑量的量被施用。

在一個實施方案中，脯氨酸、絲氨酸或蘇氨酸中的至少一種的至少一部分是游離氨基酸。

在一個實施方案中，個體具有受損的腸粘膜。

在另一個實施方案中，提供了恢復(fù)腸屏障功能的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合物。在一個實施方案中，施用一定量的所述組合物，使得所述組合物提供選自以下的劑量：(i)約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天，(ii)約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg個體體重/天，(iii)約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天，以及(iv)它們的組合。在一個實施方案中，所述個體具有受損的腸屏障功能。

在另一個實施方案中，提供了修復(fù)腸上皮細(xì)胞的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。在一個實施方案中，施用一定量的所述組合物，使得所述組合物提供選自以下的劑量：(i)約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天，(ii)約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg個體體重/天，(iii)約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天，以及(iv)它們的組合。在一個實施方案中，個體具有受損的腸上皮細(xì)胞。

在另一個實施方案中，提供了促進(jìn)結(jié)腸上皮保護(hù)的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。在一個實施方案中，施用一定量的所述組合物，使得所述組合物提供選自以下的劑量：(i)約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天，(ii)約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg個體體重/天，(iii)約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天，以及(iv)它們的組合。在一個實施方案中，所述個體具有受損的結(jié)腸上皮。

在另一個實施方案中，提供了促進(jìn)杯狀細(xì)胞生長和/或產(chǎn)生的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。在一個實施方案中，施用一定量的所述組合物，使得所述組合物提供選自以下的劑量：(i)約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天，(ii)約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg個體體重/天，(iii)約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天，以及(iv)它們的組合。在一個實施方案中，所述個體具有減少的杯狀細(xì)胞。

在另一個實施方案中，提供了用于治療炎性腸病(ibd)的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。在一個實施方案中，施用一定量的所述組合物，使得所述組合物提供選自以下的劑量：(i)約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天，(ii)約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg個體體重/天，(iii)約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天，以及(iv)它們的組合。ibd可為克羅恩病或潰瘍性結(jié)腸炎。

在另一個實施方案中，提供了用于預(yù)防或推遲ibd患者復(fù)發(fā)的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。在一個實施方案中，施用一定量的所述組合物，使得所述組合物提供選自以下的劑量：(i)約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天，(ii)約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg個體體重/天，(iii)約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天，以及(iv)它們的組合。ibd可為克羅恩病或潰瘍性結(jié)腸炎。

在另一個實施方案中，提供了制備用于促進(jìn)腸粘膜愈合的組合物的方法。該方法包括向食物中加入治療上有效促進(jìn)腸粘膜愈合的量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸，以形成醫(yī)療食物。在一個實施方案中，所述醫(yī)療食物選自發(fā)酵乳、酸奶、新鮮奶酪、精乳(rennetedmilk)、糖塊(confectionerybar)、早餐麥片、早餐麥片棒、飲料、乳粉、大豆制品、非乳發(fā)酵產(chǎn)品、或用于臨床營養(yǎng)的營養(yǎng)補(bǔ)充劑。在一個實施方案中，所述組合物可為粉末形式，特別是用液體復(fù)溶的粉末。在一個實施方案中，所述組合物可為液體形式，例如即飲型液體口服營養(yǎng)補(bǔ)充劑。

在一個實施方案中，脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸中的每一種具有各自選自以下的形式：(i)蛋白質(zhì)部分，(ii)游離形式氨基酸，和(iii)它們的混合物。

在一個實施方案中，所述個體選自嬰兒、兒童、青少年、成人和老年人。在優(yōu)選的實施方案中，所述個體選自成年人和老年人。

本公開的優(yōu)點是提供促進(jìn)腸粘膜愈合的方法，并且提供可用于此類方法中的組合物。

本公開的另一個優(yōu)點是通過口服施用摻入脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的治療性營養(yǎng)組合物或藥物，來促進(jìn)腸粘膜愈合。

本公開的另一個優(yōu)點是使用促進(jìn)腸粘膜愈合的天然化合物減輕或預(yù)防炎癥，其具有可耐受的副作用或沒有副作用。

本公開的另一個優(yōu)點是恢復(fù)腸屏障功能，修復(fù)腸上皮細(xì)胞，促進(jìn)結(jié)腸上皮的保護(hù)，和/或促進(jìn)杯狀細(xì)胞的生長和/或產(chǎn)生。

本文描述了另外的特征和優(yōu)點，并且根據(jù)以下具體實施方式和附圖，這些特征和優(yōu)點將顯而易見。

附圖說明

圖1為本文所公開的實施例的實驗結(jié)果(每μm結(jié)腸上皮的杯狀細(xì)胞數(shù))的示圖。每μm結(jié)腸上皮的杯狀細(xì)胞數(shù)。數(shù)據(jù)為平均值±sem。ctrl：對照物；dss：葡聚糖硫酸鈉；ala：丙氨酸；3aa：蘇氨酸、絲氨酸和脯氨酸的共混物；μm：微米。使用非參數(shù)kruskal-wallis方差分析，然后進(jìn)行dunn測試，來評估差值。認(rèn)為p<0.05的值是統(tǒng)計意義上顯著的。*vs.ctrl-ala；vs.dss-ala。

圖2為本文所公開的實施例的實驗結(jié)果(腸道脂肪酸結(jié)合蛋白的血漿濃度，ifabp)的示圖。ifabp在第9天和第28天的血漿濃度。數(shù)據(jù)為平均值±sem。ctrl：對照物；dss：葡聚糖硫酸鈉；ala：丙氨酸；3aa：蘇氨酸、絲氨酸和脯氨酸的共混物。使用非參數(shù)kruskal-wallis方差分析，然后進(jìn)行dunn測試，來評估差值。ng：納克。認(rèn)為p<0.05的值是統(tǒng)計意義上顯著的。*vs.ctrl-ala；vs.dss-ala。

具體實施方式

如在本公開和所附權(quán)利要求中所用，單數(shù)形式“一個”、“一種”和“所述”包括復(fù)數(shù)指代物，除非上下文另外明確規(guī)定。因此，例如，對“一種氨基酸”或“所述氨基酸”的標(biāo)引包括兩種或更多種氨基酸。在“x和/或y”的上下文中使用的術(shù)語“和/或”應(yīng)被解釋為“x”或“y”或“x和y”。當(dāng)在本文中使用時，尤其是后跟一列術(shù)語時，術(shù)語“示例”僅是示例性和例示性的，并且不應(yīng)被視為排他性或全面性的。

如本文所用，“約”應(yīng)理解為是指某一數(shù)值范圍內(nèi)的數(shù)字，例如該所提及數(shù)字的-10％至+10％，優(yōu)選地在該所提及數(shù)字的-5％至+5％的范圍內(nèi)，更優(yōu)選地在該所提及數(shù)字的-1％至+1％的范圍內(nèi)，以及最優(yōu)選地在該所提及數(shù)字的-0.1％至+0.1％的范圍內(nèi)。此外，本文中的所有數(shù)值范圍都應(yīng)理解為包含該范圍內(nèi)的所有整數(shù)或分?jǐn)?shù)。另外，這些數(shù)值范圍應(yīng)理解為對涉及該范圍內(nèi)任何數(shù)值或數(shù)值子集的權(quán)利要求提供支持。例如，1至10的公開應(yīng)理解為支持1至8、3至7、1至9、3.6至4.6、3.5至9.9等的范圍。

本文中表示的所有百分?jǐn)?shù)均以占組合物總重量的重量計，除非另有表示。提及ph時，其值對應(yīng)于使用標(biāo)準(zhǔn)設(shè)備在25℃下測量的ph。

術(shù)語“病癥”和“障礙”意指任何疾病、病癥、癥狀或適應(yīng)癥。如本文所用，“有效量”是預(yù)防缺陷、治療個體病癥或障礙的量，或更一般地講，是減輕癥狀，管理病癥或障礙進(jìn)展或向個體提供營養(yǎng)、生理或醫(yī)療有益效果的量。

術(shù)語“治療(treatment/treating)”包括導(dǎo)致病癥或障礙改善，例如減輕、減少、調(diào)節(jié)或消除病癥或障礙的任何效果?！爸委?treating/treatmentof)”病癥或障礙的非限制性示例包括：(1)抑制病癥或障礙，即阻止病癥或障礙或其臨床癥狀的發(fā)展，以及(2)緩解病癥或障礙，即，使病癥或障礙或其臨床癥狀暫時或永久地消退。術(shù)語“治療(treating/treatment)”既包括預(yù)防性或防止性治療(預(yù)防和/或延緩目標(biāo)病理學(xué)病癥或障礙的發(fā)展)，也包括治愈性、治療性或疾病改善性治療，包括治愈、延緩、減輕已確診病理學(xué)病癥或障礙的癥狀和/或中斷其進(jìn)展的治療性措施；和治療存在染病風(fēng)險或懷疑已染病的患者，以及治療患病或已經(jīng)診斷為罹患疾病或醫(yī)學(xué)病癥的患者。所述術(shù)語不一定表示受治療者被治療直至完全恢復(fù)。治療可與患者或醫(yī)生相關(guān)。

術(shù)語“預(yù)防(prevention/preventing)”是指使得所提及的病癥或障礙的臨床癥狀不在可能暴露于或易患上該病癥或障礙但尚未經(jīng)歷或表現(xiàn)出該病癥或障礙的癥狀的個體中發(fā)展。“預(yù)防”包括降低病癥或障礙的風(fēng)險和/或嚴(yán)重程度。

“動物”包括但不限于哺乳動物，所述哺乳動物包括但不限于嚙齒動物，水棲哺乳動物，家畜諸如狗和貓，和農(nóng)畜諸如羊、豬、牛和馬，以及人。在使用“動物”、“哺乳動物”或其復(fù)數(shù)形式時，這些術(shù)語還適用于能夠具有通過段落上下文表現(xiàn)出的或意欲表現(xiàn)出的作用的任何動物。如本文所用，術(shù)語“患者”和“個體”應(yīng)被理解為包括接受或意欲接受治療如本文所定義治療的動物，尤其是哺乳動物，還更尤其是人。雖然本文中常用術(shù)語“個體”和“患者”來指人，但本公開并非限制于此。因此，術(shù)語“個體”和“患者”是指可受益于治療的任何動物、哺乳動物或人。

如果動物的年齡超過其出生地平均預(yù)期壽命的三分之二，優(yōu)選地超過其出生地平均預(yù)期壽命的四分之三，更最優(yōu)選地超過其出生地平均預(yù)期壽命的五分之四，那么就認(rèn)為該動物為“老年”?！袄夏耆恕笔侵笇嶋H年齡為65歲或更大的人。

如本文所用，“長期施用”是持續(xù)施用(例如每周至少兩次，優(yōu)選每日)6周或更長時間?！岸唐谑┯谩笔浅掷m(xù)施用(例如每周至少兩次，優(yōu)選每日)不到6周。

術(shù)語“食物”、“食物產(chǎn)品”和“食物組合物”意指旨在供人攝入并且向人提供至少一種營養(yǎng)物質(zhì)的產(chǎn)品或組合物。本文所公開的組合物可不含本文未具體公開的任何要素。因此，使用術(shù)語“包括/包含”的實施方案的公開內(nèi)容包括“基本上由所指明的組分組成”的實施方案和“由所指明的組分組成”的實施方案的公開內(nèi)容。類似地，本文所公開的方法可不含本文沒有具體公開的任何步驟。因此，使用術(shù)語“包括/包含”的實施方案的公開內(nèi)容包括“基本上由所指明的步驟組成”的實施方案和“由所指明的步驟組成”的實施方案的公開內(nèi)容。本文所公開的任何實施方案可與本文所公開的任何其它實施方案組合。

在本公開的一方面，提供了促進(jìn)腸粘膜愈合的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體諸如具有受損腸粘膜的個體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合物。在一個實施方案中，愈合是內(nèi)窺鏡和顯微鏡水平下上皮層的完全修復(fù)。

在本公開的另一方面，提供了恢復(fù)腸屏障功能的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體諸如具有受損腸屏障功能的個體施用治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。

在本公開的另一方面，提供了修復(fù)腸上皮細(xì)胞的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體諸如具有受損腸上皮細(xì)胞的個體施用治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。

在本公開的另一方面，提供了促進(jìn)結(jié)腸上皮保護(hù)的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體諸如具有受損結(jié)腸上皮的個體施用治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。

在本公開的另一方面，提供了促進(jìn)腸粘膜和結(jié)腸粘膜中杯狀細(xì)胞補(bǔ)充的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體諸如杯狀細(xì)胞減少的個體施用治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸。

在任何這些實施方案中，所述個體可為具有炎性腸病的患者。

在一個實施方案中，提供了治療炎性腸病(ibd)的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。在另一個實施方案中，提供了用于預(yù)防或推遲ibd患者復(fù)發(fā)的方法。該方法包括向?qū)ζ溆行枰膫€體施用包含治療有效量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸的組合的組合物。ibd可為克羅恩病或潰瘍性結(jié)腸炎。

可將所述組合物施用于人或動物如伴侶動物、寵物或牲畜。在一個實施方案中，施用一定量的組合物，以提供以下劑量中的一種或多種：約0.07g至約0.3g脯氨酸/kg體重/天；約0.07g至約0.35g絲氨酸/kg體重/天；和約0.04g至約0.20g蘇氨酸/kg體重/天。在一個實施方案中，組合物包含以下量中的一種或多種：約0.06g脯氨酸/g蛋白質(zhì)；約0.07g絲氨酸/g蛋白質(zhì)；和0.04g蘇氨酸/g蛋白質(zhì)。

該組合物對任何年齡組均具有有益效果。優(yōu)選地，所述組合物旨在用于嬰兒、幼兒、成年人或老年人。所述組合物可以向個體施用，短期施用或長期施用。所述組合物可通過選自口服、局部、腸道和腸胃外的途徑施用。優(yōu)選地，所述組合物為腸道施用，例如口服施用。例如，所述組合物可具有粉末、液體濃縮物、或即飲型飲料的形式。

在一個實施方案中，所述組合物包含附加氨基酸，所述附加氨基酸選自丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、瓜氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、組氨酸、羥脯氨酸、羥絲氨酸、羥酪氨酸、羥賴氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、?；撬帷⑸彼?、酪氨酸、纈氨酸、以及它們的組合。在一個實施方案中，所述組合物可另外包含氨基酸前體。在一個實施方案中，所述組合物包含選自半胱氨酸前體胱硫醚、n-乙酰半胱氨酸和/或dace的氨基酸前體。在另一個實施方案中，這些附加氨基酸中的一種或多種不存在于所述組合物中。例如，在此類實施方案中，脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸可為所述組合物中僅有的氨基酸。

所述組合物中脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸各自可為游離形式(即單體)，或可為二肽、三肽或多肽(例如，本文所用的蛋白質(zhì)是指具有20個或更多個氨基酸的多肽)的一部分。如果使用蛋白質(zhì)提供脯氨酸、絲氨酸或蘇氨酸中的一種或多種，則所述蛋白質(zhì)可為完整蛋白質(zhì)、水解蛋白質(zhì)、部分水解蛋白質(zhì)、或完整蛋白質(zhì)和水解蛋白質(zhì)的混合物。

所述組合物可為食物產(chǎn)品、食物產(chǎn)品補(bǔ)充劑、動物食物產(chǎn)品、或藥物組合物。例如，所述產(chǎn)品可為營養(yǎng)組合物、營養(yǎng)制品、飲料、食品添加劑或藥物。食品添加劑或藥物可為例如片劑、膠囊、錠劑或液體的形式。食品添加劑或藥物優(yōu)選作為持續(xù)釋放制劑提供，允許長時間恒定供應(yīng)絲氨酸。

所述組合物可為醫(yī)療食物。醫(yī)療食物產(chǎn)品是專門配制的并旨在用于疾病或醫(yī)學(xué)病癥的飲食管理(例如，預(yù)防或治療疾病或不期望的醫(yī)學(xué)病癥)。醫(yī)療食物產(chǎn)品可提供臨床營養(yǎng)，例如，滿足存在醫(yī)學(xué)病癥的患者或具有特定營養(yǎng)需求的其他人士的特殊營養(yǎng)需求。醫(yī)療食物產(chǎn)品的形式可以是完全膳食、部分膳食、作為食品添加劑或者用于溶解的粉末。

在一個實施方案中，所述營養(yǎng)組合物為選自片劑、膠囊、液體、咀嚼片、軟凝膠，小藥囊、粉末、糖漿、液體懸浮液、乳劑、溶液、或它們組合的形式。在一個實施方案中，所述營養(yǎng)組合物為口服營養(yǎng)補(bǔ)充劑。另選地，所述營養(yǎng)組合物可為管飼。

所述組合物可提供全面營養(yǎng)或不全面營養(yǎng)。全面的營養(yǎng)提供充足類型和含量的宏量營養(yǎng)素(蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物)和微量營養(yǎng)素，以成為所施用動物的唯一營養(yǎng)來源?；颊吣軌驈倪@類完全營養(yǎng)組合物中得到他們100％的營養(yǎng)需求。不全面營養(yǎng)不能提供充足含量的宏量營養(yǎng)素(蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物)或微量營養(yǎng)素，以成為所施用動物的唯一營養(yǎng)來源。優(yōu)選使用部分或不全面營養(yǎng)組合物作為營養(yǎng)補(bǔ)充劑。

所述組合物優(yōu)選選自基于乳粉的產(chǎn)品；速溶飲品；即飲型制劑；營養(yǎng)粉末；營養(yǎng)液體；乳基產(chǎn)品，尤其是酸乳酪或冰淇淋；谷類產(chǎn)品；飲料；水；咖啡；熱牛奶咖啡；麥芽飲料；巧克力風(fēng)味飲料；烹飪產(chǎn)品；湯；片劑；和糖漿。乳品可為可從動物或植物來源獲得的任何乳品，并且優(yōu)選為牛乳、人乳、羊乳、山羊乳、馬乳、駱駝乳、米漿或豆?jié){。除此之外或另選地，可使用乳源蛋白質(zhì)級分或初乳。

所述組合物可包含保護(hù)性水性膠體(例如樹膠、蛋白質(zhì)、改性淀粉)、粘結(jié)劑、成膜劑、包囊劑/材料、壁/殼材料、基質(zhì)化合物、包衣、乳化劑、表面活性試劑、增溶劑(油、脂肪、蠟、卵磷脂等)、吸附劑、載體、填料、共化合物、分散劑、潤濕劑、加工助劑(溶劑)、流動劑、掩味劑、增重劑、膠凝劑、凝膠形成劑、抗氧化劑和抗微生物劑。所述組合物還可包含常規(guī)的藥物添加劑和佐劑、賦形劑和稀釋劑，包括但不限于水、任何來源的明膠、植物膠、木質(zhì)素磺酸鹽、滑石、糖、淀粉、阿拉伯樹膠、植物油、聚亞烷基二醇、風(fēng)味劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、緩沖劑、潤滑劑、著色劑、潤濕劑、填料等。此外，根據(jù)政府機(jī)構(gòu)的推薦，所述組合物可包含適用于口服或經(jīng)腸施用的有機(jī)或無機(jī)載體材料，以及維生素、礦物質(zhì)痕量元素和其它微量營養(yǎng)素。

所述組合物可包含蛋白質(zhì)源、碳水化合物源和/或類脂源。可使用任何適宜的蛋白質(zhì)源，例如動物蛋白質(zhì)(諸如乳蛋白、肉蛋白和蛋蛋白)、植物蛋白(例如大豆蛋白、小麥蛋白、大米蛋白和豌豆蛋白)、游離氨基酸的混合物、或它們的組合。乳蛋白(諸如酪蛋白和乳清)和大豆蛋白是尤其優(yōu)選的。

如果所述組合物包含脂肪源，則所述脂肪源優(yōu)選提供所述組合物能量的5％至50％，優(yōu)選所述能量的10％至40％，更優(yōu)選20％至30％。植物脂肪諸如大豆油、棕櫚油、椰子油、紅花油、向日葵油、玉米油、低芥酸菜籽油和卵磷脂是尤其適宜的。如果需要，可包括動物脂肪諸如乳脂。

碳水化合物源可提供所述組合物能量的20％至80％，優(yōu)選所述組合物能量的30％至70％?？墒褂萌魏魏线m的碳水化合物，例如蔗糖、乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖漿固體、麥芽糊精及其混合物。如果需要，也可添加膳食纖維。膳食纖維可來自任何適宜的來源，包括例如大豆、豌豆、燕麥、果膠、瓜爾膠、阿拉伯樹膠、低聚果糖、低聚半乳糖、唾液乳糖、和源自動物乳的低聚糖。

適宜的維生素和礦物質(zhì)可包含于所述組合物中。特定維生素和礦物質(zhì)的存在和量將根據(jù)預(yù)期的施用受體而變化。

在一個實施方案中，所述組合物還包含一種或多種核苷酸、合生素、魚油、ω-3脂肪酸的非海洋來源、磷脂、植物營養(yǎng)素和/或抗氧化劑。如本文所用，合生素是益生元和益生菌的組合，其協(xié)同改善腸道微生物群。適宜魚油的非限制性示例包括提供二十二碳六烯酸(dha)和二十碳五烯酸(epa)的魚油。適宜植物營養(yǎng)素的非限制性示例包括槲皮素、姜黃素和檸檬苦素?？寡趸瘎┦悄軌驕p緩或阻止其它分子氧化的分子。適宜抗氧化劑的非限制性示例包括維生素a、類胡蘿卜素、維生素c、維生素e、硒、類黃酮、乳枸杞(lactowolfberry)、枸杞(枸杞子)、多酚、番茄紅素、葉黃素、木酚素、輔酶q10(coq10)、橘皮苷和谷胱甘肽。磷脂的非限制性示例包括磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、和磷脂酰乙醇胺。

在本公開的另一方面，提供了制備用于促進(jìn)腸粘膜愈合的組合物的方法。該方法包括向食品中加入治療上有效促進(jìn)腸粘膜愈合的量的脯氨酸、絲氨酸和蘇氨酸，以形成醫(yī)療食物。例如，醫(yī)療食物可為發(fā)酵乳、酸奶、新鮮奶酪、精乳、糖塊、早餐麥片、早餐麥片棒、飲料、乳粉、大豆制品、非乳發(fā)酵產(chǎn)品、或用于臨床營養(yǎng)的營養(yǎng)補(bǔ)充劑。

實施例

以下非限制性實施例是根據(jù)本公開，促進(jìn)腸粘膜愈合的示例。

實施例1

實驗規(guī)程按照歐洲實驗動物護(hù)理和使用指南(指令2010/63/ue)進(jìn)行。本研究使用來自janvier(法國)的30只雄性sprague-dawley大鼠，年齡為6-8個月，并且在抵達(dá)當(dāng)天重約500/700g。動物被單獨飼養(yǎng)在籠子里。研究期間，它們隨意自由獲得食物和飲用水或葡聚糖硫酸鈉(dss，mw36-44kda，icnbiomedicals)溶液。通過用5％的來自d0至d8的dss(急性結(jié)腸炎)處理大鼠，然后用2％的來自d9至d28的dss(慢性結(jié)腸炎)處理大鼠，誘導(dǎo)結(jié)腸炎。將dss溶解在高壓滅菌水中，并且隨意提供給大鼠。向?qū)φ战M動物提供不包含來自d0至d28的dss的水。

3組大鼠接受以下治療和飲食：

ctrl組(ctrl-ala，n＝10)接受對照飲食，所述飲食為由以下組成的干燥半合成粉末(g/kg)：碳水化合物646(小麥淀粉)、蛋白質(zhì)120(由平衡以滿足所有氨基酸需求的鯡魚餐提供)、類脂64(花生油45、向日葵油10、油菜籽油9)、瓊脂-瓊脂30、礦物混合物70(uar205b：cahpo4，30.1；kcl，7；nacl，7；mgo，0.735；mgso4，3.5；fe2o3，0.21；feso47h2o，0.35)和維生素混合物10[uar200]。通過補(bǔ)充丙氨酸(40g/kg干物質(zhì))，使對照飲食與其它飲食等氮。對照飲食中蘇氨酸、絲氨酸和脯氨酸濃度分別為5.7g/kg、5g/kg和5g/kg(干物質(zhì))。

dss對照組(dss-ala，n＝10)接受補(bǔ)充有丙氨酸(40g/kg干物質(zhì))的對照飲食。

dss組(dss-3aa，n＝10)接受補(bǔ)充有3aa共混物(即蘇氨酸(15g/kg干物質(zhì))、絲氨酸(10g/kg干物質(zhì))和脯氨酸(15g/kg干物質(zhì)))的對照飲食。

在8d適應(yīng)期間，向每組大鼠喂食它們各自的飲食。從d0開始，它們在如前所述的它們的飲用水中獲取

或不獲取dss。在d9和d28上收集血液，并且立即轉(zhuǎn)移到干燥管中，離心，并且將血漿在-20℃下冷凍直至進(jìn)一步分析。使用商業(yè)elisa試劑盒評估腸脂肪酸結(jié)合蛋白(ifabp)的血漿濃度。

在實驗結(jié)束時(d28)，使用氯胺酮和木脂素的組合麻醉動物，然后通過頸椎脫位處以安樂死。一旦將動物安樂死，就進(jìn)行腹部中線切口，并且收集回盲部至肛門邊緣的結(jié)腸。沖洗結(jié)腸，收集近端、中間和遠(yuǎn)端結(jié)腸的結(jié)腸小塊，并且置于冷藏的4％福爾馬林中。將樣品脫水，然后嵌入蠟中以獲得橫截面。用抗-nuc2抗體免疫標(biāo)記結(jié)腸載玻片，以評估確定長度結(jié)腸粘膜上的杯狀細(xì)胞數(shù)。

每μm結(jié)腸上皮細(xì)胞的杯狀細(xì)胞數(shù)如圖1所示。與ctrl(p<0.01)和通過補(bǔ)充丙氨酸喂食等氮飲食的dss組相比，dss-3aa組中每μm結(jié)腸上皮的杯狀細(xì)胞數(shù)顯著更高。需要此類杯狀細(xì)胞增加，以促進(jìn)結(jié)腸上皮的保護(hù)，作為促進(jìn)粘膜愈合的初始步驟。

在這方面，粘膜免疫系統(tǒng)的第一道防線是上皮細(xì)胞層，其被主要由粘蛋白組成的具有散布的細(xì)菌的杯狀細(xì)胞分泌的粘液生物膜覆蓋。上皮細(xì)胞類型中杯狀細(xì)胞的比例從十二指腸(4％)向尾部增加至遠(yuǎn)端結(jié)腸(16％)，與近端腸至結(jié)腸中存在的微生物體數(shù)量增加相似。因此，杯狀細(xì)胞是確保腸道和結(jié)腸粘膜免受由腔內(nèi)內(nèi)容物(包括例如微生物群)引發(fā)的持續(xù)侵襲的關(guān)鍵參與者。還已示出，沿著這條線，杯狀細(xì)胞及其分泌的產(chǎn)物諸如粘蛋白抑制細(xì)胞凋亡并且刺激細(xì)胞遷移，意味著維持表面上皮層的完整性并且促進(jìn)粘膜修復(fù)和愈合的生物活性作用。杯狀細(xì)胞也共同分泌三葉因子諸如tff3，其已示出參與上皮恢復(fù)和傷口愈合。

圖2中示出了ifabp的血漿濃度。在第9天，與ctrl-ala相比(不顯著)，dss-ala組中ifabp血漿濃度趨于增加。與dss-ala組相比，補(bǔ)充有3aa混合物的dss組的血漿ifabp濃度顯著降低至與未處理對照組相似的濃度。類似地，在第28天，dss-3aa中ifabp的血漿濃度顯著低于dss-ala組。接受3aa補(bǔ)充的dss組中血漿ifabp濃度的這種降低示出腸上皮細(xì)胞的修復(fù)，這是實現(xiàn)粘膜愈合的必需過程。

就這一點而言，脂肪酸結(jié)合蛋白(fabp)是一類以高濃度存在于參與脂肪酸吸收和消耗的組織中的低分子量(14-15kda)胞質(zhì)蛋白。ifabp在存在于絨毛頂部的細(xì)胞中高度表達(dá)，其是許多腸道疾病中的最初破壞位點。ifabp主要限于小腸和大腸的成熟腸細(xì)胞。它以少量循環(huán)于健康個體血液中。ifabp是早期腸道細(xì)胞死亡的可用血漿/尿液標(biāo)記物，并且在急性腸道局部缺血和炎癥發(fā)作后含量迅速上升。在實驗研究中已報導(dǎo)，循環(huán)ifabp含量與腸缺血再灌注后的上皮組織學(xué)狀態(tài)有關(guān)。潰瘍性結(jié)腸炎患者的血清ifabp濃度升高也反映了腸道炎癥的存在。

因此，血漿ifabp的評估被認(rèn)為是評估腸細(xì)胞損傷的最具潛力的內(nèi)源性腸細(xì)胞蛋白標(biāo)志物，因為這些蛋白質(zhì)在腸道中特異性表達(dá)，并且在細(xì)胞損傷時立即釋放到循環(huán)中。

應(yīng)當(dāng)理解，對本文所述的目前優(yōu)選的實施方案作出的各種改變和修改對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員將是顯而易見的?？稍诓幻撾x本發(fā)明主題的實質(zhì)和范圍且不削弱其預(yù)期優(yōu)點的前提下作出這些改變和修改。因此，這些改變和修改旨在由所附權(quán)利要求書涵蓋。