本發(fā)明涉及一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的組合物。

背景技術：

皮膚作為經(jīng)常接觸外部環(huán)境的器官，主要起到保護人體遠離外部的物理性傷害和化學物質(zhì)，防止細菌、真菌、病毒等侵入到皮膚內(nèi)，并防止水分損失的屏障作用。通過觀察皮膚結構，可知其由表皮、真皮、皮下脂肪3個層構成，其中表皮作為3個層當中最薄的層，起到負責皮膚保濕和保護的重要作用。特別地，皮膚的彈性和柔潤由表皮角質(zhì)層中存在的水分來維持，并已知為了維持角質(zhì)層的彈性，必須含有10％以上的水分(o.k.jacobi，proc.sci.sec.toiletgoodsassoc.1959，31，22)。

最近，由于環(huán)境污染等原因，暴露在強紫外線中的情況變多，隨著由此引發(fā)的皮膚水分損失的增加，皮膚老化加快，并且隨著由皮膚損傷引起的相關疾病發(fā)病率的增加，對于能夠維持暴露在紫外線下的皮膚的保濕力以及長時間保持改善皺紋效果的組合物的需求具有逐漸增加的趨勢。

另外，乳酸菌是一種在人體內(nèi)起到有益作用的細菌，作為一種通過發(fā)酵諸如碳水化合物等糖類來形成乳酸(乳酸)的細菌，迄今為止，已發(fā)現(xiàn)了400余種，其中市售可得的有18種。已知這些乳酸菌具有免疫增強作用，特別具有增強胃、腸道免疫的生理活性。最近，由于健康生活的潮流，已經(jīng)形成了好的食物在擦拭時也會起到好的作用的社會氛圍，因此開發(fā)出了多種對身體有利的化妝品，其中已報道了乳酸菌的培養(yǎng)液具有皮膚保濕、增加角質(zhì)層更新速率、緩解皺紋等效果，但是，實際使用化妝品時其效果甚微的情況較多。

例如，韓國專利申請公開第1991-0019600號中公開了一種具有保濕和清除活性氧功能的用于化妝品的乳酸菌培養(yǎng)液的相關技術。韓國專利申請公開第2013-0096604號中公開了一種包含發(fā)芽谷物的發(fā)酵提取液作為主要成分的發(fā)酵化妝品及其制備方法的相關技術，公開了將通過發(fā)酵乳酸菌而形成的產(chǎn)物包含在化妝品材料中，或通過將發(fā)芽谷物等與特定屬的乳酸菌一起發(fā)酵而獲得的發(fā)酵液混合到化妝品材料中以及使用這些材料的技術。此外，已知韓國專利申請公開第2013-0115943號中公開了一種包含乳酸菌裂解上清液的用于抗炎、皮膚美白、和抗老化的組合物的相關技術。但是，在使用乳酸菌活菌時，即使是冷凍干燥的粉末形式也不僅具有吸濕等問題，還依然存在乳酸菌的穩(wěn)定性等問題以及相關問題。為了解決這些問題，可生產(chǎn)出一種具有均一性能的產(chǎn)品，即本發(fā)明的有效成分，其為間歇滅菌的乳酸菌死菌體，由于其可被冷凍干燥并可長期貯存，因此，是有利的。目前還沒有間歇滅菌的乳酸菌死菌體的皮膚保濕或改善皺紋效果的相關報道。

技術實現(xiàn)要素：

發(fā)明要解決的課題

本發(fā)明是一項由如上所述的需求而引出的發(fā)明，發(fā)明人為了開發(fā)用于皮膚保濕或改善皺紋的組合物而進行了研究。結果證實了間歇滅菌的乳酸菌死菌體抑制或減少了由于紫外線照射而引起的皮膚水分的損失，保護皮膚屏障的皮膚保濕效果優(yōu)異，并證實了其抑制皺紋產(chǎn)生相關的蛋白質(zhì)mmp-9的表達量。因此完成了本發(fā)明。

解決課題的方法

為了實現(xiàn)所述目的，本發(fā)明提供一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的健康功能食品。

此外，本發(fā)明提供一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的化妝品組合物。

此外，本發(fā)明提供一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的藥學組合物。

發(fā)明的效果

本發(fā)明涉及一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的組合物。本發(fā)明的組合物具有抑制或減少由于紫外線照射而引起的皮膚水分損失的皮膚保濕或改善皺紋的效果。并且，本發(fā)明的組合物可生產(chǎn)性能均一的產(chǎn)品，并具有可長期貯存的優(yōu)點。

附圖說明

圖1為證實間歇滅菌的乳酸菌死菌體抑制經(jīng)皮水分損失的效果的結果。＊相對于對照組具有顯著性(p＜0.0001)；#相對于紫外線照射組具有顯著性(p＜0.0001)；con為對照組；uv為紫外線照射組；lactob為間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組。

圖2為評價間歇滅菌的乳酸菌死菌體的皮膚水分含量的結果。＊相對于對照組具有顯著性(p＜0.0001)；#相對于紫外線照射組具有顯著性(p＜0.0001)；con為對照組；uv為紫外線照射組；lactob為間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組。

圖3為通過測量表皮厚度變化而評價改善皺紋效果的結果。＊相對于對照組具有顯著性(p＜0.0001)；#相對于紫外線照射組具有顯著性(p＜0.0001)；con為對照組；uv為紫外線照射組；lactob為間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組。

圖4為通過h&e染色而評價改善皺紋效果的結果。對照為正常對照組；媒介物為紫外線照射對照組；lactob為間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組。

圖5為證實間歇滅菌的乳酸菌死菌體的皺紋相關蛋白表達量的結果。con為對照組；uv為紫外線照射組；lactob為間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組。

具體實施方式

本發(fā)明提供一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的健康功能食品。

所述乳酸菌優(yōu)選為選自鏈球菌屬(streptococcus)、乳球菌屬(lactococcus)、腸球菌屬(enterococcus)、乳桿菌屬(lactobacillus)、片球菌屬(pediococcus)、明串珠菌屬(leuconostoc)、魏斯氏菌屬(weissella)和雙歧桿菌屬(bifidobacterium)中的至少一種菌株，但不限于此，更優(yōu)選為嗜酸乳桿菌(lactobacillusacidophilus)。

此外，乳酸菌發(fā)酵步驟優(yōu)選為在添加糖類酵母提取物、大豆蛋白胨和離子組分、以及其他生長因子之后將乳酸菌進行發(fā)酵的步驟，但不限于此。

所述乳酸菌的間歇滅菌法是一種將活菌乳酸菌滅活的方法，可使用任何已知的間歇滅菌方法，并可購買使用已上市銷售的間歇滅菌的乳酸菌死菌體。優(yōu)選間歇滅菌的乳酸菌死菌體通過以下間歇滅菌法來制備：從發(fā)酵培養(yǎng)液中分離乳酸菌發(fā)酵菌體后，將乳酸菌發(fā)酵菌體在60-160℃的溫度下加熱10至60分鐘，并迅速冷卻到20-40℃或20℃進行滅活。

此外，所述間歇滅菌的乳酸菌死菌體優(yōu)選為冷凍干燥的粉末形式，但不限于此。

所述皮膚保濕是指抑制或減少由于紫外線照射而引起的皮膚水分損失，但不限于此。

本發(fā)明的健康功能食品可通過直接添加間歇滅菌的乳酸菌死菌體而制備、或?qū)⑵渑c其他食品或食品成分一起制備，并可根據(jù)常規(guī)方法適當?shù)刂苽?。作為所述可添加間歇滅菌的乳酸菌死菌體的食品的實例，可以是選自焦糖、肉類、香腸、面包、巧克力、糖果類、點心類、餅干、比薩、拉面、其他面類、口香糖類、包含冰淇淋類的乳制品、各種湯、飲料、茶、飲品、酒精飲料以及維生素復合劑中的任意一種，并包含所有一般意義上的健康食品。即，所述食品種類不受特別的限制。

所述健康功能食品可包含各種營養(yǎng)素、維生素、礦物質(zhì)(電解質(zhì))、合成的以及天然的風味劑、著色劑以及增強劑(奶酪、巧克力等)、果膠酸以及其鹽、炔酸以及其鹽、有機酸、保護性膠體增稠劑、ph調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、醇、用于碳酸飲料的碳酸化劑等。并且，可包含用于制造天然果汁以及蔬菜飲料的果肉。所述成分可單獨使用或組合使用。

并且，本發(fā)明的健康功能食品可包含多種香味劑或天然糖類作為追加成分，所述天然糖類為諸如葡萄糖、果糖的單糖、諸如麥芽糖、蔗糖的二糖、以及諸如糊精、環(huán)糊精的多糖類、諸如木糖醇、山梨糖醇、赤蘚糖醇的糖醇。雖然所述天然糖類的比例不是很重要，但相對于100g本發(fā)明的健康功能食品，優(yōu)選包含0.01-0.04g，更優(yōu)選包含0.02-0.03g，但不限于此。

作為甜味劑可使用諸如索馬甜、甜菊提取物的天然甜味劑或諸如糖精、阿斯巴甜的合成甜味劑等。

本發(fā)明的健康功能食品除了所述間歇滅菌的乳酸菌死菌體以外可追加包含公知的皮膚健康相關成分。追加包含有助于皮膚健康的原料可進一步增強本發(fā)明的健康食品的皮膚保濕或改善皺紋效果。當追加有助于皮膚健康的原料時，應考慮與組合使用相關的皮膚安全性、劑型化的便利性和有效成分的穩(wěn)定性。

作為所述追加的皮膚保濕或改善皺紋成分可使用已知原料或個別地被韓國食品藥品管理局認定為可作為健康功能食品原料的原料。

所述個別認定的原料優(yōu)選松樹皮提取物等的復合物、紅參、蛇床子、山茱萸復合提取物、凹唇姜(fingerroot)提取物粉末、n-乙酰葡糖胺、透明質(zhì)酸、魔芋提取物、ap膠原蛋白酶解肽、芝草提取物粉末、蒲公英等的復合提取物、肽，但不限于此。

此外，本發(fā)明提供一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的化妝品組合物。

所述乳酸菌優(yōu)選為選自鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、乳桿菌屬、片球菌屬、明串珠菌屬、魏斯氏菌屬和雙歧桿菌屬中的至少一種菌株，但不限于此，更優(yōu)選為嗜酸乳桿菌。

并且，乳酸菌發(fā)酵步驟優(yōu)選為添加糖類酵母提取物、大豆蛋白胨和離子組分、以及其他生長因子之后將乳酸菌進行發(fā)酵的步驟，但不限于此。

所述乳酸菌的間歇滅菌法是一種將活菌乳酸菌滅活的方法，可使用任何已知的間歇滅菌方法，并可購買使用已上市銷售的間歇滅菌的乳酸菌死菌體。優(yōu)選間歇滅菌的乳酸菌死菌體通過以下間歇滅菌法來制備：從發(fā)酵培養(yǎng)液中分離乳酸菌發(fā)酵菌體后，將乳酸菌發(fā)酵菌體在60-160℃的溫度下加熱10至60分鐘，并迅速冷卻到20-40℃或20℃來進行滅活。

此外，所述間歇滅菌的乳酸菌死菌體優(yōu)選為冷凍干燥的粉末形式，但不限于此。

所述皮膚保濕是指抑制或減少由于紫外線照射而引起的皮膚水分的損失，但不限于此。

本發(fā)明的化妝品組合物可以為溶液、凝膠、固體或漿狀無水生成物、通過在水相中分散油相而獲得的乳狀液、懸浮液、微乳狀液、微膠囊或離子脂質(zhì)體、非離子型囊泡分散劑、霜劑、護膚水、潤膚露、粉劑、霜劑、精華劑、噴霧劑或遮瑕棒的形式。并且，可制備成泡沫的形式或進一步包含壓縮促進劑的氣溶膠的形式。

此外，除了本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體外，所述化妝品組合物可包含脂質(zhì)、有機溶劑、增溶劑、增稠劑以及膠凝劑、軟化劑、抗氧化劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、發(fā)泡劑、芳香劑、表面活性劑、水、離子或非離子型乳化劑、填充劑、金屬離子掩蔽劑和螯合劑、防腐劑、維生素、阻滯劑、保濕劑、精油、染料、顏料、親水性或親脂性活化劑和脂質(zhì)囊泡或在化妝品領域中通常使用的輔助劑，如通常用于化妝品的任意其他成分。

在本發(fā)明的包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的化妝品組合物中，基于化妝品組合物的總重量計，可含有0.01-15重量％、優(yōu)選2-10重量％的本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體。

除了所述間歇滅菌的乳酸菌死菌體外，本發(fā)明的用于皮膚保濕或改善皺紋的化妝品組合物可追加包含公知的皮膚保濕或改善皺紋成分。追加包含有助于皮膚健康的原料可進一步增進本發(fā)明的用于皮膚保濕或改善皺紋的化妝品組合物的效果。當追加有助于皮膚健康的原料時，應考慮與組合使用相關的皮膚安全性、劑型化的便利性和有效成分的穩(wěn)定性。

此外，本發(fā)明提供一種包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的藥學組合物。

所述乳酸菌優(yōu)選為選自鏈球菌屬、乳球菌屬、腸球菌屬、乳桿菌屬、片球菌屬、明串珠菌屬、魏斯氏菌屬和雙歧桿菌屬中的至少一種菌株，但不限于此，更優(yōu)選為嗜酸乳桿菌。

此外，乳酸菌發(fā)酵步驟優(yōu)選為添加糖類酵母提取物、大豆蛋白胨和離子組分、以及其他長因子之后將乳酸菌進行發(fā)酵的步驟，但不限于此。

所述乳酸菌的間歇滅菌法是一種將活菌乳酸菌滅活的方法，可使用任何已知的間歇滅菌方法，并可購買使用已上市銷售的間歇滅菌的乳酸菌死菌體。優(yōu)選間歇滅菌的乳酸菌死菌體通過以下間歇滅菌法來制備：從發(fā)酵培養(yǎng)液中分離乳酸菌發(fā)酵菌體后，將乳酸菌發(fā)酵菌體在60-160℃的溫度下加熱10至60分鐘，并迅速冷卻到20-40℃或20℃來進行滅活。

此外，所述間歇滅菌的乳酸菌死菌體優(yōu)選為冷凍干燥的粉末形式，但不限于此。

本發(fā)明的藥學組合物為了進行給藥，除了上述有效成分以外可追加包含1種以上的藥學上可接受的載體來制備。藥學上可接受的載體應當能夠與本發(fā)明的有效成分兼容，可通過混合并使用鹽水、無菌水、林格氏溶液、緩沖鹽水、右旋糖溶液、麥芽糊精溶液、甘油、乙醇中的至少1種，并根據(jù)所需可追加抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑等其他常規(guī)添加劑。此外，通過追加稀釋劑、分散劑、表面活性劑、粘合劑以及潤滑劑而將組合物制成諸如水溶液、懸浮液、乳液等的注射用制劑。

此外，可制成多種劑型如散劑、錠劑、膠囊劑、液劑、注射劑、軟膏劑等，并且，可以在單位-劑量或多-劑量容器，例如密封的安剖瓶和小瓶等中提供。

本發(fā)明的藥學組合物可通過口服或非口服途徑給藥。本發(fā)明的藥學組合物的給藥途徑可為：例如口腔、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、動脈內(nèi)、骨髓內(nèi)、膈膜內(nèi)、心臟內(nèi)、經(jīng)皮、皮下、腹腔內(nèi)、腸管、舌下或局部給藥，但不限于此。

為了這樣的臨床給藥，可使用公知技術將本發(fā)明的藥學組合物制成制劑。本領域技術人員可根據(jù)患者的體重、年齡、性別、健康狀態(tài)、飲食、給藥時間、方法、排泄率以及疾病的嚴重程度等容易地確定本發(fā)明的組合物的給藥量。

下文中，將使用實施例對本發(fā)明進行更詳細的說明。這些實施例僅用于更具體地說明本發(fā)明，并不限制本發(fā)明的范圍，這對于本領域技術人員應該是顯而易見的。

[材料與方法]

間歇滅菌的乳酸菌死菌體的制備：使用通過以下方法制備的間歇滅菌的乳酸菌死菌體：從發(fā)酵培養(yǎng)液中分離嗜酸乳桿菌乳酸菌發(fā)酵菌體后，將乳酸菌發(fā)酵菌體在120℃下加熱30分鐘，并急速冷卻到20℃以下來進行滅活。

[實驗動物與樣品給藥]

無毛小鼠：從中央實驗動物公司購買7周齡的雄性無毛鼠(雄性hr-1，無毛小鼠，japanslcinc.)并在經(jīng)過1周的適應期后使用。在試驗中使用通過在適應期間觀察一般狀態(tài)而被認定為處于健康狀態(tài)的動物。飼育環(huán)境維持在溫度23±3℃、濕度50±5％、明暗周期12小時(07：00-19：00/照明時間)。試驗期間，每組7只實驗動物，給小鼠飼喂小鼠專用飼料5l79(charlesriver，usa)并自由進食，使小鼠飲用經(jīng)紫外線消毒的自來水并自由飲水。

樣品給藥：實驗分為3組：對照組、紫外線處理組(uv)和間歇滅菌的乳酸菌死菌體給藥組(lactob)。樣品給藥通過小鼠探針進行口服給藥。給藥時間為總共12周，每周給藥5天。

[紫外線照射]

對除了對照組以外的實驗組進行持續(xù)12周、每周3次的紫外線照射。紫外線使用uvb燈(mineralightuvdisplaylamp，uvp，usa)。紫外線照射量如下：1至7周之間為60mj/cm²、8至12周之間為90mj/cm²，總共12周。通過光測量儀(deltaohm，意大利)測量紫外線照射量并調(diào)節(jié)照射時間。

[保濕效果的評價]

1)經(jīng)皮水分損失量(tewl)的評價

經(jīng)皮水分蒸發(fā)量：在恒溫、恒濕(23℃、相對濕度50％)條件下通過使用皮膚水份流失測試儀(tewametercourage&khazaka，德國)根據(jù)面積和時間計算從皮膚蒸發(fā)的水分量，通過保濕電子傳感器讀取蒸發(fā)的水分量(g/m²/hr)，并將其量化來測量皮膚的保濕力。

2)皮膚水分含量的測量

皮膚水分含量：在恒溫、恒濕(23℃、相對濕度50％)條件下通過使用皮膚水分測試儀(corneometercourage&khazaka，德國)測量皮膚中的水分含量。通過傳感器測量皮膚表皮內(nèi)存在的水分的離子化程度，通過將其量化并計算水分含量來測量皮膚的保濕力。

[皮膚的組織學觀察]

在將無毛小鼠背部皮膚組織剔出并固定在10％的中性福爾馬林溶液中之后，根據(jù)常規(guī)方法經(jīng)過洗滌、脫水、透明化、滲透過程后，以石蠟進行包埋，并切成4μm厚的切片，之后實施組織染色(hematoxylin&eosin；h&e)。

[電泳與蛋白質(zhì)印跡法]

使用20-30mg皮膚組織，添加提取蛋白質(zhì)的溶液并進行粉碎，然后分離蛋白質(zhì)并進行定量，將和對照組(肌動蛋白)相同量的蛋白質(zhì)進行電泳并移至pvdf膜，然后與抗體進行反應來測量蛋白質(zhì)的表達量。

[統(tǒng)計方法]

通過使用單因素方差分析以及t檢驗來分析本發(fā)明中獲得的結果的對照組和實驗組之間的顯著性(p＜0.05)。

實施例1.間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組的保濕效果評價

1)經(jīng)皮水分損失量(tewl)分析

為了證實保濕效果而在各實驗組的無毛小鼠的背部皮膚中實施經(jīng)皮水分損失量分析。經(jīng)皮水分損失量是從皮膚散發(fā)出的水分量，其數(shù)值越高表示皮膚保濕機能越低，表明皮膚固有的屏障功能受到損傷。經(jīng)皮水分蒸發(fā)量的評價通過以下方法進行：在恒溫、恒濕(23℃、相對濕度：50％)條件下通過使用皮膚水份流失測試儀(tewametercourage&khazaka，德國)根據(jù)面積和時間計算從皮膚蒸發(fā)的水分量，通過水分電子傳感器讀取蒸發(fā)的水分量(g/m²/hr)，并將其量化來測量皮膚的保濕力。其結果顯示在圖1中。如圖1所示，可證實紫外線照射造成皮膚屏障功能受損，進而降低了皮膚保濕功能(p＜0.0001)，并證實了通過間歇滅菌的乳酸菌死菌體(lactob)處理組有效地防止了由于紫外線照射引發(fā)的皮膚水分水分損失(p＜0.0001)。

2)皮膚水分含量測量

為了測量皮膚中所含有的水分量而在各實驗組的無毛小鼠的背部皮膚中進行皮膚水分含量的分析。結果如圖2中所示，證實了紫外線照射組相對于對照組皮膚水分含量下降(p＜0.0001)，間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組相對于紫外線照射組顯示出更高的水分含量?；谶@樣的結果，證實了間歇滅菌的乳酸菌死菌體處理組具有皮膚保濕效果。

實施例2.基于表皮厚度變化的效能評價

通過測量表皮厚度變化而證實抑制皺紋的效能。表皮厚度通過以下方法測量：使用安裝在顯微鏡中的尺子測量經(jīng)h&e染色的組織的從角質(zhì)層到表皮基底膜的厚度。根據(jù)圖3中示出的結果，證實了在紫外線照射時表皮厚度增加，并證實了給予間歇滅菌的乳酸菌死菌體的組表皮厚度降低。

實施例3.基于組織染色的效能評價(h&e染色)

為了證實抑制由紫外線引發(fā)的皺紋的效能，脫除無毛小鼠的皮膚組織后，通過組織染色進行證實。如圖4中所示，證實了紫外線照射組相對于對照組，角質(zhì)層和表皮厚度均增加，并了證實在紫外線照射組中，給予間歇滅菌的乳酸菌死菌體的組相對于未給予間歇滅菌的乳酸菌死菌體的紫外線照射組，角質(zhì)層得到緩解，并且表皮厚度降低。

實施例4.mmp-9(基質(zhì)金屬肽酶9)蛋白質(zhì)表達量的評價

測量已知對皺紋產(chǎn)生起到重要作用的mmp(基質(zhì)金屬肽酶9)蛋白質(zhì)表達量。結果如圖5中所示，證實了紫外線照射組(uv)相對于未照射試驗組(con)，蛋白質(zhì)表達量增加，而采用乳酸菌死菌體處理的試驗組(lactob)降低了由于紫外線引起的mmp-9蛋白質(zhì)的表達量。通過所述結果可確定具有改善由于紫外線而產(chǎn)生的皺紋的效果。

制備例1.包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的化妝品組合物的制備

1)柔性化妝水的制備

本發(fā)明的含有間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的柔性化妝水是由以下成分制備的：10.00重量份的間歇滅菌的乳酸菌死菌體、1.00重量份的1，3-丁二醇、0.05重量份的乙二胺四乙酸二鈉、0.01重量份的尿囊素、0.05重量份的甘草酸二鉀、0.01重量份的檸檬酸、0.02重量份的檸檬酸鈉、1.00重量份的甘油醇-26、2.00重量份的熊果苷、1.00重量份的氫化蓖麻油、30.00重量份的乙醇、微量防腐劑、著色劑以及香料、以及余量的凈化水。

2)滋養(yǎng)霜的制備

本發(fā)明的含有間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的滋養(yǎng)霜是由以下成分制備的：10.00重量份的間歇滅菌的乳酸菌死菌體、7.0重量份的1，3-丁二醇、1.0重量份的甘油、0.1重量份的d-泛醇、3.2重量份的植物提取物、0.3重量份的硅酸鎂鋁、1.2重量份的peg-40硬脂酸酯、2.0重量份的硬脂酸、1.5重量份的聚山梨酯60、2.0重量份的親脂性硬脂酸甘油酯、1.5重量份的脫水山梨醇倍半油酸酯、3.0重量份的鯨蠟硬脂醇、4.0重量份的礦物油、3.8重量份的角鯊烷、2.8重量份的辛酸/癸酸甘油三酯、1.8重量份的植物油、0.4重量份的二甲硅油、微量甘草酸二鉀、微量尿囊素、微量透明質(zhì)酸鈉、適量醋酸生育酚、適量三乙醇胺、適量防腐劑、適量香料以及余量的凈化水。

3)精華液的制備

根據(jù)下述配比，在80±2℃的條件下稱重并將間歇滅菌的乳酸菌死菌體、凈化水、對羥基苯甲酸甲酯、透明質(zhì)酸提取物、甘油混合來制備水相。并且，在80±2℃的條件下稱重并將對羥基苯甲酸丙酯、卵磷脂和澳洲堅果油混合來制備油相。之后將所述油相添加到水相中，使兩相互相混合來制備乳液形式的混合物，并在所述混合物中添加香料并冷卻到35±2℃來制備包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體的精華液。

水相由以下成分制成：8.00重量份的間歇滅菌的乳酸菌死菌體、7.58重量份的凈化水、0.15重量份的對羥基苯甲酸甲酯、2.50重量份的透明質(zhì)酸提取物、8.00重量份的甘油。

油相由以下成分制成：0.10重量份的對羥基苯甲酸丙酯、0.60重量份的卵磷脂、10.0重量份的澳洲堅果油；以及0.07重量份的作為添加劑的香料。

制備例2.包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體作為有效成分的用于皮膚保濕或改善皺紋的健康功能食品

1)面粉食品的制備

將0.5-5.0重量份的本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體添加到面粉中，并使用該混合物來制備面包、蛋糕、曲奇、餅干以及面條。

2)乳制品的制備

將5-10重量份的本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體添加到牛奶中，并使用所述牛奶來制備諸如奶酪以及冰淇淋等的多種乳制品。

3)禪食的制備

將糙米、大麥、大米、薏苡仁以公知的方法進行糊化并干燥，并對其進行焙燒后，以粉碎機制備成粒度為60目的粉末。

將黑豆、黑芝麻、紫蘇子也以公知的方法進行干燥，并對其進行焙燒后，以粉碎機制備成粒度為60目的粉末。將本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體在真空濃縮機中進行減壓濃縮后，進行噴霧并采用熱風干燥機干燥，將所得干燥物用粉碎機制成粒度為60目的干燥粉末。

將如上制備的谷物類、種子堅果類、以及間歇滅菌的乳酸菌死菌體以下述比率進行調(diào)配：谷物類(30重量份的糙米、15重量份的薏苡仁、20重量份的大麥)，種子堅果類(7重量份的紫蘇子、8重量份的黑豆、7重量份的黑芝麻)，間歇滅菌的乳酸菌死菌體(3重量份)，靈芝(0.5重量份)，地黃(0.5重量份)。

4)巧克力的制備

以如下配比混合而制備包含間歇滅菌的乳酸菌死菌體的巧克力：30.0重量份的可可豆，30.0重量份的全脂奶粉，41.85重量份的糖粉，0.45重量份的卵磷脂，0.1重量份的香料，0.6重量份的間歇滅菌的乳酸菌死菌體。

5)健康飲料的制備

將諸如液體果糖(0.5％)、低聚糖(2％)、糖(2％)、食鹽(0.5％)、水(75％)的輔料和5g本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體均勻地混合并瞬時滅菌之后，并將其以玻璃瓶、塑料瓶等小包裝容器進行包裝來制備。

6)蔬菜汁的制備

通過將5g本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體添加到1000ml西紅柿或胡蘿卜汁中來制備蔬菜汁。

7)水果汁的制備

通過將1g本發(fā)明的間歇滅菌的乳酸菌死菌體添加到1000ml蘋果或葡萄汁中來制備水果汁。