本發(fā)明涉及反芻動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)領(lǐng)域，具體涉及一種過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖的制備方法。
背景技術(shù)：
：瘤胃是反芻動(dòng)物的第一胃，牛采食的日糧中75-80％的干物質(zhì)以及50％以上的粗纖維是在瘤胃內(nèi)消化的。過(guò)瘤胃技術(shù)就是將一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等)經(jīng)過(guò)特殊技術(shù)處理，使其被保護(hù)起來(lái)，減少在反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)的發(fā)酵、降解，而直接進(jìn)入小腸后再被消化吸收，從而達(dá)到提高飼料利用率的技術(shù)。在牛產(chǎn)犢后，產(chǎn)奶量急劇增加，對(duì)于能量的需求、尤其是對(duì)葡萄糖的需要不斷增加，而由日糧提供的用以合成葡萄糖的碳水化合物遠(yuǎn)遠(yuǎn)不足，會(huì)引起血糖下降，機(jī)體糖的異生機(jī)制啟動(dòng)，體蛋白被動(dòng)用，體脂肪被脂解，而導(dǎo)致酮病或亞臨床酮病和脂肪肝病的發(fā)生。酮病是奶牛糖類和脂肪代謝紊亂，導(dǎo)致在血液中積累大量酮體(包括β-羥基丁酸(BHBA)、乙酰乙酸和丙酮，主要是β-羥基丁酸)，由尿液、乳汁和呼出氣體排出，并以低血糖為特征的一種能量代謝失調(diào)性疾病(孫斌等，1999；GruffatD.etal,1996；GoffJPandHorstRL，1997；HocquetteJFandBauchartD，1999)。此病是奶牛常見(jiàn)的一種嚴(yán)重的營(yíng)養(yǎng)代謝病，多發(fā)于產(chǎn)犢后10-60天。酮病雖然能夠治愈，但酮病會(huì)使乳牛的泌乳量下降、乳質(zhì)量降低、繁殖率降低以及引起生殖系統(tǒng)疾病和內(nèi)分泌紊亂等多種疾病，增加了治療費(fèi)用，給奶牛養(yǎng)殖業(yè)造成了嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。脂肪肝病是酮病的繼發(fā)現(xiàn)象，是一種營(yíng)養(yǎng)代謝病，是圍產(chǎn)期牛糖代謝失衡后，體脂肪被脂解后產(chǎn)生大量游離脂肪酸(非酯化脂肪酸)到達(dá)肝臟后來(lái)不及運(yùn)輸?shù)狡渌M織或氧化掉，大量堆積在肝臟中而產(chǎn)生脂肪肝病。目前奶牛發(fā)生酮病時(shí)通常只能采用靜脈注射葡萄糖的辦法治療，通常要連續(xù)給奶牛注射5天，不但易給奶牛造成應(yīng)激，而且操作不方便。而對(duì)這一疾病的預(yù)防沒(méi)有有效辦法，用葡萄糖直接添加到日糧中不能預(yù)防奶牛酮病，因?yàn)閷⑵咸烟侵苯蛹尤肴占Z中，其在瘤胃中會(huì)被瘤胃微生物破壞，不能有效通過(guò)瘤胃。通過(guò)引入過(guò)瘤胃保護(hù)技術(shù)(簡(jiǎn)稱過(guò)瘤胃技術(shù))可以對(duì)上述酮病或亞臨床酮病以及脂肪肝病給予緩解，具體地是利用物理或化學(xué)的方法把一些容易被瘤胃微生物破壞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)保護(hù)起來(lái)使之不被瘤胃微生物分解，使得在容易被瘤胃微生物破壞的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表面形成包被層，到達(dá)皺胃和腸道中再釋放出來(lái)，被反芻動(dòng)物利用，從而滿足機(jī)體對(duì)葡萄糖的需求，避免不必要的糖異生機(jī)制的啟動(dòng)。然而，現(xiàn)有技術(shù)的過(guò)瘤胃保護(hù)技術(shù)仍然具有如下缺點(diǎn)：一是所要保護(hù)的葡萄糖沒(méi)有被完全包被起來(lái)，因此容易被瘤胃微生物降解，過(guò)瘤胃率低；二是由于包被層被反芻動(dòng)物利用度低，因此包被的葡萄糖無(wú)法完全釋放出來(lái)，從而無(wú)法被反芻動(dòng)物充分利用。公開(kāi)于該
背景技術(shù)：
部分的信息僅僅旨在增加對(duì)本發(fā)明的總體背景的理解，而不應(yīng)當(dāng)被視為承認(rèn)或以任何形式暗示該信息構(gòu)成已為本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所公知的現(xiàn)有技術(shù)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖的制備方法，在該方法中葡萄糖完全包被，從而使得過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖能夠更有效地通過(guò)反芻動(dòng)物的瘤胃；并且本發(fā)明中反芻動(dòng)物對(duì)包被層的利用度增高，使得包被的葡萄糖能夠完全釋放出來(lái)并被反芻動(dòng)物充分利用，從而有效預(yù)防、減少圍產(chǎn)期反芻動(dòng)物酮病或亞臨床酮病以及脂肪肝病的發(fā)生，減少產(chǎn)后失重，提高情期受胎率，提高產(chǎn)奶量。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖的制備方法，包括如下步驟：(1)將葡萄糖制備成微丸，進(jìn)行干燥；(2)將干燥后的所述微丸放入流化床中流化；(3)將熔融的脂肪醇類和/或飽和脂肪酸包被到處于流化床中的所述微丸的表面，制成過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖顆粒。本發(fā)明還提供了一種過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖的制備方法，用雙糖和/或多糖代替所述葡萄糖；所述雙糖為除紅糖以外的其他蔗糖、麥芽糖、乳糖等，多糖為淀粉等。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，所述葡萄糖與脂肪醇和/或飽和脂肪酸的質(zhì)量比為25-75：45-70。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，所述葡萄糖與脂肪醇和/或飽和脂肪酸的質(zhì)量比為25-53：45-70。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，在將葡萄糖制備成微丸之前，還包括將葡萄糖和脂肪酶混合的步驟，并且所述脂肪酶為耐高溫脂肪酶。所使用的耐高溫脂肪酶的酶活不小于10000U/g，其對(duì)高溫有耐受性，當(dāng)溫度處于85℃時(shí)酶活仍能保持85％以上，并且在pH3-11均有較高酶活。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，所述每1g葡萄糖需要加入脂肪酶0.01U-0.2U。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，所述飽和脂肪酸的熔點(diǎn)在52℃以上且其中C16～C18飽和脂肪酸的質(zhì)量百分比在70％以上，包括硬脂酸以及動(dòng)、植物氫化脂肪酸。所述飽和脂肪酸可以市購(gòu)，或者本領(lǐng)域技術(shù)人員通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)手段將不飽和脂肪酸制備成飽和脂肪酸。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，所述脂肪醇類和/或飽和脂肪酸中含有pH敏感物，其中所述pH敏感物為在pH6～7時(shí)不溶于水，而在pH低于2～3時(shí)能溶解于水的物質(zhì)，如殼聚糖、聚丙烯酸樹(shù)脂IV等。優(yōu)選地，上述技術(shù)方案中，所述pH敏感物與葡萄糖的質(zhì)量比為1-5：25-75。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：一是通過(guò)本申請(qǐng)的包被方法使得包被的葡萄糖在葡萄糖微丸中的含量有所提高，使得葡萄糖被完全包被，并且在包被層無(wú)葡萄糖顆粒殘留，從而使得葡萄糖的過(guò)瘤胃率至少提高25％～40％，達(dá)到90％以上大大提高，更能滿足反芻動(dòng)物泌乳期對(duì)葡萄糖的需要量；二是在包含葡萄糖的混合物中含有脂肪酶，使得葡萄糖微丸在進(jìn)入皺胃后，在胃酸存在的情況下，使得脂肪酸迅速分解，進(jìn)而使得包被的葡萄糖能夠更有效地釋放，在小腸釋放率能夠達(dá)到90％。進(jìn)一步，通過(guò)上述的過(guò)瘤胃保護(hù)技術(shù)，使得過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖能有效地通過(guò)反芻動(dòng)物的瘤胃，阻斷圍產(chǎn)期反芻動(dòng)物糖代謝失衡引起的糖的異生機(jī)制，使體蛋白不再動(dòng)用，體脂肪不再脂解，不會(huì)產(chǎn)生大量的游離脂肪酸，不但能夠有效預(yù)防亞臨床癥狀酮病和臨床癥狀酮病及脂肪肝病等，還能直接治療酮病；降低產(chǎn)后失重的發(fā)生，提高情期受胎率；而且能直接給反芻動(dòng)物提供過(guò)瘤胃葡萄糖，給反芻動(dòng)物供能，使過(guò)瘤胃葡萄糖、過(guò)瘤胃脂肪與過(guò)瘤胃氨基酸達(dá)到平衡，提高產(chǎn)奶量，同時(shí)對(duì)于反芻動(dòng)物的健康也有意義。具體實(shí)施方式下面對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)描述，但應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受具體實(shí)施方式的限制。以下實(shí)例中所使用的酶活為10000U/g的耐高溫脂肪酶由泛亞太生物科技有限公司提供，當(dāng)溫度處于85℃時(shí)酶活仍能保持85％以上，pH3-11均有較高酶活。以下實(shí)例所使用的飽和脂肪酸熔點(diǎn)在52℃以上，含有C16～C18飽和脂肪酸的質(zhì)量百分比為70％。實(shí)例1，本實(shí)例制備30％的過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖稱取葡萄糖30.5千克，粉碎過(guò)120目，同時(shí)稱取酶活為10000U/g的耐高溫脂肪酶200毫克加入葡萄糖中混合，加水8千克制成濕材，用擠出機(jī)擠出并拋丸，60℃以下低溫烘干，即制成葡萄糖微丸；將飽和脂肪酸65.5千克、殼聚糖4千克，加熱到120℃熔融；將葡萄糖微丸放入底噴包衣機(jī)的流化床中流化，將冷卻到100℃以下的熔融物噴到葡萄糖微丸的表面，即得到含有葡萄糖30％的過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖。實(shí)例2，本實(shí)例制備50％的過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖稱取葡萄糖50.5千克，粉碎過(guò)120目，同時(shí)稱取酶活為10000U/g的耐高溫脂肪酶400毫克加入葡萄糖中混合，加水13千克制成濕材，用擠出機(jī)擠出并拋丸，60℃以下低溫烘干，即制成葡萄糖微丸；將飽和脂肪酸47.5千克，聚丙烯酸樹(shù)脂Ⅳ2千克加熱到120℃熔融；將葡萄糖微丸放入底噴包衣機(jī)的流化床中流化，將冷卻到100℃以下的熔融物噴到葡萄糖微丸的表面，即得到含有葡萄糖50％的過(guò)瘤胃保護(hù)葡萄糖。對(duì)比實(shí)例，制備45％的過(guò)瘤胃葡萄糖稱取葡萄糖45.5克，粉碎過(guò)120目；稱取飽和脂肪酸51克、尼龍4g，加熱到160℃熔融；往冷卻到100℃熔融物中加入葡萄糖，攪拌均勻形成混合物，然后把該混合物加入高壓噴頭中，向通入20℃冷氣的流化床中噴霧冷卻，即得到含有葡萄糖45％的過(guò)瘤胃葡萄糖。實(shí)例3效果實(shí)施例為了驗(yàn)證本發(fā)明制備的過(guò)瘤胃葡萄糖的產(chǎn)品性能，運(yùn)用體外法(InVitro)模擬反芻動(dòng)物消化道進(jìn)行穩(wěn)定性檢驗(yàn)(模擬瘤胃環(huán)境：pH值6.6緩沖液和pH值5.4緩沖溶液、真胃和十二指腸：pH值2.4緩沖溶液)和評(píng)價(jià)。材料和方法本研究采用pH值6.6、pH值5.4、pH值2.4緩沖液分別模擬反芻動(dòng)物瘤胃，皺胃和十二指腸消化道。不同pH值緩沖溶液配方表1：不同pH值的緩沖溶液配方(單位：克)將表中所列物質(zhì)溶于少量蒸餾水中，定容至1000ml即可。試驗(yàn)樣品樣品A：實(shí)例1制備的過(guò)瘤胃葡萄糖，葡萄糖含量：30％；樣品B：實(shí)例2制備的過(guò)瘤胃葡萄糖，葡萄糖含量：50％；樣品C：對(duì)比實(shí)例制備的過(guò)瘤胃葡萄糖，葡萄糖含量：45％；每個(gè)樣品3個(gè)生產(chǎn)批次，各400克，備用；過(guò)瘤胃葡萄糖在不同pH值緩沖液中的穩(wěn)定性檢驗(yàn)分別準(zhǔn)確稱取樣品A，樣品B，樣品C各1.0000g，放在50ml具塞試管底部，加入20ml緩沖液，蓋緊試管塞，在39℃的恒溫水浴搖床內(nèi)消化2、4、8、12、24小時(shí)，取出后沖洗、過(guò)濾，濾液定容，測(cè)定濾液中的葡萄糖的含量，由此計(jì)算出葡萄糖的過(guò)瘤胃率和小腸釋放率。每種包被過(guò)瘤胃葡萄糖在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)設(shè)三個(gè)重復(fù)。葡萄糖檢測(cè)方法：GB/T22221食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測(cè)定高效液相色譜法。計(jì)算公式產(chǎn)品過(guò)瘤胃率(W1)＝(1-A2)/A1×100％式中：A1——產(chǎn)品中葡萄糖含量；A2——產(chǎn)品在pH6.6緩沖溶液濾液中葡萄糖的含量。產(chǎn)品小腸釋放率(W2)＝A3/A1×100％式中：A1——產(chǎn)品中葡萄糖含量；A3——產(chǎn)品在pH2.4緩沖溶液濾液中葡萄糖的含量。產(chǎn)品有效釋放率＝W1×W2×100％式中：W1——產(chǎn)品過(guò)瘤胃率；W2——產(chǎn)品小腸釋放率。統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。結(jié)果分析各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的過(guò)瘤胃率(pH6.6)從表1中可以看出，通過(guò)用pH6.6的緩沖溶液對(duì)各試驗(yàn)樣品在39℃恒溫水域床中培養(yǎng)，可以看出，各試驗(yàn)品過(guò)瘤胃率效果為：樣品A＝樣品B>樣品C。表1pH6.6時(shí)各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的過(guò)瘤胃率(％)時(shí)間2h4h8h12h24h樣品A96.4093.5180.5073.0069.50樣品B96.8093.1079.1072.1570.21樣品C82.0072.0064.9058.2050.20各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的小腸釋放率(pH2.4)從表2中可以看出，通過(guò)用pH2.4的緩沖溶液對(duì)各試驗(yàn)樣品在39℃恒溫水域床中培養(yǎng)，可以看出，各試驗(yàn)品小腸釋放率效果為：樣品A＝樣品B>樣品C。表2pH2.4時(shí)各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的小腸釋放率(％)時(shí)間2h4h8h12h24h樣品A92.2097.30100.00100.00100.00樣品B93.1497.80100.00100.00100.00樣品C89.0092.0094.5095.3097.40各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的產(chǎn)品有效釋放率從表3中可以看出，通過(guò)用pH6.6、pH2.4的緩沖溶液對(duì)各試驗(yàn)樣品在39℃恒溫水域床中培養(yǎng)，可以看出，各試驗(yàn)品有效釋放率效果為：樣品A＝樣品B>樣品C。表3各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的有效釋放率(％)時(shí)間2h4h8h12h24h樣品A88.991.080.573.069.5樣品B90.291.179.172.270.2樣品C73.066.261.355.548.9結(jié)論本試驗(yàn)通過(guò)體外模擬反芻動(dòng)物瘤胃液和小腸溶液的方法對(duì)幾種過(guò)瘤胃葡萄糖產(chǎn)品進(jìn)行體外培養(yǎng)，得出各產(chǎn)品不同時(shí)間點(diǎn)的過(guò)瘤胃率、小腸釋放率以及產(chǎn)品有效釋放率，試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明所得的過(guò)瘤胃葡萄糖的過(guò)瘤胃率、小腸釋放率以及產(chǎn)品有效釋放率相比對(duì)比實(shí)例均有顯著提高。當(dāng)樣品A、B、C中所使用的飽和脂肪酸含有C16～C18飽和脂肪酸的質(zhì)量百分比在大于70％時(shí)，也能達(dá)到類似的實(shí)驗(yàn)效果。前述對(duì)本發(fā)明的具體示例性實(shí)施方案的描述是為了說(shuō)明和例證的目的。這些描述并非想將本發(fā)明限定為所公開(kāi)的精確形式，并且很顯然，根據(jù)上述教導(dǎo)，可以進(jìn)行很多改變和變化。對(duì)示例性實(shí)施例進(jìn)行選擇和描述的目的在于解釋本發(fā)明的特定原理及其實(shí)際應(yīng)用，從而使得本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)并利用本發(fā)明的各種不同的示例性實(shí)施方案以及各種不同的選擇和改變。本發(fā)明的范圍意在由權(quán)利要求書及其等同形式所限定。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3