本發(fā)明涉及魚飼料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料及其制備方法。

背景技術(shù)：

黃河鯉同淞江鱸魚，興凱湖魚、松花江鮭魚被共譽(yù)為我國(guó)四大名魚。黃河鯉，自古就有“豈其食魚，必河之鯉”、“洛鯉伊魴，貴如牛羊”之說(shuō)，向?yàn)槭持掀贰｜S河鯉還以其肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美，金鱗赤尾、體型梭長(zhǎng)的優(yōu)美形態(tài)，馳名中外，是河南省和我國(guó)的寶貴魚類資源。民間流傳有“黃河三尺鯉，本在孟津居，點(diǎn)額不成龍，歸來(lái)伴凡魚”等美好詩(shī)句。

當(dāng)前，黃河鯉的池塘養(yǎng)殖主要集中于河南省的鄭州、洛陽(yáng)、焦作、新鄉(xiāng)、開封、商丘、三門峽等沿黃區(qū)域。但伴隨著集約化、高密度養(yǎng)殖，隨之而來(lái)也出現(xiàn)了環(huán)境惡化、疾病暴發(fā)、魚經(jīng)常處于應(yīng)激等狀態(tài)。在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，魚類持續(xù)不斷的受一些外界因素的影響，特別是水體溫度、養(yǎng)殖密度、養(yǎng)殖水體化學(xué)因子等應(yīng)激，且這些因素往往是復(fù)合存在的。這阻礙了黃河鯉養(yǎng)殖業(yè)在我國(guó)的快速發(fā)展并造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

特別的，應(yīng)激反應(yīng)過(guò)大會(huì)對(duì)動(dòng)物機(jī)體造成不同程度的損害，很多養(yǎng)殖場(chǎng)會(huì)因?yàn)檫@個(gè)原因?yàn)E用抗生素來(lái)解決，不符合健康養(yǎng)殖與食品安全的理念。因此，研究抗應(yīng)激飼料，增強(qiáng)水產(chǎn)動(dòng)物在受干擾的情況下自我調(diào)節(jié)能力，從而緩解應(yīng)激，就成為亟待解決的重大問(wèn)題，引起人們的廣泛關(guān)注。尋找理想的無(wú)毒、無(wú)害、高效、環(huán)保性飼料添加劑日益受到關(guān)注。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中提出的規(guī)模化和集約化養(yǎng)殖過(guò)程中，黃河鯉出現(xiàn)的抗應(yīng)激能力差、發(fā)病率高的問(wèn)題，本發(fā)明提供一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料及其制備方法，提高黃河鯉的抗應(yīng)激和抗病力。

本發(fā)明為解決上述問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料，組成飼料的原料的質(zhì)量占飼料總質(zhì)量的百分比依次為：魚粉14~16%、豆粕8.5~10%、肉骨粉7.5~9%、蠶蛹粉12~30%、發(fā)酵棉粕3~5%、玉米蛋白粉3~4%、玉米淀粉8~10%、米糠7~9%、次粉13~15%、大豆油0.4~2%、牡丹籽油1.5~2%、茶籽油1~2%、番茄紅素0.5%、復(fù)合礦物質(zhì)1%、食鹽0.1~0.5%、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料1%、中藥添加劑0.5~1%；其中，每千克的飼料中還含有乳酸菌1×10⁶~10⁷ cfu/kg、亞硒酸鈉0.2mg/kg、杜仲翅果浸提液0.05~0.2g/kg。

進(jìn)一步地，所述的復(fù)合礦物質(zhì)由KI、CuSO₄·5H₂O、CoCl₂·6H₂O、FeSO₄·7H₂O、MnSO₄·4H₂O和ZnSO₄·7H₂O組成，其中，每千克飼料中含KI 0.06g；CuSO₄·5H₂O 10mg；CoCl₂·6H₂O 1mg；FeSO₄·7H₂O 23.2g；MnSO₄·4H₂O 2g；ZnSO₄·7H₂O 60mg。

進(jìn)一步地，每千克飼料中含維生素為VA 9000 IU；VD 5000 IU；VE 25 mg；VK3 2.2 mg；VC 78 mg；VB₁ 3.2 mg；VB₂ 5.5 mg；煙酸 40 mg； VB₅ 20 mg；VB₆ 10 mg；VB₁₂ 0.018 mg；泛酸 10 mg；葉酸 2.38 mg；膽堿 300 mg。

本發(fā)明制得的飼料中包含的營(yíng)養(yǎng)素和水平為：粗蛋白28~34%、粗脂肪5~8%、總能16~20MJ/kg。

進(jìn)一步地，所述乳酸菌選自乳酸菌培養(yǎng)液，乳酸菌培養(yǎng)液的制備方法：采用純種乳酸菌在35℃條件下擴(kuò)增2天，吸取培養(yǎng)基2mL，離心后棄上清液，然后吸取0.1mL懸濁液，用葡萄糖培養(yǎng)基在pH為7.2條件下進(jìn)行培養(yǎng)24h，制得無(wú)菌含乳酸菌水溶物的完全培養(yǎng)液，完全培養(yǎng)液的濃度為7.8×10⁹ cfu/mL。

制備如上所述的一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料的方法，包括以下步驟：步驟一、將豆粕、發(fā)酵棉粕、肉骨粉、蠶蛹粉和米糠分別用粉粹機(jī)充分粉碎，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)40目篩，然后將粉碎的按照所述的質(zhì)量百分比稱重后，放入混勻機(jī)中攪拌10~20min，混合成混合料A，混合料A的備用；

步驟二、將魚粉、玉米蛋白粉、玉米淀粉、次粉、番茄紅素、復(fù)合礦物質(zhì)、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料和中藥添加劑按照所述的質(zhì)量百分比稱重后依次混合，形成混合料B，備用；

步驟三、將步驟一制備的混合料A和步驟二制備的混合料B全部加入混勻機(jī)中攪拌10~40min，制得混合物A，備用；

步驟四、取杜仲翅果用粉粹機(jī)充分粉碎形成精粉，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)80~100目篩，按精粉：純凈水=1：8~10的質(zhì)量比，將精粉和純凈水混合加入到80~100℃的提取罐中保溫1~1.2h，然后將提取罐中的提取液取出；然后向提取罐中補(bǔ)入相同質(zhì)量的純凈水，并按照上述方法再進(jìn)行三至五次提取，合并多次提取的提取液，備用；

步驟五、將提取液中加入糖化酶，并在60℃下水浴加熱40~55min，然后將提取液置于過(guò)濾器中過(guò)濾，制得杜仲翅果浸提液，備用；其中，每1mL提取液中添加170~200U糖化酶；

步驟六、向步驟三制得的混合物A中加入按照所述的質(zhì)量百分比稱重的大豆油、牡丹籽油、茶籽油和食鹽，預(yù)混10~15min形成混合物B，然后加入占混合物B總質(zhì)量5~8%的純凈水，攪拌均勻后，按照每一千克目標(biāo)飼料加入0.05~0.2克杜仲翅果浸提液的比例，加入步驟五制得的杜仲翅果浸提液，并按照每一千克目標(biāo)飼料加入1×10⁶~10⁷ cfu乳酸菌的比例、每一千克目標(biāo)飼料加入0.2mg亞硒酸鈉的比例依次加入乳酸菌和亞硒酸鈉，繼續(xù)攪拌均勻，制得混合物C，備用；

步驟七、采用制粒機(jī)將步驟六制得的混合物C制成粒徑為1~2mm的顆粒，然后利用冷風(fēng)機(jī)脫水、冷卻并干燥，使顆粒的含水量不超過(guò)10%，制得黃河鯉抗應(yīng)激飼料。其中的顆粒的含水量為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)，以風(fēng)干樣為基礎(chǔ)。

本發(fā)明中使用的水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料為市場(chǎng)上購(gòu)買的產(chǎn)品。

本發(fā)明采用的乳酸菌廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi)的一類物質(zhì)，它能夠提供部分必需氨基酸和維生素，產(chǎn)生酸和酶類，幫助宿主消化；調(diào)整消化道微生態(tài)平衡，通過(guò)頡頏作用抑制和排斥有害菌，以粘附抗性和競(jìng)爭(zhēng)排斥限制有害菌體內(nèi)定植，清除腸胃內(nèi)有害物質(zhì)，調(diào)節(jié)抗應(yīng)激能力；并且，具有價(jià)格低廉、來(lái)源豐富、毒性低、無(wú)耐藥性和藥物殘留的優(yōu)點(diǎn)。

我國(guó)中草藥資源非常豐富，可用中藥添加劑5000多種，目前已應(yīng)用于生產(chǎn)有200多種。中草藥具有天然性、多功能性、無(wú)毒副殘留性、無(wú)抗藥性、雙向調(diào)節(jié)性、促進(jìn)免疫性、抗氧化抗應(yīng)激等諸多優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明通過(guò)對(duì)黃河鯉抗應(yīng)激飼料的開發(fā)，探討其在增強(qiáng)免疫力和抗應(yīng)激的可行性，達(dá)到提高生長(zhǎng)性能、降低餌料系數(shù)、改善魚體健康、提高其抗應(yīng)激的目的，最終解決制約黃河鯉可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵問(wèn)題。

與現(xiàn)有技術(shù)本相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：（一）、飼喂后對(duì)黃河鯉進(jìn)行高溫應(yīng)激和運(yùn)輸應(yīng)激實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)黃河鯉的抗應(yīng)激能力得到顯著提高。（二）、黃河鯉的生長(zhǎng)性能、免疫指標(biāo)活性都得到了顯著的提高，增強(qiáng)了黃河鯉的免疫指標(biāo)的活性。（三）、本發(fā)明中使用的乳酸菌、亞硒酸鈉、中藥添加劑均為綠色、環(huán)保的添加劑，不會(huì)產(chǎn)生對(duì)魚體任何副作用，在改善魚體健康方面能起到較好的作用；而且，乳酸菌能夠降低杜仲翅果浸提液的pH值，促進(jìn)蛋白分解，避免多酚氧化和分子降解；飼料中含有粗蛋白28~34%、粗脂肪5~8%、總能16~20MJ/kg。蛋白質(zhì)和活菌含量高，增強(qiáng)魚體的消化能力。（四）、杜仲翅果中富含α-亞麻酸、亞油酸等多種不飽和脂肪酸、維生素E、桃葉珊瑚甙、京尼平甙、松脂醇二葡萄糖甙等多種聚環(huán)烯醚萜甙類、活性成份、礦物質(zhì)和微量元素；本發(fā)明的飼料中含有亞硒酸鈉，屬于無(wú)機(jī)硒，其與番茄紅素、復(fù)合礦物質(zhì)和中藥添加劑的復(fù)配作用，使飼料中富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、微量元素、杜仲翅果浸提液及生物活性物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)魚體與外界環(huán)境的平衡功能、提高魚體抗應(yīng)激力、增強(qiáng)魚體體質(zhì)、促進(jìn)消化吸收和生長(zhǎng)、抗菌、抑制病毒等作用，增強(qiáng)抗病力，改善黃河鯉健康狀況，降低生產(chǎn)成本，可用于規(guī)?；B(yǎng)殖。（五）本發(fā)明采用大豆油、牡丹籽油和茶籽油復(fù)配，能夠調(diào)配α-亞麻酸和亞油酸的含量，能夠?yàn)轸~類提供不飽和脂肪酸，增強(qiáng)魚體的免疫機(jī)能、提高抗應(yīng)激能力。本發(fā)明中用的大部分原料是在我國(guó)能大量獲得的飼料原料，成本不高，飼喂效果好，便于大規(guī)模推廣。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，以使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以更好的理解本發(fā)明并能予以實(shí)施，但所舉實(shí)施例不作為對(duì)本發(fā)明的限定。

一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料，組成飼料的原料的質(zhì)量占飼料總質(zhì)量的百分比依次為：魚粉14~16%、豆粕8.5~10%、肉骨粉7.5~9%、蠶蛹粉12~30 %、發(fā)酵棉粕3~5%、玉米蛋白粉3~4%、玉米淀粉8~10%、米糠7~9%、次粉13~15%、大豆油0.4~2%、牡丹籽油1.5~2%、茶籽油1~2%、番茄紅素0.5%、復(fù)合礦物質(zhì)1%、食鹽0.1~0.5%、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料1%、中藥添加劑0.5~1%；其中，每千克的飼料中還含有乳酸菌1×10⁶~10⁷ cfu/kg、亞硒酸鈉0.2mg/kg、杜仲翅果浸提液0.05~0.2g/kg。制成的飼料中包含的營(yíng)養(yǎng)素和水平為：粗蛋白28~34%、粗脂肪5~8%、總能16~20MJ/kg。

其中，復(fù)合礦物質(zhì)由KI、CuSO₄·5H₂O、CoCl₂·6H₂O、FeSO₄·7H₂O、MnSO₄·4H₂O和ZnSO₄·7H₂O組成，其中，每千克飼料中含KI 0.06g；CuSO₄·5H₂O 10mg；CoCl₂·6H₂O 1mg；FeSO₄·7H₂O 23.2g；MnSO₄·4H₂O 2g；ZnSO₄·7H₂O 60mg；每千克飼料中含維生素為VA 9000 IU；VD 5000 IU；VE 25 mg；VK3 2.2 mg；VC 78 mg；VB₁ 3.2 mg；VB₂ 5.5 mg；煙酸 40 mg； VB₅ 20 mg；VB₆ 10 mg；VB₁₂ 0.018 mg；泛酸 10 mg；葉酸 2.38 mg；膽堿 300 mg。

實(shí)施例1

一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料的制備方法，飼料中各原料的重量占飼料總重量的百分比依次為：魚粉14%、豆粕8.5%、肉骨粉7.5%、蠶蛹粉30 %、發(fā)酵棉粕3%、玉米蛋白粉3%、玉米淀粉8%、米糠7%、次粉13%、大豆油0.4%、牡丹籽油1.5%、茶籽油1%、番茄紅素0.5%、復(fù)合礦物質(zhì)1%、食鹽0.1%、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料1%、中藥添加劑0.5%。其中，本實(shí)施例原料的重量為：魚粉1.4kg、豆粕0.85kg、肉骨粉0.75kg、蠶蛹粉3kg、發(fā)酵棉粕0.3kg、玉米蛋白粉0.3kg、玉米淀粉0.8kg、米糠0.7kg、次粉1.3kg、大豆油0.04kg、牡丹籽油0.15kg、茶籽油0.1kg、番茄紅素0.05kg、復(fù)合礦物質(zhì)0.1kg、食鹽0.01kg、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料0.1kg、中藥添加劑0.05kg，其中，每千克的總飼料中還含有乳酸菌1×10⁶~10⁷ cfu、亞硒酸鈉0.2mg、杜仲翅果浸提液0.2g。含有的粗蛋白28~34%、粗脂肪5~8%、總能16~20MJ/kg。

本發(fā)明的黃河鯉抗應(yīng)激飼料的制備方法包括以下步驟：步驟一、采用純種乳酸菌在35℃條件下擴(kuò)增2天，吸取培養(yǎng)基2mL，離心后棄上清液，然后吸取0.1mL懸濁液，用葡萄糖培養(yǎng)基在pH為7.2條件下進(jìn)行培養(yǎng)24h，制得無(wú)菌含乳酸菌水溶物的完全培養(yǎng)液，完全培養(yǎng)液的濃度為7.8×10⁹ cfu/mL；乳酸菌選自該完全培養(yǎng)液；

步驟二、將豆粕、發(fā)酵棉粕、肉骨粉、蠶蛹粉和米糠分別用粉粹機(jī)充分粉碎，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)40目篩，然后將粉碎的按照上述重量稱重后，放入混勻機(jī)中攪拌20min，混合成混合料A，混合料A的備用；

步驟三、將魚粉、玉米蛋白粉、玉米淀粉、次粉、番茄紅素、復(fù)合礦物質(zhì)、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料和中藥添加劑按照上述重量稱重后，通過(guò)逐級(jí)擴(kuò)大法進(jìn)行充分混合，形成混合料B，備用；

步驟四、將步驟二制備的混合料A和步驟三制備的混合料B全部加入混勻機(jī)中攪拌30min，制得混合物A，備用；

步驟五、取杜仲翅果用粉粹機(jī)充分粉碎形成精粉，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)80目篩，按精粉：純凈水=1：10的質(zhì)量比，將精粉和純凈水混合加入到95℃的提取罐中保溫1.2h，然后將提取罐中的提取液取出；然后向提取罐中補(bǔ)入相同質(zhì)量的純凈水，并按照上述方法再進(jìn)行三至五次提取，合并多次提取的提取液，備用；

步驟六、將提取液中加入糖化酶，并在60℃下水浴加熱55min，然后將提取液置于過(guò)濾器中過(guò)濾，制得杜仲翅果浸提液，備用；其中，每1mL提取液中添加190~200U糖化酶；

步驟七、向步驟四制得的混合物A中加入按照上述重量稱重的大豆油、牡丹籽油、茶籽油和食鹽，預(yù)混15min形成混合物B，然后加入占混合物B總質(zhì)量8%的純凈水，攪拌均勻后，按照每1kg目標(biāo)飼料加入0.2g杜仲翅果浸提液的比例，加入步驟五制得的杜仲翅果浸提液，并按照每1kg目標(biāo)飼料加入1×10⁶~10⁷ cfu乳酸菌的比例、每1kg目標(biāo)飼料加入0.2mg亞硒酸鈉的比例依次加入乳酸菌和亞硒酸鈉，繼續(xù)攪拌均勻，制得混合物C，備用；

步驟八、采用制粒機(jī)將步驟七制得的混合物C制成粒徑為1~2mm的顆粒，然后利用冷風(fēng)機(jī)脫水、冷卻并干燥，使顆粒的含水量不超過(guò)10%，制得黃河鯉抗應(yīng)激飼料。

選用初重為1.5±0.02g的黃河鯉作為試驗(yàn)魚，在室內(nèi)研究基礎(chǔ)上，經(jīng)過(guò)馴化7d后，隨機(jī)分到8個(gè)水族箱中，設(shè)為2組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾魚，分別投喂基礎(chǔ)日糧（常規(guī)飼料）和實(shí)驗(yàn)日糧，日投飼料重量為魚體重的3~5％。常規(guī)飼料的配方為：魚粉0.5kg、豆粕2.6kg、棉粕1.5kg、花生粕1kg、菜粕0.5kg、豆油0.3kg、魚油0.1kg、麥麩0.8kg、次粉2.08kg、磷酸二氫鈣0.1kg、預(yù)混料0.1kg、食鹽0.02kg、水分1.12kg?？偰芰繛?6.8MJ/kg，粗蛋白29%、粗脂肪5%。實(shí)施例1配方為實(shí)驗(yàn)日糧組。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)8周，養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，饑餓24h，對(duì)實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)行生長(zhǎng)性測(cè)定，并隨機(jī)采集6尾魚的血液，測(cè)定血清免疫指標(biāo)，對(duì)剩下的魚用34℃的高溫進(jìn)行高溫應(yīng)激實(shí)驗(yàn)，在應(yīng)激后的24h采樣。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1、表2和表3。本發(fā)明各實(shí)施例中的a、b標(biāo)示不同組之間的差異顯著性。

表1 對(duì)室內(nèi)養(yǎng)殖黃河鯉生長(zhǎng)性能的影響

表2 對(duì)室內(nèi)養(yǎng)殖黃河鯉血清免疫指標(biāo)的影響

表3 對(duì)室內(nèi)養(yǎng)殖黃河鯉高溫應(yīng)激后應(yīng)激指標(biāo)的影響

結(jié)果表明：本發(fā)明配方飼料提高了黃河鯉的生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)了黃河鯉血清中免疫指標(biāo)活性，并降低了血液皮質(zhì)醇、血糖和乳酸的含量，提高了黃河鯉的抗應(yīng)激能力。

實(shí)施例2

一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料的制備方法，飼料中各原料的重量占飼料總重量的百分比依次為：魚粉16%、豆粕10%、肉骨粉9%、蠶蛹粉12 %、發(fā)酵棉粕5%、玉米蛋白粉4%、玉米淀粉10%、米糠9%、次粉15%、大豆油2%、牡丹籽油2%、茶籽油2%、番茄紅素0.5%、復(fù)合礦物質(zhì)1%、食鹽0.5%、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料1%、中藥添加劑1%。其中，本實(shí)施例原料的重量為：魚粉1.6kg、豆粕1kg、肉骨粉0.9kg、蠶蛹粉1.2kg、發(fā)酵棉粕0.5kg、玉米蛋白粉0.4kg、玉米淀粉1kg、米糠0.9kg、次粉1.5kg、大豆油0.2kg、牡丹籽油0.2kg、茶籽油0.2kg、番茄紅素0.05kg、復(fù)合礦物質(zhì)0.1kg、食鹽0.05kg、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料0.1kg、中藥添加劑0.1kg，其中，每千克的總飼料中還含有乳酸菌1×10⁶~10⁷ cfu、亞硒酸鈉0.2mg、杜仲翅果浸提液0.15g。含有的粗蛋白28~34%、粗脂肪5~8%、總能16~20MJ/kg。

本發(fā)明的黃河鯉抗應(yīng)激飼料的制備方法包括以下步驟：步驟一、采用純種乳酸菌在35℃條件下擴(kuò)增2天，吸取培養(yǎng)基2mL，離心后棄上清液，然后吸取0.1mL懸濁液，用葡萄糖培養(yǎng)基在pH為7.2條件下進(jìn)行培養(yǎng)24h，制得無(wú)菌含乳酸菌水溶物的完全培養(yǎng)液，完全培養(yǎng)液的濃度為7.8×10⁹ cfu/mL，乳酸菌選自該完全培養(yǎng)液；

步驟二、將豆粕、發(fā)酵棉粕、肉骨粉、蠶蛹粉和米糠分別用粉粹機(jī)充分粉碎，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)40目篩，然后將粉碎的按照上述重量稱重后，放入混勻機(jī)中攪拌18min，混合成混合料A，混合料A的備用；

步驟三、將魚粉、玉米蛋白粉、玉米淀粉、次粉、番茄紅素、復(fù)合礦物質(zhì)、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料和中藥添加劑按照上述重量稱重后，通過(guò)逐級(jí)擴(kuò)大法進(jìn)行充分混合，形成混合料B，備用；

步驟四、將步驟二制備的混合料A和步驟三制備的混合料B全部加入混勻機(jī)中攪拌25min，制得混合物A，備用；

步驟五、取杜仲翅果用粉粹機(jī)充分粉碎形成精粉，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)100目篩，按精粉：純凈水=1：9的質(zhì)量比，將精粉和純凈水混合加入到80~100℃的提取罐中保溫1.5h，然后將提取罐中的提取液取出；然后向提取罐中補(bǔ)入相同質(zhì)量的純凈水，并按照上述方法再進(jìn)行三至五次提取，合并多次提取的提取液，備用；

步驟六、將提取液中加入糖化酶，并在60℃下水浴加熱40min，然后將提取液置于過(guò)濾器中過(guò)濾，制得杜仲翅果浸提液，備用；其中，每1mL提取液中添加170~180U糖化酶；

步驟七、向步驟四制得的混合物A中加入按照上述重量稱重的大豆油、牡丹籽油、茶籽油和食鹽，預(yù)混10min形成混合物B，然后加入占混合物B總質(zhì)量5%的純凈水，攪拌均勻后，按照每1kg目標(biāo)飼料加入0.15g杜仲翅果浸提液的比例，加入步驟五制得的杜仲翅果浸提液，并按照每1kg目標(biāo)飼料加入1×10⁶~10⁷ cfu乳酸菌的比例、每1kg目標(biāo)飼料加入0.2mg亞硒酸鈉的比例依次加入乳酸菌和亞硒酸鈉，繼續(xù)攪拌均勻，制得混合物C，備用；

步驟八、采用制粒機(jī)將步驟七制得的混合物C制成粒徑為1~2mm的顆粒，然后利用冷風(fēng)機(jī)脫水、冷卻并干燥，使顆粒的含水量不超過(guò)10%，制得黃河鯉抗應(yīng)激飼料。

對(duì)外界池塘環(huán)境，在仔稚魚研究基礎(chǔ)上，又對(duì)10g左右的幼魚進(jìn)行了研究。選取健康的黃河鯉幼魚180尾隨機(jī)分為2組，每組4個(gè)重復(fù)，每缸30尾，分別投喂實(shí)施例1中列舉常規(guī)飼料作為的基礎(chǔ)日糧和實(shí)施例2作為的實(shí)驗(yàn)日糧，經(jīng)過(guò)8周的飼養(yǎng)試驗(yàn)，對(duì)其進(jìn)行稱重并計(jì)算生長(zhǎng)性能，等魚情穩(wěn)定后，對(duì)其進(jìn)行運(yùn)輸應(yīng)激，并在應(yīng)激后的24h采樣，測(cè)定血液應(yīng)經(jīng)指標(biāo)。結(jié)果表明，飼喂本黃河鯉抗應(yīng)激飼料，魚的末重和特定生長(zhǎng)率都顯著增高，并提高康運(yùn)輸應(yīng)激的能力，試驗(yàn)數(shù)據(jù)見表4和表5。

表4 對(duì)池塘內(nèi)養(yǎng)殖的黃河鯉生長(zhǎng)性能的影響

表5 對(duì)池塘養(yǎng)殖的黃河鯉運(yùn)輸應(yīng)激后應(yīng)激指標(biāo)的影響

實(shí)施例3

一種黃河鯉抗應(yīng)激飼料的制備方法，飼料中各原料的重量占飼料總重量的百分比依次為：魚粉15.5%、豆粕9.5%、肉骨粉8.5%、蠶蛹粉20 .5%、發(fā)酵棉粕4%、玉米蛋白粉3.2%、玉米淀粉9.8%、米糠8%、次粉13.5%、大豆油0.5%、牡丹籽油1.8%、茶籽油1.7%、番茄紅素0.5%、復(fù)合礦物質(zhì)1%、食鹽0.3%、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料1%、中藥添加劑0.7%。其中，本實(shí)施例原料的重量為：魚粉1.55kg、豆粕0.95kg、肉骨粉0.85kg、蠶蛹粉2.05kg、發(fā)酵棉粕0.4kg、玉米蛋白粉0.32kg、玉米淀粉0.98kg、米糠0.8kg、次粉1.35kg、大豆油0.05kg、牡丹籽油0.18kg、茶籽油0.17kg、番茄紅素0.05kg、復(fù)合礦物質(zhì)0.1kg、食鹽0.03kg、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料0.1kg、中藥添加劑0.07kg，其中，每千克的總飼料中還含有乳酸菌1×10⁶~10⁷ cfu、亞硒酸鈉0.2mg、杜仲翅果浸提液0.05g。含有的粗蛋白28~34%、粗脂肪5~8%、總能16~20MJ/kg。

本發(fā)明的黃河鯉抗應(yīng)激飼料的制備方法包括以下步驟：步驟一、采用純種乳酸菌在35℃條件下擴(kuò)增2天，吸取培養(yǎng)基2mL，離心后棄上清液，然后吸取0.1mL懸濁液，用葡萄糖培養(yǎng)基在pH為7.2條件下進(jìn)行培養(yǎng)24h，制得無(wú)菌含乳酸菌水溶物的完全培養(yǎng)液，完全培養(yǎng)液的濃度為7.8×10⁹ cfu/mL，乳酸菌選自該完全培養(yǎng)液；

步驟二、將豆粕、發(fā)酵棉粕、肉骨粉、蠶蛹粉和米糠分別用粉粹機(jī)充分粉碎，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)40目篩，然后將粉碎的按照上述重量稱重后，放入混勻機(jī)中攪拌10min，混合成混合料A，混合料A的備用；

步驟三、將魚粉、玉米蛋白粉、玉米淀粉、次粉、番茄紅素、復(fù)合礦物質(zhì)、水產(chǎn)復(fù)合預(yù)混料和中藥添加劑按照上述重量稱重后，通過(guò)逐級(jí)擴(kuò)大法進(jìn)行充分混合，形成混合料B，備用；

步驟四、將步驟二制備的混合料A和步驟三制備的混合料B全部加入混勻機(jī)中攪拌10min，制得混合物A，備用；

步驟五、取杜仲翅果用粉粹機(jī)充分粉碎形成精粉，粉碎的粒度要求為全部通過(guò)80目篩，按精粉：純凈水=1：8的質(zhì)量比，將精粉和純凈水混合加入到100℃的提取罐中保溫1h，然后將提取罐中的提取液取出；然后向提取罐中補(bǔ)入相同質(zhì)量的純凈水，并按照上述方法再進(jìn)行三至四次提取，合并多次提取的提取液，備用；

步驟六、將提取液中加入糖化酶，并在60℃下水浴加熱45min，然后將提取液置于過(guò)濾器中過(guò)濾，制得杜仲翅果浸提液，備用；其中，每1mL提取液中添加180~200U糖化酶；

步驟七、向步驟四制得的混合物A中加入按照上述重量稱重的大豆油、牡丹籽油、茶籽油和食鹽，預(yù)混10min形成混合物B，然后加入占混合物B總質(zhì)量7%的純凈水，攪拌均勻后，按照每1kg目標(biāo)飼料加入0.05g杜仲翅果浸提液的比例，加入步驟五制得的杜仲翅果浸提液，并按照每1kg目標(biāo)飼料加入1×10⁶~10⁷ cfu乳酸菌的比例、每1kg目標(biāo)飼料加入0.2mg亞硒酸鈉的比例依次加入乳酸菌和亞硒酸鈉，繼續(xù)攪拌均勻，制得混合物C，備用；

步驟八、采用制粒機(jī)將步驟七制得的混合物C制成粒徑為1~2mm的顆粒，然后利用冷風(fēng)機(jī)脫水、冷卻并干燥，使顆粒的含水量不超過(guò)10%，制得黃河鯉抗應(yīng)激飼料。

本實(shí)施例的實(shí)驗(yàn)是在室外池塘進(jìn)行的。本實(shí)施例選用的是魚體規(guī)格為53.5±2.0g大小的一齡黃河鯉，試驗(yàn)分為兩組，每組3重復(fù)，對(duì)照組投喂基礎(chǔ)日糧，實(shí)驗(yàn)組投喂抗應(yīng)激日糧，養(yǎng)殖周期為8周，試驗(yàn)結(jié)束后稱重并計(jì)算生長(zhǎng)性能，結(jié)果表明，飼喂本黃河鯉抗應(yīng)激飼料，黃河鯉的生長(zhǎng)性能顯著提高，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)見表6。

表6 對(duì)池塘養(yǎng)殖的一齡黃河鯉生長(zhǎng)性能的影響

該結(jié)果表明，本發(fā)明黃河鯉抗應(yīng)激飼料，可顯著提高黃河鯉的生長(zhǎng)性能、成活率、降低餌料系數(shù)，降低飼料成本，在生產(chǎn)上完全可行，飼料成本不高，另外，黃河鯉的抗應(yīng)激能力也得到了提高，增強(qiáng)耐運(yùn)輸力，降低黃河鯉的發(fā)病率，改善魚體品質(zhì)，增加水產(chǎn)品價(jià)格，增加經(jīng)濟(jì)效益，本飼料是綠色、無(wú)公害飼料，對(duì)環(huán)境無(wú)污染。

該飼料可以一定程度上提高黃河鯉的生長(zhǎng)性能、降低餌料系數(shù)、提高抗應(yīng)激能力、增強(qiáng)免疫力、并達(dá)到縮短養(yǎng)殖周期、降低養(yǎng)殖成本，最終提高經(jīng)濟(jì)效益的目的。與現(xiàn)有的配合飼料相比，該飼料營(yíng)養(yǎng)均衡，利于黃河鯉的充分消化、吸收，提高飼料利用率，降低餌料系數(shù)，降低飼料成本。