本發(fā)明屬于中藥保健領(lǐng)域，具體涉及一種破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝。
背景技術(shù)：
：靈芝多糖是靈芝“扶正固本”的有效成分。靈芝多糖存在于靈芝菌絲體、子實(shí)體、孢子粉及靈芝工程菌株的發(fā)酵液中，由肽多糖、葡聚糖、雜多糖等組成的混合物。葡聚糖中大部分為β2葡聚糖，少數(shù)為α2葡聚糖，而β2葡聚糖是其發(fā)揮活性的主要成分。研究表明，靈芝多糖具有廣泛的生理活性，具有提高機(jī)體免疫力、抑制腫瘤、增強(qiáng)機(jī)體耐缺氧能力、消除自由基、抗衰老等作用。目前，提取靈芝多糖的方法大多采用水提醇沉法、酸堿提取法、酶法提取、超臨界流體輔助提取、以及超聲波微波提取法等。用這些方法提取的靈芝多糖，其結(jié)構(gòu)、生物活性均會受到溶劑、提取溫度、酸堿度等條件的影響而下降，這些方法也存在提取率不高，雜質(zhì)較多等缺憾，同時靈芝多糖的提取部位也對其物理性質(zhì)、化學(xué)性質(zhì)及生物學(xué)功能產(chǎn)生較大的影響。目前，面市上的靈芝多糖保健食品中，其多糖成分主要來源于靈芝菌絲體，或靈芝子實(shí)體，少部分來源于靈芝高產(chǎn)菌株的發(fā)酵產(chǎn)物，并以靈芝提取物的形式組成產(chǎn)品組方，以靈芝孢子粉多糖為原料的產(chǎn)品正是鳳毛麟角。從靈芝孢子粉中提取多糖的制備工藝大多停留在實(shí)驗(yàn)室階段，或處于中試過程中，尚未見到一款用成熟的靈芝孢子粉多糖提取工藝制備的產(chǎn)品問世。傳統(tǒng)的靈芝多糖提取、分離方法普遍存在提取效率不高、純度低、溶劑用量大等缺點(diǎn)。新型提取分離技術(shù)如超聲波提取、酶法提取、大孔樹脂分離等雖然在一定程度上能夠彌補(bǔ)傳統(tǒng)方法的不足，但由于上述方法的最優(yōu)操作條件較為苛刻，若要將其運(yùn)用到實(shí)際生產(chǎn)中，還需要進(jìn)行大量的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝，包括以下步驟：1)破壁靈芝孢子粉的制備；2)破壁靈芝孢子粉多糖的制備；3)破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備。其中，上述步驟1)中的破壁靈芝孢子粉的制備工藝包括以下步驟：原材料準(zhǔn)備：取靈芝孢子粉原材料，水洗、去雜；真空干燥：設(shè)置真空度和真空干燥時間，使真空干燥后水分≤6％；冷凍脆化破壁：將真空干燥后的原材料在‐18℃條件下，放置脆化3‐5h；然后在40～70℃條件下，進(jìn)行超聲波混合破壁，即得所述破壁靈芝孢子粉。其中，上述步驟1)中的真空度0.7～1.0MPa和真空干燥時間4-8h，超聲波的超聲頻率為18-22千赫茲，混合時間為4～12min，混合轉(zhuǎn)速為20～50rpm。其中，上述步驟2)破壁靈芝孢子粉多糖的制備方法如下：預(yù)處理：取破壁靈芝孢子粉，加入純化水在混勻機(jī)中混合得到混合物；超聲空化：將預(yù)處理后得到的混合物加入超聲波反應(yīng)斧中進(jìn)行超聲空化得到提取液，超聲頻率為10～30kHZ；初純：將提取液抽真空后靜置得到上清液，所述真空度為-0.2～-0.1MPa；靜置時間為10～14h；浸膏濃縮：將上清液進(jìn)行低溫濃縮得到浸膏；濃縮溫度為40～50℃；冷凍干燥：將浸膏真空冷凍干燥得到凍干粉，分為三個階段：預(yù)冷處理、冷凍處理、升溫處理；所述預(yù)冷的溫度為-16℃～-20℃，過夜；所述冷凍處理過程中冷阱溫度為-22℃，冷凍時間為20～24h，升溫處理過程中的升華溫度為35～45℃，升華時間為16～20h；整個真空干燥過程中的真空度為-0.2～-0.1MPa；粉碎并收集：將凍干粉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎整齊，顆粒通過70～90目篩網(wǎng)，裝袋，封口即得。其中，上述步驟2)破壁靈芝孢子粉多糖的制備步驟中：破壁靈芝孢子粉：純化水的質(zhì)量比為1：(5‐10)。其中，上述步驟2)破壁靈芝孢子粉多糖的制備步驟中：混勻機(jī)轉(zhuǎn)速為30～40rpm，混合溫度為50～60℃，混合時間為5～10min。其中，上述步驟3)破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝如下：將玉米淀粉、異麥芽酮糖醇與破壁靈芝孢子粉多糖充分混合，得到混合料；取上述混合料，加入硬脂酸鎂，充分混合均勻后，壓片，即得破壁靈芝孢子粉多糖含片。其中，上述破壁靈芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁靈芝孢子粉多糖5～334.4份、異麥芽酮糖醇1.0～60份、玉米淀粉0.5～28份、硬脂酸鎂0.1～5.6份。其中，上述破壁靈芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁靈芝孢子粉多糖334.4份、異麥芽酮糖醇40份、玉米淀粉20份、硬脂酸鎂5.6份。其中，上述破壁靈芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁靈芝孢子粉多糖5份、異麥芽酮糖醇1.0份、玉米淀粉0.5份、硬脂酸鎂0.1份。其中，上述破壁靈芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁靈芝孢子粉多糖334.4份、異麥芽酮糖醇60份、玉米淀粉28份、硬脂酸鎂5.6份。本發(fā)明的主要原料來源于靈芝(Ganodermalucidum)。我國在《真菌類保健食品申報與審評規(guī)定(試行)》中明確，靈芝是可用于保健食品的真菌菌種。破壁靈芝孢子粉多糖是以新鮮靈芝孢子粉為原料，經(jīng)去雜、破壁、超聲空化提取、低溫濃縮、冷凍干燥、粉碎等工藝而制成的破壁靈芝孢子粉提取物。黃曉蘭等學(xué)者研究破壁與不破壁孢子粉多糖的單糖組成。他們指出：破壁與不破壁孢子粉多糖的單糖組成相同，但破壁靈芝孢子粉多糖較不破壁孢子粉的多糖高出70％，增加部分為相對分子質(zhì)量較小的多糖，其生物活性較強(qiáng)，藥用價值更好。研究表明，靈芝孢子粉的多糖可顯著增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬功能，具有免疫調(diào)節(jié)作用。靈芝多糖能提高小鼠特異性體液免疫功能，提高小鼠的B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的能力。由此可見，靈芝提取物中的多糖類成分均為增強(qiáng)免疫的主要有效成分。本發(fā)明的另一原料為異麥芽酮糖醇。異麥芽酮糖醇(Isomalt)又稱帕拉金糖醇(Palatinitol)，國外稱益壽糖，是近年來新興的功能性食用糖醇，天然存在于蜂蜜和甘蔗汁中，是一種功能性二糖。異麥芽酮糖醇呈白色無臭結(jié)晶或粉末，甜度約為蔗糖的50％，低吸濕性，它具有不引起血糖和胰島素水平波動，非致齲齒性、低熱量、高耐受性等生理功效，被美國FDA給予食品安全最高等級“GRAS(公認(rèn)安全)”。2008年異麥芽酮糖醇由我國衛(wèi)生部批準(zhǔn)為新資源食品(中華人民共和國衛(wèi)生部公告2008年第20號)。異麥芽酮糖醇以它良好的可壓性，在本產(chǎn)品的配方工藝中是一種干粉直壓的填充劑。正由于異麥芽酮糖醇這一特性，使本產(chǎn)品的壓片工藝變得快捷、方便。本產(chǎn)品中異麥芽酮糖醇的食用量為160mg/天，遠(yuǎn)低于100克/天的規(guī)定量(中華人民共和國衛(wèi)生部公告2008年第20號)，并按照“中華人民共和國衛(wèi)生部公告2008年第20號”中有關(guān)異麥芽酮糖醇項(xiàng)下的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及“QB/T4486異麥芽酮糖醇”的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)使用這一功能性糖醇。玉米淀粉，俗名六谷粉。是一種來源于玉米的食品原料。玉米淀粉在本產(chǎn)品作為崩解劑，確保本產(chǎn)品在胃腸中遇水能快速吸水崩解，溶出靈芝多糖等功效物質(zhì)，便于被人體吸收、利用。按照我國國家標(biāo)準(zhǔn)“GB/T8885食用玉米淀粉”的質(zhì)量要求，使用玉米淀粉。硬脂酸鎂(CNS號02.006)，在本產(chǎn)品的組方中貢獻(xiàn)于潤滑劑，并按照食品添加劑指定標(biāo)準(zhǔn)“衛(wèi)生部關(guān)于指定D-甘露糖醇等58個食品添加劑產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的公告(2011年第8號)”及《中華人民共和國藥典》2015年二部的規(guī)定使用硬脂酸鎂；硬脂酸鎂在本品中的用量按照“GB2760-2014食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)”規(guī)定的用量組成本配方。本發(fā)明中破壁方法采用冷凍脆化破壁，僅需在-18℃條件下，放置脆化3-5h，再進(jìn)行超聲波破壁，即可達(dá)到99％以上的破壁率，條件要求低，工藝簡單，無需添加任何輔料，并且能有效保留原料中的有效成分，破壁率高?，F(xiàn)有技術(shù)中有采用液氮中超低溫冷凍處理5-120分鐘，然后室溫靜置，并且反復(fù)多次的破壁方法，該方法成本高，操作復(fù)雜，條件要求高，并且破壁效果不佳；還有技術(shù)將原料置于干冰和無水乙醇的混合物中，采用超聲波進(jìn)行機(jī)械粉碎破壁，雖然該技術(shù)也采用超聲波破壁，但是其破壁仍然需要在低溫環(huán)境下，并且還需加入干冰和無水乙醇，除了增加成本外，無水乙醇會破壞其中有效成分，甚至造成殘留。本發(fā)明是以破壁靈芝孢子粉提取靈芝孢子油后的剩余物料為原料，采用超聲空化、極限真空低溫水提取工藝制取靈芝孢子粉多糖，再經(jīng)低溫濃縮膏狀物、冷凍干燥，粉碎過篩等步驟制備具有增強(qiáng)免疫力功能的保健食品原料靈芝孢子粉多糖干品，是對靈芝孢子粉的綜合利用。本發(fā)明制備的破壁靈芝孢子粉多糖，與傳統(tǒng)的靈芝子實(shí)體多糖有著明顯的區(qū)別：靈芝孢子粉多糖無苦味、具有破壁靈芝孢子粉特有的氣香味、蔗糖醇味。靈芝多糖(靈芝子實(shí)體多糖)具有強(qiáng)烈苦味，傳統(tǒng)工藝用乙醇提取，配輔料環(huán)狀糊精、羧甲纖維素鈉把子實(shí)體多糖苦味以降到最低程度。本發(fā)明的提取工藝與傳統(tǒng)的堿提取、醇沉等提取方法相比，水提取過程均在低溫、無溶劑接觸條件下進(jìn)行，有效地保留了靈芝孢子粉多糖的生物活性，使其免受溶劑、溫度等理化因素的影響。用這一方法提取的靈芝孢子粉多糖膏體水分低、雜質(zhì)少，再經(jīng)過后續(xù)的低溫冷凍干燥進(jìn)一步純化破壁靈芝孢子粉多糖。本方法提取的靈芝孢子粉多糖具有蔗糖香甜、純度高、無溶劑殘留等特點(diǎn)。有益效果：本發(fā)明的產(chǎn)品是以破壁靈芝孢子粉多糖、異麥芽酮糖醇、玉米淀粉、硬脂酸鎂為原料，經(jīng)配料、混合、壓片、裝瓶/鋁塑包裝、外包裝而成的破壁靈芝孢子粉多糖含片。具有“增強(qiáng)免疫力”功能的保健食品。本發(fā)明與傳統(tǒng)的堿提醇沉等提取方法相比，本發(fā)明的工藝過程均在低溫、無化學(xué)溶劑接觸條件下進(jìn)行，有效地保留了破壁靈芝孢子粉多糖的生物活性，使其免受溶劑、溫度等理化因素的影響。用這一工藝提取的靈芝孢子粉多糖口感醇香，無靈芝菌絲體多糖、子實(shí)體多糖的苦味而具有蔗糖甜醇感，在后續(xù)的成品配方中不需要添加遮味劑，可直接入組方；這種多糖物料具有良好的流動性、可壓性及較大的堆積密度，適合加工成片劑、膠囊劑。具體實(shí)施方式下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。本發(fā)明中的破壁靈芝孢子粉多糖得率按照以下公式算得：多糖得率(％)＝破壁靈芝孢子粉多糖重量(g)/破壁靈芝孢子粉重量(g)*100％實(shí)施例1：破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備破壁靈芝孢子粉的制備：(1)原材料準(zhǔn)備：取靈芝孢子粉原材料，水洗、去雜；(2)真空干燥：設(shè)置真空度和真空干燥時間，真空度為0.9MPa，真空干燥時間為6h，使真空干燥后水分≤6％；(3)冷凍脆化破壁：將真空干燥后的原材料在-18℃條件下，放置脆化4h；然后在55℃條件下，進(jìn)行超聲波混合破壁，超聲波的超聲頻率為20千赫茲，混合時間為8min，混合轉(zhuǎn)速為35rpm，即得所述破壁靈芝孢子粉。破壁靈芝孢子粉多糖的提取工藝，包括以下步驟：1)預(yù)處理：取破壁靈芝孢子粉70kg，加入純化水在混勻機(jī)中混合得到混合物；混勻機(jī)轉(zhuǎn)速為30rpm，混合溫度為50℃，混合時間為10min；其中，破壁靈芝孢子粉：純化水的質(zhì)量比為1：5；2)超聲空化：將步驟1)預(yù)處理后得到的混合物加入超聲波反應(yīng)斧中進(jìn)行超聲空化得到提取液；超聲頻率為30kHZ；3)初純：將步驟2)得到的提取液抽真空后靜置得到上清液，所述真空度為-0.2MPa；靜置時間為14h；4)浸膏濃縮：將步驟3)得到的上清液進(jìn)行低溫濃縮得到浸膏；濃縮溫度為40℃；5)冷凍干燥：將浸膏真空冷凍干燥得到凍干粉，分為三個階段：預(yù)冷處理、冷凍處理、升溫處理；所述預(yù)冷的溫度為-16℃，過夜；所述冷凍處理過程中冷阱溫度為-22℃，冷凍時間為24h，升溫處理過程中的升華溫度為45℃，升華時間為16h；整個真空干燥過程中的真空度為-0.2MPa；6)粉碎并收集：將凍干粉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎整齊，顆粒通過70目篩網(wǎng)，裝袋，封口即得破壁靈芝孢子粉多糖6.8kg。破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝如下：1)將玉米淀粉20份、異麥芽酮糖醇40份與破壁靈芝孢子粉多糖334.4份充分混合，得到混合料；2)取上述混合料，加入硬脂酸鎂5.6份，充分混合均勻后，壓片，即得破壁靈芝孢子粉多糖含片。實(shí)施例2：破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備破壁靈芝孢子粉的制備：(1)原材料準(zhǔn)備：取靈芝孢子粉原材料，水洗、去雜；(2)真空干燥：設(shè)置真空度和真空干燥時間，真空度為0.9MPa，真空干燥時間為6h，使真空干燥后水分≤6％；(3)冷凍脆化破壁：將真空干燥后的原材料在-18℃條件下，放置脆化4h；然后在55℃條件下，進(jìn)行超聲波混合破壁，超聲波的超聲頻率為20千赫茲，混合時間為8min，混合轉(zhuǎn)速為35rpm，即得所述破壁靈芝孢子粉。破壁靈芝孢子粉多糖的提取工藝，包括以下步驟：1)預(yù)處理：取破壁靈芝孢子粉70kg，加入純化水在混勻機(jī)中混合得到混合物；混勻機(jī)轉(zhuǎn)速為40rpm，混合溫度為60℃，混合時間為5min；破壁靈芝孢子粉：純化水的質(zhì)量比為1：10；2)超聲空化：將步驟1)預(yù)處理后得到的混合物加入超聲波反應(yīng)斧中進(jìn)行超聲空化得到提取液；超聲頻率為30kHZ；3)初純：將步驟2)得到的提取液抽真空后靜置得到上清液，所述真空度為-0.1MPa；靜置時間為14h；4)浸膏濃縮：將步驟3)得到的上清液進(jìn)行低溫濃縮得到浸膏；濃縮溫度為50℃5)冷凍干燥：將浸膏真空冷凍干燥得到凍干粉，分為三個階段：預(yù)冷處理、冷凍處理、升溫處理；所述預(yù)冷的溫度為-20℃，過夜；所述冷凍處理過程中冷阱溫度為-22℃，冷凍時間為20h，升溫處理過程中的升華溫度為35℃，升華時間為20h；整個真空干燥過程中的真空度為-0.1MPa；6)粉碎并收集：將凍干粉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎整齊，顆粒通過90目篩網(wǎng)，裝袋，封口即得破壁靈芝孢子粉多糖6.027kg。破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝如下：1)將玉米淀粉0.5份、異麥芽酮糖醇1.0份與破壁靈芝孢子粉多5份充分混合，得到混合料；2)取上述混合料，加入硬脂酸鎂0.1份，充分混合均勻后，壓片，即得破壁靈芝孢子粉多糖含片。實(shí)施例3破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備破壁靈芝孢子粉的制備：(1)原材料準(zhǔn)備：取靈芝孢子粉原材料，水洗、去雜；(2)真空干燥：設(shè)置真空度和真空干燥時間，真空度為0.9MPa，真空干燥時間為6h，使真空干燥后水分≤6％；(3)冷凍脆化破壁：將真空干燥后的原材料在-18℃條件下，放置脆化4h；然后在55℃條件下，進(jìn)行超聲波混合破壁，超聲波的超聲頻率為20千赫茲，混合時間為8min，混合轉(zhuǎn)速為35rpm，即得所述破壁靈芝孢子粉。破壁靈芝孢子粉多糖的提取工藝，包括以下步驟：1)預(yù)處理：取破壁靈芝孢子粉70kg，加入純化水在混勻機(jī)中混合得到混合物；混勻機(jī)轉(zhuǎn)速為35rpm，混合溫度為55℃，混合時間為7min；破壁靈芝孢子粉：純化水的質(zhì)量比為1：8；2)超聲空化：將步驟1)預(yù)處理后得到的混合物加入超聲波反應(yīng)斧中進(jìn)行超聲空化得到提取液；超聲頻率為20kHZ；3)初純：將步驟2)得到的提取液抽真空后靜置得到上清液，所述真空度為-0.1MPa；靜置時間為12h；4)浸膏濃縮：將步驟3)得到的上清液進(jìn)行低溫濃縮得到浸膏；濃縮溫度為45℃5)冷凍干燥：將浸膏真空冷凍干燥得到凍干粉，分為三個階段：預(yù)冷處理、冷凍處理、升溫處理；所述預(yù)冷的溫度為-18℃，過夜；所述冷凍處理過程中冷阱溫度為-22℃，冷凍時間為22h，升溫處理過程中的升華溫度為40℃，升華時間為18h；整個真空干燥過程中的真空度為-0.2MPa；6)粉碎并收集：將凍干粉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎整齊，顆粒通過80目篩網(wǎng)，裝袋，封口即得破壁靈芝孢子粉多糖5.516kg。破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝如下：1)將玉米淀粉28份、異麥芽酮糖醇60份與破壁靈芝孢子粉多糖334.4份充分混合，得到混合料；2)取上述混合料，加入硬脂酸鎂5.6份，充分混合均勻后，壓片，即得破壁靈芝孢子粉多糖含片。實(shí)施例4破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備破壁靈芝孢子粉的制備：(1)原材料準(zhǔn)備：取靈芝孢子粉原材料，水洗、去雜；(2)真空干燥：設(shè)置真空度和真空干燥時間，真空度為0.7MPa，真空干燥時間為4h，使真空干燥后水分≤6％；(3)冷凍脆化破壁：將真空干燥后的原材料在-18℃條件下，放置脆化3h；然后在40℃條件下，進(jìn)行超聲波混合破壁，超聲波的超聲頻率為18千赫茲，混合時間為4min，混合轉(zhuǎn)速為50rpm，即得所述破壁靈芝孢子粉。破壁靈芝孢子粉多糖的提取工藝，包括以下步驟：1)預(yù)處理：取破壁靈芝孢子粉70kg，加入純化水在混勻機(jī)中混合得到混合物；混勻機(jī)轉(zhuǎn)速為35rpm，混合溫度為55℃，混合時間為8min；破壁靈芝孢子粉：純化水的質(zhì)量比為1：7；2)超聲空化：將步驟1)預(yù)處理后得到的混合物加入超聲波反應(yīng)斧中進(jìn)行超聲空化得到提取液；超聲頻率為25kHZ；3)初純：將步驟2)得到的提取液抽真空后靜置得到上清液，所述真空度為-0.2MPa；靜置時間為11h；4)浸膏濃縮：將步驟3)得到的上清液進(jìn)行低溫濃縮得到浸膏；濃縮溫度為46℃5)冷凍干燥：將浸膏真空冷凍干燥得到凍干粉，分為三個階段：預(yù)冷處理、冷凍處理、升溫處理；所述預(yù)冷的溫度為-19℃，過夜；所述冷凍處理過程中冷阱溫度為-22℃，冷凍時間為23h，升溫處理過程中的升華溫度為42℃，升華時間為18h；整個真空干燥過程中的真空度為-0.1MPa；6)粉碎并收集：將凍干粉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎整齊，顆粒通過85目篩網(wǎng)，裝袋，封口即得破壁靈芝孢子粉多糖5.761kg。破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝如下：1)將玉米淀粉25份、異麥芽酮糖醇35份與破壁靈芝孢子粉多糖300份充分混合，得到混合料；2)取上述混合料，加入硬脂酸鎂3份，充分混合均勻后，壓片，即得破壁靈芝孢子粉多糖含片。實(shí)施例5破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備破壁靈芝孢子粉的制備：(1)原材料準(zhǔn)備：取靈芝孢子粉原材料，水洗、去雜；(2)真空干燥：設(shè)置真空度和真空干燥時間，真空度為1.0MPa，真空干燥時間為8h，使真空干燥后水分≤6％；(3)冷凍脆化破壁：將真空干燥后的原材料在-18℃條件下，放置脆化5h；然后在70℃條件下，進(jìn)行超聲波混合破壁，超聲波的超聲頻率為22千赫茲，混合時間為12min，混合轉(zhuǎn)速為20rpm，即得所述破壁靈芝孢子粉。破壁靈芝孢子粉多糖的提取工藝，包括以下步驟：1)預(yù)處理：取破壁靈芝孢子粉70kg，加入純化水在混勻機(jī)中混合得到混合物；混勻機(jī)轉(zhuǎn)速為40rpm，混合溫度為50℃，混合時間為10min；破壁靈芝孢子粉：純化水的質(zhì)量比為1：8；2)超聲空化：將步驟1)預(yù)處理后得到的混合物加入超聲波反應(yīng)斧中進(jìn)行超聲空化得到提取液；超聲頻率為15kHZ；3)初純：將步驟2)得到的提取液抽真空后靜置得到上清液，所述真空度為-0.1MPa；靜置時間為13h；4)浸膏濃縮：將步驟3)得到的上清液進(jìn)行低溫濃縮得到浸膏；濃縮溫度為43℃5)冷凍干燥：將浸膏真空冷凍干燥得到凍干粉，分為三個階段：預(yù)冷處理、冷凍處理、升溫處理；所述預(yù)冷的溫度為-16℃，過夜；所述冷凍處理過程中冷阱溫度為-22℃，冷凍時間為24h，升溫處理過程中的升華溫度為45℃，升華時間為20h；整個真空干燥過程中的真空度為-0.2MPa；6)粉碎并收集：將凍干粉經(jīng)粉碎機(jī)粉碎整齊，顆粒通過70～90目篩網(wǎng)，裝袋，封口即得破壁靈芝孢子粉多糖5.278kg。破壁靈芝孢子粉多糖含片的制備工藝如下：1)將玉米淀粉14份、異麥芽酮糖醇30份與破壁靈芝孢子粉多糖169.7份充分混合，得到混合料；2)取上述混合料，加入硬脂酸鎂2.85份，充分混合均勻后，壓片，即得破壁靈芝孢子粉多糖含片。實(shí)驗(yàn)例1破壁靈芝孢子粉多糖含片多糖含量的測定1.樣品處理：取樣品用研缽粉碎，混合均勻。精密稱取樣品粉末0.5g，精確到0.001g，用冷水溶解并全部轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中。定容并混合均勻后，置于4℃冰箱靜置2－4小時。準(zhǔn)確移取容量瓶中上層清液5.0mL，轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶，并用水定容。此溶液為樣品測定液，過濾后使用。2.標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液的配制：精密吸取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于25mL具塞比色管中，準(zhǔn)確補(bǔ)水至1.0mL。加入5％苯酚水溶液1.0mL，再快速加5.0mL濃硫酸(與液面垂直加入，勿接觸試管壁，以便與反應(yīng)液充分混合)，靜置10min，使用渦旋振蕩器使反應(yīng)液充分混合，然后將試管置于30℃水浴中反應(yīng)20min，冷卻至室溫后，用分光光度計(jì)在490nm處測定吸光度值。取水1.0mL，加5％苯酚溶液1.0mL，濃硫酸5.0mL，同上做空白對照。以葡萄糖質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.樣品測定：精密吸取樣品測定液1.0mL于25mL具塞比色管中，按步驟B.4.2操作，測吸光度，以標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算多糖含量。4.計(jì)算樣品中多糖含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，單位以克每百克(g/100g)表示，按式(1)計(jì)算：式中：m1—樣品測得的光度計(jì)數(shù)值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線所求得的對應(yīng)葡萄糖量，單位為微克(μg)；m2—樣品質(zhì)量，單位為克(g)V1—樣品定容體積，單位為毫升(mL)V2—比色測定時，所移取的樣品測定液的體積，單位為毫升(mL)通過上述方法對實(shí)施例1～5制備得到的破壁靈芝孢子粉多糖含片分別進(jìn)行測定，得到多糖含量；通過對對實(shí)施例1～5制備得到的破壁靈芝孢子粉多糖分別進(jìn)行測定得到多糖得率：測定結(jié)果見表1：實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3實(shí)施例4實(shí)施例5多糖含量57.8％55.5％56.7％57.6％57.5％多糖得率9.71％8.61％7.88％8.23％7.54％實(shí)驗(yàn)例2破壁靈芝孢子粉多糖含片穩(wěn)定性研究采用濃硫酸法測定破壁靈芝孢子粉多糖含片中多糖含量采用加速試驗(yàn)，考察所得破壁靈芝孢子粉多糖含片的穩(wěn)定性，結(jié)果如下表2：表2破壁靈芝孢子粉多糖含片穩(wěn)定性考察本發(fā)明制備工藝所得破壁靈芝孢子粉多糖含片，經(jīng)過加速試驗(yàn)結(jié)果表明，其多糖含量在1個月、2個月和3個月時均沒有顯著變化，表明其穩(wěn)定性強(qiáng)，性能優(yōu)異。盡管本發(fā)明的具體實(shí)施方式已經(jīng)得到詳細(xì)描述，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解。根據(jù)已經(jīng)公開的所有教導(dǎo)，可以對那些細(xì)節(jié)進(jìn)行各種修改和替換，這些均在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。本發(fā)明的全部范圍由所附專利要求極其任何等同物給出。當(dāng)前第1頁1 2 3