本發(fā)明涉及一種蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維的制備方法，屬于膳食纖維技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

膳食纖維是食物中不被人體胃腸消化酶所分解的、不可消化植物成分的總稱，被 稱為“第七大營(yíng)養(yǎng)素”，包括可溶性膳食纖維和不溶性膳食纖維。膳食纖維對(duì)人體健康有重要的生理功能，如降膽固醇、預(yù)防肥胖等。廣義上的膳食纖維泛指不能被人體內(nèi)源酶消化吸收的可食用植物細(xì)胞、多糖、木質(zhì)素以及相關(guān)物質(zhì)的總和， 包括食品中的大量組成成分如纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、膠質(zhì)、改性纖維素、 黏質(zhì)、寡糖、果膠以及少量組成成分如蠟質(zhì)、軟木質(zhì)。按其溶解特性不同分為可溶性膳食纖維和不溶性膳食纖維兩大類(lèi)，兩者在人體內(nèi)所具有的生理功能有所不同。相比而言，可溶性膳食纖維對(duì)人體的生理代謝發(fā)揮著更為重要的作用，它具有防止膽結(jié)石、排除體內(nèi)有害金屬離子、防治糖尿病、降低血清及膽固醇、防止高血壓和心臟病等作用，是一種極具應(yīng)用開(kāi)發(fā)潛力的功能食品添加劑。

南瓜內(nèi)含有維生素和果膠，果膠有很好的吸附性，能粘結(jié)和消除體內(nèi)細(xì)菌毒素和其他有害物質(zhì)，如重金屬中的鉛、汞和放射性元素，起到解毒作用。南瓜所含果膠還可以保護(hù)胃腸道粘膜，免受粗糙食品刺激，促進(jìn)潰瘍面愈合，適宜于胃病患者。南瓜所含成分能促進(jìn)膽汁分泌，加強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)。幫助食物消化。南瓜能消除致癌物質(zhì)亞硝胺的突變作用，有防癌功效，并能幫助肝、腎功能的恢復(fù)，增強(qiáng)肝、腎細(xì)胞的再生能力。銀耳也是一味滋補(bǔ)良藥，特點(diǎn)是滋潤(rùn)而不膩滯，具有補(bǔ)脾開(kāi)胃、益氣清腸、安眠健胃、補(bǔ)腦、養(yǎng)陰清熱、潤(rùn)燥之功，對(duì)陰虛火旺不受參茸等溫?zé)嶙萄a(bǔ)的病人是一種良好的補(bǔ)品。銀耳富有天然特性膠質(zhì)，加上它的滋陰作用，長(zhǎng)期服用可以潤(rùn)膚，并有祛除臉部黃褐斑、雀斑的功效。銀耳是種含膳食纖維的減肥食品，它的膳食纖維可助胃腸蠕動(dòng)，減少脂肪吸收。因此，是制備可溶性膳食纖維的優(yōu)良原料。雖然總膳食纖維含量較高，但是其中的可溶性膳食纖維的含量卻非常低。因此，如何提高可溶性膳食纖維的含量成為研究的關(guān)鍵。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題：針對(duì)人體能有效吸收的可溶性膳食纖維含量少，生物利用度低的問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維的制備方法，本發(fā)明從蝸牛嗉囊中提取制備蝸牛酶，通過(guò)蝸牛酶中纖維素酶、果膠酶、淀粉酶、蛋白酶等多種酶協(xié)同作用，對(duì)南瓜和銀耳中不溶性膳食纖維進(jìn)行適當(dāng)水解，有利于南瓜和銀耳中營(yíng)養(yǎng)成分的提取，提高可溶性膳食纖維收率，本發(fā)明制備的可溶性膳食纖維收率高，且具有較好的排除體內(nèi)有害金屬離子、防治糖尿病、降低血清及膽固醇的效果。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

（1）選取20只體重20~40g健康蝸牛，將其置于飼養(yǎng)盒中饑餓處理3~5天，每天用去離子水清洗1~3次，洗凈蝸牛后敲碎并剝?nèi)ノ伵?，完整取出蝸牛軟體，順其消化道剪開(kāi)蝸牛軟體剝離消化道，取出嗉囊，在5~8℃下，將嗉囊加入研缽中研磨破碎10~15min，得蝸牛消化道液；

（2）量取15~20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%檸檬酸溶液，加入20~25mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%磷酸氫二鈉溶液中，以300~400r/min攪拌混合均勻，得檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，向上述蝸牛消化道液中加入15~20mL檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，在300W超聲波超聲提取1~2h，得混合液，將混合液裝入離心機(jī)中，以8000~10000r/min離心分離10~20min，取上清液，將上清液裝入冷凍干燥箱中，在﹣30~﹣10℃下冷凍干燥10~12h，得蝸牛酶，備用；

（3）稱取5~6kg南瓜，用去離子水洗滌表皮1~2次，切開(kāi)南瓜去籽后裝入組織搗碎機(jī)中破碎制漿，得南瓜汁，稱取100~200g銀耳，自然風(fēng)干后，加入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)100目篩，將過(guò)篩后的銀耳粉加入上述南瓜汁中，以300~500r/min攪拌混合20~30min，隨后轉(zhuǎn)入高壓滅菌鍋中滅菌處理，得南瓜銀耳混合液；

（4）量取100~120mL上述南瓜銀耳混合液，與500~600mL去離子水混合均勻，加入1.2~1.5g步驟（2）制備的蝸牛酶，在30~40℃恒溫水浴下，以150~200r/min攪拌反應(yīng)3~5h，隨后轉(zhuǎn)入離心機(jī)中，以7000~8000r/min離心分離15~20min，收集上清液并將其減壓蒸發(fā)濃縮至原體積的20~30%，加入200~400mL無(wú)水乙醇，靜置1~2h后，真空抽濾，將濾餅置于干燥箱中，在70~80℃下干燥至恒重，并轉(zhuǎn)入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)60目篩，得蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：高血脂高血糖患者每天吃30~40g添加本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維食物，一個(gè)月后，血壓指數(shù)下降8~16%，血糖指數(shù)下降6~15%，本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維得率為24~36%。

本發(fā)明的有益技術(shù)效果是：

（1）本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維營(yíng)養(yǎng)好，口感佳，安全，純度高；

（2）本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維反應(yīng)迅速，條件溫和，設(shè)備要求簡(jiǎn)單且無(wú)污染，成本低。

具體實(shí)施方式

選取20只體重20~40g健康蝸牛，將其置于飼養(yǎng)盒中饑餓處理3~5天，每天用去離子水清洗1~3次，洗凈蝸牛后敲碎并剝?nèi)ノ伵?，完整取出蝸牛軟體，順其消化道剪開(kāi)蝸牛軟體剝離消化道，取出嗉囊，在5~8℃下，將嗉囊加入研缽中研磨破碎10~15min，得蝸牛消化道液；量取15~20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%檸檬酸溶液，加入20~25mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%磷酸氫二鈉溶液中，以300~400r/min攪拌混合均勻，得檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，向上述蝸牛消化道液中加入15~20mL檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，在300W超聲波超聲提取1~2h，得混合液，將混合液裝入離心機(jī)中，以8000~10000r/min離心分離10~20min，取上清液，將上清液裝入冷凍干燥箱中，在﹣30~﹣10℃下冷凍干燥10~12h，得蝸牛酶；稱取5~6kg南瓜，用去離子水洗滌表皮1~2次，切開(kāi)南瓜去籽后裝入組織搗碎機(jī)中破碎制漿，得南瓜汁，稱取100~200g銀耳，自然風(fēng)干后，加入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)100目篩，將過(guò)篩后的銀耳粉加入上述南瓜汁中，以300~500r/min攪拌混合20~30min，隨后轉(zhuǎn)入高壓滅菌鍋中滅菌處理，得南瓜銀耳混合液；量取100~120mL上述南瓜銀耳混合液，與500~600mL去離子水混合均勻，加入1.2~1.5g上述蝸牛酶，在30~40℃恒溫水浴下，以150~200r/min攪拌反應(yīng)3~5h，隨后轉(zhuǎn)入離心機(jī)中，以7000~8000r/min離心分離15~20min，收集上清液并將其減壓蒸發(fā)濃縮至原體積的20~30%，加入200~400mL無(wú)水乙醇，靜置1~2h后，真空抽濾，將濾餅置于干燥箱中，在70~80℃下干燥至恒重，并轉(zhuǎn)入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)60目篩，得蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維。

實(shí)例1

選取20只體重20g健康蝸牛，將其置于飼養(yǎng)盒中饑餓處理3天，每天用去離子水清洗1次，洗凈蝸牛后敲碎并剝?nèi)ノ伵?，完整取出蝸牛軟體，順其消化道剪開(kāi)蝸牛軟體剝離消化道，取出嗉囊，在5℃下，將嗉囊加入研缽中研磨破碎10min，得蝸牛消化道液；量取15mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%檸檬酸溶液，加入20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%磷酸氫二鈉溶液中，以300r/min攪拌混合均勻，得檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，向上述蝸牛消化道液中加入15mL檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，在300W超聲波超聲提取1h，得混合液，將混合液裝入離心機(jī)中，以8000r/min離心分離10min，取上清液，將上清液裝入冷凍干燥箱中，在﹣10℃下冷凍干燥10h，得蝸牛酶；稱取5kg南瓜，用去離子水洗滌表皮1次，切開(kāi)南瓜去籽后裝入組織搗碎機(jī)中破碎制漿，得南瓜汁，稱取100g銀耳，自然風(fēng)干后，加入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)100目篩，將過(guò)篩后的銀耳粉加入上述南瓜汁中，以300r/min攪拌混合20min，隨后轉(zhuǎn)入高壓滅菌鍋中滅菌處理，得南瓜銀耳混合液；量取100mL上述南瓜銀耳混合液，與500mL去離子水混合均勻，加入1.2g上述蝸牛酶，在30℃恒溫水浴下，以150r/min攪拌反應(yīng)3h，隨后轉(zhuǎn)入離心機(jī)中，以7000r/min離心分離15min，收集上清液并將其減壓蒸發(fā)濃縮至原體積的20%，加入200mL無(wú)水乙醇，靜置1h后，真空抽濾，將濾餅置于干燥箱中，在70℃下干燥至恒重，并轉(zhuǎn)入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)60目篩，得蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：高血脂高血糖患者每天吃30g添加本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維食物，一個(gè)月后，血壓指數(shù)下降8%，血糖指數(shù)下降6%，本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維得率為24%。

實(shí)例2

選取20只體重30g健康蝸牛，將其置于飼養(yǎng)盒中饑餓處理4天，每天用去離子水清洗2次，洗凈蝸牛后敲碎并剝?nèi)ノ伵?，完整取出蝸牛軟體，順其消化道剪開(kāi)蝸牛軟體剝離消化道，取出嗉囊，在6℃下，將嗉囊加入研缽中研磨破碎12min，得蝸牛消化道液；量取18mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%檸檬酸溶液，加入22mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%磷酸氫二鈉溶液中，以350r/min攪拌混合均勻，得檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，向上述蝸牛消化道液中加入18mL檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，在300W超聲波超聲提取1.5h，得混合液，將混合液裝入離心機(jī)中，以9000r/min離心分離15min，取上清液，將上清液裝入冷凍干燥箱中，在﹣20℃下冷凍干燥11h，得蝸牛酶；稱取5.5kg南瓜，用去離子水洗滌表皮1次，切開(kāi)南瓜去籽后裝入組織搗碎機(jī)中破碎制漿，得南瓜汁，稱取150g銀耳，自然風(fēng)干后，加入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)100目篩，將過(guò)篩后的銀耳粉加入上述南瓜汁中，以400r/min攪拌混合25min，隨后轉(zhuǎn)入高壓滅菌鍋中滅菌處理，得南瓜銀耳混合液；量取110mL上述南瓜銀耳混合液，與550mL去離子水混合均勻，加入1.3g上述蝸牛酶，在35℃恒溫水浴下，以180r/min攪拌反應(yīng)4h，隨后轉(zhuǎn)入離心機(jī)中，以7500r/min離心分離18min，收集上清液并將其減壓蒸發(fā)濃縮至原體積的25%，加入300mL無(wú)水乙醇，靜置1.5h后，真空抽濾，將濾餅置于干燥箱中，在75℃下干燥至恒重，并轉(zhuǎn)入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)60目篩，得蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：高血脂高血糖患者每天吃35g添加本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維食物，一個(gè)月后，血壓指數(shù)下降10%，血糖指數(shù)下降8%，本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維得率為28%。

實(shí)例3

選取20只體重40g健康蝸牛，將其置于飼養(yǎng)盒中饑餓處理5天，每天用去離子水清洗3次，洗凈蝸牛后敲碎并剝?nèi)ノ伵ぃ暾〕鑫伵＼涹w，順其消化道剪開(kāi)蝸牛軟體剝離消化道，取出嗉囊，在8℃下，將嗉囊加入研缽中研磨破碎15min，得蝸牛消化道液；量取20mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%檸檬酸溶液，加入25mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%磷酸氫二鈉溶液中，以400r/min攪拌混合均勻，得檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，向上述蝸牛消化道液中加入20mL檸檬酸﹣磷酸氫二鈉緩沖溶液，在300W超聲波超聲提取2h，得混合液，將混合液裝入離心機(jī)中，以10000r/min離心分離20min，取上清液，將上清液裝入冷凍干燥箱中，在﹣30℃下冷凍干燥12h，得蝸牛酶；稱取6kg南瓜，用去離子水洗滌表皮2次，切開(kāi)南瓜去籽后裝入組織搗碎機(jī)中破碎制漿，得南瓜汁，稱取200g銀耳，自然風(fēng)干后，加入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)100目篩，將過(guò)篩后的銀耳粉加入上述南瓜汁中，以500r/min攪拌混合30min，隨后轉(zhuǎn)入高壓滅菌鍋中滅菌處理，得南瓜銀耳混合液；量取120mL上述南瓜銀耳混合液，與600mL去離子水混合均勻，加入1.5g上述蝸牛酶，在40℃恒溫水浴下，以200r/min攪拌反應(yīng)5h，隨后轉(zhuǎn)入離心機(jī)中，以8000r/min離心分離20min，收集上清液并將其減壓蒸發(fā)濃縮至原體積的30%，加入400mL無(wú)水乙醇，靜置1~2h后，真空抽濾，將濾餅置于干燥箱中，在80℃下干燥至恒重，并轉(zhuǎn)入粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)60目篩，得蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維。

本發(fā)明的應(yīng)用方法是：高血脂高血糖患者每天吃40g添加本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維食物，一個(gè)月后，血壓指數(shù)下降16%，血糖指數(shù)下降15%，本發(fā)明制備的蝸牛酶輔助降解可溶性膳食纖維得率為36%。