本發(fā)明屬于水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料領域，具體地涉及一種可替代鮮活餌料的凡納濱對蝦親蝦配合飼料。
背景技術：
凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei)，屬熱帶型開放式納精囊種類，是世界上公認的少數(shù)優(yōu)良養(yǎng)殖蝦種之一。生產(chǎn)中，為保證親蝦順利成熟和產(chǎn)卵，會在摘除親蝦眼柄前進行為期兩個多月的親蝦營養(yǎng)強化培育。親蝦的性腺發(fā)育過程是一個營養(yǎng)物質(zhì)大量并且快速積累的過程，當其攝入的能量超過維持能耗時，才能用于生長、蛻皮和繁殖。在這一過程中，親蝦需要不斷攝入大量的營養(yǎng)物質(zhì)以滿足正常的性腺發(fā)育、配子生成以及繁殖活動的需要。研究表明，在親蝦性腺發(fā)育的過程中，卵巢可以在幾天內(nèi)快速增重4-9倍。因此，在親蝦性腺發(fā)育期間，需提供合適的餌料，保證親蝦繁殖所必需的物質(zhì)和能量的充分積累。
目前，親蝦的繁殖培育一般投喂生物餌料，包括鮮活沙蠶以及冰凍的牡蠣、魷魚等，這一過程一般從營養(yǎng)強化階段持續(xù)到產(chǎn)卵階段。這些生物餌料能夠提高親蝦繁殖性能和幼體質(zhì)量，但在其應用過程中，也存在越來越多的問題。已有研究證實，沙蠶、牡蠣等天然生物餌料是對蝦多種病原的中間寄主，其攜帶的致病原能通過垂直傳播途徑傳染給蝦苗。另外，這些生物餌料的生長和繁殖受諸多環(huán)境因素的影響，質(zhì)量和產(chǎn)量不穩(wěn)定，易影響大批量親蝦催熟培育及苗種生產(chǎn)。而且，這些生物餌料投喂量大(一般日投喂量為親蝦體重的20-30％)，價格昂貴，制約著苗種生產(chǎn)企業(yè)效益的提高。而親蝦人工配合飼料具有營養(yǎng)全 面、運輸使用方便、基本不會帶入致對蝦發(fā)病的病原等優(yōu)點，其應用前景廣闊。隨著我國對蝦養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，開發(fā)出優(yōu)良的人工配合親蝦飼料，具有重大的經(jīng)濟效益。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明要解決的技術問題是提出一種可替代鮮活餌料的凡納濱對蝦親蝦飼料，能提高凡納濱對蝦親蝦的繁殖性能，改善卵的質(zhì)量，增加產(chǎn)卵次數(shù)，替代鮮活餌料。
本發(fā)明是按以下操作技術完成的：
一種可替代鮮活餌料的凡納濱對蝦親蝦飼料，所述飼料的成分及重量百分比為魚粉40％，酪蛋白6％，磷蝦粉10％，貽貝粉15％，高筋粉14.75％，膽固醇0.5％，磷脂2％，魚油7％，膽堿1％，蝦青素0.5％，維生素C0.75％，磷酸氫鈣1.5％，復合維生素0.5％，復合礦物質(zhì)0.5％。
復合維生素(mg/kg飼料)：硫胺素，25mg；核黃素，45mg；鹽酸吡哆醇，20mg；維生素B12，0.1mg；維生素K3，10mg；肌醇，800mg；泛酸，60mg；煙酸，200mg；葉酸，20mg；生物素，1.20mg；維生素A，32mg；維生素D，5mg；維生素E，120mg；次粉3.66g。
復合礦物質(zhì)(mg/kg or g/kg飼料)：氟化鈉，2mg；碘化鉀，0.8mg；氯化鈷，50mg；硫酸銅，10mg；硫酸鐵，80mg；硫酸鋅，50mg；硫酸鎂，1200mg；磷酸二氫鈣，3000mg；氯化納，100mg；沸石粉，0.5g。
本發(fā)明還提供一種所述飼料的制備方法，將上述飼料原料粉碎后過60目篩，采用逐級放大的方法混勻后加水攪拌，進制粒機壓制成規(guī)格為1.5×3.0mm的親蝦飼料，烘干后，儲存于陰涼避光處保存?zhèn)溆谩?/p>
本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比的有益效果：
1、飼料中添加了魚粉、磷蝦粉、貽貝粉及酪蛋白為蛋白源且對其比例進行調(diào)配，可使飼料有一個合理的營養(yǎng)組分，能滿足凡納濱對蝦親蝦的對蛋白質(zhì)及氨基酸的營養(yǎng)需求。此外，磷蝦粉、貽貝粉的添加可顯著提高對蝦飼料的誘食性
2、本發(fā)明在凡納濱對蝦親蝦飼料中添加一定比例磷蝦粉，及一定量的魚油、膽固醇及蝦青素，可滿足凡納濱對蝦親蝦對必需脂肪酸、膽固醇的需求，從而提高其產(chǎn)卵量，提高孵化率及變態(tài)率。
3、本發(fā)明凡納濱對蝦親蝦飼料通過對各營養(yǎng)成分配比及原料選擇，所配制的配合飼料能夠滿足親蝦繁殖的營養(yǎng)需求，其飼喂效果與投喂鮮活沙蠶在產(chǎn)卵率、連續(xù)產(chǎn)卵率、孵化率、變態(tài)率及卵的徑等方面無顯著差異，因此本發(fā)明飼料可替代鮮活餌料對親蝦進行營養(yǎng)強化，且避免了由于投喂鮮活餌料而感染外來病源的問題。
具體實施方式
下面通過實施例詳細敘述本發(fā)明的技術內(nèi)容。
本實施例主要是對凡納濱對蝦飼料中不同水平磷蝦粉的篩選，設計了三組人工配合飼料，并以沙蠶為對照對親蝦進行營養(yǎng)強化培養(yǎng)，喂養(yǎng)親蝦60天，觀察其產(chǎn)卵性能及后代質(zhì)量以證明本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比的有益效果。
三種親蝦人工配合飼料以魚粉、貽貝粉、南極磷蝦粉為蛋白源，魚油為脂肪源，親蝦飼料配方組成及常規(guī)營養(yǎng)成分含量如表1，對照組投喂沙蠶。飼料原料粉碎后過60目篩，采用逐級放大的方法混勻后加水攪拌，進制粒機壓制成規(guī)格為1.5×3.0mm的親蝦飼料。烘干后，儲存于陰涼避光處保存?zhèn)溆谩?/p>
表1試驗飼料配方組成及營養(yǎng)組成(％)
注：復合維生素(mg/kg or g/kg飼料)：硫胺素，25mg；核黃素，45mg；鹽酸吡哆醇，20mg；維生素B12，0.1mg；維生素K3，10mg；肌醇，800mg；泛酸，60mg；煙酸，200mg；葉酸，20mg；生物素，1.20mg；維生素A，32mg；維生素D，5mg；維生素E，120mg；次粉18.67g。
復合礦物質(zhì)(mg/kg or g/kg飼料)：氟化鈉，2mg；碘化鉀，0.8mg；氯化鈷，50mg；硫酸銅，10mg；硫酸鐵，80mg；硫酸鋅，50mg；硫酸鎂，1200mg；磷酸二氫鈣，3000mg；氯化納，100mg；沸石粉，15.51g。
試驗用水取自渤海灣，經(jīng)沉淀、沙濾、消毒后使用，營養(yǎng)強化期間的水溫維持在27-28℃、鹽度28-33‰、pH8.0-8.5、溶氧>5mg/L、總氨氮<0.5mg/L、亞硝酸鹽<0.1mg/L、水深50-60cm。
受精產(chǎn)卵期間，產(chǎn)卵孵化用水在正常處理基礎之上，需要加入10ppm的EDTA和0.5ppm聚維酮碘液以絡合水體中的重金屬離子及對水體進行消毒處理。
試驗分四個處理組，每個處理組80尾蝦，雌雄比例1：1，兩個平行組，分別投喂飼料1、飼料2、飼料3和沙蠶(沙蠶采用活體投喂，投喂前用濃度為50ppm 的高錳酸鉀溶液浸泡兩到三分鐘后清水洗凈)。試驗之初，在每尾親蝦的一側(cè)眼柄套上眼標，以區(qū)分個體。營養(yǎng)強化結(jié)束后，對全部的雌親蝦采用鑷燙法進行單側(cè)眼柄摘除手術。術后，全部處理組均改投喂鮮活沙蠶，采用人工授精的方法，采集繁殖和幼體發(fā)育數(shù)據(jù)。
人工授精后，統(tǒng)計各處理組產(chǎn)卵量、孵化率及變態(tài)率；計算各處理組的產(chǎn)卵率、連續(xù)產(chǎn)卵率、平均產(chǎn)卵次數(shù)。從每個處理組的前十次產(chǎn)卵中各取50粒左右受精卵，保存在濃度為4％的甲醛溶液中，用于測量受精卵的卵徑；同時從每個處理組的前十次產(chǎn)卵中，每次收集大約0.2g的受精卵保存在液氮中，用于卵脂肪酸測量。不同處理組的親蝦產(chǎn)卵繁殖情況如表2所示，從表中可以看出，飼料2組的產(chǎn)卵量顯著高于飼料1組(P<0.05)，與對照組(沙蠶)及飼料3組無顯著差異(P>0.05)，對照組的產(chǎn)卵量最大，為23.45±0.63萬，其次依次為飼料2組、飼料3組和飼料1組，分別為22.53±0.70萬、21.74±2.86萬和18.06±0.68萬。
四個處理組的孵化率在45.02±1.20％到49.26±0.82％間，對照組最高，四組間孵化率均不存在顯著差異(P>0.05)。四組中變態(tài)率對照組、飼料2組及飼料3組無顯著差異，顯著高于飼料1組(P<0.05)。
表2各飼料組產(chǎn)卵量、孵化率和變態(tài)率
注:不同的上標字母代表差異顯著(P<0.05)，下同。
親蝦產(chǎn)卵率、連續(xù)產(chǎn)卵率和平均產(chǎn)卵次數(shù)如表3所示，從表中可以看出，飼料2的產(chǎn)卵率最大，達74.16±1.18％，沙蠶組的產(chǎn)卵率最小為59.17±1.18％，飼料1和飼料3的產(chǎn)卵率分別為70.09±1.89％和69.05±3.36％，飼料1組、飼料2組、飼料3組無顯著差異(P>0.05)；對于連續(xù)產(chǎn)卵率，飼料3組最大，達 55.00±7.07％，顯著地高于對照組，與飼料1組及飼料2組無顯著差異(P>0.05)。
綜合整個試驗過程中各個處理組的全部產(chǎn)卵情況，計算出各處理組平均產(chǎn)卵次數(shù)。從表中可以看出，飼料3組的平均產(chǎn)卵次數(shù)最大，為2.00±0.28，顯著地高于飼料1和對照組，與飼料2組無顯著差異(P>0.05)。
表3各飼料組產(chǎn)卵率、連續(xù)產(chǎn)卵率和平均產(chǎn)卵次數(shù)
產(chǎn)卵率＝產(chǎn)卵的雌蝦數(shù)量/雌蝦總數(shù)×100％
連續(xù)產(chǎn)卵率＝多次產(chǎn)卵的雌蝦數(shù)量/產(chǎn)卵的雌蝦數(shù)量×100％
用光學顯微鏡測量每個處理組的前十次產(chǎn)卵卵徑，每次產(chǎn)卵50粒，各處理組共檢測500粒受精卵的卵徑，測量結(jié)果如表4所示。從表中可以看出，卵徑最大的是飼料3組，為267.84±7.19μm；最小的是飼料1組，為256.70±4.54μm；飼料2組和對照組分別為263.37±3.00μm和258.21±8.23μm。單因素方差分析表明，對照組與飼料3組差異顯著(P<0.05)，與飼料1組和飼料2組差異性不顯著(P>0.05)，飼料2組、飼料3組間不存在顯著差(P>0.05)。
表4各飼料組產(chǎn)卵卵徑大小
卵徑＝(長徑+短徑)/2。
三組人工配合飼料及沙蠶的脂肪酸組成測量結(jié)果如表5所示。從表中可以看出，總多不飽和脂肪酸(PUFA)含量在沙蠶體內(nèi)最高，為46.68±0.68％；飼料2和飼料3的ΣPUFA分別為37.31±1.13％和38.23±0.15％，飼料1的含量最低，僅為28.94±0.60％，飼料2與飼料3差異不顯著(P>0.05)。DHA(C22:6n-3)含量對照沙蠶組與飼料3無顯著差異(P<0.05)，EPA(C20:5n-3)和AA(C20:4n-6) 含量在沙蠶體內(nèi)的含量均高于三組人工配合飼料，但相比之下，飼料2和飼料3有與沙蠶更接近的EPA和AA含量，2組無顯著差異。
n-6系列PUFA的含量在沙蠶體內(nèi)最高，達13.63±0.01％，與其余各組差異顯著(P<0.05)；沙蠶體內(nèi)的n-3系列PUFA含量同樣高于其余三組人工配合飼料，達33.05±0.67％。但是，n-3/n-6數(shù)值最大的是飼料3，為3.17±0.02，其次依次是飼料2、沙蠶和飼料1，數(shù)值分別為2.85±0.10、2.42±0.04和2.20±0.03。
表5人工配合飼料和沙蠶的脂肪酸組成(％)
注：脂肪酸含量以各脂肪酸甲酯占總脂肪酸甲酯的比例表示。下同。
各處理組受精卵脂肪酸組成
對照組卵中的ΣPUFA含量最高，為24.59±1.18％，其次是飼料2組，23.62±0.48％，兩組之間差異不顯著(P>0.05)；飼料3組ΣPUFA為22.93±1.01％，與飼料2組間不存在顯著性差異(P>0.05)，飼料1組ΣPUFA含量最低，為19.14±0.07％，與其余三組差異顯著(P<0.05)。對照組卵中EPA含量最高，為9.16±1.03％，飼料2組、飼料3組中的含量分別為8.37±0.02％、8.88±0.04％，三組間不存在顯著差(P>0.05)；飼料1組的EPA含量為7.60±0.38％，與沙蠶組差異性顯著。AA含量在對照組卵里的含量低于飼料2組和飼料3組，但高于飼料1組，飼料3組含量最高，為1.48±0.28％。DHA含量在飼料1組的卵中含量最低，并且與其余三組存在顯著差(P<0.05)，飼料2組、飼料3組和沙蠶組之間差異不顯著(P>0.05)。四個處理組中n-3/n-6比值介于1.21±0.14到1.36±0.25之間，四組間不存在顯著差(P>0.05)，飼料3組最大，為1.36±0.25，飼料2組次之。
表6各處理組卵中的脂肪酸組成(％)
由以上實驗可見，在凡納濱對蝦親蝦飼料中添加質(zhì)量比為10％的磷蝦粉，同時配合40％魚粉、6％酪蛋白、15％貽貝粉、14.75％高筋粉、0.5％膽固醇、2％磷脂、7％魚油、1％膽堿、0.5％蝦青素、0.75％維生素C、1.5％磷酸氫鈣、0.5％復合維生素和0.5％復合礦物質(zhì)，可提高凡納濱對蝦親蝦的產(chǎn)卵率、連續(xù)產(chǎn)卵率；同時孵化率、變態(tài)率及卵徑也不同程度提高，可與沙蠶相媲美。