Ctab法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒及其提取方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用CTAB法提取動物微生物糞便基因組的試劑盒及其提取方法，所述試劑盒主要是通過溶菌酶破碎糞便中的微生物細胞，利用CTAB溶液去除含有的蛋白雜質(zhì)，同時利用硅基生物磁珠可以特異性吸附核酸的原理，將動物糞便中微生物的基因組吸附出來，本試劑盒操作方便、快捷，能夠快速獲得動物糞便微生物基因組。
【專利說明】CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒及其提取方 法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑 盒及其提取方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 動物腸道是一類典型而又獨特的環(huán)境，過去將糞便微生物作為資源研宄的極少。 動物體在"出生前"是無菌的，在動物出生的過程中及與外界環(huán)境的接觸中（包括呼吸、食 物攝取等所有的生命活動），有大量微生物進入體內(nèi)，并由自身的遺傳基因和飲食等特性決 定而形成自身特有的穩(wěn)定的腸道微生物系統(tǒng)。
[0003] 一方面，宿主腸道為腸道微生物提供優(yōu)越的棲息和繁殖環(huán)境。宿主滿足了腸道微 生物生長和繁殖所需要的各種生理條件，包括氧氣天然的隔絕、充足的營養(yǎng)物質(zhì)以及適宜 的溫度和PH值等。絕大多數(shù)生活在腸道內(nèi)的微生物是專性或兼性厭氧微生物，他們的生 長和繁殖需要自然界中很少見的厭氧環(huán)境，腸道生理特性可以為專性和兼性厭氧微生物創(chuàng) 造出所需的厭氧環(huán)境。另一方面，腸道微生物及其基因組賦予人類沒有必要在自身上進化 的代謝特性，彌補了宿主動物的某些生物學(xué)不足。盡管我們對宿主-腸道微生物之間關(guān)系 已經(jīng)有了一定認(rèn)識，但他們之間具體的相互關(guān)系及作用機理，還需要我們傾注更多的努力 和研宄來更加深刻的認(rèn)識和理解他們，并對他們加以開發(fā)利用。
[0004] 當(dāng)前對腸道微生物菌群的認(rèn)識，主要是通過選擇性培養(yǎng)基獲得糞便菌群純培養(yǎng)物 而取得的，然而近年來隨著宏基因組學(xué)的發(fā)展，利用于16S rRNA基因的免培養(yǎng)分析技術(shù)越 來越受重視，利用16S rRNA基因的免培養(yǎng)分析技術(shù)進行腸道微生物多樣性的分析的前提要 求是要提取到動物糞便的微生物基因組DNA。因此，為了更好地研宄腸道微生物與動物之間 的關(guān)系，提供一種提取動物糞便微生物基因組的試劑盒十分有必要。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種利用CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒及 其提取方法，所述試劑盒操作方便、快捷，能夠快速獲得動物糞便微生物基因組。
[0006] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0007] 一種CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，所述試劑盒由以下工作液組 成：
[0008] 工作液A :由終濃度0· 25-0. 37mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 175-0. 2mol/L氫氧 化鈉組成，pH = 7-8 ;
[0009] 工作液B :由終濃度10-20mmol/L三羥甲基氨基甲烷（Tris)和終濃度I-IOmmol/ L乙二胺四乙酸（EDTA)組成，pH = 5. 0-8. 0 ;
[0010] 工作液 C : 10-50mg/ml 溶菌酶；
[0011] 工作液 D : 20-50mg/ml 蛋白酶 K ;
[0012] 工作液E :質(zhì)量濃度10-20 %的十二烷基硫酸鈉（SDS);
[0013] 工作液 F :3-8mol/L 氯化鈉（NaCl);
[0014] 工作液G :由終濃度0. 14-0. 28mol/L十六烷基三甲基溴化銨（CTAB)和終濃度 0· 5-lmol/L 氯化鈉（NaCl)組成；
[0015] 工作液H :體積比為酚：氯仿：異戊醇=25:24:1的混合液；
[0016] 工作液I :體積比為氯仿：異戊醇=24:1的混合液；
[0017] 工作液J :體積比為異丙醇：磁珠混懸液=24:1的混懸液，所述磁珠混懸液由磁珠 和水按照1:2體積比混合配置而成；
[0018] 工作液K :由終濃度4. 3-21. 4mmol/L三羥甲基氨基甲烷（Tris)，終濃度 2. 1-4. 2mmol/L乙二胺四乙酸（EDTA)，終濃度42. 9-85. 7mmol/L Nacl和體積終濃度 60-80 %無水乙醇組成；
[0019] 工作液 L :8-10mmol/L 三羥甲基氨基甲烷（Tris)，pH = 8. 0-9. 0。
[0020] 所述磁珠為硅基生物磁珠，粒徑為lum，購買自溫州安科納米科技有限公司，產(chǎn)品 編號：AK1-G1000。
[0021] 本發(fā)明所述終濃度是指溶液在工作液中的終濃度，例如工作液A :由終濃度 0· 25-0. 37mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 175-0. 2mol/L氫氧化鈉組成，pH = 7-8 ;是指 磷酸二氫鉀在工作液A中的濃度為0. 25-0. 37mol/L，氫氧化鈉在工作液A中的濃度為 0· 175-0. 2mol/L，工作液 A 的 pH = 7-8〇
[0022] 所述試劑盒的提取方法，包括糞便的前處理、糞便中微生物細胞的裂解、DNA的游 離與雜蛋白的抽除，RNA的吸附以及磁珠法回收微生物基因組，具體步驟如下：
[0023] 1)糞便的前處理：稱取0. 3-0. 5g糞便于2ml離心管中，加入l-2ml工作液A振蕩 l_2min，3000-5000rpm/min 離心 10_20min，轉(zhuǎn)移上清至滅菌的離心管中，10000-12000rpm/ min離心10-20min，棄上清，保留沉淀；
[0024] 2)糞便中微生物細胞的裂解：在上述沉淀中加入450-600 μ 1工作液B和 50-60 μ 1工作液C，混勻后，37-40°C水浴l_2h，加入65-70 μ 1工作液D和65-70 μ 1工作 液 Ε，混勻后，37-60°C水浴 l_2h ;加入 100-200 μ I Buffer F 和 50-100 μ IBuffer G 溶液， 混勻后，65-80°C水浴 10_20min ;
[0025] 3) DNA的游離與雜蛋白的抽除：在上述溶液中加入600-800 μ 1工作液H，振蕩器震 蕩30_60s后，12000-13000rpm/min離心10_20min，將一次上清液移至滅菌的離心管中，加 入與一次上清液等體積的工作液I，12000-13000rpm/min離心10-20min，將二次上清液移 至滅菌的離心管中；
[0026] 4)磁珠法回收微生物基因組：加入與二次上清液等體積的Buffer J，震蕩10-20s 后，室溫下放置5-10min，然后將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠； 在含有磁珠的離心管中加入l_2ml Buffer K，打勻后室溫靜置5-10min，將離心管放在磁力 架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含有磁珠的離心管中加入50-100 μ I Buffer L，將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，經(jīng)觀察，磁珠吸附到離心管一側(cè)時吸取液體，此 溶液即為糞便微生物基因組DNA，于1 %瓊脂糖凝膠中電泳檢測。
[0027] 本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，所述試劑盒主要是通過溶菌酶破碎糞便中的微生物細 胞，利用CTAB溶液去除含有的蛋白雜質(zhì)，同時利用硅基生物磁珠可以特異性吸附核酸的原 理，將動物糞便中微生物的基因組吸附出來，所述試劑盒操作方便、快捷，能夠快速獲得動 物糞便微生物基因組。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0028] 圖1為利用本發(fā)明試劑盒提取的動物糞便微生物基因組于1%瓊脂糖凝膠中的電 泳檢測圖：
[0029] 泳道1，2是利用本發(fā)明試劑盒提取到的動物糞便微生物基因組；
[0030] 泳道 3 為 TAKARA 公司的 DL4500marker。

【具體實施方式】
[0031] 一種CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，所述試劑盒由以下工作液組 成：
[0032] 工作液A :由終濃度0· 25-0. 37mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 175-0. 2mol/L氫氧 化鈉組成，pH = 7-8 ;
[0033] 工作液 B :由終濃度 10-20mmol/L Tris 和終濃度 1-lOmmol/L EDTA 組成，pH = 5. O-8. 0 ；
[0034] 工作液 C :10_50mg/ml 溶菌酶；
[0035] 工作液 D : 20-50mg/ml 蛋白酶 K ;
[0036] 工作液E :質(zhì)量濃度10-20%的SDS ;
[0037] 工作液 F :3-8mol/L NaCl ;
[0038] 工作液 G :由終濃度 0· 14-0. 28mol/L CTAB 和終濃度 0· 5-lmol/L NaCl 組成；
[0039] 工作液H :體積比為酚：氯仿：異戊醇=25:24:1的混合液；
[0040] 工作液I :體積比為氯仿：異戊醇=24:1的混合液；
[0041] 工作液J :體積比為異丙醇：磁珠混懸液=24:1的混懸液，所述磁珠混懸液由磁珠 和水按照1:2體積比混合配置而成；
[0042] 工作液 K :由終濃度 4. 3-21. 4mmol/L Tris,終濃度 2. 1-4. 2mmol/L EDTA,終濃度 42. 9-85. 7mmol/L Nacl和體積終濃度60-80%無水乙醇組成；
[0043] 工作液 L ：8~1 Ommol /T, Tris, pH = 8. 0-9. 0〇
[0044] 本發(fā)明所述終濃度是指溶液在工作液中的終濃度，例如工作液A :由終濃度 0· 25-0. 37mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 175-0. 2mol/L氫氧化鈉組成，pH = 7-8 ;是指 磷酸二氫鉀在工作液A中的濃度為0. 25-0. 37mol/L，氫氧化鈉在工作液A中的濃度為 0.175-0. 2mol/L〇
[0045] 所述試劑盒的提取方法，包括以下步驟：
[0046] 1)糞便的前處理：稱取0. 3-0. 5g糞便于2ml離心管中，加入l-2ml工作液A振蕩 l_2min，3000-5000rpm/min 離心 10_20min，轉(zhuǎn)移上清至滅菌的離心管中，10000-12000rpm/ min離心10-20min，棄上清，保留沉淀；
[0047] 2)糞便中微生物細胞的裂解：在上述沉淀中加入450-600 μ 1工作液B和 50-60 μ 1工作液C，混勻后，37-40°C水浴l_2h，加入65-70 μ 1工作液D和65-70 μ 1工作 液 Ε，混勻后，37-60°C水浴 l_2h ;加入 100-200 μ I Buffer F 和 50-100 μ IBuffer G 溶液， 混勻后，65-80°C水浴 10-20min ;
[0048] 3) DNA的游離與雜蛋白的抽除：在上述溶液中加入600-800 μ 1工作液H，振蕩器震 蕩30_60s后，12000-13000rpm/min離心10_20min，將一次上清液移至滅菌的離心管中，加 入與一次上清液等體積的工作液I，12000-13000rpm/min離心10-20min，將二次上清液移 至滅菌的離心管中；
[0049] 4)磁珠法回收微生物基因組：加入與二次上清液等體積的Buffer J，震蕩10-20s 后，室溫下放置5-10min，然后將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠； 在含有磁珠的離心管中加入l_2ml Buffer K，打勻后室溫靜置5-10min，將離心管放在磁力 架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含有磁珠的離心管中加入50-100 μ I Buffer L，將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，經(jīng)觀察，磁珠吸附到離心管一側(cè)時吸取液體，此 溶液即為糞便微生物基因組DNA，于1 %瓊脂糖凝膠中電泳檢測。
[0050] 實施例1
[0051] 一種CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，所述試劑盒由以下工作液組 成：
[0052] 工作液A :由終濃度0· 25mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 175mol/L氫氧化鈉組成， pH = 7. 2 ；
[0053] 工作液B :由終濃度10mmol/L Tris和終濃度lmmol/L EDTA組成，pH = 8. 0 ;
[0054] 工作液C :20mg/ml溶菌酶；
[0055] 工作液D :20mg/ml蛋白酶K ;
[0056] 工作液E :質(zhì)量濃度10%的SDS ;
[0057] 工作液 F :5mol/L NaCl ;
[0058] 工作液G :由終濃度0. 14mol/L CTAB和終濃度0. 5mol/L NaCl組成；
[0059] 工作液H :體積比為酚：氯仿：異戊醇=25:24:1的混合液；
[0060] 工作液I :體積比為氯仿：異戊醇=24:1的混合液；
[0061] 工作液J :體積比為異丙醇：磁珠混懸液=24:1的混懸液，所述磁珠混懸液由磁珠 和水按照1:2體積比混合配置而成；
[0062] 工作液 K :由終濃度 8. 6mmol/L Tris,終濃度 3. 4mmol/L EDTA,終濃度 60mmol/L Nacl和體積終濃度70%無水乙醇組成；
[0063] 工作液 L ：8mmol/L Tris, pH = 8. 0〇
[0064] 實施例2
[0065] -種CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，所述試劑盒由以下工作液組 成：
[0066] 工作液A :由終濃度0· 37mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 2mol/L氫氧化鈉組成，pH =8 ；
[0067] 工作液 B :由終濃度 20mmol/L Tris 和終濃度 10mmol/L EDTA 組成，pH = 5. 0 ;
[0068] 工作液C :50mg/ml溶菌酶；
[0069] 工作液D :50mg/ml蛋白酶K ;
[0070] 工作液E :質(zhì)量濃度20%的SDS ;
[0071] 工作液 F :3mol/L NaCl ;
[0072] 工作液G :由終濃度0. 28mol/L CTAB和終濃度lmol/L NaCl組成；
[0073] 工作液H :體積比為酚：氯仿：異戊醇=25:24:1的混合液；
[0074] 工作液I :體積比為氯仿：異戊醇=24:1的混合液；
[0075] 工作液J :體積比為異丙醇：磁珠混懸液=24:1的混懸液，所述磁珠混懸液由磁珠 和水按照1:2體積比混合配置而成；
[0076] 工作液K :由終濃度 21. 4mmol/L Tris,終濃度4. 2mmol/L EDTA,終濃度85. 7mmol/ L Nacl和體積終濃度80%無水乙醇組成；
[0077] 工作液 L ： 10mmol/L Tris, pH = 9. 0〇
[0078] 實施例3
[0079] -種CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，所述試劑盒由以下工作液組 成：
[0080] 工作液A :由終濃度0· 25mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0· 175mol/L氫氧化鈉組成， pH = 7 ；
[0081] 工作液B :由終濃度15mmol/L Tris和終濃度5mmol/L EDTA組成，pH = 6. 5 ;
[0082] 工作液C :10mg/ml溶菌酶；
[0083] 工作液D :35mg/ml蛋白酶K ;
[0084] 工作液E :質(zhì)量濃度15%的SDS ;
[0085] 工作液 F :8mol/L NaCl ;
[0086] 工作液G :由終濃度0· 21mol/L CTAB和終濃度0· 75mol/L NaCl組成；
[0087] 工作液H :體積比為酚：氯仿：異戊醇=25:24:1的混合液；
[0088] 工作液I :體積比為氯仿：異戊醇=24:1的混合液；
[0089] 工作液J :體積比為異丙醇：磁珠混懸液=24:1的混懸液，所述磁珠混懸液由磁珠 和水按照1:2體積比混合配置而成；
[0090] 工作液 K :由終濃度 4. 3mmol/L Tris,終濃度 2. lmmol/L EDTA,終濃度 42. 9mmol/ L Nacl和體積終濃度60%無水乙醇組成；
[0091] 工作液 L :9mmol/L Tris，pH = 8. 5。
[0092] 實施例4
[0093] 利用實施例1的試劑盒，提取動物糞便微生物基因組，具體包括以下步驟：
[0094] 所述試劑盒的提取方法，包括以下步驟：
[0095] 1)糞便的前處理：分別稱取兩管0. 3g新鮮的狗糞便于2ml離心管中，加入Iml工 作液A振蕩lmin，3000rpm/min離心lOmin，轉(zhuǎn)移上清至滅菌的離心管中，10000rpm/min離 心10min，棄上清，保留沉淀；
[0096] 2)糞便中微生物細胞的裂解：在上述沉淀中加入450 μ 1工作液B和50 μ 1工作 液C，混勻后，37°C水浴lh，加入65 μ 1工作液D和65 μ 1工作液Ε，混勻后，37°C水浴2h ;加 入 100 μ I Buffer F 和 50 μ I Buffer G 溶液，混勻后，65°C水浴 20min ;
[0097] 3) DNA的游離與雜蛋白的抽除：在上述溶液中加入600 μ 1工作液H，振蕩器震蕩 60s后，13000rpm/min離心10min，將一次上清液移至滅菌的離心管中，加入與一次上清液 等體積的工作液I，13000rpm/min離心10min，將二次上清液移至滅菌的離心管中；
[0098] 4)磁珠法回收微生物基因組：加入與二次上清液等體積的Buffer J，震蕩20s后， 室溫下放置5min，然后將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含 有磁珠的離心管中加入Iml Buffer K，打勻后室溫靜置5min，將離心管放在磁力架上，進行 磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含有磁珠的離心管中加入50 μ I Buffer L，將離心管放 在磁力架上，進行磁珠分離，經(jīng)觀察，磁珠吸附到離心管一側(cè)時吸取液體，此溶液即為糞便 微生物基因組DNA，于1%瓊脂糖凝膠中電泳檢測。
[0099] 實施例5
[0100] 本發(fā)明的提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，其提取方法包括以下步驟：
[0101] 1)糞便的前處理：稱取〇.5g新鮮糞便于2ml離心管中，加入2ml工作液A振蕩 l_2min，5000rpm/min離心20min，轉(zhuǎn)移上清至滅菌的離心管中，12000rpm/min離心20min， 棄上清，保留沉淀；
[0102] 2)糞便中微生物細胞的裂解：在上述沉淀中加入600 μ 1工作液B和60 μ 1工作 液C，混勻后，40°C水浴2h，加入70 μ 1工作液D和70 μ 1工作液Ε，混勻后，60°C水浴Ih ;加 入 200 μ I Buffer F 和 100 μ I Buffer G 溶液，混勻后，80°C水浴 IOmin ;
[0103] 3)DNA的游離與雜蛋白的抽除：在上述溶液中加入800 μ 1工作液H，振蕩器震蕩 30s后，12000rpm/min離心20min，將一次上清液移至滅菌的離心管中，加入與一次上清液 等體積的工作液I，12000rpm/min離心20min，將二次上清液移至滅菌的離心管中；
[0104] 4)磁珠法回收微生物基因組：加入與二次上清液等體積的Buffer J，震蕩IOs后， 室溫下放置lOmin，然后將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含 有磁珠的離心管中加入2ml Buffer K，打勻后室溫靜置lOmin，將離心管放在磁力架上，進 行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含有磁珠的離心管中加入100 μ I Buffer L，將離心管 放在磁力架上，進行磁珠分離，經(jīng)觀察，磁珠吸附到離心管一側(cè)時吸取液體，此溶液即為糞 便微生物基因組DNA，于1%瓊脂糖凝膠中電泳檢測。
[0105] 利用實施例1的試劑盒，按照實施例4的提取方法提取的動物糞便微生物基因組 DNA于1%瓊脂糖凝膠中的電泳檢測結(jié)果見圖1，其中泳道1，2均是利用本發(fā)明試劑盒提取 到的動物糞便微生物基因組，泳道3為TAKARA公司的DL4500marker。從圖中可以看出本 方法可以較為快速地提取到動物糞便微生物基因組DNA。
[0106] 提取到的動物糞便微生物DNA，其純度用OD26cimZOD28tlmi比值來衡量，純度見表1。
[0107] 表1動物糞便微生物DNA的純度
[0108]

【權(quán)利要求】
1. CTAB法提取動物糞便微生物基因組的試劑盒，其特征在于：所述試劑盒由以下工作 液組成： 工作液A :由終濃度0? 25-0. 37 mol/L磷酸二氫鉀和終濃度0? 175-0. 2 mol/L氫氧化 鈉組成，pH=7-8 ; 工作液B :由終濃度10-20mmol/L三羥甲基氨基甲烷和終濃度l-10mmol/L乙二胺四乙 酸組成，pH=5. 0-8. 0 ; 工作液C :10-50mg/ml溶菌酶； 工作液D :20-50mg/ml蛋白酶K ; 工作液E :質(zhì)量濃度10-20%的十二烷基硫酸鈉； 工作液F :3-8mol/L氯化鈉； 工作液G :由終濃度0? 14-0. 28mol/L十六烷基三甲基溴化銨和終濃度0? 5-lmol/ L氯 化鈉組成； 工作液H :體積比為酚：氯仿：異戊醇=25:24:1的混合液； 工作液I :體積比為氯仿：異戊醇=24:1的混合液； 工作液J :體積比為異丙醇：磁珠混懸液=24:1的混懸液，所述磁珠混懸液由磁珠和水 按照體積比1:2混合配置而成； 工作液K :由終濃度4. 3-21. 4 mmol/L三羥甲基氨基甲烷，終濃度2. 1-4. 2 mmol/L乙 二胺四乙酸，終濃度42. 9-85. 7 mmol/L Nacl和體積終濃度60-80%無水乙醇組成； 工作液L :8-10mmol/L三羥甲基氨基甲烷，pH=8. 0-9. 0。
2. 如權(quán)利要求1所述試劑盒的提取方法，其特征在于：其包括以下步驟： 1) 糞便的前處理：稱取糞便于離心管中，每〇. 3-0. 5g糞便中加入l-2ml工作液A振蕩 l_2min，3000-5000rpm/min 離心 10_20min，轉(zhuǎn)移上清至滅菌的離心管中，10000-12000rpm/ min離心10-20min，棄上清，保留沉淀； 2) 糞便中微生物細胞的裂解：在上述沉淀中加入450-600 y 1工作液B和50-60 y 1 工作液C，混勻后，37-40° C水浴l-2h，加入65-70 y 1工作液D和65-70 y 1工作液E， 混勻后，37-60° C 水浴 l-2h ;加入 100-200 y 1 Buffer F 和 50-100 y 1 Buffer G 溶液，混 勻后，65-80° C 水浴 10-20min ; 3. DNA的游離與雜蛋白的抽除：在上述溶液中加入600-800 yl工作液H，振蕩器震蕩 30_60s后，12000-13000rpm/min離心10_20min，將一次上清液移至滅菌的離心管中，加入 與一次上清液等體積的工作液I，12000-13000rpm/min離心10-20min，將二次上清液移至 滅菌的離心管中； 4) 磁珠法回收微生物基因組：加入與二次上清液等體積的Buffer J，震蕩10-20s后， 室溫下放置5-10min，然后將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在 含有磁珠的離心管中加入l_2ml Buffer K，打勻后室溫靜置5-10min，將離心管放在磁力架 上，進行磁珠分離，吸去液體，保留磁珠；在含有磁珠的離心管中加入50-100 yl Buffer L， 將離心管放在磁力架上，進行磁珠分離，經(jīng)觀察，磁珠吸附到離心管一側(cè)時吸取液體，此溶 液即為糞便微生物基因組DNA。
【文檔編號】C12N15/10GK104498477SQ201410835993
【公開日】2015年4月8日 申請日期:2014年12月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月29日
【發(fā)明者】王清水, 余彥 申請人:福建師范大學(xué)