一株產(chǎn)中溫α-淀粉酶的枯草芽孢桿菌的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公布了一株產(chǎn)中溫α-淀粉酶的枯草芽孢桿菌。所述菌株通過-氯化鋰-硫酸二乙酯復(fù)合誘變獲得，具體為枯草芽孢桿菌304 Bacillus subtilis304，保藏號(hào)為CCTCC NO:M 2013600。該菌株所產(chǎn)中溫α-淀粉酶最適作用溫度為65℃，該酶在65℃條件下保存24h仍具有80％酶活，70℃條件下保存12h仍具有50％以上酶活；該酶最適反應(yīng)pH值為5.0，在pH4-6下保存18h后仍有80％以上的酶活；該酶酶活力為7000-8500U/ml，特別適合反應(yīng)溫度高、液化工藝與糖化工藝并存的工業(yè)化需求。
CCTCC NO：M 2013600
20131124
【專利說明】一株產(chǎn)中溫a-淀粉酶的枯草芽孢桿菌

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于微生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一株產(chǎn)中溫a -淀粉酶的枯草芽孢桿菌。

【背景技術(shù)】
[0002] a-淀粉酶全稱為a-l，4-葡聚糖水解酶（EC3.2. 1. 1)，作用于淀粉時(shí)，可從分子 內(nèi)部切開a-1，4-糖苷鍵而生成糊精和還原糖，由于產(chǎn)物的末端葡萄糖殘基C1碳原子為 構(gòu)型，故得名為a_淀粉酶。根據(jù)其使用的溫度范圍又分為高溫a_淀粉酶、中溫a_淀 粉酶以及a-淀粉酶。在不同的工業(yè)中，需要對(duì)不同酶學(xué)性質(zhì)的a-淀粉酶進(jìn)行選擇使用。
[0003] 中溫a -淀粉酶是一類使用溫度在60-90°C，且在60°C以下、pH6. 0-7. 0時(shí)較為穩(wěn) 定的淀粉酶。廣泛應(yīng)用于酒精、啤酒、味精、淀粉糖、發(fā)酵工業(yè)的液化以及紡織、印染退漿、飼 料行業(yè)、制漿造紙等。但由于此類酶穩(wěn)定性差，且pH低于5. 0以下時(shí)便會(huì)失活嚴(yán)重，從而限 制了它的應(yīng)用，并且給工業(yè)生產(chǎn)過程帶來一定的麻煩。比如在淀粉質(zhì)原料的糖化液化過程 中，由于淀粉漿的pH -般在4. 5左右，而廣泛應(yīng)用的a -淀粉酶的適用pH在6. 0-7. 0,因此 在此階段需要調(diào)節(jié)淀粉漿的pH以適應(yīng)淀粉液化過程在a -淀粉酶的作用條件，而在此后的 糖化過程中，糖化酶的作用pH-般在4. 2-5. 0,為了適用糖化酶的作用條件，需要在此調(diào)節(jié) 體系的pH，由于pH的反復(fù)調(diào)整，不僅增加了工藝過程，消耗試劑，而且引入了外源離子，增 加了分類的負(fù)擔(dān)。
[0004] 若能改變此類淀粉酶的作用pH范圍，將能夠極大的簡(jiǎn)化工藝過程，減少消耗與能 耗，降低生產(chǎn)成本，因此，開發(fā)出一種性能優(yōu)良的中溫a -淀粉酶將具有極大的工業(yè)價(jià)值。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一株生產(chǎn)中溫a -淀粉酶的枯草芽孢桿菌。
[0006] 本發(fā)明提供的產(chǎn)中溫a -淀粉酶的菌株具體為枯草芽孢桿菌304Bacillus SUbtilis304。該菌株已于2013年11月24日保藏于中中國典型培養(yǎng)物保藏中心（簡(jiǎn)稱 CCTCC，地址為：中國.武漢.武漢大學(xué)），保藏號(hào)為CCTCC NO:M 2013600。
[0007] 所述枯草芽孢桿菌304由一株分離自酸性土壤的產(chǎn)中溫a -淀粉酶的枯草芽孢桿 菌出發(fā)菌株經(jīng)紫外線-氯化鋰-硫酸二乙酯復(fù)合誘變篩選獲得，菌株特點(diǎn)如下：
[0008] 所述菌株在固體平板上菌落顏色為乳白色，表面干燥褶皺，色暗不透明，邊緣整 齊，鏡檢為長(zhǎng)桿狀，革蘭氏染色呈陽性，周生鞭毛，芽孢呈橢圓形。
[0009] 理化特性：
[0010]

【權(quán)利要求】
1. 一株產(chǎn)中溫a-淀粉酶的枯草芽孢桿菌，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌具體為枯 草芽孢桿菌 304Bacillus subtilis304,保藏編號(hào)為 CCTCC NO:M 2013600。
2. 如權(quán)利要求1所述的一株產(chǎn)中溫a -淀粉酶的枯草芽孢桿菌，其特征在于，所述中 溫a _淀粉酶具有以下特性：該酶最適作用溫度為65°C，該酶在65°C條件下保存24h仍具 有80%酶活，70°C條件下保存12h仍具有50%以上酶活。
3. 如權(quán)利要求1-2所述的一株產(chǎn)中溫a -淀粉酶的枯草芽孢桿菌，其特征在于，所述中 溫a -淀粉酶具有以下特性：該酶最適反應(yīng)pH值為5. 0,在pH4-6下保存18h后仍有80% 以上的酶活。
4. 如權(quán)利要求1-3所述的一株產(chǎn)中溫a -淀粉酶的枯草芽孢桿菌，其特征在于，所述中 溫a -淀粉酶具有以下特性：該酶酶活力為7000-8500U/ml。
5. 如權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌在a -淀粉酶生產(chǎn)中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C12N9/28GK104450572SQ201410735023
【公開日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月4日
【發(fā)明者】李洪兵, 張錦杰, 李海清, 胡永明, 朱永明, 孫明芳 申請(qǐng)人:湖南新鴻鷹生物工程有限公司