一種利用黃原膠∕殼聚糖∕黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】一種利用黃原膠∕殼聚糖∕黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法及應(yīng)用，通過(guò)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，活化三次后收集菌體得菌泥，將菌泥與配制成菌懸液；將菌懸液和黃原膠溶液混合后加入除氧劑溶液，混勻后得到雙歧桿菌菌膠液，將雙歧桿菌菌膠液加入殼聚糖溶液中攪拌獲得微膠囊；待微膠囊完全交聯(lián)后過(guò)濾，與黃原膠溶液再次混合攪拌，后過(guò)濾洗滌，最終得到雙層的雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為3.0～4.5×109CFU/g。將制備出的雙歧桿菌微膠囊加入自制酸奶中，貯存4周后，其活菌數(shù)仍大于106CFU/g，且酸奶的酸度和pH變化不大，從而對(duì)酸奶的品質(zhì)不會(huì)造成影響，飲用后可有效的發(fā)揮其益生作用。
【專利說(shuō)明】一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于益生菌制品制備【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]雙歧桿菌(Bifidobacteria)是由法國(guó)Tisser博士從母乳喂養(yǎng)嬰兒的糞便中分離出的一種厭氧菌。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，雙歧桿菌是人體腸道中的一種重要的益生菌，其在腸道中定殖的數(shù)量往往與人的健康狀況存在著關(guān)系。雙歧桿菌作為一種典型的益生菌，可通過(guò)改善腸道微生物菌群的平衡而發(fā)揮保健功能，例如具有雙向調(diào)理胃腸的功能，抗癌作用，免疫調(diào)節(jié)功能等。但其對(duì)氧極為敏感，對(duì)低PH值的抵抗力差，活性保持較為困難。
[0003]微膠囊技術(shù)具有防止外界環(huán)境因素破壞芯材、有效地控制芯材的釋放、掩蓋芯材的異味、改變芯材的物理和化學(xué)性質(zhì)，使其便于貯藏和運(yùn)輸?shù)茸饔?。可利用微膠囊及技術(shù)對(duì)益生菌進(jìn)行雙層包埋，以便對(duì)益生菌起到更強(qiáng)的保護(hù)作用。
[0004]目前，利用微膠囊包埋技術(shù)保護(hù)雙歧桿菌的報(bào)道很多，大多數(shù)都是利用海藻酸鹽等材料作為包埋壁材對(duì)菌體進(jìn)行單層或雙層包埋。例如，CN1969889A中公開了一種益生菌的微膠囊，該微膠囊是以海藻酸鈉和氯化鈣為壁材進(jìn)行單層包埋，然后用殼聚糖在海藻酸鈣上進(jìn)行二次包被；CN10275589A中公開的雙歧桿菌包埋方法中提到，先利用果膠對(duì)菌體進(jìn)行單層包埋，再利用海藻酸鈉進(jìn)行雙層包埋；CN1884513A中也公開一種雙層雙歧桿菌微膠囊的制備方法，該微膠囊用變性淀粉、阿拉伯膠、聚乙二醇、海藻酸鈉、殼聚糖、氯化鈣構(gòu)成的壁材進(jìn)行雙層包埋；文獻(xiàn)“雙歧桿菌微膠囊的制備和穩(wěn)定性研究”公開了一種雙層雙歧桿菌微膠囊的制備方法，它先以明膠、黃原膠、果膠等復(fù)合膠類物質(zhì)包裹雙歧桿菌菌體形成耐酸的保護(hù)層，再以海藻酸鈉和殼聚糖交聯(lián)形成耐酸性能更好的雙層微膠囊。
[0005] 除以上提到的包埋材料之外，還可以利用殼聚糖與黃原膠的聚電解質(zhì)絡(luò)合作用形成的共混凝膠先對(duì)雙歧桿菌進(jìn)行包埋，再在黃原膠中進(jìn)行二次成膜，得到雙層包埋的雙歧桿菌微膠囊。此法得到的益生菌微膠囊可應(yīng)用與果粒橙等液態(tài)飲料中，開發(fā)出新型的液態(tài)食品。殼聚糖和和黃原膠都是天然的生物大分子，生物相容性好，無(wú)毒副作用。殼聚糖溶于酸性水溶液中帶正電荷，可與帶負(fù)電荷的陰離子多糖黃原膠通過(guò)聚電解質(zhì)絡(luò)合作用形成共凝膠，從而作為包埋壁材使用。目前還沒有利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠雙歧桿菌微膠囊的制備和應(yīng)用的發(fā)明專利，為此，提供一種黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊及應(yīng)用的方法是很有必要的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于克服上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn)，提供一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法及應(yīng)用，具有能夠提高菌體的包埋產(chǎn)率以及包埋活菌數(shù)，將制備出的雙歧桿菌微膠囊加入果粒橙等飲料中，可獲得新型液態(tài)食品的優(yōu)點(diǎn)。[0007]為實(shí)現(xiàn)上述目的，一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，包括以下步驟:
[0008]I)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，在37°C培養(yǎng)條件下MRS活化三次，前兩次以3~5%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)22~24h，第三次按照2~3%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)18h，后進(jìn)行離心處理并收集菌體，棄去上清液得菌泥，將菌泥與濃度為0.85~0.9%的無(wú)菌生理鹽水混合配制成1.2~1.3 X 109CFU/mL的菌懸液備用；
[0009]2)取濃度為0.5~1.1 %和0.1 %的黃原膠溶液，滅菌和離心除氣處理后備用；
[0010]3)取濃度為0.4~1.3%殼聚糖溶液，調(diào)節(jié)pH至5~5.9備用；
[0011]4)配制除氧劑溶液，除氧劑為異抗壞血酸鈉或半胱氨酸鹽酸鹽，過(guò)濾除菌以備使用；
[0012]5)將步驟I)制備的菌懸液和步驟2)制備的濃度為0.5~1.1 %的黃原膠溶液按照1: (3~10)的質(zhì)量比例混合后加入步驟4)制得的除氧劑溶液，充分混勻后得到雙歧桿菌菌膠液，除氧劑的添加量按照菌膠液總量的0.03~0.07%加入，將雙歧桿菌菌膠液加入磁力攪拌器上的步驟3)制備的殼聚糖溶液中攪拌，菌膠液與殼聚糖比例為1: (3~6)，加入后攪拌，獲得微膠囊；
[0013]6)待微膠囊完全交聯(lián)后過(guò)濾，將過(guò)濾后的微膠囊與步驟2)制備的0.1%的黃原膠溶液以Ig: (20~40mL)混合攪拌，后將微膠囊過(guò)濾，并洗滌，最終得到雙層的雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為3.0~4.5X 109CFU/g。 [0014]所述的步驟I)中離心時(shí)的轉(zhuǎn)速為7000~10000r/min,離心時(shí)間為10~15min。
[0015]所述的步驟2)中滅菌處理的溫度為:80~110°C，時(shí)間為10~15min ;離心除氣處理的轉(zhuǎn)速為:5000~7000r/min,時(shí)間為10~15min。
[0016]所述的步驟3)中，調(diào)節(jié)pH值時(shí)使用的試劑為濃度為IN的NaOH溶液。
[0017]所述的步驟5)中，將雙歧桿菌菌膠液加入磁力攪拌器上的殼聚糖溶液中的方式為:使用針頭規(guī)格為0.45~0.7mm的無(wú)菌注射器將雙歧桿菌菌膠液以一滴一滴地方式擠壓入磁力攪拌器上的殼聚糖溶液中；且攪拌時(shí)間為30~60min。
[0018]所述的步驟6)中，過(guò)濾時(shí)使用160~200目的紗布過(guò)濾；洗滌時(shí)使用生理鹽水洗滌若干次；攪拌時(shí)間為20~40min。
[0019]—種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的應(yīng)用，在酸奶中，以
0.(w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌膠囊加入，獲得含益生菌微膠囊的液態(tài)酸奶。
[0020]本發(fā)明具有以下的有益效果:相比較現(xiàn)有技術(shù)，大多數(shù)的微膠囊包埋壁材是使用海藻酸鹽，而海藻酸鹽在有磷酸、乳酸等離子存在的環(huán)境中，凝膠中的鈣離子被取代下來(lái)，會(huì)導(dǎo)致了凝膠的不穩(wěn)定，這就限制其在發(fā)酵食品中的應(yīng)用。另外，海藻酸鹽等食用膠材料，長(zhǎng)期服用會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一定的副作用。本發(fā)明利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠對(duì)雙歧桿菌進(jìn)行雙層包埋，這就提高了益生菌的包埋率和活菌數(shù)，此方法簡(jiǎn)單，操作性強(qiáng)。殼聚糖和和黃原膠都是天然的生物大分子，生物相容性好，無(wú)毒副作用。殼聚糖溶于酸性水溶液中帶正電荷，可與帶負(fù)電荷的陰離子多糖黃原膠通過(guò)聚電解質(zhì)絡(luò)合作用形成共凝膠，從而作為包埋壁材使用。另外，將制備出的雙歧桿菌微膠囊加入自制酸奶中，貯存4周后，其活菌數(shù)仍大于106CFU/g，且酸奶的酸度和pH變化不大，從而對(duì)酸奶的品質(zhì)不會(huì)造成影響，飲用后可有效的發(fā)揮其益生作用。
【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】，對(duì)本發(fā)明作詳細(xì)說(shuō)明。
[0022]一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，包括以下步驟:
[0023]I)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，在37°C培養(yǎng)條件下MRS活化三次，前兩次以3~5%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)22~24h，第三次按照2~3%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)18h，后進(jìn)行離心處理，離心轉(zhuǎn)速為7000~10000r/min，離心時(shí)間10~15min，后收集菌體，棄去上清液得菌泥，將菌泥與濃度為0.85~0.9%的無(wú)菌生理鹽水混合配制成1.2~1.3 X 109CFU/mL的菌懸液備用；
[0024]2)取濃度為0.5~1.1 %和0.1 %的黃原膠溶液，在80~110°C下滅菌10~15mim，將滅菌后的黃原膠溶液進(jìn)行離心除氣，離心轉(zhuǎn)速5000~7000r/min，離心時(shí)間10~15min,后備用；
[0025]3)取濃度為0.4~1.3%殼聚糖溶液，用IN NaOH溶液將殼聚糖溶液pH調(diào)節(jié)至5~5.9，以備使用；
[0026]4)配制除氧劑溶液，除氧劑為異抗壞血酸鈉或半胱氨酸鹽酸鹽，過(guò)濾除菌以備使用；
[0027]5)將步驟I)制備的菌懸液和步驟2)制備的濃度為0.5~1.1 %的黃原膠溶液按照1: (3~10)的質(zhì)量比例混合后加入步驟4)制得的除氧劑溶液，充分混勻后得到雙歧桿菌菌膠液，除氧劑的添加量按照菌膠液總量的0.03~0.07%加入，將雙歧桿菌菌膠液以一滴一滴地方式擠壓入磁力攪拌器上的步驟3)制備的殼聚糖溶液中攪拌30~60min，菌膠液與殼聚糖比例為1: (3~6)，加入后攪拌，獲得微膠囊；
[0028]6)待微膠囊完全交聯(lián)后用160~200目的紗布過(guò)濾，將過(guò)濾后的微膠囊與步驟2)制備的0.1 %的黃原膠溶液以Ig: (20~40mL)混合攪拌，攪拌20~40min，后用160~200目的紗布將微膠囊過(guò)濾，并用生理鹽水洗滌若干次，最終得到雙層的雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為3.0~4.5X 109CFU/g。
[0029]—種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的應(yīng)用，在酸奶中，以
0.(w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌膠囊加入，獲得含益生菌微膠囊的液態(tài)酸奶。
[0030]步驟I)制備過(guò)程中所使用的MRS肉湯來(lái)自青島高科技園海博生物技術(shù)有限公司。
[0031]具體實(shí)施例:
[0032]實(shí)施例1:
[0033](I)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，其中前兩次以3%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)22h，第三次按照2 %的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)18h，然后離心，離心轉(zhuǎn)速7000r/min，離心時(shí)間15min，后棄去上清液得菌泥，將菌泥與0.85~0.9 %的無(wú)菌生理鹽水混合配制成
1.2 X 109CFU/mL的菌懸液以備使用；
[0034](2)配制濃度為0.5%和0.1%的黃原膠溶液，80°C，滅菌15mim。將滅菌后的黃原膠溶液進(jìn)行離心除氣，離心轉(zhuǎn)速5000r/min，離心時(shí)間15min，后備用；
[0035](3)配制濃度為0.4%殼聚糖溶液，用IN NaOH溶液將殼聚糖溶液pH調(diào)節(jié)至5，以備使用；
[0036](4)制備為異抗壞血酸鈉溶液的除氧劑，過(guò)濾除菌；
[0037](5)將菌懸液與0.5 %的黃原膠溶液按照1:3的比例混合，除氧劑以菌膠液總量的
0.03%的添加量加入，之后搖勻；
[0038](6)用針頭規(guī)格為0.45_的無(wú)菌注射器，將步驟5)制得的混合液一滴一滴以擠壓方式加入至磁力攪拌器上的步驟3)制備的殼聚糖溶液中，并持續(xù)攪拌30min，菌膠液與殼聚糖比例為1:3，之后用160目的紗布進(jìn)行過(guò)濾得濕膠囊；
[0039](7)將制備好的微膠囊與0.1 %的黃原膠以lg:20mL的比例混合，并不斷攪拌20min，之后將微膠囊用160目的紗布進(jìn)行過(guò)濾，并用生理鹽水沖洗3次，得雙層雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為3.0X 109CFU/g ；
[0040](8)在自制的酸奶中，以0.5% (w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌微膠囊加入，獲得含益生菌微膠囊的液態(tài)酸奶。
[0041]實(shí)施例2:
[0042](I)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，其中前兩次以4%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)23h，第三次按照2.5 %的接種量轉(zhuǎn)接，并在37 °C的條件下培養(yǎng)18h，然后離心，離心轉(zhuǎn)速8000r/min，離心時(shí)間13min，后棄去上清液得菌泥，將菌泥與0.85~0.9 %的無(wú)菌生理鹽水混合配制成
1.25 X 109CFU/mL的菌懸液以備使用；
[0043](2)配制濃度為0.7%和0.1 %的黃原膠溶液，100°C，滅菌13mim。將滅菌后的黃原膠溶液進(jìn)行離心除氣，離心轉(zhuǎn)速6000r/min，離心時(shí)間13min，后備用；
[0044](3)配制濃度為I %殼聚糖溶液，用IN NaOH溶液將殼聚糖溶液pH調(diào)節(jié)至5.5，以備使用；
[0045](4)制備為異抗壞血酸鈉溶液的除氧劑，過(guò)濾除菌；
[0046](5)將菌懸液與0.7 %的黃原膠溶液按照1:7的比例混合，除氧劑以菌膠液總量的
0.05%的添加量加入，之后搖勻；
[0047](6)用針頭規(guī)格為0.6mm的無(wú)菌注射器，將步驟5)制得的混合液一滴一滴以擠壓方式加入至磁力攪拌器上的步驟3)制備的殼聚糖溶液中，并持續(xù)攪拌40min，菌膠液與殼聚糖比例為1:5，之后用180目的紗布進(jìn)行過(guò)濾得濕膠囊；
[0048](7)將制備好的微膠囊與0.1 %的黃原膠以lg:30mL的比例混合，并不斷攪拌30min，之后將微膠囊用180目的紗布進(jìn)行過(guò)濾，并用生理鹽水沖洗4次，得雙層雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為3.6X 109CFU/g ；
[0049](8)在自制的酸奶中，以0.7% (w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌微膠囊加入，獲得含益生菌微膠囊的液態(tài)酸奶。
[0050]實(shí)施例3:
[0051](I)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，在37°C培養(yǎng)條件下采用此MRS液體培養(yǎng)基活化三次，其中前兩次以5%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)24h，第三次按照3%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)18h，然后離心。離心轉(zhuǎn)速10000r/min，離心時(shí)間lOmin，后棄去上清液得菌泥，將菌泥與0.85~0.9 %的無(wú)菌生理鹽水混合配制成
1.3 X 109CFU/mL的菌懸液以備使用；
[0052](2)配制濃度為1.1%和0.1%的黃原膠溶液，110°C，滅菌lOmim，將滅菌后的黃原膠溶液進(jìn)行離心除氣，離心轉(zhuǎn)速7000r/min，離心時(shí)間lOmin，后備用；
[0053](3)配制濃度為1.3%殼聚糖溶液，用IN NaOH溶液將殼聚糖溶液pH調(diào)節(jié)至5.9，以備使用；
[0054](4)制備為半胱氨酸鹽酸鹽溶液的除氧劑，過(guò)濾除菌；
[0055](5)將菌懸液與1.1%的黃原膠溶液按照1:10的比例混合，除氧劑以菌膠液總量的0.07%的添加量加入，之后搖勻；
[0056](6)用針頭規(guī)格為0.7mm的無(wú)菌注射器，將步驟5)制得的混合液一滴一滴地?cái)D壓方式加入至磁力攪拌器上的步驟3)制備的殼聚糖溶液中，并持續(xù)攪拌60min，菌膠液與殼聚糖比例為1:6。之后用200目的紗布進(jìn)行過(guò)濾得濕膠囊。
[0057](7)將制備好的微膠囊與0.1 %的黃原膠以lg:40mL的比例混合，并不斷攪拌40min,之后將微膠囊用200目的紗布進(jìn)行過(guò)濾，并用生理鹽水沖洗5次，得雙層雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為4.0X 109CFU/g ；
[0058](8)在自制的酸奶中，以1% (w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌微膠囊加入，獲得含益生菌微膠囊的液態(tài)酸奶。
[0059]在自制的酸奶中，以0.5%~1% (w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌微膠囊加入，在4°C的條件下貯存，并以含IO7~108CFU/mL的游離雙歧桿菌的酸奶作為對(duì)照。存貯4周后，發(fā)現(xiàn)加有微膠囊的酸奶中活菌數(shù)雖有不同程度的下降，但其活菌數(shù)仍大于106CFU/g，且酸奶的酸度和PH變化不大，從而對(duì)酸奶的品質(zhì)不會(huì)造成影響。未包埋的雙歧桿菌活菌數(shù)劇烈下降，其活菌數(shù)小于105CFU/mL，未達(dá)到益生菌食品要求達(dá)到的活菌數(shù)標(biāo)準(zhǔn)，且酸奶的酸度和PH變化較大。所以，利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備的雙歧桿菌微膠囊可增強(qiáng)菌體的抗酸性，發(fā)揮其有益人體健康的作用。
【權(quán)利要求】
1.一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)將雙歧桿菌凍干菌粉接種于MRS肉湯中，在37°C培養(yǎng)條件下MRS活化三次，前兩次以3~5%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)22~24h，第三次按照2~3%的接種量轉(zhuǎn)接，并在37°C的條件下培養(yǎng)18h，后進(jìn)行離心處理并收集菌體，棄去上清液得菌泥，將菌泥與濃度為0.85~0.9%的無(wú)菌生理鹽水混合配制成1.2~1.3 X 109CFU/mL的菌懸液備用； 2)取濃度為0.5~1.1%和0.1 %的黃原膠溶液，滅菌和離心除氣處理后備用； 3)取濃度為0.4~1.3%殼聚糖溶液，調(diào)節(jié)pH至5~5.9備用； 4)配制除氧劑溶液，除氧劑為異抗壞血酸鈉或半胱氨酸鹽酸鹽，過(guò)濾除菌以備使用； 5)將步驟I)制備的菌懸液和步驟2)制備的濃度為0.5~1.1 %的黃原膠溶液按照1: (3~10)的質(zhì)量比例混合后加入步驟4)制得的除氧劑溶液中，充分混勻后得到雙歧桿菌菌膠液，除氧劑的添加量按照菌膠液總量的0.03~0.07%加入，將雙歧桿菌菌膠液加入磁力攪拌器上的步驟3)制備的殼聚糖溶液中攪拌，菌膠液與殼聚糖比例為1: (3~6)，加入后攪拌，獲得微膠囊； 6)待微膠囊完全交聯(lián)后過(guò)濾，將過(guò)濾后的微膠囊與步驟2)制備的0.1 %的黃原膠溶液以Ig: (20~40mL)混合攪拌，后將微膠囊過(guò)濾，并洗滌，最終得到雙層的雙歧桿菌微膠囊，微膠囊的活菌數(shù)為3.0~4.5X 109CFU/g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，其特征在于:所述的步驟I)中離心時(shí)的轉(zhuǎn)速為7000~10000r/min，離心時(shí)間為10~15min。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，其特征在于:所述的步驟2)中滅菌處理的溫度為:80~110°C，時(shí)間為10~15min ；離心除氣處理的轉(zhuǎn)速為:5000~7000r/min，時(shí)間為10~15min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，其特征在于:所述的步驟3)中，調(diào)節(jié)pH值時(shí)使用的試劑為濃度為IN的NaOH溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，其特征在于:所述的步驟5)中，將雙歧桿菌菌膠液加入磁力攪拌器上的殼聚糖溶液中的方式為:使用針頭規(guī)格為0.45~0.7_的無(wú)菌注射器將雙歧桿菌菌膠液以一滴一滴地方式擠壓入磁力攪拌器上的殼聚糖溶液中；且攪拌時(shí)間為30~60min，菌膠液與殼聚糖比例為1: (3~6)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的方法，其特征在于:所述的步驟6)中，過(guò)濾時(shí)使用160~200目的紗布過(guò)濾；洗滌時(shí)使用生理鹽水洗滌若干次；攪拌時(shí)間為20~40min。
7.一種利用黃原膠/殼聚糖/黃原膠制備雙歧桿菌微膠囊的應(yīng)用，其特征在于:在酸奶中，以0.5%~1% (w/w)的加入量將制備的雙歧桿菌膠囊加入，獲得含益生菌微膠囊的液態(tài)酸奶。
【文檔編號(hào)】C12N11/04GK103981169SQ201410196061
【公開日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年5月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月9日
【發(fā)明者】陳合, 宋雅娟, 舒國(guó)偉, 劉妮娜 申請(qǐng)人:陜西科技大學(xué)