側(cè)孢芽孢桿菌制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于微生物制劑【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是指側(cè)孢芽孢桿菌制劑，本發(fā)明的制備工藝如下：側(cè)孢芽孢桿菌菌種（安瓿管）——試管斜面菌種培養(yǎng)——搖瓶菌種培養(yǎng)——種子罐深層液體發(fā)酵培養(yǎng)——封閉式固體發(fā)酵箱培養(yǎng)——側(cè)孢芽孢桿菌制劑。本發(fā)明采用先進的“深層液體發(fā)酵+封閉式固體發(fā)酵”的連續(xù)發(fā)酵工藝，利用全封閉自控式固體發(fā)酵設(shè)備，使固體發(fā)酵的整個過程都處于全封閉的自動監(jiān)控之下，對發(fā)酵過程中的培養(yǎng)基成分、配方、溫度、濕度、通氣、PH值等環(huán)境條件進行自動化檢測、電子顯示、自動控制，不僅大幅度提高產(chǎn)量，而且保證了由該制劑配制的微生物葉面增效劑的質(zhì)量。
【專利說明】側(cè)孢芽孢桿菌制劑
[0001]本申請是一件分案申請，是申請?zhí)枮?01010103139.0,申請日為2010年I月26日，發(fā)明名稱為“微生物葉面增效劑”的分案申請。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明屬于微生物制劑【技術(shù)領(lǐng)域】，具體是指側(cè)孢芽孢桿菌制劑。
【背景技術(shù)】
[0003]我國微生物肥料的研發(fā)和應(yīng)用始于20世紀(jì)50年代，由于研究經(jīng)費匱乏，長期以來，微生物肥料產(chǎn)業(yè)整體水平不高、技術(shù)創(chuàng)新不足、產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定、利用程度較低等問題。目前世界上已有70多個國家和地區(qū)開發(fā)應(yīng)用微生物肥料，在歐美發(fā)達國家農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，微生物肥料的使用已達肥料總量的20%以上，總產(chǎn)量以10%~20%的速度遞增。而我國年產(chǎn)微生物肥僅占化肥產(chǎn)量的0.5%。據(jù)專家測算，如果這一比例達到3%，就能減少50萬噸化肥用量，增產(chǎn)糧食100億公斤。
[0004]我國是一個農(nóng)業(yè)大國，作物種植面積廣闊。農(nóng)業(yè)是國民經(jīng)濟的基礎(chǔ)，是“安天下的產(chǎn)業(yè)”。我國和世界大多數(shù)農(nóng)業(yè)國家一樣，目前均面臨著因過量使用化肥、農(nóng)藥、激素而造成的環(huán)境污染、土壤酸化板結(jié)、地力衰退、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量下降、有毒化學(xué)物質(zhì)殘留超標(biāo)、危害人類健康等日趨嚴(yán)峻問題。尤其是食品安全、餐桌污染給人類帶來的危害，已引起國際社會普遍關(guān)注。因此，發(fā)展生態(tài)農(nóng)業(yè)，生產(chǎn)綠色食品，保障人民健康，倍受各國政府重視和支持?！熬G色、環(huán)保、健康”已成為當(dāng)今社會發(fā)展的主題?！敖鉀Q21世紀(jì)農(nóng)業(yè)問題，關(guān)鍵靠生物技術(shù)”，已成為世界各國專家、政要的共同認識。利用生物技術(shù)修復(fù)土壤、降解毒害、消除污染、促進植物和動物生長、增強防病抗逆能力、提高產(chǎn)量改善品質(zhì)，其獨特卓越的功效已為農(nóng)業(yè)工作者所認識和接受。生物工 程，被喻為“21世紀(jì)的朝陽產(chǎn)業(yè)”。應(yīng)用生物技術(shù)研制的綠色食品生產(chǎn)資料和環(huán)保產(chǎn)品，具有巨大的市場需求和發(fā)展空間。我國微生物肥料的市場前景極為廣闊。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于利用微生物菌種和先進的生物技術(shù)研制側(cè)孢芽孢桿菌制劑以及利用側(cè)孢芽孢桿菌制劑制備微生物肥料。
[0006]本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的:
本發(fā)明的工藝流程路線如下:
1、側(cè)孢芽孢桿菌制劑的制備:菌種(安瓿管)一試管斜面菌種培養(yǎng)一搖瓶菌種培養(yǎng)一種子罐深層液體發(fā)酵培養(yǎng)一封閉式固體發(fā)酵箱培養(yǎng)一一側(cè)孢芽孢桿菌制劑。
[0007]原料菌選育:
通過對土壤中大量微生物的分離、篩選，將防病、促生長、抗逆性強的側(cè)孢芽孢桿菌iBaciIlus laterosporus)作為生產(chǎn)菌株之一，該菌株經(jīng)中國疾病預(yù)防控制中心營養(yǎng)與食品安全所進行了菌種毒力試驗，證實該菌株按食品經(jīng)口毒性分級標(biāo)準(zhǔn)，屬實際無毒物質(zhì)。該菌株的中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址:北京市海淀區(qū)中關(guān)村北一條13號，中國科學(xué)院微生物研究所)菌株保藏編號為=CGMCCN0.1755 ；
原料菌株側(cè)孢芽孢桿菌的特性:
1、菌種選育形態(tài)學(xué)特性
形狀及排列:菌體桿狀，端稍細，單生成對、成堆；芽孢呈橢圓形，(I~
1.2) X (2.5~3) μ m，附著于芽孢一側(cè)有獨木舟形體，芽孢在紡錘形孢囊中側(cè)生、中生。
[0008]運動及鞭毛:能運動。
[0009]2、生理特性
(O明膠穿刺培養(yǎng):液化:陽性;液化速度:慢，弱。
[0010](2)淀粉水解:陰性。
[0011](3)與氧的關(guān)系:有氧、無氧均能生長。
[0012](4)酪蛋白水解:陽性。
[0013](5)酪氨酸水解:陰性。
[0014](6) 二羥丙酮的形成:陰性。
[0015]3、培養(yǎng)學(xué)特性:培養(yǎng)時任選一種培養(yǎng)基培養(yǎng)
【權(quán)利要求】
1.側(cè)孢芽孢桿菌制劑，其特征在于:側(cè)孢芽孢桿菌制劑的制備: a.菌種選育 (安瓿管)形狀及排列:菌體桿狀，端稍細，單生成對、成堆；芽孢呈橢圓形，(I~1.2) X(2.5~3) μ m，附著于芽孢一側(cè)有獨木舟形體，芽孢在紡錘形孢囊中側(cè)生、中生； 運動及鞭毛:能運動； b.菌種培育 斜面菌種培養(yǎng):試管斜面培養(yǎng)基:牛肉膏一蛋白胨培養(yǎng)基；培養(yǎng)溫度:32±1°C ;培養(yǎng)時間:72~96小時； 搖瓶培養(yǎng):培養(yǎng)溫度:32±1°C，培養(yǎng)時間:30~32小時； c.制劑生產(chǎn) 種子罐深層液體發(fā)酵培養(yǎng):培養(yǎng)溫度:32土1°C,培養(yǎng)時間:18~20小時,通氣條件1:.0.3 ~0.5V/V ； 封閉式固體發(fā)酵培養(yǎng)箱培養(yǎng): 培養(yǎng)溫度28~35°C，培養(yǎng)時間:96~120小時，培養(yǎng)濕度:60%~90% ； 側(cè)孢芽孢桿菌制劑一檢測合格； 側(cè)孢芽孢桿菌制劑檢驗指標(biāo):有效活菌> 50億/克；雜菌率< 5% ;水分< 10% ； 其中，所述的菌種為側(cè)孢芽孢桿菌菌株，已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，菌株保藏編號為=CGMCC N0.1755。
【文檔編號】C12R1/07GK103725626SQ201310592554
【公開日】2014年4月16日 申請日期:2010年1月26日 優(yōu)先權(quán)日:2010年1月26日
【發(fā)明者】張新雄 申請人:東莞市保得生物工程有限公司