專利名稱：一種蠟狀芽孢桿菌和微生物菌劑及它們的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種芽孢桿菌(Bacillus sp.),以及一種含有該芽孢桿菌
cereus )作為活性成分的微生物菌劑和它們的應(yīng)用；更確切地說，涉及一種保藏號為CGMCCN0.6895的芽孢桿菌(Bacillus sp.)，以及含有此芽孢桿菌的微生物菌劑，還涉及所述芽孢桿菌或微生物菌劑在降解纖維素中的應(yīng)用、在以纖維素為原料制備乙醇中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
當今世界，面臨著能源短缺和環(huán)境污染的問題，世界各國都在嘗試燃料乙醇的生產(chǎn)和使用，目前燃料乙醇的生產(chǎn)主要以玉米和谷物為原料，然而中國具有大量潛在的低成本的纖維素生物質(zhì)原料，纖維素在纖維素酶的作用下能夠降解成葡萄糖，從而可以用于發(fā)酵生產(chǎn)乙醇,從而極大地擴大乙醇的產(chǎn)量并降低原料成本。在使用纖維素作為原料生產(chǎn)燃料乙醇的過程中，纖維素酶是決定降解纖維素的關(guān)鍵因素之一，纖維素與纖維素酶之間的作用多是通過將能夠產(chǎn)纖維素酶的微生物與纖維素原料接觸來實現(xiàn)的。目前已經(jīng)分離得到的微生物菌株對纖維素的降解能力還較低，因此，迫切需要開發(fā)出一種高活力的能夠降解纖維素原料的微生物菌株及相關(guān)的微生物菌劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有的微生物菌株對纖維素的降解能力低的缺點，提供一種高活力的能夠降解纖維素原料 的微生物菌株及相關(guān)的微生物菌劑和應(yīng)用。為了實現(xiàn)第一個發(fā)明目的，提供了一種芽孢桿菌(Bacillus sp.)，其中，該芽孢桿菌(Bacillus sp.)的保藏編號為 CGMCC N0.6895。為了實現(xiàn)第二個發(fā)明目的，提供了一種降解纖維素的微生物菌劑，其中，該微生物菌劑含有芽孢桿菌(Bacillus sp.)作為活性成分，其中，該芽孢桿菌(Bacillus sp.)的保藏編號為 CGMCC N0.6895。此外，本發(fā)明還提供了所述芽孢桿菌或所述微生物菌劑在降解纖維素中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了所述芽孢桿菌或所述微生物菌劑在以纖維素為原理制備燃料乙醇中的應(yīng)用。本發(fā)明的芽孢桿菌(Bacillus sp.)菌株是通過大量篩選工作篩選到的,該菌株對纖維素具有很強的降解能力。該菌株已于2012年11月28日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(地址:北京市朝陽區(qū)北辰西路I號院3號)，保藏號為CGMCC N0.6895。本發(fā)明提供的保藏號為CGMCC N0.6895的芽孢桿菌(Bacillus sp.)及含有該菌的微生物菌劑對纖維素具有很強的降解能力，可以廣泛地應(yīng)用于降解纖維素以及以纖維素為原料制備乙醇等工藝中。


圖1顯示了實施例1中對采集的污泥和湖水樣品中的微生物富集之后，將菌懸液稀釋涂布于初篩培養(yǎng)基平板上，經(jīng)革蘭氏碘液染色的結(jié)果；
圖2顯示了本發(fā)明篩選的保藏號為CGMCC N0.6895的芽孢桿菌(Bacillus sp.)在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)48小時的形態(tài)。
具體實施例方式本發(fā)明提供了一種芽孢桿菌(Bacillus sp.),其中，該芽孢桿菌(Bacillus sp.)的保藏編號為CGMCC N0.6895。經(jīng)過16s rDNA擴增與測序分析，保藏編號為CGMCC N0.6895的菌株具有SEQ ID NO:1所示的16s rDNA序列。本發(fā)明還提供了一種降解纖維素的微生物菌劑，其中，該微生物菌劑含有芽孢桿菌(Bacillus sp.)作為活性成分，其中，該芽孢桿菌(Bacillus sp.)的保藏編號為CGMCCN0.6895。所述微生物菌劑中含有的芽孢桿菌(Bacillus sp.)的量可以在很大范圍內(nèi)改變，優(yōu)選情況下，每克所述微生物菌劑所含的總活菌數(shù)可以為0.1-2.5X1010個，更優(yōu)選為
0.5-1X1010 個。根據(jù)本發(fā)明，所述微生物菌劑還含有培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基和TSB培養(yǎng)基中的一種或幾種，優(yōu)選為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。上述培養(yǎng)基能夠商購得到或者根據(jù)“微生物培養(yǎng)基手冊”(Microbiology Culture Media Manual)的記載制備得到。例如，所述營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基含有牛肉膏、蛋白胨、NaCl、水及選擇性含有的瓊脂，其中，相對于100重量份的牛肉膏，蛋白胨的含量可以為100-350重量份，NaCl的含量可以為100-350重量份，瓊脂的含量可以為0-50重量份，水的含量可以為30000-35000重量份，pH值可以為
7.2_8.0 ο本發(fā)明還提供了保藏號為CGMCC N0.6895的芽孢桿菌(Bacillus sp.)及含有該菌株的微生物菌劑在降解纖維素中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了保藏號為CGMCC N0.6895的芽孢桿菌(Bacillus sp.)及含有該菌株的微生物菌劑在以纖維素為原料制備燃料乙醇中的應(yīng)用。下面通過具體的實施例對本發(fā)明進行更進一步的說明。實驗材料
一、篩選菌種的樣品:
采自廣東省湛江市西南的湖光瑪珥湖(21° 9' N，110° 17' E)的6個點采集淤泥和湖水樣品，采樣點按梅花形分布，代表性強，覆蓋面大。采樣時間、地點、天氣條件見表I。表1、樣品米集
權(quán)利要求
1.一種臘狀芽孢桿菌(ifeci77i/5.sp.),其特征在于,該芽孢桿菌(Bacillus sp.)的保藏編號為 CGMCC N0.6895。
2.一種降解纖維素的微生物菌劑，其特征在于，該微生物菌劑含有芽孢桿菌OfeciJAz1Ssp.)作為活性成分，其中，該芽孢桿菌sp.)的保藏編號為CGMCC N0.6895。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的微生物菌劑，其中，每克所述微生物菌劑所含的總活菌數(shù)為0.1-2.5X 101° 個。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的微生物菌劑，其中，每克所述微生物菌劑所含的總活菌數(shù)為0.5-1 X 101。個。
5.根據(jù)權(quán)利要求2-4中的任意一項所述的微生物菌劑，其中，該微生物菌劑還含有培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 、LB培養(yǎng)基和CMC培養(yǎng)基中的一種或幾種。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物菌劑，其中，所述培養(yǎng)基為營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。
7.權(quán)利要求1所述的蠟狀芽孢桿菌或權(quán)利要求2-6中的任意一項所述的微生物菌劑在降解纖維素中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1所述的蠟狀芽孢桿菌或權(quán)利要求2-6中的任意一項所述的微生物菌劑在以纖維素為原料制備乙醇中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種保藏號為CGMCCNo.6895的芽孢桿菌(Bacillussp.)，以及含有此蠟狀芽孢桿菌的微生物菌劑，還提供了所述蠟狀芽孢桿菌或微生物菌劑在降解纖維素中的應(yīng)用、以及在以纖維素為原料制備乙醇中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的保藏號為CGMCCNo.6895的芽孢桿菌(Bacillussp.)及含有該菌的微生物菌劑在堿性條件下對纖維素具有很強的降解能力，可以用于以纖維素為原料制備乙醇。
文檔編號C12N1/20GK103074283SQ20131003075
公開日2013年5月1日 申請日期2013年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月25日
發(fā)明者崔麗虹, 李積華, 魏曉奕, 張雨良, 付調(diào)坤, 韓冬輝, 王飛, 劉義軍 申請人:中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所, 中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所