一種短乳桿菌及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種短乳桿菌及其應(yīng)用，屬于食品生物【技術(shù)領(lǐng)域】。提供了一種短乳桿菌，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCCNo.6683，該菌株可用于發(fā)酵生產(chǎn)單質(zhì)硒，具有亞硒酸鹽耐受度高的優(yōu)點(diǎn)。
【專利說(shuō)明】一種短乳桿菌及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種短乳桿菌及其應(yīng)用，屬于食品生物【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]短乳桿菌是乳桿菌屬的重要菌種，具有益生功能，研究和報(bào)道表明，短乳桿菌具有高產(chǎn)酸能力和解毒、抑菌、提高機(jī)體免疫能力等多種功能特性，常用于發(fā)酵食品的加工，在食品工業(yè)具有廣泛用途。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明提供了一種短乳桿菌幾D715，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC N0.6683。
[0004]所述菌株篩選自傳統(tǒng)乳制品，已于2012年10月18日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC N0.6683，建議分類命名為短乳桿菌Lactobacillus地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。
[0005]所述短乳桿菌16SrDNA序列如SEQ ID N0.1所示。 [0006]本發(fā)明還提供了短乳桿菌CGMCC N0.6683的應(yīng)用，是將所述短乳桿菌用于生產(chǎn)單質(zhì)硒，是用CGMCC N0.6683發(fā)酵亞硒酸鹽生產(chǎn)單質(zhì)硒。
[0007]所述亞硒酸鹽為亞硒酸鈉。
[0008]具體而言是將亞硒酸鹽加入含有CGMCC N0.6683的培養(yǎng)體系，所述培養(yǎng)體系可以為液體培養(yǎng)體系或固體培養(yǎng)體系，優(yōu)選短乳桿菌常用發(fā)酵培養(yǎng)基，例如MRS培養(yǎng)基，培養(yǎng)基組成是可進(jìn)行優(yōu)化，培養(yǎng)基優(yōu)化過(guò)程為常規(guī)技術(shù)手段。
[0009]亞硒酸鹽加入時(shí)間為發(fā)酵開始前、短乳桿菌的延滯期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期或穩(wěn)定期中任一一個(gè)時(shí)期，也可以在各個(gè)時(shí)期均加入一定量的亞硒酸鹽，具體添加方式和添加量可根據(jù)有限次的實(shí)驗(yàn)得以確定。
[0010]經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，優(yōu)選亞硒酸鹽濃度為0.01mM-30mM,更進(jìn)一步地優(yōu)選亞硒酸鹽濃度為
0.01mM-20 mM。
[0011]本發(fā)明具有如下有益效果:
I ) CGMCC N0.6683好氧條件下活菌數(shù)高；
2)為單質(zhì)硒的發(fā)酵生產(chǎn)提供了新方法。
【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0012]圖1 CGMCC N0.6683掃描電鏡和EDS分析
圖2 CGMCC N0.6683對(duì)0.2mM、0.5mM、l mM亞硒酸鈉的轉(zhuǎn)化率
【具體實(shí)施方式】[0013]實(shí)施例1
結(jié)合說(shuō)明書附圖1對(duì)實(shí)施例1進(jìn)行說(shuō)明。
[0014]將CGMCC N0.6683接種到亞硒酸鈉濃度為IOmM的MRS培養(yǎng)基中，30攝氏度培養(yǎng)5天，離心收集菌泥，進(jìn)行冷凍真空干燥，得到橘紅色粉末。送樣進(jìn)行掃描電鏡分析，并對(duì)菌體表面進(jìn)行EDS能譜分析，結(jié)果見附圖1。發(fā)現(xiàn)菌體表面存在C、O和Se (O價(jià))元素，結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道，可以認(rèn)定CGMCC N0.6683產(chǎn)生了單質(zhì)硒。通過(guò)掃描電鏡結(jié)合EDS能譜分析，單質(zhì)硒富集在菌體表面。
[0015]實(shí)施例2
發(fā)酵培養(yǎng)基采用MRS培養(yǎng)基，出發(fā)菌株為CGMCC N0.6683。在滅菌后的MRS培養(yǎng)基中加入0.2 mM亞硒酸鈉后，立即接入10%CGMCC N0.6683，30°C好氧培養(yǎng)200小時(shí)，剩余亞硒酸鹽含量如圖2所示。
[0016]實(shí)施例3
發(fā)酵培養(yǎng)基采用MRS培養(yǎng)基，出發(fā)菌株為CGMCC N0.6683。在滅菌后的MRS培養(yǎng)基中加入0.5 mM亞硒酸鈉后，立即接入10%CGMCC N0.6683，30°C好氧培養(yǎng)250小時(shí)，剩余亞硒酸鹽含量如圖2所示。
[0017]實(shí)施例4
發(fā)酵培養(yǎng)基采用MRS培養(yǎng)基，出發(fā)菌株為CGMCC N0.6683。在滅菌后的MRS培養(yǎng)基中加入1mM亞硒酸鈉后，立即接入10%CGMCC N0.6683，30°C好氧培養(yǎng)250小時(shí)，剩余亞硒酸鹽含量如圖2所示。
[0018]實(shí)施例5
將CGMCC N0.6683接種到含有IOmM的亞硒酸鹽的MRS瓊脂培養(yǎng)基，得到紅色菌落。
[0019]實(shí)施例6
將CGMCC N0.6683在MRS液體培養(yǎng)基中活化兩代，接入含有10 mM亞硒酸鈉的MRS液體發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)至穩(wěn)定期，取1mL離心生理鹽水洗滌后，逐級(jí)稀釋涂布于MRS固體培養(yǎng)基，CGMCC N0.6683 活菌數(shù)為 6.29 X 1O7 CFU /mL。
[0020]實(shí)施例7
將CGMCC N0.6683在MRS液體培養(yǎng)基中活化兩代，接入含有20 mM亞硒酸鈉的MRS液體發(fā)酵培養(yǎng)基，培養(yǎng)至穩(wěn)定期，取1mL離心生理鹽水洗滌后，逐級(jí)稀釋涂布于MRS固體培養(yǎng)基，CGMCC N0.6683 活菌數(shù)為 1.5 X 1O5 CFU /mL。
【權(quán)利要求】
1.一種短乳桿菌，其特征在于，保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC N0.6683。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述短乳桿菌，其特征在于，其16SrDNA序列如SEQID N0.1所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述短乳桿菌，其特征在于，其用于生產(chǎn)單質(zhì)硒。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于，用CGMCCN0.6683發(fā)酵亞硒酸鹽生產(chǎn)單質(zhì)硒。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，所述亞硒酸鹽為亞硒酸鈉。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，在滅菌后的短乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基中加入亞硒酸鈉，接入CGMCC N0.6683進(jìn)行發(fā)酵。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，所述短乳桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基為短乳桿菌生長(zhǎng)增殖培養(yǎng)基。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)基采用MRS培養(yǎng)基，在滅菌后的MRS培養(yǎng)基中加入0.2mM-20mM亞硒酸鈉后，立即接入CGMCC N0.6683，30°C好氧培養(yǎng)。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)基采用MRS培養(yǎng)基，在滅菌后的MRS培養(yǎng)基中加入lmM-20mM亞硒酸鈉后，立即接入10% CGMCC N0.6683，30°C好氧培養(yǎng)。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所 述方法，其特征在于，發(fā)酵培養(yǎng)基采用MRS培養(yǎng)基，在滅菌后的MRS培養(yǎng)基中加入1OmM亞硒酸鈉后，立即接入10% CGMCC N0.6683，30°C好氧培養(yǎng)。
【文檔編號(hào)】C12R1/24GK103897995SQ201210569562
【公開日】2014年7月2日 申請(qǐng)日期:2012年12月25日 優(yōu)先權(quán)日:2012年12月25日
【發(fā)明者】姜毓君, 鄧宇, 滿朝新, 成唯嘉 申請(qǐng)人:東北農(nóng)業(yè)大學(xué)