專利名稱：山茱萸果核提取物及其在制備降血壓組合物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種山茱萸果核提取物，同時涉及該提取物在制備降血壓藥物中的應(yīng)用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
山茱萸(Cornus officinalis Sieb. et Zucc.)山茱萸科落葉灌木或小喬木。是我國重要的傳統(tǒng)中藥，富含生命活性物質(zhì)如氨基酸、維生素、微量元素、沒食子酸、蘋果酸、熊果酸等，具有調(diào)節(jié)免疫、抗氧化作用、抗腫瘤、治療糖尿病、抗休克、強心作用、抗心律失常作用、治療不孕不育癥、抗艾滋病作用等多種功能，含有山茱萸果肉的復(fù)方藥物在臨床上應(yīng)用廣泛目前。山茱萸僅果肉入藥，只能滿足國內(nèi)市場需求量的三分之一，資源缺乏急需解決。山茱萸的加工將果核棄之，資源浪費嚴重，因此充分的利用山茱萸果核是研究的主要方向。
本發(fā)明的目的是提供一種具有降血壓功效的山茱萸果核提取物。為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明山茱萸果核提取物所采用的技術(shù)方案是一種山茱萸果核提取物，采用如下步驟提取而成I)取干燥的山茱萸果核粉碎成20 100目的粉末，對粉末采用石油醚進行滲漉提取，然后采用丙酮進行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收丙酮溶劑得總提取物；2)取總提取物加水分散，上樣于大孔樹脂吸附柱，樹脂用量為總提取物體積的8 12倍，徑高比為I : 5 10，吸附流速0. I 0. 5BV/h ；3)上樣后采用12 20BV的10%甲醇水溶液洗脫，流速為I 3BV/h，收集洗脫液回收溶劑得降血壓提取物。步驟I)所述石油醚的加入量為粉末體積的5 10倍。步驟I)所述丙酮的加入量為粉末體積的5 10倍。所述大孔樹脂為HP-20。步驟I)山茱萸果核采用如下方法干燥先用60 100°C熱風(fēng)干燥5 10小時，然后用微波干燥，微波頻率2450MHz、微波功率10 15KW、時間20 30min。本發(fā)明的山茱萸提取物經(jīng)過試驗證明具有降血壓的作用，可以作為降血壓藥物、食品或保健品的活性物質(zhì)，采用常規(guī)的制備方法制成各種劑型的藥物、食品或保健品，作為活性物質(zhì)的本發(fā)明山茱萸果核提取物其添加量為0. I 99. 9%。
具體實施例方式實施例I本實施例的山茱萸果核提取物是采用如下步驟提取而成I)取除去果肉的山茱萸果核，先用60°C熱風(fēng)干燥10小時，然后用微波干燥，微波頻率2450MHz、微波功率15KW、時間20min ;干燥后將山茱萸果核粉碎成20目的粉末，將粉末置于滲漉罐內(nèi)，采用占粉末5倍體積的石油醚進行滲漉提取，然后采用占粉末5倍體積的丙酮進行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收丙酮溶劑得總提取物；2)取步驟I)得到的總提取物加I倍體(總提取物)積的水分散，上樣于HP-20大孔樹脂吸附柱，樹脂用量為總提取物體積的8倍，徑高比為I : 5，吸附流速0. lBV/h;3)上樣后采用12BV的10%甲醇水溶液洗脫，流速為lBV/h，收集洗脫液回收溶劑得降血壓提取物。實施例2本實施例的山茱萸果核提取物是采用如下步驟提取而成I)取除去果肉的山茱萸果核，先用80°C熱風(fēng)干燥8小時，然后用微波干燥，微波頻率2450MHz、微波功率13KW、時間25min ;干燥后將山茱萸果核粉碎成60目的粉末，將粉末 置于滲漉罐內(nèi)，采用占粉末7倍體積的石油醚進行滲漉提取，然后采用占粉末8倍體積的丙酮進行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收丙酮溶劑得總提取物；2)取步驟I)得到的總提取物加I. 5倍體(總提取物)積的水分散，上樣于HP-20大孔樹脂吸附柱，樹脂用量為總提取物體積的10倍，徑高比為I : 7，吸附流速0.3BV/h;3)上樣后采用16BV的10%甲醇水溶液洗脫，流速為3BV/h，收集洗脫液回收溶劑得降血壓提取物。實施例3本實施例的山茱萸果核提取物是采用如下步驟提取而成I)取除去果肉的山茱萸果核，先用100°C熱風(fēng)干燥5小時，然后用微波干燥，微波頻率2450MHz、微波功率10KW、時間30min ;干燥后將山茱萸果核粉碎成100目的粉末，將粉末置于滲漉罐內(nèi)，采用占粉末10倍體積的石油醚進行滲漉提取，然后采用占粉末10倍體積的丙酮進行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收丙酮溶劑得總提取物；2)取步驟I)得到的總提取物加2倍體(總提取物)積的水分散，上樣于HP-20大孔樹脂吸附柱，樹脂用量為總提取物體積的12倍，徑高比為I : 10，吸附流速0.5BV/h;3)上樣后采用20BV的10%甲醇水溶液洗脫，流速為2BV/h，收集洗脫液回收溶劑得降血壓提取物。實驗例以下給出采用本發(fā)明的山茱萸果核提取物的降血壓效果的試驗I.高血壓模型的制備(RVH的模型制作)模型組①麻醉SD大鼠腹腔注射I %戊巴比妥鈉溶液(35mg/kg)麻醉暴露腎動脈俯臥位固定備皮，于第3腰椎棘突水平沿背部后正中線切開皮膚3 4cm，皮下組織、腰背筋膜(防止損傷肋下神經(jīng))，暴露左右腎動脈。③分離左腎動脈左腎動靜脈包裹在一個血管鞘中，通常情況下左腎動脈位于深靜脈的上后方，(偶爾會出現(xiàn)在腎靜脈下方或橫跨在腎靜脈的上方)，鈍性分離左腎動脈長約0. 5cm ;④狹窄左腎動脈將鈦合金夾呈水平方向套在左腎動脈上，務(wù)必使左腎動脈全部落入鈦合金夾頂部的圓形小孔內(nèi)，再用眼科直鑷夾閉其兩腳，以狹窄后左腎顏色變?yōu)椤皽\紅色”為宜。向手術(shù)野內(nèi)注入0. 5ml青霉素G(8萬U/mL)。⑤狹窄右腎動脈手術(shù)開口較左腎開口處高約1cm，暴露右腎及右腎蒂，右腎動脈位置變異少，且于右腎靜脈相距稍遠，較左腎動脈易于分離。在下腔靜脈和腹主動脈之間與右腎水平線相交處分離筋膜，即見右腎動脈，分離狹窄右腎動脈，具體方法同左腎動脈。多數(shù)情況下肉眼可見右腎動脈直徑較左腎動脈大，故鈦合金夾直徑的選擇上亦可以視具體情況進行調(diào)整，本研究常用0. 3mm 0. 35mm內(nèi)徑鈦合金夾狹窄右腎動脈。亦以狹窄后右腎顏色變?yōu)椤皽\紅色”為宜。后注入0.5mL青霉素G。⑥縫合皮下筋膜軟組織及皮膚，常規(guī)消毒，腹腔注入0.5mL青霉素G，手術(shù)完成。假手術(shù)組僅游離左、右腎動脈，不予狹窄，其余過程同模型組。術(shù)后護理動物蘇醒后單籠飼養(yǎng)，注意保持呼吸道通暢和保溫，禁食24h，不禁水。術(shù)后觀察皮膚切口，精神狀態(tài)及飲食。術(shù)后3d注射青霉素G 8萬U/mL，lmL/d/只，共5d。假手術(shù)組只游離動脈，不縮窄。2.高血壓模型成功的標(biāo)準(zhǔn)正常血壓大鼠血壓在85mmHg 120mmHg，以2K2C手術(shù)6W后動物血壓明顯升高，超過自身術(shù)前血壓30mmHg以上，且解剖后雙腎無壞死，萎縮或纖維化為模型復(fù)制成功；術(shù)后血壓無明顯升高或死亡者為失敗。3.降壓的效果如表I所示
表I降血壓效果表
主動脈收縮壓主動脈舒張壓
組別
(mmHg)(mmHg)
假手術(shù)組101 ±3. I86 ±3. 5
模型組176 ±4.9** 142 ±4.6**
實施例 I 高劑量組，600 mg kg-1 cT1 133±3. 1## 113±2. 8##---
提取物低劑量組，300 mg kg-1 Cf1 150±7.0*# 129.0±7.7*#
實施例 2高劑量組，600 mg kg-1 cT1 137. 3±4. 3##118.6±10.7##
提取物低劑量組，300 mg kg-1 cf1 148. ±3. 79**128. 7±8. 6*#
實施例 3高劑量組，600 mg kg-1 cf1136. 73±3. 08##120. 21 ±7. 49##
提取物低劑量組，300 mg kg-1 cf1147. I ±11. 9*#129. 7±10. 4*#注與假手術(shù)組比較，*P< 0. 05、**P <0.01 ;與模型組比較，#P < 0. 05、##P < 0. 01。結(jié)果表I顯示實施例I、2、3山茱萸果核提取物在大鼠術(shù)后8周，2K2C組大鼠血壓明顯高于假手術(shù)組，P < 0. 01顯示造模成功。山茱萸果核提取物各高劑量組(600mg .kg-1 .d-1)血壓與模型組大鼠血壓比較明顯降低，P < 0.01 ;山茱萸果核提取物各低劑量組(300mg kg-1 cf1)血壓與模型組大鼠血壓比較均有降低，P < 0. 05，即山茱萸果核提取物高劑量組和低劑量組血壓降低均具有顯著性差異。結(jié)論經(jīng)過上述方法得到的山茱萸果核提取物在劑量為300mg kg—1 cf1 600mg kg—1 cf1的范圍內(nèi)對2K2C高血壓大鼠有降壓作用。
權(quán)利要求
1.ー種山茱萸果核提取物，其特征在于采用如下步驟提取而成 1)取干燥的山茱萸果核粉碎成20 100目的粉末，對粉末采用石油醚進行滲漉提取，然后采用丙酮進行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收丙酮溶劑得總提取物； 2)取總提取物加水分散，上樣于大孔樹脂吸附柱，樹脂用量為總提取物體積的8 12倍，徑高比為I : 5 10，吸附流速O. I O. 5BV/h ； 3)上樣后采用12 20BV的10%甲醇水溶液洗脫，流速為I 3BV/h，收集洗脫液回收溶劑得降血壓提取物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的山茱萸果核提取物，其特征在于步驟I)所述石油醚的加入量為粉末體積的5 10倍。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的山茱萸果核提取物，其特征在于步驟I)所述丙酮的加入量為粉末體積的5 10倍。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的山茱萸果核提取物，其特征在于所述大孔樹脂為HP-20。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的山茱萸果核提取物，其特征在干步驟I)山茱萸果核采用如下方法干燥先用60 100°C熱風(fēng)干燥5 10小時，然后用微波干燥，微波頻率2450MHz、微波功率10 15KW、時間20 30min。
6.一種如權(quán)利要求I所述山茱萸果核提取物在制備降血壓組合物中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述的組合物為藥物、食品或保健品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種山茱萸果核提取物，1)取干燥的山茱萸果核粉碎成20～100目的粉末，對粉末采用石油醚進行滲漉提取，然后采用丙酮進行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收丙酮溶劑得總提取物；2)取總提取物加水分散，上樣于大孔樹脂吸附柱，樹脂用量為總提取物體積的8～12倍，徑高比為1∶5～10，吸附流速0.1～0.5BV/h；3)上樣后采用12～20BV的10％甲醇水溶液洗脫，流速為1～3BV/h，收集洗脫液回收溶劑得降血壓提取物。本發(fā)明的山茱萸提取物經(jīng)過試驗證明具有降血壓的作用，可以作為降血壓藥物、食品或保健品的活性物質(zhì)。
文檔編號A23L1/29GK102688275SQ20121000098
公開日2012年9月26日 申請日期2012年1月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年1月4日
發(fā)明者馮建芳, 劉玲, 姜華, 方偉進, 李軍, 李瑞芳, 李艷, 杜景霞, 路西明 申請人:河南科技大學(xué)