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連續(xù)回收收獲袋的制作方法

文檔序號:392912閱讀:219來源:國知局
專利名稱:連續(xù)回收收獲袋的制作方法
技術(shù)領域
本公開涉及收獲細胞的裝置和方法,所述細胞在例如二維一次性袋(two dimensional disposable bag)或三維一次性臺式生物反應器袋(three dimensional disposable bench top bioreactor bag)或更大的一次性生物反應器中的微載體上生長。
背景技術(shù)
細胞培養(yǎng)是制備許多生物產(chǎn)品必不可少的步驟,所述生物產(chǎn)品例如核酸、用于疫苗中的病毒、抗體和蛋白(例如干擾素)。依賴貼壁細胞(例如一些動物細胞)需要附著于表面以生長和分裂。對于大規(guī)模細胞培養(yǎng),微載體提供了依賴貼壁細胞生長所需的較大表面積。Van Wezel于1967公開了微載體、小珠子(bead)或直徑約0. 2mm的顆粒在所述細胞生長中的用途。在生物反應器袋內(nèi)將所述微載體混懸于培養(yǎng)基中。將細胞(接種物)加入混懸有所述微載體的液體培養(yǎng)基中。在該細胞培養(yǎng)方法中,有時用溫和的攪動來幫助所述微載體珠子保持混懸。不依賴貼壁細胞(又名“懸浮細胞”)不需要生長于其上的固體載體,并且能夠生長于細胞混懸液中。連續(xù)或灌注模式在連續(xù)或灌注模式中,新鮮的富營養(yǎng)培養(yǎng)基連續(xù)地流經(jīng)附著細胞群的微珠混懸液,或流經(jīng)細胞混懸培養(yǎng)液。在整個培養(yǎng)期中都可收獲產(chǎn)物。除去了毒性代謝產(chǎn)物,且有時除去了死細胞。在混懸培養(yǎng)液中,由于細胞的尺寸較小,因此除去營養(yǎng)枯竭的培養(yǎng)基同時在生物反應器中保留細胞的方法存在持續(xù)的問題?,F(xiàn)有的過濾方法和系統(tǒng)存在一些典型的缺點,包括濾器的堵塞和所述生物反應器內(nèi)死細胞的蓄積。這些問題影響了回收的產(chǎn)物量,并使所述灌注生物反應器系統(tǒng)難以放大至工業(yè)規(guī)模。分批模式在分批模式中,在開始時加入所有營養(yǎng)素,且直到一批結(jié)束時才取出產(chǎn)物。廢物在進程中蓄積并且營養(yǎng)素被用盡,使所述分批方法在很多應用中并不有效。補料分批模式補料分批模式與分批模式的相似之處在于產(chǎn)物只在進程結(jié)束時才被取出,但不同之處在于在該方法過程中營養(yǎng)素以多次間隔加入。在上述各個模式中,細胞群可將感興趣的產(chǎn)物分泌或釋放入培養(yǎng)基中。通過從所述生物反應器袋取出至少一部分所述培養(yǎng)基而收獲產(chǎn)物,同時在所述生物反應器袋中留下來自細胞混懸液或附著細胞群的微載體珠子的細胞。如上文所述,在連續(xù)或灌注模式中,在整個培養(yǎng)期中收獲產(chǎn)物。在分批和補料分批模式中,產(chǎn)物只在進程結(jié)束時才取出。在培養(yǎng)細胞的這些模式的每一個中,在收獲期中從培養(yǎng)基分離微載體珠子或細胞的最常規(guī)方法是使所述珠子或細胞沉降然后傾倒該液體,或在外部過濾該混合物。這些方法都不有效,并且都需要大量時間以完成分離。外部濾器可用于法向流過濾(Normal Flow Filtration,NFF)中,其中液體流接近法向,即垂直于濾器表面。除了 NFF是一種相對較慢的方法之外,在NFF中未通過濾器的顆粒會蓄積并且容易堵塞濾器。在正切流動過濾(Tangential Flow Filtration,TFF)中,液體流是沿濾器表面的正切方向。在TFF中,壓力沿法向施加于濾器表面,以迫使部分的流動液體通過濾器至濾液側(cè)。不僅不會堵塞濾器,未通過濾器的顆粒還會被液流帶走。盡管所述裝置一般不存在堵塞的問題,然而TFF裝置需要大面積、高流速以及高壓力,這可能破壞細胞或所述微載體珠子。另一種并不十分有效的方法涉及使用在“振蕩器(rocker) ”式二維袋內(nèi)的浮動灌注濾器。而另一種過濾系統(tǒng)是筒式濾器系統(tǒng),其一般在筒或外殼內(nèi)包括波紋狀或褶狀濾器。 筒式濾器也容易發(fā)生堵塞。這些現(xiàn)有的系統(tǒng)都未能提供一種有效的回收微載體珠子的方法。因此,仍然對從培養(yǎng)基分離微載體珠子或細胞、并在收獲時回收微載體珠子或細胞提供更快、更有效的方式的設備和方法存在持續(xù)需求。尤其公認需要用于細胞培養(yǎng)的連續(xù)或灌注模式(其中營養(yǎng)素連續(xù)加入系統(tǒng)中并且在整個培養(yǎng)期內(nèi)收獲產(chǎn)物)中的裝置和方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明尤其單獨或組合地包括如下內(nèi)容。在一個方面中,本發(fā)明涉及我們對于收獲和微載體回收袋的發(fā)現(xiàn),以及涉及收獲培養(yǎng)基并且同時將所述微載體珠子留在袋中的相應方法,該方法顯著地比現(xiàn)有技術(shù)方法更為有效。在本發(fā)明的另一個實施方案中,培養(yǎng)基和珠子可從所述收獲和微載體回收袋內(nèi)部流出并返回生物反應器中。本發(fā)明涉及一種能夠保存液體的無孔容器,該容器包括外壁表面和內(nèi)壁表面,所述內(nèi)壁表面限定了用于保存液體的內(nèi)室;濾器,其具有周邊(perimeter)、第一表面和第二表面,并且環(huán)繞其整個周邊固定連接至所述無孔容器的內(nèi)壁表面的部分,從而在所述無孔容器內(nèi)形成整合的內(nèi)袋;以及第一配件(fitment),其在與所述整合的內(nèi)袋相鄰的外壁表面的部分連接至所述無孔容器的外壁表面,所述第一配件形成第一通孔(port),該第一通孔設置用于允許液體從內(nèi)室經(jīng)過濾器流入所述整合的內(nèi)袋,并從所述第一通孔流出。在一個實施方案中,所述無孔容器包括柔性材料。在另一實施方案中,所述無孔容器包括可折疊袋(collapsible bag)。在本發(fā)明的一個實施方案中,所述濾器的面積約等于所述無孔容器的內(nèi)壁表面的面積。本發(fā)明的另一個實施方案是一種無孔貯器,其具有能夠保存液體的第一內(nèi)室,所述無孔貯器包括內(nèi)囊,其具有第二內(nèi)室且與所述無孔貯器的壁整合,所述內(nèi)囊包括與所述無孔貯器的第一內(nèi)室相鄰的多孔性表面,且設置使得所述第一內(nèi)室和所述第二內(nèi)室彼此流體連通;配件,其在所述無孔貯器的表面形成通孔,所述通孔的位置允許通向所述第二內(nèi)室,使得當使所述第一內(nèi)室中所含的液體從所述無孔貯器的表面上的通孔流出時,液體從所述第一內(nèi)室流出并經(jīng)過該多孔性表面,形成濾液,該濾液通過所述內(nèi)囊并從所述通孔流
出ο本發(fā)明公開的無孔容器可具有連接至配件的通孔的管道,以收獲所述無孔容器的內(nèi)室中保存的液體。本發(fā)明具有很多優(yōu)勢。存在解決涉及以下的問題的持續(xù)需求收獲包括感興趣的產(chǎn)物的培養(yǎng)基,同時將微載體珠子留在生物反應器或細胞培養(yǎng)袋中。本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)外部濾器提供的一個優(yōu)勢是,防止了濾器的堵塞或?qū)⑵渥钚』?。所述外部濾器通常用于 “終端(dead end)”或分批模式中,其中在收獲過程中所述微載體珠子蓄積且最終堵塞了所述濾器。與之相反,本發(fā)明公開的收獲和微載體回收袋的整合的濾器并不像所述外部濾器那樣易于堵塞。本發(fā)明公開的裝置可用于分批模式或者連續(xù)或半連續(xù)模式中,其中濃縮的微載體珠子混懸液或細胞混懸液可重新回收入所述生物反應器中。本發(fā)明的另一優(yōu)勢在于,其不僅比沉降和傾倒(decanting)液體更快,而且其是一種比傾倒更有效的分離方法。在傾倒方法中,無效分離(即,使珠子進入收獲液)的可能性是很高的。另外,使用本發(fā)明公開的裝置和方法,本領域技術(shù)人員通常能夠收回比傾倒更多的液體。我們使用多孔性管道裝置的先前的嘗試有著其它限制例如堵塞,以及基于其在袋中的位置對液體回收更有限制,和當使用三維袋時其偶爾卷入葉輪中。通過將本發(fā)明整合至生物反應器的設計或其它一次性裝置中獲得其它優(yōu)勢,使得這些裝置是一次性的、單次使用、并可同時滅菌,而不存在經(jīng)過無菌連接造成污染的風險。


本發(fā)明的前述和其它特征以及優(yōu)勢將從以下本發(fā)明的例示性實施方案的更具體描述顯而易見,如在附圖中例示。附圖不必按比例;重點在于示出所公開的設備的例示性實施方案的結(jié)果。圖1是二維可折疊袋形式的收獲和微載體回收容器的部分的俯視圖(top plan view)的示意圖,該袋具有矩形濾器和篩,其透過根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的透明袋部分可見。圖2A是二維收獲和微載體回收袋的部分的俯視圖的示意圖,該袋具有圓形濾器和篩,其透過根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的透明袋部分可見。圖2B是收獲和微載體回收袋的頂板的部分的剖視圖,其顯示了夾在根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的袋的濾器和內(nèi)壁之間的篩。圖3A是根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的袋的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋的頂板47的俯視圖,以及該袋底板48的仰視圖(bottom plan view) 0圖;3B是根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋的截面圖。圖4顯示根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋的頂部的透視圖。圖5是根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋的底部的透視圖。發(fā)明詳述以下是本發(fā)明的優(yōu)選實施方案的描述。將理解的是,本發(fā)明的具體實施方案通過實例示出且不作為本發(fā)明的限制。在開始時,在本發(fā)明以最寬的總體方面描述,然后是更具體的描述。本發(fā)明的組合物和方法的特征和其它細節(jié)將在權(quán)利要求中進一步指出。與從培養(yǎng)基分離微載體珠子的現(xiàn)有技術(shù)方法不同,本發(fā)明人在此公開一種連續(xù)回收收獲容器或袋和相應的收獲培養(yǎng)基且同時將所述微載體珠子留在收獲和微載體回收袋或所述生物反應器中,或留在收獲和微載體回收袋與所述生物反應器兩者之中的方法,這是一種明顯比現(xiàn)有技術(shù)方法更有效的方法。本發(fā)明涉及一種容器,其可為對過濾應用產(chǎn)生特定功能的一種可折疊袋。所述袋可為任意尺寸。在一個實施方案中,所述可折疊袋選自二維一次性袋、三維一次性臺式生物反應器袋和一次性生物反應器。在本發(fā)明的另一實施方案中,所述袋為單次使用的柔性無孔袋,其適于在微載體珠子上培養(yǎng)細胞。本發(fā)明公開的連續(xù)回收收獲容器可為一次性的或單次使用的。術(shù)語“連續(xù)回收收獲容器”、“收獲和微載體回收袋”、“無孔容器”和“無孔袋”在本文中作為同義詞使用。在本發(fā)明的另一個實施方案中,所述袋是柔性無孔袋,其適于收獲細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基。在圖3A、3B、4和5中顯示的本發(fā)明的另一個實施方案中,所述無孔袋是一種連續(xù)回收的流經(jīng)(flow-thorugh)收獲袋,其可用于例如在生物反應器中以連續(xù)或灌注模式培養(yǎng)細胞。在流經(jīng)收獲袋的一個實施方案中,培養(yǎng)基和微載體珠子可從生物反應器流入所述流經(jīng)袋的底板(bottom panel)的通孔,并從所述袋的底板的另一通孔流出并返回所述生物反應器中。在一個實施方案中,所述無孔袋包括柔性的聚乙烯材料或膜,且可具有與之相連接的配件。本文所用的術(shù)語“配件”是指單獨的物件,其焊接(例如熱焊接)至所述無孔袋膜以與之相連接。由此,配件通常包括可相同于或類似于構(gòu)成所述無孔袋的壁的聚合物材料的聚合物材料。配件通常為比所述無孔袋的壁更致密的材料,且可被添加至所述袋以實現(xiàn)功能。配件的一個非限制性實例是形成通孔的配件。在本發(fā)明的一個實施方案中,將如下文所述的通孔添加至所述無孔袋的壁,以從所述無孔袋的內(nèi)部抽取細胞培養(yǎng)基或其它液體。本發(fā)明公開的無孔袋可具有與配件的通孔相連接的管道,用于收獲所述無孔袋的內(nèi)室中保存的液體。所述無孔袋可具有多個設置有通孔和管道的配件,用于使含微載體珠子或細胞混懸液的培養(yǎng)基連續(xù)地流經(jīng)該設備,使得隨著培養(yǎng)基從所述內(nèi)室流經(jīng)所述整合的內(nèi)袋、所述濾器并從所述通孔流出時可發(fā)生連續(xù)過濾。在本發(fā)明的多種實施方案中,所述無孔袋為包括頂板和底板的二維一次性袋,或三維一次性臺式生物反應器袋,或與支持結(jié)構(gòu)一起使用的一次性生物反應器袋。所述無孔袋可為任意尺寸,例如10升、100升、200升、500升或5000升。在本發(fā)明的一個實施方案中,所述無孔袋包括無孔性聚合物材料,其包括至少一個內(nèi)壁部分,一片多孔性聚合物材料環(huán)繞著所述濾器的整個外周通過焊接(例如熱焊接) 直接連接至該內(nèi)壁部分。該連接的濾器完全位于所述無孔袋內(nèi)部,并在所述無孔袋內(nèi)形成整合的內(nèi)袋。所述濾器的一側(cè)暴露于所述無孔袋中含有的大量液體(bulk fluid)。在所述濾器的另一側(cè),在所述濾器和所述無孔袋的內(nèi)壁部分之間形成口袋。圖1是根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的二維收獲和微載體回收袋20的部分的俯視圖。矩形微孔性濾器(本文中稱為“濾器” 2 連接至該透明的無孔袋20的內(nèi)壁表面。濾器23和篩22的邊緣,透過無孔袋20的透明頂板28可見。管道沈連接至配件M的收獲通孔。另外的通孔30可用于例如填充所述無孔袋、噴灑或用于傳感器的探針。圖2A顯示收獲和微載體回收袋21的另一個實施方案的俯視圖。所述圖1和圖2A 中所示的無孔袋的唯一區(qū)別在于,圖2A所示的無孔袋21中的濾器是圓形或橢圓形的。圖2B是本發(fā)明公開的單次使用的收獲和微載體回收袋21的頂板觀的部分的剖視圖,其顯示袋外壁表面32、袋內(nèi)壁表面34、濾器23 (其圍繞所述濾器23的整個周邊在13 處縫合焊接(seamield)至內(nèi)壁表面34)以及自由浮動篩22 (其夾在根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的袋21的濾器23和內(nèi)壁表面34之間)。所述篩22和所述濾器23可各自包括任何合適的材料,例如合適孔度的整合的聚乙烯(integrated polyethylene)。所述篩22可為自由浮動的并置于所述袋21的濾器23 和內(nèi)壁表面34之間,且所述濾器23圍繞其周邊縫合焊接至所述袋21的內(nèi)壁表面34,因而在所述袋21內(nèi)形成夾層。圖2B顯示,在圍繞所述濾器23的周邊的13處的縫合焊接在所述無孔袋21內(nèi)形成具有多孔性壁的整合的內(nèi)袋,該多孔性壁朝向所述無孔袋21的內(nèi)室。圖3A提供了根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋觀的頂板32 的俯視圖47,以及所述袋觀的底板50的仰視圖48。收獲通孔M在袋觀的頂板32外側(cè)的配件25處形成。篩(圖;3B中的2 在濾器23和頂板32的內(nèi)壁表面之間自由浮動。在所述袋觀的頂板內(nèi)形成篩-濾器-袋的夾層結(jié)構(gòu)35。袋觀為連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋28, 其可用于例如在生物反應器(未顯示)中以連續(xù)或灌注模式培養(yǎng)細胞。在圖3A和;3B所示的實施方案中,所述濾器的面積約等于所述二維一次性袋的頂壁板的內(nèi)壁表面的總面積。在所述流經(jīng)收獲袋觀的一個實施方案中,培養(yǎng)基和微載體珠子可從生物反應器流入流經(jīng)袋觀的底板50的通孔36之一中。參見例如圖:3B,其為根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋觀的截面圖。在圖3B中,所述袋內(nèi)部M在一側(cè)被底板50限制。箭頭40表示培養(yǎng)基和微珠(或細胞)經(jīng)過通孔并進入所述袋內(nèi)部M的流動方向。箭頭42表示培養(yǎng)基和珠子經(jīng)過另一通孔從所述袋內(nèi)部M流出并返回生物反應器(未顯示) 的方向。箭頭44表示培養(yǎng)基從所述袋流出的方向,并將珠子留在所述袋內(nèi)。圖;3B的截面圖顯示,自由浮動篩22夾在所述袋28的濾器23和頂板32之間。所述濾器23在其周邊焊接至袋觀的頂板32,因而與所述袋觀的頂板32形成整合的濾器袋。 所述篩22簡單地起到使所述濾器23與所述頂板32保持隔開的作用。在圖3A和圖;3B中, 配件25和收獲通孔24顯示位于頂板32中。在圖3A中,通孔36之一可用于從所述生物反應器將培養(yǎng)基和珠子流入所述袋28,并且通孔36之一可用于將培養(yǎng)基和珠子從袋28流出并流回所述生物反應器。圖4是根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案的二維連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋的頂部透視圖。 所述頂板32具有用于收獲通孔的配件25以及連接至該收獲通孔的管道26。圖5是圖4所示的連續(xù)回收的流經(jīng)收獲袋的底板50的透視圖。配件51可用于連接輸送管,該輸送管用于使培養(yǎng)基和珠子從生物反應器流入所述袋。管道52可用于使培養(yǎng)基和珠子流出所述袋并返回以連續(xù)、灌注模式操作的生物反應器中。包括連接管道沈的收獲通孔M的配件與所述無孔袋觀的壁部分連接,使得當液體(例如培養(yǎng)基)從所述無孔袋28的內(nèi)部部分經(jīng)過管道沈抽出時,所述無孔袋28中的大量液體必須首先通過所述無孔袋觀內(nèi)的整合的內(nèi)袋,并經(jīng)過所述濾器或濾器23然后經(jīng)過通孔M從所述無孔袋觀流出并進入所述管道26。所述濾器23與所述無孔袋觀完全整合, 且允許液體通過并同時經(jīng)機械過篩在所述無孔袋觀中保留大于一定粒徑的所有顆粒(例如微載體珠子)。所述濾器23的面積可為任意大小,例如其可約等于所述袋觀的內(nèi)壁表面的面積。在本發(fā)明的另一個實施方案中,所述濾器23的面積等于所述無孔袋觀的內(nèi)壁表面的面積的約2%至約95%。在本發(fā)明的另一個實施方案中,所述濾器的面積等于所述無孔袋28的內(nèi)壁表面的面積的約25%至約50%。在本發(fā)明優(yōu)選的實施方案中,所述無孔袋觀包括自由浮動篩22,其位于所述袋觀的濾器23和內(nèi)壁表面之間。在一個實施方案中,所述篩22的平均孔徑大于所述濾器23的平均孔徑。所述濾器的平均孔徑可為例如約0. 2微米至約200微米之間。所述篩22輔助保持將所述濾器23與所述袋的內(nèi)壁表面隔開。所述篩22透過所述袋28的透明頂部表面可見。圖2A顯示所述無孔袋觀的另一個實施方案,其中所述濾器23的形狀為圓形。本發(fā)明公開的無孔袋的濾器23可包括整合的聚乙烯濾器或高密度聚乙烯(HDPE) 濾器。可為多孔性形式并且可為構(gòu)成所述濾器23的合適材料的聚合物的其它非限制性實例包括氟化聚乙烯、聚-4-甲基戊烯、聚丙烯腈、聚酰胺、聚酰胺酰亞胺(polyamideimide)、 聚丙烯酸酯、聚苯并p惡唑、聚碳酸酯、聚氰基芳基醚(polycyanoarylether)、聚酯、聚酯碳酸酯(polyestercarbonate)、聚醚、聚醚醚酮(polyetheretherketone)、聚醚酰亞胺、聚醚酮、聚醚砜、聚氟烯烴、聚酰亞胺、聚烯烴、聚w惡二唑、聚苯醚(polyphenylene oxide)、聚苯硫醚(polyphenylene sulfide)、聚丙烯、聚苯乙烯、聚硫化物、聚砜、聚四氟乙烯、聚硫醚、 聚三唑、聚氨基甲酸酯、聚乙烯、聚偏1,I" 二氟乙烯、再生纖維素、聚硅氧烷、及其共聚物或其物理混合物。適用于根據(jù)本發(fā)明的實施方案的濾器的多孔性材料的另一個非限制性實例是一種多孔性基質(zhì),該基質(zhì)由膠原和硫酸軟骨素與戊二醛部分交聯(lián)制成。另一個實例是聚交酯 (polylactide)或聚乳酸(PLA)的高分子量聚合物。在本發(fā)明的一個實施方案中,所述濾器23可為整合的聚乙烯濾器。所述孔徑可取決于所選的微載體珠子的尺寸,或取決于當液體經(jīng)濾器抽出時欲使之留在所述無孔袋中的其它顆粒的尺寸??讖酵ǔ?蔀槔缂s0. 2微米至約200微米??墒褂帽景l(fā)明公開的單次使用的收獲和微載體回收袋的應用的非限制性實例包括從細胞培養(yǎng)基分離微載體珠子,從細胞培養(yǎng)基或灌注培養(yǎng)液收獲分離細胞。實施例為制備單次使用的收獲和微載體回收袋,我們將微孔性聚合物薄片圍繞其整個周邊熱焊接至柔性無孔袋的壁內(nèi)部的部分,因而形成了整合的內(nèi)袋,其包括一個壁,其包括柔性無孔袋的部分,以及第二壁,其包括所述微孔性聚合物薄片。所述內(nèi)袋的多孔性壁與所述柔性無孔袋的內(nèi)部接觸。所述內(nèi)袋的無孔性壁包括所述無孔柔性袋的部分,其圍繞其整個周邊與該無孔柔性袋的部分連接。我們所用的無孔袋是聚乙烯袋。將配件(包括形成收獲通孔的配件)添加至所述無孔袋的外面。不將任何配件直接焊接至所述濾器。所述配件也由聚乙烯形成,但其密度比所述無孔袋的密度更高。所述配件根據(jù)多種因素可為各種尺寸和形狀。構(gòu)建的原型使用了半英寸(0.5英寸)軟管倒鉤 (hose barb)或3英寸衛(wèi)生接頭(sanitary fitting)作為所述配件。當用于從培養(yǎng)基分離微載體珠子時,所述無孔袋內(nèi)的整合的內(nèi)袋的多孔性壁起到濾器的作用,將微載體珠子從所述袋內(nèi)的其余溶液分離。液體可從所述無孔袋的內(nèi)室中泵出,流經(jīng)整合的內(nèi)袋,經(jīng)過微濾器23,并從所述收獲通孔M流出并流入所述收獲管道沈,將所述微珠留在所述內(nèi)室中。遍及本說明書的描述和權(quán)利要求,詞匯"包括"和"包含"及這些詞匯的變體的意思是"包括但不限于",且它們不意圖(且不)排除其它部分、添加物、構(gòu)件、整體或步驟。遍及本說明書的描述和權(quán)利要求,單數(shù)形式包括復數(shù)形式,除非上下文另有需要。特別地,在不定冠詞使用之處,本說明書將被理解為考慮為復數(shù)或單數(shù),除非上下文另有需要。結(jié)合本發(fā)明具體的方面、實施方案或?qū)嵤├_的特征、整體、特性、化合物、化學部分或基團,應理解適用于本文公開的任何其它方面、實施方案或?qū)嵤├?,除非與之不相容。本說明書中(包括附帶的任何權(quán)利要求、摘要和附圖)公開的所有這些特征和/或所公開的任何方法或工藝中的所有步驟可以任意地組合,除非至少一些所述特征和/或步驟的組合是互相排斥的。本發(fā)明不限于任何前述實施方案的細節(jié)。本發(fā)明可擴展至本說明書中(包括附帶的任何權(quán)利要求、摘要和附圖)公開的特征的所有新特征或新組合,或擴展至所公開的方法步驟或工藝步驟的所有新步驟或新組合。等同體盡管本發(fā)明已參考其優(yōu)選的實施方案具體示出和描述,本領域技術(shù)人員理解的是,其中可以進行各種形式上和細節(jié)上的變化,且本發(fā)明的原理和特征可以用在各種和許多實施方案中,而不背離由所附的權(quán)利要求包括的本發(fā)明的范圍。
權(quán)利要求
1.一種能夠保存液體的無孔容器,該容器包括外壁表面和內(nèi)壁表面,所述內(nèi)壁表面限定了用于保存液體的內(nèi)室; 濾器,其具有周邊、第一表面和第二表面,并且環(huán)繞其整個周邊固定連接至所述無孔容器的內(nèi)壁表面的部分,從而在所述無孔容器內(nèi)形成整合的內(nèi)袋;第一配件,其在與所述整合的內(nèi)袋相鄰的外壁表面的部分連接至所述無孔容器的外壁表面,所述第一配件形成第一通孔,該第一通孔設置用于允許液體從內(nèi)室經(jīng)過濾器流入所述整合的內(nèi)袋,并從所述第一通孔流出。
2.權(quán)利要求1的無孔容器,其中所述無孔容器包括柔性材料。
3.權(quán)利要求1的無孔容器,其中所述無孔容器包括可折疊袋。
4.權(quán)利要求3的無孔容器,其中所述可折疊袋選自二維一次性袋、三維一次性臺式生物反應器袋和一次性生物反應器。
5.權(quán)利要求1的無孔容器,其中所述濾器的面積約等于所述容器的內(nèi)壁表面的總面積。
6.權(quán)利要求1的無孔容器,其中所述濾器的面積等于所述無孔容器的內(nèi)壁表面的面積的約2%至約95%。
7.權(quán)利要求6的無孔容器,其中所述濾器的面積等于所述無孔容器的內(nèi)壁表面的面積的約25%至約50%。
8.權(quán)利要求1的無孔容器,其包括位于所述無孔容器的濾器與內(nèi)壁表面之間的篩,所述篩具有的平均孔徑大于所述濾器的平均孔徑。
9.權(quán)利要求1的無孔容器,其中所述濾器包括整合的聚乙烯濾器。
10.權(quán)利要求1的無孔容器,其中所述濾器的平均孔徑為約0.2微米至約200微米之間。
11.權(quán)利要求1的無孔容器,其包括用于收獲無孔容器的內(nèi)室中保存的液體的管道,所述管道連接至所述第一通孔的第一配件。
12.權(quán)利要求1的無孔容器,其包括在與所述整合的內(nèi)袋不相鄰的外壁的部分連接至所述無孔容器的外壁的第二配件,所述第二配件形成第二通孔,該第二通孔設置用于允許液體流入所述內(nèi)室中。
13.權(quán)利要求4的無孔容器,其中所述可折疊袋是二維一次性袋,其包括頂壁板和底壁板,且其中所述濾器連接至所述二維一次性袋的頂壁板的內(nèi)壁表面的部分。
14.權(quán)利要求13的無孔容器,其中所述濾器的面積約等于所述二維一次性袋的頂壁板的內(nèi)壁表面的總面積。
15.一種無孔貯器,其具有能夠保存液體的第一內(nèi)室,所述無孔貯器包括內(nèi)囊,其具有第二內(nèi)室且與所述無孔貯器的壁整合,所述內(nèi)囊包括與所述無孔貯器的第一內(nèi)室相鄰的多孔性表面,且設置使得所述第一內(nèi)室和所述第二內(nèi)室彼此流體連通;配件,其在所述無孔貯器的表面形成通孔,所述通孔的位置允許通向所述第二內(nèi)室,使得當使所述第一內(nèi)室中所含的液體從所述無孔貯器的表面上的通孔流出時,該液體從所述第一內(nèi)室流出并經(jīng)過該多孔性表面,形成濾液,該濾液通過所述內(nèi)囊并從所述通孔流出。
全文摘要
一種能夠保存液體的無孔容器,所述無孔容器包括外壁表面和內(nèi)壁表面,所述內(nèi)壁表面限定了保存液體的內(nèi)室;濾器,其具有周邊、第一表面和第二表面,并且環(huán)繞其整個周邊固定連接至所述無孔容器的內(nèi)壁表面的部分,因而在所述無孔容器內(nèi)形成整合的內(nèi)袋;以及配件,其在與所述整合的內(nèi)袋的第一表面相鄰的外壁表面的部分連接至所述無孔容器的外壁,所述配件形成通孔,通孔設置用于允許液體從內(nèi)室流經(jīng)所述整合的內(nèi)袋,流經(jīng)濾器,并從所述通孔流出。
文檔編號C12N1/02GK102575219SQ201080048344
公開日2012年7月11日 申請日期2010年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月26日
發(fā)明者C.圖伊, J.斯威比斯, M.費希爾, R.達姆倫, T.厄爾登伯格 申請人:艾克塞勒雷克斯公司
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