專利名稱：水貂源植物乳桿菌mdl1118及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株從水貂腸道內(nèi)分離得到的植物乳桿菌，并特別涉及其在水貂日糧 中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
在動物腸道中95%以上的微生物為乳酸菌等益生菌，動物腸道為這些腸道微生物 提供優(yōu)越的棲息和繁殖環(huán)境。腸道微生物及其基因組賦予動物沒有必要在自身上進(jìn)化的特 性，彌補動物某些生物學(xué)不足。腸道微生態(tài)區(qū)系是個復(fù)雜的動態(tài)生態(tài)系統(tǒng)，通常與宿主的新 陳代謝密切相關(guān)。腸道微生物及其代謝產(chǎn)物對宿主的能量平衡和生理活動產(chǎn)生重要影響， 能夠降解和發(fā)酵復(fù)雜非可消化性碳水化合物，釋放出部分能量，可再次被宿主吸收和利用， 擴大了宿主可利用原料范圍，提高能量利用效率，并影響氨基酸的動態(tài)平衡。對人來說，血 液中1-20%的賴氨酸和蘇氨酸來自腸道內(nèi)細(xì)菌的合成；腸道微生物還可合成必需維生素K 和B族維生素。此外腸道微生物可分泌蛋白酶，脂肪酶，淀粉酶等，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)分解為可 直接被宿主吸收利用的小分子物質(zhì)。哺乳動物腸道通過自然選擇而存在的固有菌，能對很多藥物及營養(yǎng)物質(zhì)的代謝產(chǎn) 生明顯的影響，改變它們的生物學(xué)利用率及代謝結(jié)果。宿主和腸道微生物在長期的協(xié)同進(jìn) 化過程中形成的相互協(xié)同關(guān)系，二者共同組成腸道微生態(tài)系統(tǒng)，保障該系統(tǒng)最大限度地從 有限的食物中獲取最大可能的營養(yǎng)價值，維護系統(tǒng)長期穩(wěn)定和動態(tài)平衡。隨著微生態(tài)學(xué)理論研究的不斷深入。微生態(tài)制劑(或稱微生態(tài)調(diào)節(jié)劑Biogen， microeclogial modulator)也隨之迅速發(fā)展起來。以益生菌為主要作用成份的微生態(tài)制 劑作為促進(jìn)動物健康的有益菌，其功能是多方面的。近年來人們對益生菌的研究越來越多。 益生菌可以降低腹瀉及腸炎的發(fā)病率，可以抑制急性腸炎，輪狀病毒引起的腹瀉，以及抗生 素導(dǎo)致的腹瀉，并且還可以抑制Helicobacter pylori感染，減輕消化道紊亂癥。此外益 生菌在對與致病菌感染及相應(yīng)的免疫激活方面也可以表現(xiàn)出其益生活性?？梢越档脱装Y癥 狀，如炎癥性腸炎(IBD)和腸易激綜合征(IBS)，腸道微生物及其代謝產(chǎn)物對宿主的能量平 衡和生理活動產(chǎn)生重要影響，能夠降解和發(fā)酵非可消化性碳水化合物，補救出部分能量，可 以再次被宿主吸收和利用，擴大了宿主可利用原料的范圍和提高了能量利用效率。降低血 清中膽固醇含量，增加含有益生菌乳產(chǎn)品的食入量，已作為降低血清膽固醇的一種方式。很 多研究表明，有些乳酸桿菌具有降低總膽固醇和低密度(LDL)膽固醇的能力，腸道益生菌 數(shù)量的改變，會導(dǎo)致肝臟脂類代謝的改變，并且降低血漿脂蛋白水平。增加含有益生菌乳產(chǎn) 品的食入量，已作為降低血清膽固醇的一種方式。植物乳桿菌(LactcAacillus plantarum)廣泛存在于自然界，在植物表面，天然發(fā) 酵的酸牛乳，泡菜，青貯飼料，酸面團及動物體內(nèi)均有發(fā)現(xiàn)。植物乳桿菌作為一種動物原籍 菌，具有很多優(yōu)良性狀，可改善腸道健康，調(diào)節(jié)機體免疫，對于促進(jìn)宿主健康具有重要作用， 目前國內(nèi)外對植物乳桿菌的研究和應(yīng)用較多，已被廣泛應(yīng)用于食品或飼料添加劑。水貂屬于鼬科，肉食哺乳動物。這種小型的肉食動物消化特點同其他單胃動物相比具有其獨特性，即消化道較短，食物在腸道內(nèi)停留的時間較短，對纖維性物質(zhì)及淀粉消化 率低，對脂肪的消化率高達(dá)95-98%，新鮮動物性飼料中蛋白質(zhì)的消化率為87% 90%。本 發(fā)明就是基于上述問題，提出了一種針對毛皮動物生產(chǎn)專用的水貂源植物乳桿菌并檢測其 應(yīng)用效果。

發(fā)明內(nèi)容
從健康成年水貂腸道內(nèi)分離乳酸菌，取小腸內(nèi)容物20g，加入IOOml無菌水中，搖 床震蕩30min，使內(nèi)容物充分溶解，梯度稀釋，利用傾注培養(yǎng)法進(jìn)行分離培養(yǎng)，37°C培養(yǎng)7 選擇具有溶鈣圈的菌落，采用平板劃線的方式純化，純化3-4代，鏡檢，將純化后的乳酸菌 接入MRS液體培養(yǎng)基中，檢測其微生物學(xué)特性，如形態(tài)學(xué)、生理學(xué)特性(表1)以及糖分解代 謝(表幻的能力，檢測其體外培養(yǎng)對膽固醇的降解功能(表幻。進(jìn)行對小鼠安全性(表 4)檢測以及對水貂生產(chǎn)性能(表幻的影響。該植物乳桿菌MDL1118已于2010年10月21日于中國微生物菌種保藏管理 委員會普通微生物中心(地址中國北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院 微生物研究所)保藏，保藏號CGMCC No. 4238。其分類命名為植物乳桿菌，拉丁名為 Lactobacillusplantarumo


圖1植物乳桿菌體外培養(yǎng)條件下對膽固醇的降解，橫坐標(biāo)為培養(yǎng)時間(h)，縱坐標(biāo) 為膽固醇降解率(％)。下面結(jié)合實施例和圖進(jìn)一步說明本發(fā)明實施例I形態(tài)學(xué)觀察、顯微鏡檢以及生理生化指標(biāo)檢測無菌條件下挑取該植物乳桿菌MDL1118涂于干凈的載玻片上，制片，革蘭氏染色 進(jìn)行形態(tài)學(xué)及染色結(jié)果觀察。無菌條件下將植物乳桿菌接種于相應(yīng)的培養(yǎng)基或培養(yǎng)條件 下，進(jìn)行生理生化指標(biāo)的檢測觀察。
權(quán)利要求
1.一種植物乳桿菌(lactobacillus ρlantarum)MDLl 118，保存編號 CGMCC No. 4238。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，所述的乳酸菌分離自水貂腸道，體外培養(yǎng)生長迅速，可廣泛利用碳 水化合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的植物乳桿菌MDLl118具有膽固醇降解功能。
4.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的植物乳桿菌MDLl118通過小鼠安全性檢測，可以提高小 鼠采食量，增加日增重及提高免疫器官重量。
5.根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的植物乳桿菌MDLl118可以提高水貂日采食量，體增重及日增重。
6.根據(jù)權(quán)利要求3、4所述的植物乳桿菌MDL1118，可以與其他常規(guī)載體組合，具有降低 動物血清膽固醇的功能。
7.根據(jù)權(quán)利要求3、4、5所述，植物乳桿菌與其他常規(guī)載體混合后加入毛皮動物日糧 中，具有提高動物生產(chǎn)性能的功能。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述，一種飼料預(yù)混料，飼料預(yù)混料含有權(quán)利要求1所述植物乳桿菌 MDLl118。
全文摘要
本發(fā)明涉及一株水貂源的植物乳桿菌菌株及其應(yīng)用。具體涉及的植物乳桿菌MDL1118，專利保藏號CGMCC No.4238。植物乳桿菌MDL1118可發(fā)酵廣泛碳水化合物，具有高效降解膽固醇的功能；植物乳桿菌MDL1118單獨應(yīng)用或與常規(guī)載體組合可以增加水貂采食量，日增重，增強機體免疫機能，并且可使水貂季節(jié)性腹瀉下降50％。
文檔編號C12R1/25GK102093966SQ201010569600
公開日2011年6月15日 申請日期2010年12月2日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月2日
發(fā)明者劉鳳華, 劉晗璐, 劉柏陽, 孫偉麗, 常忠娟, 李丹麗, 李光玉, 楊琛杰, 王凱英, 趙家平, 趙靖波, 鐘偉, 鮑坤 申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所