專利名稱：一種嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子。
背景技術(shù)：
隨著奶業(yè)市場(chǎng)的發(fā)展，特別是人們健康意識(shí)的逐步增強(qiáng)，食品、保健品及醫(yī)藥等的 安全性越來越受到人們的關(guān)注。含有益生菌的微生態(tài)制劑正作為一個(gè)新的領(lǐng)域逐步被研究 和開發(fā)。嗜酸乳桿菌作為益生菌的一種，在促進(jìn)人體健康和預(yù)防疾病方面具有重要作用，并 日益成為乳品科學(xué)研究的熱點(diǎn)。嗜酸乳桿菌菌粉已廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等行業(yè)中，已經(jīng)成 為現(xiàn)代重要工業(yè)原料真空冷凍干燥(簡(jiǎn)稱凍干)是制備和保存生物材料最有效的方法之一，凍干是冷 凍和干燥技術(shù)的有機(jī)結(jié)合。然而，真空冷凍干燥會(huì)造成生物細(xì)胞的損傷、死亡及某些酶蛋白 分子的鈍化。為了提高真空冷凍干燥后微生物的存活率，人們進(jìn)行了大量的研究。影響乳 酸菌凍干效果的因素有很多，如菌株、細(xì)胞大小及形狀、生長(zhǎng)階段及速率、初始細(xì)胞濃度、PH 值、保護(hù)劑種類與配比、預(yù)凍溫度、降溫速率、冷凍干燥條件、細(xì)胞含水量、細(xì)胞膜成份等。在發(fā)酵液中添加一些物質(zhì)能夠抑制冷凍干燥過程中共晶現(xiàn)象的發(fā)生，減少蛋白損 傷，提高菌體抗冷凍能力。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，在制備菌粉的 過程中加入本發(fā)明復(fù)合抗冷凍因子，其菌粉存活率達(dá)76.5%。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其配方為肌醇 0. 1-0. 2g/L、氯化鈉 3-4g/L、牛血清蛋白 0-0. 07g/L、丙氨酸 0. 03-0. 06g/L。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明至少具有以下優(yōu)點(diǎn)在培養(yǎng)基中添加本發(fā)明的復(fù)合抗冷 凍因子后，可以使嗜酸乳桿菌在冷凍干燥過程中的存活率最高達(dá)76.5%，而如果沒有添加 該復(fù)合抗冷凍因子，則菌體在冷凍干燥過程中的存活率最高僅52. %。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例一將微孔濾膜除菌的復(fù)合抗冷凍因子添加至MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h，然后以轉(zhuǎn)速為 6000r/min離心lOmin，收集菌體，然后，用生理鹽水清洗菌體2次，離心棄去上清液；用保護(hù) 劑I將菌體配制成8士 1 X 101(lCfu/mL菌懸液后，靜置30-40min，再加入保護(hù)劑II均勻混合， 其中，所述保護(hù)劑II與保護(hù)劑I的體積比為1 1，然后，靜置20-30min后裝于凍干管中， 裝樣高度0. 3-0. 5cm，接著放入-35 _40°C的冰箱中預(yù)凍24h后，移轉(zhuǎn)入真空冷凍干燥機(jī) 中，于溫度為_56°C，真空度為4-6Pa的條件下凍干24h ；最后，用生理鹽水復(fù)溶，MRS固體培 養(yǎng)基計(jì)數(shù)，測(cè)定菌粉活性和菌體存活率，所述保護(hù)劑I的配方為海藻糖10g/L+甘油20mL/ L+牛血清蛋白10g/L+氯化鈉8. 5g/L+蔗糖80g/L ；保護(hù)劑II的配方為脫脂奶粉150g/L+葡萄糖10g/L+氯化鈉8. 5g/L+抗壞血酸0. 2g/L。所述復(fù)合抗冷凍因子的 配方如下表1所示表1添加不同配比的復(fù)合抗冷凍因子發(fā)酵得到的菌體進(jìn)行凍干的存活率的驗(yàn)證 結(jié)果
權(quán)利要求
一種嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其特征在于其配方為肌醇0.1 0.2g/L、氯化鈉3 4g/L、牛血清蛋白0 0.07g/L、丙氨酸0.03 0.06g/L。
2.如權(quán)利要求1所述的嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其特征在于其配方為肌醇0.Ig/ L、氯化鈉3g/L、牛血清蛋白0. 07g/L、丙氨酸0. 03g/L。
3.如權(quán)利要求1所述的嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其特征在于其配方為肌醇 0. 15g/L、氯化鈉 3. 5g/L、丙氨酸 0. 045g/L。
4.如權(quán)利要求1所述的嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其特征在于其配方為肌醇0.2g/ L、氯化鈉4g/L、牛血清蛋白0. 035g/L、丙氨酸0. 06g/L。
5.如權(quán)利要求1所述的嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其特征在于其配方為肌醇 0. 15g/L、氯化鈉4g/L、牛血清蛋白0. 07g/L、丙氨酸0. 06g/L。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種嗜酸乳桿菌復(fù)合抗冷凍因子，其配方為肌醇0.1-0.2g/L、氯化鈉3-4g/L、牛血清蛋白0-0.07g/L、丙氨酸0.03-0.06g/L，在培養(yǎng)基中加入本發(fā)明復(fù)合抗冷凍因子而制得的菌粉，其存活率最高達(dá)76.5％，而不添加本發(fā)明的復(fù)合抗冷凍因子，其菌粉存活率最高僅52.7％。
文檔編號(hào)C12R1/23GK101962617SQ201010295048
公開日2011年2月2日 申請(qǐng)日期2010年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月29日
發(fā)明者王磊, 秦濤, 舒國(guó)偉, 陳合, 馬齊 申請(qǐng)人:陜西科技大學(xué)