專利名稱：一種耐熱菌復合培養(yǎng)基及耐熱菌的檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及固體食品中耐熱菌的檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體地講是一種耐熱菌復合培養(yǎng) 基及耐熱菌的檢測方法。
背景技術(shù)：
耐熱菌是一類含有芽孢，經(jīng)熱加工仍然存活，適宜條件下孢子可活化為營養(yǎng)體從 而導致食品腐敗的細菌的總稱；目前，對耐熱菌的研究主要涉及果汁中嗜酸耐熱菌等，其檢 測方法與試劑皆針對液體食品，不適合固體食品中耐熱菌的檢測；現(xiàn)有標準SN 0178《出口 食品嗜熱菌芽孢(需氧芽孢總數(shù)、平酸芽孢和厭氧芽孢)計數(shù)方法》中使用葡萄糖胰蛋白胨 瓊脂，但是葡萄糖胰蛋白胨瓊脂耐熱菌檢出率較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服上述已有技術(shù)的不足，而提供一種耐熱菌復合培養(yǎng)基。本發(fā)明的另一目的是提供一種耐熱菌的檢測方法。本發(fā)明主要解決現(xiàn)有的培養(yǎng)基用于檢測固體食品中的耐熱菌檢測結(jié)果不準確的 問題。為了達到上述目的，本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的一種耐熱復合菌培養(yǎng)基，其特殊之處 在于它含有下述百分重量配比的原料胰蛋白胨10 20%、細菌瓊脂粉50 70%、牛肉 膏1 10%、酵母膏1 10%、葡萄糖1 10%、溴甲酚紫0. 1 0.9%、復合維B 0. 1 0. 9%、硝酸鈣0. 1 0. 9%、吐溫80 1 10%。本發(fā)明的一種耐熱菌復合培養(yǎng)基，其較好的百分重量配比為胰蛋白胨12 17%、細菌瓊脂粉55 65%、牛肉膏4 7%、酵母膏8 10%、葡萄糖2 5%、溴甲酚紫 0. 1 0. 5%、復合維B 0. 6 0. 9%、硝酸鈣0. 6 0. 9%、吐溫80 2 5%。本發(fā)明的一種耐熱菌復合培養(yǎng)基，其最佳的百分重量配比為胰蛋白胨15%、細 菌瓊脂粉60%、牛肉膏6%、酵母膏9%、葡萄糖4%、溴甲酚紫0.4%、復合維B 0.8%、硝酸 鈣0. 8%、吐溫 80 4%。本發(fā)明的一種耐熱菌的檢測方法，其特殊之處在于樣品稀釋液置于實驗試管中， 同時設置溫度對照試管，水浴溫度控制在74°C 士2°C，當對照試管溫度上升至74°C時，開始 計時，水浴lOmin，每隔3min搖動試管一次，加熱完畢，取出實驗試管冷卻，然后接種實驗試 管稀釋液，傾倒耐熱菌復合培養(yǎng)基，于36°C 士 1°C的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h士2h，計數(shù)，得耐熱菌 的檢測結(jié)果。本發(fā)明的耐熱菌復合培養(yǎng)基各成分作用原理如下胰蛋白胨低分子肽，游離氨基酸，提供營養(yǎng)基礎。酵母膏提供維生素和氨基酸。葡萄糖提供營養(yǎng)。吐溫80 表面活性劑，降低菌表面和培養(yǎng)基的表面張力，使營養(yǎng)物質(zhì)更易吸收。
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細菌瓊脂粉凝固劑。溴甲酚紫指示劑。牛肉膏(可用肉浸液代替)提供營養(yǎng)物質(zhì)和微量的金屬元素。復合維B 提供B類元素，芽孢構(gòu)成的成分。硝酸鈣酶反應促進，菌體成分構(gòu)成，增加耐熱性。本發(fā)明所述的一種耐熱菌復合培養(yǎng)基及耐熱菌的檢測方法與已有技術(shù)相比具有 突出的實質(zhì)性特點和顯著進步采用耐熱菌復合培養(yǎng)基可準確檢測熱加工中心溫度條件下 固體食品中殘存的耐熱菌數(shù)量，檢出率比市售培養(yǎng)基(葡萄糖胰蛋白胨瓊脂)高20%，且菌 落特征顯著，易于計數(shù)。
具體實施例方式為了更好地理解與實施，下面結(jié)合實施例詳細說明本發(fā)明。實施例1，準確地稱取胰蛋白胨1. 5g、細菌瓊脂粉6. 0g、牛肉膏0. 6g、酵母膏0. 9g、 葡萄糖0.4g、溴甲酚紫0.04g，復合維B 0.08g、硝酸鈣:0.08g、吐溫80 0.4g，混合后為耐熱
菌培養(yǎng)基。實施例2，準確地稱取胰蛋白胨1. 2g、細菌瓊脂粉6. 5g、牛肉膏0. 4g、酵母膏0. Sg、 葡萄糖0. 5g、溴甲酚紫0. 05g，復合維B 0. 06g、硝酸鈣0. 09g、吐溫80 0. 4g，混合后為耐熱
菌培養(yǎng)基。實施例3，準確地稱取胰蛋白胨1. 7g、細菌瓊脂粉5. 5g、牛肉膏0. 7g、酵母膏l(xiāng)g、葡 萄糖0.44g、溴甲酚紫O.Olg，復合維B 0.09g、硝酸鈣0.06g、吐溫80 0. 5g，混合后為耐熱
菌培養(yǎng)基。實施例4，準確地稱取胰蛋白胨1.6g、細菌瓊脂粉6.3g、牛肉膏0.5g、酵母膏l(xiāng)g、葡 萄糖0. 2g、溴甲酚紫0. 05g，復合維B 0. 09g、硝酸鈣0. 06g、吐溫80 0. 2g，混合后為耐熱菌
培養(yǎng)基。實施例5，準確地稱取胰蛋白胨lg、細菌瓊脂粉5g、牛肉膏l(xiāng)g、酵母膏l(xiāng)g、葡萄糖 0.898、溴甲酚紫0.098，復合維8 O.Olg、硝酸鈣0.01g、吐溫80 lg，混合后為耐熱菌培養(yǎng)基。實施例6，準確地稱取胰蛋白胨2g、細菌瓊脂粉7g、牛肉膏0. lg、酵母膏0. lg、葡萄 糖0. lg、溴甲酚紫O.Olg，復合維B 0.09g、硝酸鈣0.09g、吐溫80 0. 51g，混合后為耐熱菌
培養(yǎng)基。實施例7，準確地稱取胰蛋白胨1.25g、細菌瓊脂粉6.5g、牛肉膏0.5g、酵母膏 0. 5g、葡萄糖lg、溴甲酚紫0. 05g，復合維B 0. 05g、硝酸鈣0. 05g、吐溫80 0. lg，混合后為
耐熱菌培養(yǎng)基。實施例8，耐熱菌的檢測是針對熱加工中心溫度為74°C，持續(xù)IOmin的低溫肉制 品；當熱加工中心溫度與持續(xù)時間有異，可隨之改變水浴溫度與時間；檢測步驟如下將上述實施例1的耐熱菌培養(yǎng)基10g，加入到400ml水中，將耐熱 菌復合培養(yǎng)基的PH值調(diào)為6.0 7. 5，備用；再稱取25 士 0. Ig樣品，加入無菌均質(zhì)瓶(袋) 中，加入225mL無菌稀釋液，均質(zhì)lmin-2min，使樣品分散良好，此時稀釋度為1 10;取2份 IOmL上述稀釋液，分別放入2支帶有塑料封口的18mmX150mm試管中，搖勻，其中1支試管用于實驗，另1支用作溫度對照試管；將試管置于水浴鍋振蕩溫浴，溫度控制在74°C 士2°C， 當對照管溫度上升至74°C時，開始計時，水浴lOmin，每隔3min搖動實驗試管一次，加熱完 畢，取出實驗試管，立即置冷水中，30s內(nèi)冷卻，搖勻試管，接種LOmL稀釋液，傾倒耐熱菌復 合培養(yǎng)基，于36°C 士 1°C的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h士2h，計數(shù)，得耐熱菌的檢測結(jié)果。
權(quán)利要求
一種耐熱菌復合培養(yǎng)基，其特征在于它由下述百分重量配比的原料組成胰蛋白胨10～20％、細菌瓊脂粉50～70％、牛肉膏1～10％、酵母膏1～10％、葡萄糖1～10％、溴甲酚紫0.1～0.9％、復合維B 0.1～0.9％、硝酸鈣0.1～0.9％、吐溫80 1～10％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種耐熱菌復合培養(yǎng)基，其特征在于它由下述百分重量配比 的原料組成胰蛋白胨12 17%、細菌瓊脂粉55 65%、牛肉膏4 7%、酵母膏8 10%、 葡萄糖2 5%、溴甲酚紫0. 1 0.5%、復合維B 0.6 0.9%、硝酸鈣0. 6 0.9%、吐 溫80 2 5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種耐熱菌復合培養(yǎng)基，其特征在于它由下述百分重量配比 的原料組成胰蛋白胨15%、細菌瓊脂粉60%、牛肉膏6%、酵母膏9%、葡萄糖4%、溴甲酚 紫0.4%、復合維B 0. 8%、硝酸鈣0. 8%、吐溫80 4%。
4.一種耐熱菌的檢測方法，其特征在于樣品稀釋液置于實驗試管中，同時設置溫度 對照試管，水浴溫度控制在74°C 士2°C，當對照試管溫度上升至74°C時，開始計時，水浴 lOmin，每隔3min搖動實驗試管一次，加熱完畢，取出實驗試管冷卻，然后接種實驗試管稀 釋液，傾倒耐熱菌復合培養(yǎng)基，于36°C 士 1°C的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h士2h，計數(shù)，得耐熱菌的檢 測結(jié)果。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種耐熱菌復合培養(yǎng)基，其特點是它含有下述百分重量配比的原料胰蛋白胨10～20％、細菌瓊脂粉50～70％、牛肉膏1～10％、酵母膏1～10％、葡萄糖1～10％、溴甲酚紫0.1～0.9％；耐熱菌的檢測方法包括樣品中加入無菌稀釋液，均質(zhì)后取稀釋液進行實驗，接種稀釋液，傾倒耐熱菌復合培養(yǎng)基，于36℃±1℃的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h±2h，計數(shù)得耐熱菌的檢測結(jié)果；采用耐熱菌復合培養(yǎng)基可準確檢測熱加工中心溫度條件下固體食品中殘存的芽孢菌數(shù)量，檢出率比市售培養(yǎng)基高20％，且菌落特征顯著，易于計數(shù)。
文檔編號C12Q1/06GK101948904SQ20101028993
公開日2011年1月19日 申請日期2010年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月21日
發(fā)明者宋維娟, 徐世明, 徐冬雪, 趙瑞連 申請人:煙臺喜旺科技發(fā)展有限公司